Manual de operações MMI laser
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1. Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus Para renomear a objetica definida clique sobre Objective Name e digite um nome diferente As op es Nosepiece e Lamp Voltage somente s o utilizadas em microsc pios motorizadas Al m dos par metros mostrados na tela Objective Editor as seguintes informa es s o armazenadas separadamente para cada objetiva Configura o de c mera Calibra o da Objetiva em rela o ao platina Lens Offset Calibration Foco Z somente para microsc pio motorizado Par metros de corte Posi o do laser Se algum destes par metros n o estiver correto consulte o cap tulo relacionado Objectives representa todas as configura es e calibra es relacionadas s objetivas Se voc alterar a calibra o ou par metros relacionados objetiva essa altera o somente ser o refletidas nas configura es do setup e slide atual 3 3 6 Configura es da c mera Use o bot o ig CameraRC ou o item de menu Settings gt Camera gt Remote Control para abrir a janela de configura o da c mera Os valores m ximos e m nimos s o espec ficos para cada tipo de c mera Os controles deslizantes ser o automaticamente ajustados para as faixas suportadas por sua2. S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus Se voc executa diferentes tipos de experimentos por exemplo microdissec o com campo claro microdissec o com fluoresc ncia ou pin as recomenda se definir uma configura o para cada um destes experimentos Set Editor a Table EE Name Filte rblock E Upticalpath DF single trans 1 U BF_cellEctor Para renomear as configura es definidas clique no Setup name e digite um nome diferente As configura es Filterblock Condenser e Opticalpath somente s o usadas com microsc pios motorizados Objective E sx _UPlanFin phe w 3 3 5 Objective Editor A caixa de sele o Objective voc encontra todas as objetivas que voc definiu para a configura o ativa Para alterar o banco de dados pressione o bot o E para abrir o Objective Editor Para usar este editor siga o m todo do Slide Editor descrito acima Se voc criar uma nova configura o todas as objetivas ser o automaticamente copiadas a partir do slide ativo Objective Editor Objective Table Css A A At AA o Objective Name Nosepiece Lamp voltage mw dx UPlanFUN ph 1 4000 EI Tx UPlanFLM ph ROOD elx _LUCPIanFLN_ ph 3 roop J 40x _ L CFanFLN ph 10000
3. OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus Slide E settings customer 3 3 3 Slide editor Na caixa de sele o Slide voc encontrar todas as amostras que voc definiu no passado Toda a documenta o salva sob este nome Para alterar o banco de dados pressione o bot o El e ter a tela do editor de Slide Slide Table Harme setings factory I settings customer ETS O bot o define um novo slide todos os par metros do slide ativo ser o copiados Renomeie o slide clicando sobre o nome O bot o Remove o slide ativo Utilize a barra abaixo para navegar pelos Slides o Setp 3 3 4 Setup Editor E BF_snge0 5 trans O Setup representa todos os par metros necess rios para definir o m todo de ilumina o campo claro fluoresc ncia DIC Se voc alterar um par metro em um Setup as altera es somente ser o refletidas no slide atual Na caixa de sele o do setup voc encontrar todos os par metros definidos para o slide ativo Para adicionar remover ou alterar o banco de dados pressione o bot o E Para usar este Editor siga os mesmos passos do Slide Editor descrito acima Se voc criar um novo slide todas as configura es ser o automaticamente copiadas do slide ativo Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar
4. O mmi IsolationCap usado com a tecnologia mmi Caplift permite a coleta de v rias reas de toda a l mina Ap s a microdissec o os mmi IsolationCapsO s o encaixados em tubos de microcentrifuga o para proceder com a extra o de biomol culas Ap s aplicar os reagentes recomendados para extra o pelo tempo necess rio os cortes extra dos est o prontos para an lises gen micas ou prote micas 1 2 Configura o do Sistema O Sistema mmi CellCut composto de um microsc pio biol gico Olympus de alta performance com platina motorizada controlada eletronicamente laser em estado s lido feixe do laser de acordo com os requisitos Computador com Sistema Operacional Windows e um sofisticado software de controle mmi CellToolsO Todas as caracter sticas comuns do microsc pio est o dispon veis O software mmi CellTools controla o laser a captura de imagem e as a es de escaneamento da platina sem bloquear qualquer outra a o do microsc pio Computer controlled it movements UV Cut software controlled laser focus and energy Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 2 Manuseando as amostras 2 1 Usando o mmi IsolationCapO para uma coleta simples A microdissec o para isolamento de c lula
