Reactivos - Annar Diagnóstica Import
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1. 1 Tan EM Autoantibodies to nuclear antigens ANA Their immunobiology and medicine Advances in Immunology 1982 33 167 239 Francoeur AM Chan EK Garrels Jl Mathews MB Characterization and purification of lupus antigen La and RNA binding protein Mol Cell Biol 1985 5 3 586 590 Alexander EL Hirsch TJ Arnett FC Provost TT Stevens MB Ro SS B and La SS B antibodies in the clinical spectrum of Sj gren s Syndrome J Rheumatology 1982 9 239 246 Alspaugh MA Talal N Tan EM Differentiation and characterization of autoantibodies and their antigens in Sjogren s syndrome Arthritis Rheum 1976 19 216 222 Meilof JF Smeenk RJ Autoantibodies and their target antigens in Sjogren s syndrome Neth J Med 1992 40 3 4 140 147 Moutsopoulos HM Zerva LV Anti Ro SSA La SSB antibodies and Sjogren s syndrome Clin Rheumatol 1990 9 1 supl 1 123 130 Egner W The use of laboratory tests in the diagnosis of SLE J Clin Pathol 2000 53 6 424 432 Shiboski SC Shiboski CH Criswell LA Baer AN Challacombe S Lanfranchi H Schigdt M Umehara H Vivino F Zhao Y Dong Y Greenspan D Heidenreich AM Helin P Kirkham B Kitagawa K Larkin G Li M Lietman T Lindegaard J McNamara N Sack K Shirlaw P Sugai S Vollenweider C Whitcher J Wu A Zhang S Zhang W Greenspan JS Daniels TE para los grupos de investigaci n de la Sj gren s International Collaborative Clinical Alliance SICCA American College of Rheumatolog2. nas SS A y SS B se asocian al mismo tipo de RNA Los autoanticuerpos contra el ant geno SS B se encuentran en el 5 15 de los pacientes con lupus eritematoso sist mico LES y en el 30 50 de los pacientes con s ndrome de Sj gren SS Un resultado positivo para los anticuerpos anti SS B La es uno de los tres criterios indicados en la lista de criterios de clasificaci n del American College of Rheumatology para el s ndrome de Sj gren Los pacientes con LES que producen tanto SS B como SS A a diferencia de los que solo generan SS A presentan generalmente una forma mas leve de la enfermedad asi como una menor incidencia de nefritis y una menor cantidad de anticuerpos anti dsDNA La IgG anti SS B junto con la anti Ro60 y la anti Ro52 se transfiere a trav s de la placenta en el ltimo trimestre del embarazo y puede dar lugar a patolog as en el reci n nacido lupus neonatal o bloqueo cardiaco cong nito Se han utilizado varios m todos incluidas la doble difusi n de Ouchterlony y la aglutinaci n pasiva para detectar anticuerpos anti SS B Tambi n se han desarrollado ensayos ELISA con utilidad cl nica para detectar anticuerpos anti SS B El QUANTA Flash SS B es un inmunoensayo por quimioluminiscencia muy sensible para la detecci n y la determinaci n de anticuerpos anti SS B que proporciona resultados semicuantitativos en un amplio rango de medici n anal tica y ofrece la comodidad de un acceso aleatorio una carga continua
3. datos obtenidos se resumen a continuaci n Intraensayo Interensayo Interd a Total Muestra N Media DE CV DE CV DE CV DE CV 1 112 10 0 0 4 3 9 0 4 4 1 0 8 8 3 1 0 10 1 2 104 23 1 1 1 4 7 0 4 1 8 2 1 91 2 4 10 4 3 96 91 4 3 3 3 7 3 3 3 6 7 6 8 3 8 9 9 7 4 96 187 9 17 4 9 3 10 9 5 8 15 9 85 26 0 13 8 5 92 452 8 20 1 4 14 27 6 6 1 446 99 56 2 12 4 6 96 872 3 61 1 7 0 59 0 6 8 62 4 7 2 105 4 12 1 7 104 1371 41 96 3 7 0 33 9 2 55 1048 7 6 146 3 10 7 L mites de detecci n rango lineal y rango de medici n anal tica El l mite inferior de detecci n de este ensayo determinado seg n el documento EP17 A del CLSI es 508 RLU que se encuentra muy por debajo del m nimo del AMR 3 3 CU El AMR completo que va de 3 3 CU a 1 706 8 CU es lineal Se ha realizado un estudio de linealidad conforme al documento EP6 A del CLSI utilizando 7 muestras de suero con diferentes concentraciones de anticuerpo anti SS B Todas las 7 muestras presentaron linealidad de diluci n individualmente y los datos combinados generaron los resultados siguientes con regresi n lineal Muestra Rango del Pendiente Intersecci n en Y an lisis CU IC del 95 IC del 95 R2 Todas las muestras Pe 34a 1 828 1 1 03 de 1 01 a 1 04 3 44 de 2 72 a 9 60 0 99 QUANTA Flash SS B 7
