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0905 VDR1 Box
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1. 1 0 Typing Kit e Placas de tipagem VDR 48 tipagens 2 placas 24 amostras cada conservar de 15 a 30 2C e PCR Master Mix com Taq DNA Polimerase 2 X 340 ul conservar de 15 a 30 C e Selantes de Placas 2 selantes para PCR transparentes e Manual de instru es 1 Manual de Instru es com pares de primers espec ficos desidratados Componentes da PCR Master Mix Nucle tidos concentra o final de cada dNTP 600 uM Tamp o da PCR concentra es finais s o 3 3x NH4 2 0 mM MgCl e 0 4 u ul Amplitag DNA polimerase pH 8 3 Glicerol concentra o final 16 6 Vermelho de cresol concentra o final de 300ug ml 5 25 Protocolo de amplifica o por PCR Reagentes e Amostra de DNA 100 200 ng ul e PCR Master Mix e gua bi destilada est ril n o fornecida Extrac o de DNA Para a tipagem por SSP necess rio DNA extra puro Recomenda se que o isolamento de DNA seja efectuado utilizando kits de extrac o com marca o CE que garantam um r cio DO 260 280 maior do que 1 6 e uma concentra o entre 100ng 200 ng ul Alternativamente o DNA pode ser extra do utilizando sais de Brometo de Trimetilamonia DTAB CTAB ou por salting out dissolvendo o em Tamp o TE Devem ser asseguradas o mesmo n vel de DO e de concentra o N O UTILIZE SANGUE HEPARINIZADO COM ESTE M TODO Amplifica o por PCR 1 Agite brevemente os tubos de DNA e da mistura de reac o 2 Junte e 1
2. para interpretar os resultados 8 25 Folha de Dados de Seguran a 2 3 Material Safety Data Sheet MSDS 7 Manipula o e armazenamento Manipula o evite o contacto directo com a subst ncia Armazenamento armazene temperatura aconselhada proteja do contacto com a luz Danifica o da embalagem protectora rejeitar o constituinte contido na embalagem 8 Perigos Os componentes da mistura de reac o podem ser perigosos se inalados ingeridos ou absorvidos pela pele Este material pode causar irrita o da pele dos olhos e do tracto respirat rio A ingest o de grandes quantidades desta mistura pode causar dores de est mago v mitos ou diarreia 9 Medidas de Primeiros Socorros No caso de contacto com os olhos deve lavar imediatamente os olhos com gua abundante por cerca de 15 minutos Deve consultar o seu m dico No caso de contacto com a pele deve lavar imediatamente a zona afectada com gua corrente e sab o Lave a roupa contaminada antes da sua utiliza o No caso de ingest o lave a boca com gua abundante Deve contactar o seu m dico se necess rio No caso de inala o mudar a v tima para um local arejado Se se encontrar inanimado aplique respira o artificial Se apresentar dificuldades respirat rias aplique oxig nio Deve consultar o seu m dico 10 Medidas a tomar em caso de inc ndio Meios de extin o gua di xido de carbono p qu mico seco ou espuma apropriada Meios
3. testes de diagn stico indubitavelmente declaramos que este produto ao qual se relaciona esta declara o de conformidade est em conformidade com os seguintes documentos normativos ISO 9001 2008 e ISO 13485 2004 Seguindo ainda as indica es da Directiva Europeia 98 79 CE sobre dispositivos m dicos de diagn stico in vitro conformidade de acordo com o Anexo IV transposto para as leis nacionais dos estados membros da Uni o Europeia Europeia A ficha e os documentos t cnicos deste produto s o mantidos na geneBOX biocant centro de inova o em biotecnologia 3060 197 Cantanhede Portugal Sandra Balseiro Directora T cnica 18 25 Tabela de interpreta o de resultados 1 1 A E VDR Fokl C 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 Cc G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl C 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl C 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 Cc G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 c G VDR Bsml A 21
4. 4 ul da PCR Master Mix e 30 pl de gua bi destilada est ril e e 4 plida amostra de DNA conc 100 200 ng ul num tubo de 0 7 ml ou 1 5 ml Agite vigorosamente durante 15 segundos 4 Pipete 10 pl da mistura para cada po o da placa de tipagem 4 pares de primers 5 Repita os passos anteriores para cada uma das amostras DNA num total de 24 amostras por placa 6 Sele a placa de tipagem com um autocolante e coloque num aparelho PCR de 96 po os 6 25 Refer ncias 1 Nelson D A Vande Vord P J Wooley P H Polymorphism in the vitamin D receptor gene and bone mass in African American and white mothers and children a preliminary report 630 Ann Rheum 2000 59 626 630 2 Morrison N A Yeoman R Kelly P J Eisman J A Contribution of trans acting factor alleles to normal physiological variability Vitamin D polymorphisms and circulating osteocalcin Proc Natl Acad Sci 1992 89 6665 6669 3 Chuang H Y Yu K T Ho C K Wu M T Lin G T Wu T N Investigation of vitamin D receptor polymorphism affecting workers susceptibility to lead J Occup Health 2004 46 316 321 4 Nejentsev S Cooper J D Godfrey L Howson J M M Rance H Nutland S Walker N M Guja C lonescu Tirgovis C Savage D A Undlien D E R nningen K S Tuomilehto Wolf E Tuomilehto J Gillespie K M Ring S M Strachan D P Widmer B Dunger D Todd J A Analysis of the Vitamin D Receptor Gene Sequence Variant
