Hoefer SE300 miniVE
Contents
1. aplicar press o para dentro para libertar placa de vedac o mn O Fig 3 M dulo na posic o aberta Fig 4 Montagem sanduiche de gel Para abrir o m dulo balance os grampos para fora grampos 2 Cologue o plano m dulo sobre uma superficie de trabalho Preparando se auto cast g is Um gel nico pode ser convertido no m dulo Para lancar v rios g is use um rodizio 4 gel como o SE235 Hoefer rodizio ver informac o sobre a encomenda na p gina 27 Monte o sandu che de gel O Preparar o m dulo tal como descrito na p gina 4 a Escolha uma placa entalhada uma placa de vidro rectangular e dois espacadores Use apenas placas unchipped para evitar fugas Montar o sandu che de gel com o entalhe na parte superior da sandu che e as cristas espacadoras alinhar ao longo das bordas de vidro de placa sobre os lados da sandu che Fig 4 Importante O alinhamento adeguado essencial para evitar fugas Nota Uma vez gue o sandu che cuidadosamente alinhados segure os lados planos firme mente entre o polegar e os dedos perto da fossa Fig 5 Colocar o sandu che no m dulo Fig 6 Posicionamento dos grampos e p Coloque e selar o sanduiche no m dulo O Tome cuidado para quadrado os tr s lados de veda o do sandu che Segure o sandu che como um baralho de cartas e bata suavemente a parte inferior contra uma superf cie plana2. O Fig 9 Montado m dulo com abas envolvidas em alto n vel Nota Para testar para o alin hamento passar por um canto da Wonder Wedge em toda a borda inferior dos espacadores e as placas de vidro Se uma aresta pega realinhar Veri figue ambos os lados Fig 10 Pendurar o m dulo sobre o lado mais estreito do tangue para verter o gel e p8 Bloquear a placa de vedac o para a posic o fechada envolvendo cada guia na sua extremidade superior do entalhe Fig 9 guias envolvidos em alto nivel o Pendurar o m dulo a partir do lado mais estreito do tangue ou suport lo sobre a bancada para converter o gel Fig 10 Auando o m dulo de pendurar no tangue guer encher o tangue ou pendurar o segundo m dulo do outro lado como um contrapeso Verter o gel resolver O Preparar a solu o de mon mero a Pipetar a soluc o para o sandu che devagar para gue ela flui ao longo de um espacador tomando cuidado para n o prender as bolsas de ar N gel de empilhamento Encher a soluc o para o n vel desejado e em seguida inserir um pente a um ngulo ligeiro na sandu che tomando cuidado para n o pren der o ar sob os dentes Atenc o A acrilamida uma neurotoxina Use sempre luvas e observar todos os procedimentos de seguranca do laborat rio Nota Aproximadamente 10 ml de soluc o de mon mero necess rio para converter um gel 1 mm de espessura A 1 cm de empilh
3. a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desco necta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Reca lentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhan dah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaborato rium anvandning bara Bara medhj lpare och delar godkande eller lever erade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd
4. as solu es e Verificar as receitas as concentra es de gel solu es e dilui es Por exemplo n o utilize TRIS HCI em vez de tamp o Tris e Se o pH requerido de uma solu o for excedido n o fazer voltar titula Prepare uma solu o tamp o nova e Descarte as solu es mais velhos de acrilamida e usar o estoque s da mais alta qualidade e Apenas usar ur ia rec m deionizada Ajuste as configura es de tens o ou corrente e Para aumentar ou diminuir a taxa de migra o ajustar a tens o ou corrente por 25 50 Bandas s o enviesadas ou distorcidas Verificar prepara o de gel e de polimeriza o e Desgaseificar a solu o de gel de empilhamento e evitar bolhas de sob os dentes do pente e Sobrepor o gel rodando com gua saturada de n butanol antes da polimeriza o come a a evitar formando uma superf cie de gel desigual Verificar a prepara o da amostra e Dialisar ou dessalinizar a amostra e Centrifugar ou filtrar amostra antes de carregar para remover part culas e p16 Problema Soluc o Corada coleta Perto da frente tamp o e A prote na n o suficientemente limitada pelo gel resolver aumentar a T Perto do topo do gel guando a frente de tamp o atingiu o fundo e O tamanho de poro de gel muito pequeno Diminuir o T do gel de resolu o e A prote na precipitada Aguecer a amostra a uma tempera tura infer
5. mini de uma s vez se dois g is s o colocados em cada um dos dois m dulos A pilha de transfer ncia consiste do gel e da membrana papel de filtro e tr s esponjas de embalagem O gel determina o tamanho da membrana e papel de filtro O Para cada gel cortar a membrana e duas pe as de papel de filtro do mesmo tamanho que o gel mas n o maior do que 8 5 x 10 5 cm a Equilibrar o gel em tamp o de transfer ncia durante 10 minutos Equilibration permite que o gel a inchar ou encolher antes de ele contacta com a membrana de trans ferencia e remove os sais do tamp o em excesso e detergentes do gel Mais de equilibrio pode resultar em bandas difusas Membranas pr molhadas de nitrocelulose ou nylon em agua destilada tomando cuidado para n o prender as bolhas de ar Mergulhar uma extremidade da membrana para o tamp o e lentamente submergir la permitindo que ele para molhar por acc o capilar Pr molhado PVDF ou outras membranas hidrof bicos em metanol Ap s o pr umedecimento molhe todos os tipos de membrana em tamp o de transfer ncia por 2 5 minutos o Molhar as duas pecas de papel de filtro em tamp o de transfer ncia nu O Montar a pilha de transfer ncia de modo gue as mol culas ir o migrar para a membrana Fig 15 Para macromol culas carregados negativamente tais como prote nas s o executados em um gel de SDS e cidos nucleicos montar a pilha de transfe
