QUANTA Flash® Centromere
Contents
1. ee Toal tr s amostras foram de doentes com SSc e 8 amostras foram de doentes com LES duas com diagn stico desconhecido Doente com MCTD com S ndrome de Raynaulds Precis o e reprodutibilidade Avaliou se a precis o do ensaio do Centromero QUANTA Flash testando 8 doentes de acordo com o CLSI EP5 A2 e abaixo encontram se os dados resumidos Durante os Testes Entre Testes Entre Dias Total Amostra N M dia UG DP CV DP CV DP CV DP cv DA ol 62 02 264 02 80 05 54 04 67 e fo iss osf arel os 216 07 49 06 ss c feol 229 oo ame 05 22 09 40 14 59 o feol eosl 20 az 19 21 34 55 41 E feol 1083 57 _5 6 04 04 42 41 71 69 CF f l 1979 182 67 o0 00 119 60 177 9 0 a eol 324 245 76 00 00 278 8 7 97 1 11 5 CH eo 4682 336 73 00 0 0 229 4 9 407 8 8 Limites de dete o intervalos lineares e de medi o analitica De acordo com a CLSI EP17 A o limite de dete o inferior deste ensaio aproximadamente 370 2 URL que equivale a 1 0 UQ o que bastante abaixo do intervalo de medi o anal tico O limite superior de dete o cerca de 774 000 RLU que aproximadamente 39 acima do topo do intervalo de medi o anal tico Todo o intervalo de medi o anal tico desde 3 4 UQ at 708 9 UQ linear Realizou se um estudo de linearidade de acordo com a CLSI EP6 A e abaixo encontram se os dados resumidos Amostra Inte2. a amostra a 2 8 C 3 Se o teste n o for conclu do num prazo de 48 horas ou para transporte da amostra congelar a 20 C ou temperatura inferior As amostras congeladas devem ser bem agitadas depois de descongelarem e antes de serem testadas Procedimento Materiais Fornecidos Cartucho de Reagente do Centromero QUANTA Flash Tamp o de ressuspensao Pipeta de transfer ncia Materiais Adicionais Necessarios mas nao Fornecidos Instrumento BIO FLASH com computador Lavagem do Sistema BIO FLASH Numero de Pe a 3000 8205 Ativadores BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8204 Tinas BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8206 Calibradores de Centr mero QUANTA Flash N mero de Pe a 701196 Controlos de Centr mero QUANTA Flash N mero de Pe a 701197 Utilizar o Analisador Quimioluminescente BIO FLASH 1 Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Para informa es adicionais e resolu o de problemas com este ensaio contacte a assist ncia t cnica da INOVA Diagnostics Inc no endere o ou atrav s do n mero de telefone indicados no final das Instru es deste Folheto Para esvaziar o recipiente de res duos s lidos abra a gaveta dos res duos Remova o recipiente de res duos s lidos e elimine as tinas usadas adequadamente Substitua o recipiente de res duos s lidos
3. a large cohort of systemic sclerosis patients comparison between immunofluorescence CENP A and CENP B ELISA Clin Chim Acta 2011 412 1937 1943 Walker JG Pope J Baron M Leclercq S Hudson M Taillefer S Edworthy SM et al The development of systemic sclerosis classification criteria Clin Rheumatol 2007 26 1401 1409 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 Fifth Edition Simbolos Utilizados 8 gt E gt O ml ONTR ONTR me DBE SHETE Meo Dispositivo m dico para diagn stico n Vitro Consultar as instru es de utiliza o Limite de temperatura N o reutilizar Riscos biol gicos C digo do lote N mero de refer ncia Utilizar at Fabricante Representante autorizado Cont m o suficiente para lt n gt testes Controlo Positivo Controlo Negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Reciclar a caixa de papel Este lado para cima QUANTA Flash uma marca comercial registada da INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH uma marca comercial registada da Biokit S A 2012 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road san Diego CA 92131 Estados Unidos da Am rica Assist ncia T cnica apenas EUA e Canada 877 829 4745 Assist ncia T cnica Fora dos EUA 1 858 805 7950 support inovadx com Representante Autorizado na UE Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenh
4. centromero s o reconhecidos enquanto marcador serol gico de uma forma de esclerose sist mica SSc ou escleroderma que comummente referido como sindrome de CREST calcinose fen meno de Raynaud imobilidade esof gica esclerodactilia e telangiectasia Os doentes com anticorpos anti centr mero t m tend ncia a ter uma forma mais benigna de SSc com menos envolvimento sist mico Os anticorpos para as proteinas do Centr mero s o virtualmente exclusivas em amostras com anticorpos anti RNA Pol III ou anti Scl 70 Princ pio do Procedimento O recombinante de proteina B centr mero est revestido por esferas paramagn ticas que est o guardadas no cartucho de reagente em condi es que conservem o antig nio no seu estado reativo Quando o cartucho do ensaio estiver pronto a ser utilizado pela primeira vez adiciona se uma solu o tamp o ao tubo que cont m as esferas conservadas e as esferas s o misturadas com o tamp o O cartucho de reagente ent o carregado no instrumento BIO FLASH No instrumento dilui se previamente uma amostra de soro do doente utilizando lavagem do sistema adicionada a uma tina pl stica Pequenas quantidades de soro dilu do do doente as esferas de CENP B e o tamp o de ensaio s o todos combinados numa segunda tina e misturados Incuba se esta tina a 37 C As esferas s o ent o magnetizadas e lavadas v rias vezes Adiciona se ent o a tina o anticorpo conjugado de isoluminol e incuba se a 37 C Mai
5. reagente e mantenha a nesta posi o Transfira analiticamente todo o conte do do frasco para o tubo do reagente de esferas atrav s de um nico orif cio na parte superior do cartucho de reagente C Misture os conte dos do tubo do reagente esfera aspirando e doseando o l quido pelo menos 30 vezes Se estiverem vis veis peda os de esferas continue a misturar a solu o mais 30 vezes Se as micropart culas n o ficarem em suspens o NAO UTILIZE O CARTUCHO d Certifique se de que pipeta todo o l quido antes de retirar a pipeta do tubo e elimin la 4 Retire o autocolante da parte superior do cartucho de reagente para p r vista os outros tr s orif cios 5 Coloque o cartucho de reagente em qualquer ranhura aberta no carrossel do reagente do instrumento BIO FLASH Quando o cartucho colocado no carrossel do reagente o instrumento executa a mistura peri dica adicional das esferas Calibracao do ensaio 1 Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar este lote novo at que seja calibrado 2 Consulte a sec o intitulada QUANTA Flash Centr mero Calibradores do 701196 deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como calibrar o cartucho de reagente 3 Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Pr
6. 4 UQ Sensibilidade e especificidade cl nicas O estudo de valida o cl nica incluiu 137 amostras de doentes com esclerose sist mica SSc 50 com artrite reumatoide 137 com l pus eritematoso sist mico 49 com doen a inflamat ria intestinal 27 com doen a de Crohn 30 com colite ulcerativa 19 com esclerose m ltipla 31 com v rus da hepatite B 24 com v rus da hepatite C 8 com v rus da imunodefici ncia humana 9 com s filis e 37 doentes com outras doen as Incluiram se ainda amostras de 400 dadores de sangue normais Abaixo encontram se os resultados destes testes Diagn stico __ An lise Estudo cl nico N 898 ses Intervalo de seguran a de 95 Positivo Sensibilidade Centr meroQ 23 4 16 6 31 3 UANTA Negativa Ser HERE 821 958 5 amostras foram retiradas de indiv duos aparentemente e uma amostra de um doente com MCTD uma amostra de um doente CREST incompleto CRES e uma amostra de um doente com LES 7 8 amostras foram tamb m positivas com o ELISA Comparacao do metodo com dispositivo implicado As amostras para a an lise de compara o do metodo incluiram amostras dos estudos de valida o cl nica e da compara o anal tica Testaram se estas amostras no Centromero QUANTA Flash e no dispositivo implicado ELISA Compara o do M todo Centromero ELISA Concordancia de percentagem N 361 Intervalo de seguranca de 95 Concordancia Pos i rea di ai ancia eg Sac om fo fem omg Sees
7. Antes de utilizar Controlos do Centromero QUANTA Flash pela primeira vez no instrumento tem de introduzir no software o nome o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Clique no bot o New QC Material Com cada conjunto de Controlos est inclu da uma ficha de dados espec fica do lote Introduza primeiro o nome o n mero do lote a data de validade desta folha de dados no software Em seguida clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio do Centr mero da lista e clique em Add Por fim introduza na dose alvo e DP alvo Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Para criar um novo lote para materiais de CQ existentes 1 Antes de utilizar um lote novo de Controlos do Centromero QUANTA Flash pela primeira vez tem de introduzir no software o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo A partir do ecra Instrument Summary clique no botao de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Realce o ensaio CEN na coluna do lado esquerdo Em seguida realce o material do controlo adequado direita CENN para o Controlo Negativo ou CENP para o Controlo Positivo Clique no bot o New QC Lot o Com cada conjunto de Controlos est inclu
