Hoefer SE600 Chroma
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1. e utilizzato in ambienti di laboratorio e utilizzati cos come forniti dal Hoefer Inc salvo alterazioni descritte nel manuale d uso e e collegato ad altri marcati CE strumenti o prodotti raccomandati o approvati da Hoefer Inc Fig 1 Principali componenti del Hoefer SE600 Chroma vedi Fig 4 per i componenti caster Inclusi ma non mostrato e Seal composto Gel 1 4 oz e Spacer Mate allineamento template e lastre di vetro 6 e Wonder Wedge piastra strumento di separazione e diga Buffer Unit completa comprende anche distanziali 4 e pettini 2 Necessario ma non inclusi e agitatore magnetico e Alimentazione con un rating minimo di 300 V 100 mA costante A o V Optional Circolatore bagno Nota La sezione di ordinazione elenca tutti gli accessori e parti di ricambio color coded cavi 2 coperchio di sicurezza perni di blocco tampone camera superiore con elettrodo superiore Scambiatore di calore con elettrodo inferiore buffer di camera inferiore Apertura della confezione e Inventory Scartare tutti i pacchetti con attenzione e com parare i contenuti con la packing list assicu randosi che tutti gli elementi arrivato Se una parte manca rivolgersi all ufficio vendite locale Controllare tutti i componenti per i danni che possono essersi verificati mentre l unit era in transito Se una parte risulta danneggiata contattate immediatamente Ess2. l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird f r den Innenlaborgebrauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann fiir das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein fiihrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen fiihrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hImittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Uber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die Uberhitzung wird ni
3. Ispezionare lastre di vetro per il nick Utilizzare solo le piastre unchipped per evitare perdite lastre morsetto camminare di vetro creste spingidisco Nota le lastre di vetro e distanziali deve essere allineato con le creste di serraggio sia a livello alto e in basso per una buona tenuta Nota Non utilizzare grasso al silicone o vaselina per sigillare il panino Queste sostanze sono difficili da rimuovere ed infine causare artefatti Costruire il panino gel e inserirlo caster Preparare il caster e morsetti Posizionare la livella a bolla nel centro caster e rego lare i piedini di livellamento Allentare tutte le viti di serraggio e fare spazio per il panino facendo scorrere le piastre di pressione verso le viti a Costruire panini gel Per ogni panino scegliere due perfettamente pulite lastre di vetro unchipped e due distanziali Lay una piastra su una superficie piana porre le Spacer Mate modello allineamento sulla piastra lato largo nella parte superiore della piastra inserire un distanziatore lungo ogni bordo e porre la seconda piastra di vetro Fissare il panino con morsetti Inserire un morsetto alla volta lungo i lati a sandwich Finger stringere una vite su ogni morsetto impostare il panino in posizione verticale su una superficie piana e allentare la vite per allineare lo stack Facendo molta attenzione in allineamento garantire una buona tenuta Finger stringere tutte le v
4. per il livello della soluzione appropriata a seconda dell applicazione No stacking gel sistema continuo Riempire soluzione appena sotto il bordo superiore della piastra superiore Se le bolle sono in trappola rimuovere con una pipetta o una siringa Introdurre un pettine con una leggera angolazione in ogni sandwich facendo attenzione a non intrappolare bolle d aria sotto i denti Panino a pi strati Pipettare la soluzione in entrambi i panini riempi endo ciascuna allo stesso livello sotto il bordo dentel lato Stacking gel Riempire soluzione di 3 4 cm sotto la parte supe riore della lastra di vetro Questa altezza permette 1 cm di gel di impilamento al di sotto del pozzetti Versare il gel e applicare un overlay vedi punto 2 Dopo che il gel impostato la preparazione del gel di impilamento come descritto di seguito 2 D elettroforesi proteine del sistema discontinuo Riempire soluzione di monomero di circa 1 cm sotto la parte superiore della lastra di vetro per consen tire 4 5 mm per la striscia IPG o gel tubo e una guarnizione agarosio Un gel di impilamento richie dono spazio extra Sigillare la striscia IPG o gel tubo in posizione con agarosio sciolto in tampone di corsa Fare attenzione a non intrappolare eventuali bolle d aria tra il gel prima e seconda dimensione JL 2 Sovrapposizione ciascun gel con un sottile strato di acqua butanolo saturo acqua o tampone gel diluito per evitare
5. and Osborn M The reliability of molecular weight determinators by dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 1969 Elettroforesi bidimensionale Adams L D and Gallagher S R Two Dimensional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology Ausubel E A et al eds OSC pp 10 4 1 10 4 13 1992 Anderson N G Anderson N L and Tollaksen S L Proteins of human urine I Concentration and analysis by two dimensional electrophoresis Clin Chem Jul 25 7 1199 2210 1979 Anderson Leigh and Anderson Norman G High resolution two dimensional electrophoresis of human plasma proteins Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Anderson L Two Dimensional Electrophoresis Operation of the ISO DALT System Second Edition Large Scale Biology Press 1991 Bravo R Schafer R Willecke K MacDonald Bravo H Fey S J and Celis J E More than one third of the discernible mouse polypeptides are not expressed in a Chinese hamster mouse embryo fibroblast hybrid that retains all mouse chromosomes Proc Natl Acad Sci USA Apr 79 7 2281 2285 1982 Hurkman W J and Tanaka C K Solubilization of Plant Membrane Proteins for Analysis by Two Dimensional Gel Electrophoresis Plant Pbysiology 81 802 806 1986 Mets L J and Bogorad L Two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis an improved method fo
6. di ICI plc 2012 Hoefer Inc Tutti i diritti riservati Stampato negli Stati Uniti Hoefer
7. instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguran a registrada por um nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de seguranca deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel unidade o pv Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser dafiada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para oper
8. solo a fonti refrigeranti con pressione regolata Non collegare al rubinetto dell acqua Coperchio di sicurezza La banana sullo scambiatore di calore si col lega al cavo rosso e il tappo sulla camera tam pone superiore collega in testa nera Di 4 mm avvolto color coded spina cavi in colorate prese nella sezione di alimentazione Inserire perni di blocco prima di abbassare le connessioni degli elettrodi a connettori a banana Installare sempre il coperchio di sicurezza prima dell uso Lastre di vetro Il Chroma SE600 ospita piastre 16 o 8 cm di lunghezza di 18 cm di larghezza Piastre divisori intagliati ordinare a parte dividere panini gel in modo da formare club sandwich di due gel ciascuno quindi fino a quattro gel pu essere eseguito in una sola volta Morsetti Due morsetti 16 cm vengono utilizzati per garantire il panino gel Il bar di pressione morsetto regolata con viti distribuisce la pres sione in modo uniforme Casting supporto Lo stand di colata di gel contiene panini assemblati in posizione verticale per la fusione gel I piedini regolabili livellare il caster Una guarnizione stratificato sul fondo di ogni culla guarnizioni colata la parte inferiore del sand wich quando viene serrato nel supporto Cams Cams sono usati due volte prima per fissare il sandwich assemblato nello stand casting e in secondo luogo per attaccare il panino alla camera tampone superiore Guarnizioni di gomm