4. de muestras y un corto tiempo de an lisis Principios del procedimiento Se recubren con prote na SS B recombinante part culas paramagn ticas que se guardan en el cartucho de reactivos en unas condiciones que mantienen el ant geno en su estado reactivo Cuando el cartucho de an lisis est preparado para el primer uso se a ade una soluci n de tamp n al tubo que contiene las part culas y estas se mezclan con el tamp n A continuaci n se coloca el cartucho de reactivos en el instrumento BIO FLASH Mediante el instrumento se diluye una muestra de suero de paciente en una cubeta desechable de pl stico Se combinan en una segunda cubeta y se mezclan peque as cantidades del suero de paciente diluido las part culas de SS B y el tamp n de an lisis Esta cubeta se incuba a 37 C y despu s se magnetizan las part culas y se lavan varias veces A continuaci n se a ade anticuerpo anti lgG humana conjugado con isoluminol a la cubeta y esta se incuba a 37 C De nuevo las part culas se magnetizan y se lavan repetidamente El conjugado de isoluminol produce una reacci n luminiscente cuando se a aden a la cubeta los reactivos iniciadores La luz generada por la reacci n se mide como unidades relativas de luz RLU mediante el sistema ptico del BIO FLASH El resultado en RLU es proporcional a la cantidad de conjugado de isoluminol ligado que a su vez es proporcional a la cantidad de anticuerpos anti SS B unidos al SS B en las par
5. logo Utilizar antes del tiempo indicado Fabricante Representante autorizado Contenido suficiente para n an lisis Control positivo Control negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Caja de cart n reciclable Mantener en esta posici n QUANTA Flash es una marca comercial registrada de INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH es una marca comercial registrada de Biokit SA O 2012 17 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos de Am rica Servicio t cnico solo para EEUU y Canad 877 829 4745 Servicio t cnico fuera de EEUU 1 858 805 7950 support inovadx com Representante autorizado en la UE Medical Technology Promedt Consulting GmBH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemania Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621150ESP Julio de 2012 Revisi n 0 18
6. reum ticas y 30 con varias enfermedades infecciosas Adem s se han analizado retrospectivamente 15 muestras de competencia procedentes del College of American Pathologists CAP y del National External Quality Assessment Service del Reino Unido UKNEQAS que se han incluido solo en el estudio de comparaci n de m todos La sensibilidad y especificidad cl nicas para el SS n 40 y el LES n 240 usando la poblaci n de control n 271 se calcula en las dos tablas siguientes Sensibilidad y especificidad cl nicas del QUANTA Flash SS B en el SS An lisis cl nico Diagn stico An lisis n 311 Sin SS intervalo de confianza 95 Positivo Sensibilidad 35 0 20 6 51 7 Negativo Especificidad 97 4 94 8 99 0 Total Un paciente con esclerodermia uno con enfermedad hepatica autoinmune y uno con artritis reumatoide los tres son tambi n positivos en el ELISA SS B Tres muestras adicionales proced an de pacientes con artritis reumatoide y el ltimo paciente tenia artropatia psori sica QUANTA Flash SS B Sensibilidad y especificidad clinicas del QUANTA Flash SS B en el LES An lisis cl nico Diagn stico An lisis n 511 LES Sin LES intervalo de confianza 95 Positivo Sensibilidad 13 8 9 7 18 8 Negativo Especificidad 97 4 94 8 99 0 Total Un paciente con esclerodermia uno con enfermedad hep tica autoinmune y uno con artritis reumatoide los tres son tambi n positivos en e
7. 01151 Calibradores Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los calibradores QUANTA Flash SS B estan destinados a utilizarse con el inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA QUANTA Flash SS B en el instrumento BIO FLASH Cada calibrador establece un punto de referencia para la curva de trabajo utilizada en la determinaci n de los valores de las unidades de quimioluminiscencia CU para la medici n de anticuerpos anti SS B en suero Resumen y principios del procedimiento El CIA QUANTA Flash SS B emplea una curva maestra predefinida espec fica de cada lote que se guarda en el c digo de barras del cartucho de reactivos Los calibradores QUANTA Flash SS B est n dise ados para generar una curva de trabajo espec fica para el instrumento a partir de los par metros de la curva maestra con un punto de decisi n basado en las caracter sticas de rendimiento y en la evaluaci n cl nica del CIA QUANTA Flash SS B Los calibradores se analizan en varios instrumentos con diversos lotes de reactivos antes de efectuar la asignaci n de valores Reactivos 1 Calibrador 1 del QUANTA Flash SS B Dos 2 tubos etiquetados con c digo de barras que contienen 0 3 mL de reactivo prediluido listo para utilizarse Los calibradores contienen anticuerpos humanos anti SS B con estabilizantes y conservantes 2 Calibrador 2 del QUANTA Flash SS B Dos 2 tubos etiquetados con c digo de barras q
