QUANTA Flash® GBM
Contents
1. Inventory Bulks clique no bot o Triggers esquerda Aparecer uma janela nova intitulada Add Triggers Remove old bottles b Abra e retire a gaveta dos res duos no instrumento BIO FLASH Elimine quaisquer tinas na gaveta de res duos secos Clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Retire as garrafas ativadoras dos respetivos suportes e clique no bot o Next Desaperte as tampas das garrafas antigas de ativadores e substitua por ativadores novos Certifique se de que as coloca uma de cada vez com as tampas coloridas correspondentes branca com branca e vermelha com vermelha c Siga as instru es na janela nova Add Triggers Add Trigger 2 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 2 no suporte branco Clique em Next d Siga as instru es na janela Add Triggers Add Trigger 1 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 1 no suporte vermelho Clique em Finish Substitua a gaveta dos res duos e feche a 4 Para substituir o recipiente da Lavagem do Sistema clique no bot o Bulks Inventory F9 canto superior direito No ecr Inventory Bulks clique no bot o Sys Rinse Na janela Add System Rinse Remove bottles clique em Next Siga as instru es na janela nova Add System Rinse Add bottle Quando o codigo de barras tiver sido aceite se necess rio clique em Finish 5 Para esvaziar o Recipiente de Res duos de Fluido a partir do ecr Inveno2. 27 07 83 11 49 06 29 15 65 ef a1 ie aim os 2 oo om 14 49 CE s4 340 09 26 11 31 07 20 15 45 a s4 ait 11 36 os 19 05 16 14 44 Ch e aga 1e aon 13 26x os ior 22 am Ci 80 969 30 81 19 1 9 04 04 35 36 L so 119 1 1132 os 90 9 7 6 274 2 9 147 4 12 4 m 1 Q I Limites de dete o intervalos lineares e pass veis de relat rio De acordo com a CLSI EP17 A o limite de dete o inferior deste ensaio aproximadamente 851 URL que equivalem a 0 7 UQ o que bastante abaixo do intervalo razo vel O limite superior de dete o cerca de 620 000 RLU que aproximadamente 38 acima do topo do intervalo razo vel Todo o intervalo pass vel de relat rio desde 2 9 UQ at 1437 8 UQ linear Realizou se um estudo de linearidade de acordo com a CLSI EP6 A e abaixo encontram se os dados resumidos Intervalo do Teste UQ Inclina o 95 IS Interce o Y 95 IS 1 a 17 6 0 95 0 91 a 1 00 0 02 0 29 a 0 69 3 9 a 35 1 1 01 0 97 a 1 05 0 277 1 14 a 0 59 4 a 46 9 0 99 0 95 a 1 04 0 202 1 35 a 1 94 60 9 a 610 5 0 90 0 96 a 1 01 0 666 9 89 a 8 56 10 6 a 97 1 0 98 0 95 a 1 01 1 252 2 89 a 0 39 155 9 a 1558 6 0 93 0 87 a 1 00 22 640 37 80 a 83 08 Interfer ncia As amostras que cont m at 10 mg dl de bilirrubina 200 mg dl de hemoglo
3. Dois 2 tubos marcados com c digo de barras com tamp o contendo anticorpos de soro humano para GBM dilu dos previamente prontos a utilizar 0 7 ml cor rosea contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes Advert ncias 1 os calibradores cont m um qu mico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da California por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos controlos deste produto foi testado e deu resultados negativos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Portanto devem manipular se os Calibradores QUANTA Flash GBM como se fossem qualquer material potencialmente infecioso Usar equipamento de prote o pessoal apropriado para trabalhar com os reagentes Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duo
4. Introduza primeiro o nome o n mero do lote a data de validade desta folha de dados no software Em seguida clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio GBM da lista e clique em Add Por fim introduza na dose alvo e DP alvo Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Para criar um novo lote para materiais de CQ existentes 1 Antes de utilizar um lote novo de Controlos QUANTA Flash GBM pela primeira vez tem de introduzir no software o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo 2 A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M V Selecione QC Ctrl F2 Realce o ensaio GBM na coluna do lado esquerdo Em seguida realce o material do controlo adequado direita GBMN para o Controlo Negativo ou GBMP para o Controlo Positivo Clique no bot o New QC Lot 3 Com cada conjunto de Controlos esta incluida uma ficha tecnica de dados especifica do lote Introduza as informa es desta ficha tecnica de dados no software Estas dever o incluir o numero do lote a data de validade a dose alvo e o DP alvo Se necess rio clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio GBM da lista e clique em Add Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Recomenda se a utiliza o dos co
