EnVision™ FLEX, High pH, (Link)
Contents
1. Apr s un d paraffinage et une r hydratation dans un bain de tampon eau les coupes de tissus doivent tre soumises un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER 1 Placer les cuves de coloration contenant le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x dilu dans un bain marie 2 Porter le bain marie et les cuves remplies de produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail 95 99 Couvrir les cuves pour stabiliser la temp rature et viter toute vaporation 3 Immerger les coupes se trouvant temp rature ambiante dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e contenue dans les cuves de coloration 4 Porter de nouveau le bain marie et le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution 95 99 Incuber pendant 20 minutes 1 minute 95 99 5 Retirer la cuve contenant les lames du bain marie Laisser les lames refroidir dans le produit EnVision M FLEX Target Retrieval Solution pendant 20 minutes 1 minute a temp rature ambiante 6 Vider le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution et rincer les coupes l aide du produit EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante pendant 1 5 minutes 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 18 30 7 Placer le portoir contenant les coupes rinc es dans un appareil Autostainer Link Lancer imm diatement le c2. EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 L concentr 20x Solution saline de tampon Tris contenant du Tween 20 pH 7 6 0 1 EnVision FLEX EnVision FLEX Hematoxylin 3 x 45 mL pr t l emploi Solution aqueuse d h matoxyline EnVision FLEX Rabbit LINKER 40 mL pr t l emploi Solution tampon contenant une prot ine stabilisante et un agent antimicrobien Contient suffisamment de r actif pour 130 200 tests sur la base de 200 300 uL par test EnVision FLEX EnVision FLEX Mouse LINKER 40 mL pr t l emploi Solution tampon contenant une prot ine stabilisante et un agent antimicrobien Contient suffisamment de r actif pour 130 200 tests sur la base de 200 300 uL par test K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 14 30 Pr cautions Pour utilisateurs professionnels Les produits EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER et EnVision FLEX Rabbit LINKER contiennent des substances d origine animale et on ne peut exclure le fait que des quantit s infimes de substances humaines puissent tre pr sentes en raison des proc dures de fabrication Comme avec tout produit d origine biologique respecter les proc dures de manipulation appropri es Ne pas exposer les produits EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Substrate Buffer EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrate Working Solution ou EnVision FLEX Hematoxylin
3. innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert wird A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 Code Nr K8007 Eine f r das geplante F rbeverfahren ausreichende Menge EnVision FLEX Wash Buffer 20x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 20 verd nnen Um ein Aufsch umen so weit wie m glich zu vermeiden f gen Sie konzentrierten Wash Buffer zu einer abgemessenen Menge destilliertem oder entionisiertem Wasser hinzu R hren Sie gleichm ig bis die verd nnte L sung homogen erscheint Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert wird AA EnVision FLEX Substrate Working Solution Die DAB haltige EnVision FLEX Substrate Working Solution wird durch gr ndliches Mischen von 1 Tropfen EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 und 1 mL EnVision FLEX Substrate Buffer SM803 angesetzt Die EnVision FLEX Substrate Working Solution innerhalb von 5 Tagen verbrauchen bei 2 8 im Dunklen aufbewahren Entnahme und Vorbereitung der Probe Als Proben kommen formalinfixierte paraffineingebettete Gewebeschnitte in Betracht Die Fixation h ngt von Art Dicke des Fixationsmittels und des Gewebes ab Zum Beispiel sollten Gewebebl cke mit einer Dicke
4. r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante 7 Laisser les lames dans le tampon EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante pendant 1 5 minutes 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 17 30 8 Placer les lames sur un appareil Autostainer Link et proc der la coloration Les coupes ne doivent pas s cher lors du traitement ni pendant la proc dure de coloration immunohistochimique 9 Apr s coloration il est recommand d effectuer une d shydratation un claircissement et un montage permanent REMARQUE lors d une utilisation pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 sur un appareil PT Link la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu peuvent tre utilis s 3 fois sur une p riode de 5 jours condition d tre conserv s a temp rature ambiante Proc dure HIER l aide du PT Link Apr s un d paraffinage et une r hydratation dans un bain de tampon eau les coupes de tissus doivent tre soumises un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER 1 Pr parer une solution de travail en diluant la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentr e au 1 50 me dans de l eau distill e ou d ionis e 2 Remplir les cuves du PT Link avec une quantit de solution de travail suffisante 1 5 litres pour recouvrir les
5. C Store EnVision FLEX Hematoxylin Code K8008 in the dark at room temperature Do not use after expiration date stamped on the vials If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user The prepared Substrate Working Solution should be stored in the dark at 2 8 C and used within 5 days If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the product is suspected contact Dako Technical Services 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 7 30 Reagent Preparation A 1 EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Code K8004 Dilute a sufficient quantity of EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 1 50 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned If Dako PT Link is used for pre treatment dilution can be performed by emptying the content of the Target Retrieval Solution 50x vial into the Dako PT Link tank and adding distilled or deionised water to the marked line Fill Line Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 Code K8005 Dilute a sufficient quantity
6. DAB protocoles FLEX Mouse LINKER FLEX Rabbit et FLEX Rabbit 2x5 DAB protocoles FLEX Rabbit LINKER Le volume de r actif recommand devant tre appliqu est de 1 x 200 uL ou 2 x 150 uL par lame Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l appareil Autostainer Link utilis contacter le service technique de Dako Les temps d incubation optimaux de l anticorps primaire et du produit EnVision FLEX HRP d pendent de l anticorps primaire utilis Veuillez vous reporter la notice de chaque anticorps primaire Dako L utilisateur doit v rifier le protocole appliqu Une fois la proc dure de coloration termin e les chantillons doivent tre mont s Il est recommand de r aliser une d shydratation un claircissement et un montage permanent quand les lames ont subi une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 Pour les lames ayant subi une proc dure HIER elles peuvent tre mont es avec un milieu de montage aqueux ou permanent Pour un montage aqueux un milieu de montage de type Dako Glycergel Mounting Medium r f CO563 ou Faramount Aqueous Mounting Medium r f S3025 est recommand Contr le qualit Chaque cycle de coloration doit comprendre un chantillon de contr le positif connu pour v rifier la bonne performance de tous les r actifs appliqu s Si l chantillon de contr le positif ne pr sente pas de coloration positive le marquage des chantillons analyser doit tre cons
7. If the positive control specimen fails to demonstrate positive staining labeling of test specimens should be considered invalid A negative control reagent should be used with each specimen to identify any non specific staining If non specific staining cannot be clearly differentiated from the specific staining the labeling of the test specimen should be considered invalid Interpretation of Results The diaminobenzidine containing Substrate Working Solution gives a brown color at the site of the target antigen recognized by the primary antibody The brown color should be present on the positive control specimen at the expected localization of the target antigen If non specific staining is present this will be recognized as a rather diffuse brown staining on the slides treated with the negative control reagent Nuclei will be stained blue by the hematoxylin counterstain Limitations 1 For automated use on Autostainer Link instruments only When performing manual stainings the optimal procedure must be determined and verified by the user unless specified in the Package Insert for the specific Dako Primary Antibody 2 Foruse on formalin fixed paraffin embedded tissue sections only When using frozen sections or cell smears the optimal procedure must be determined and verified by the user unless specified in the Package Insert for the specific Dako Primary Antibody Changes in the procedure may have impact on the number of tests provided