8. QUANTA Flash SS B 701153 Reactivos Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACI N NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto El QUANTA Flash SS B es un inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA para la detecci n semicuantitativa de anticuerpos contra el ant igeno del s ndrome de Sj gren de tipo B SS B en suero humano en el instrumento BlO FLASH La presencia de anticuerpos anti SS B junto con datos cl nicos y otras pruebas de laboratorio puede servir de ayuda en el diagn stico del s ndrome de Sj gren y del lupus eritematoso sist mico Resumen y explicaci n de la prueba Dado que los anticuerpos antinucleares ANA se encuentran en una gran variedad de enfermedades del tejido conectivo permiten realizar an lisis de detecci n sensibles Los sueros positivos para los ANA reaccionan con varios ant genos nucleares diferentes incluidas las ribonucleoprote nas nucleares peque as como la SS B tambi n denominada ant geno La del lupus Las ribonucleoprote nas nucleares peque as son complejos de RNA y prote nas que se combinan con pre mRNA no modificado y varias otras prote nas para formar un empalmosoma o ayustosoma un gran complejo molecular de RNA y prote nas sobre el que tiene lugar el corte y empalme de pre mRNA Los anticuerpos anti SS B reaccionan con una prote na de 47 kDa asociada al hY RNA Los anticuerpos anti SS B se detectan muy pocas veces sin el anti SS A Ro60 ya que las prote
9. System Rinse Add bottle Una vez aceptado el c digo de barras haga clic en Finish si es necesario Para vaciar el recipiente de residuos l quidos en la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Fluid Waste Extraiga el residuo l quido y t relo Haga clic en Next Una vez sustituido el frasco vac o haga clic en Finish M todo Preparaci n del cartucho de reactivos La primera vez que se usa el cartucho de reactivos deben seguirse los pasos indicados a continuaci n para instalar el cartucho adecuadamente en el instrumento BIO FLASH Nota No utilice el cartucho de reactivos si observa alg n signo de da o 1 Coloque el cartucho de reactivos sobre una superficie s lida Con una mano sostenga el cartucho de reactivos en su lugar Con la otra mano agarre con fuerza la anilla roja de la parte posterior del cartucho de reactivos y tire de ella completamente 2 Pulse las dos pesta as laterales del tap n de perforaci n parte gris y aplique presi n a la parte superior del cartucho de reactivos hasta que descienda y alcance un tope Las pesta as deber an quedar ocultas NO INVIERTA EL CARTUCHO ABIERTO 3 Resuspenda las micropart culas de SS B a Destape el vial de tamp n de resuspensi n y recoja fluido en la pipeta de transferencia suministrada Se utilizar todo el contenido del vial b Deslice la puerta de la tapa del cartucho de reactivos hasta la posici n abierta presionando suavem
10. de la parte superior derecha a En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Triggers situado a la izquierda Se abrir una nueva ventana Add Triggers Remove old bottles b Abra el caj n de residuos del instrumento BIO FLASH y extr igalo Tire todas las cubetas al caj n de residuos secos Haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Retire los frascos del iniciador de sus soportes y haga clic en el bot n Next Desenrosque los frascos viejos del iniciador de sus tapones y sustit yalos por nuevos iniciadores Realice la operaci n frasco a frasco y respete el c digo de color de los tapones blanco blanco rojo rojo c Siga las instrucciones de la ventana que se abrir Add Triggers Add Trigger 2 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 2 en el soporte de color blanco Haga clic en Next d Siga las instrucciones de la ventana Add Triggers Add Trigger 1 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 1 en el soporte de color rojo Haga clic en Finish Vuelva a colocar el caj n de residuos en su lugar y ci rrelo Para sustituir el recipiente de l quido de lavado del sistema haga clic en el bot n Bulks Inventory F9 en la esquina superior derecha En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Sys Rinse En la ventana que se abrir Add System Rinse Remove bottles haga clic en Next Siga las instrucciones de la ventana que aparecer Add
11. e de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 4 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones Pp Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Este ensayo solo debe utilizarse con el instrumento BIO FLASH Se recomienda seguir estrictamente el protocolo de resuspensi n indicado Una vez abierto el cartucho de reactivos debe almacenarse en la bandeja de reactivos del instrumento La colocaci n del cartucho de reactivos en el instrumento por primera vez debe realizarse con todo cuidado para no verter los reactivos Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento seg n el procedimiento recomendado que est indicado en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los cartuchos de reactivos no abiertos y el tamp n de resuspens
