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Wellcolex Colour E. coli O157:H7 [FR]

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1. mulsionn e Eliminer le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es A l aide d un autre b tonnet mulsionner une quantit similaire d chantillon de culture dans la solution saline de l autre cercle Eliminer le b tonnet homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Pour chaque chantillon ajouter une goutte de latex test 0157 dans un cercle avec la culture mulsionn e et une goutte de latex t moin 0157 dans l autre cercle contenant la culture mulsionn e S assurer que les flacons compte gouttes sont tenus verticalement pour assurer la pr cision du volume distribu M langer le contenu de chaque cercle en talant soigneusement le latex sur toute la surface du cercle Jeter le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Faire doucement osciller la carte pendant 30 secondes et observer l apparition ventuelle d une agglutination La carte doit tre maintenue une distance de lecture normale des yeux 25 35 cm Ne pas utiliser de loupe Jeter la carte de r action utilis e selon les r gles de s curit appropri es 40 ul sol saline Emulsionner l chantillon Emulsionner l chantillon 1 goutte 30 secondes Les cultures positives avec le latex test 0157 doivent tre remises en culture une nuit 37 C sur une g lose au sang ou un bouillon Tryptone soya TSB et test es pour l an
2. Wellcolex E coli 0157 H7 FR R30959601 sus 50 Tests 1 DOMAINE D APPLICATION Wellcolex E coli 0157 H7 est un test rapide d agglutination au latex pour l identification pr somptive des isolats Escherichia coli 0157 H7 sur des milieux de culture en laboratoire Le test au latex Wellcolex E coli 0157 H7 a t classifi comme hautement complexe par le Clinical Laboratory Improvement Act CLIA88 code du syst me de test 40268 code de l analyte 1604 2 RESUME ET EXPLICATION DU TEST Les v rotoxines produites par E coli 0157 sont une cause importante de diarrh es de colites h morragiques et du syndrome ur mique h molytique La pathog nicit de cet organisme est due l expression de v rotoxines VT1 et ou VT2 45 Des ent rites dues d autres s rotypes ne sont pas exceptionnelles mais la diff rence de la majorit des isolats la plupart des E coli 0157 H7 ne fermentent pas le sorbitol propri t utilis e pour la diff renciation en laboratoire En particulier la g lose MacConkey contenant du sorbitol la place du lactose SMAC est souvent utilis e comme milieu primaire de d pistage D autres ent robact ries ne fermentant pas le sorbitol peuvent galement pousser sur SMAC L utilisation du r actif au latex 0157 sur les colonies suspectes permet de d terminer si l isolat appartient au s rogroupe 0157 Un r actif au latex H7 est fourni afin de d
3. Tenover F C and Yolken R H American Society for Microbiology Washington D C Pages 450 456 EMBALLAGE REF 7C61 R30959601 50 tests L gende des symboles R f rence de catalogue Dispositif m dical de diagnostic in vitro Consulter le mode d emploi Limite de temp rature temp rature de conservation Code de lot num ro de lot A utiliser avant date d expiration fabricant E aS E Bronidox est une marque d pos e de Cognis UK Ltd marque de commerce CE X7825 R vis Juin 2012 wl Pour tout support technique contacter le distributeur local Remel Europe Ltd Clipper Boulevard West Crossways Dartford Kent DA2 6PT Royaume Uni
4. e et une goutte de latex t moin H7 dans l autre cercle contenant la culture mulsionn e S assurer que les flacons compte gouttes sont tenus verticalement pour assurer la pr cision du volume distribu M langer le contenu de chaque cercle en talant soigneusement le latex sur toute la surface du cercle Jeter le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Faire doucement osciller la carte 30 secondes pendant 30 secondes et observer l apparition ventuelle d une agglutination La carte doit tre maintenue une distance de lecture normale des yeux 25 35 cm Ne pas utiliser de loupe Jeter la carte de r action utilis e selon les r gles de s curit appropri es Emulsionner l chantillon Etape 4 Emulsionner l chantillon Etape 6 Etape 7 Etape 8 Etape 9 Proc dure H7 Bouillon TSB Etape 1 Homog n iser les r actifs au latex H7 Etape 2 Pour chaque chantillon distribuer 40 il de 40 ul de culture en croissance sur bouillon bouillon TSB dans deux cercles d une carte de r action Etape 3 Pour chaque chantillon ajouter une 1 goutte goutte de latex test H7 dans un cercle avec le bouillon de culture et une goutte de latex t moin H7 dans l autre cercle contenant le bouillon de culture S assurer que les flacons compte gouttes sont tenus verticalement pour assurer la pr cision du volume distribu Etape 4 M langer le cont
