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1. Xi R36 38 Irritante para los ojos y la piel S37 39 Llevar guantes adecuados y un aparato de protecci n para los ojos la cara SOLUCION STANDARD Piruvato de sodio 2 mmol L Sodio merthiolato 0 1 Tamp n Fosfato pH 7 5 100 mmol L Conservante Xn R20 21 22 Nocivo por inhalaci n por contacto con la piel y en caso de ingesti n S37 38 Llevar guantes adecuados En caso de ventilaci n insuficiente llevar un aparato respiratorio sel 2 IVD E Fabricante Fecha de caducidad Uso in vitro Temperatura de conservaci n Made in France Ultima Versi n www biolabo fr PRECAUCIONES Los reactivos BIOLABO est n destinados nicamente a profesionales para uso in vitro e Verificar la integridad de los reactivos antes de su utilizaci n e Utilizar equipamientos de protecci n bata guantes gafas No pipetear con la boca e En caso de contacto con la piel o los ojos enjuagar abundantemente y consultar al m dico e Los reactivos contienen azida de sodio concentraci n lt 0 1 que puede reaccionar con metales como el cobre y el plomo de la tuber as Enjuagar con abundancia e La ficha de datos de seguridad puede obtenerse por petici n e Eliminaci n de los deshechos respetar la legislaci n en vigor Por medida de seguridad tratar toda muestra como potencialmente infecciosa Respetar la legislaci n en vigor PREPARACION DE LOS REACTIVOS Los reactivos est n listos para el uso Preparar una soluci n de sosa
2. 0 4 N diluyendo 16 g de sosa en 1 litro de agua desmineralizada Esta soluci n es irritante Ver PRECAUCIONES ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Almacenar a 2 8 C en el vial de origen bien cerrado y protegido de la luz e Almacenados y utilizados en las condiciones adecuadas en ausencia de contaminaci n los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta e Soluci n Standard vial_R4 transvasar la cantidad necesaria tapar bien de nuevo y almacenar a 2 8 C No utilizar los reactivos si est n turbios o si el blanco reactivo medido a 505 nm gt 0 400 No utilizar los reactivos m s all de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA 2 Suero o plasma heparinizado no hemolizado La actividad ALT es estable en la muestra e 24 horas a temperatura ambiente e 7 d as a 2 8C La actividad AST es estable en la muestra e 24 horas a temperatura ambiente e 28 d as a 2 8C e por lo menos un a o a 20 C El a adido de piridoxal fosfato 0 1 mM permite aumentar la estabilidad del AST a temperatura ambiente a 7 d as INTERFERENCIAS 3 Hem lisis Interferencia positiva en raz n del contenido en AST y ALT de los eritrocitos Young D S ha publicado una lista de las sustancias que interfieren con la prueba ANE LOT AN y gt CH Referencia del producto Consultar instrucciones Numero de lote Protegido de la luz Sufici
3. 37 IN LIMITE DE LINEALIDAD M s all de 225 UI L diluir la muestra 1 9 con NaCl 9 g L y hacer de nuevo la determinaci n multiplicando por 10 el resultado final le do sobre la curva factor de diluci n El l mite de linealidad depende de la relaci n de diluci n muestra reactivo MODO DE EMPLEO TECNICA MANUAL Tabla 1 Establecimiento de las Curvas Est ndar Poner los reactivos y muestras a temperatura ambiente Pipetear en tubos mL Agua desmineralizada 1 os os o7 os o5 R4 Est ndar Por o2 os o4 os R3 Colorante Mezclar Dejar 20 minutos a temperatura ambiente A adir NaOH 0 4 No 10 10 10 10 10 10 REF 92026 Mezclar Esperar 5 minutos y leer las absorbancias a 505 nm