12. el valor o dosis y la DE objetivo En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M V Seleccione QC Ctrl F2 Marque el ensayo SS B en la columna de la izquierda A continuaci n seleccione el material de control apropiado en la derecha SSBN para el control negativo o bien SSBP para el control positivo Haga clic en el bot n New QC Lot Cada kit de control incluye una hoja de datos espec fica del lote Introduzca la informaci n de esta hoja de datos en el software Dicha informaci n debe comprender el n mero de lote la caducidad la dosis objetivo y la DE objetivo Si es necesario haga clic en el bot n Add Assay En la ventana que se abrir aseg rese de que est marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo SS B en la lista y haga clic en Add Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Se recomienda analizar los controles QUANTA Flash SS B una vez cada d a en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambi n deben tener en cuenta los requisitos legales de mbito nacional y local 14 Cada control debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del control y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a tra
13. ente el lateral estrecho del cartucho de reactivos y mant ngala en esta posici n Transfiera anal ticamente todo el contenido del vial al tubo de reactivo de micropart culas a trav s del nico orificio de la parte superior del cartucho de reactivos Cc Mezcle el contenido del tubo de reactivo 30X p de microparticulas aspirando y dispensando el l quido al menos 30 veces Si se observan masas visibles de part culas contin e mezclando la Mio 7 m gt we soluci n 30 veces m s Si las microparticulas no se resuspenden NO gt UTILICE EL CARTUCHO d Aseg rese de dispensar todo el l quido antes de retirar la pipeta del tubo y desecharla 4 Retire el adhesivo de la parte superior del cartucho de reactivos para descubrir los otros tres orificios 5 Coloque el cartucho de reactivos en cualquier ranura abierta de la bandeja de reactivos del instrumento BIO FLASH Calibraci n del ensayo 1 Cada nuevo lote de cartucho de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre 2 Consulte el apartado Calibradores QUANTA Flash SS B 701151 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre c mo calibrar el cartucho de reactivos 3 Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos en el que se ha efectuado la calibraci n estar preparado para utilizarse Programaci n y an l
14. i n a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los cartuchos de reactivos abiertos deben guardarse cargados en el instrumento y permanecen estables durante 25 d as tras este per odo deben desecharse El software BIO FLASH supervisa las fechas de caducidad de los cartuchos cargados as como las de los lotes de cartuchos de reactivos Recogida de muestras Este procedimiento debe realizarse en una muestra de suero No deben utilizarse muestras que est n contaminadas con microorganismos que hayan recibido un tratamiento a base de calor o que contengan part culas visibles Las muestras que conten an hasta 10 mg dL de bilirrubina 200 mg dL de hemoglobina 1 000 mg dL de triglic ridos 224 mg dL de colesterol o 500 Ul mL de factor reumatoide IgM no presentaron interferencias en el ensayo QUANTA Flash SS B Tras la recogida el suero debe separarse del co gulo El documento H18 A4 del CLSI recomienda las siguientes condiciones de almacenamiento de muestras 1 No guarde las muestras a temperatura ambiente durante m s de 8 horas 2 Siel an lisis no se efect a en un plazo de 8 horas refrigere las muestras a 2 8 C 3 Si el an lisis no va a realizarse en un plazo de 48 horas o si debe preparar las muestras para enviarlas cong lelas a una temperatura de 20 C o inferior Las muestras congeladas deben mezclarse bien despu s de desconge
15. i se utiliza el mismo tubo de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos Para conseguir una estabilidad ptima retire los controles del sistema inmediatamente despu s de tomar las muestras y almac nelos tapados a 2 8 C en el vial original Procedimiento Para crear nuevos materiales de control de calidad para el ensayo SS B 1 Antes de utilizar los controles QUANTA Flash SS B por primera vez en el instrumento introduzca en el software el nombre el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M V Seleccione QC Ctrl F2 Haga clic en el bot n New QC Material Cada kit de control incluye una hoja de datos espec fica del lote En primer lugar introduzca el nombre el n mero de lote y la caducidad de esta hoja de datos en el software A continuaci n haga clic en el bot n Add Assay En la ventana que se abrir aseg rese de que est marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo SS B en la lista y haga clic en Add Por ltimo introduzca la dosis objetivo y la DE objetivo Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Para crear un nuevo lote para los materiales de control de calidad existentes 1 Antes de utilizar un nuevo lote de controles QUANTA Flash SS B por primera vez introduzca en el software el lote la caducidad