5. S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 4 1 2 2 Ret ngulos e linhas Clique com o bot o direito sobre o bot o Ret ngulo ou Linha para acionar a janela de configura o destas formas Voc pode desenhar um ret ngulo ou uma linha e tamb m pode definir as dimens es shape das formas digitando o valor nos campos correspondentes Const Rect a micron 100 Type m b micron 100 Ap s desenhar as formas pressione ESC l ou clique com o bot o direito sobre o bot o Ret ngulo Linha LI area pr 10000 000 4 1 2 3 Deletando contornos Com a ferramenta de dele o voc pode clicar sobre uma forma que ela ser apagada automaticamente Tamb m poss vel utilizar o menu de contexto clicando com o bot o direito sobre o painel de v deo onde aparecer o as op es abaixo Delete active Del Del all From group Shift ctrl Del Delete all Ckri Del 4 1 2 4 Mover os contornos E Utilize a ferramenta para mover os contornos e as formas para a posi o correta E muito til quando desenhamos uma elipse um quadrado etc e precisamos ajustar sua posi o 4 1 2 5 Copiar e colar contornos Para copiar e colar contornos marque a forma ou contorno desejado e pressione CTRL C para copiar e CTRL V para colar em outra regi o Olympus Optical
6. 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CelICut Plus Escolha uma das op es de desenho conforme segue Ferramenta de sele o gt Desenho a m o livre C rculo ou elipse O e Ret ngulo ou linhas E Ferramenta para apagar o desenho Es Ferramenta para mover o desenho E Estas ferramentas podem ser ativadas clicando sobre os respectivos bot es ou atrav s do menu de contexto colocando o ponteiro do mouse sobre a imagem e clicando no bot o direito Para trocar rapidamente entre a ferramenta selecionada e o movimento da platina utilize a barra de espa o do teclado Ap s desenhar um contorno com a ferramenta M o livre F por padr o o software fecha o contorno Para desligar esta op o selecione o item de menu CellCut gt Draw and Cut gt AutoEnclose Shape 4 1 2 1 C rculos e El pses Clique com o bot o direito sobre o bot o C rculo ou elipse para acionar a janela de configura o destas formas Voc pode desenhar um c rculo ou uma Const Radi o pia irma elipse e tamb m pode definir as dimens es Shape das formas digitando o valor nos campos correspondentes R micron 100 p Type T Ap s desenhar as formas pressione ESC ou clique com o bot o direito sobre o bot o Circulo Elipse area pr 3445 927 Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar
7. Ei E Cap group Mode EA E Roe AQUI Parameters Pos ti E 10 49 10 005 o o E ad A i mi E e Repeat e p 2Dilham 1AM M a Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI mma CellCut Plus 4 1 Desenhando o contorno dos cortes 4 1 1 Princ pios Voc pode desenhar usando o mouse do seu computador Ou usar a caneta digital para desenhar diretamente no monitor caso seu sistema possua este recurso O laser corta ao longo do contorno desenhado em torno da rea de interesse As seguintes calibra es devem ser feitas corretamente antes de iniciar os cortes Alinhamento da c mera Manual se o 8 3 11 Calibra o da objetiva Manual se o 8 3 11 2 Velocidade do corte Manual se o 8 4 2 3 Foco do laser Manual se o 8 4 2 4 Pot ncia do laser Manual se o 8 4 2 5 Posi o do laser Manual se o 8 4 8 1 po Sa INE Ap s desenhar os contornos das formas voc s precisa clicar no bot o CUT e o sistema cortar todos os contornos definidos 4 1 2 Modos de desenho Para cada modo de desenho existe um bot o no painel de ferramentas Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone
8. Prepara o do Sistema Quando iniciar o software pela primeira vez comece com a defini o de um novo ajuste New Setup Por ser mais simples chamaremos o primeiro setup de Default Neste ajuste ser o gravados 9 Setllp Pot ncia do laser El Br singleos trans gt Foco do laser gt Posi o do laser Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus gt Calibra o da platina XY gt Ajustes de c mera para cada objetiva Para acessar o setup Explorer clique em E do lado esquerdo da lista de Setup Para cada objetiva que voc definir siga os procedimentos para gt Posi o do laser Objective gt Foco do laser Pot ncia do laser gt Calibra o de objetiva gt Configura o da c mera El 4x LPlanFLN phe w 3 2 3 Manuseando uma nova l mina Prepare sua amostra de acordo com o que est descrito no Cap tulo 7 do manual do usu rio Defina um New Slide usando o item de menu File gt New Slide ou clique no bot o E localizado do lado esquerdo a lista de l minas O editor de l minas abrir e voc poder adicionar uma nova l mina pressionando to Toda a documenta o ser gravada em uma pasta com o mesmo nome que voc pa para a nova
9. c mera Auto Brightness o brilho pode ser ajustado automaticamente pressionando o bot o Auto O controle deslizante Auto permite definir o brilho necess rio Quando a imagem muda o modo Auto ir ajustar automaticamente o brilho O ajuste de brilho tamb m pode ser feito manualmente clicando no bot o Manual Neste caso o usu rio seleciona o tempo de exposi o e o gain atrav s dos controles correspondentes Primeiro ajusta se o brilho alterando o tempo de exposi o O ajuste de gain s necess rio para imagens escuras quando tempos de exposi o longos n o s o aceit veis O Gain sempre causa ru dos na imagem Para tempos de exposi o de mais de 20ms ser reduzido o n mero de quadros por segundo FPS O valor padr o de Gamma de 0 75 e deve ser ajustado sobre uma faixa de 0 2 a 2 0 para modificar a escala de cinza da imagem Marque Saving drawings para salvar a imagem da tela Essa imagem conter todos os desenhos e marcadores Salve esta imagem com extens o BMP ou TIF para obter melhor qualidade Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus White Balance WB Clique em set WB para obter um melhor Blanco de branco Para melhores resultados sele
10. l mina Defina os limites da rea de trabalho da sua l mina movendo a mesma para o canto superior esquerdo at que voc consiga obter a vis o do canto sombreado frame com a membrana e pressione o icone aj E Limit e depois mova para o canto inferior direito da l mina at obter a vis o do canto sombreado frame com a membrana e pressione o cone Limit2 Use a objetiva de menor aumento padr o 4x Clique no bot o E e o software criar uma imagem panor mica da l mina Para navegar pela l mina clique duas vezes na rea desejada ou arrastar o ret ngulo piscante para a posi o desejada Tamb m pode ser usada as setas direcionais do teclado para mover a platina Mova o Caplift para baixo clicando no bot o ou use a tecla de atalho F2 Ap s abaixar o Caplift voc deve ajustar o foco fino conforme a necessidade Qualquer bot o na barra de ferramentas pode ser ativado com um clique do mouse Por exemplo a ferramenta de desenho a m o livre L I permite que voc desenhe uma linha em torno do objeto a ser cortado Pressione o bot o Cut Cut para cortar o objeto selecionado Levante o Capholder clicando no bot o MM para coletar a amostra cortada Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento
11. montado no lado plano da membrana da mesma maneira que feito em l minas de vidro comuns Ap s o processo rotineiro a membrana com o tecido invertida Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus e colocada contra uma l mina de vidro e fixada no microsc pio para realizar a microdissec o 2 3 Prepara o de c lulas vivas O mmi CellCut permite a microdissec o em c lulas vivas padr o utilizando o CellChamberQ que consiste em um anel de a o inox com uma membrana no fundo na qual as c lulas vivas podem ser cultivadas P Antes da microdissec o o mmi CellChamber fo al colocado em uma placa de petri revestida com um s E A a adesivo no fundo e levada ao microsc pio para realizar pn il a microdissec ao Es reas de interesse podem ser positivamente ou chamber with negativamente selecionadas pelo laser sem qualquer a E mentes necessidade de abrir a placa de petri ou drenar o meio d P a de crescimento O laser corta r pido e precisamente with adhesive somente a membrana para permitir f cil separa o das rr c lulas vivas selecionadas Depois de dissecado o CellChamber removido da placa de petri sob condi es ass pticas totais deixando as c lulas selecionadas no fundo