8. In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Consulter les instructions Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer TR d utilisation NZ Contenu suffisant pour lt n gt tests sl Fabricant Gebrauchsanweisung Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller beachten The Dako EnVision Systems are covered by U S Patent 5 543 332 and European Patent 594 772 Les syst mes Dako EnVision sont couverts par le brevet am ricain 5 543 332 et le brevet europ en 594 772 Die Dako EnVision Systeme sind durch folgende Patente gesch tzt US Patent 5 543 332 und Europ isches Patent 594 772 Produced by Produit par Hersteller Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Danemark D nemark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 30 30
9. Minuten im verd nnten und auf Raumtemperatur gebrachten EnVisionTM FLEX Wash Buffer 20x belassen 8 Objekttr ger in ein Autostainer Link Ger t einsetzen und mit der F rbung fortfahren Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen 9 Nach der F rbung sollte eine Dehydrierung Sp lung und Permanentfixierung erfolgen HINWEIS Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in 1 Probenvorbereitung k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer 3 Mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert werden 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 26 30 HIER Verfahren mit PT Link Nach der Entparaffinierung und Rehydrierung mit Puffer Wasser ist bei den meisten Gewebeschnitten eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER erforderlich 1 2 gt 10 Eine Arbeitsl sung durch Verd nnen der konzentrierten EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 herstellen Tanks des PT Link mit einer ausreichenden Menge Arbeitsl sung 1 5 L f llen um die Gewebeschnitte zu bedecken PT Link auf Erw rmen der L sung auf 65 einste llen Gewebeschnitte auf Objekttr gern manuell entparaffinieren und rehydrieren Die auf Raumtemperatur gebrachten Gewebeschnitte in die vorgew rmte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung in de
10. an den Glas Objekttr gern werden FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen B Arbeitsablauf des F rbens Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies k nnen mit dem Dako EnVision FLEX Nachweissystem auf formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten verwendet werden Die Packungsbeilage der konzentrierten prim ren Antik rper enth lt Angaben zur Verd nnung konzentrierter prim rer Antik rper von Dako Die konzentrierten prim ren Antik rper sollten nur mit EnVisionTM FLEX Antibody Diluent DM830 Code Nr K8006 verd nnt werden Die Arbeitsschritte zur F rbung und die empfohlenen Inkubationszeiten sind in der Autostainer Link Software vorprogrammiert ebenso wie die Protokolle f r die Visualisierungssysteme FLEX und FLEX 2x5 DAB FLEX Protokolle FLEX Maus und FLEX Maus 2x5 DAB FLEX Maus LINKER Protokolle FLEX Kaninchen und FLEX Kaninchen 2x5 DAB FLEX Kaninchen LINKER Protokolle Die zur Anwendung empfohlene Menge des Reagenz betr gt 1 x 200 uL oder 2 x 150 uL pro Objekttr ger Sollten die Protokolle auf dem verwendeten Autostainer Link Ger t nicht vorhanden sein wenden Sie sich bitte an den technischen Kundendienst von Dako Optimale Inkubationszeiten f r den prim ren Antik rper und EnVision FLEX HRP h ngen vom verwendeten prim ren Antik rper ab Angaben bitte der Packungsbeilage des jeweiligen prim ren Antik rpers von Dako entnehmen Die Verifizierung des verwendeten Protokolls
11. coupes de tissus 3 Regler le PT Link afin de pr chauffer la solution 65 4 D paraffiner et r hydrater manuellement les coupes de tissus mont es sur des lames de verre 5 Immerger les coupes de tissus temp rature ambiante dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e et incuber a 97 pendant 20 minutes 6 Laisser les coupes refroidir dans le PT Link jusqu 65 7 Retirer chaque portoir lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex PT Link Rinse Station r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante 8 Laisser les lames dans le tampon EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante pendant 1 5 minutes 9 Placer les lames sur un appareil Autostainer Link et proc der la coloration Les coupes ne doivent pas s cher lors du traitement ni pendant la proc dure de coloration immunohistochimique 10 Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand REMARQUE lors d une utilisation pour une proc dure HIER sur un appareil PT Link la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu peuvent tre utilis s 3 fois sur une p riode de 5 jours condition d tre conserv s temp rature ambiante Proc dure HIER utilisant des cuves de Coplin
12. der Vorbehandlung cccocoocococcccccconcnononcnnnnconcnnonnncnnnnocnnnnnnnnnnnncnnnnnnnnnnnnnaninnns 26 B Arbeitsablauf des E rbens nennen 28 Qualitatskontrolle o a 28 Auswertung der Ergebnisse 2 2 2a iin einabncen ln 28 A ET EE 29 Erl uterung der Symbole dd a ege 30 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 3 30 ENGLISH Intended Use For in vitro diagnostic use Dako EnVision FLEX detection system is intended for use in immunohistochemistry together with Autostainer Link instruments The system detects primary mouse and rabbit antibodies and the reaction is visualized by EnVision FLEX DAB Chromogen If used with EnVision FLEX Rabbit LINKER Code K8009 or EnVision FLEX Mouse LINKER Code K8021 signal amplification of primary rabbit antibodies or primary mouse antibodies respectively can be achieved The EnVision FLEX reagents are intended for use on formalin fixed paraffin embedded tissue sections Summary and Explanation Dako EnVision FLEX detection system has been designed to be a flexible system and gives an optimal staining on Autostainer Link instruments when using the protocol recommended in this package insert Prior to staining formalin fixed paraffin embedded tissue sections should be subjected to deparaffinization and hydration followed by heat induced epitope retrieval HIER using the target retrieval method specified in the package insert for the primary antibody
13. klassifiziert sind mit Blei und Kupferabflussrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Azidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen Entsprechende Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 10 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Lagerung EnVisionTM FLEX und EnVisionTM FLEX Reagenzien bei 2 8 C lagern EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX HRP und EnVision FLEX Substrate Buffer im Dunkeln bei 2 8 C lagern EnVision FLEX Hematoxylin Code Nr K8008 im Dunkeln bei Raumtemperatur lagern Nach Ablauf des auf den Fl schchen aufgedruckten Verfallsdatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien anders als entsprechend den in der Packungsbeilage angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 24 30 die Bedingungen vom Anwender verifiziert werden Die fertige Substrat Arbeitsl sung im Dunkeln bei 2 8 C aufbewahren und innerhalb von 5 Tagen verbrauchen Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Produkt hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Reagenzvorbereitung A 1 EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Code Nr K8004 Eine f r das geplante F rbeverfahren au
14. konzentrierte prim re Kaninchen bzw Mausantik rper von Dako Dako FLEX Ready to Use Rabbit oder Mouse Universal Negative Control oder anderes geeignetes Negativkontrollreagenz f r den prim ren Antik rper Zubeh r f r Dako Ger te Objekttr ger z B FLEX IHC Microscope Slides F r die Entparaffinierung bei paraffineingebetteten Gewebeschnitten gebr uchliche Laborreagenzien 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 22 30 Fixiermittel w ssrig oder auf Basis organischer L sungsmittel und Deckgl ser C Optionale Reagenzien K8004 FARCE URE RIEVAL SOLUTION DM828 HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50fach konzentriert Tris EDTA Puffer pH 9 K8005 TARGET RETRIEVAL SOLUTION DM829 LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL 50fach konzentriert Citrat Puffer pH 6 1 K8006 DM830 EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL gebrauchsfertig Tris Puffer pH 7 2 mit 15 mmol L NaN und Protein K8007 wasn surten 20X DM831 EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 L 20fach konzentriert Tris gepufferte Kochsalzl sung mit Tween 20 pH 7 6 0 1 K8008 SM806 EnVision FLEX Hematoxylin 3 x 45 mL gebrauchsfertig W ssrige H matoxylinl sung K8009 SM805 EnVision FLEX Rabbit LINKER 40 mL gebrauchsfertig Gepufferte L sung mit Stabilisatorprotein und einer antimikrobiellen Substanz Ausreichend f r 130 200 Tests bei Verwendung von 20