5. ncia de percentagem M todo N 138 Intervalo de seguran a de 95 QUANTA Concord ncia Pos 91 0 83 6 95 8 Flash Negativo 9 36 45 Concordancia Neg 94 7 92 3 99 4 GBM CIA Concordancia Total 92 0 86 2 96 0 Sensibilidade e especificidade cl nicas O estudo de valida o cl nica incluiu 90 amostras de GPS 50 com artrite reumatoide 67 com l pus eritematoso sist mico 50 com doen a inflamat ria intestinal indiferenciada 50 com esclerose sist mica 20 com esclerose m ltipla 10 com doen a do tecido conjuntivo indiferenciada 10 com colite ulcerativa 32 com virus da hepatite B 58 com v rus da hepatite C 10 com virus da imunodefici ncia humana 10 com s filis e 30 doentes com outras doen as Abaixo encontram se os resultados destes testes Estudo cl nico Diagn stico An lise N 487 N o ar Intervalo de seguran a de 95 Positivo 86 1 87 Sensibilidade 95 6 89 0 98 8 Especificidade 99 7 98 6 100 0 Total 90 397 487 Concord ncia Total 99 0 97 6 99 7 Uma amostra de um doente com VIH Precis o e reprodutibilidade Avaliou se a precis o do ensaio QUANTA Flash GBM testando 12 doentes de acordo com o CLSI EP5 A2 e abaixo encontram se os dados resumidos Testes Amosr N M dia DP cv DP cv DP cv DP CV Ce s 215 10 48 12 54 03 16 16 74 Ce so 20 12 59 09 42 06 25 16 73 DD so
6. QUANTA Flash GBM 701143 Reagentes Para utiliza o em diagnostico n Vitro Aplica o diagn stica O QUANTA Flash GBM um imunoensaio quimioluminescente IEQ para a dete o semiquantitativa de autoanticorpos para membrana basal antiglomerular GBM IgG em soro humano no instrumento BIO FLASH O QUANTA Flash GBM uma ajuda no diagn stico de Sindroma de Goodpasture em conjunto com conclus es cl nicas e outros testes laboratoriais Resumo e explica o do teste Os anticorpos Anti GBM s o reconhecidos como sendo importantes na patog nese e no diagn stico da glomerulonefrite de progress o r pida da S ndroma de Goodpasture GPS As experi ncias de transfer ncia passiva estabeleceram que os anticorpos anti GBM podem reproduzir les o no rg o alvo A GPS n o tratada pode causar um ataque fulminante com deteriora o r pida da fun o renal por vezes acompanhada de hemorragia pulmonar grave A identifica o precoce destes doentes acarreta implica es importantes em termos de gest o e progn stico uma vez que a imunoterapia e a plasmaferese podem melhorar o resultado se institu das numa fase suficientemente precoce Os ensaios para os anticorpos anti GBM circulantes incluem ensaios de imonofluoresc ncia indireta RIA ELISA e multiplex gt A membrana basal glomerular constitu da por muitas prote nas diferentes Determinou se que a maioria dos anticorpos de doentes com GPS reage com a regi o n o colag n
7. a quantidade diferente de anticorpos GBM O Controlo Negativo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de anticorpo muito baixos O Controlo Positivo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de anticorpo desde moderados a elevados Reagentes 1 Controlo Negativo do QUANTA Flash GBM Dois 2 tubos marcados com c digo de barras com tamp o contendo anticorpos de soro humano para GBM dilu dos previamente prontos a utilizar 0 5 ml cor r sea contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes 2 Controlo Positivo do QUANTA Flash GBM Dois 2 tubos marcados com c digo de barras com tamp o contendo anticorpos de soro humano para GBM dilu dos previamente prontos a utilizar 0 5 ml cor r sea contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes Advert ncias Te Os controlos cont m um qu mico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos cont
8. agem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Precau es particulares de conserva o at a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo 2 Devem guardar se no instrumento os cartuchos de reagente abertos e permanecem est veis durante um total de 42 dias per odo ap s o qual devem eliminar se O software BIO FLASH monitoriza as datas de validade dos cartuchos colocados das curvas de calibra o bem como dos lotes do cartucho reagente Colheita prepara o e manuseamento de amostras Este procedimento deve ser efetuado com uma amostra de soro As amostras de soro com contamina o microbiana que sofreram tratamento t rmico ou que cont m part culas vis veis n o devem ser utilizadas N o deve utilizar se soro muito hemolizado lip mico ou it rico Ap s a colheita o soro deve ser separado do co gulo O documento H18 A4 da CLSI recomenda as seguintes condi es de conserva o para as amostras 1 Nao conservar as amostras a temperatura ambiente durante mais de 8 horas 2 Se o teste nao for conclu do num prazo de 8 horas guardar a amostra a 2 8 C 3 Se o teste nao for concluido num prazo de 48 horas ou se houver transpor
