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1. gatif ont une fine paroi cellulaire contenant des peptidoglycanes Les bact ries Gram positif et Gram n gatif se colorent avec le colorant laque cr par une coloration au cristal violet et le mordant pour fixer l iode Cependant au cours du rin age avec une solution de d coloration le colorant laque est compl tement limin de la bact rie fine Gram n gatif Un contraste va tre obtenu sur la paroi cellulaire gr ce la solution de coloration de safranine O La courte dur e de rin age de la solution de d coloration permet au colorant laque de rester l int rieur des parois des bact ries Gram positif plus paisses Rincez avec pr caution la lame l aide de la solution de d coloration Un rin age plus long avec la solution de d coloration peut pousser le colorant laque de cristal violet s chapper de la couche paisse de la paroi cellulaire des bact ries Gram positif et des bact ries Gram n gatif R f rences 1 Bancroft J D and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques Churchill Livingstone New York NY 1977 2 Volk W A Essentials of Medical Microbiology J B Lippincott Company Philadelphia PA 1982 3 Manual of Clinical Microbiology of the American Society for Microbiology 30 45 1970 4 Hucker G J and Conn H J Further Studies on the Methods of Gram Staining NY Agric Exp Stain Technology Bulletin No 128 1927 5 Cutlin B W 1975 Cellular Elongation Und2. Thermo SCIENTIFIC Thermo Scientific Richard Allan Scientific Chromaview Coloration Avanc e Colorant de Gram Etalement Mode d emploi Discussion technique Pr paration Un frottis monocouche sur une lame de verre propre Fixation Plonger la lame dans du m thanol absolu ou fixer la chaleur l aide d une flamme Contr le de qualit L utilisation d une lame de contr le avec des organismes Gram positif et Gram n gatif connus est recommand e Proc dure technique Protocole de coloration standard 1 Plonger le frottis dans une solution de cristal violet pendant 1 minute tape facultative ajouter 5 gouttes d une solution de bicarbonate de sodium au frottis pour am lio rer la r tention du cristal violet Rincer l exc s de colorant l eau d min ralis e pendant 30 secondes Plonger le frottis dans une solution iod e de Gram pendant 1 minute Rincer l exc s de colorant l eau d min ralis e pendant 30 secondes Plonger le frottis dans une solution de d coloration Rincer l eau d min ralis e pendant 30 secondes Plonger le frottis dans une solution de safranine O pendant 1 minute Rincer l exc s de colorant l eau d min ralis e pendant 30 secondes 9 S cher la lame avec un papier absorbant 10 Examiner au microscope SN 9 AR RTS R sultats Organismes Gram positif bleus Organismes Gram n gatif rouges Remarques ous les r actifs d
3. er the Influence of Antibacterial Agents Way to mDifferentiate Coccobacilli from Cocci J Clin Micro 1 102 105 Informations de commande Produit Contenance Qt REF Kit de coloration de Gram film 1 Kit 1 87101 Solution de cristal violet 500 ml i 88101 Solution iod e de Gram 500 ml 1 88102 Solution de coloration safranine O 500 ml i 88103 Solution de d coloration 500 ml i 88104 Solution de bicarbonate de sodium 8ml 2 cs 88116 2013 Thermo Fisher Scientific Inc All rights reserved All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific Inc and its subsidiaries nea Richard Allan Scientific Subsidiary of Thermo Fisher Scientific 4481 Campus Drive Kalamazoo MI 49008 Phone 1 800 522 7270 Phone 1 269 544 5600 www thermoscientific com pathology Anatomical Pathology 1S87101FR R4 13 ec rer Thermo Shandon Limited Subsidiary of Thermo Fisher Scientific Tudor Road Manor Park Runcorn Cheshire WA7 1TA UK Phone 44 0 1928 534 050 Fax 44 0 1928 534 049
4. es colorants doivent tre conserv s temp rature ambiante Les r actifs du colorant de Gram sont r serv s l utilisation In Vitro Pour les informations de sant et de s curit r f rez vous la iche de donn es de s curit du mat riau Tous les r actifs sont stables et ne doivent pas former de pr cipit s en conditions normales d entreposage Ces colorants ne doivent pas tre dilu s et sont pr ts l emploi Tous es colorants entrant dans ces compositions sont certifi s par la Biological Stain Commission Commission de a coloration biologique Commentaires techniques En cas de pr cipitation dans la solution de cristal violet placer dans un four chaud environ 35 C et m langer La solution iod e de Gram peut pr senter une perte en dilution au fil du temps Une fois termin e la lame est d finitivement stable Lors de colorations de Gram effectu es en milieu de culture il faut consid rer l ge de la culture Ceci peut affecter le degr de coloration Gram positif Des traitements antibact riens peuvent gale ment affecter la coloration Gram positif il faut tre conscient qu une sur coloration est plus probable Mode d action probable Les bact ries peuvent tre class es en une ou deux familles selon l paisseur de la membrane cellulaire conten ant des peptidoglycanes Les bact ries Gram positif ont une paisse paroi cellulaire contenant des peptidogly canes Les bact ries Gram n
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