16. isis de muestras 1 Pulse el bot n Worklist de la parte superior de la pantalla y seleccione la pesta a Racks de la parte inferior 2 Seleccione la gradilla de muestras que se utilizar marc ndola en la pantalla o escaneando su c digo de barras con el lector manual de c digos de barras Escanee o escriba el nombre de la muestra indique el tipo de muestra elija el tipo de recipiente tubo copa y seleccione SS B en el panel del ensayo Repita estos pasos para todas las muestras 3 Cargue las muestras en las posiciones seleccionadas de la gradilla de muestras y coloque la gradilla en el carro de muestras del instrumento 4 Cuando todos los materiales necesarios est n cargados en el instrumento el icono de inicio pasar a estar disponible en color verde en la parte superior de la pantalla Pulse el icono Start F4 para comenzar el an lisis Control de calidad Los controles QUANTA Flash SS B vendidos por separado n mero de producto de INOVA 701152 contienen los controles positivos y negativos para el SS B Consulte el apartado Controles QUANTA Flash SS B 701152 de este documento para obtener instrucciones detalladas sobre c mo introducir en el software todos los datos necesarios de cada control y c mo analizar los controles Se recomienda analizar los controles una vez cada d a en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambi n deben tener en cuenta los requisitos de la legislaci n nacional y local C lculo de
17. l ELISA SS B Tres muestras adicionales proced an de pacientes con artritis reumatoide y el ltimo paciente ten a artropat a psori sica QUANTA Flash SS B Distribuci n de las poblaciones de control de la enfermedad utilizadas en el estudio de validaci n Grupo de pacientes Negativo Positivo o Enfermedad tiroidea autoinmune Enfermedad tiroidea no autoinmune Enfermedad hep tica autoinmune Esclerodermia Artritis reumatoide Otras enfermedades reum ticas sist micas Hepatitis v rica VIH S filis ooo bh O Comparaci n de m todos con un instrumento destinado al mismo fin Las muestras para el an lisis de comparaci n de m todos han sido aquellas muestras de los estudios de validaci n pacientes con SS y LES otros controles de enfermedad muestras de competencia y donantes de sangre que se encontraron dentro del AMR del ensayo Dichas muestras se analizaron mediante el QUANTA Flash SS By tambi n en un ELISA destinado al mismo fin Comparaci n de m todos N Concordancia 133 FUSA SSB intervalo de confianza 95 Negativo Positivo CIA QUANTA Negativo Conc pos 83 3 69 8 92 5 Flash Positivo Conc neg 91 8 83 8 96 6 SS B Total Conc total 88 7 82 1 93 5 Precision y reproducibilidad La precisi n del ensayo QUANTA Flash SS B se ha evaluado analizando 7 muestras de suero seg n el documento EP5 A2 del CLSI Los
18. larse y antes del an lisis Procedimiento Materiales suministrados 4 4 4 Cartucho de reactivos QUANTA Flash SS B tamp n de resuspensi n pipeta de transferencia Materiales adicionales necesarios no suministrados Instrumento BIO FLASH con ordenador para manejarlo L quido de lavado del sistema BIO FLASH n mero de componente 3000 8205 Iniciadores BIO FLASH n mero de componente 3000 8204 Cubetas BIO FLASH n mero de componente 3000 8206 Calibradores QUANTA Flash SS B n mero de componente 701151 Controles QUANTA Flash SS B n mero de componente 701152 Uso del analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH 1 Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Para obtener m s informaci n o solucionar problemas relativos al ensayo p ngase en contacto con el servicio t cnico de INOVA Diagnostics Inc en la direcci n o n mero de tel fono indicados al final de estas instrucciones de uso Para vaciar el recipiente de residuos s lidos abra el caj n de residuos Retire el recipiente de residuos s lidos y elim nelo de forma adecuada Vuelva a colocar el recipiente de residuos s lidos en su lugar cierre el caj n de residuos y haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Para sustituir los iniciadores haga clic en el bot n Bulks Inventory F9