6. o gel tem pocos pule para a montagem final na p gina 11 Tip Para calcular o volume medir a dist ncia em cent metros a partir do topo do gel para resolver o entalhe na placa de vidro Isto deve ser de pelo menos 2 cm Multiplicar esta dist ncia pela largura gel 8 cm e da espessura do gel cm para o volume reguerido ml Nota Para auxiliar no carrega mento da amostra marcar os locais bem com uma caneta laborat rio marca o e plo Inserir um pente em um ligeiro ngulo para evitar gue o ar aprisionamento na sandu che permitindo que os lados do pente para repousar sobre os espacadores o Permitir um m nimo de uma hora para o gel para polimerizar Working with precast gels O Prepare o m dulo de eletroforese como descrito em Preparar o m dulo na p gina 4 Seguir as instru es do fabricante para preparar o gel para electroforese Isto pode envolver a remo o de fita ou romper a borda de veda o a partir do fundo da cassete a Retirar o pente e lavar os pocos com tamp o de eletroforese para remover gualguer acrilamida n o polimerizada Se o gel est pronto para eletroforese mova a placa de vedac o para o meio aberto posic o Apligue uma leve press o para ambos os separadores e tranc los no menor n vel o Posicionar a cassete no m dulo Orientar a cassete de modo gue o lado entalhado contra a junta e os pocos est o na parte superior
7. pres sione as metades juntas para tirar o m dulo fechado O estoque de transfer ncia deve ser firmemente no lugar quando o copo esta fechado Substitua esponjas velhas e comprimido se necess rio para encher o copo A montagem final d Lentamente deitar 300 350 ml de tamp o de transfer ncia para a parte superior do m dulo para permitir gue o ar a ser deslocado pelo buffer como ele preenche o copo Togue levemente o copo blot ting para desalojar as bolhas de ar nas esponjas de embalagem a Posicionar o m dulo s no tangue com as fichas de banana em direcc o ao centro o lado voltado para fora vermelho Adicionar gua desionizada para o tangue 1 7 litros de um m dulo e 1 2 litros por dois m dulos Para evitar a evaporac o r pida a temperatura do buffer n o dever exceder 75 C Refrigera o passiva recomendada se a transfer ncia sera mais de uma hora se a atividade biol gica deve ser mantida ou se a transfer ncia de cidos nucleicos Frio de gua desionizada a 4 C antes de adicionar ao tanque o Colocar a tampa de seguranca no tangue Qualquer orientac o se encaixa e correto Conecte os cabos codificados por cores para as tomadas de uma fonte de alimentac o aprovados como o PS300B ou PS200HC vermelho com vermelho preto com preto Importante Condutividade tamp o aumenta com o aumento da temperatura proporcionando uma realimen tac o positiva gue resul
8. testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng Vander sig alla kraft tillgang kontroller av och kopplar bort kraften blyen fore flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom varmen exchanger i sa utrustad fall Inte kopplar varmen exchanger till en vatten kran eller nagot kylmedel k lla dar vattnet trycket r unregulated Infor aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anvand inte med buffert temperaturer over det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten o pvi Portugu s English French German Italian Spanish IM 134 D bt 1 1 Res duos de Equipamentos El ctricos e Electr nicos REEE Este s mbolo indica que os res duos de equipamentos el ctri cos e electr nicos n o devem ser eliminados como res duos urbanos indiferenciados e devem ser recolhidos separada mente Entre em contato com um representante autorizado do fabricante para obter informa es sobre o desmantelamento do seu equipamento This symbol indicates that the waste of electrical and elec tronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized re
9. verti de fornecimento de energia cal miniVE realiza eletroforese em gel vertical 50 mA 250 V de tens o de em formato mini g is A unidade b sica inclui corrente constante ou constante dois m dulos de eletroforese Cada m dulo cont m um sandu che de gel 10 cm de largura e at 10 5 cm de comprimento Um gel pode ser convertido no lugar em cada m dulo de electro forese Uma vasta gama de acess rios encomen dado separadamente ver p gina 27 empresta o grau de miniVE alta de versatilidade Estes incluem e Uma sele o grande de pentes e espacadores e Um m dulo blot para converter o miniVE em uma unidade de mini blotting Consulte a p gina 18 para obter instru es y leads cor codificada conectar eletrodos para fonte de alimentac o Fig 1 Principais componentes do miniVE SE300 Hoefer tampa m dulo de eletroforese bananeira conectores Desempacotando e Retire todas as embalagens com cuidado e comparar o conte do com a lista de embala gem certificando se todos os itens chegaram e Se alguma parte est faltando contacte o seu escrit rio de vendas local Inspecione todos os componentes de danos que possam ter ocor rido quando o aparelho estava em tr nsito Se qualquer parte estiver danificado contate imediatamente a transportadora Certifique se de manter todo o material de embalagem para pedidos de indemnizac o ou de reembalagem caso seja necess rio para devolver a unid