8. NTA Flash Centromere 701197 Controlos Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro Utiliza o Prevista Os Controlos do Centromero QUANTA Flash destinam se a efeitos de controlo de qualidade do kit de imunoensaio quimioluminescente de Centr mero QUANTA Flash CIA num instrumento BIO FLASH Resumo e princ pios do procedimento Os Controlos do Centromero QUANTA Flash MPO s o constitu dos por um Controlo Negativo e um Controlo Positivo Cada um cont m uma quantidade diferente de anticorpos do Centromero O Controlo Negativo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de anticorpo muito baixos O Controlo Positivo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de anticorpo desde moderados a elevados Reagentes 1 Controlo Negativo do Centr mero QUANTA Flash dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para centr mero em solu o tamp o estabilizadores e conservantes 2 Controlo Positivo do Centr mero QUANTA Flash dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para centr mero em solu o tamp o estabilizadores e conservantes Advert ncias Te Os controlos cont m um qu mico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este pr
9. O tamp o de ensaio cont m um qu mico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro 2 Este ensaio destina se apenas a utiliza o com o instrumento BIO FLASH 3 O protocolo para a ressuspensao deve ser criteriosamente respeitado 4 Uma vez aberto deve guardar se este cartucho de reagente no carrossel do reagente do instrumento Deve ter se cuidado para evitar entornar os reagentes quando se coloca pela primeira vez o cartucho de reagente no instrumento 5 A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente pode
10. QUANTA Flash Centr mero 701198 Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O N O SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o Prevista O Centromero QUANTA Flash um imunoensaio quimioluminescente IEQ para a dete o semiquantitativa de autoanticorpos para prote na B de centr mero em soro humano no instrumento BIO FLASH Utiliza se este teste em conjunto com conclus es cl nicas para ajudar na avalia o de doen as do tecido conjuntivo incluindo a esclerose sist mica Resumo e Explica o do Teste Os anticorpos reativos com a regi o do centromero de cromossomas foram os primeiros descritos em 1980 Tradicionalmente os anticorpos anti centromero CENP s o detetados por imunofluoresc ncia IIF utilizando linhas de c lulas de cultura de tecidos de divis o r pida como o HEp 2 como substrato O que referido como centr mero n o se conhece como consistido por subcomponentes de proteinas sendo as diagnosticamente mais importantes as CENP A CENP B e CENP C Muitas das unidades centrom tricas foram isoladas ou clonadas Muitos outros antig nios foram identificados mas os anticorpos aos mesmos s o reconhecidos com muito menos frequ ncia A maior parte dos ensaios para a dete o de anticorpos anti CENP t m como base CENP B recombinado que foram reportados como tendo uma sensibilidade de cerca de 95 quando comparado com a IIF utilizando substrato de c lulas HEp 2 Os anticorpos
11. UQ real utilizando este fator de dilui o adicional Resultados O Ensaio QUANTA Flash tem capacidade para detetar pequenas diferen as em popula es de doentes Cada laborat rio deve estabelecer os seus pr prios valores de refer ncia com base nos seus controlos e popula o de doentes em fun o dos seus pr prios procedimentos estabelecidos Sugere se que os resultados apresentados pelo laborat rio incluam a declara o Obtiveram se os resultados seguintes com o imunoensaio quimioluminescente do Centr mero INOVA QUANTA Flash Valores obtidos com m todos de ensaio de diferentes fabricantes n o podem ser comparados A magnitude dos n veis de anticorpos descritos n o pode ser sempre correlacionada com um t tulo final Limita es do Procedimento 1 Nem todos os doentes com esclerose sistemica sao positivos para anticorpos anti CENP B 2 Os resultados deste ensaio devem ser utilizados em conjunto com as conclus es cl nicas e outros testes serologicos 3 A falha de ressuspender adequadamente as esferas revestidas do Centromero pode resultar em valores mais baixos do que se as esferas estivessem devidamente ressuspendidas 4 As carateristicas de desempenho deste ensaio nao foram determinadas para outras matrizes al m do soro Valores Esperados Para estabelecer os valores esperados testou se o soro de 400 dadores de sangue aparentemente saud veis A m dia foi lt 3 4 UQ e os 95 foram calculados como lt 3
