FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Calretinin Clon DAK
Contents
1. n de ADNc de retina de pollo y es miembro de la superfamilia de prote nas transportadoras de calcio CaBP a la que tambi n pertenecen la calbindina la parvalb mina y la calmodulina Esta familia se caracteriza por una secuencia de amino cidos que se pliega en una estructura h lice bucle h lice que constituye el dominio de uni n al calcio motivos EF hand 5 En humanos la masa molecular de la calretinina es 32 kDa y la prote na contiene cinco sitios de uni n al Ca 6 La calretinina se expresa abundantemente en tejidos neurales centrales y perif ricos particularmente en la retina y en las neuronas de las v as sensoriales 6 y se ha planteado que debido a sus capacidades amortiguadoras podr a cumplir una funci n importante en la supervivencia de las c lulas nerviosas durante las alteraciones en la homeostasis del calcio 7 El hallazgo de calretinina en c lulas productoras de andr geno ha llevado a sugerir que la expresi n de la prote na puede estar relacionada con la secreci n de esteroides 8 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n 9 Limitaciones generales Ant2. 61 2 Gotzos V Vogt P Celio MR The calcium binding protein calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type Path Res Pract 1996 192 137 47 3 Cury PM Butcher DN Fisher C Corrin B Nicholson AG Value of the mesothelium associated antibodies thrombomodulin cytokeratin 5 6 calretinin and CD44H in distinguishing epithelioid pleural mesothelioma from adenocarcinoma metastatic to the pleura Mod Pathol 2000 13 107 12 4 McCluggage WG Young RH Immunohistochemistry as a diagnostic aid in the evaluation of ovarian tumors Semin Diagn Pathol 2005 22 3 32 5 Rogers JH Calretinin a gene for a novel calcium binding protein expressed principally in neurons J Cell Biol 1987 105 1343 53 6 Pochet R Blachier F Malaisse W Parmentier M Pasteels B Pohl V et al Calbindin D28 in mammalian brain retina and endocrine pancreas immunohistochemical comparison with calretinin Adv Exp Med Biol 1989 255 435 43 7 Lukas W Jones KA Cortical neurons containing calretinin are selectively resistant to calcium overload and exitotoxicity in vitro Neuroscience 1994 61 307 16 8 Bertschy S Genton CY Gotzos V Selective immunocytochemical localisation of calretinin in the human ovary Histochem Cell Biol 1998 109 59 66 9 Versnel MA Bouts MJ Hoogsteden HC van der Kwast TH Delahaye M Hagemeijer A Establishment of human malignant mesothelioma cell lines Int J Cancer 1989 44 256 60 10 Vers
3. de aplicaci n 300 uL Autoprogram Calret sin contratinci n o CalretH con contratinci n El paso auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso auxiliar debe configurarse a ninguno De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n con hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n
4. icuerpo monoclonal de rat n listo para usar suministrado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de azida de sodio Clon DAK Calret 1 Isotipo lgG1 kappa A partir de la l nea de c lulas de mesotelioma maligno humano Mero 41 9 10 el gen que codifica la calretinina se amplific por PCR y se expres como prote na recombinante en E coli La prote na purificada se utiliz para la inmunizaci n En inmunohistoqu mica el anticuerpo marca espec ficamente la calretinina 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaNz un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse de acuerdo con las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si
5. ionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus ne de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus utilizando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen
6. los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario deber comprobar dichas condiciones No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras de pacientes En caso de observarse una coloraci n inesperada que no puede ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y sospeche un problema con un anticuerpo comun quese con la asistencia t cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High 1S627 ES MNI 2009 12 04 p 1 2 Dako Denmark A S Produkt
7. nel MA Hoogsteden HC Hagemelijer A Bouts MJ van der Kwast TH Delahaye M et al Characterization of three human malignant mesothelioma cell lines Cancer Genet Cytogenet 1989 42 115 28 Explicaci n de los s mbolos o e 6 Limitaci n de temperatura Fecha de caducidad Dispositivo m dico para Contiene suficiente para lt n gt 116579 003 1S627 ES MNI 2009 12 04 p 2 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
8. realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir colon y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 Las c lulas marcadas por el anticuerpo muestran tinci n citoplasm tica y nuclear Tejidos normales El anticuerpo marca c lulas mesoteliales normales c lulas nerviosas y c lulas reticulares del colon De los otros tejidos normales analizados no se observ tinci n en epitelio escamoso simple ri n h gado p ncreas pr stata y am gdala En el colon las c lulas ganglionares de los nervios perif ricos muestran una reacci n de tinci n de moderada a fuerte mientras que los axones de los nervios perif ricos muestran una reacci n de leve a moderada Tejidos anormales El anticuerpo marc mesotelioma mientras que el adenocarcinoma de pulm n el melanoma y el carcinoma de mama y de timo fueron negativos Las pruebas realizadas con el anticuerpo sobre tumores de c lulas granulosas mostraron una reacci n positiva 1 Barberis MCP Faleri M Veronese S Casadio C Viale G Calretinin A selective marker of normal and neoplastic mesothelial cells in serous effusions Acta Cytol 1997 41 1757
9. y Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 116579 003 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Calretinin Clon DAK Calret 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 1S627 Para uso en diagn stico in vitro Se prev el uso de FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Calretinin Clon DAK Calret 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo marca calretinina en c lulas mesoteliales normales y neopl sicas y representa una herramienta til en la identificaci n de mesoteliomas malignos de tipo epitelial y para diferenciar estas neoplasias malignas de met stasis de adenocarcinoma de pulm n 1 3 Los anticuerpos contra calretinina pueden resultar tiles en el diagn stico diferencial de tumores estromales de los cordones sexuales de los ovarios tales como tumores de c lulas granulosas 4 La interpretaci n cl nica de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un pat logo calificado dentro del contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas La calretinina se identific por primera vez mediante clonaci
Download Pdf Manuals
Related Search