LIAISON® 25 OH Vitamin D GEN 3 Control Set (310601)
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1. culas magn ticas coloque el integral en el instrumento y deje que la espuma se disipe El integral estar listo para su uso cuando la espuma haya desaparecido y el integral haya permanecido mezcl ndose en el instrumento Carga del integral en el rea de reactivos Analizador LIAISON Coloque el integral en el rea de reactivos del analizador con el c digo de barras mirando a la izquierda y d jelo reposar durante 30 minutos antes de utilizarlo El analizador agita autom ticamente las part culas magn ticas hasta su total resuspensi n Siga las instrucciones del manual del analizador para cargar las muestras e iniciar el ensayo 7 ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DEL INTEGRAL DE REACTIVOS A su recepci n almacene el integral de reactivos en posici n vertical para facilitar la resuspensi n de las part culas magn ticas Si el integral de reactivos se almacena sin abrir los reactivos permanecen estables a 2 8 C hasta la fecha de caducidad No lo congele El integral de reactivos no debe utilizarse despu s de la fecha de caducidad indicada en el kit y en las etiquetas correspondientes Una vez abiertos vuelva a colocar los integrales en la caja del kit y gu rdela en posici n vertical a 2 8 C o en el analizador LIAISON Si se guardan correctamente los integrales abiertos mantienen su estabilidad de uso durante 8 semanas Consulte los intervalos de calibraci n en la secci n 10 8 OBTENCI N Y PREPARACI N DE LAS MUESTRAS Recoja2. de colonizar el duro entorno cido del est mago Para ello la H pylori utiliza sus flagelos para horadar activamente la mucosidad hasta alcanzar la capa de c lulas epiteliales del est mago Adem s la H pylori produce ureasa una enzima que degrada la urea en di xido de carbono y amon aco y ayuda a neutralizar el cido g strico presente en el est mago El diagn stico de la infecci n por H pylori se obtiene aplicando distintos m todos entre ellos biopsia g strica TBU prueba del aliento con urea y ELISA fecal El ensayo LIAISON H pylori SA detecta la presencia del antigeno de Helicobacter pylori en heces humanas 3 PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO El LIAISON H pylori SA es un ensayo de dos pasos modificado tipo sandwich con dos anticuerpos para la deteccion del antigeno fecal de H pylori El ensayo utiliza anticuerpos monoclonales para la detecci n del antigeno fecal de H pylori El ensayo utiliza 200 ul de muestra formada por una mezcla de diluyente de muestras y antigeno fecal de H pylori extraido e incubado con particulas paramagn ticas revestidas de anticuerpos de captura para ant geno fecal de H pylori Tras la incubaci n se a aden a la reacci n anticuerpos conjugados con isoluminol para ant geno fecal de H pylori y se incuba Tras la segunda incubaci n el material libre se elimina en un ciclo de lavado A continuaci n se agregan los reactivos Starter y tiene lugar una reacci n quimioluminiscente r pida La s
3. posici n vertical 7 Desenrosque el tubo para mezclas y el dispositivo de filtro azul y eliminelos en un recipiente apropiado para desechos biologicos Examine el sobrenadante liquido del tubo conico el sobrenadante de la muestra puede aparecer turbio pero no debe presentar restos ni burbujas visibles 8 Coloque un tubo conico en una gradilla para muestras de tipo S y deslicelo en el analizador DiaSorin LIAISON para analizarlo 9 Limpie el rea de trabajo con una soluci n de lej a al 10 que contenga hipoclorito s dico al 0 5 gt A Al final de las instrucciones de uso s incluyen diagramas que ilustran el procedimiento de preparaci n de muestras de heces con el LIAISON Stool Extraction Device de DiaSorin g 1 118 x 10 radio en cm rpm es318920 39336 1 13 4 12 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO Para asegurar el resultado correcto del ensayo siga rigurosamente las instrucciones de funcionamiento del analizador LIAISON Cada par metro del ensayo se identifica con un c digo de barras en el integral de reactivos Si se produce un fallo de funcionamiento en el lector de c digo de barras los datos pueden introducirse manualmente Para obtener m s informaci n consulte el manual del operador de LIAISON Las operaciones del analizador son las siguientes 1 Dispensar part culas magn ticas revestidas en el m dulo de reacci n Dispensar los calibradores los controles o las muestras en el m dulo de reacci n