5. b tonnet d homog n isation Eliminer le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Etape 4 Faire osciller la carte pendant 30 30 secondes secondes Apr s ce temps une agglutination nette doit tre visible avec les latex test Proc dure du t moin n gatif Etape 1 Distribuer une goutte de chaque latex 1 goutte test dans des cercles distincts d une carte de r action Etape 2 Ajouter une goutte de t moin n gatif 1 goutte c t de chaque latex test Etape 3 M langer l aide d un b tonnet d homog n isation Eliminer le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Etape 4 Faire osciller la carte pendant 30 30 secondes secondes Apr s ce temps Il ne doit pas y avoir d agglutination significative avec les latex test La performance des r actifs au latex test et t moin peut galement tre confirm e en utilisant des cultures r centes de la nuit pr c dente de souches bact riennes de r f rence selon la Proc dure du test d crite Les souches de r f rence appropri es sont les suivantes SOUCHES RESULTAT ATTENDU Latex test 0157 Latex t moin et H7 T moin positif E coli 0157 H7 ATCC 43895 T moin n gatif E coli 014 ATCC R S 19110 INTERPRETATION DES RESULTATS R sultats positifs Une agglutination du latex test 0157 accompagn e d une absence d agglut
6. compte gouttes bouchon rouge 1 flacon compte gouttes bouchon bleu 7 Cartes de r action 1 paquet jetables 8 B tonnets d homo 3 paquets g n isation jetables 9 Notice d utilisation 1 4 1 DESCRIPTION DES REACTIFS PREPARATION POUR UTILISATION ET CONDITIONS DE CONSERVATION RECOMMANDEES Se r f rer galement au paragraphe Pr cautions et restrictions d emploi 8C 2C Pour garder leur activit jusqu la date de p remption du coffret les suspensions de latex doivent tre conserv es en position verticale entre 2 et 8 C Ne pas congeler les suspensions de latex Les cartes de r action et les b tonnets d homog n isation peuvent tre conserv s temp rature ambiante 18 30 C Latex test 0157 Suspension tamponn e de particules de latex de polystyr ne de couleur rouge recouvertes d IgG de lapin sp cifiques de E coli 0157 Conservateur Bronidox 0 05 0157 TEST LATEX Latex t moin 0157 Suspension tamponn e de particules de latex de polystyr ne de couleur rouge recouvertes d IgG de lapin non immunes Conservateur Bronidox 0 05 0157 CONTROL LA Latex test H7 Suspension tamponn e de particules de latex de polystyr ne de couleur bleue recouvertes d IgG de lapin sp cifiques de E coli H7 Conservateur Bronidox 0 05 TEST LATEX Tz ka m x Latex t moin H7 Suspension tamponn e de particules de latex de polystyr ne de couleur ble
7. e g lose au sang ou un bouillon Tryptone soya pour l analyse de l antig ne H7 7 PROCEDURE MATERIEL FOURNI La quantit de r actifs au latex fournis est suffisante pour 50 tests Voir la Composition du coffret MATERIEL NON FOURNI 1 Une pipette appropri e pour mesurer 40 pl 2 Solution saline 0 85 NaCl m v PROCEDURE DU TEST Lire attentivement les Pr cautions d analyse avant d effectuer le test Amener les r actifs temp rature ambiante 18 30 C avant emploi Proc dure 0157 Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Etape 5 Etape 6 Etape 7 Etape 8 Etape 9 Homog n iser les r actifs au latex 0157 Pour chaque chantillon distribuer 40 ul de solution saline dans deux cercles d une carte de r action A l aide d un b tonnet d homog n isation lever une quantit de culture suffisante pour recouvrir l extr mit plate du b tonnet REMARQUE Le latex est tr s sensible Ne pas pr lever une quantit excessive de culture Emulsionner l chantillon de culture dans la solution saline en frottant avec l extr mit plate du b tonnet M langer soigneusement sans pour autant exercer une trop forte pression afin de ne pas endommager la surface de la carte Certaines cultures sont parfois difficiles mulsionner ceci doit tre pris en compte lors de la lecture car le latex peut alors pr senter un aspect rugueux ou filandreux en pr sence de culture mal