15. obliegt dem Anwender Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Proben fixiert werden Es wird empfohlen eine Dehydrierung Reinigung und permanente Fixierung durchzuf hren wenn Objekttr ger mit der 3 in 1 Probenvorbereitung behandelt wurden Mit dem HIER Verfahren behandelte Objekttr ger k nnen mit einem w ssrigen oder permanenten Fixiermittel fixiert werden Zur Fixierung in w ssrigem Medium werden Fixiermittel we Dako Glycergel Mounting Medium Code Nr C0563 oder Faramount Aqueous Mounting Medium Code Nr S3025 empfohlen Qualitatskontrolle Bei jedem F rbedurchlauf sollte eine als positiv bekannte Kontrollprobe mitgef hrt werden um die Leistung aller verwendeten Reagenzien zu bestatigen Wenn das positive Kontrollgewebe keine F rbung aufweist muss die Markierung der Testproben f r ung ltig erkl rt werden Zum Ausschluss einer unspezifischen F rbung sollte ferner stets eine Negativkontrolle mitlaufen Ist die unspezifische F rbung nicht eindeutig von der spezifischen F rbung zu unterscheiden muss die Markierung der Testproben f r ung ltig erkl rt werden Auswertung der Ergebnisse Die Diaminobenzidin enthaltende Substrat Arbeitsl sung erzeugt am Ort des vom prim ren Antik rper erkannten Zielantigens ein braunes Endprodukt Die Braunf rbung muss am erwarteten Ort des Zielantigens auf der Positivkontrolle vorhanden sein Eine unspezifische F rbung stellt sich als eher diffuse Braunf rbung der mit der Nega
16. of EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 1 50 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned If Dako PT Link is used for pre treatment dilution can be performed by emptying the content of the Target Retrieval Solution 50x vial into the Dako PT Link tank and adding distilled or deionised water to the marked line Fill Line Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 Code K8007 Dilute a sufficient quantity of EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 20 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned Dilute by adding the concentrated Wash Buffer to a pre measured quantity of distilled or deionised water to minimize foaming Stir gently until the diluted solution appears homogenous Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 4 EnVision FLEX Substrate Working Solution The DAB containing EnVision FLEX Substrate Working Solution is prepared by mixing it thoroughly with 1 drop EnVision FL
17. von 3 4 mm in neutral gepuffertem Formalin 18 24 Stunden fixiert werden Die optimale Dicke paraffineingebetteter Schnitte betr gt etwa 4 um Die Proben sollten auf Objekttr ger zum Beispiel FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 aufgebracht werden Die Schnitte so flach und faltenfrei wie m glich auf den Objekttr gern aufbringen Zu viele Falten wirken sich negativ auf die F rbungsergebnisse aus HINWEIS Die Gr e der Objekttr ger muss zum Autostainer Link Ger t passen Angaben zu geeigneten Mikroskop Objekttr gern bitte dem Bedienungshandbuch des jeweiligen Dako Ger ts entnehmen 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 25 30 Paraffineingebettete Schnitte sollten aus einem vorgew rmten Wasserbad mit destilliertem oder entionisiertem Wasser heraus fixiert werden Dieses Wasserbad darf keine Zus tze enthalten wie z B Gelatine Poly L Lysin usw Die Schnitte werden bis zu 60 Minuten lang unter W rme getrocknet gew hnlich bei einer Temperatur von h chstens 60 C Damit die Schnitte gut auf den Objekttr gern haften muss vor dem Trockenprozess im Ofen alles Wasser unter den Schnitten entfernt worden sein Verfahren Um optimale F rbungsergebnisse zu erzielen arbeiten die Autostainer Link Ger te mit auf verschiedenen Prinzipien beruhenden Verfahren Bitte lesen Sie vor der Durchf hrung von F rbungen mit Ihrem Autostainer Link Ger t das Bedienerhandbuch des jeweiligen Dako Ger ts gr ndlich durch Um f r eine
18. 0 300 uL pro Test K8021 SM804 EnVision FLEX Mouse LINKER 40 mL gebrauchsfertig Gepufferte L sung mit Stabilisatorprotein und einer antimikrobiellen Substanz Ausreichend f r 130 200 Tests bei Verwendung von 200 300 uL pro Test 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 23 30 Vorsichtsma nahmen 9 Zur Anwendung durch Fachpersonal EnVisionTM FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER und EnVision FLEX Rabbit LINKER enthalten Material tierischen Ursprungs es kann nicht ausgeschlossen werden dass aufgrund der Herstellungsverfahren auch Spuren von Material menschlichen Ursprungs enthalten sind Wie alle Produkte biologischen Ursprungs muss auch dieses entsprechend gehandhabt werden EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Substrate Buffer EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrat Working Solution oder EnVision FLEX Hematoxylin wahrend des Verfahrens keinem starken Lichteinfall aussetzen F r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x und EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x steht auf Anfrage f r professionelle Benutzer ein Sicherheitsdatenblatt zur Verf gung F r EnVision FLEX Wash Buffer 20x steht auf Anfrage f r professionelle Benutzer ein Sicherheitsdatenblatt zur Verf gung F r EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent steht auf Anfrage f r professionelle Benutzer ein Sicherheitsdatenblatt zur Ver
19. 2 3 fold signal amplification and EnVision FLEX Mouse LINKER provides 4 5 fold signal amplification Dako EnVision FLEX HRP detection reagent SM802 in the kit consists of a dextran backbone to which a large number of peroxidase HRP molecules and secondary antibody molecules have been coupled A unique chemistry is used for the coupling reaction which permits the binding of up to 100 HRP molecules and up to 20 antibody molecules per backbone The substrate system in the kit consists of two components EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 a concentrated diaminobenzidine DAB solution and EnVision FLEX Substrate Buffer SM803 containing hydrogen peroxide Before use EnVision FLEX DAB Chromogen must be diluted in EnVision FLEX Substrate Buffer The substrate system produces a crisp brown end product at the site of the target antigen EnVision FLEX Hematoxylin Code K8008 is recommended for counterstaining The reagent provides a clear blue nuclear staining The stained tissue sections may be mounted with either aqueous or organic solvent based mounting medium 114818 004 K8000 EFG NAN 201 1 03 25 p 4 30 Reagents A Materials provided S M80 1 EnVision FLEX PEROXIDASE BLOCKING REAGENT EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 40 mL ready to use Phosphate buffer containing hydrogen peroxide 15 mmol L NaN and detergent SE EnVision FLEX HRP 3 x 40 mL ready to use Dextran coupled w
20. 4 x 1 L concentr 20x Solution saline de tampon Tris contenant du Tween 20 pH 7 6 0 1 B Mat riel requis mais non fourni Appareil Autostainer Link Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use si n cessaire Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies ou anticorps primaires de lapin ou de souris concentr s dilu s de fa on appropri e obtenus aupr s de Dako 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 13 30 Dako FLEX Ready to Use Rabbit ou Mouse Universal Negative Control ou r actif de contr le n gatif appropri pour l anticorps primaire Ustensiles pour l appareillage Dako Lames de microscope par ex les lames FLEX IHC Microscope Slides R actifs g n raux de laboratoire pour le d paraffinage des coupes de tissus incluses en paraffine Milieu de montage aqueux ou organique base de solvant et lamelles C Reactifs en option K8004 DM828 K8005 DM829 K8006 DM830 K8007 DM831 K8008 SM806 K8009 SM805 K8021 SM804 114818 004 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL concentr 50x Tampon Tris EDTA pH 9 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL concentr 50x Tampon citrate pH 6 1 EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL pr t l emploi Tampon Tris pH 7 2 NaN 15 mmol L et une prot ine wash BurrER 20X
21. 5 99 Incubate for 20 1 minutes at 95 99 5 Remove the entire jar with slides from the water bath Allow slides to cool in the EnVision FLEX Target Retrieval Solution for 20 1 minutes at room temperature 6 Decant the EnVision FLEX Target Retrieval Solution and rinse sections with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 7 Place the rack with rinsed sections on an Autostainer Link instrument Immediately begin the pre programmed staining run NOTE When used in Coplin jars HIER procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used only 1 time single use A few epitopes do not tolerate the HIER and some require enzymatic pre treatment Please refer to the package insert for the individual Dako primary antibody The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohisto chemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended B Staining procedure Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies can be used with Dako EnVision FLEX detection system applied on formalin fixed paraffin embedded tissue sections A dilution guideline for Dako concentrated primary antibodies is provided in the package insert of the concentrated primary antibody The concentrated primary antibodies should be diluted in EnVision FLEX Antibody Dilue