9. 20 1 50 4 1 1 SE511 20 1 5 28 0 75 2 1 SE511 28 75 28 1 00 20 1 SE511 28 1 0 28 1 50 2 7 1 SE511 28 1 5 Comb profondita di 15 mm tutti gli altri 25 mm Preparativa pettini Questi pettini sono 25 mm di profondita regolabile a 10 o 15 mm numero di pozzi spessore larghezza mm prep ref mm prep ref quantita codice 1 1 0 75 121 6 1 SE511 R 75 1 1 1 121 6 1 SE511 R 1 0 1 1 1 50 121 6 1 SE511 R 1 5 1 2 0 75 113 6 1 SE511 DR 75 1 2 1 113 6 1 SE511 DR 1 0 1 2 1 50 113 6 1 SE511 DR 1 5 Schienale regolabile pettine 1 SE511 BKA Necessario per convertire qualsiasi da 25 mm pettine in profondit per 10 o 15 mm di profondit e p37 Distanziali spessore mm lunghezza cm larghezza cm quantit codice 0 75 8 2 2 SE6419 2 75 1 0 8 2 2 SE6419 2 1 0 1 5 8 2 2 SE6419 2 1 5 0 75 16 2 2 SE6119 2 75 1 0 16 2 2 SE6119 2 1 0 5 16 2 2 SE6119 2 1 5 1 0 16 1 2 SE6118 2 1 0 5 16 1 2 SE6118 2 1 5 Companion prodotti Hoefer SE100 Mate lavaggio della piastra e di unit di memorizzazione 1 SE100 Connettori QuickFit femmina 3 8 2 QF3 8 Connettori QuickFit di sesso maschile 3 8 2 QFX3 8 e p33 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Numero verde 1 800 227 4750 Telefono 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer un marchio registrato di Hoefer Inc Coomassie un marchio
10. Nota Se l opzione di raffreddamento viene utilizzato frequentemente conveniente collegare i connettori QuickFit al tubo Le valvole di questi raccordi evitare la fuoriuscita del refrigerante ing Installare camme crinale verso il basso nei fori di buffer camera a camme Bloccare il sandwich in luogo contemporaneamente ruotando una camma in senso orario e l altra in senso antiorario di 180 o Use a pipette to carefully fill each slot above the sample wells with buffer to minimize disturbing the samples Then pour 100 ml of buffer into the cham ber directing the buffer stream toward the side wall Check that no buffer leaks around the gasket Buffer di camera inferiore Mettere una barra magnetica di spin nella camera tampone inferiore LBC e posizionare l unit su un agitatore magnetico Riempire la camera inferiore con un massimo di 4 litri di buffer a Abbassare lo scambiatore di calore nella camera infe riore di montare le porte nelle tacche del cerchio Lo scambiatore di calore deve essere in vigore per tutte le corse perch l elettrodo inferiore integrato nello scambiatore di calore Se non necessario il raffreddamento passare al punto 3 Opzionale Collegare lo scambiatore di calore ad un circolatore termostatica Diapositive fascette quattro in totale su ogni estremit di due lunghezze di 10 12 millimetri id Tubatura di vinile o silicone Attac care un estremit di ciascun tr
11. S o entrambi pH Soluzioni con valori di pH estremi in particolare acido non pu polimerizzare Ossigeno Rimuovere ossigeno dall ambiente gel Degas la soluzione di monomero 5 10 min prima di versare e quindi sovrapporre la superficie del gel con acqua satura di n butanolo Temperatura Regolare la temperatura della soluzione gel ad un minimo di 20 C specialmente per basse gel sulla T LLL e p27 problema Superiori tampone camera perdite Potenza supplyde tects perdita di corrente Curve fronte del colorante fino ndr sorride ai bordi Proteine striature in verticale Insolitamente lenta o veloce run possibile causa Mis allineati parti rimedio Verificare che le lastre di vetro distanziali e morsetti sono allineati e si adattano perfettamente alla guarnizione camera superiore Controllare che entrambe le guarnizioni sono centrati e che le creste di posizionamento che si inseriscano nelle scanalature Componenti sporchi o danneggiati Percorso elettrico a terra al di fuori terra Non uniforme dis tribuzione del calore Controllare che la guarnizione non sia danneggiato o pizzicato Sostituire se necessario Controllare che la camera di compensazione superiore non deformato da una precedente esposizione a calore eccessivo Aggiungi pi grasso al silicone per sigillare passacavi scambiatori di calore Controllare eventuali perdite o rotture nello scambiatore di calore S
12. a Collegare i cavi colorati ai jack di un alimentatore approvato Collegare il cavo rosso nel jack di uscita rosso e il filo nero nel jack di uscita nero Nella mag gior parte dei sistemi testa rosso che collegato all elettrodo di fondo I anodo e il cavo nero collegato con l elettrodo superiore il catodo Note di montaggio importanti e JEF Esegue il livello del buffer nella camera tam pone inferiore non deve mai raggiungere la camera superiore del buffer mantenere almeno 2 cm di spazio e Non riempire la camera superiore o inferiore al di sopra dei livelli raccomandati illustrati in Fig 8 Rimuovere tampone in contatto con gli elettrodi posti e tampone Versare lentamente e lontano dalle fessure nella camera tampone superiore per evitare di dis turbare i campioni e Utilizzare acqua solo o 50 50 di acqua glicole etilenico come refrigerante Non utilizzare mai un antigelo commerciale o qualsiasi miscela a base di alcool o danni irreparabili allo scambiatore di calore risulter e Non collegare lo scambiatore di calore ad un rubi netto di acqua o qualsiasi altra fonte in cui la pres sione dell acqua regolamentata Nota SE600 Chroma unit utilizza 18 cm di larghezza piatti Lo spessore gel determina la sezione trasversale e attuale requisito per la costante piste attuali La lunghezza della piastra determina il tempo di esecuzione Tabella 2 sistema tampone Laemmli punto
13. a Ci sono due insiemi di due guarnizioni Le guarnizioni solide laminati inseriscono nel fondo della colata e stanno per realizzare la tenuta colata del gel Le guarnizioni fessurate collocato sotto la camera di transito superiore e formare la tenuta tra le camere superiori e inferiori Le creste sulla guarnizione superiore allineare la scanalatura guarnizione per mante nere aperto un canale tra la parte superiore del gel e il buffer nella camera superiore Distanziali Distanziatori determinare lo spessore del gel e sono disponibili in tre spessori 0 75 1 0 e 1 5 mm e due larghezze 1 e 2 cm Possono essere ordinati separatamente Spacer Mate allineamento template Questo modello allinea distanziatori durante il montaggio a sandwich Combs Combs sono disponibili in dimensioni che for mano 10 12 15 20 o 28 pozzetti Preparativa pettini comprendono uno o due pozzetti di riferimento oltre ad un pozzo preparativa La maggior parte pettini sono disponibili in tutti e tre spessori 0 75 1 0 e 1 5 mm Possono essere ordinati separatamente Tutti i pettini preparativa e il 10 12 15 e 20 oltre i pozzi di forma pettini che sono il 25 mm di profondit I 28 pozzi pettine e forme che sono solo 15 mm di profondit in modo che i pozzi non collassano quando il pettine viene rimosso Il volume del campione detenuta da ogni pozzetto dipende dallo spessore gel ben profondit e il numero di pozzetti per pettine Tabell