10. Entalhadas placas de vidro 10 x 10 5 cm 5 SE262GN 5 Espacadores 0 75 mm espesso par SE2619T 2 75 Espacadores 1 0 mm espesso par SE2619T 2 1 0 Espacadores 1 5 mm espesso par SE2619T 2 1 5 Pente 5 bem 0 75 mm espesso 1 SE211A 5 75 Pente 5 bem 1 0 mm espesso 1 SE211A 5 1 0 Pente 5 bem 1 5 mm espesso 1 SE211A 5 1 5 Pente 9 bem 1 0 mm espesso microtiter SE211A 9 1 0 Pente 10 bem 0 75 mm espesso SE211A 10 75 Pente 10 bem 1 0 mm espesso SE211A 10 1 0 Pente 10 bem 1 5 mm espesso SE211A 10 1 5 Pente 12 bem 1 0 mm espesso SE211A 12 1 0 Pente 15 bem 0 75 mm espesso SE211A 15 75 Pente 15 bem 1 0 mm espesso 1 SE211A 15 1 0 Pente 15 bem 1 5 mm espesso 1 SE211A 15 1 5 Pente 18 bem 1 0 mm espesso microtiter 1 SE211A 18 1 0 Pente prep ref 0 75 mm espesso 1 SE211A R 75 Pente prep ref 1 0 mm espesso 1 SE211A R 1 0 Pente prep ref 1 5 mm espesso 1 SE211A R 1 5 Cabo de junta 100 cm FH2208 e p27 produto guantidade c digo Acess rios blotting Esponja embalagem Dacron 3 pk SE3005 Papel mata borr o 9 10 5 cm 50 pk TE26 Rodinhas de gel Hoefer SE235 4 Rodinhas de gel 2 a 4 g is 10 x 10 5 cm SE235 Fonte de alimentac o PS200HC Alimentac o 200 V 2000 mA 200 W PS200HC PS300B Alimenta o 300 V 500 mA 90 W PS300B Sistema de gel de secagem Hoefer Easy Breeze Ar secador de gel 115 V SE1200 115V Hoefer Easy Breeze Ar secador de gel 230 V o p28 SE1200 230V Hoefer In
11. a Lado da placa entalhada para baixo cologue o sandu che no m dulo Fig 5 Ajustar o sandu che gel dentro das guias em ambos os lados a e contra os p s de guia na parte inferior b entalhe na parte superior a Enguanto suavemente segurando o sandu che contra o m dulo oscile um grampo na posic o sobre o espa cador tomando cuidado para n o colidir o sandu che para fora do alinhamento Fig 6 Importante Verificar o alin hamento do bordo inferior da sandu che contra os p s de guia Fig 7 Fig 7 Verifigue as extremidades inferiores para o alinhamento correto orientar p Fig 8 Desalinhamentos causar vazamentos o Gire cada parafuso alternando para manter a press o mesmo at gue os grampos s o fracamente protegido e permitir gue os espacadores de ser ajustada se necess rio Repita no outro lado Se os espacadores e as placas de vidro n o s o perfeitamente alinhado contra os batentes usar a extremidade rigida da cunha Maravilha Hoefer para pressionar contra as bordas do espacador e placas de vidro e posicion los lave contra o p de guia Conclua aperto apertando cada parafuso firmemente a m o apertada N o aperte demais pois as placas podem rachar Verifigue o alinhamento espacador O espacador n o A placa de vidro n o deve deve sobressair do estar descansando sobre a sandu che ou ser cabe a do espa ador T rebaixado para ele
12. a destilada Manusear o m dulo com cuidado para evitar danos para as fichas de el ctrodos Deixar secar ao ar e p23 Blotter soluc o de problemas problema soluc o Transfer ncia incompleta reas em branco na membrana e Remova todas as bolhas de ar na pilha de transfer ncia cuidar especialmente grande durante a montagem da pilha para evitar bolhas de ar formando a medida que cada camada colocada Verifique a continuidade do eletrodo Use um tamp o de baixa forca i nica Mol culas n o migram de gel e p24 Aumentar a intensidade do campo Aumentar o per odo de transfer ncia Tente dobrando lo N o exponha o gel de colorac o ou de fixac o agentes antes da transfer ncia Utilizar um diluente gel Reduzir a concentrac o de acrilamida gel Para as prote nas usar 3 5 mM de SDS 0 1 no tamp o de transfer ncia Diminuir o metanol no tamp o de transfer ncia de prote na ou reduzir a guantidade a um m nimo Tipicamente metanol a 10 necess rio para a ligac o boa para membranas de nitrocelulose Aumentar o comprimento do blots de ADN de tempo s o depurinated Verificar o pH tamp o A maioria dos buffers n o deve ser titulada fazer tamp o fresco Para g is nativas aumentar a carga l guida na proteina mudando para um tamp o de transfer ncia com um pH diferente PH mais baixo lt 6 7 aumenta a carga positiva no proteinas pH mais ele
13. ade Antes de usar lavar o tangue e m dulo com uma soluc o dilu da de detergente n o abra sivo laborat rio Enxaguar bem primeiro com gua e depois com gua destilada Especifica es Eletroforese Tamanho sandu che Gel 10 0 cm de largura x 8 a 10 5 cm de comprimento Max volume do tanque 1 6 litros com um m dulo no lugar 1 4 litros com dois m dulos em lugar Max tens o 600 V Max pot ncia Electrotransfer ncia 25 W por m dulo eletroforese Max volume m dulo blot 350 ml por m dulo Max volume do tanque para refrigera o passiva 1 7 litros com um m dulo no lugar 1 2 litros com dois m dulos em lugar Max pot ncia 15 W por blot m dulo Max atual 400 mA SE300 especifica es miniVE Temperatura m xima de opera o 75 C Compatibilidade quimica Para uso apenas com solu es aquosas dilu das entre pH 2 e pH 12 Nao compativel com solventes org nicos ou lcoois concentrados acidos bases e agentes oxidantes As condic es ambientais de operac o Humidade at 80 Uso interno 4 40 C Altitude at 2000 m Categoria Instala o II Grau de polui o II Dimens es L x P x A 19 2 x 17 2 x 18 8 cm Peso tanque na tampa e dois m dulos de gel 1 2 kg Certifica es de Produtos EN61010 1 UL61010A 1 CSA C22 2 1010 1 CE certificadas Esta declarac o de conformidade v lida apenas para o