4. DiaSorin Inc ID STE 1951 Northwestern Ave Stillwater MN 55082 USA Tif 1 651 439 9710 Fax 1 651 351 5669 Preste atencion a los cambios LIAISON H pylori SA 318920 1 INDICACIONES El LIAISON H pylori SA de DiaSorin es un inmunoensayo quimioluminiscente CLIA indicado para la determinacion cualitativa de antigenos fecales de H pylori en heces humanas con el LIAISON Analyzer El ensayo sirve como ayuda para diagnosticar la infecci n por H pylori y para controlar la respuesta de los pacientes durante y despu s de la terapia Los resultados del ensayo deben utilizarse junto con otros datos clinicos y de laboratorio para ayudar al medico a decidir el tratamiento que debe aplicarse a cada paciente 2 RESUMEN Y EXPLICACION DEL ENSAYO Helicobacter pylori es una bacteria gram negativa y forma helicoidal que se encuentra en el est mago humano Es el agente causante de la gastritis cronica o inflamaci n de la mucosa estomacal y de las lceras de duodeno y de estomago y esta asociada con un aumento en el riesgo de padecer cancer de est mago Si bien no se conoce la v a exacta de transmisi n por lo general se suelen aceptar como v lidas las v as oral oral y o fecal oral Una vez establecida la colonizaci n del est mago es probable que la H pylori persista indefinidamente a menos que se prescriba una intervenci n antimicrobiana A diferencia de la mayor a de especies bacterianas la H pylori es capaz
5. Incubar Dispensar el conjugado Incubar Lavar con l quido de lavado sistema 7 Agregar los reactivos Starter y medir la emisi n de luz Los resultados del inmunoensayo pueden verse afectados por las fluctuaciones de temperatura Los usuarios deben tener en cuenta las variaciones de temperatura en el entorno del laboratorio puede ser necesario realizar controles y efectuar las recalibraciones subsiguientes con m s frecuencia OI e de 13 CONTROL DE CALIDAD Es necesario realizar el control de calidad cada dia de trabajo o conforme a lo estipulado en las normas y los requisitos de los reglamentos locales o de las entidades acreditadas Se recomienda consultar la documentacion C24 A3 de CLSI y 42 CFR 493 1256 c para conocer las pr cticas de control de calidad adecuadas El LIAISON H pylori SA Control Set 318921 es un juego de control indicado para detectar cualquier sintoma importante de deterioro del reactivo Siempre que los resultados de control queden fuera de los rangos previstos sera necesario repetir la calibracion y volver a analizar los controles y las muestras Los resultados de los pacientes solo se notifican cuando los resultados del control quedan dentro de los rangos esperados Antes de utilizar otros controles es preciso evaluar su efectividad para comprobar su compatibilidad con este ensayo Deberan establecerse rangos de valores apropiados para todos los materiales de control de calidad utilizados El rango de las
6. UFC ml Coxsackievirus DICT so ml Peptostreptococcus 1 2 x 108 UFC ml Eahore 1 x 10 anaerobius DICT so ml 8 1 x 10 Plesiomonas shigelloides 1 2 x 10 UFC ml e DI isteti Je Proteus vulgaris 1 2 x 10 UFC ml es318920 39336 1 13 9 es318920 39336 1 13 10 Anada el diluyente de muestras de heces LIAISON al tubo para mezclas Enrosque BIEN la unidad de filtro conico azul en el tubo para mezclas Los bordes exteriores de ambos recipientes deben tocarse entre si NOTA El dispositivo correctamente montado no debe mostrar huecos visibles Agite vigorosamente en vortex durante 10 segundos para mezclar la muestra a fondo Desenrosque el tubo conico del dispositivo Correcto Sin huecos Centrifugue con el tubo c nico mirando hacia arriba a 2 2 000 g durante 10 minutos en una centrifuga de cubeta oscilante 1 Preparaci n de las heces con el LIAISON Stool Extraction Device de DiaSorin A ada las heces A L guidas o semis lidas Utilice una pipeta para heces l quidas desechable B S lidas Utilice la cuchara azul del tubo c nico con la unidad de filtro azul o un dispositivo similar Incorrecto Hay huecos visibles Invierta el dispositivo de forma que el tubo c nico quede mirando hacia abajo Centrifugue a 200 g durante 1 minuto NOTA El dispositivo debe permanecer ahora en posici n vertical 5 Examen y an lisis Coloque el tubo c nico en el ana