14. a 1 volumi di campione liste di pozzi per tutti i pettini vedere pagina 17 Wonder Gel Wedge strumento piastra di separazione Questo strumento utilizzato per smontare panini gel e per controllare pettine distanziatore e spessori Istruzioni per l uso Gel procedure di fusione e l elettroforesi seguire Sono incluse istruzioni per gel di poliacrilam mide utilizzata con sistemi tampone continuo o discontinuo e gel gradiente Vedere pagina 31 per la bibliografia Preparare il Sandwich Gel Lastre di vetro distanziali e set di clamp sono dimensionati in modo che il sandwich assemb lato pu essere facilmente allineato per creare la tenuta necessaria prima di lanciare il gel e poi eseguirlo Per ottenere risultati ottimali fare particolare attenzione ad allineare tutte le com ponenti in fase di montaggio panini Da uno a quattro gel 18 x 16 cm possono essere assem blati ed eseguiti in Chroma SE600 Sia gel prefabbricati e auto getto gel pu essere usato Per gel pi auto cast kit possono essere ordinati separatamente Il SE615 multipla Caster Kit Gel pu contenere fino a 10 panini singoli gel e SE675 Kit Gel Caster pu conte nere fino a quattro panini Vedere il Manuale gel caster di accompagnamento dell utente per le istruzioni complete Per eseguire quattro gel contemporaneamente due lastre divisorie acces sori intagliate e due coppie di distanziali sono obbligatori Fig 2 Sandwich di montaggio
15. ade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften blyen f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten o pvi Italiano R English R French R Ea German R E Spanish La Swedish R Rifiuti di apparecchiature elettriche ed elettroniche RAEE Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalit di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante This symbol indicates that the waste of electrical and electronic equipment must not be disposed as unsorted municipal
16. ar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intyg
17. arnizione deve essere completa mente pulita Lavare se necessario Sostituire lastre scheggiate soprattutto se scheggiato vicino ai distanziali Controllare la guarnizione caster per i tagli o screpolature e sostituirli se necessario Mis allineati parti Verificare l allineamento piastra e distanziale riallineare se necessario Over bloccaggio bolle d aria Ruotare camma soltanto per quanto necessario per creare una tenuta di solito 90 150 ma fino a 180 Su ogni distanziale applicare un leggero strato di composto Seal Gel verso il basso angolo esterno solo Non usare grasso al silicone Eliminare le bolle d aria prima di inserire pettini Far scor rere pettine in soluzione ad angolo Se pettine deve essere rimosso aggiungere la soluzione di monomero pi prima di reinserire il pettine Polimerizzazione incompleta o ritardata Lasciare gel di acrilammide da impostare per un minimo dilh Detriti in pozzi Sciacquare gel non polimerizzato con il tampone del campione rimozione Comb Prodotti chimici Togliere il pettine con una leggera angolazione e molto lenta mente per evitare di danneggiare il gel Gel di agarosio Abbassare il pettine non superiore a 1 cm in gel Utilizzare solo le scorte recenti di altissima qualit reagenti Se il persolfato di ammonio secco non scricchiolano quando vengono aggiunti all acqua sostituire con il brodo fresco Aumentare TEMED o concentrazione AP
18. atto di tubazione ad una porta scambiatore di calore Fissare le estremit libere di ciascun tratto di tubazione per porte bagno i circolatori uno per l ingresso e altra alla presa Fissare i collegamenti con le fascette Utilizzare il grafico Fig 7 a pagina 20 di stimare un punto di partenza per l impostazione della tem peratura circolatore bagno Regolare come neces sario per variabili quali la temperatura variazioni di potenza e bagno efficienza circolatore Se il controllo e pl9 Fig 7 Approssimativo bagno circolatore impostazione della temperatura Impostare la temperatura del bagno circolatore impostazione inferiore alla temperatura di funzionamento desiderato per l importo indicato sul grafico Questo dovrebbe essere controllato in tre punti e p20 0 i P 2 3 o 2 2 N 2 4 o 2 E e 5 3 6 7 0 10 20 30 40 50 60 alimentazione impostazione W Esempio Esegui parametri 200 V 0 05 A 50 mA 1 Calcolare W se il vostro alimentatore non visualizza alimentazione direttamente W VxA 10W 200Vx0 05A 2 Interpolare il numero di gradi di sottrarre dalla temperatura di funzionamento desiderato 10 W interseca il grafico a circa 1 C Se la temperatura desiderata di 23 C per impostare il bagno 23 1 22 C Se la temperatura desiderata 4 C per impostare il bagno 4 1 3 C Fig 8 Superiori e inferiori livelli di ri
19. cht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en mate ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utformet for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbehar og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium o piv Sikkerheten lokket m veere p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjalemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organiske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overoppheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochr
20. consegnato ad una velocit che mantiene un flusso continuo sulla superficie del vetro Nota gel gradiente versato nel Caster SE615 e SE675 Gel multipla vengono introdotti attraverso il fondo Nota Quando si versa un esponenziale gel gradiente la posizione di un pistone o tappo di chiusura sopra il liquido nella camera di miscelazione per contenere il volume costante e pl4 Gradient gel Gel gradiente sia lineari che esponenziale pu essere versato in dual gel caster Si consiglia di utilizzare uno Hoefer SG Maker Gradient Series Gel gradiente vengono versati dall alto della ruota con una cannula se si utilizza il for nito dual gel caster o dal basso se si utilizza un multiplo Caster Gel Hoefer vedi istruzioni che accompagnano la caster Un gel di impilamento viene poi versato sul gradiente di gel o 0 O o oo O Versando un gel gradiente lineare Montare sandwich es nei dual gel ruote come descritto a pagina 9 a Impostare il percorso di soluzione di monomero di flusso Eseguire un pezzo di tubo in vinile trasparente attra verso una pompa peristaltica Collegare un estremit del tubo alla porta di uscita gradiente maker e l altra estremit ad una cannula 20 cm La od della can nula deve essere inferiore allo spessore distanziatore Posizionare la cannula in modo che poggia sul fondo della met panino tra i distanziatori Opzionale Regolare la percentuale supe