14. amento de gel abaixo da pocos Encher a 3 cm abaixo da parte superior da placa de vidro rectangular Sobrepor cada gel com uma fina camada de gua saturada de n butanol gua ou tamp o de gel dilu do para evitar a exposig o da soluc o de mon mero ao oxig nio Usar uma seringa de vidro equipada com uma agulha de calibre 22 para aplicar 100 pl da soluc o de sobreposic o lentamente para um lado da sandu che pr ximo do espa ador Permitir que a soluc o a fluir atrav s da superf cie nu Ap s a polimerizac o Permitir um m nimo de uma hora para o gel para polimerizar a Se um pente est no lugar remova o puxando o pente enguanto suavemente para frente e para tr s para quebrar o vacuo Lavar os pocos com tamp o de electroforese para remover qualquer acrilamida n o polimerizada Se uma sobreposic o foi aplicado lavar o sanduiche v rias vezes com gua bidestilada para a remover Inverta o m dulo de drenar Para garantir o contacto cont nuo entre a resoluc o e de empilhamento g is remover o l quido residual por blotting um canto do gel com um tecido macio Fundic o o gel de empilhamento Preparar a soluc o de mon mero de empilhamento de gel a Deaerate a soluc o de mon mero de empilhamento gel adicionar catalisador e iniciador e em seguida derramar Usar uma pipeta para fornecer a soluc o em um canto da placa tomando cuidado para n o inter ceptar guaisguer bolhas Nota Se
15. c 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Toll Free 1 800 227 4750 Telefone 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer uma marca registrada da Hoefer Inc Coomassie uma marca comercial da ICI plc Dacron marca registrada da El du Pont de Nemours amp Co RBS 35 uma marca comercial da Pierce Chemical Company 2012 Hoefer Inc Todos os direitos reservados Impresso nos EUA Hoefer
16. cato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di labora torio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente ricon osciuto testando il laboratorio O piv II coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disin serisce i piombi di potere prima di togliere il coper chio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi eguipag giato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acgua o gualungue fonte di refriger ante dove la pressione di acgua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causera il danno irreparabile all unita Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en m te ikke spesi fisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av u
17. com miniVE pentes e n o g is pr moldados e p12 o postion semi aberta para a electroforese c mara tamp o superior Adicionar a quantidade apropriada de tamp o de elec troforese para o tanque Adicionar 1 2 1 6 litros de reserva para o tanque quando apenas um m dulo est no lugar e 1 1 1 4 litros quando dois m dulos est o no lugar Os n veis m nimos e m ximos s o marcados Verificar que o el ctrodo inferior que de aproximadamente 2 cm do fundo do m dulo completamente submersa Para evitar a partir de tamp o de entrar na c mara de tamp o superior verificar que o n vel de buffer n o est acima do n vel m ximo o Adicionar a guantidade apropriada de tamp o de elec troforese para a c mara de tamp o superior Encher a c mara de tamp o superior a um n vel de 3 5 mm acima da placa de dentada Isto reguer aproximadamente 100 ml Nota A guantidade de amostra de prote na adicionada a cada poco depende tanto a sensibi lidade do m todo de colorac o ea distribuic o de proteinas entre as bandas separadas Com Coomassie Blue poss vel detectar 1 ug em uma Unica banda com as manchas de prata mais sensiveis possivel detectar tio pouco quanto 10 ng Fig 13 Totalmente montado com m dulo miniVE eletroforese Preparar e aplicar a amostra Aumentar a densidade da amostra liquida com 10 de glicerol ou sacarose Adicionar um corante de rast reio tai
18. d Osborn M 1969 The reliability of molecu lar weight determinators by dodecyl sulfate polyacryl amide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 Blotting Gallagher S Winston S E Fuller S A and Hurrell J G R 1993 Immunoblotting and Immunodetection in Current Protocols in Molecular Biology 10 8 1 10 8 17 Greene Publishing and Wiley Interscience NY Gershoni J M and G E Palade 1983 Protein Blotting Principles and Applications Anal Biochem 131 1 15 Harlow E and Lane D 1988 Antibodies A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Press Sambrook J et al 1989 Molecular Cloning A Labora tory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press B 23 Towbin H Staehelin T and Gordon J 1979 Electro phoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets procedure and some applications Proc Natl Acad Sci USA 76 4350 4354 p26 Informac es sobre pedidos produto quantidade c digo Hoefer SE300 miniVE completa 1 SE300 10A 1 0 Inclui unidade b sica 3 placas de vidro retangulares 3 placas entalhadas 2 cada 1 0 mil metros de espessura 10 bem pentes e 1 0 mm de espessura conjuntos espacador M dulo blot 1 SE302 Inclui 3 esponjas de Dacron de embalagem 0 635 cm de espessura 25 folhas de papel mata borr o Acess rios Placas de vidro de 10 x 10 5 cm 5 SE262P 5
19. die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird fiir den Innenlaborge brauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann fur das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produk tes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den Warmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische Losungsmittel in jeden Teil des Instru mentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Uber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die berhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata in un modo specifi