19. los ensayos con anticuerpos anti SS B En su lugar se ha analizado el suero de referencia del Centers for Disease Control and Prevention para anticuerpos anti SS B 152073 ANA n m 2 patr n moteado anti SS B La y se ha determinado una concentraci n de 1 634 9 CU Limitaciones Estos calibradores est n dise ados para realizar 4 calibraciones El tiempo m ximo durante el que los tubos del calibrador pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es 8 horas Si los calibradores destapados permanecen en el instrumento durante mas de 8 horas deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de calibrador para mas de 4 calibraciones y o durante m s de 8 horas es posible que la calibraci n del ensayo sea incorrecta lo que producir resultados err neos 12 QUANTA Flash SS B 701152 Controles Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los controles QUANTA Flash SS B estan destinados al control de calidad del inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA QUANTA Flash SS B utilizado en el instrumento BIO FLASH Resumen y principios del procedimiento Los controles QUANTA Flash SS B estan constituidos por un control negativo y un control positivo Cada uno de ellos contiene una cantidad diferente de anticuerpos anti SS B El control negativo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles muy bajos de autoanticuerpo El contr
20. los resultados INOVA genera una curva maestra de cinco puntos para cada nuevo lote del QUANTA Flash SS B Esta curva log stica de cuatro par metros se codifica mediante el c digo de barras de cada cartucho de reactivos Una vez calibrado un cartucho de reactivos se utilizar una curva de trabajo espec fica del instrumento para convertir las RLU a CU La reactividad del anticuerpo frente al SS B puede entonces clasificarse seg n la tabla siguiente Reactividad CU Negativo lt 20 Positivo 220 La reactividad expresada en CU est directamente relacionada con la titulaci n del autoanticuerpo en la muestra de paciente Los aumentos y disminuciones de las concentraciones de autoanticuerpos en los pacientes se reflejar n en un correspondiente aumento o disminuci n de la CU que es proporcional a la cantidad de anticuerpo El rango de medici n anal tica del ensayo AMR va de 3 3 CU a 1 706 8 CU Si el resultado de un paciente es inferior a 3 3 CU el sistema BIO FLASH indicar lt 3 3 CU Dado que este valor es inferior a 20 CU se considera un resultado negativo Si el resultado de un paciente es superior a 1 706 8 CU el sistema BIO FLASH indicar gt 1 706 8 CU Este valor se considera un resultado positivo El software BIO FLASH dispone de una opci n denominada Auto Rerun rean lisis autom tico Si esta opci n est seleccionada el instrumento volver a analizar autom ticamente cualquier muestra que presente un re
21. nado a uso diagn stico In Vitro Los controles QUANTA Flash SS B deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash SS B No transfiera los reactivos de los controles a tubos secundarios Los c digos de barras de los tubos son utilizados por el instrumento para identificar al control 4 Cada tubo de control una vez abierto es v lido para 15 usos y puede permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso 13 Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento seg n el procedimiento recomendado que est indicado en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los controles no abiertos a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los controles abiertos son v lidos para 15 usos y pueden permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso El tiempo m ximo durante el que los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles destapados que permanezcan en el instrumento durante un periodo de tiempo de m s de 2 5 horas en total deben desecharse S
22. ol positivo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles de autoanticuerpo de moderados a altos Reactivos 1 Control negativo del QUANTA Flash SS B Dos 2 tubos etiquetados con c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para utilizarse Los controles contienen anticuerpos humanos anti SS B con estabilizantes y conservantes 2 Control positivo del QUANTA Flash SS B Dos 2 tubos etiquetados con c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para utilizarse Los controles contienen anticuerpos humanos anti SS B con estabilizantes y conservantes Advertencias 1 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los controles para este producto ha sido analizado y ha producido un resultado negativo con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los controles QUANTA Flash SS B deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 2 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 3 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones 1 Este producto est desti