12. a internacional para anticorpos anti Centr mero que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Centr mero Em vez deste testou se o soro de refer ncia do Center of Disease Control and Prevention para anticorpos anti Centromero IS2187 ANA 8 ANA 8 FANA padr o Centr mero e determinou se uma concentra o de 500 8 UQ Limita es Estes controlos est o concebidos para 15 utiliza es A etiqueta de cada tubo de controlo tem uma fila de 15 caixas que podem retirar se para verificar o n mero de utiliza es O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Refer ncias Fritzler MJ Rattner JB Luft LM Edworthy SM Casiano CA Peebles C et al Historical perspectives on the discovery and elucidation of autoantibodies to centromere proteins CENP and the emerging importance of antibodies to CENP F Autoimmun Rev 2011 10 194 200 Mahler M Fritzler MJ Epitope specificity and significance in systemic autoimmune diseases Ann N Y Acad Sci 2010 1183 267 287 Mahler M You D Baron M Taillefer SS Hudson M Canadian Scleroderma Research Group CSRG Fritzler MJ Anti centromere antibodies in
13. ar se os Calibradores do Centr mero QUANTA Flash como se fossem qualquer material potencialmente infecioso Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes 5 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precaucoes 1 2 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Os Calibradores do Centr mero QUANTA Flash destinam se a utiliza o com o ensaio Centr mero QUANTA Flash N o transfira os reagentes calibradores para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para combinar os calibradores com o tipo de ensaio adequado Ap s aberto um tubo calibrador mant m se bom durante um per odo de 8 horas ou 4 calibra es ap s o qual tem de eliminar se A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva o 1 2 Conserve os calibradores por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem estaveis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme desc
14. da uma ficha de dados espec fica do lote Introduza as informa es desta ficha de dados no software Estas dever o incluir o n mero do lote a data de validade a dose alvo e o DP alvo Se necess rio clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio CEN da lista e clique em Add Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Recomenda se a utiliza o dos controlos do Centr mero QUANTA Flash uma vez por cada dia que se utilize o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada controlo para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo de controlo e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos de controlo e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Rastreabilidade N o est dispon vel soro de refer nci
15. em Rinse Add bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite se necess rio clique em Finish Para esvaziar o Recipiente de Res duos de Fluido a partir do ecr Inventory Bulks clique no bot o Fluid Waste Retire e elimine os res duos de fluido Clique em Next Quando tiver substitu do a garrafa vazia clique em Finish Metodo Preparacao do cartucho de reagente Na primeira vez que utilizar um cartucho de reagente deve furar os selos de conserva o nos tubos de reagente e misturar as esferas revestidas do Centr mero com o tamp o de ressuspens o Nota N o utilize o cartucho de reagente se observar quaisquer sinais de danos 1 Coloque o cartucho de reagente numa superf cie s lida Com uma m o segure o cartucho de reagente no lugar Com a outra m o segure firmemente a patilha vermelha na parte de tr s do cartucho de reagente e puxe a totalmente para fora 2 Pressione as duas patilhas nos lados da tampa perfurada parte cinzenta e exer a press o na parte superior do cartucho de reagente at encaixar numa posi o bloqueada As patilhas dever o deixar de estar vis veis 3 Ressuspenda os reagentes do kit a Destape o frasco do tamp o de ressuspens o e recolha fluido para a pipeta de transfer ncia fornecida Ser utilizado todo o conte do do frasco b Fa a deslizar a porta no cartucho de reagente para a posi o de aberta pressionando suavemente o lado estreito no cartucho de