9. as amostras nas posi es selecionadas no rack de amostras e carregue o rack no carrossel de amostras do instrumento 4 Se todos os materiais necess rios estiverem colocados no instrumento o icone iniciar estar dispon vel a verde na parte superior do ecr Pressione o icone Start F4 para iniciar o ensaio Controlo de qualidade Os Controlos QUANTA Flash GBM vendidos em separado INOVA Numero de ltem 701142 cont m os Controlos GBM Positivos e Negativos Consulte a se o intitulada QUANTA Flash GBM Controlos 701142 deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como introduzir o valor da unidade e o desvio padr o de cada controlo no software bem como sobre o funcionamento dos controlos Recomenda se que se testem os controlos pelo menos uma vez nos dias em que se utiliza o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais C lculo dos resultados Para cada lote novo de QUANTA Flash GBM produz se uma Curva Modelo de seis pontos na INOVA Esta curva log stica de quatro par metros est codificada no c digo de barras de cada cartucho de reagente Assim que o cartucho de reagente tenha sido calibrado a curva de trabalho espec fica da m quina ser utilizada para converter as ULR em UQ Pode ent o classificar se a reatividade do anticorpo para GBM de acordo com a tabela abaixo Reatividade UQ Negativo lt 20 Positivo 220 A reati
10. bina 1000 mg dl de triglic ridos 224 mg dl de colesterol ou 500 Ul ml IgM de fator reumatoide n o mostraram interfer ncia no QUANTA Flash GBM QUANTA Flash GBM 701141 Calibradores Para utiliza o em diagnostico n Vitro Aplica o diagn stica Os Calibradores QUANTA Flash GBM destinam se a utiliza o com o imunoensaio quimioluminescente EQL QUANTA Flash GBM no instrumento BIO FLASH Cada calibrador estabelece um ponto de refer ncia para a curva de trabalho utilizada na medi o de autoanticorpos para membrana basal antiglomerular GBM IgG em soro humano Resumo e princ pios do procedimento O QUANTA Flash GBM CIA utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que esta armazenada no c digo de barras do cartucho de reagente Os Calibradores QUANTA Flash GBM est o concebidos para produzir uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento a partir de par metros da Curva Modelo com um ponto de decis o baseado nas carater sticas de desempenho e na avalia o cl nica do QUANTA Flash GBM CIA Antes da atribui o do valor testam se os calibradores em v rios instrumentos com diversos lotes de reagentes Reagentes 1 Calibrador 1 do QUANTA Flash GBM Dois 2 tubos marcados com c digo de barras com tamp o contendo anticorpos de soro humano para GBM dilu dos previamente prontos a utilizar 0 7 ml cor rosea contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes 2 Calibrador 2 do QUANTA Flash GBM
11. e INOVA QUANTA Flash GBM Valores obtidos com m todos de ensaio de diferentes fabricantes n o podem ser comparados A magnitude dos n veis de anticorpos descritos n o pode ser sempre correlacionada com um t tulo final Limita es do procedimento 1 Nem todos os doentes com Sindroma de Goodpasture sao positivos para anticorpos GBM 2 Os resultados deste ensaio devem ser utilizados em conjunto com as conclus es cl nicas e outros testes serol gicos 3 A mistura inadequada dos reagentes antes da primeira utiliza o pode levar a resultados erroneos 4 As carateristicas de desempenho deste ensaio nao foram determinadas para outras matrizes al m do soro Valores esperados Para estabelecer os valores esperados testou se o soro de 400 dadores de sangue aparentemente saud veis A m dia foi 3 3 UQ e os 95 foram calculados como 5 1 UQ Recomenda se que cada laborat rio estabele a os seus pr prios intervalos de refer ncia para refletir a popula o de refer ncia Rastreabilidade Atualmente n o existe uma norma internacional reconhecida para a medi o de anticorpos anti GBM Comparacao do metodo com dispositivo implicado As amostras para a an lise de compara o do m todo inclu ram as amostras dos estudos de valida o cl nica que estavam dentro do intervalo pass vel de relat rio do ensaio Testaram se estas amostras no QUANTA Flash GBM e no dispositivo implicado ELISA Compara o do GBM ELISA Concord
