Fer-color - Wiener lab.
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1. Ce Fer color AA M todo colorim trico direto para a determina o de ferro em soro ou plasma SIGNIFICADO CL NICO O ferro encontra se distribu do no organismo em diferentes formas que incluem hemoglobina ferro tissular e mioglobina O transporte de ferro de um rg o a outro realiza se mediante uma prote na transportadora a apotransferrina O complexo formado com o ferro conhecido como trans ferrina A ferritina localizada em quase todas as c lulas do corpo constitui uma reserva de ferro dispon vel para a forma o da hemoglobina e outras prote nas que cont m o grupo hemo A absor o de ferro realizada principalmente no duode no Tanto a ferritina como a transferrina encontram se nas c lulas da mucosa intestinal e ambas regulam a absor o de ferro Os mais grandes desordens do metabolismo de ferro relacionam se com a defici ncia ou excesso No entanto observam se altera es em muitas outras doen as como anemia doen as cardiovasculares hepatite cr nica doen as renais e infec es A anemia por perda de ferro representa um dos transtornos org nicos mais frequentes principalmente em crian as mu lheres jovens gr vidas e idosos Tamb m constituem causas de anemia ferrop nica as lceras g stricas ou duodenais e carcinoma de est mago Por outra parte o excesso de ferro associa se com outros desordens como hemosiderose hemocromatose e anemia siderobl stica FUNDAMENTO DO M TO2. Fe ug dl D corrigida x f 100 ug dl onde f P corrigido M TODO DE CONTROLE DE QUALIDADE Processar dois n veis de um material de controle de qua lidade Standatrol S E 2 niveles com concentra es conhecidas de ferro com cada determina o VALORES TE RICOS Homens 65 a 175 ug dl 11 6 31 3 umol Mulheres 50 a 170 ug dl 9 30 4 umol l VALORES DE REFER NCIA Em um grupo de 20 mulheres e 20 homens sadios com idades entre os 18 e 51 anos foram encontradas faixas de 55 a 175 ug dl com as seguintes m dias Homens 114 6 ug dl 20 5 umol Mulheres 103 3 ug dl 18 5 umol Valores de refer ncia extra dos de arquivos da Wiener lab E recomend vel que cada laborat rio estabele a seus pr prios valores de refer ncia CONVERS O DE UNIDADES AO SISTEMA SI Ferro ug dl x 0 179 Ferro umol LIMITA ES DO PROCEDIMENTO Valores de Branco aceit vel a determina o de oligoe lementos comprometem as poss veis contamina es de gua e os reagentes O Branco de Reagente realizado segundo o Manual de Instru es n o deve superar 0 150 D O devendo ser ainda desprez vel a contribui o de gua no Branco Para poder ser controlado recomenda se o uso de gua de qualidade comprovada condutibilidade menor a 0 02 uOhms Limpeza do material todo o material do laborat rio utilizado deve estar livre de ferro submergindo o durante 6 horas em HCI p a 10 15 eliminando a acidez c
3. DO O ferro s rico libera se de sua liga o com sua prote na transportadora espec fica a transferrina tamp o acetato de pH 4 5 e em presen a de um redutor o cido asc rbico Depois reage com o reagente de cor piridil bis fenil triazina sulfonato ferrozina obtendo se um produto de cor magenta que se mede a 560 nm REAGENTES FORNECIDOS A Reagente A solu o de acetato 150 mmol l para pH 4 5 contendo guanidina B Reagente B cido absc rbico C Reagente C solu o estabilizada de ferrozina S Padr o solu o de i nes Fe III equivalem a 100 ug dl Concentra es finais Acetato c eee 150 mmol l pH 4 5 Ferrozina a esssssssosneoenerenrrrnnrnrnrrrrrrrrrrrrrrrernrererns 0 2 mmol l cido absc rbico eeio 0 03 mol l CUANIa scpiessassnsrab in sreinsi sai daictal IE ECE teta lana Sa 4 0 mol l REAGENTE N O FORNECIDO Calibrador A plus da Wiener lab gua destilada INSTRU ES DE USO Reagente C pronto para uso Padr o pronto para uso Reagente de Trabalho transferir ao frasco de Reagente B a quantidade de Reagente A indicada no r tulo Colocar a data de preparo PRECAU ES Os reagentes s o para uso diagn stico in vitro Utilizar os reagentes observando as precau es habituais de trabalho no laborat rio de an lises cl nicas Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas conforme regula o local vigente ESTABILIDADE E INSTRU ES DE A