21. d della corrente o della tensione impostazione il numero e lo spessore di gel sistemi tampone e le letture iniziale e finale di corrente o di tensione per ogni ciclo in modo che i risultati possono essere confrontati Risultati incoerenti per lo stesso sistema e le impostazioni di indicare potenziali problemi come perdite attuali le concentrazioni di buffer non corretto concentrazioni di sali o la qualit chimica incoerente Verificare i progressi band dopo 5 min e di nuovo dopo 1 h con un occhio sul tasso di migrazione del colorante inseguimento La pista completa quando il colorante inseguimento rag giunge il fondo del gel Vedere il livello del buffer e se necessario alimentarlo come richiesto per mantenere l elettrodo superiore sommerso Un piccolo volume di tampone pu fuoriuscire oltre una piastra intaccate o guarnizione o tampone pu passare attraverso il gel Dopo elettroforesi Una volta che il colorante inseguimento raggiunge il fondo del gel spegnere l alimentazione scollegare i cavi e rimuovere il coperchio di sicurezza utiliz zando leva dito tra il coperchio e la parte superiore dello scambiatore di calore Sollevare verso l alto per evitare di piegare i connettori a banana a Se il liguido refrigerante circola fermare il flusso e scollegare i raccordi o tubi Estrarre il gruppo superiore camera buffer Versare il buffer in un lavandino Installare il gruppo nel gel caster duale e q
22. del sandwich e consentono di fluire attraverso la superficie nudo o Lasciare i gel per polimerizzare per un minimo di 1 h Dopo la polimerizzazione versare overlay e sciacquare la superficie del gel pi volte con acqua distillata e p15 _ __ __Z A Nota con blu Coomassie possibile rilevare 1 pg di proteina in una singola banda Con le macchie d argento pi sensibili possibile rilevare un minimo di 10 ng di proteina e pl6 Preparare la soluzione di impilamento gel monomero versare il gel di impilamento e introdurre un pettine con una leggera angolazione nel sandwich facendo attenzione a non intrappolare l aria sotto i denti Las ciare un minimo di 1 h per polimerizzare il gel per Preparazione del campione e Loading Il campione pu essere caricati o mentre il sandwich in caster o dopo la camera di tran sito viene fissata Quando si caricano campioni mentre utilizzando piastre divisorie i campioni devono essere caricate senza la camera tampone superiore in posizione La quantit di campione caricato dipende dallo spessore del gel la sensibilit del metodo di rilevamento utilizzato e la quantit di campi one previsto in ciascuna banda In un sistema tampone continuo il campione deve essere relativamente concentrato poich non viene utilizzato gel di impilamento In un sistema tam pone discontinuo la zona in cui ciascuna specie molecolare migra acui
23. di partenza le linee guida Gel di spessore 1 5mm Corrente per gel 25 mA corrente costante Avvio di tensione 80 90 V 220 250 V tensione finale Gel pi spessi o pi sottili richiedono proporzionalmente pi o meno corrente Per esempio un gel 0 75 mm che la met dello spessore di un gel 1 5 mm richiede met molta corrente o 12 5 mA La corrente deve essere moltiplicata per il numero di gel Ad esempio se due panini sono installati i quattro gel richiedono quattro volte tanto corrente La corrente pu essere aumentato per velocizzare le piste se raffreddamento attivo viene utilizzato e pu essere diminuita per lenti piste notte A 25 mA per gel La separazione del campione Parametri elettroforesi per gel di poliac rilammide discontinui I gel possono essere eseguiti sia in costante impostazioni correnti o tensione costante Una modalit corrente costante tradizionalmente utilizzato con un sistema tampone discontinuo modo che la velocit di migrazione elettroforet ica rimane invariato per tutta la corsa In queste condizioni di tensione aumenta man mano che i proventi di esecuzione Un valore minore di cor rente raccomandata per una maggiore risoluzi one Il livello ottimale di corrente deve essere determinato empiricamente i principali fattori che devono essere equilibrato includere la con centrazione di gel e la velocit di migrazione e il riscaldamento Joule risul
24. e del buffer con cura per evitare di danneggiare la spina a banana Pulire le guarnizioni con un detergente neutro e risciacquare con acqua dis tillata Lasciare asciugare all aria Pulire lastre di vetro e distanziali con una soluz ione diluita di un detergente laboratorio come RBS 35 quindi risciacquare abbondantemente con rubinetto e acqua distillata Lastre di vetro possono anche essere trattati con soluzioni di acido ma non memorizzato in di pulizia Sostituzione di un tubo scambiatore di calore di vetro Rimuovere il tubo contemporaneamente torsione e scorrere verso il basso per quanto possibile fino a quando l estremit superiore libera della guarnizione superiore Guidare con attenzione il tubo in modo che canceller l assemblea quindi sollevare il tubo dalla guarnizione inferiore a Ingrassare leggermente la parte esterna di entrambe le estremit del tubo nuovo con grasso al silicone Twist e slitta un estremit del tubo nella guarnizione inferiore Poi scivolare l altra estremit della guarnizione superiore spingendo delicatamente con una leggera torsione fino all arresto Controllare che la guarnizione non pizzicato Risoluzione dei problemi problema Gel a sandwich mentre le perdite di fusione Esempio di pozzi danneggiati o irregolari Gel polimerizzazi one incompleta possibile causa Componenti sporchi o danneggiati rimedio Piatti Distanziali e con la gu
25. e o corrente del 25 50 problema Bands sono inclinate o distorte possibile causa Gel preparazione incompleta e di polimerizzazione rimedio Degas l impilamento gel soluzione ed evitare bolle d aria sotto i denti del pettine Interfaccia irrego lare tra stacking e l esecuzione di gel Sovrapporre il gel esecuzione con acqua satura butanolo comincia prima della polimerizzazione per evitare la formazione di una superficie irregolare gel Preparazione del campione Campione Stained raccoglie Vicino alla parte anteriore del buffer Gel concentration Degradation Dializzare o desalificare del campione Le molecole non sono sufficientemente limitata dalle dimensioni del gel risoluzione dei pori aumentare la T Le proteine possono essere degradata da proteasi endo gene utilizzare gli inibitori delle proteasi durante la fase di isolamento Vicino alla parte superiore del gel quando il fronte di buffer ha raggiunto il fondo Gel concentration Precipitation La dimensione dei pori gel troppo piccola diminuire il T del o sovrapposizione gel risolvere La proteina precipitata Riscaldare il campione ad una temperatura inferiore 70 C o meno per 1 2 min A sia superiore e inferiore del gel Monitoraggio colorante non affi nare in una zona concentrata nel gel di impilamento Gel concentration Poor impilamento L intervallo di peso molecolare del campione richiede