contra agua Unidades or o so 7 tes 225 eso Unidades aPT o o so mo 225 82 No es necesario hacer de nuevo estas curvas a cada ensayo Tabla 2 ENSAYOS Poner los reactivos y muestras a temperatura ambiente Mezclar y incubar a 37 C durante Exactamente Exactamente 1 hora 30 minutos 1 mt 10 mL Nota Los vol menes pueden ser reducidos de forma proporcional sin modificar los resultados CALCULO v Referirse a la Curva Est ndar provista espec fica del lote O v Hacer las Curvas Est ndar sobre papel milimetrado Absorbancias o semi log transmisi n procediendo como se describe en la tabla 1 Abscisa Unidades en Ul L Ordenada Absorbancias o porcentaje
4. BIOLABO www biolabo fr FABRICANTE BIOLABO SA Les Hautes Rives 02160 Maizy France BIOLABO TGO 92025 R11x100 mL TGP REF 92027 R21x100 mL R3 1 x 100 mL R3 1 x 100 mL AST GOT ALT GPT M todo colorim trico Reactivo para la determinaci n cuantitativa de la actividad Alanina aminotransferasa ALT EC 2 6 1 2 y Aspartato aminotransferasa AST EC 2 6 1 1 en suero o plasma humano R41x10mL R41x10mL 92026 Soluci n NaOH 0 4 N SOPORTE TECNICO Y PEDIDOS Tel 33 03 23 25 15 50 Fax 33 03 23 256 256 CE R1 1 x500 mL Venta al detalle CODIGO SFBC DX USO IN VITRO AAA A SIGNIFICACION CL NICA 1 2 El ALT se encuentra en grandes cantidades en los tejidos hep ticos y renales y en menor medida en el m sculo esquel tico y card aco Aunque la actividad ALT y AST aumenta en el suero sea cual sea el da o de las c lulas hep ticas el ALT es la enzima m s espec fica Un aumento importante de la actividad ALT en el suero o el plasma se observa raramente salvo en enfermedades hep ticas cirrosis carcinoma hepatitis ictericia por obstrucci n biliar o congesti n hep tica La elevaci n de la actividad ALT persiste m s tiempo que la del AST La medida conjunta de la actividad ALT y AST es interesante para diferenciar una hepatitis de otras lesiones parenquimatosas El AST est presente en todos los tejidos del cuerpo pero su actividad m s importante se encuentra en el h
5. an lisis longitud de onda temperatura volumen muestra volumen reactivo tiempo de medida y factor de calibraci n 4 Siel valor obtenido queda fuera de los l mites utilizar otro vial de reactivo y repetir el test 5 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites contactar el servicio t cnico BIOLABO o el distribuidor local INTERVALOS DE REFERENCIA 2 ALT UI L a 30 C a 37 C Reci n nacidos ni os 9 32 13 45 Hombres 7 28 10 40 Mujeres 5 25 7 35 AST UI L a 30 C a 37 C Reci n nacidos 25 75 39 117 Ni o 15 60 23 94 Adulto 8 20 13 31 Se recomienda a cada laboratorio definir sus propios intervalos de referencias para la poblaci n estimada PRESTACIONES 92025 GOT Intra serie Tasa Tasa Inter serie Tasa Tasa N 20 normal elevada N 20 normal elevada Media UI L 37 7 Media UI L 38 S D UI L 1 1 S D UI L 3 75 C V 2 9 C V 9 9 L mite de detecci n aproximadamente 7 2 UI L Sensibilidad para 100 UI L aproximadamente 0 200 Abs a 505nm Comparaci n con reactivo de la competencia y 0 8984 x 3 6 r 0 9729 92027 GPT Intra serie Tasa Tasa Inter serie Tasa Tasa N 20 normal elevada N 20 normal elevada Media UI L 51 6 90 6 Media UI L 29 7 S D UI L 2 2 2 5 S D UI L 1 71 C V 4 2 2 8 C V 5 8 L mite de detecci n aproximadamente 7 2 UI L Sensibilidad para 100 Ul L aproximadamente 0 200 Abs a 505nm Comparaci n con reactivo de la competencia y 1 0477 x 2 3 r 0 97