8. e pendant au moins 15 minutes 121 C Le mat riel usage unique doit tre st rilis par autoclave ou incin r Les claboussures de mat riaux potentiellement infectieux doivent tre limin es imm diatement l aide d un papier absorbant et les surfaces contamin es doivent tre nettoy es avec un d sinfectant antibact rien standard Le mat riel utilis pour l limination des claboussures y compris les gants doit tre limin comme s il s agissait de d chets biologiquement dangereux Pour manipuler les chantillons et effectuer le test porter une blouse de laboratoire des gants usage unique et des lunettes de protection Une fois le test termin se laver soigneusement les mains Si les principes de bonnes pratiques de laboratoire les consignes de s curit et les instructions de la notice sont respect s les r actifs fournis ne pr sentent pas de danger pour la sant Les antig nes E coli utilis s pour les t moins positif et n gatif ont t chimiquement inactiv s Ils doivent cependant tre manipul s comme s ils taient potentiellement infectieux 5 2 PRECAUTIONS D ANALYSE 5 2 1 Ne pas utiliser les r actifs au del de la date de p remption indiqu e 5 2 2 Les r actifs au latex montrant des signes d agr gation ou de granulosit avant emploi peuvent avoir t congel s et ne doivent pas tre utilis s 5 2 3 Lors de l utilisation de flacons compte gouttes il e
9. ec au moins un autre test rapide au latex disponible dans le commerce pour l identification de E coli 0157 H7 Un total de 371 cultures cultiv es s par ment sur g lose au sang et sur TSB dont 324 E coli 0157 H7 37 E coli 0157 non mobiles et 10 E coli 0157 avec des antig nes autres que H7 ont t test es avec les latex test et latex t moin H7 Les cultures E coli 0157 H7 ont t confirm es avec un autre test rapide au latex et ou des anticorps sp cifiques Les r sultats de l tude sont r sum s dans le tableau 2 Le latex test H7 a r agi avec 324 cultures de E coli 0157 H7 cultiv es sur g lose au sang et sur TSB La sensibilit et la valeur pr dictive positive du latex test H7 sur ce groupe de cultures sur g lose au sang TSB est donc estim e 100 324 324 avec une limite inf rieure de 98 9 pour un intervalle de confiance 95 Le latex test H7 n a pas r agi avec 37 cultures E coli 0157 non mobiles ni avec 10 cultures non H7 La sp cificit et la valeur pr dictive n gative du latex test H7 est donc estim e 100 47 47 avec une limite inf rieure de 92 5 pour un intervalle de confiance 95 Durant cette tude aucun r sultat ininterpr table n a t rapport avec le latex test H7 Tableau 2 R sultats Wellcolex E coli H7 Positifs N gatifs Total E coli 0157 H7 324 0 307 g lose au sang E coli 0157 H7 TSB 324 0 324 E coli 0157 non mobile 0 47 0
10. enu de chaque cercle en talant soigneusement le latex sur toute la surface du cercle Jeter le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Faire doucement osciller la carte 30 secondes pendant 30 secondes et observer l apparition ventuelle d une agglutination La carte doit tre maintenue une distance de lecture normale des yeux 25 35 cm Ne pas utiliser de loupe Etape 5 Jeter la carte de r action utilis e selon les r gles de s curit appropri es Etape 6 8 RESULTATS LECTURE DES RESULTATS L apparition d un motif avec une agglutination clairement visible des particules de latex indique un r sultat positif La vitesse d apparition et l aspect de l agglutination d pendent de la qualit et de la quantit de l antig ne de culture L absence d agglutination du latex et l aspect inchang de la suspension pendant toute la dur e de l agitation indique un r sultat n gatif Il est noter que de faibles traces de granulosit s peuvent tre d tect es alors que le r sultat est n gatif selon l acuit visuelle de l op rateur L agglutination des deux types de latex test et t moin indique une r action non sp cifique 9 CONTROLE QUALITE Les proc dures suivantes doivent tre effectu es chaque r ception de coffrets de test puis p riodiquement pendant toute sa dur e de vie Des r glementations locales peuvent n cessiter un cont