5. 9 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 11 25 Tabela de interpreta o de resultados 2 2 tinha Poco Gene Polimortismo areto Banda especitica Bandacontrolor A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 7 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 A E VDR Fokl G 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 8 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 a c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 A E VDR Fokl C 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 1D c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 11 A E VDR Fokl 0 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 A E VDR Fokl c 163 790 B F VDR Fokl T 163 790 lo c G VDR Bsml A 219 790 D H VDR Bsml G 219 790 DNA 1 DNA 2 Os pares de primers controlo emparelham com sequ ncias n o polim rficas Os primers de controlo positivo interno amplificam segmentos do gene PIC1 originando fragmentos com 790 pares de bases Na presen a da banda espec fica a banda controlo pode ver diminu da a sua intensidade A reac o de PCR s valida na presen a da banda controlo ou nalguns casos na presen a da banda
6. 946 22 25 Par metros do programa PCR Desnatura o 96 2C 1 min 1 Desnatura o 96 2C 25 seg 21 Emparelhamento 65 C 45 seg Extens o 72 2C 30 seg Extens o 72 2C 10 min 1 7 No final da PCR guarde a placa a 2 8 C So Detecte os produtos do PCR com uma electroforese em gel de agarose a 2 Protocolo de electroforese em gel de agarose Prepara o do gel de agarose a 2 1 Dissolver 4 gramas de p agarose em 200 ml de tamp o TAE 1X 2 Dissolver completamente a agarose aquecendo a no microondas Arrefe a o gel at aproximadamente 502C 4 Adicione pelo menos 20 pl de brometo de et dio 10 mg ml ou 2 ql de Sybr Safe 10000x concentrado agarose Agite at estar completamente incorporado 5 Numa superf cie nivelada monte a placa do gel com 96 po os 6 Verta uma camada de gel com cerca de 5mm 7 Deixe o gel arrefecer Aten o este reagente um forte agente mutag nico leia atentamente a MSDS do produto Electroforese Submirja o gel na tina de electroforese com tamp o TAE 1X Remova os pentes com cuidado do gel Adicione 10 pl do produto de PCR em cada po o se o INE TA Ligue a tina de electroforese corrente com uma voltagem m dia 115V 5 Deixe a electroforese correr por cerca de 20 minutos ou at o corante estar a 2 3 da linha 6 Ponha o gel no transiluminador Fotografe o gel e identifique o 8 Use a Tabela de interpreta o de resultados 1 e 2
7. C digo do Produto 0905 VDR Box 1 0 Typing Kit Dispositivo para utiliza o in vitro Manual de I nstru es oqo oo geneBox 090 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO Vers o1 7 Maio de 2010 A euVe genesox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 2 25 Apresenta o iene amarrar animar 4 Altera es e melhoramento do Produto ms 4 Controlo da Qualidade 4 Componentes do VDR Box 1 0 Typing Kit 5 Protocolo de amplifica o por PCR 6 Reagentes s csseniinasaagintidamaRiisagaea SE EAER Ea 6 Extrac o de DNA O Amplifica o por PCR sssssssisssssrrsrssireririrrrrrirrnrnerna 6 Par metros do programa de PCR 7 Protocolo de electroforese em gel de agarose 8 Prepara o do gel a 2 ieseemeeeeemeneecemsa 8 Electroforese serrana 8 Esquema da placa VDR Box 2 0 9 Identifica o da placa VDR Box 1 0 10 Tabela de interpreta o dos Resultados LI Guia de resolu o de problemas eereres 13 Avisos precau es L4 GuiaL CNICO asian desta tm ea E patanaa o E e Garantia a saipiaces n Dista ie oca a a asa ata LO Aviso de Garantias iintindi anaana 17 Declara o de Conformidade