12. para obter imagens mais claras mas com menor resolu o Usado em combina o com Gamma entre 1 e 2 3 3 7 Freeze v deo live v deo Em aplica es fluorescentes faz sentido congelar o v deo quando voc adquiriu uma boa imagem Ap s congelar o v deo voc pode fechar o shutter da fluoresc ncia e desenhar e cortar sobre a imagem congelada sem que submeta sua amostra fluoresc ncia a um photo bleaching Para congelar o v deo use o item de menu Video gt V deo freeze Para retornar ao modo live v deo Video gt Video live Estas op es podem ser acionadas pressionando o bot o direito do mouse sobre o painel do v deo Outras op es de v deo como gravar v deo est o dispon veis Consulte o manual do usu rio Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CelICut Plus 4 mmi CellTools Plug in CellCut O software mmi CellTools possui v rios plug ins instalados de acordo com o produto ou m dulo adquirido CellCut CellEctor CellExplorer CellManipulator Para utilizar as fun es de microdissec o clique na aba CellCut ia CENE O CelEctor Lellut CelEsplorer CelMaripulator Para utilizar os plug ins instalados clique nas respectivas abas Groups Serial sections
13. MMI mma CellCut Plus Remova o tubo e proceda com a aplica o 3 2 4 Desligando o sistema v Fechar o Software CellTools usando o comando Exit no menu lt File gt v Desligue o controle do laser pressionando o bot o para desligar o laser e girando a chave para a posi o OFF posi o vertical para desligar os controles eletr nicos v Desligue o PC usando os comandos normais do Windows 3 3 mmi CellTools Tela Principal O software fornece uma painel para visualiza o ao vivo do campo de vis o atual do microsc pio Fun es de digitaliza o est o dispon veis no painel Overview na parte inferior direita da janela do software Na barra superior o programa permite acessar o banco de dados espec fico do usu rio Este banco de dados permite administrar e salvar todos os par metros definidos pelo usu rio Todos os itens de menu podem ser acessados por teclas de fun o Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus O item Hardware check mostra se o sistema est funcionando corretamente Hardware self monitoring 3 3 2 Banco de dados de usu rio espec fico Todas as configura es salvas no software mmi CellTools s o nicas isto pertencem ao usu rio atual que acessou log
14. OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus Sistema de Microdissec o CellCut Plus Treinamento para usu rios Guia de orienta o b sico Kleber Campos Especialista de Produtos Olympus Optical do Brasil Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 1 Princ pios e funcionamento do mmi CellCut O mmi CellCut usado para isolar sob vis o microsc pica pequenas reas ou c lulas isoladas a partir de cortes histol gicos para posterior an lise microbiol gica DNA RNA bem como prote nas a partir de amostras puras podem ser investigadas Nenhum contato mec nico necess rio para a microdissec o a laser das amostras Others e g sperms Celegans Para prepara o de amostras seja qual for a origem tecidos congelados parafinados esfrega os cytospins o mmi CellCut utiliza a tecnologia mmi Membrana Slides Esta l mina possui um suporte met lico revestido com uma membrana que completamente inerte e sua autofluoresc ncia insignificante Diferentes tipos de amostras podem ser preparadas nesta membrana e depois coberta com uma l mina de vidro normal para prote o contra contamina es Atrav s do software mmiCellCut as regi es de interesse s o
15. ados Os cortes somente ser o iniciados quando Repeat clicar no bot o h cu O campo Repeat indica quantas vezes consecutivas o laser deve passar sobre o contorno Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus O zDrill indica o movimento do feixe do laser na dire o do eixo Z a cada repeti o 2 Drum Esta op o s est dispon vel em microsc pios motorizados uso 4 2 3 Seguran a do laser Quando o laser ligado uma pequena janela com um s mbolo laser aparece no canto Laser DON superior direito i e desaparece quando o laser desligado O laser n o pode ser ligado por mais de 3 minutos por vez Na ai Ey a 4 2 4 Icone Posi o do laser n Selecione os itens de menu conforme segue abaixo para visualizar ou esconder a posi o do laser CellCut gt Laser gt Laser Target Este guia tem a finalidade de orient lo nas fun es b sicas do sistema mmiCellCut Plus Detalhes e opera es mais avan adas devem ser consultadas no manual do usu rio Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br