12. e de temperatura N o reutilizar Riscos biol gicos C digo do lote N mero de refer ncia Utilizar at Fabricante Representante autorizado Cont m o suficiente para lt n gt testes Controlo Positivo Controlo Negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Reciclar a caixa de papel Este lado para cima QUANTA Flash uma marca registada comercial da INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH uma marca comercial registada da Biokit S A O 2012 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos da Am rica Assist ncia T cnica apenas EUA e Canada 877 829 4745 Assist ncia T cnica Fora dos EUA 1 858 805 950 support inovadx com Representante Autorizado na UE Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemanha Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621140PRT Setembro 2012 Revisao 2
13. io NC1 da cadeia de colag nio 3 IV Os ensaios ELISA utilizando antig nio 3 IV espec fico provaram ser altamente sens veis e espec ficos para a GPS Raramente se encontram anticorpos Anti GBM em doentes saud veis e os doentes tratados ou em remiss o tendem a ter n veis mais baixos de anticorpo Os doentes com GPS podem apresentar carater sticas cl nicas que podem sugerir determinados tipos de vasculite autoimune Por este motivo sugere se a inclus o da dete o de autoanticorpos de anti GBM juntamente com a an lise de anticorpos anti neutr filos citoplasm ticos ANCA como parte da an lise serologica de doentes com suspeita de sindroma reno pulmonar Baseando se na natureza de r pida progress o da GPS a dete o precoce de anticorpos anti GBM da mais alta import ncia para o diagn stico e o tratamento dos doentes Princ pio do procedimento O GMB purificado nativo est revestido por esferas de paramagn ticas que est o guardadas no cartucho de reagente em condi es que conservem o antig nio no seu estado reativo Quando o cartucho do ensaio est pronto para ser utilizado pela primeira vez invertido todo o cartucho v rias vezes at completa mistura dos reagentes O cartucho de reagente ent o carregado no instrumento BIO FLASH No instrumento dilui se previamente uma amostra de soro do doente utilizando lavagem do sistema adicionada a uma tina pl stica descart vel Pequenas quantidades de
14. ntrolos QUANTA Flash GBM uma vez por cada dia que se utilize o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada controlo para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo de controlo e coloque ambos numa prateleira de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os na prateleira Coloque a prateleira de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos de controlo e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Rastreabilidade Atualmente n o existe uma norma internacional reconhecida para a medi o de anticorpos anti GBM Limita es Estes controlos est o concebidos para 15 utiliza es A etiqueta de cada tubo de controlo tem uma fila de 15 caixas que podem retirar se para verificar o numero de utiliza es O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no ins
15. o Tris Tween 20 estabilizadores proteicos e conservantes C Marcador IgG anticorpos IgG anti humanos marcados isoluminol contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservante Advert ncias 1 O tamp o de ensaio cont m um qu mico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Usar equipamento de prote o pessoal apropriado para trabalhar com os reagentes Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro 2 Este ensaio destina se apenas a utiliza o com o instrumento BIO FLASH Uma vez aberto deve guardar se este cartucho de reagente no carrossel do reagente do instrumento Deve ter se cuidado para evitar entornar os reagentes quando se coloca pela primeira vez o cartucho reagente no instrumento 4 A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lav