16. er executada A Curva Modelo aparece como uma linha tracejada ao passo que a Curva de Trabalho aparece como uma linha cont nua Se os resultados da calibra o forem v lidos aparecer um bot o de valida o no canto inferior esquerdo do ecr Clique no bot o Validate Calibration Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Recomenda se testar os Controlos do Centr mero QUANTA Flash vendidos separadamente numero de pe a 701197 ap s a calibra o de um lote de cartucho de reagente Rastreabilidade Nao esta disponivel soro de refer ncia internacional para anticorpos anti Centromero que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Centromero Em vez deste testou se o soro de refer ncia do Center of Disease Control and Prevention para anticorpos anti Centr mero 152187 ANA 8 ANA 8 FANA padr o Centromero e determinou se uma concentra o de 500 8 UQ Limita es Estes calibradores est o concebidos para 4 calibra es O tempo total em que os tubos calibradores podem estar destapados dentro do instrumento de 8 horas Se se deixarem os calibradores destapados dentro do instrumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos calibradores durante mais de 4 calibra es e ou mais de 8 horas pode originar uma calibra o incorreta do ensaio que por sua vez pode fornecer resultados errados QUA
17. feche a gaveta dos res duos e clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Para substituir os ativadores clique no bot o Bulks Inventory F9 superior direito a No ecr Inventory Bulks clique no bot o Triggers esquerda Aparecer uma janela nova intitulada Add Triggers Remove old bottles 4 b Abra e retire a gaveta dos res duos no instrumento BIO FLASH Elimine quaisquer tinas na gaveta de res duos secos Clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Retire as garrafas ativadoras dos respetivos suportes e clique no bot o Next Desaperte as tampas das garrafas antigas de ativadores e substitua por ativadores novos Certifique se de que as coloca uma de cada vez com as tampas coloridas correspondentes branca com branca e vermelha com vermelha c Siga as instru es na janela nova Add Triggers Add Trigger 2 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 2 no suporte branco Clique em Next d Siga as instru es na janela Add Triggers Add Trigger 1 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 1 no suporte vermelho Clique em Finish Substitua a gaveta dos res duos e feche a Para substituir o recipiente da Lavagem do Sistema clique no bot o Bulks Inventory F9 canto superior direito No ecr Inventory Bulks clique no bot o Sys Rinse Na nova janela Add System Rinse Remove bottles clique em Next Siga as instru es na janela nova Add Syst
18. lizado at 15 vezes com um tempo m ximo de 10 minutos inserido no instrumento por utiliza o A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva o 1 Conserve os controlos por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem est veis at a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Podem utilizar se os controlos abertos at 15 vezes com um tempo m ximo de 10 minutos inseridos no instrumento por utiliza o O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento por um per odo total superior a 2 2 horas dever se o eliminar Utilizar o mesmo tubo de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Para a estabilidade ideal retire os controlos do sistema imediatamente ap s a amostragem e guarde os a 2 8 C tapados no frasco original Procedimento Para criar novos materiais de CQ para o Ensaio do CENTROMERO 1