26. edi Fig 4 con il lato di schiuma verso il basso Posizionare il gruppo pinza nella culla casting vite laterale rivolto verso l esterno Nota quando girando gli eccentrici pi facile mantenere l equilibrio caster se si attiva sia verso il centro della ruota Fig 4 Caster componenti e la configurazione o Inserire una camma nel foro su ciascun lato del vas soio fusione con la cresta breve termine verso l alto Sigillare la panino gel contro la guarnizione colata ruotando entrambe le camme di quanto necessario generalmente 90 150 fino a 180 La camma preme le piastre gi nella guarnizione per sigillare la parte inferiore del sandwich La tenuta conclusa quando il bordo del vetro appare pi scura e quasi trasparente contro la guarnizione Non girare oltre questo punto guarnizione lato schiuma verso il basso A gp piedini di livellamento 4 D ra di vetro camminare buraco circa morsetto buraco circa culle di fusione 2 buraco circa installare cresta finiscono buraco circa pll e pl2 Gel di acrilammide Preparare la soluzione di monomero e versare il gel Preparare la quantit richiesta di soluzione di mono mero Disaerare e aggiungere l iniziatore e cataliz zatore appena prima di versare il gel Pipettare la soluzione in un angolo del sandwich facendo attenzi one a non introdurre eventuali bolle d aria Vedi sotto
27. empimento del buffer da camera accurato della temperatura un fattore critico misu rare la temperatura e regolare se necessario Opzionale Prechill il buffer Montare il gruppo superiore camera di compensazi one nella camera tampone inferiore Utilizzare una mano ferma per evitare di disturbare i campioni Afferrare il montaggio nello stand di colata dalla cam era tampone superiore e con attenzione abbassare nella camera inferiore o Controllare l installazione e controllare i livelli di buffer Buffer di camera superiore UBC L elettrodo lungo il crinale della camera superiore deve essere sommerso a circa 1 cm Questo livello richiede 450 600 ml di tampone appena sufficiente a coprire le costole camera superiore ma non abbastanza per contattare la spina a banana Non superare la linea di riempi mento MAX UBC Buffer di camera inferiore LBC Riempire con la linea di riempimento MAX LBC Camera superiore buffer di max linea di A UBC riempimento MAX La Camera Bassa del buffer max linea di riempimento Buffer livello tee di etichetta MAX e p21 _ __ __Z A 5 e p22 Mettere il coperchio di sicurezza sull unita dal con fronto con i perni di blocco di sicurezza prima di abbassare le connessioni degli elettrodi su i connet tori a banan
28. eparazione del campione Conservare campione sul ghiaccio prima che sia denaturato Dializzare o desalificare del campione campioni di calore in tampone campione SDS per non pi di 1 2 min a 100 C per migliorare la dissociazione delle subunit Conservare sul ghiaccio dopo il riscaldamento Regolare il volume del campione o la concentrazione Aggiungere pi mercaptoetanolo o ditiotreitolo controllare trattamento del campione Aggiungere inibitori della proteasi PMSF come se necessaria per prevenire la degradazione proteolitica di campione Aumentare glicerolo o saccarosio per aumentare la densit del campione Conservare i campioni devono essere congelati in aliquote per evitare cicli ripetuti di congelamento scongelamento Conservare a 40 a 80 C Bibliografia Generale Gallagher S R and Smith J A Electrophoretic separation of proteins In Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A eds OSC 10 2 1 10 2 21 1991 Hames B D and Rickwood D Gel Electrophoresis of Proteins A Practical Approach Second edition City IRL Press 1990 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor NY 2001 Sasse J and Gallagher S R Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds OSC 10 6 1 10 6 8 1991 SDS Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Isoelectric Foc
29. ere sicuri di mantenere tutto il materiale di imballaggio per richieste di risarcimento danni o per utilizzare qualora risultasse necessario restituire l unit Buffer di camera inferiore La camera tampone inferiore trasparente che consente il monitoraggio visivo della elettro foresi La camera chimicamente resistente ai comuni buffer elettroforetici ma non ai solventi organici o acidi forti o alcali Temperature superiori a 45 C pu causare la camera a defor marsi Buffer di camera superiore La camera tampone superiore chimicamente resistente ai buffer elettroforesi comuni ma non ai solventi organici o acidi forti o alcali Delettrodo superiore catodo corre lungo il crinale centro e termina alla banana La camera superiore richiede 0 5 0 8 litri di riempimento del buffer non superiore alla sommit delle cos tole di plastica Scambiatore di calore Lo scambiatore di calore deve essere installato per ogni uso perch ospita l elettrodo inferiore anodo che corre lungo la parte inferiore del telaio Se collegato ad un bagno circolatore lo scambiatore di calore regola la temperatura del tampone nella camera inferiore Refrigerante passa attraverso i tubi di vetro che sono fissati con gommine in silicone in gomma Le porte di collegamento dello scambiatore di calore sono 13 mm di diametro esterno Lo scambiatore di calore viene valutato a un massimo di 0 8 atmosfere sopra ambiente 12 psig Collegare
30. ettroforesi su gel inteso per elettroforesi proteine e acidi nucleici sotto denaturazione comunemente utilizzati e non condizioni dena turanti Fino a 28 campioni possono essere con frontati su un gel singola lastra Le applicazioni includono proteine separazioni frazionamento acido nucleico e la separazione seconda dimensione di elettroforesi 2 D Prima dimensione di separazione di 2 D elettroforesi delle proteine deve essere eseguita su gel di pH immobilizzati gradiente Le strisce concentrati sono facilmente trasferiti al gel di seconda dimensione lastra per la separazione dimensioni Le lastre di gel sono di 18 cm di larghezza per 16 cm di lunghezza Fino a quattro gel pu essere eseguito in una volta se i panini sono appaiati in club sandwich Lo scambiatore di calore permette di controllo della temperatura del buffer nella camera inferiore e pl Specificazioni Gel dimensioni piastra 18 x 16 cm L x A Gel taglia 140 16 cmx 16 cm L x A Max potenza 50 W Max tensione di 1000 V Max amperaggio di 500 mA Max temperatura 45 C Condizioni operative ambientali Uso interno 4 40 C Umidita fino a 80 Altitudine fino a 2000 m Categoria di installazione II Grado di inquinamento Il Dimensioni L x A x P 32 x 29x 14 cm Certificazioni di prodotto EN 61010 1 UL 61010A 1 CSA C22 2 1010 1 Certificazione CE Questa dichiarazione di conformit valida solo per lo strumento quando
31. fbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kolemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske oplosningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden O pii Driver ikke med stodpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil forarsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exc
32. hanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents w