23. rrido este tiempo los reactivos deben desecharse Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento seg n el procedimiento recomendado que est indicado en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 2 Guarde los calibradores no abiertos a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los calibradores abiertos deben desecharse al cabo de 8 horas Procedimiento 1 Cada nuevo lote de cartucho de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre Cada calibrador debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del calibrador y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en la bandeja de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los
24. s de rendimiento de este ensayo no se han establecido para sustratos distintos del suero Rango de referencia El l mite de detecci n del ensayo se ha determinado analizando un grupo de preparaci n de 207 muestras caracterizadas formado por 182 muestras de sujetos de referencia y 25 muestras caracterizadas que han sido positivas para el anticuerpo anti SS B El l mite de detecci n se ha establecido como superior al percentil 99 de los resultados obtenidos en los sujetos de referencia y se le ha asignado un valor de 20 CU Valores esperados Los niveles de autoanticuerpos anti SS B se han analizado mediante el QUANTA Flash SS B en un grupo de 200 donantes de sangre aparentemente sanos 152 mujeres y 48 hombres de edades comprendidas entre 17 y 60 a os con una edad media de 32 a os y una mediana de edad de 29 a os Con el l mite de detecci n de 20 CU dos de las muestras un 1 0 fueron positivas en el QUANTA Flash SS B La concentraci n media fue de 4 3 CU y los valores oscilaron entre lt 3 3 CU y 174 1 CU Sensibilidad y especificidad cl nicas En el estudio de validaci n cl nica se han empleado en total 566 muestras que incluyen 240 muestras de pacientes con LES procedentes de dos cohortes diferentes y 40 de pacientes con s ndrome de Sj gren de dos cohortes diferentes Como controles se han utilizado 85 pacientes con enfermedad tiroidea autoinmune y no autoinmune 2 con enfermedad hep tica autoinmune 154 con enfermedades
25. sultado superior a 1 706 8 CU diluy ndola otra vez seg n un factor de 10 y calcular la CU real a partir de este factor de diluci n adicional Interpretaci n de los resultados El ensayo QUANTA Flash permite detectar peque as diferencias en las poblaciones de pacientes Se aconseja que cada laboratorio verifique el rango de referencia indicado por el fabricante y si lo desea establezca su propio rango normal a partir de sus propios controles y su poblaci n de pacientes de acuerdo con sus procedimientos particulares Es recomendable que los resultados comunicados por el laboratorio incluyan la informaci n siguiente Los siguientes resultados se han obtenido mediante el inmunoensayo por quimioluminiscencia QUANTA Flash SS B de INOVA Es posible que los valores obtenidos con m todos de ensayo de otros fabricantes no sean intercambiables con dichos resultados La magnitud de los niveles de autoanticuerpos obtenidos no siempre puede correlacionarse con un t tulo de punto final Limitaciones del procedimiento 1 No todos los pacientes con LES y s ndrome de Sj gren son positivos para el SS B Los resultados de este an lisis deben utilizarse junto con datos cl nicos y otras pruebas serol gicas 2 Si la resuspensi n de las part culas recubiertas de SS B no se efect a de un modo adecuado pueden obtenerse resultados inferiores en comparaci n con los an lisis que han tenido una resuspensi n adecuada 3 Las caracter stica
26. t culas El ensayo QUANTA Flash SS B utiliza una curva maestra predefinida espec fica para cada lote que se carga en el instrumento mediante el c digo de barras del cartucho de reactivos A partir de los resultados obtenidos del an lisis de dos calibradores se genera una curva de trabajo espec fica para el instrumento que el software emplea para calcular las unidades de quimioluminiscencia CU bas ndose en el valor de RLU obtenido por cada muestra Reactivos la El cartucho de reactivos del QUANTA Flash SS B contiene los siguientes reactivos para 50 determinaciones a Part culas paramagn ticas recubiertas de SS B conservadas antes del primer uso b Tamp n de an lisis de color rosa que contiene soluci n salina tamponada con Tris Tween 20 estabilizantes de prote nas y conservantes C IgG trazadora anticuerpo anti lgG humana etiquetada con isoluminol que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservante 2 Tamp n de resuspensi n de color rosa en un vial que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 El tamp n de an lisis contiene una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida s dica como conservante La azida s dica es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida s dica puede reaccionar con el plomo o el cobr