22. 5 p 8 30 Procedure Autostainer Link instruments use techniques based on different principles to obtain an optimal staining result Before running protocols on your Autostainer Link instrument please read carefully the Operator s Manual for the dedicated Dako instrument In order to ascertain reproducible epitope retrieval it is recommended always to load the slide holder fully with slides This ensures an identical heating of sections in every run A Pre treatment procedure Recommended 3 in 1 specimen preparation procedure using PT Link Deparaffinization rehydration and heat induced epitope retrieval HIER can be performed on formalin fixed paraffin embedded tissue sections using the 3 in 1 specimen preparation procedure 1 Prepare a working solution by diluting the EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentrate 1 50 in distilled or deionized water 2 Fill PT Link tanks with sufficient quantity 1 5 L of working solution to cover the tissue sections Set PT Link to pre heat the solution to 65 4 Immerse the mounted formalin fixed paraffin embedded tissue sections into the pre heated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution in PT Link tanks and incubate for 20 minutes at 97 5 Leave the sections to cool in PT Link to 65 6 Remove each Autostainer slide rack with the slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 wi
23. EX DAB Chromogen DM827 per 1 mL EnVision FLEX Substrate Buffer SM803 Use EnVision FLEX Substrate Working Solution within 5 days store in the dark at 2 8 C Specimen Collection and Preparation The specimens should be formalin fixed paraffin embedded tissue sections Fixation time is dependent on fixative and tissue type thickness For example tissue blocks with a thickness of 3 4 mm should be fixed in neutral buffered formalin for 18 24 hours The optimal thickness of paraffin embedded sections is approximately 4 um The specimens should be mounted on microscope slides e g FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 The sections should be mounted on the slides as flat and wrinkle free as possible Too many wrinkles will have an impact on the staining results NOTE The microscope slides must have a width suitable for the Autostainer Link instrument Please refer to the Operator s Manual for the individual Dako instrument for definition of usable microscope slides Paraffin sections should be mounted from a pre heated water bath containing distilled or deionized water The water bath should contain no additives such as gelatin poly L lysine etc Sections should be dried by heating generally at a temperature not above 60 C for up to 60 minutes To ensure proper adherence of sections to slides it is important to drain the water from beneath the sections prior to the oven drying process 114818 004 K8000 EFG NAN 201 1 03 2
24. EnVision FLEX HRP et EnVision M FLEX Substrate Buffer dans l obscurit entre 2 et 8 C Conserver le produit EnVision FLEX Hematoxylin r f K8008 dans l obscurite temp rature ambiante Ne pas utiliser apres la date de p remption imprim e sur les flacons Si les r amp actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur La solution de travail du substrat pr par e doit tre conserv e dans l obscurit entre 2 et 8 C et utilis e dans les 5 jours suivant sa pr paration En cas de coloration inattendue ne pouvant tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et de suspicion d un probleme avec le produit contacter le service technique de Dako Pr paration des r actifs A 1 EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 r f K8004 Diluer une quantit suffisante de EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x au 1 50 me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue Si l appareil Dako PT Link est utilis pour effectuer un pr traitement la dilution peut tre r alis e en vidant le contenu du flacon de solution de d masquage des cibles 50x dans la cuve du Dako PT Link et en ajoutant de l eau distill e ou d ionis e jusqu au trait indiqu ligne de remplissage La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pe ndant un m
25. EnVision FLEX High pH Link Code K8000 4th edition 4 me dition 4 Ausgabe O CE The kit contains reagents sufficient for 400 600 tests For Autostainer Link instruments Les r actifs contenus dans ce kit permettent d effectuer 400 600 tests Pour les appareils Autostainer Link Die in diesem Kit enthaltenen Reagenzien sind ausreichend f r 400 600 Tests F r Autostainer Link Ger te Optional reagents R actifs en option Optionale Reagenzien Code K8004 K8005 K8006 K8007 K8008 K8009 K8021 Product name Nom du produit Produktname EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x EnVisionTM FLEX Antibody Diluent EnVision FLEX Wash Buffer 20x EnVision FLEX Hematoxylin Link EnVision FLEX Rabbit LINKER Link EnVision FLEX Mouse LINKER Link Other options Autres options Weitere Optionen K8020 114818 004 FLEX IHC Microscope Slides Tests 200 430 200 430 400 600 400 600 130 200 130 200 500 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 1 30 Contents Table des matieres Inhalt Page Page Seite ENGLISH Intended EE 4 Summary and ExplanatiON o rates aaa ti ies 4 Reagents A haine ak EEE ee ee sia Adee 5 A M terials provided 2 222 2 an nr LEBE 5 B Materials required but not Drovided nnne nene 5 C Optionalireagents ers 6 PRECAUTIONS 255 eas AAA 7 ele le iii An 7 Reagent Preparati
26. Please also see Procedure section for 3 in 1 specimen preparation Code K8000 includes EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Alternatively EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8004 or EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 is recommended Some primary antibodies require enzymatic pre treatment of tissue for optimal staining instead of HIER Endogenous peroxidase should be blocked with EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent SM801 included in the kit Due to an effective washing procedure and the presence of stabilizing proteins in the Dako reagents extra blocking steps to reduce non specific background staining are unnecessary EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 included in the kit or available as optional reagent Code K8007 is recommended Primary antibodies are not provided with the kit We recommend the use of Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies or Dako concentrated Primary Antibodies EnVision FLEX Antibody Diluent Code K8006 is recommended for the dilution of Dako concentrated Primary Antibodies EnVision FLEX Rabbit LINKER Code K8009 may be applied for an optional signal amplification of rabbit primary antibodies For signal amplification when using mouse primary antibodies EnVision FLEX Mouse LINKER Code K8021 or included in Code K8002 may be applied As a guideline EnVision FLEX Rabbit LINKER provides
27. Vermeiden von Verdunstung die Schalen mit Deckeln abdecken Die auf Raumtemperatur gebrachten Gewebeschnitte in die vorgew rmte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung in den F rbeschalen eintauchen Die Temperatur von Wasserbad und EnVision FLEX Target Solution wieder auf 95 99 bringen Bei 95 99 20 1 Minuten inkubieren Die Schale mit den Objekttr gern aus dem Wasserbad nehmen Die Objekttr ger in der EnVision M FLEX Target Retrieval Solution bei Raumtemperatur 20 1 Minuten abk hlen lassen Die EnVision FLEX Target Retrieval Solution ausgie en und die Schnitte mit verd nntem EnVisionTM FLEX Wash Buffer 20x bei Raumtemperatur 1 5 Minuten sp len Das Gestell mit den gesp lten Schnitten in ein Autostainer Link Ger t einsetzen Sofort mit dem vorprogrammierten F rbedurchlauf beginnen HINWEIS Bei Verwendung von Coplin Schalen f r das HIER Verfahren k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer nur ein Mal verwendet werden Einmalgebrauch 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 27 30 Einige Epitope vertragen das HIER Verfahren nicht und andere erfordern enzymatische Vorbehandlung Angaben bitte der Packungsbeilage des jeweiligen prim ren Antik rpers von Dako entnehmen Die Gewebeschnitte d rfen weder w hrend der Behandlung noch w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbevorgangs austrocknen F r eine bessere Haftung der Gewebeschnitte
28. a une lumi re intense pendant la proc dure Une fiche technique de s curit destin e aux utilisateurs professionnels est disponible sur demande pour les produits EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x et EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Une fiche technique de s curit destin e aux utilisateurs professionnels est disponible sur demande pour le produit EnVision FLEX Wash Buffer 20x Une fiche technique de s curit destin e aux utilisateurs professionnels est disponible sur demande pour le produit EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX DAB Chromogen contient 1 5 de t trahydrochlorure de 3 3 diaminobenzidine et est d sign comme Nocif R40 Effet canc rog ne suspect preuves insuffisantes R43 Peut entrainer une sensibilisation par contact avec la peau R68 Possibilit d effets irr versibles S35 Ne se d barrasser de ce produit et de son emballage qu en prenant toutes les pr cautions d usage S36 37 Porter un v tement de protection et des gants appropri s En r gle g n rale il n est pas permis aux personnes g es de moins de 18 ans de manipuler ce produit Les utilisateurs doivent tre inform s des proc dures de travail ad quates des propri t s dangereuses du produit et des instructions de s curit n cessaires conform ment a la directive europ enne n 94 33 CE Veuillez vous reporter la fiche technique de