20. do m dulo O centro da cassete dentro do guiderail em ambos os lados do m dulo a Fig 11 Prenda a fita Balancar cada grampo na posic o ao longo dos lados da cassete Aperte cada parafuso alter nando para aplicar press o at gue o mesmo cassete segura A junta em torno da c mara tamp o superior deve ser totalmente comprimida para proporcionar uma vedac o mas os parafusos n o devem ser apertados para o ponto de gue a press o salienta a cassete Fig 11 Protegendo a cassete Verificar que ambas as superficies do gel entrar em contacto com tamp o Verifigue se o slot de gel de contato de fundo est exposto o Mova a placa de vedac o para o meio aberto posic o para se preparar para eletroforese Apligue uma press o suave para dentro de duas abas e tranc los no menor n vel A montagem final O Verifique se a placa de veda o est no meio aberto posi o A seta na Fig 12 indica a posi o correcta a Abaixar cada m dulo para dentro do tangue assentando la nas ranhuras de fixac o Os assentos m dulo adeguadamente em apenas uma orientac o com as fichas de banana em direcc o ao centro do tangue eo gel virada para fora e pll Fig 12 Preparando se para eletroforese Sugest o Como aux lio em amostras de carregamento margue o local bem com uma caneta laborat rio marcac o ou usar a localizac o do decalgue O decalque localizac o s funciona
21. e de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instru mento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Super aquecer causar agress o irrepar vel a unidade Dule it Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskyt nut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat po
22. fer Inc la protection fourni par V guipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de labora toire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entrete nir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationale ment reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre a sa place avant connecter l alimentation mene a une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur a un robinet d eau ou la source d agent de refroidissement o la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de instrument Les dissolvants organigues causeront des dommages irr parables a l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications technigues La surchauffe causera des dommages irr parables l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch
23. ge to the unit T rke Tietoa Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton Tama valine suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen labo ratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan ennen yhdist minen k ytt j nnitelyijyj k ytt j nnit teeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautuk seen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesi paine on unregulated o piii Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumen eminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoe
24. id delen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not speci fied by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating main taining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable dama
25. instrumento guando ele e utilizado em locais de laborat rio e usado como entregues a partir de Hoefer Inc exceto para altera es descritas no manual do usu rio e ligado a outros CE rotulados instrumentos ou produtos recomendados ou aprovados por Hoefer Inc e p3 Nota A placa de vedac o tem tr s posi es fechado ou seladas para o vaza mento semi aberta para a electroforese e totalmente aberto para a coloca o do sandu che gel Fig 2 M dulo na posi o fechada ep 0 m dulo de Electroforese Esta secc o descreve o uso do m dulo de electro forese Para obter instru es sobre como usar o m dulo blot consulte a p gina 18 O m dulo de electroforese aceita tanto auto fundido e g is pr moldados de 8 cm de largura a partir de 8 10 5 cm de comprimento e 0 75 1 5 mm de espessura Para obter instru es sobre como usar o m dulo com g is pr moldados consulte a p gina 10 Preparac o do m dulo Para posicionar o m dulo para aceitar o sandu che gel cada um dos tr s elementos de veda o de batente deve ser aberto 0 Libertar a placa de vedac o por aplicac o de press o para dentro suave para ambas as abas como indicado pelas setas Fig 2 a Segurando as abas mova a placa na posic o total mente aberta Solte todos os parafusos guatro voltas 4 5 no sentido anti hor rio N o tente remover os parafusos dos grampos parafusos de fixac o 4
26. ior 70 C ou menos para 1 2 minutos Resoluc o banda pobre e Utilize apenas os reagentes de alta qualidade Realizar a separac o em uma configurac o mais baixa corrente ou tens o e Dialisar ou dessalinizar a amostra e Reduzir o volume da amostra ou concentra o e Apenas usar ur ia rec m deionizada e Melhorar a dissocia o das subunidades por amostra de aquecimento na amostra tamp o SDS 1 2 minutos a 100 C e Adicione mais mercaptoetanol ou ditiotreitol verificar o tratamento da amostra e S use g is que foram rec m preparadas e Verificar valores de pH das solu es de separa o e de empilhamento de gel N o titular back buffers A prepara o das amostras e Amostras de calor para n o mais do que 1 2 minutos a 100 C Armazenar em gelo ap s o aquecimento e Armazenar amostra em gelo antes que seja desnaturado e Adicionar os inibidores de protease se necess rio para evitar a degrada o proteol tica da amostra e Armazenar as amostras a serem congelados em al quotas para evitar o congelamento e descongelamento repetidos Loja a 40 C a 80 C Azul de bromofenol n o afiar para e Despeje um alto gel de empilhamento Para melhores uma zona concentrada no gel de resultados permitir uma altura de empilhamento de gel de empilhamento 2 5 vezes a altura da amostra no poco e Descarte de solu es de acrilamida desatualizados e u