11. et antig ne autres que H7 Dont quatre cultures n gatives avec un autre test au latex Trois cultures ont t trouv es positives avec les antis rums H7 et une culture tait non disponible pour une r analyse Une culture suppl mentaire a donn une r action non sp cifique avec l autre test au latex BIBLIOGRAPHIE Tarr P I 1995 Escherichia coli 0157 H7 Clinical diagnostic and epidemiological aspects of human infection Clinical Infectious Diseases 20 1 10 2 Wells J G Davis B R et al 1983 Laboratory investigation of hemorrhagic colitis outbreaks associated with rare Escherichia coli serotype Journal of Clinical Microbiology 18 512 520 2 Ratnam S March S B et al 1988 Characterization of Escherichia coli serotype 0157 H7 Journal of Clinical Microbiology 26 2006 2012 bi Willshaw G A Scotland S M et al 1992 Properties of Vero cytotoxin producing Escherichia coli of human origin of O serogroups other than 0157 Journal of Infectious Diseases 166 797 802 3 Thielman N M 1994 Enteric Escherichia coli infections Current Opinion in Infectious Diseases 7 582 591 6 March S B and Ratnam S 1986 Sorbitol MacConkey medium for detection of Escherichia coli O157 H7 associated with hemorrhagic colitis Journal of Clinical Microbiology 23 869 872 F Gray L D 1995 Manual of Clinical Microbiology 6th Ed edited by Murray P R Baron E J Pfaller M A
12. if pour H7 la culture doit tre repiqu e sur un milieu de motilit et r analys e Une r action n gative n exclut pas la pr sence possible de E coli 0157 en faible quantit dans l chantillon R sultat ininterpr table Une agglutination visible du latex t moin indique une r action non sp cifique 10 RESULTATS ATTENDUS Les souches exprimant l antig ne 0157 donnent une agglutination forte et rapide en pr sence du latex test 0157 Les souches exprimant l antig ne H7 donnent une agglutination en pr sence du latex test H7 11 LIMITES DE LA METHODE 11 1 Seules les colonies bien isol es doivent tre test es Les cultures positives doivent tre identifi es biochimiquement afin de confirmer la pr sence de E coli et doivent tre valu es pour la production de v rotoxines 11 2 La g lose MacConkey Sorbitol et ce test au latex ne confirment pas que les isolats sont des producteurs de v rotoxines Tous les isolats produisant des v rotoxines n appartiennent pas au s rotype 0157 et tous les isolats 0157 ne produisent pas des v rotoxines 11 3 Faire bien attention lors du test E coli 0157 pour l antig ne H7 Les E coli varient dans leur expression des antig nes flagellaires et les isolats qui sont initialement n gatifs avec les tests de s rologie H doivent tre retest s apr s un passage dans un milieu de motilit appropri destin accro tre la motilit avant de conclure qu ils n exp
13. ination du latex t moin indique la pr sence d antig ne 0157 dans la culture test e Les cultures donnant une r action positive doivent tre identifi es biochimiquement comme E coli Lorsque des antig nes E coli 0157 sont identifi s les cultures doivent tre galement test es pour l antig ne H7 et ou la production de v rotoxines Une agglutination du latex test H7 accompagn e d une absence d agglutination du latex t moin indique la pr sence d antig ne H7 dans la culture test e Les isolats E coli 0157 H7 ou les isolats produisant des v rotoxines doivent tre transmis aux services de sant locaux pour des valuations compl mentaires et si n cessaire pour une action de sant publique afin de pr venir l apparition de nouveaux cas R sultat n gatif Une absence d agglutination dans les deux r actifs 0157 signifie que la culture analys e n est vraisemblablement pas de l esp ce E coli 0157 Si de l gers agr gats correspondant une bact rie non mulsionn e avec les 2 latex est observ e la r action peut tre consid r e n gative tant que la majorit du latex reste sous forme d une suspension homog ne non agglutin e L absence d agglutination dans les deux r actifs H7 indique que la culture test e n est vraisemblablement pas de l esp ce E coli 0157 H7 cependant les cultures diff rent dans leur expression de l antig ne H7 et avant de confirmer un r sultat n gat
14. r le qualit pour chaque s rie de tests Une s rie peut tre d finie comme une p riode d analyse allant jusqu 24 heures Toute divergence par rapport aux r sultats attendus peut indiquer un probl me de r actifs celui ci devra tre r solu avant de continuer l utilisation avec des chantillons cliniques Inspection visuelle Il faut toujours v rifier l absence d agr gats dans les suspensions de latex lorsqu elles sont distribu es sur la carte de r action S il y a agglutination avant l addition de l chantillon tester la suspension de latex ne doit pas tre utilis e Apr s une conservation prolong e des agr gats ou fragments secs peuvent appara tre en haut du flacon Dans ce cas agiter vigoureusement le flacon pendant quelques secondes jusqu ce que la resuspension soit compl te Proc dure de contr le Lors du test d chantillons cliniques la performance des r actifs du coffret doit tre valu e en testant le t moin positif et le t moin n gatif fournis dans chaque coffret Un t moin positif et un t moin n gatif doivent tre inclus dans chaque s rie Homog n iser soigneusement chaque t moin avant emploi Procedure du t moin positif Etape 1 Distribuer une goutte de chaque latex 1 goutte test dans des cercles distincts d une carte de r action Etape 2 Ajouter une goutte de t moin positif 1 goutte c t de chaque latex test Etape 3 M langer l aide d un