7. al 0 2 y sulfato de gentamicina al 0 1 Una vez abierto el diluyente de muestras es estable durante 10 semanas si se almacena a 2 8 C Diluyente de muestras 1 x 45 ml 8 x blanco l desd Para etiquetar los tubos del calibrador con las al cuotas para su etiqueta de c digo aplicaci n en el analizador LIAISON Para etiquetar los tubos del calibrador con las al cuotas para su 8 x blanco etiqueta de c digo aplicaci n en el analizador LIAISON de barras 1 x 50 cada uno PIPETTOR Pipeta para heces l quidas X0031 LIAISON Stool Extraction Device 1 x 50 cada uno El dispositivo no contiene Bisfenol A BPA l tex ni Di 2 etilhexil ftalato DEHP Tubo para mezclas tubo c nico y tap n azul en polipropileno con unidad de filtro azul en polietileno de alta densidad PEAD Materiales necesarios pero no suministrados Materiales adicionales recomendados LIAISON Module 319130 LIAISON H pylori SA Control Set 318921 LIAISON Starter Kit 319102 LIAISON Light Check 319101 Suministros de laboratorio opcionales disponibles en LIAISON Wash System Fluid 319100 DiaSorin LIAISON Waste Bags 9450003 Pipeta para heces liquidas X0031 LIAISON Cleaning Kit 310990 5 ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES SOLO PARA UTILIZAR EN DIAGNOSTICOS IN VITRO No debe utilizarse interna o externamente en seres humanos ni animales SEGURIDAD GENERAL e Todas las muestras los reactivos biologicos y los materi
8. ales utilizados en el ensayo deben ser considerados como transmisores potenciales de agentes infecciosos Evite el contacto con la piel los ojos y las membranas mucosas El ensayo debe realizarse respetando escrupulosamente las buenas practicas higienicas industriales e Abst ngase de comer beber fumar o aplicarse cosm ticos en el laboratorio de ensayos e No pipetee las soluciones con la boca e Evite el contacto directo con todos los materiales potencialmente infecciosos para ello se aconseja utilizar batas de laboratorio mascarillas y protectores oculares adem s de guantes desechables e Lavese las manos a fondo despu s de cada ensayo e Evite las salpicaduras o la formaci n de aerosoles cuando manipule diluya o transfiera muestras o reactivos Los reactivos derramados deben lavarse con una soluci n de lej a al 10 que contenga hipoclorito s dico al 0 5 y eliminarse como si se tratara de material potencialmente infeccioso e La eliminaci n de los residuos debe efectuarse de conformidad con las disposiciones y normas generales establecidas por las autoridades con jurisdicci n sobre el laboratorio y con las leyes vigentes en cada pa s e No utilice ning n kit o componente despu s de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta RIESGO QU MICO E INFORMACI N DE SEGURIDAD Los reactivos de este kit se han clasificado de conformidad con lo establecido en la Norma de Comunicaci n de Riesgos Hazard Communication Standard
9. as de heces obtenidas de los pacientes con s ntomas se analizaron con el ensayo LIAISON H pylori SA y con un ensayo ELISA para la detecci n de antigeno fecal de H pylori Los resultados se resumen en la tabla _ _ ELISA para la detecci n de antigeno fecal de H pylori RBR Buse IT Negativo o 2 98 100 Total 02 Coincidencia de positivos 95 99 96 0 95 Cl 90 1 98 4 Coincidencia de negativos 98 102 96 1 95 Cl 90 4 98 4 Coincidencia general 193 201 96 0 95 Cl 92 3 97 9 17 2 Terapia posterior a la erradicacion Para el seguimiento se utilizaron un total de 60 muestras de heces obtenidas de los pacientes con sintomas diagnosticados inicialmente como infectados las muestras se analizaron con el ensayo LIAISON H pylori SA y con un ensayo ELISA para la deteccion de antigeno fecal de H pylori cuatro semanas despu s de finalizar la terapia de erradicacion de H pylori prescrita por el m dico Los resultados se resumen en la tabla siguiente ELISA para la detecci n de antigeno fecal de H pylori LIAISON 2 2 4 Coincidencia de positivos 2 2 100 0 95 Cl 29 2 99 2 Coincidencia de negativos 56 58 96 6 95 CI 88 3 98 9 Coincidencia general 58 60 96 7 95 Cl 88 7 99 0 Dudoso J 0 A f O A 56 56 es318920 39336 1 13 6 17 3 Metodo comparativo Un total de 299 muestras de heces se analizaron con el ensayo LIAISON H pylori SA y con un ensa