27. tubos del calibrador e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH El instrumento analizar cada calibrador por triplicado Una vez analizados los calibradores el software solicitar la validaci n de la calibraci n En la pantalla Instrument Summary haga clic en bot n de flecha Choose more options Ctrl M V Seleccione Calibration Ctrl F3 En la ventana Calibration marque el ensayo deseado y haga clic en Details En la ventana Calibration Details que se abrir seleccione la calibraci n que acaba de efectuar La curva maestra se visualizar como una l nea discontinua y la nueva curva maestra como una l nea continua Si los resultados de la calibraci n son v lidos en la parte inferior izquierda de la pantalla aparecer un bot n de validaci n Haga clic en el bot n Validate Calibration Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos en el que se ha efectuado la calibraci n estar preparado para utilizarse Se recomienda analizar los controles QUANTA Flash SS B vendidos por separado n mero de producto 701152 tras calibrar un lote de cartuchos de reactivos 11 Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti SS B que permita estandarizar
28. ue contienen 0 3 mL de reactivo prediluido listo para utilizarse Los calibradores contienen anticuerpos humanos anti SS B con estabilizantes y conservantes Advertencias 1 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los calibradores para este producto ha sido analizado y ha producido un resultado negativo con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los calibradores QUANTA Flash SS B deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 2 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 3 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos 10 Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Los calibradores QUANTA Flash SS B deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash SS B No transfiera los reactivos de los calibradores a tubos secundarios Los c digos de barras de los tubos son utilizados por el instrumento para ajustar los calibradores al tipo de ensayo adecuado Los tubos de los calibradores una vez abiertos pueden utilizarse durante un m ximo de 8 horas o 4 calibraciones transcu
29. v s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en la bandeja de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del control e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti SS B que permita estandarizar los ensayos con anticuerpos anti SS B En su lugar se ha analizado el suero de referencia del Centers for Disease Control and Prevention para anticuerpos anti SS B 152073 ANA n m 2 patr n moteado anti SS B La y se ha determinado una concentraci n de 1 634 9 CU Limitaciones Estos controles est n dise ados para 15 usos La etiqueta de cada tubo de control posee una fila de 15 casillas que pueden marcarse para controlar el n mero de usos El tiempo m ximo durante el que los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles destapados que permanezcan en el instrumento durante m s tiempo deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos 15 Bibliograf a
30. y Classification Criteria for Sj gren s Syndrome A Data Driven Expert Consensus Approach in the Sjogren s International Collaborative Clinical Alliance Cohort American College of Rheumatology 2012 64 4 475 487 Maddison PJ Mogavero H Reichlin M Patterns of clinical disease associated with antibodies to nuclear RNP J Rheumatology 1978 5 407 Kephart DC Hood AF Provost TT Neonatal Lupus Erythematosus New Serological Findings J Invest Derm 1981 77 331 333 Friedman DM Rupel A Buyon JP Epidemiology etiology detection and treatment of autoantibody associated congenital heart block in neonatal lupus Curr Rheumatol Rep 2007 9 2 101 108 Sanchez Guerrero J Lew RA Fossel AH Schur PH Utility of anti Sm anti RNP anti Ro SS A and anti La SS B extractable nuclear antigens detected by enzyme linked immunosorbent assay for the diagnosis of systemic lupus erythematosus Arthritis Rheum 1996 39 6 1055 1061 Buyon JP Neonatal lupus bedside to bench and back Scand J Rheumatol 1996 25 5 271 276 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories BMBL 5 edition Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 16 o 3 y o O 0 Cc N o O 0 PO ls LOT ONTR E gt BE i E a Dispositivo m dico para diagn stico In Vitro Consulte las instrucciones de uso L mites de temperatura No reutilizar Riesgos biol gicos C digo del lote N mero de cat
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