33. i Ordine pet tini e distanziali separatamente Per un massimo di 10 gel Multipla Gel Caster Kit 1 SE615 10 gels 18 x 16 cm Include 20 lastre di vetro salvaspazio piastra 5 fogli di riempimento 100 fogli di carta oleata dima di allineamento Spacer Mate e tappi di carico Ordine pettini e distanziali separatamente e p35 prodotto quantit codice Morsetti e camme Clamp e Cam Kit quattro morsetti 16 cm e 8 camme nere 1 SE6003UK Viti di ricambio per pinze 12 SE6003U 2 Cams nero per pinze con fori a camme 4 SE6005L Bloccare assemblee 16 cm SE6003U Bloccare assemblee 8 cm SE6403U Lastre di vetro 18 x 8 cm Lastre di vetro 2 SE6402 Lastre di vetro panino divisore club con intaglio 1 SE6402D 18 x 16 cm Lastre di vetro 2 SE6102 Lastre di vetro panino divisore club con intaglio 1 SE6102D e p36 scegliere il distanziale e la lunghezza appropriata piastra per l unit morsetto universale SE6003U SE6009 caster di base SE6015 camma SER11 Pettine numero spessore larghezza di pozzi mm mm quantit codice 10 0 75 8 3 1 SE511 10 75 10 1 00 8 3 1 SE511 10 1 0 10 1 50 8 3 1 SE511 10 1 5 12 0 75 7 6 1 SE511 12 75 12 1 00 7 6 1 SE511 12 1 0 12 1 50 7 6 1 SE511 12 1 5 15 0 75 5 7 1 SE511 15 75 15 1 00 5 7 1 SE511 15 1 0 15 1 50 5 7 1 SE511 15 1 5 20 0 75 4 1 1 SE511 20 75 20 1 00 4 1 1 SE511 20 1 0
34. id musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybavena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan maske svaekkes Dette instrument er designet for indend rs laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan maske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads far forbinding stramforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og a
35. ill cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehkaisty varusteille saattaa olla avuton Tama valine suunnitellaan sisalaboratoriokayt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan ennen yhdist minen k ytt j nnitelyijyj k ytt j nnitteeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen o piii miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk66n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumene
36. iti Rimuovere il distanziale Mate Suggerimento Usare la base di colata per tenere il panino durante l allineamento Rimuovere la guarnizione lamellare dalla culla e invece di impostare il panino in posizione verticale su una superficie piana messo in culla casting e p9 Fig 3 Club sandwich di assemblaggio Fascette laterali ospiter due distanziali fino a 1 5 mm di spessore lastre di vetro ai lati esterni del sandwich camminare centerplate dentellato e plo o Panino a pi strati A 16 cm di lunghezza con intaglio centro divisore piatto da ordinare separatamente coppie di due panini di raddoppiare il numero di gel che possono essere espressi ed eseguire Assemblare un sandwich nello stesso modo come un sandwich regolare tranne prima di posizionare la las tra di vetro superiore fissare la piastra di separazione e una seconda serie di distanziali sulla pila Posizion are la tacca in modo che sar in cima dei gel essenziale che i distanziatori e le piastre allineare perfettamente per sigillare Rimuovere il sandwich e ispezionare il fondo per assi curarsi che i bordi siano allineati filo per garantire una buona tenuta Regolare se necessario Opzionale applicare un leggero strato di composto Seal Gel solo sulle superfici in basso creati dai dis tanziatori e piastre se i panini tendono a perdere Posizionare la guarnizione lamellare nel supporto di fusione v
37. l lamento e di livello diga di buffer Spacer Mate modello di allineamento e Wedge Wonder separazione piastra gel dell utensile Parti di ricambio Wonder Gel Wedge strumento 1 SE1514 piastra di separazione Slotted guarnizioni in gomma siliconica 2 SE6008B per camera tampone superiore Laminati guarnizioni in gomma siliconica 2 SE6009 supporto per la fusione Buffer diga SE6032 Buffer di camera superiore SE6054 per SE600 Chroma Buffer di camera inferiore SE6150X per SE600 Chroma Coperchio con cavi ad alta tensione SE6056X per SE600 Chroma Ad alta tensione di sicurezza set di piombo SE6056 HV Spinotto a banana oro con 2 rondelle SE6067 Scambiatore di calore SE600 Chroma SE6160 elettrodo gruppo inferiore Tubo di vetro con 2 occhielli SE6160 5 per scambiatore di calore assemblaggio di elettrodo inferiore Fissaggi per scambiatore di calore 4 SE6060 6 elettrodo gruppo inferiore Livella 1 SER11 Gel composto Seal 1 4 oz tubo SE6070 Spacer Mate 3 SE6119SM prodotto quantit codice Gel rotelle Per 102 gel Gel Caster doppio 1 SE6015 basic 2 gels 18 cm wide Include 2 guarnizioni in bianco per 1 o 2 gel Quello incluso in ogni unit SE600 Chroma Fino a 4 gel Gel Caster Kit 1 SE675 4 gels 18 x 16 cm Comprende 8 lastre di vetro 3 salvaspazio piatti 5 fogli di riempimento 100 fogli di carta cera Spacer Mate modello allineamento e sui tapp
38. l esposizione all ossigeno gel Lentamente fornire la soluzione overlay da una siringa di vetro dotato di 22 gauge Applicare la soluzione in pros simit del distanziatore ad un lato del sandwich e consentono di fluire attraverso la superficie nudo Lasciare il gel per polimerizzare per un minimo di 1 h Stacking preparazione gel Versare il gel di impilamento mentre il sandwich ancora in caster gel Impilabile gel risoluzione otti male quando versato poco prima elettroforesi o Rimuovere la mascherina sciacguando la superficie del gel pi volte con acqua distillata Invertire il caster per drenare Per assicurare un contatto per fetto tra il risolvere e il gel di impilamento rimuovere i residui di liquido tamponando un angolo con un laboratorio wipe Calcolare il volume di gel di impilamento monomero soluzione Preparare la sovrapposizione gel soluzione di mono mero che disaerare e aggiungere catalizzatore e promotore Versare il gel di impilamento sul gel risoluzione con una pipetta Pasteur monouso o ad un livello di circa 2 mm dalla cima della piastra o Introdurre un pettine con una leggera angolazione nel sandwich facendo attenzione a non intrappolare l aria sotto i denti Lasciare un minimo di 1 h per polimerizzare il gel per e pl3 Fig 5 Versando un gradiente di gel Una punta di pipetta pu essere usato al posto di una cannula se la soluzione di gel viene
39. minen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par V guipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de laboratoire interieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre a sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur a un robinet d eau ou a la source d agent de refroidissement ou la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables a l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irr parables
40. ony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce oznakowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este
41. ostituire anelli di tenuta usurate Riempire la camera tampone inferiore al livello appropriato per la corsa bordi Vedi Fig 8 pagina 21 Utilizzare agitatore magnetico e mescolare bar per mante nere buffer di ben miscelati Il calore eccessivo Particolato nel campione Circulate ext refrigerante Diminuire l impostazione corrente o tensione Prechill il buffer Eseguire il gel in cella Centrifuga o filtro di esempio prima di caricare per rimuovere particelle Sovraccarico Carica quantit inferiore di campione degradazione Corrente di disper sione intorno gel Aggiungere inibitore della proteasi come PMSF Controllare eventuali perdite tutti i piatti e distanziali devono essere allineati e privo di grassi e di crepe Se utilizzato la diga del buffer deve essere sicuro Campione o preparaz ione del reagente Se il pH richiesta di una soluzione superato non back titolare Scartare e preparare tampone fresco Ricette Verifica concentrazioni gel e tampone di diluizione Per esempio non utilizzare Tris HCI invece di tampone Tris per serbatoio Laemmli Diminuisce la concentrazione di sale di campioni Qualit del reagente Smaltire soluzioni di acrilammide anziani e utilizzare solo stock di altissima qualit Utilizzare solo urea appena deionizzata Impostazioni di tensione o corrente o p28 Per aumentare o diminuire la velocita di migrazione regolare la tension