16. r do cartucho de reagente at encaixar numa posi o bloqueada As patilhas dever o deixar de estar vis veis N O INVERTA O CARTUCHO ABERTO 4 Coloque cuidadosamente o cartucho de reagente em qualquer ranhura aberta no carrossel do reagente do instrumento BIO FLASH Quando o cartucho colocado no carrossel do reagente o instrumento executa a mistura peri dica adicional das esferas Calibra o do ensaio 1 Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o e da em diante a cada 75 dias O software n o permitir utilizar um lote se estes requisitos n o forem cumpridos 2 Consulte a se o intitulada QUANTA Flash GBM Calibradores 701141 deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como calibrar o cartucho de reagente 3 Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Programa o e realiza o de testes 1 Pressione o bot o Worklist na parte superior do ecr e selecione o separador Racks no fundo 2 Selecione o rack de amostra a utilizar real ando o rack no ecr ou digitalizando o c digo de barras com o leitor de c digo de barras port til Digitalize ou escreva o nome da amostra selecione o tipo de amostra o tipo de recipiente tubo ta a e selecione GBM a partir do painel do ensaio Repita estes passos para todas as amostras 3 Carregue
17. rador do BIO FLASH Precau es particulares de conserva o 1 Conserve os controlos por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem est veis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Podem utilizar se os controlos abertos ate 15 vezes com um tempo maximo de 10 minutos inseridos no instrumento por utiliza o O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento por um per odo total superior a 2 2 horas dever se o eliminar Utilizar o mesmo tubo de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas pode originar resultados errados Para a estabilidade ideal retire os controlos do sistema imediatamente ap s a amostragem e guarde os a 2 8 C tapados no frasco original Procedimento Para criar novos materiais de CQ para o ensaio GBM 1 Antes de utilizar Controlos QUANTA Flash GBM pela primeira vez no instrumento tem de introduzir no software o nome o lote as r plicas data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more option Ctrl M VW Selecione QC Ctrl F2 Clique no bot o New QC Material Com cada conjunto de Controlos est inclu da uma ficha t cnica de dados espec fica do lote
18. rolos deste produto foi testado e deu resultados negativos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Portanto devem manipular se os Controlos QUANTA Flash GBM como se fossem qualquer material potencialmente infecioso Usar equipamento de prote o pessoal apropriado para trabalhar com os reagentes 5 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 2 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Os Controlos QUANTA Flash GBM destinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash GBM N o transfira os reagentes do controlo para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para identificar o controlo Uma vez aberto cada tubo de controlo est em condi es de ser utilizado at 15 vezes com um tempo m ximo de 10 minutos inserido no instrumento por utiliza o A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do ope
19. ry Bulks clique no bot o Fluid Waste Retire e elimine os res duos de fluido Clique em Seguinte Quando tiver substitu do a garrafa vazia clique em Finish M todo Prepara o do cartucho de reagente Da primeira vez que utilizar o cartucho do reagente tem de seguir os passos seguintes para instalar corretamente o cartucho no instrumento BIO FLASH Nota N o utilize o cartucho de reagente se observar quaisquer sinais de danos Cartucho de Reagente QUANTA Flash GBM As micropart culas assentam durante o envio e armazenamento e necessitam de agita o para voltarem a ficar em suspens o 1 Da primeira vez que utilizar o cartucho inverta suavemente o cartucho 30 vezes evitando a forma o de espuma Verifique a re suspens o completa das micropart culas Se as micropart culas n o estiverem totalmente em suspens o continue a inverter o cartucho at que as micropart culas estejam completamente em suspens o Se as micropart culas n o ficarem em suspens o NAO UTILIZE O CARTUCHO 2 Assim que as micropart culas ficarem em suspens o coloque o cartucho de reagente numa superf cie s lida para remover a patilha vermelha Com uma m o segure o cartucho de reagente no lugar Com a outra m o segure firmemente a patilha vermelha na parte de tr s do cartucho de reagente e puxe a totalmente para fora 3 Pressione as duas patilhas nos lados da tampa perfurada parte cinzenta e exer a press o na parte superio