27. ne eller nogen kolemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske oplosningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stodpudetemperaturer over o pii maksimummet specificerede tekniske specifica tions Overheding vil for rsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleen glycol door de hitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosm
28. nsfer ncia cont m metanol 210 equilibrar o gel durante 30 minutos para permitir que ele encolher totalmente Nota o encolhimento do gel pode retardar a migrac o de mol culas grandes para fora do gel Tome cuidado para que o gel n o se desloque uma vez entra em contato com a membrana e Verificar que qualquer superf cie preferida de ligac o da membrana enfrenta o gel e p25 AAA Bibliografia Electroforese em gel de poliacrilamida Adams L D and Gallagher S R 1992 Two Dimensional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology 10 4 1 10 4 13 Gallagher S R and Smith J A 1991 Electrophoretic separation of proteins Current Protocols in Molecular Biology F A Ausubel R Brent R E Kingston D D Moore J G Seidman J A Smith and K Struhl eds 10 2 1 10 2 21 Laemmli U K 1970 Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 Nature 227 680 685 Matsudaira P T and Burgess D R 1978 SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 Reisfeld R A et al 1962 Acidic buffer system for resolu tion of cationic proteins Nature 195 281 Sasse J and Gallagher S R 1991 Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology F A Ausubel R Brent R E Kingston D D Moore J G Seidman J A Smith and K Struhl eds 10 6 1 10 6 8 Weber K an
29. presentative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs guipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Haus m ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem auto risierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparec chiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalita di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Este simbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo e pvii Nota classificac es m nimas O Hoefer SE300 sistema de eletroforese
30. r ncia do lado preto c todo Prote nas ir transferir para o lado vermelho nodo Fig 15 Montagem da pilha de transfer ncia vermelho nodo preto c todo Nota Para obter melhores a Centro de esponja uma embalagem no lado do c todo resultados evitar bolhas de preto como cada camada apli cada Sempre estabelecer b Lay um pedaco de papel de filtro molhado na esponja contacto total ao longo de c Posicionar o gel eguilibrada no papel de filtro Molhar a um lado e manter o contacto superficie do gel com algumas gotas de tamp o de trans como a camada reduzida em fer ncia posic o d Colocar a membrana sobre o gel N o reposicionar a membrana uma vez entra em contato com o gel Use uma vareta de vidro para a implantac o de bolhas de ar Lay um pedaco de papel de filtro molhado na membrana Lay duas esponjas de embalagem sobre o papel de filtro Uma pilha de transfer ncia segundo se adicionados colocado entre estas duas esponjas Repita os passos b e e p21 Fig 16 A montagem final c todo preto enfrenta o centro lado do nodo vermelho enfrenta a parede do tanque exterior e p22 O Verificar a posi o da pilha de transfer ncia A pilha de transfer ncia deve ser centrada na placa de eletrodo Nenhuma camada deve ser beliscado quando o m dulo estiver fechada o Dobre a metade vazia do copo sobre a pilha e
31. ransfer ncia e um adicio nal de 300 350 ml de tamp o necess ria para encher cada m dulo A receita para tamp o Towbin listado abaixo A Bibliografia na p gina 26 lista fontes para outros buffers Towbin tamp o 25 mM Tris 192 mM glicina 0 20 v v metanol DH 8 3 1 liter Tris FW 121 1 25 mM 3 0 g Glicina FW 75 07 192 mM 14 4 g SDS FW 288 4 ate 0 1 3 5 mM 1 0g Opcional Adicionando SDS pode melhorar a efici ncia de transfer ncia Dissolver em 750 ml de agua destilada a Adicionar metanol conforme necess rio Dependendo do tipo de membrana seleccionada a adic o de metanol pode melhorar os resultados de transfer ncia Devido tamp es contendo metanol pode deteriorar se se for armazenado por longos per odos adicionar metanol apenas antes da transfer ncia Traga a 1 litro com gua destilada N o ajustar o pH que deve ser entre 8 2 e 8 4 Opcional Chill antes da utilizac o e pl9 Importante Tentar colocar o gel correctamente pela primeira vez As proteinas podem comecar a transferir imediatamente Uma vez gue a transfer ncia comeca movendo se o gel vai distorcer os resultados ou causar faixas de sombra sobre a mancha e p20 Preparar a pilha de transfer ncia Transferir a amostra logo que possivel ap s a electroforese para minimizar a difus o da amostra dentro do gel Transfer ncia electro for tica pode ser realizada em at guatro g is de