42. r ribosomal proteins Anal Biochem Jan 57 1 200 210 1974 O Farrell P H High resolution two dimensional electrophoresis of proteins J Biol Chem May 25 250 10 4007 4021 1975 Bjellqvist B et al Isoelectric focusing in immobilized pH gradients principle methodology and some applications J Biochem Biophys Methods 6 317 339 1982 Gorg A et al The current state of two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients Electrophoresis 9 531 546 1988 G rg A Two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients current state Biochem Soc Trans 21 130 132 1993 Bjellqvist B et al Micropreparative two dimensional electrophoresis allowing the separation of samples containing milligram amounts of proteins Electropboresis 14 1375 1378 1993 Blomberg A et al Interlaboratory reproducibility of yeast protein patterns analyzed by immobilized pH gradient two dimensional gel electrophoresis Electropboresis 16 1935 1945 1995 e p33 coperchio di sicurezza con cavi SE6056X tampone camera superiore SE6054 scambiatore di calore SE6160 buffer di camera inferiore SE6150X e p34 Informazioni per l ordine prodotto quantit codice SE600 Chroma unit completa 1 SE600X 15 1 Comprende 3 serie di lastre di vetro due di 15 e pettini 2 set di distanziali da 1 5 mm di spes sore 6 camme dual gel di stand fusione con base di live
43. rima con acqua e poi con acqua distillata Pulire via qualsiasi gel aderente l esterno dei panini gel a Se si esegue un solo gel Bloccare il secondo superiore slot di camera di compensazione con l installazione della diga acrilico tampone incluso con l unit Mon tare i morsetti sulla diga avendo cura di allineare le estremit del morsetto e bordi diga Installare i gel fittizio le viti si affacciano nella culla secondo nel gel caster duale Fissare il panino gel alla camera tampone superiore Girare la camera superiore del buffer a testa in gi e mettere una guarnizione ad incastro a sand wich entrambi i recessi porta Sia la fessura nella guarnizione e la scanalatura nella rientranza devono allinearsi Entrambe le guarnizioni asolati deve essere utilizzato anche se si esegue un solo panino gel Grooves lungo ogni slot aiutare a mantenere la guarnizione al suo posto Inoltre una piccola quantit di Seal gel pu essere applicato a ciascuna estremit della guarnizione prima di installare per contribuire a tenere la guarnizione contro la camera tampone superiore Rilasciare i panini dal caster rimuovendo tutte le camme fondo se presente Abbassare la camera superiore del buffer sui panini gel nello stand cast Nota Non forzare le camme Se si incontra una resistenza insolita smontare e controllare l allineamento pinza e vetro nella parte superiore del sandwich Allineare e reinstallare
44. riore soluzione acrilammide al 15 w v di saccarosio o 25 v v glicerolo per migliorare la stratificazione Preparare la soluzione di monomero Calcolare il volume di soluzione di monomero neces sario Dividete il volume totale a meta e preparare questo volume di entrambi i superiore e inferiore per centuale di acrilammide soluzioni o Versare la soluzione luce nella camera di ser batoio la camera pi distante dalla presa Aprire il rubinetto tra le camere abbastanza a lungo per spostare l aria e quindi chiudere Versare la soluzione pesante nella camera di miscelazione e inserire una barra di agitazione in questa camera Porre a gra diente su un agitatore magnetico e iniziare agitazione ad una velocit che mescola bene ma non introdurre bolle nella soluzione Mescolare il gradiente e pompare la soluzione nel panino Mentre la soluzione viene agitazione iniziare a pom pare dalla camera di miscelazione e aprire il rubine tto alla camera serbatoio Sollevare la cannula quanto liquido entra il panino mantenendo la punta alla superficie del gel Preparare altri gel come richiesto Sovrapposizione ciascun gel con un sottile strato di acqua butanolo saturo acqua o tampone gel diluito per evitare l esposizione all ossigeno gel Lentamente fornire la soluzione overlay da una siringa di vetro dotato di 22 gauge Applicare la soluzione in pros simita del distanziatore ad un lato
45. tante e distorsione banda Tabella 2 liste di partenza punto linee guida e le regolazioni per lo spessore del gel il numero di gel e la velocit di migrazione Corrente Attuali agisce sul totale sezione trasversale di tutti i gel perch i gel sono collegate in paral lelo al circuito elettrico Cos l impostazione corrente per un gel deve essere moltiplicato per il numero di gel della stessa sezione run simultaneamente Per un gel 1 5 millimetri di spessore si consiglia l impostazione corrente di avviamento di 25 mA Due da 1 5 mm gel 50 mA Nota raffreddamento pu essere richiesto di controllare il riscaldamento Joule e p23 Attenzione dopo il controllo iniziale non lasciare incustodito l apparecchio per pi di 1 h prima di controllare i progressi delle bande e il livello del buffer e p24 Tensione La tensione di partenza per un gel 1 5 millimetri lastra collegato ad un alimentatore impostato a 25 mA generalmente 80 90 V utilizzando l unit SE600 Chroma con un sistema discon tinuo tampone Laemmli per SDS gel La ten sione finale tipicamente 250 400 V a seconda della lunghezza del gel Vedi Tabella 2 Tempo Una corsa generalmente completa quando il colorante inseguimento raggiunge il fondo del gel In gel a 16 cm SE600 Chroma di 1 5 mm di spessore Laemmli SDS gel eseguito a 25 mA gel senza raffreddamento di solito richiede 5 ore Registrare ogni corsa Mantenere un recor
46. to da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cos equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento I solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Dulezit Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti l
47. to dal gel di impila mento quindi il campione non deve essere cos concentrato Preparare i pozzetti Togliere il pettine delicatamente cullandolo un lato all altro e poi sollevando verso l alto per evitare di danneggiare le pareti del pozzo Sciacquare accu ratamente ciascun pozzetto con acqua distillata per rimuovere acrilammide non polimerizzato e quindi scaricare invertendo il panino gel o caster Riempire ogni pozzetto con tampone di elettroforesi JL D Nota Una volta che i campioni nei pozzetti fare attenzione a non urtare i panini in modo che i campioni non vengono sversati o mescolato Preparare il campione Aumentare la densit del liquido campione con il 10 glicerolo o saccarosio Aggiungi un colorante di monitoraggio come il rosso fenolo blu di bro mofenolo o pironina Y Per gel SDS proteici 2X tampone di utilizzare un trattamento per denaturare entrambi i campioni secco e liquido in una provetta Per soluzioni proteiche liquide aggiungere un volume uguale di 2X tampone Per asciugare campioni proteici aggiungere volumi uguali di 2X tampone campione e ad elevata purezza per ottenere la concentrazione desiderata Riscaldare il tubo in acqua bollente per 90 secondi poi lasciare raffreddare a temperatura ambiente Campioni trattati possono essere conservati a 40 a 80 C per le corse successive Proteine di membrana di calore a 60 C per 20 minuti Conservare campione inutili