4. RMAZENAMENTO Reagentes Fornecidos s o est veis sob temperatura ambiente lt 25 C at a data do vencimento indicada na embalagem Reagente de Trabalho est vel por 3 meses a contar da data de sua prepara o conservado sob refrigera o 2 10 C ou por 10 dias sob temperatura ambiente 18 25 C IND CIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORA O DOS REAGENTES Varia es nas leituras de Brancos de Reagentes e ou Padr o s o ind cios de contamina es ocasionais gua material de vidro etc Aumento no valor dos Brancos indi car uma contamina o com ferro AMOSTRA Soro ou plasma a Coleta o paciente deve estar em jejum sendo que as extra es devem ser realizadas sempre na mesma hora preferencialmente de manh j que as oscila es fisiol gicas s o muito importantes durante o dia b Aditivos se a amostra plasma dever utilizar se hepa rina como anticoagulante c Subst ncias interferentes conhecidas n o se observa interfer ncia pela hemoglobina at 90 mg dl bilirrubina at 15 mg dl nem heparina at 50 Ul mil Amostras lip micas podem levar a resultados err neos N veis de triglicer deos de 3 72 g l produzem interfer ncias Embora hem lises ligeiras n o interferem com este m todo 870460000 01 p 4 6 o International Committee for Standardization in Hematology ICSH recomenda a utiliza o de soro livre de hem lise Refer ncia bibliogr fica de Young para efeitos de droga
5. ires 1975 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests AACC Press 4 ed 2001 870460000 01 p 6 6 S MBOLOS Os seguintes s mbolos s o utilizados nos kits de reagentes para diagn stico da Wiener lab 3 Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europ ia 98 79 CE para dispositivos m dicos de diagn stico in vitro Representante autorizado na Comunidade Europ ia vo Uso m dico diagn stico in vitro W Conte do suficiente para lt n gt testes z Data de validade Limite de temperatura conservar a XK N o congelar D Risco biol gico gt Volume ap s da reconstitui o Cont Conte do LOT N mero de lote wl Elaborado por x Nocivo Em Corrosivo Ca stico q Irritante i Consultar as instru es de uso Calibr Calibrador EE Controle ConTROL Controle Positivo conmo Controle Negativo REF N mero de cat logo W wiener lab 2000 Rosario Argentina UR130115
6. om v rios lavados com gua livre de ferro Enxugar o material perfeitamente temperatura n o superior a 80 C em cesto de a o inoxi d vel ou recoberto com pl stico Todo o material deve ser utilizado s para a determina o de ferro DESEMPENHO a Reprodutibilidade processando duplicatas das mesmas amostras no mesmo dia foram obtidos os seguintes dados N vel D P C V 146 5 ug dl 1 93 ug dl 1 32 324 6 ug dl 1 76 ug dl 0 54 Processando a mesma amostra em diferentes dias obteve se o seguinte N vel D S C V 142 8 ug dl 2 50 ug dl 1 75 314 0 ug dl 3 93 ug dl 1 25 b Recupera o adicionar quantidades conhecidas de Fe II a al quotas de um mesmo soro recuperou se entre 90 e 103 c Linearidade a rea o linear at 1000 ug dl d Limite de detec o 6 05 ug dl PAR METROS PARA ANALISADORES AUTOM TICOS Para a programa o consultar o manual de uso do analisador 870460000 01 p 5 6 a ser utilizado Para a calibra o deve se utilizar Calibra dor A plus da Wiener lab segundo os requerimentos do analisador APRESENTA O 5 x 20 ml C d 1492003 REFER NCIAS Dixon K Ann Clin Biochem 10 5 127 1973 1 C S H Am J Clin Path 56 4 543 1971 Zak B Baginski E S Epstein E y Wiener L M Clin Toxicol 4 4 621 1971 Rojk n M L Olgu n de Mariani M C Drappo G A y Albarrac n A Ill Congreso Argentino de Bioqu mica Buenos A
7. s neste m todo d Estabilidade e instru es de armazenamento o soro e o plasma heparinizado podem ser conservados at uma semana sob refrigera o 2 10 C MATERIAL NECESS RIO n o fornecido Espectrofot metro ou fotocolor metro Micropipetas e pipetas para medir os volumes indicados Tubos ou cubetas espectrofotom tricas CONDI ES DE REA O Comprimento de onda 560 nm em espectrofot metro ou 540 560 nm em fotocolor metro com filtro verde Temperatura de rea o temperatura ambiente Tempo de rea o 5 minutos Volume de amostra 200 ul Volume total de rea o 1 4 ml PROCEDIMENTO Em tr s tubos marcados B Branco de Reagente P Padr o e D Desconhecido colocar B P D gua bidestilada 200 ul Padr o 200 ul Amostra 200 ul Reagente de Trabalho 1ml 1ml 1ml Misturar Ler a absorb ncia do tubo D Branco de Soro BS em espectrofot metro a 560 580 nm ou em fotoco lor metro com filtro verde 540 560 nm levando a zero o aparelho com gua Depois adicionar Reagente C 200 ul 200 ul 200 ul Misturar imediatamente Voltar a ler cada tubo em 5 minutos levando o aparelho a zero com gua ESTABILIDADE DA MISTURA DE REA O FINAL Os tubos devem ser lidos entre 5 e 60 minutos ap s com pletados os passos do procedimento C LCULOS DOS RESULTADOS Corrigir as leituras de P e D subtraindo os Brancos cor respondentes P B P corrigido D B BS D corrigida
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