32. rificar o progresso ap s 5 minutos e nova mente ap s meia hora o controlo da posic o do corante de seguimento A execuc o est completa quando o corante de rastreio atinge o fundo do gel Ap s a electroforese o Desligue a fonte de alimentac o e desconecte os cabos a Remova a tampa de seguranca e retire o m dulo s Libertar cada sandu che gel ou cassete a partir do m dulo Mover a placa de vedac o para a posic o totalmente aberta pressionando para dentro em ambos os separa dores e guiar a placa para abrir para fora Em seguida solte todos os parafusos guatro voltas 4 5 no sentido anti hor rio Balancar as bracadeiras para fora o Remover o gel da sandu che ou cassete Com cuidado solte e deslize afastado ambos espa cadores Deslizar um espacador extra ou o Wonder Wedge Hoefer na extremidade inferior para impedir a quebra das orelhas das placas entalhadas e separar as placas Se estiver usando g is pr moldados siga as instru es do fabricante do gel n O Cuidadosamente levante o gel a partir da placa e coloc lo em uma bandeja gue cont m tamp o de mancha fixador ou transfer ncia O Limpe a unidade conforme descrito em Cuidados e manuten o abaixo Cuidados e manuten o e N o autoclave ou aquecer qualquer parte acima 75 C e Nao mergulhe a tampa de seguranca em qualquer liquido e Nao use solventes org nicos oxidantes fortes ou sol
33. s como azul de bromofenol Subjacente a amostra nas cavidades utilizando uma pipeta de micro ou de ponta fina microsseringa A Tabela 1 mostra o volume de amostra necess rio para diferentes numeros de pocos e pente espessuras Tabela 1 capacidades well volume de amostra ul por 1 mm de profundidade espessura pente mm niimero de pocos 0 75 1 0 1 5 9 5 12 7 19 1 m 5 8 gt 10 3 6 4 8 72 12 4 75 15 2 2 2 9 4 4 18 2 9 As conex es el tricas Coloque a tampa de seguranca sobre a unidade ea sede da tampa de modo que os plugues banana envolver as tomadas na tampa A tampa sim trica e se encaixa em qualquer orientac o Fig 13 e Ligue os fios codificados por cores para as tomadas de uma fonte de alimentac o aprovado vermelho com vermelho preto com preto A avaliac o fornecimento m nimo de energia de 250 V 50 mA voltagem ou constante constante Fonte de alimentac o recomen dada PS300B e pl3 e pl4 Eletroforese Para melhor resoluc o eletroforese comecar imediatamente ap s o carregamento da amostra G is pode ser executado em gualguer tens o de corrente constante ou constante Para separa es Laemmli SDS a faixa de tens o recomendada 100 250 V e n o deve exceder 300 V Se voc estiver executando g is a corrente constante a corrente deve ser 10 20 mA por gel dependendo da espessura do gel 10 mA para 0 75 mm 15 mA durante 1 5 mm Ve
34. ta em aguecimento r pido Reco mendamos programar o forneci mento de energia para manter a configurac o atual constante para evitar o superaguecimento poss vel especialmente se n o houver refrigerac o passiva est no lugar Se a op o de programac o apenas para manter a configurac o de tens o constante monitorar e ajustar a tens o para manter a corrente a ou abaixo de 400 mA Electrotransfer ncia Eletrofor ticos condi es de transfer ncia para blotting de prote nas em tamp o Towbin 25 V por 1 2 horas 300 400 mA Depois electrotransfer ncia Desligue a fonte de alimentac o e desconecte os cabos a Remover a tampa de seguranca Retire cada m dulo e dren lo por ele invertendo sobre uma pia Evite molhar os plugues banana com buffer o Abrir o m dulo Remover os g is e as membranas Salve as esponjas da embalagem Descarte o papel mata borr o Rotular cada membrana e indicar o lado da amostra Levantar a membrana s com uma pinca rombas e deixa se secar ao ar O Lavar o equipamento imediatamente ap s o uso Blotter cuidado e manuten o e N o autoclave ou aquecer qualquer parte acima de 75 C e Nao utilize solventes org nicos oxidantes fortes ou solu es de limpeza abrasivos ou cidos fortes ou bases em qualquer parte do instrumento e Imediatamente ap s cada uso lave a unidade com agua e depois enxaguar abundantemente com agu
35. tilizar apenas o mais alto grau de acrilamida e Ao preparar as amostras evitar o uso de solug es com uma alta de s dio ou concentrac o de pot ssio e p17 Fig 14 Instale uma junta em cada meio copo e pl8 0 modulo blot O Hoefer miniVE M dulo Blot que podem ser encomendados separadamente realiza electro transfers em formato mini g is Cada m dulo tem capacidade para at dois g is 8 2 cm de largura e at 10 4 centimetros de comprimento Um ou dois m dulos podem ser executados ao mesmo tempo Montagem O Antes de usar lave o reservat rio eo m dulo blot com uma solu o dilu da de detergente n o abrasivo labo rat rio Enxaguar bem com gua e gua destilada a Separar duas das quatro vertentes de juntas incluidos em cada m dulo Abra o m dulo liberando as duas guias o Estabelecer uma vedac o ao longo da ranhura inteiro em torno de tr s lados de cada meia chavena Evite esticar ou torcer a junta o comprimento deve apenas se encaixam Pressione suavemente no lugar Cada junta se encaixa na ranhura em torno de tr s lados de cada meia chavena Preparac o Opcional Passivo de refrigerac o Arrefeca a cerca de 2 litros de gua desionizada a 4 C Encher o tanque com agua gelada serve como um dissipador de calor durante electro transfer ncia Preparar tamp o de transfer ncia Montagem de pilha requer aproximadamente 250 ml de tamp o de t
36. tstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utformet for innendors labo ratoriumbruk bare Bare tilbehor og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium Sikkerheten lokket m v re p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene f r fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjolemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organi ske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner A overop pheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Jezeli ten sprzet jest wykorzystywany w spos b nie okreslone przez Hoefer Inc do ochrony przewid zianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarc zone prze
37. u es de limpeza abrasivos ou cidos fortes ou bases em qualquer parte do instrumento Imediatamente ap s cada uso lave o reservat rio e os m dulos com gua e em seguida enxaguar abundan temente com gua destilada Manuseie o m dulo com cuidado para evitar danos aos plugues de banana Deixar secar ao ar a Limpe a tampa com um pano humido Se necess rio brevemente enxaguar o lado de baixo da tampa com agua Placas de vidro limpas e espacadores com uma soluc o dilu da de um detergente de laborat rio tais como RBS 35 em seguida enxaguar abundante mente com torneira e gua destilada Placas de vidro podem ser tratadas com mas n o s o armazenados em solu es de limpeza cidas o Wipe placas com isopropanol para remover gualguer res duo de vedac o Gel e p15 Soluc o de problemas de eletroforese Problema Soluc o Efeito sorriso na frente tamp o Para reduzir a temperatura de funcionamento e Encha o tanque at o nivel maximo de buffer marcado e Prechill o buffer e Realizar eletroforese em c mara fria e Diminua a configurac o da corrente ou tens o 10 mA por gel 0 75 mm 15 mA por gel 1 5 mm de espessura Estrias prote na verticalmente e Centrifugar ou filtrar amostra antes de carregar para remover part culas e Dialisar ou dessalinizar a amostra Extraordinariamente lento de execuc o ou r pido Ajuste
38. ual do su rio Portugu s Hoefer SE300 miniVE Mini vertical unidade de electroforese em gel m SE300 IM Portuguese Rev C0 06 12 H O e fe r Conte do Informa es Importantes AAA ji Residuos de Equipamentos El ctricos e Electr nicos REEB vii Introdu o ary wd R AA a s 1 Desempacotando azammazsan ss senaagaasiaesusdens naa aa mamak 2 ESPECITICACOGS spririt cra arar 3 O m dulo de EISCTroforese vussa awa ai v 4 ElCtrOONESE cocos oi A vh Kaanaan naan MANAMTA TTE aE 14 G idados manuten o sisisi ia saa a do Eege 15 Solu o de problemas de eletroforese 16 O modulo loto 18 Blotter cuidado e manuten o 23 Blotter solu o de problemas nunnan 24 Bibliografia EE 26 Informa es sobre pedidos 2 27 Informac es Importantes Portugu s Se este eguipamento usado numa maneira nao especificada por Hoefer Inc que a protecc o forne cida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguranca registrada por um nacionalmente recon hecido testando laborat rio A tampa de seguran a deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoqu
39. uze voda nebo 50 50 voda ethyleng lykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybav ena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapravi teln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifika cemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specifice ret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan maske sv kkes Dette instrument er designet for indendors labora toriumbrug bare Bare tilbehor og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan maske bruges for drive funk tionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedlaget m v re pa plads far forbinding stramforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandha
40. vado gt 6 7 aumenta a carga negativa sobre as proteinas problema soluc o Ineficiente ligac o Os par metros quimicos e Fixar ou reticular a toupeira para os requisitos do cido nucleico o tipo de proteina ou membrana Prepare buffer de transfer ncia de prote nas sem SDS SDS pode melhorar a efici ncia de transfer ncia mas reduz a ligac o Verificar a quantidade ptima de metanol requerido para o tipo de membrana e verificar a solu o tamp o Adicionar metanol 10 20 para o tamp o de transfer ncia para melhorar a ligac o para nitrocelulose Par metros de Membrana Usar luvas ao manusear membranas Armazenar as membranas de forma adequada Proteg las de temperaturas extremas e luz direta do sol Se as prote nas passam atrav s da membrana seleccionada tentar um tipo diferente ou um com um menor tamanho dos poros 0 10 0 20 um Se as prote nas diferentes podem ser migrar em direc es opostas colocar uma membrana em ambos os lados do gel Se a carga da amostra pode ser superior a capa cidade da rea de superf cie de ligac o aplicam se duas membranas Se soprar atrav s ocorre reduzir a carga de amostra Difusas padr es de bandas Conduzir a electrotransfer ncia imediatamente ap s a separac o eletrofor tica Reduzir ou eliminar a etapa de eguil brio antes electrotransfer ncia ou de equil brio conduta na sala fria Se o tamp o de tra
41. z Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce ozna kowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organ icznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no espe cificado por Hoefer Inc la protecci n proporcio nado por el eguipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender
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