29. ebenen Demaskierungsmethode unterzogen werden Bitte lesen Sie dazu auch 3 in 1 Probenvorbereitung im Abschnitt Verfahren Code Nr K8000 enth lt EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Alternativ kann EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8004 oder EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 eingesetzt werden Bei einigen prim ren Antik rpern sind die F rbeergebnisse besser wenn anstelle des HIER Verfahrens eine Gewebevorbehandlung mit Enzymen vorgenommen wird Endogene Peroxidase sollte mit dem im Kit enthaltenen EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent SM801 blockiert werden Das wirkungsvolle Waschverfahren und die in den Dako Reagenzien vorhandenen Stabilisierungsproteine machen weitere Blockierungsschritte zur Verminderung einer unspezifischen Hintergrundf rbung berfl ssig Empfohlen wird der EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 der im Kit enthalten oder auf Wunsch auch als optionales Reagenz einzeln Code Nr K8007 erh ltlich ist Prim re Antik rper geh ren nicht zum Lieferumfang Wir empfehlen Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies bzw Dako Concentrated Primary Antibodies Zur Verd nnung von Dako Concentrated Primary Antibodies wird EnVision FLEX Antibody Diluent Code Nr K8006 empfohlen EnVisionTM FLEX Rabbit LINKER Code Nr K8009 kann wahlweise zur Verst rkung des Signals von prim ren Kaninchen Antik rpern ei
30. f gung EnVisionTM FLEX DAB Chromogen enth lt 1 5 3 3 Diaminobenzidin Tetrahydrochlorid und ist wie folgt gekennzeichnet Gesundheitssch dlich R40 Krebserregende Wirkung nicht auszuschlie en R43 Sensibilisierung durch Kontakt mit der Haut m glich R68 Irreversible Sch den m glich S35 Abf lle und Beh lter m ssen auf sichere Weise entsorgt werden S36 37 Bei der Arbeit geeignete Schutzhandschuhe und Schutzkleidung tragen Personen unter 18 Jahren d rfen mit diesem Produkt grunds tzlich nicht arbeiten Alle Anwender m ssen sorgf ltig in das richtige Arbeitsverfahren die gef hrlichen Eigenschaften des Produkts und die notwendigen Sicherheitsma nahmen eingewiesen werden gem EU Richtlinie 94 33 EG Weitere Informationen bitte dem Material Sicherheitsdatenblatt MSDS entnehmen USA 3 3 Diaminobenzidin DAB kann bei Einatmen Hautkontakt und Verschlucken gesundheitssch dlich sein Reizt Augen und Haut Bei Hautkontakt betroffenen Bereich mit Seife und Wasser behandeln HINWEIS Zwischen Diaminobenzidin und Benzidin besteht zwar eine strukturelle hnlichkeit dennoch ist eine krebserregende Wirkung von Diaminobenzidin nicht erwiesen Entsprechend rtlichen und staatlichen Richtlinien entsorgen EnVision FLEX Antibody Diluent Code Nr K8006 enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Ansammlungen von Natriumazid k nnen auch in Konzentrationen die nicht als gef hrlich
31. fine est d environ 4 um Les chantillons doivent tre mont s sur des lames de microscope par ex les lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 Les coupes doivent tre mont es sur les lames aussi plates que possible et avec le moins de plis possible Trop de plis aurait un impact sur les r sultats de la coloration REMARQUE les lames de microscope doivent poss der une largeur adapt e a l appareil Autostainer Link Veuillez vous reporter au manuel de l op rateur de chaque appareil Dako pour la d finition des lames de microscope utilisables Les coupes en paraffine doivent tre mont es depuis le bain pr chauff contenant de l eau distill e ou d ionis e Le bain marie ne doit contenir aucun additif tel que de la g latine de la poly L lysine etc Les coupes doivent tre s ch es en les chauffant en g n ral une temp rature ne d passant pas 60 C pendant 60 minutes maximum Pour garantir une bonne adh rence des coupes aux lames il est important d goutter l eau se trouvant sous les coupes avant de passer la proc dure de s chage dans une tuve Proc dure Les appareils Autostainer Link utilisent des techniques bas es sur diff rents principes afin d obtenir un r sultat de coloration optimal Avant d ex cuter des protocoles sur les appareils Autostainer Link veuillez lire attentivement le Manuel de l op rateur sp cifique l appareil Dako utilis Pour assurer un d masquage des pitopes re
32. ganic solvent based and coverslips 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 5 30 C Optional reagents K8004 DM828 K8005 DM829 K8006 DM830 K8007 DM831 K8008 SM806 K8009 SM805 K8021 SM804 114818 004 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50x concentrated Tris EDTA buffer pH 9 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL 50x concentrated Citrate buffer pH 6 1 EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL ready to use Tris buffer pH 7 2 containing 15 mmol L NaN and protein wash surrer 20X EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 L 20x concentrated Tris buffered saline solution containing Tween 20 pH 7 6 0 1 EnVision FLEX EnVision FLEX Hematoxylin 3 x 45 mL ready to use Aqueous solution of hematoxylin EnVision FLEX Rabbit LINKER 40 mL ready to use Buffered solution containing stabilizing protein and an antimicrobial agent Contains reagent sufficient for 130 200 tests based on the use of 200 300 uL per test EnVision FLEX Mouse LINKER 40 mL ready to use Buffered solution containing stabilizing protein and an antimicrobial agent Contains reagent sufficient for 130 200 tests based on the use of 200 300 uL per test K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 6 30 Precautions 1 For professional user
33. id r comme non valide Un r actif de contr le n gatif doit tre utilis avec chaque chantillon afin d identifier toute coloration non sp cifique Si une coloration non sp cifique ne peut pas tre clairement diff renci e de la coloration sp cifique le marquage de l chantillon analyser doit tre consid r comme non valide Interpr tation des r sultats La solution de travail du substrat contenant de la diaminobenzidine produit une coloration brune sur le site de l antig ne cible reconnu par l anticorps primaire La couleur brune doit tre pr sente sur l chantillon de contr le positif l o l antig ne cible est attendu Si une coloration non sp cifique est 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 19 30 pr sente ceci sera identifi comme une coloration brune diffuse sur les lames trait es avec le r actif de contr le n gatif Les noyaux seront color s en bleu par le contre colorant h matoxyline Limites 1 Pour une utilisation automatis e sur les appareils Autostainer Link uniquement Lors de la r alisation de colorations manuelles la proc dure optimale doit tre d termin e et v rifi e par Putilisateur moins qu elle soit sp cifi e dans la notice de l anticorps primaire sp cifique de Dako 2 R serv une utilisation sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine uniquement Lors de l utilisation de coupes congel es ou de frottis cellulaires la proc dure
34. ith peroxidase molecules and goat secondary antibody molecules against rabbit and mouse immunoglobulins In buffered solution containing stabilizing protein and preservative DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 3x3 mL 3 3 diaminobenzidine tetrahydrochloride in organic solvent The color of this reagent may vary from strong violet to colorless without having any influence on the performance of the kit SM803 EnVision FLEX Substrate Buffer 12x20 mL Buffered solution containing hydrogen peroxide and preservative DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 9 x 30 mL 50x concentrated Tris EDTA buffer pH 9 DM831 EnVision FLEX DO x WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x 4 x 1 L 20x concentrated Tris buffered saline solution containing Tween 20 pH 7 6 0 1 B Materials required but not provided Autostainer Link instrument Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use if necessary Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies or suitably diluted concentrated primary rabbit or mouse antibodies from Dako Dako FLEX Ready to Use Rabbit or Mouse Universal Negative Control or suitable negative control reagent for the primary antibody Dako instrumentation utensils Microscope slides e g FLEX IHC Microscope Slides General laboratory reagents for deparaffinization of paraffin embedded tissue sections Mounting medium aqueous or or
35. mand e pour la contre coloration Le r actif provoque une coloration nucl aire bleu clair Les coupes de tissus color es peuvent tre mont es soit avec un milieu de montage aqueux soit avec un milieu de montage organique base de solvant Reactifs A Materiel fourni SM801 EnVision FLEX PEROXIDASE BLOCKING REAGENT EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 40 mL pr t l emploi Tampon phosphate contenant du peroxyde d hydrog ne NaN 15 mmol L et un d tergent SE EnVision FLEX HRP 3 x 40 mL pr t l emploi Dextrane coupl des mol cules de peroxydase et des mol cules d anticorps secondaires de ch vre dirig s contre les immunoglobulines de souris et de lapin Dans une solution tamponn e contenant une prot ine stabilisante et un agent conservateur DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 3x3mL Tetrahydrochlorure de 3 3 diaminobenzidine dans un solvant organique La couleur de ce r actif peut varier de violet fonc incolore sans que cela ait une quelconque influence sur les performances du kit SM803 EnVision FLEX Substrate Buffer 12x20 mL Solution tamponn e contenant du peroxyde d hydrog ne et un agent conservateur DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 9 x 30 mL concentr 50x Tampon Tris EDTA pH 9 DM831 EnVision FLEX DO WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x
