1. NOME DO TESTE • A hemoglobina glicada é também chamada
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1. GRUPO SANTA HELENA Sistema Integrado de Sa de C DIGO PT LB BQ 453 ELABORADO APROVADO DATA Ver Pg HEMOGLOBINA GLICADA Adson Amaral Andersom Alvim 27 04 2011 001 1 5 1 NOME DO TESTE A hemoglobina glicada tamb m chamada de hemoglobina glicosilada hemoglobina Aic ou simplesmente HbA1c 2 APLICA O CL NICA Hemoglobina Glicada tamb m abreviada como Hb Aic uma forma de hemoglobina presente naturalmente nos eritr citos humanos que til na identifica o de altos n veis de glic mia durante per odos prolongados Este tipo de hemoglobina formada a partir de reac es n o enzim ticas entre a hemoglobina e a glucose Quanto maior a exposi o da hemoglobina a concentra es elevadas de glucose no sangue maior a forma o dessa hemoglobina glicada Como esta reac o irrevers vel a hemoglobina glicada permite identificar a concentra o m dia de glicose no sangue durante per odos longos de tempo ignorando altera es de concentra o epis dicas Isto til no diagn stico de diabetes mesmo que o doente se abstenha de consumir produtos com glucose dias antes da consulta de forma a esconder a sua situa o ou a incorrecta ingest o de alimentos tendo em conta a sua condi o Tamb m se evita assim que certos factores que alteram a concentra o de glucose do sangue por curtos per odos como por exemplo o stress possam indicar um falso diagn stico2. 3 PRINC PIO DO M TODO O programa do BIORAD D 10 Hemoglobina A1C utiliza o principio da cromatografia l quida de alta performance HPLC As amostras s o automaticamente dilu das no aparelho e injetadas na coluna anal tica O D 10 utiliza um programado de gradiente de concentra o que aumenta a for a i nica para a coluna onde as hemoglobinas s o separadas baseadas em suas intera es i nicas com o material da coluna As fra es da hemoglobina passam pelo filtro do fot metro e as mudan as s o mensuradas na absorb ncia em 415 nm 4 AMOSTRA 4 1 Tipos de amostra Usar sangue total coletado com EDTA Armazenamento e estabilidade da amostra At duas semanas se conservado em geladeira Se conservado em freezer a estabilidade de 3 meses Crit rios para rejei o da amostra Presen a de co gulos PREPARA O DOS PRIMERS CALIBRADORES CONTROLES E AMOSTRAS Primer Sangue Total Reconstituir com 1 mL de gua destilada Aguardar 10 minutos Homogeneizar gentilmente Est vel por 1 dia a 2 8 C IMPRESS O PARA TREINAMENTO GRUPO SANTA HELENA Sistema Integrado de Sa de C DIGO PT LB BQ 453 ELABORADO APROVADO DATA Ver Pg HEMOGLOBINA GLICADA Adson Amaral Andersom Alvim 27 04 2011 001 2 5 passado uma vez por coluna Calibradores Composto de dois n veis Reconstituir com 7 mL do diluente calibrador Aguardar de 5 10 minutos Homegeneizar gent
3. ESULTADOS N o se aplica CONTROLE DE QUALIDADE e Passar diariamente antes do in cio da rotina os controles 1 e 2 pr prios do equipamento e verificar se os resultados dos controles est o v lidos Imprimir os resultados ao final da rotina e arquivar junto aos resultados dos pacientes IMPRESS O PARA TREINAMENTO GRUPO SANTA HELENA Sistema Integrado de Sa de C DIGO ELABORADO APROVADO DATA Ver Pg Gus HEMOGLOBINA GLICADA Adson Amaral Andersom Alvim 27 04 2011 001 5 5 10 INTERVALO DE REFER NCIA E VALOR CR TICO Hemoglobina A c Significado gt 8 Altamente sugestivo 6 7 Alto risco de desenvolver Diabete lt 6 N o Diab tico 11 INTERFER NTES e Amostras com co gulos 12 REFER NCIAS BIBLIOGR FICAS 1 Manual de instru es BIORAD D10 Hemoglobina glicada Engvall E and Perlmann P J Immunol 109 129 135 1971 Betts R F and al Journal of Infectious Diseases 143 821 826 1981 Kraat Y J et al Journal of Clin Microbiol 30 522 524 1992 mo ON Landini M P et al Eur J Clin Microbiol 8 159 163 1989 HIST RICO DE REVIS ES Pg NATUREZA DA ALTERA O DATA REVIS O VERS O RESPONS VEL IMPRESS O PARA TREINAMENTO
4. de barras dos calibradores e controles estiverem danificados ou n o forem lidos por outro motivo manualmente escreva os na worklist Run Edit screen Cali Cal2 CTRL CTRH f Certifique se de que a op o Stop IF calibration fails est selecionada na tela Settings Alert Settings screen 5 of 5 g Selecione Start na tela Run h O relat rio de calibra o ser impresso ap s o teste ter sido executado i Ap s o termino da corrida selecione Eject na tela Run e remova a rack 7 3 Procedimento de rotina com as amostras a Passar os controles Baixo e Alto nas posi es 1 e 2 da rack b Preencher os espa os remanescentes com amostras de pacientes OBS Amostras pr dilu das s o colocadas em adaptadores sem c digo de barras c Insira a rack no sistema d Inicialmente c digo de barra s o lidos e No caso de algum c digo de barras n o ter sido lido ou amostras pr diluidas sem c digo de barras entrar manualmente com os mesmos na tela Run Edit screen Obs O sistema n o realiza o teste se a amostra n o estiver identificada f Selecione Start para iniciar a corrida 9 Ao t rmino da corrida selecione Eject na tela Run para remover a rack NOTA Ap s o t rmino da corrida o sistema entrar em Standby e permanecer assim durante 30 minutos Se durante este tempo n o forem colocadas novas amostras o sistema entra em Sleep C LCULO DE LIBERA O DOS R