48. uale utente Italiano Hoefer SE600 Chroma Standard Doppio raffreddato gel per l elettroforesi mu SE600X IM ltalian Rev CO 05 12 A Hoefer Contenuto Informazioni Importanti lt lt lt ji Rifiuti di apparecchiature elettriche ed elettroniche RAEE vii Gel elettroforesi unit funzionale e Descrizione 1 Specificazi i z voa bad dh a 2 Apertura della confezione e Inventory lt wau aso E d na aw ane db dia 4 Istruzioni per USO 2 aaa aaa aaa aa 8 Preparare il Sandwich Gel 8 Gel di acrilammide nn unaaunaaaaaaa an 12 Gradient gel E NNN NEE EE NNN e 14 Preparazione del campione e Loading 16 Assemblaggio finale o 18 La separazione del campione 23 Cura e manutenzione lt 26 Risoluzione dei problemi 27 Bibliografia 2 12 6155 i o 31 Informazioni per l ordinazi0ne 34 pi Informazioni Importanti Italiano Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certifica
49. uindi rilasciare i panini girando e la rimozione delle camme o Svitare le pinze dai panini e rimuovere Delicata mente allentare e poi scivolare via entrambi i distanziali Utilizzare il Wonder Hoefer Wedge Gel strumento piastra di separazione per separare i piatti Sollevare con cautela la lastra di vetro con il gel in allegato Maneggiare il gel con cura per evitare di danneggiarla Capovolgere la piastra e il gel posizione bassa sul vassoio colorazione Pry un angolo del gel lontano dal vetro e farla cadere nel cassetto oppure se il gel spesso sufficiente per gestire sollevarlo e metterlo nel cassetto Per evitare schizzi aggiungere la colorazione o la soluzione fissativa al vassoio dopo che il gel viene trasferito Pulire l unit come descritto nella sezione successiva e p25 Pulizia e Non sterilizzare in autoclave o riscaldare qualsiasi parte superiore a 45 C e Non usare solventi organici soluzioni di pulizia abrasivi forti o acidi o basi forti per pulire le camere e Non immergere la guarnizione laminato Nota Se il tubo vecchio incrinata o rotta proteggere la tua mano con guanti spessi un pezzo di stoffa o tovaglioli di carta prima di rimuovere il tubo p26 Cura e manutenzione Immediatamente dopo ogni utilizzo lavare le camere di buffer superiore e inferiore con acqua e poi sciacquare abbondantemente con acqua distillata Maneggiare la camera superior
50. un gradiente di concentrazione di acrilamide per risolvere l intera gamma di dimensioni proteiche Versare un gel pi alto impilamento Per ottenere risultati ottimali permettono un impilamento gel altezza di 2 5 volte l altezza del campione nel pozzo Qualit del reagente Smaltire le soluzioni obsolete di acrilammide e usare solo il pi alto grado di acrilammide Preparazione del campione Durante la preparazione dei campioni evitare di utilizzare soluzioni con elevate concentrazioni saline e p29 problema Fascia bassa risoluzione e p30 possibile causa Condizioni di funzionamento rimedio Iniziare elettroforesi appena il campione viene caricato per impedire specie a basso peso molecolare da diffondere Effettuare la separazione in una posizione pi bassa corrente o tensione per ridurre riscaldamento Joule Qualit del reagente Utilizzare solo i reagenti di altissima qualit Poor impilamento Utilizzare solo gel che erano recentemente preparato Aggiungere un gel di impilamento o aumentare l altezza del gel di impilamento Preparare la Risoluzione gel superficie prima risciacquo con stacking gel monomero prima di ver sare il gel di impilamento per garantire la continuit tra i gel Controllare i valori di pH delle risoluzione e stacking gel soluzioni Non titolare di ritorno buffer Gel polimerizzazione incompleta Lasciare gel per polimerizzare completamente Pr
51. using Handbook 80 6013 88 Hoefer Inc 2001 Non denaturante gel sistemi Reisfeld R A et al Acidic buffer system for resolution of cationic proteins Nature 195 281 1962 McLellan T Electrophoresis buffers for polyacrylamide gels at various pH values Anal Biochem 126 94 1982 Hedrick J L and Smith A J Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by discontinuous gel electrophoresis Arch Biochem Biophys 126 155 1968 Denaturazione sistemi gel Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Matsudaira P T and Burgess D R SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 1978 Schreier M H Erni B and Staehelin T Initiation of mammalian protein synthesis I Purification and characterization of seven initiation factors J Mol Biol Nov 116 4 727 753 1977 e p31 e p32 Shapiro A L and Maizel J V Jr Molecular weight estimation of polypeptides by SDS polyacrylamide gel electrophoresis further data concerning resolving power and general considerations Anal Biochem Jun 29 3 505 514 1969 Schaegger H and Von Jagow G Tricine sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa Anal Biochem 166 368 379 1987 Weber K
52. waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs a l quipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Gerate die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Hausm ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden miissen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Gerates zu erhalten Este simbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrustningar inte far avyttras som osorterat hushallsavfall och maste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen e pvii Gel elettroforesi unit funzionale e Descrizione Il Hoefer SE600 Chroma verticale lastra unit el
53. zzato a 4 C o Underlay il campione nei pozzetti utilizzando una punta fine microsiringa o gel loading punta della pipetta Tabella 1 Volume di campione per le misure standard pettine volume del campione pl per 1 mm di profondit numero spessore pettine mm di pozzi 0 75 1 0 1 5 10 6 2 8 3 12 4 12 5 8 7 7 11 5 15 4 3 5 7 8 6 20 3 1 4 1 6 2 28 2 1 2 7 4 1 1 1 ref prep 4 90 6 121 9 183 1 2 ref prep 4 85 6 112 9 171 e p17 Fig 6 Collegamento panini gel nella camera tampone superiore Se le perdite di assemblaggio necessario per un lavandino e parzialmente rilasciare le camme per consentire buffer di defluire nella camera superiore Smontare controllare l allineamento di tutti i componenti a sandwich e regolare se necessario A Togliere camme dai fori inferiori a camme Posizionare la camera superiore sui panini e quindi inserire le camme nei fori superiori a camme cresta breve termine verso il basso B La posizione finale camma non mostrato deve essere verticale in modo che il gruppo si inserisce nella camera tampone inferiore e p18 Assemblaggio finale Buffer di camera superiore Sciacquare entrambe le camere del buffer con acqua e acqua distillata accuratamente prima di ogni uti lizzo Nota Prima di usare la prima volta smontare l unit e lavare con una soluzione diluita di un detergente laboratorio e risciacquare abbondantemente p
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