16. cione uma are vazia da l mina A imagem deve aparecer com brilho razo vel Se estiver muito ou pouco brilhante o White balance falhou N o use o Set WB em imagens fluorescentes Para microsc pios manuais somente uma configura o de White Balance ser salva Quando voc altera o White balance o efeito vis vel para todas as objetivas Em configura es de microsc pios autom ticos os ajustes de White balance s o salvos separadamente para cada objetiva O bot o Default redefinir os controles deslizantes para a posi o padr o Camera Settings ES Brightness Exposure Time Gain ALtO Gamma m dus gt 1 dB e i 0 2 L gt nl ms 1 dB Bl 0 75 La Kils TU dE Ji Ea Image Format Image Option White Balance Perteck Color High Speed Low Light Save Drawing Perfect Color para aplica es de campo claro otimiza a qualidade das cores High Speed Maximiza a faixa de quadros por segundo Neste modo at 15 fps com resolu o total de pixels ser o mostradas Low Light Para aplica es fluorescentes o contraste pode ser otimizado com esta op o E utilizado em combina o com ajustes de Gamma e Gain Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus Binning 2x2 pixels ser o usados
17. da placa as quais podem ser utilizadas para nova cultura ii l O CellChamber pode ser descartado ou se colocado Ci T em uma nova placa de Petri pode ser usado muitas vezes para isolar diferentes c lulas da mesma cultura p se for necess rio em Durante este processo as c lulas podem permanecer A em seu meio de cultura sem que a energia do laser as afetem Este fluxo de trabalho minimiza o risco de perda de viabilidade tanto pelo estresse gerado pela luz do laser ou pelas condi es ambientais Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 3 Vis o geral das fun es do mmi CellCut O software CellTools em conjunto com o mmi CellCut plug in fornece todos os controles necess rios para Exibir imagens ao vivo da amostra atual no microsc pio Salvar imagens Platina motorizada x y Ajustes do laser velocidade pot ncia e foco Salvar configura es preferenciais da c mera Manipula o autom tica do caplift Manipula o autom tica dos opcionais Multicap e Multislide Manuseio opcional de motoriza o de microsc pios Isto resulta em um f cil e amig vel m todo para Escanear amostras Documentar amostras Marcar o caminho do laser para cortar em torno das c lulas Marcar v rias reas para se
18. do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 4 2 Cortes 4 2 1 Laser tiro simples Utilizando o bot o is voc pode executar tiros simples com laser por tempo determinado Clique com o bot o direito do mouse sobre o bot o para alterar as configura es do tempo do pulso do laser conforme desejar Laser Settings Laser Shortimpuls millisecond 5U e A faixa t pica de 50 100 mseg 4 2 2 Princ pios O corte autom tico ao longo dos contornos torna seu trabalho mais f cil e r pido Voc pode escolher se quer cortar uma rea ou um grupo de reas Para a maioria das aplica es os melhores resultados s o observados com as objetivas de 20x e 40x O usu rio deve selecionar a objetiva apropriada na caixa de sele o de Objective E 20x LocPlanFUM pol 4 objetivas Farameters Ti As configura es do laser incluem os seguintes 2p 4 00 par metros E fd s e Speed Velocidade de movimento da platina e Focus Foco do laser e Power Pot ncia do laser essencial configurar estes par metros para cada objetiva e tipo de tecido a Veja os detalhes de configura o no manual do usu rio Fega se o 8 4 2 6 a re re Ap s ajustar as configura es proceda com os cortes E fire desej
19. ou o Microsoft Windows O mmi CellTools suporta totalmente o gerenciamento de usu rios do Microsoft Windows Durante a inicializa o o programa carrega as ltimas configura es salvas pelo usu rio ativo Portanto cada usu rio cadastrado no Windows manipula somente seu pr prio banco de dados Altera es de um determinado usu rio n o ser o vis veis por outros usu rios O banco de dados default sempre estar salvo separadamente Este banco de dados default espec fico para o seu sistema e ser configurado e gerenciado somente durante a instala o ou servi os de manuten o do sistema Se um banco de dados de um determinado usu rio falhar o usu rio pode recuperar o arquivo default com o procedimento seguinte e Feche o mmi CellTools e Delete a pasta de seu computador conforme segue cADocumenis and seitingsVUsernamet Application DataiMMImCUT Database e Abra o mmi CellTools Agora o arquivo default ser automaticamente restaurado e diretamente vis vel no software mmi CellTools O usu rio pode salvar todos os par metros para cada experimento l mina separadamente Se o usu rio alterar as par metros para o experimento atual os par metros dos experimentos recentes ainda estar o salvos e acess veis Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br