15. riment pas d antig ne H7 Si une souche est positive pour l antig ne 0157 et non mobile elle doit tre valu e pour la production de v rotoxines afin d exclure l E coli h morragique Certaines souches de E coli 0157 ne produisent pas de v rotoxines et ont des antig nes H autres que H7 11 4 Des souches E coli 0157 produisant des v rotoxines qui fermentent le sorbitol ont t isol es Celles ci peuvent ne pas tre d tect es par les protocoles qui utilisent le SMAC pour la s lection pr liminaire des isolats lors du d pistage avec les tests d agglutination au latex 12 CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Etude d valuation 1 La performance du test Wellcolex E coli 0157 latex test et latex t moin a t valu e dans un laboratoire de microbiologie clinique d Am rique du Nord et deux laboratoires europ ens en testant des colonies de 611 cultures ne fermentant pas le sorbitol Les cultures ont t test es en parall le avec au moins deux autres tests au latex disponibles dans le commerce pour l identification de E coli 0157 Les r sultats de l tude sont r sum s dans le tableau 1 L tude porte sur 307 cultures trouv es positives pour E coli 0157 avec le latex test 0157 et avec d autres tests La sensibilit du latex test 0157 sur ce groupe de cultures est donc estim e 100 307 307 avec une limite inf rieure de 98 8 pour un intervalle de confiance 95 Un total de 299 autres en
16. st important de les garder en position verticale et de v rifier que la goutte se forme l extr mit de l embout Si embout du compte gouttes est mouill un volume incorrect se forme autour de l extr mit et non pas l extr mit m me dans ce cas s cher l embout avant de continuer 5 2 4 Utiliser uniquement les cartes de r action fournies dans le coffret 5 2 5 Ne pas toucher les zones de r action sur les cartes 5 2 6 Tester uniquement les cultures ne fermentant pas le sorbitol Seules les cultures positives avec le latex test 0157 doivent tre test es pour l antig ne H7 5 2 8 Ne pas tester l antig ne H7 sur des cultures provenant d une g lose MacConkey Sorbitol 5 2 9 Ne pas interpr ter une agglutination qui appara t apr s 30 secondes comme un r sultat positif 5 2 10 Ne pas utiliser de loupe pour interpr ter l agglutination 6 PRELEVEMENT ET CONSERVATION DES ECHANTILLONS IL EST RECOMMANDE D UTILISER DES CULTURES RECENTES DE LA NUIT PRECEDENTE 16 A 24 HEURES POUR LA DETECTION D ANTIGENES 0157 ET H7 Pour de plus amples informations sur le pr l vement etle traitement des chantillons se r f rer un manuel de r f rence Les cultures ne fermentant pas le sorbitol provenant d une g lose MacConkey Sorbitol SMAC doivent tre analys es pour la d tection de l antig ne 0157 Les isolats pr sentant un antig ne 0157 doivent tre remis en culture une nuit sur un
17. t robact ries ne fermentant pas le sorbitol dont E hermannii ont t galement test es avec le latex test 0157 et les autres tests Une r action faussement positive a t enregistr e pour une culture Providencia rettgeri avec le latex test 0157 et avec un des autres tests La sp cificit du latex test 0157 sur ce groupe de cultures est donc estim e 99 7 298 299 avec des limites inf rieure et sup rieure respectives de 98 2 et 99 9 pour un intervalle de confiance 95 Les valeurs pr dictives positives et n gatives du latex test 0157 pour la population tudi e sont respectivement de 99 7 307 308 et 100 298 298 Le latex test 0157 a donn un r sultat ininterpr table avec cinq des cultures non E coli 0157 qui ont t exclues du r sum ci dessus Tableau 1 R sultats Wellcolex E coli 0157 Positifs N gatifs Total E coli 0157 307 0 307 Autres ent robact ries ne fermentant pas le 1 298 299 sorbitol Total 308 298 606 Etude d valuation 2 Dans une autre tude la performance du test Wellcolex E coli 0157 H7 latex test et latex t moin a t valu e dans un laboratoire de microbiologie clinique d Am rique du Nord et deux laboratoires europ ens en testant des cultures identifi es comme E coli 0157 par un latex test 0157 Les cultures ont t repiqu es sur g lose au sang et sur bouillon de Tryptone soja TSB puis ont t test es en parall le av