20. s Precau es 1 2 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Os calibradores QUANTA Flash GBM destinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash GBM N o transfira os reagentes calibradores para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para combinar os calibradores com o tipo de ensaio adequado Ap s aberto um tubo calibrador mant m se bom durante um per odo de 8 horas ou 4 calibra es ap s o qual tem de eliminar se A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Precau es particulares de conserva o 1 2 Conserve os calibradores por abrir a 2 8 C N o congele Os reagentes permanecem est veis at data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Devem eliminar se os calibradores abertos ap s 8 horas Procedimento 1 Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar este lote novo at que seja calibrado Para al m disso tem de calibrar se cada lote de cartucho de reagente a cada 75 dias An
21. soro dilu do do doente as esferas de GBM e o tamp o de ensaio s o todos combinados numa segunda tina e misturados Incuba se esta tina a 37 C As esferas s o ent o magnetizadas e lavadas v rias vezes Adiciona se ent o tina o anticorpo IgG anti humano conjugado de isoluminol e incuba se a 37 C Mais uma vez as esferas s o magnetizadas e lavadas repetidamente O conjugado de isoluminol produz uma rea o luminescente quando se adicionam os reagentes Ativadores tina A luz produzida a partir desta rea o medida como Unidades Relativas de Luz URL pelo sistema tico BIO FLASH As URL s o proporcionais quantidade de conjugado de isoluminol ligado que por sua vez proporcional quantidade de autoanticorpos anti GBM IgG ligados ao GBM nas esferas O ensaio QUANTA Flash GBM utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que carregada no instrumento atrav s do c digo de barras do cartucho de reagente Baseando se no resultado da execu o de dois calibradores cria se uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento que se utiliza para calcular unidades quimioluminescentes UQ a partir da URL obtida para cada doente Reagentes 1 O cartucho de reagente QUANTA Flash GBM cont m os reagentes seguintes para 50 determina es a Esferas paramagn ticas revestidas GBM num l quido contendo tamp o estabilizadores de prote na e conservante b Tampao de ensaio cor de rosa contendo tampao salin
22. te da amostra congelar a 20 C ou a uma temperatura inferior AS amostras congeladas devem ser bem agitadas depois de descongelarem e antes de serem testadas Procedimento Materiais fornecidos 1 Cartucho de Reagente QUANTA Flash GBM Materiais adicionais necessarios mas nao fornecidos Instrumento BIO FLASH com computador Lavagem do Sistema BIO FLASH Numero de Pe a 3000 8205 Ativadores BIO FLASH Numero de Pega 3000 8204 Tinas BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8206 Calibradores QUANTA Flash GBM Numero de Pega 701141 Controlos QUANTA Flash GBM N mero de Pe a 701142 Utilizar o Analisador Quimioluminescente BIO FLASH 1 Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Para informa es adicionais e resolu o de problemas com este ensaio contacte a assist ncia t cnica da INOVA Diagnostics Inc no endere o ou atrav s do n mero de telefone indicados no final das Instru es deste Folheto 2 Para esvaziar o recipiente de res duos s lidos abra a gaveta dos res duos Remova o recipiente de res duos s lidos e elimine as tinas usadas adequadamente Substitua o recipiente de res duos s lidos feche a gaveta dos res duos e clique em Yes na janela Empty Waste Drawer 3 Para substituir os ativadores clique no bot o Bulks Inventory F9 superior direito a No ecr
23. tes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada calibrador para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo calibrador e coloque ambos numa prateleira de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os na prateleira Coloque a prateleira de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os codigos de barras nos tubos calibradores e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH O instrumento testar ent o cada calibrador em triplicado Ap s os Calibradores terem sido testados o software exigir a valida o da calibra o A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M V Selecione Calibration Ctrl F3 Na janela Calibra o realce o ensaio pretendido e clique em Details Na nova janela Calibration Details selecione a calibra o que acabou de ser executada A Curva Modelo aparece como uma linha tracejada ao passo que a Curva de Trabalho aparece como uma linha cont nua Se os resultados da calibra o forem v lidos aparecer um bot o de valida o no canto inferior esquerdo do ecr Cliq
24. trumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Refer ncias Pedchenko V Bondar O Fogo AB Vanacore R Voziyan P Kitching AR et al Molecular architecture of the Goodpasture autoantigen in anti GBM nephritis N Engl J Med 2010 363 343 354 Westman KW Bygren PG Eilert Wiik A Wieslander J Rapid screening assay for anti GBM antibody and ANCAs an important tool for the differential diagnosis of pulmonary renal syndromes Nephrol Dial Transplant 1997 12 1863 1868 Mahler M Radice A Sinico RA Damoiseaux J Seaman A Buckmelter K et al Performance evaluation of a novel chemiluminescence assay for detection of anti GBM antibodies an international multicenter study Nephro Dial Transplant 2011 Jaskowski TD Martins TB Litwin CM Hill HR Comparison of four enzyme immunoassays for the detection of immunoglobulin G antibody against glomerular basement membrane J Clin Lab Anal 2002 16 143 145 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories Centers for Disease Control and Prevention National Institutes of Health 2007 Fifth Edition S mbolos Utilizados 09 5 E rm Ela m z K E ur gt re O 2 gj ir N E f gt Dispositivo m dico para diagn stico n vitro Consultar as instru es de utiliza o Limit
25. ue no bot o Validate Calibration Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Recomenda se testar os Controlos QUANTA Flash GBM vendidos separadamente n mero de pe a 701142 ap s a calibra o de um lote de cartucho de reagente Rastreabilidade Atualmente n o existe uma norma internacional reconhecida para a medi o de anticorpos anti GBM Limita es Estes calibradores est o concebidos para 4 calibra es O tempo total em que os tubos calibradores podem estar destapados dentro do instrumento de 8 horas Se se deixarem os calibradores destapados dentro do instrumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos calibradores durante mais de 4 calibra es e ou mais de 8 horas pode originar uma calibra o incorreta do ensaio que por sua vez pode fornecer resultados errados QUANTA Flash GBM 701142 Controlos Para utiliza o em diagn stico In Vitro Aplica o diagn stica Utilizam se os Controlos QUANTA Flash GBM para controlo da qualidade do kit de imunoensaio quimioluminescente EQL QUANTA Flash GBM testado num instrumento BIO FLASH utilizado na medi o de autoanticorpos para membrana basal antiglomerular GBM IgG em soro humano Resumo e princ pios do procedimento Os Controlos QUANTA Flash GBM s o constitu dos por um Controlo Negativo e um Controlo Positivo Cada um cont m um
26. vidade em UQ est relacionada diretamente com o t tulo do autoanticorpo na amostra do doente Aumentos e diminui es nas concentra es do anticorpo no doente refletir se o numa subida ou descida correspondente em UQ proporcionalmente quantidade de anticorpo O intervalo pass vel de relat rio do ensaio de 2 9 UQ para 1437 8 UQ Se o resultado de um doente for inferior a 2 9 UQ ent o o sistema BIO FLASH indic lo como lt 2 9 UQ Visto ser inferior a 20 UQ considera se um resultado negativo Se o resultado de um doente for superior a 1437 8 UQ ent o o sistema BIO FLASH indica lo a como gt 1437 8 UQ Este considerado um resultado positivo O software BIO FLASH disponibiliza uma op o de Novo teste autom tico Se esta op o estiver selecionada o instrumento retestar automaticamente qualquer amostra que tenha um resultado gt 1437 8 UQ diluindo a mais por um fator de 20 e calculara a UQ real utilizando este fator de dilui o adicional Interpreta o dos resultados O Ensaio QUANTA Flash tem capacidade para detetar pequenas diferen as em popula es de doentes Cada laborat rio deve estabelecer os seus pr prios valores de refer ncia com base nos seus controlos e popula o de doentes em fun o dos seus pr prios procedimentos estabelecidos Sugere se que os resultados apresentados pelo laborat rio incluam a declara o Obtiveram se os seguintes resultados com o imunoensaio quimioluminescent
Download Pdf Manuals
Related Search