6. ente para Diluir con Versi n 13 10 2011 REACTIVOS Y MATERIAL COMPLEMENTARIOS 1 Equipamiento de base del laboratorio de an lisis m dico 2 Sueros de control normal y patol gico 3 REF 92026 Soluti n NaOH 0 4 N Xi R36 38 S37 39 ver REACTIVOS CALIBRACION La validez de los resultados depende de la exactitud de la calibraci n del instrumento de la justa medida del tiempo del respeto de la relaci n volumen reactivo volumen muestra y del control de la temperatura Se recomienda establecer una nueva Curva Est ndar a cada nuevo lote de reactivo CALCULO o referirse a la Curva Standard provista espec fica del lote CONTROL DE CALIDAD CODIGO SFBC DX BIOLABO EXATROL N Tasa 1 95010 BIOLABO EXATROL P Tasa 2 95011 Cualquier otro suero de control titulado para este m todo Programa externo de control de calidad Se recomienda controlar en los siguientes casos e Al menos un control por rutina e Al menos un control cada 24 horas e Cambio de vial del reactivo Despu s de operaci n de mantenimiento sobre el analizador Cuando un valor de control se encuentra fuera de los l mites de confianza recomendados aplicar las siguientes acciones correctivas 1 Repetir el test utilizando el mismo control 2 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites preparar un suero de control reci n reconstituido y repetir el test 3 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites verificar los par metros del
7. gado el coraz n los m sculos esquel ticos y en los eritrocitos En la piel los ri ones y el p ncreas se mide una actividad m s baja Aunque la actividad del AST y del ALT en el suero aumenta en todos los casos donde la integridad de las c lulas hep ticas se afecta hepatitis viral necrosis hep tica cirrosis un aumento de la actividad AST en el suero o el plasma aparece despu s de un infarto de miocardio en el 97 de los casos Una actividad AST elevada y ocasionalmente ALT se puede encontrar en casos de distrofia muscular progresiva embolia pulmonar pancreatitis aguda PRINCIPIO 4 M todo colorim trico desarrollado por Tonhazy White y Umbreit y adaptado a la prueba en suero por Reitman y Frankel El esquema reaccional es el siguiente L Alanina 2 Oxoglutarato A Piruvato L Glutamato AST L Aspartato 2 Oxoglutarato de Oxaloacetato L Glutamato El Piruvato o el Oxaloacetato formados reaccionan con el 2 4 DNPH para formar su derivado 2 4 Dinitrofenilhidrazona que da en medio alcalino una coloraci n le ble a 505 nm y proporcional a la actividad AST o ALT en el medio reaccional REACTIVOS Vial R1 SUSTRATO GOT Tamp n Fosfato pH 7 5 85 mmol L 2 oxoglutarato 2 mmol L L aspartato 200 mmol L Conservante Vial R2 SUSTRATO GPT Tamp n Fosfato pH 7 5 100 mmol L 2 oxoglutarato 2 mmol L L alanina 200 mmol L Conservante Vial R3 REACTIVO COLORANTE 2 4 dinitrofenil hidrazina DNPH 1 mmol L HCI 1 mol L
8. s de transmisi n Llevar las absorbancias de los ensayos o porcentajes de transmisi n a la Curva Est ndar correspondiente y calcular las actividades GOT o GPT en UI L AE BIBLIOGRAFIA 1 TIETZ N W Text book of clinical chemistry 3 Ed C A Burtis E R Ashwood W B Saunders 1999 p 652 657 2 Clinical Guide to Laboratory Test 3 Ed N W TIETZ 1995 p 20 21 et p 76 77 3 YOUNG D S Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests 4 Ed 1995 p 3 6 a 3 17 et p 3 68 a 3 79 4 A colorimetric method for the determination of serum GOT and GPT REITMAN S and FRANKEL S Amer J Clin Path 1957 28 p 56 63 Made in France Ultima Versi n www biolabo fr Versi n 13 10 2011
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