18. terminer si l isolat poss de aussi l antig ne H7 Les isolats E coli 0157 H7 sont partiellement toxig nes alors que les isolats mobiles E coli 0157 avec des antig nes H autres que H7 peuvent ne pas tre toxig nes 3 PRINCIPE DE LA METHODE Le test Wellcolex E coli 0157 H7 contient deux r actifs Le r actif 0157 est constitu de particules de latex rouges recouvertes d anticorps sp cifiques de E coli 0157 Quand une goutte de r actif est m lang e avec une suspension d organismes E coli sur une carte de r action une agglutination rapide appara t du fait de l interaction entre les IgG sp cifiques et les antig nes lipopolysaccharides 0157 De la m me fa on le r actif H7 est constitu de particules de latex bleues recouvertes d anticorps sp cifiques de l antig ne E coli H7 Quelques coliformes f caux peuvent provoquer des agr gations non sp cifiques avec les particules de latex particuli rement lorsqu ils se d veloppent sur un milieu contenant du sucre tel que le MacConkey Des r actifs au latex t moins sont donc fournis pour aider identifier les r actions non sp cifiques 4 REACTIFS COMPOSITION DU COFFRET 1 Latex test 0157 1 flacon compte gouttes bouchon rose 2 Latex t moin 0157 1 flacon compte gouttes bouchon gris 3 Latex test H7 4 Latex t moin H7 5 T moin positif 6 T moin n gatif 1 flacon compte gouttes bouchon bleu p le 1 flacon compte gouttes bouchon blanc 1 flacon
19. tig ne H7 Ne pas tester l antig ne H7 sur des cultures provenant d une g lose SMAC Proc dure H7 g lose au sang Etape 1 Homog n iser les r actifs au latex H7 Etape 2 Pour chaque chantillon distribuer 40 pl sol 40 ul de solution saline dans 2 cercles saline d une carte de r action Etape3 A l aide d un b tonnet d homog n isation pr lever une quantit de culture suffisante pour recouvrir l extr mit plate du b tonnet REMARQUE Le latex est tr s sensible Ne pas pr lever une quantit excessive de culture Emulsionner l chantillon de culture dans la solution saline en frottant avec l extr mit plate du b tonnet M langer soigneusement sans pour autant exercer une trop forte pression afin de ne pas endommager la surface de la carte Certaines cultures sont parfois difficiles mulsionner ceci doit tre pris en compte lors de la lecture car le latex peut alors pr senter un aspect rugueux ou filandreux en pr sence de culture mal mulsionn e Eliminer le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Etape5 A laide dun autre b tonnet mulsionner une quantit similaire d chantillon de culture dans la solution saline de l autre cercle Eliminer le b tonnet d homog n isation selon les r gles de s curit appropri es Pour chaque chantillon ajouter 1 goutte une goutte de latex test H7 dans un cercle avec la culture mulsionn
20. ue recouvertes d IgG de lapin non immunes Conservateur Bronidox 0 05 Amener les suspensions de latex temp rature ambiante 18 30 C avant emploi Apr s une conservation prolong e quelques agr gats ou fragments secs du latex peuvent appara tre en haut du flacon Dans ce cas agiter vigoureusement le flacon de latex pendant quelques secondes CONTROL gt 5 jusqu ce que la resuspension soit compl te T moin positif Suspension inactiv e chimiquement d antig nes de E coli O157 H7 Conservateur Bronidox 0 05 T moin n gatif Suspension inactiv e chimiquement d antig nes de E coli 0106 H33 Conservateur Bronidox 0 05 5 PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D EMPLOI R actifs destin s exclusivement au diagnostic in vitro R actifs r serv s exclusivement un usage professionnel Attention Ce produit contient du caoutchouc naturel sec Pour de plus amples informations sur les composants potentiellement dangereux se r f rer la fiche de s curit fournie par le fabricant et l tiquetage du produit 5 1 INFORMATIONS DE SECURITE 5 1 1 Il est recommand de manipuler ces r actifs et les chantillons analyser conform ment aux bonnes pratiques de laboratoire 5 1 2 L quipement non jetable doit tre st rilis apr s emploi l aide d une proc dure appropri e au choix bien que la m thode recommand e soit la st rilisation par autoclav

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