36. n PT Link Tanks geben und 20 Minuten bei 97 inkubieren Die Schnitte im PT Link auf 65 abk hlen lasse n Die Gestelle aus dem PT Link Tank nehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter Tank z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Raumtemperatur gebrachtem Dako Wash Buffer 20x tauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im verd nnten und auf Raumtemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 20x belassen Objekttr ger in ein Autostainer Link Ger t einsetzen und mit der F rbung fortfahren Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Fixiermittel fixieren HINWEIS Bei Verwendung im PT Link f r das HIER Verfahren k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer 3 Mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert werden HIER Arbeitsverfahren mit Coplin K vetten Nach der Entparaffinierung und Rehydrierung mit Puffer Wasser ist bei den meisten Gewebeschnitten eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER erforderlich 1 Die F rbeschalen mit verd nnter EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x in ein Wasserbad stellen Die Schalen mit der EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung im Wasserbad auf 95 99 erw rmen Zur Temperaturstabilisierung und zum
37. n ajoutant le tampon de lavage concentr une quantit pr mesur e d eau distill e ou d ionis e afin de minimiser la formation de mousse M langer doucement jusqu ce que la solution dilu e apparaisse homog ne La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pendant un mois Jeter la solution si elle semble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e temp rature ambiante AA EnVision FLEX Substrate Working Solution La solution de travail du substrat EnVision FLEX Substrate Working Solution contenant de la DAB est pr par e en m langeant vigoureusement 1 goutte de EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 par 1 mL de EnVision FLEX Substrate Buffer SM803 Utiliser la EnVision FLEX Substrate Working Solution dans les 5 jours conserver dans l obscurit entre 2 et 8 C 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 16 30 Prelevement et pr paration des chantillons Les chantillons doivent tre des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine Le temps de fixation d pend du fixateur et du type de l paisseur du tissu Par exemple les blocs de tissu d une paisseur de 3 4 mm doivent tre fix s au formol neutre tamponn pendant 18 a 24 heures L paisseur optimale des coupes incluses en paraf
38. ngesetzt werden Bei der Verwendung von prim ren Maus Antik rpern kann zur Verst rkung des Signals EnVision FLEX Mouse LINKER Code Nr K8021 oder in Code Nr K8002 enthalten eingesetzt werden Als Richtwert EnVision FLEX Rabbit LINKER liefert zwei bis dreifache Signalverst rkung EnVision FLEX Mouse LINKER vier bis f nffache Signalverst rkung Dako EnVision FLEX HRP Detection Reagent SM802 im Kit besteht aus einem Dextran Backbone an das zahlreiche Peroxidase HRP Molek le und Molek le sekund rer Antik rper gekoppelt sind Die Kopplungsreaktion besteht aus einer einzigartigen chemischen Reaktion die es erm glicht pro Backbone bis zu 100 HRP Molek le und bis zu 20 Antik rper Molek le zu binden Das Substratsystem im Kit besteht aus zwei Komponenten EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 einer konzentrierten Diaminobenzidinl sung DAB L sung und dem wasserstoffperoxidhaltigen EnVision FLEX Substrate Buffer SM803 Vor der Anwendung muss EnVision FLEX DAB Chromogen mit EnVision FLEX Substrate Buffer verd nnt werden Das Substratsystem f hrt zu einem kontrastreichen braunen Endprodukt am Ort des Zielantigens Zur Gegenf rbung wird EnVision FLEX Hematoxylin Code Nr K8008 empfohlen Dieses Reagenz ruft eine deutliche Blauf rbung der Zellkerne hervor 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 21 30 F r die Fixierung der gef rbten Gewebeschnitte eignen sich sowohl Fixiermittel auf w
39. nsulter aussi la section Proc dure La r f rence K8000 inclut la solution EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Il est galement possible d utiliser les solutions EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x r f K8004 ou EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x r f K8005 Certains anticorps primaires n cessitent un pr traitement enzymatique du tissu pour une coloration optimale au lieu d une proc dure HIER La peroxydase endog ne doit tre bloqu e l aide du r actif EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent SM801 inclus dans le kit En raison d une proc dure de lavage efficace et de la pr sence de prot ines stabilisantes dans les r actifs Dako des tapes de blocage suppl mentaires ne sont pas n cessaires pour r duire la coloration de fond non sp cifique Il est recommand d utiliser le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 inclus dans le kit ou disponible comme r actif en option r f K8007 Les anticorps primaires ne sont pas fournis dans le kit L utilisation des anticorps primaires pr t a l emploi Dako FLEX ou des anticorps primaires concentr s Dako est recommand e Le diluant EnVisionTM FLEX Antibody Diluent r f K8006 est recommand pour la dilution des anticorps primaires concentr s Dako Le produit EnVisionTM FLEX Rabbit LINKER r f K8009 peut tre appliqu pour obtenir une amplification du signal des anticorp
40. nt DM830 Code K8006 The staining steps and recommended incubation times are pre programmed into the Autostainer Link software as the following visualization system protocols FLEX and FLEX 2x5 DAB FLEX protocols FLEX Mouse and FLEX Mouse 2x5 DAB FLEX Mouse LINKER protocols FLEX Rabbit and FLEX Rabbit 2x5 DAB FLEX Rabbit LINKER protocols The recommended reagent application volume is 1 x 200 uL or 2 x 150 uL per slide If the protocols are not available on the used Autostainer Link instrument please contact Dako Technical Services Optimal incubation times of primary antibody and EnVision FLEX HRP are dependent on the applied primary antibody Please refer to the package insert for the individual Dako primary antibody The user must verify the applied protocol When the staining procedure is completed the specimens must be mounted It is recommended to perform dehydration clearing and permanent mounting when slides have been treated with the 3 in 1 specimen preparation procedure Slides treated with HIER procedure can be mounted using aqueous or permanent mounting medium For aqueous mounting mounting media such as Dako Glycergel 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 10 30 Mounting Medium Code C0563 or Faramount Aqueous Mounting Medium Code S3025 is recommended Quality Control Each staining run should include a known positive control specimen to ascertain a proper performance of all the applied reagents
41. ois Jeter la solution si elle semble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e temp rature ambiante A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 r f K8005 Diluer une quantit suffisante de EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x au 1 50 me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue Si l appareil Dako PT Link est utilis pour effectuer un pr traitement la dilution peut tre r alis e en vidant le contenu du flacon de solution de d masquage des cibles 50x dans la cuve du Dako PT Link et en ajoutant de l eau distill e ou d ionis e jusqu au trait indiqu ligne de remplissage La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pe ndant un mois Jeter la solution si elle semble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e temp rature ambiante A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 r f K8007 Diluer une quantit suffisante de EnVision FLEX Wash Buffer 20x au 1 20 me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue Diluer e
42. on cito ii hin 8 Specimen Collection and Preparation cane nn nn nnnnaninnaness 8 POCO recorra aaa laa 9 A gt Pre treatment procedure x dre sense rn ini 9 B Stalning ProCe TEE 10 Quality COO A A nn ee ee e 11 Interpretation of Results cionado a 11 E EE 11 Explanation of symbols u 20er einen bebe de 30 FRANCAIS Utilisation pr vue rite fenetre A ad ee In eee 12 R sum et explication iia todas 12 REAGU Saieta E AA E 13 A Materiel TOUR 13 B Mat riel requis Mais non fourni 13 CG Reactifs en Optica li sa 14 Leide Le Sic nik 15 CONSOIV e 16 le ele Ree 16 Pr l vement et pr paration des chantillons cnn nn nonnann nro 17 PKOCE GUNG isoialtico a A ias 17 A Proc dure de pr traitement cnn eiden avariata 17 B Proc dure de coloration Hear 19 Gontr le qualit ira aa aida 19 Interpretation des r sultats nianse tnn AA ea la 19 LIM nes da div eee ada ds cde dant ho dhe edad 20 Explication des symboles sis 30 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 2 30 DEUTSCH Ve le 21 Zusammenfassung und Erkl rung 21 Reagenzien rar an ri Rent MONE S 22 A Mitgelieferte Materialien ss 22 B Erforderliches aber nicht mitgeliefertes Material 22 G Optional Re genzien sise rte nr HR ei 23 Vorsichtsma nahmen E 24 LAU usa e A A A 24 Reagenzvorbereitung nen 25 Entnahme und Vorbereitung der Probe ss 25 Verfahren it en ee AR Ta ge EEN ee ee vg 26 A Arbeitsablauf