8. CE 18 Folha de dados de seguran a 19 Refer ncias assinei a raa aa a n 422 3 25 Apresenta o Este kit cont m placas com misturas de primers desidratadas e PCR Master Mix para efectuar a tipagem gen tica dos polimorfismos Fokl e Bsml do receptor da vitamina D VDR Altera es e melhoramento do Produto Este produto pode ser melhorado de modo a aumentar o seu rendimento As altera es adi es ou modifica es de primers em rela o ao lote anterior est o detalhadas na tabela abaixo Tubo primers motivo N A Controlo de Qualidade Devido inexist ncia de linhas celulares controlo n o foram feitos testes normais de controlo da qualidade Contudo a Genebox testou as misturas de primers com v rios DNAs padr o obtendo amostras positivas e negativas para cada uma das muta es A Genebox garante a qualidade e a fiabilidade do seu kit VDR Box 4 25 sjo eve genesox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU RO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 25 25 Sie euUe genesox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 24 25 Componentes do VDR Box
9. Utilize batas distintas para a zona Pr e P s PCR Mude de luvas frequentemente Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Esfrega o de bandas Degrada o da amostra de DNA Reextraia a amostra de DNA de material fresco Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Amostra de DNA muito concentrada Verifique a qualidade e concentra o do DNA Dissolva o DNA em q H20 de forma a obter a concentra o exacta Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Problemas com tamp o de electroforese Use um tamp o recomendado novo Fora de prazo ou composi o errada Avisos e precau es A amplifica o por PCR permite nos obter milh es de c pias de DNA a partir de uma pequena quantidade de amostra Infelizmente isto tamb m verdade para o DNA contaminante que pode comprometer performance da nossa reac o Consequentemente pr ticas laboratoriais espec ficas podem evitar a presen a de amplifica es inespec ficas Em baixo encontram se descriminadas as recomenda es da Genebox Separe fisicamente as reas de pr PCR e de p s PCR O fluxo Laboratorial deve ser sempre unidireccional da rea pr PCR para a rea p s PCR Deve sempre utilizar se equipamentos espec ficos para cada area de trabalho prepara o de amostras pr amplifica o amplifica o e p s amplifica o Todos os equipamentos utilizados na rea de p s PCR n o deve
10. agem Armazenamento a 42C os primers desidratados permanecem est veis durante 12 meses a partir da data de produ o temperatura ambiente os primers desidratados permanecem est veis durante 3 a 4 semanas a partir da data de recep o Quando o selante removido os primers desidratados permanecem est veis durante 2 dias no m ximo desde que n o humede am 2 Mistura de Reac o Armazenamento a 202 C a mistura de reac o permanece est vel durante 18 meses a partir da data de produ o ver validade do lote na embalagem Armazenamento a 4 C a mistura de reac o permanece est vel durante 15 dias a partir da data de recep o temperatura ambiente a mistura de reac o permanece est vel durante 3 dias a partir da data de recep o A mistura de reac o nunca deve ser deixada ou armazenada com a tampa aberta 3 DNA O DNA extra do por salting out ou por qualquer outro m todo deve ser armazenado a 4 C ou 202C Ao optar pela congela o das amostras devem ser evitadas ciclos repetidos de congela o descongela o de modo a impedir a degrada o da amostra As amostras de DNA armazenadas em dH 0 permanecem est veis durante pelo menos 4 semanas a 42C ou 2 anos a 20 C As amostras de DNA armazenadas em tamp o TE permanecem est veis durante pelo menos 2 anos a 42C ou 5 anos a 20 C 16 25 Guia de resolu o de problemas PROBLEMAS Bandas controlo e espec ficas fra
11. cas POSSI VEI S CAUSAS Concentra o da amostra de DNA baixa SUGEST ES Verifique a qualidade e concentra o do DNA Reextraia a amostra de DNA ou tente n o adicionar gua mistura de reac o Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Presen a de inibidores da Taq polimerase nas amostras de DNA Repurifique a amostra de DNA Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Os controlos internos falharam em diversos po os Presen a de inibidores da Taq polimerase nas amostras de DNA Repurifique a amostra de DNA Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Produtos de amplifica o secos Verifique a selagem das placas Repita a tipagem utilizando um adaptador de silicone para placas de 96 e ou adicione leo mineral Falsos negativos de uma banda espec fica com o controlo interno normal Degrada o da amostra de DNA Reextraia a amostra de DNA de material fresco Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Detec o de mais de dois alelos espec ficos Amostra de DNA muito concentrada Verifique a qualidade e concentra o do DNA Dissolva o DNA em q H20 de forma a obter a concentra o exacta Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Contamina o com outros produtos de PCR ou outras amostras de DNA durante a prepara o do PCR Limpe a zona de trabalho Trabalhe em zonas Pr e P s PCR separadas