19. m causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva o iP Conserve os cartuchos de reagente e o tamp o de ressuspens o por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem est veis at a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Devem guardar se no instrumento os cartuchos de reagente abertos e permanecem est veis durante um total de 56 dias per odo ap s o qual devem eliminar se O software BIO FLASH monitoriza as datas de validade dos cartuchos colocados bem como dos lotes do cartucho de reagente Colheita da Amostra Este procedimento deve ser efetuado com uma amostra de soro AS amostras de soro com contamina o bacteriana que sofreram tratamento t rmico ou contendo part culas vis veis nao devem ser utilizadas As amostras que cont m at 10 mg dL de bilirrubina 200 mg dL de hemoglobina 1000 mg dL de triglic ridos 224 mg dL de colesterol ou 500 IU mL IgM de fator reumatoide n o mostraram interfer ncia no Centr mero QUANTA Flash Ap s a colheita o soro deve ser separado do co gulo O documento H18 A4 da CLSI recomenda as seguintes condi es de conserva o para as amostras 1 Nao conservar as amostras a temperatura ambiente durante mais de 8 horas 2 Se o teste nao for conclu do num prazo de 8 horas guardar
20. oduto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos controlos deste produto foi testado e deu resultados negativos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Logo devem manipular se os Controlos do Centr mero QUANTA Flash como se fossem qualquer material potencialmente infecioso Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes 5 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precaucoes 1 2 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Os Controlos do Centromero QUANTA Flash destinam se a utili com Centr mero QUANTA Flash N o transfira os reagentes do controlo para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para identificar o controlo Uma vez aberto cada tubo de controlo est em condi es de ser uti
21. ofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemanha Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621195PRT Maio 2012 Revisao 0
22. ograma o e realiza o de testes 1 Pressione o bot o Worklist na parte superior do ecr e selecione o separador Racks no fundo 2 Selecione o rack de amostra a utilizar real ando o rack no ecr ou digitalizando o c digo de barras com o leitor de c digo de barras port til Digitalize ou escreva o nome da amostra selecione o tipo de amostra o tipo de recipiente tubo ta a e selecione Centr mero a partir do painel do ensaio Repita estes passos para todas as amostras 3 Carregue as amostras nas posi es selecionadas no rack de amostras e carregue o rack no carrossel de amostras do instrumento 4 Se todos os materiais necess rios estiverem colocados no instrumento o icone iniciar estar dispon vel a verde na parte superior do ecr Pressione o cone iniciar para iniciar o ensaio Controlo de qualidade Os Controlos do Centr mero QUANTA Flash vendidos em separado INOVA N mero de Item 701197 cont m os Controlos do Centr mero Positivos e Negativos Consulte a sec o intitulada QUANTA Flash Centr mero Controlos 701197 deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como introduzir o valor da unidade e o desvio padr o de cada controlo no software bem como sobre o funcionamento dos controlos Recomenda se que se testem os controlos pelo menos uma vez nos dias em que se utiliza o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locai
23. rito no protocolo Devem eliminar se os calibradores abertos apos 8 horas Procedimento dis Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar este lote novo at que seja calibrado Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada calibrador para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo calibrador e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos calibradores e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH O instrumento testar ent o cada calibrador em triplicado Ap s os Calibradores terem sido testados o software exigir a valida o da calibra o A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M V Selecione Calibration Ctrl F3 Na janela Calibra o realce o ensaio pretendido e clique em Details Na nova janela Calibration Details selecione a calibra o que acabou de s