43. optimale doit tre d termin e et v rifi e par l utilisateur moins qu elle soit sp cifi e dans la notice de l anticorps primaire sp cifique de Dako Des modifications apport es la proc dure peuvent avoir une influence sur le nombre de tests que le kit permet d effectuer 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 20 30 DEUTSCH Verwendungszweck Zur In vitro Diagnostik Das Dako EnVision FLEX Nachweissystem ist f r immunhistochemische Verfahren mit Autostainer Link Ger ten bestimmt Das System weist prim re Maus und Kaninchen Antik rper nach und stellt die Reaktion mittels EnVision FLEX DAB Chromogen dar Durch Verwendung von EnVision FLEX Rabbit LINKER Code Nr K8009 bzw EnVision FLEX Mouse LINKER Code Nr 8021 k nnen die Signale der prim ren Maus bzw Kaninchenantik rper verst rkt werden Die EnVision FLEX Reagenzien sind zur Verwendung auf formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten vorgesehen Zusammenfassung und Erkl rung Das Dako EnVision FLEX Nachweissystem wurde als flexibles System konzipiert das bei Verwendung des in dieser Packungsbeilage angegebenen Protokolls optimale F rbeergebnisse auf Autostainer Link Ger ten liefert Vor der F rbung m ssen die formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte einer Entparaffinierung und Rehydrierung gefolgt von hitzeinduzierter Epitopdemaskierung HIER mit der in der Packungsbeilage des prim ren Antik rpers angeg
44. productible il est recommand de toujours remplir compl tement le portoir lames Ceci assure un chauffage identique des coupes lors de chaque cycle A Proc dure de pr traitement Proc dure 3 en 1 recommand e pour la pr paration des chantillons l aide du PT Link Le d paraffinage la r hydratation et le d masquage d pitope induit par la chaleur HIER peuvent tre r alis s sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine en utilisant la proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 1 Pr parer une solution de travail en diluant la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentr e au 1 50 me dans de l eau distill e ou d ionis e 2 Remplir les cuves du PT Link avec une quantit de solution de travail suffisante 1 5 litres pour recouvrir les coupes de tissus 3 Regler le PT Link afin de prechauffer la solution 65 4 Immerger les coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine mont es dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e contenue dans les cuves du PT Link et incuber 97 pendant 20 minutes 5 Laisser les coupes refroidir dans le PT Link jusqu 65 6 Retirer chaque portoir lames Autostainer contenant les lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex PT Link Rinse Station
45. reproduzierbare Epitopdemaskierung zu sorgen wird empfohlen den Objekttr gerhalter immer voll zu beladen Dadurch wird eine gleichm ige Erhitzung der Schnitte in jedem Durchlauf erreicht A Arbeitsablauf der Vorbehandlung Empfohlenes Verfahren zur 3 in 1 Probenvorbereitung mit PT Link Entparaffierung Rehydration und hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER k nnen mit formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten nach dem 3 in 1 Verfahren durchgef hrt werden 1 Eine Arbeitsl sung durch Verd nnen der konzentrierten EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 herstellen 2 Tanks des PT Link mit einer ausreichenden Menge Arbeitsl sung 1 5 L f llen um die Gewebeschnitte zu bedecken 3 PT Link auf Erw rmen der L sung auf 65 einste llen 4 Tauchen Sie die auf Objekttr ger aufgebrachten fomalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte in die vorerhitzte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung in den PT Link Tanks und lassen Sie diese 20 min bei 97 darin inkubieren 5 Die Schnitte im PT Link auf 65 abk hlen lasse n 6 Die Autostainer Gestelle mit den Objekttr gern aus dem PT Link Tank nehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter Tank z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Raumtemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 20x tauchen 7 Die Objekttr ger f r 1 5
46. s 2 EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER and EnVision FLEX Rabbit LINKER contain material of animal origin and it cannot be excluded that trace amounts of human material could be present due to manufacturing procedures As with any product derived from biological sources proper handling should be used 3 Do not expose EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Substrate Buffer EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrate Working Solution or EnVision FLEX Hematoxylin to strong light during the procedure 4 For EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x and EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x a safety data sheet is available for professional users on request 5 For EnVision FLEX Wash Buffer 20x a safety data sheet is available for professional users on request 6 For EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent a safety data sheet is available for professional users on request 7 EnVision M FLEX DAB Chromogen contains 1 5 3 3 diaminobenzidine tetrahydrochloride and is labeled Harmful R40 Limited evidence of a carcinogenic effect R43 May cause sensitisation by skin contact R68 Possible risk of irreversible effects S35 This material and its container must be disposed of in a safe way S36 37 Wear suitable protective clothing and gloves As a general rule persons under 18 years of age are no
47. s curit MSDS pour plus d informations tats Unis le 3 3 diaminobenzidine DAB peut tre nocif par inhalation par contact avec la peau et par ingestion Cette substance est irritante pour les yeux et la peau En cas de contact avec la peau rincer la zone concern e au savon et l eau REMARQUE bien que la diaminobenzidine soit structurellement li e la benzidine il n existe aucune preuve de la canc rog nicit de la diaminobenzidine Se reporter aux r glementations locales et nationales pour l limination Le produit EnVision FLEX Antibody Diluent r f K8006 contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 15 30 Conservation Conserver les r actifs EnVision FLEX et EnVision FLEX entre 2 et 8 C Conserver les produits EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent
48. s primaires de lapin en option Le produit EnVision FLEX Mouse LINKER r f K8021 ou inclus dans la r f rence K8002 peut tre appliqu pour obtenir une amplification du signal lorsque des anticorps primaires de souris sont utilis s De mani re g n rale le produit EnVision FLEX Rabbit LINKER fournit une amplification du signal de 2 3 fois et le produit EnVision FLEX Mouse LINKER fournit une amplification du signal de 4 5 fois Le r actif de d tection Dako EnVisionTM FLEX HRP SM802 du kit se compose d une cha ne de dextrane sur laquelle un grand nombre de mol cules de peroxydase HRP et de mol cules d anticorps secondaire ont t coupl es Une seule r action chimique est utilis e pour la r action de couplage ce qui permet la liaison de 100 mol cules de HRP maximum et de 20 mol cules d anticorps maximum par cha ne Le syst me du substrat contenu dans le kit est form de deux composants le produit EnVisionTM FLEX DAB Chromogen DM827 une solution de diaminobenzidine DAB concentr e et le tampon EnVision M FLEX Substrate Buffer SM803 contenant du peroxyde d hydrog ne Avant emploi le EnVision FLEX DAB Chromogen doit tre dilu dans le tampon substrat EnVision FLEX Substrate Buffer Le syst me du substrat forme un produit brun vif sur le site de l antig ne cible 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 12 30 L h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin r f K8008 est recom
49. sreichende Menge EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x mit destilliertem oder entionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 verd nnen Wenn Dako PT Link zur Vorbehandlung genutzt wird kann die Verd nnung durch berf hren des Inhalts des Fl schchens Target Retrieval Solution 50x in den Dako PT Link Tank und Hinzuf gen von destilliertem oder deionisiertem Wasser bis zur Markierung Fill Line erfolgen Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert wird A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 Code Nr K8005 Eine f r das geplante F rbeverfahren ausreichende Menge EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x mit destilliertem oder entionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 verd nnen Wenn Dako PT Link zur Vorbehandlung genutzt wird kann die Verd nnung durch berf hren des Inhalts des Fl schchens Target Retrieval Solution 50x in den Dako PT Link Tank und Hinzuf gen von destilliertem oder deionisiertem Wasser bis zur Markierung Fill Line erfolgen Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal
50. ssriger Basis als auch auf Basis organischer L sungsmittel Reagenzien A Mitgelieferte Materialien SM801 PEROXIDASE BLOCKING EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 40 mL gebrauchsfertig Wasserstoffperoxidhaltiger Phosphatpuffer 15 mmol L NaN3 und Detergenz M EnVision FLEX HRP 3 x 40 mL gebrauchsfertig Mit Peroxidasemolek len und sekund ren Ziegenantik rpermolek len gegen Kaninchen und Maus Immunglobuline gekoppeltes Dextran In gepufferter L sung mit Stabilisatorprotein und Konservierungsmittel DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 3x3mL 3 3 Diaminobenzidin Tetrahydrochlorid in organischem L sungsmittel Farbschwankungen bei diesem Reagenz kr ftig violett bis farblos haben keinerlei Einfluss auf die Leistung des Kits sm80s EnVision FLEX Substrate Buffer 12x20 mL Gepufferte L sung mit Wasserstoffperoxid und Konservierungsmittel DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 9 x 30 mL 50fach konzentriert Tris EDTA Puffer pH 9 DM831 Envision FLEX DO X WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x 4 x 1 L 20fach konzentriert Tris gepufferte Kochsalzl sung mit Tween 20 pH 7 6 0 1 B Erforderliches aber nicht mitgeliefertes Material Autostainer Link Ger t Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use falls erforderlich Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies oder entsprechend verd nnte
51. t allowed to work with this product Users must be carefully instructed in the proper work procedure the dangerous properties of the product and the necessary safety instructions per European Union Directive 94 33 EC Please refer to the Material Safety Sheet MSDS for additional information USA 3 3 diaminobenzidine DAB may be harmful by inhalation in contact with skin and if swallowed Material is irritating to eyes and skin If skin contact should occur rinse affected area with soap and water NOTE Although diaminobenzidine is structurally related to benzidine there is no evidence for the carcinogenicity of diaminobenzidine Consult Federal State or local regulations for disposal 8 EnvVision FLEX Antibody Diluent Code K8006 contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 9 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 10 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store EnVision FLEX and EnVision FLEX reagents at 2 8 C Store EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX HRP and EnVisionTM FLEX Substrate Buffer in the dark at 2 8
52. tely dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x 8 Leave slides in the diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 9 Place slides on an Autostainer Link instrument and proceed with staining The sections should not dry out during the treatment or during the immunohistochemical staining procedure OL ED D 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 9 30 10 After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium NOTE When used in PT Link for HIER procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature HIER procedure using Coplin jars After deparaffinization and hydration to buffer water the tissue sections should be subjected to heat induced epitope retrieval HIER 1 Place staining jars containing diluted EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x in water bath 2 Heat water bath and jars filled with EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution to 95 99 Cover jars with lids to stabilize the temperature and avoid evaporation 3 Immerse the room temperature sections in the preheated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution in the staining jars 4 Bring temperature of the water bath and EnVision FLEX Target Retrieval Solution back to 9
53. th diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x 7 Leave slides in the diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 8 Place slides on an Autostainer Link instrument and proceed with staining The sections should not dry out during the treatment or during the immunohistochemical staining procedure 9 After staining it is recommended to perform dehydration clearing and permanent mounting NOTE When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature Gei HIER procedure using PT Link After deparaffinization and hydration to buffer water the tissue sections should be subjected to heat induced epitope retrieval HIER 1 Prepare a working solution by diluting the EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentrate 1 50 in distilled or deionized water Fill PT Link tanks with sufficient quantity 1 5 L of working solution to cover the tissue sections Set PT Link to pre heat the solution to 65 Manually deparaffinize and rehydrate tissue sections mounted on glass slides Immerse room temperature tissue sections into the pre heated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution and incubate for 20 minutes at 97 Leave the sections to cool in PT Link to 65 7 Remove each slide rack from PT Link tank and immedia
54. tivkontrolle behandelten Objekttr ger dar Zellkerne werden durch die H matoxylin Gegenf rbung blau gef rbt 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 28 30 Einschr nkungen 1 Nur f r die automatisierte Benutzung in Autostainer Ger ten Falls das F rben manuell durchgef hrt wird muss der optimale Arbeitsablauf vom Benutzer ermittelt und festgelegt werden solange dieser nicht in der Packungsbeilage f r den spezifischen Dako Primary Antibody beschrieben ist 2 Nur zur Benutzung mit formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten Bei der Benutzung gefrorener Gewebeschnitte oder Zellabstriche muss der optimale Arbeitsablauf vom Benutzer ermittelt und festgelegt werden solange dieser nicht in der Packungsbeilage f r den spezifischen Dako Primary Antibody beschrieben ist Anderungen des Arbeitsablaufes k nnen Auswirkungen auf die Anzahl der im Kit mitgelieferten Tests haben 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 29 30 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole Catalogue number Temperature limitation Batch code Harmful Reference du catalogue X Limites de temp rature LOT Code du lot Nocif Bestellnummer Zul ssiger Temperaturbereich Chargenbezeichnung An Gesundheitssch dlich In vitro diagnostic medical device Store in the dark Use by IVD Dispositif medical de Conserver dans l obscurit e Utiliser avant laanosticlh vi f diag ost vitro Im Dunkeln aufbewahren Verwendbar bis
55. with the kit 114818 004 K8000 EFG NAN 2011 03 25 p 11 30 FRANCAIS Utilisation pr vue Pour utilisation en diagnostic in vitro Le syst me de d tection Dako EnVision FLEX est destin tre utilis en immunohistochimie avec les appareils Autostainer Link Le syst me d tecte les anticorps primaires de souris et de lapin et la r action est visualis e l aide de EnVision FLEX DAB Chromogen Utilis avec les produits EnVisionTM FLEX Rabbit LINKER r f K8009 ou EnVision FLEX Mouse LINKER r f K8021 une amplification du signal des anticorps primaires de lapin ou de souris respectivement peut tre obtenue Les r actifs EnVision FLEX sont destin s tre utilis s sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine R sum et explication Con u comme un dispositif flexible le syst me de d tection Dako EnVision FLEX permet d obtenir une coloration optimale sur les appareils Autostainer Link condition de respecter le protocole recommand dans la pr sente notice Avant de proc der la coloration les coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine doivent tre soumises un d paraffinage et une r hydratation puis une proc dure de d masquage d pitope induit par la chaleur HIER l aide de la m thode de restauration des cibles indiqu e dans la notice de l anticorps primaire Pour la proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 co
56. ycle de coloration pr programm REMARQUE lors d une proc dure HIER avec des cuves de Coplin n utiliser la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu qu une seule fois usage unique Certains pitopes ne tol rent pas la proc dure HIER et requi rent un pr traitement enzymatique Veuillez vous reporter la notice de chaque anticorps primaire Dako Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 B Proc dure de coloration Les anticorps Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies peuvent tre utilis s avec le syst me de d tection Dako EnVision FLEX appliqu sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine Une directive de dilution pour les anticorps primaires concentr s Dako est fournie dans la notice de l anticorps primaire concentr Les anticorps primaires concentr s doivent tre dilu s dans le diluant EnVision FLEX Antibody Diluent DM830 r f K8006 Les tapes de la coloration ainsi que les temps d incubation recommand s sont pr programm s dans le logiciel de l Autostainer Link sous les protocoles des syst mes de visualisation suivants FLEX et FLEX 2x5 DAB protocoles FLEX FLEX Mouse et FLEX Mouse 2x5
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