12. de extin o n o aconselhados n o existem restri es conhecidas Perigos espec ficos de exposi o em caso de inc ndio podem emitir fumos t xicos de di xido e mon xido de carbono nitrog nio f sforo cloreto de hidrog nio e g s hidrog nio Equipamento especial de combate ao inc ndio quando s o libertadas grandes quantidades de subst ncia trabalhe apenas com protec o adequada para olhos e pele 11 Medidas a tomar no caso de derrame acidental Precau es pessoais evite o contacto directo com a subst ncia Limpeza limpe normalmente a rea afectada n o s o necess rios cuidados adicionais Protec o da pele use uma bata de laborat rio 21 25 Protec o dos olhos recomenda se o uso de culos de protec o qu mica Esquema da placa VDR Box 1 0 han N qu qu qu 000000000000 000000000000 000000000000 000000000000 a900000000000 D00000000000 000000000000 1000000000000 9 25 20 25 Identifica o da placa VDR Box 1 0 Folha de Dados de Seguran a 1 3 Material Safety Data Sheet MSDS geneBOX R amp D Diagnostic Tests PCR SSP Kits Posi o Posi o Local Produtos de tipagem SSP da geneBOX Amostra impar Amostra par Gene Polim rfico Esta folha de dados de seguran a aplic vel a todos os produtos de tipagem por PCR SSP da geneBOX 1 Produtos Qu micos e Identifica o da Companhia Data de realiza o Maio 2010 Grupo do produto Produtos
13. de tipagem SSP da geneBOX Manufactura o geneBOX R amp D Diagnostic Tests biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel fax 351 231 410 946 351 231 410 947 e mail info genebox com 2 Composi o e Informa o sobre os reagentes Componente Qu mico Nome vulgar Placa Acido Desoxiribonucleico Oligonucle tido Vermelho de Cresol Mistura de reac o Desoxiribonucle tidos Nucle tidos Tamp o NH4 Cloreto de Magn sio Mgci2 Vermelho de Cresol Glicerol Taq DNA Polimerase Taq 3 Propriedades f sico qu micas Componente Aspecto Cor Odor Placa seco no fundo do po o vermelho nenhum Mistura de reac o l quido vermelho rosa nenhum 4 Informa o Toxicol gica Qu mico Toxicidade Glicerol LD50 oral 4090 mg kg ratinho LD50 oral 12600 mg kg rato LD50 oral 1480 mg kg humano 5 Estabilidade e reactividade Condi es a evitar Calor e humidade Incompatibilidades Bases e agentes oxidantes fortes 6 Protec o pessoal Protec o das m os use luvas apropriadas resistentes a qu micos 10 25 19 25 Declara o de Conformidade Nome do Produto VDR Box Numero do Produto GB 09 05 Utiliza o Tipagem gen tica do receptor da vitamina D Produ o geneBOX R amp D Diagnostic Tests biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal N s geneBOX investiga o e desenvolvimento de
14. espec fica Na aus ncia da banda controlo por favor repita a tipagem NOTA Se o PCR tiver bandas com tamanhos diferentes dos previstos n o as considere pois pode tratar se de bandas n o espec ficas ou artefactos 12 25 Aviso de garantia geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos responsabiliza se perante os seus clientes pelos defeitos no material e componentes dos seus produtos aplicados em condi es normais Os produtos da empresa que apresentam esta garantia devem ser substitu dos sem encargos para o cliente Esta garantia aplica se s para produtos que sejam manipulados e armazenados de acordo com as especifica es e recomenda es de utiliza o As reclama es devem ser enviadas por escrito directamente para a geneBOX e devem ser acompanhadas por uma c pia da guia de transporte ou factura do produto Este produto n o pode ser reformulado reembalado ou revendido em nenhuma forma sem o expresso consentimento da geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos 17 25 geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos garante que os primers presentes no kit de tipagem VDR Box apresentam as especificidades dadas nas folhas e tabelas de interpreta o de resultados do produto 1 Placa de Tipagem Armazenamento a 202C os primers desidratados permanecem est veis durante 12 a 19 meses a partir da data de produ o ver validade do lote na embal