20. rem cortadas em uma nica opera o Marcar e salvar reas para cortes posteriores Dissecar automaticamente as reas marcadas Coletar as amostras sem radia o ou risco de contamina o dos materiais isolados A opera o de todos os m dulos facilmente controlada pelo software mmi CellTools A aplica o principal respons vel por exibir as imagens no v deo salvar a imagem ajustar os controles da c mera e controlar os movimentos b sicos da platina XY Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Future Treinamento MMI CellCut Plus 3 1 Guia R pido 3 1 2 Ligando o Sistema Para ligar o sistema mmiCellCutO siga os passos abaixo v Ligar o PC e esperar at que apare a a rea de trabalho do Windows v Ligar a fonte de luz branca do microsc pio Ligar o controlador do laser com a chave O LED amarelo acender v Iniciar o software mmi CellTools e aguardar at que o software realize o processo de inicializa o e testes internos v Ligar o laser pressionando o bot o da caixa controladora O LED verde acender Laser controller Pushbut Key switch ton Interlock LED 1 LED 2 ft of or O O locked O OQ Off locked i i OQ On On On On Oo _ unlocked Off On Off unlocked Or 3 2 2
21. s s til quando voc consegue remover as reas de interesse do tecido e da pr pria l mina A coleta de fase nica torna simples o corte de uma ou v rias reas de interesse al m de ser livre de contamina o Esta coleta utiliza uma membrana protetora e um tubo de rea o com uma tampa aderente especial O prop sito da membrana protetora e Evitar contamina o da amostra e Facilitar a remo o e coleta da rea cortada I d of tube membrane tissue slide O feixe do laser passa atrav s da objetiva na parte inferior da platina cortando o tecido e a membrana O tecido e a membrana s o coletados na tampa do tubo de rea o O corte feito em torno das c lulas selecionadas Para a etapa de coleta nenhuma radia o adicional usada Tanto a membrana quanto a tampa adesiva s o quimicamente inertes e n o tem influ ncia nos processos seguintes de biologia molecular A membrana transparente constitu da de PET Politereftalato de etileno e n o interfere no feixe de luz A tampa do tubo de rea o tamb m cont m um difusor inserido O difusor melhora a qualidade da imagem notavelmente e pode ser colocado diretamente no topo do tecido e da membrana durante todas as opera es 2 2 Prepara o das l minas J A coleta de amostras de microdissec o laser requer l minas especiais As l minas s o fornecidas com uma membrana o transparente PET com espessura de 1 4 um y aa O tecido
22. selecionadas na tela usando tanto o mouse para para contornos livres ou pode se utilizar as formas geom tricas pr definidas como c rculos elipses quadrados Qualquer n mero de reas em toda a l mina pode ser identificado como regi es de interesse e os tamanhos das formas geom tricas podem ser alterados ou copiados e colados A fun o de agrupamento permite ao usu rio coletar um n mero ilimitado de diferentes c lulas ou reas celulares dentro de um nico processo de triagem em diferentes tubos de coleta mmi IsolationCaps A espessura 0 3 um em 100x fina do feixe permite uma extra o precisa das reas selecionadas com excelente rapidez sem afetar sua morfologia ou outras reas de interesse negativamente Como resultado n o h perda de qualidade do material que ser usado em etapas subsequ ntes Mesmo a viabilidade de c lulas vivas n o afetada e portanto uma vez selecionadas c lulas podem ser recultivadas Olympus Optical do Brasil Rua do R cio 430 2 andar S o Paulo CEP 04552 906 SP Brasil Fone 11 3046 6400 Fax 11 3046 6413 www olympus com br OLYMPUS Your Vision Our Futuro Treinamento MMI CellCut Plus V rias reas de interesse podem ser microdissecadas em uma opera o automatizada e coletadas no mmi IsolationCap Um nico mmi IsolationCap pode ser usado para coletar v rias dissec es mesmo de l minas diferentes at 3 l minas
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