5. idamente identificado com c digo de barras Coloque a rack no equipamento Selecione a tela Run ap s o equipamento cessar os movimentos de inicializa o Verifique Prime aparecer na tela Run Se o c digo de barras Prime n o estiver OK digite Prime como identifica o de amostras na posi o 1 na op o Run Edit Selecione Start na tela O sistema iniciar automaticamente um flush com Wash ap s o Prime estar completo Todo processo dura 13 minutos Selecione Eject na tela Run para remover a rack ap s terminado o procedimento 7 2 Procedimento de calibra o em uma nova coluna NOTA A calibra o realizada uma vez a cada nova coluna IMPRESS O PARA TREINAMENTO GRUPO SANTA HELENA Sistema Integrado de Sa de C DIGO a HEMOGLOBINA GLICADA ELABORADO APROVADO DATA Ver Pg Adson Amaral Andersom Alvim 27 04 2011 001 4 5 8 9 a Coloque os adaptadores com seus c digos de barras nas posi es de 1 a 4 na rack de amostras Call Cal2 Low Control e High control tamb m j podem ser inclu dos pacientes b Certifique se de que os c digos de barras est o voltados para a parte de tr s da rack c Pipete 1mL de cada tipo de amostras dentro dos frascos espec ficos Calibradores na requerem pr dilui o Controles requerem dilui o de 1 300 com o wash d Insira a rack no sistema e Se o c digo
6. ilmente Est vel por 7 dias a 2 8 C Adicionar 1mL no microtubo de 1 5mL feito uma vez por coluna Controles Reconstituir com 0 5mL de gua destilada Aguardar 10 minutos Homogeneizar gentilmente Est vel por 7 dias a 2 a 8 C Diluir 1 300 por an lise 10uL de controle com 3mL de wash Passar os controles uma vez por dia Amostras N o necessitam de pr dilui o a menos que o volume da amostra seja menor que 2mL Se for o caso pr dilua a amostra a 1 300 no microtubo de 1 5mL 10uL de controle com 3mL de wash As amostras devem ser coletadas em tubos de v cuo contendo EDTA 5 MATERIAIS REQUERIDOS Equipamento da hemoglobina glicada 6 REAGENTES Tamp o de Elui o 1 Dois frascos contendo 2L de Bis Tris tamp o fosfato pH 6 0 Cont m lt 0 05 azida s dica como conservante Pronto para uso Tamp o de Elui o 2 Um frasco contendo 1L de Bis Tristamp o fosfato pH 6 7 Cont m lt 0 05 de azida s dica como conservante Pronto para uso Solu o de Wash Diluente Um frasco contendo 1 6L de gua deionizada com lt 0 05 de azida s dica como conservante Pronto para uso Coluna anal tica Uma coluna anal tica 4 0mm ID x 30mm Disquete Com par metros para o programa D 10 hemoglobina Asc Calibrador Diluente Um conjunto contendo 3 fracos de calibradores n vel e 3 frascos de calibrador n vel 2 e e um frasco com diluente de calibrador Primer 4 frascos de hemolisado de c lu
7. las vermelhas liofilizados com gentamicina tobramicina e EDTA como conservantes IMPRESS O PARA TREINAMENTO GRUPO SANTA HELENA Sistema Integrado de Sa de C DIGO PT LB BQ 453 ELABORADO APROVADO DATA Ver Pg HEMOGLOBINA GLICADA Adson Amaral Andersom Alvim 27 04 2011 001 3 5 e Frascos de amostras 100 frascos de 1 5mL e Papel t rmico Um rolo 6 1 PREPARO DE REAGENTES a Instalar novos Tamp es e o Wash Coloque o sistema em Sleep Remova os reagentes um de cada vez N o toque ou seque os pescadores Coloque cada garrafa de tamp o no seu lugar apropriado NOTA O frasco do tamp o 1 instalado para 200 inje es Lembre se de resetar o contador a cada troca b Ative o System Flush Tela Maintain se os lotes forem novos c Ap s instala o do segundo frasco de tamp o 1 Siga at a tela Lot Info Selecione o Buffer 1 5 de 8 na tela Toque o contador Na op o Reset Buffer selecione Reset 7 PROCEDIMENTO DETALHADO 7 1 Procedimento de Prime em uma nova coluna NOTA O prime feito uma vez a cada nova coluna a b Coloque o adaptador de microtubo com o c digo de barras PRIME na primeira posi o da rack Certifique se que o c digo de barras esta voltado para a parte de tr s da rack Verta o conte do do prime para o microtubo de 1 5mL e coloque o na primeira posi o da rack dentro do adaptador dev
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