15. m sais desta zona Utilize micropipetas luvas e batas espec ficas para cada rea Utilize preferencialmente luvas sem talco uma vez que o talco pode inibir a reac o de PCR Utilize pontas de filtro de forma a minimizar contamina es cruzadas Verifique periodicamente as micropipetas de forma a assegurar a varia o de pipetagem inferior a 5 Utilize micropipetas adaptadas a cada volume de pipetagem Verifique periodicamente os termocicladores de forma a assegurar a varia o de temperaturas inferiores a 1 Abra e feche os reagentes com cuidado Depois de utilizar armazene os restantes componentes do kit s temperaturas recomendadas devidamente fechados N o utilize o kit com a validade expirada Os componentes dos kits s o resistentes s temperaturas de armazenamento indicadas O armazenamento dos kits a temperaturas n o recomendadas podem levar rupturas no material e contamina o dos reagentes dos kits Os materiais pl sticos fornecidos neste kit s o resistentes gama de temperaturas de utiliza o e armazenamento recomendadas A sua utiliza o em gamas distintas de temperaturas pode causar rupturas impossibilitando a utiliza o normal do kit Verifique a concentra o e qualidade de todas as amostras de DNA antes de utilizar este kit Instru es de gerais de seguran a no laborat rio N o coma beba ou fume dentro do laborat rio Utilize sempre luvas descart vei
16. s e mude as com frequ ncia Utilize batas limpas e proteja os olhos sempre que se justifique Lave as m os antes e depois de qualquer manipula o de amostras ou reagentes Lave a rea de trabalho antes e depois de qualquer manipula o N o pipete com a boca 14 25 Guia T cnico 1 Pureza e Concentra o do DNA Para obter bons resultados com o VDR Box 1 0 Typing Kit a pureza da amostra de DNA cr tica Ter uma amostra pura significa obter uma raz o 260nm 280nm de DO superior a 1 6 e uma por o de DNA superior a 9 4 kb A elevada degrada o do DNA ou uma raz o 260nm 280nm inferior a 1 5 requer uma nova extrac o de DNA Cada amostra de DNA deve ter aproximadamente 100 a 200 ng l Concentra es elevadas de DNA provocam um decl nio consider vel na especificidade da PCR Recomenda se o uso de qualquer kit de extrac o de DNA que apresente marca o CE de modo a obter um DNA extra puro t 2 Taq Polimerase O VDR Box 1 0 Typing Kit foi intensivamente testado utilizando a Taq da Reagente 5 Reagente 5 Lisboa Portugal 3 Mistura de reac o Para uma boa performance da tipagem com o VDR Box 1 0 Typing Kit obrigat ria a utiliza o da PCR Master Mix fornecida com o Kit 4 Procedimentos de amplifica o No fim da PCR examine o grau de evapora o e de condensa o da mistura de reac o da PCR Se as perdas de volume forem superiores a 20 n o devem ser validados os resul
17. s in Type 1 Diabetes DIABETES 2004 53 2709 2712 CJELI U genesox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 23 25 Folha de Dados de Seguran a 3 3 Material Safety Data Sheet MSDS 12 Informa o ecol gica N o existem dados dispon veis 13 Informa o sobre a elimina o de res duos Elimine o material de acordo com toda a regulamenta o aplic vel os res duos devem ser devidamente tratados e ou incinerados 14 Informa o sobre o transporte No transporte dos Kits devem estar a seguradas as temperaturas n o devendo ultrapassar os 252C A dura o do transporte n o deve ser superior a 3 dias de modo a garantir que todos os componentes do Kit cheguem em perfeitas condi es aos seus destinat rios 15 Contactos teis N mero Nacional de Emerg ncia 112 Centro de Informa o Anti Venenos 808 250 143 16 Outras informa es As informa es a cima dispon veis s o baseados no n vel de conhecimento actual devendo ser utilizado apenas como guia A geneBOX R amp D Diagnostic Tests n o se responsabiliza por qualquer dano causado pela manipula o inapropriada ou pelo contacto com os referidos produtos Para mais esclarecimentos por favor contactem com o apoio t cnico para o 351 231 410
18. tados obtidos De forma a prevenir esta situa o devem adicionar previamente leo mineral mistura de reac o ou utilizar um adaptador de silicone para placas de 96 Tamb m se deve ter em aten o a temperatura de aquecimento do aparelho Se a temperatura de aquecimento n o for suficiente v o se verificar problemas de condensa o 5 Termociclador Recomenda se utiliza o de qualquer Termociclador que apresente as seguintes caracter sticas heating rate superior a 2 5 C sec cooling rate superior a 1 5 C sec gama de temperatures 4 100 C uniformidade de temperaturas 0 59C heated lid superior a 1002C 6 Validade Como especificado na embalagem Se os problemas persistirem por favor contactem com o apoio t cnico para o 351 231 410 946 15 25
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