24. rvalo do Teste UQ Inclina o 95 IS Interce o Y 95 IS R2 1 77 17 7 0 94 0 91 a 0 97 1 01 0 69 a 1 33 6 3 63 7 0 98 0 96 a 1 00 1 89 1 15 a 2 64 9 33 93 26 0 98 0 96 a 1 01 2 45 1 16 a 3 74 24 44 244 4 0 99 0 97 a 1 01 113 59 1135 9 0 99 0 95 a 1 03 0 20 3 18 a 2 78 39 07 67 38 a 10 76 12 74 127 4 0 99 0 97 a 1 01 2 27 0 89 a 3 64 QUANTA Flash Centromere 701196 Calibradores Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro Utiliza o Prevista Os Calibradores do Centr mero QUANTA Flash destinam se a utiliza o com o imunoensaio quimioluminescente do Centr mero QUANTA Flash CIA no instrumento BIO FLASH Cada calibrador estabelece um ponto de refer ncia para a curva de trabalho utilizada para determinar valores de Unidades Quimioluminescentes UQ na medi o de anticorpos do Centr mero em soro Resumo e princ pios do procedimento O Centr mero QUANTA Flash CIA utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que est armazenada no c digo de barras do cartucho de reagente Os Calibradores do Centromero QUANTA Flash est o concebidos para produzir uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento a partir de par metros da Curva Modelo com um ponto de decis o baseado nas caracter sticas de desempenho e na avalia o cl nica do mero A Flash CIA Antes da atribui o do valor testam se os calibradores em v rios in
25. s nacionais C lculo dos Resultados Para cada lote novo de Centr mero QUANTA Flash produz se na INOVA uma Curva Modelo de seis pontos Esta curva log stica de quatro par metros est codificada no codigo de barras de cada cartucho de reagente Quando um cartucho de reagente tiver sido calibrado utilizar se uma curva de trabalho espec fica da m quina para converter a URL em UQ Pode ent o classificar se reatividade do Centr mero de acordo com a tabela abaixo Reatividade UQ Negativo lt 20 Positivo 220 A reatividade em UQ est relacionada diretamente com o titulo do autoanticorpo na amostra do doente Aumentos e diminui es nas concentra es do anticorpo no doente refletir se o numa subida ou descida correspondente em UQ proporcionalmente quantidade de anticorpo O intervalo de medi o anal tica IMA do ensaio de 3 4 UQ para 708 9 UQ Se o resultado de um doente for inferior a 3 4 UQ ent o o sistema BIO FLASH indic lo como lt 3 4 UQ Visto ser inferior a 20 UQ considera se um resultado negativo Se o resultado de um doente for superior a 708 9 UQ ent o o sistema BIO FLASH indica lo a como gt 708 9 UQ Este considerado um resultado positivo O software BIO FLASH disponibiliza uma op o de Novo teste autom tico Se esta op o estiver selecionada o instrumento retestar automaticamente qualquer amostra que tenha um resultado gt 708 9 UQ diluindo a mais por um fator de 20 e calculara a
26. s uma vez as esferas sao magnetizadas e lavadas repetidamente O conjugado de isoluminol produz uma rea o luminescente quando se adicionam os reagentes Ativadores tina A luz produzida a partir desta rea o medida como Unidades Relativas de Luz URL pelo sistema tico BIO FLASH As URL s o proporcionais quantidade de conjugado de isoluminol ligado que por sua vez proporcional a quantidade de anticorpos anti CENP ligados ao CENP B nas esferas O ensaio de Centr mero QUANTA Flash MPO utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que carregada no instrumento atrav s do c digo de barras do cartucho de reagente Baseando se no resultado da execu o de dois calibradores cria se uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento que se utiliza para calcular unidades quimioluminescentes UQ a partir da URL obtida para cada doente Reagentes 1 O Centromero QUANTA Flash cont m os reagentes seguintes para 50 determina es a As esferas paramagn ticas revestidas do centr mero conservadas antes da primeira utiliza o b Tampao de ensaio cor de rosa contendo tampao salino Tris Tween 20 estabilizadores proteicos e conservantes C Marcador IgG anticorpos IgG anti humanos marcados isoluminol contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservante 2 Tamp o de ressuspens o 1 frasco cor de rosa contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes Advert ncias 1
27. strumentos com diversos lotes de reagentes Reagentes 1 Calibrador 1 do Centr mero QUANTA Flash dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do pronto a usar Calibradores contendo anticorpos humanos para centr mero em solu o tamp o estabilizadores e conservantes 2 Calibrador 2 do Centromero QUANTA Flash dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do e pronto a utilizar Os calibradores cont m anticorpos humanos para o centromero no tamp o estabilizadores e conservantes Advert ncias 1 os calibradores cont m um quimico 0 02 clorafenicol conhecido no Estado da California por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos controlos deste produto foi testado e deu resultados negativos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Logo devem manipul
Download Pdf Manuals
Related Search