10. calibradores asociados con un lote de reactivos diferente en el mismo ensayo 10 CALIBRACI N Cada integral de reactivos LIAISON H pylori SA tiene una etiqueta de c digo de barras con informaci n especifica sobre la calibraci n del lote de integral de que se trate La calibraci n debe repetirse e con cada nuevo lote de reactivos integral de reactivos o reactivos Starter e cada 14 d as si se guarda conforme a las instrucciones de la secci n 7 e despu s de cada tarea de reparaci n o mantenimiento del analizador LIAISON e silos resultados del control de calidad quedan fuera del rango aceptable 11 PREPARACION DE LAS MUESTRAS Utilizando el dispositivo de extracci n de heces LIAISON tool Extraction Device de DiaSorin 1 A ada 850 ul del diluyente de muestras LIAISON H pylori SA a un tubo para mezclas del LIAISON Stool Extraction Device 2 Preparaci n de las heces Mezcle el contenido tan a fondo como sea posible antes de retirar la muestra a Heces l quidas o semis lidas Utilizando una pipeta para heces l quidas desechable mida y transfiera 750 ul de muestra al tubo para mezclas del LIAISON Stool Extraction Device que contenga el diluyente de muestras Enjuague la pipeta con la mezcla en suspension las veces que sean necesarias para eliminar la mayor cantidad de muestra posible de la pipeta para heces liquidas b Heces s lidas Utilizando la cuchara de la unidad de filtro c nico azul del LIAISON Stool Extraction De
11. concentraciones de cada control se indica en el certificado de an lisis y detalla los limites establecidos por DiaSorin para los valores de control que pueden obtenerse con cada serie de ensayos fiable 14 INTERPRETACION DE RESULTADOS El analizador LIAISON calcula automaticamente los niveles de antigeno fecal de H pylori expresados como valores de indice y clasifica los resultados Para obtener mas informaci n consulte el manual del operador del analizador El valor de corte del ensayo LIAISON H pylori SA se determin a partir de los resultados de muestras de ensayos que representaban poblaciones de pacientes con valores positivos y negativos para antigeno fecal de H pylori Las muestras se analizaron en paralelo con un ensayo ELISA de H pylori comercial y con el ensayo LIAISON H pylori SA El valor de corte ptimo se determin mediante un an lisis de distribuci n de frecuencias acumuladas ROC El valor de corte que discrimina entre la presencia y la ausencia de ant geno fecal de H pylori se ha establecido para que tenga un valor de ndice de 1 0 Advertencia Si el resultado de la muestra presenta un mensaje invalid RLU y un signo de admiraci n de cierre significa que el resultado obtenido queda por debajo del rango de se ales del ensayo En tal caso ser necesario volver a analizar la muestra Si el ensayo posterior de la muestra vuelve a indicar invalid RLU p ngase en contacto con el Servicio t cnic
12. de OSHA en Estados Unidos las leyes de derecho a la informaci n Right to Know estatales de Estados Unidos las normas reguladoras de Productos Controlados Seguridad y Salud Ocupacional Occupational Health and Safety Controlled Products centrales canadienses y las directivas de la Uni n Europea que sean aplicables en cada caso consulte las fichas de datos de seguridad del material para obtener informaci n adicional es318920 39336 1 13 2 CLP EUROPEO Algunos reactivos incluidos en el kit contienen ProClin como conservante siguiendo la clasificaci n de la Uni n Europea que se indica a continuaci n 67 548 CEE 1999 45 CE 2001 60 CE CE N 1272 2008 CLASIFICACION Irritante Sensibilizaci n cut nea Categor a 1 DE SUSTANCIA PALABRA NA Advertencia INDICADORA S MBOLOS PICTOGRAMAS Xi Irritante GHS07 Signo de exclamaci n R43 Posibilidad de sensibilizaci n en H317 Puede provocar una reacci n contacto con la piel al rgica en la piel PRECAUCIONES S24 Ev tese el contacto con la piel P261 Evite inhalar o pulverizar el producto INDICACIONES S37 Usense guantes adecuados P272 La ropa de trabajo contaminada no DE SEGURIDAD S60 Elim nense el producto y su recipiente debe utilizarse fuera del lugar de trabajo como residuos peligrosos P280 Lleve puestos guantes y vestuario de protecci n adem s de protectores oculares P264 Lavese las manos a fondo despu s de manipular e
13. e al luminosa se mide en unidades lum nicas relativas ULR con un fotomultiplicador y es proporcional a la concentraci n de ant geno fecal de H pylori presente en los calibradores controles o muestras 4 MATERIAL SUMINISTRADO Integral de reactivos Part culas Part culas magn ticas revestidas con anticuerpo monoclonal antiantigeno magn ticas SORB fecal en tamp n fosfato ASB surfactante ProClin 300 al 0 1 y sulfato 1 4 ml de gentamicina al 0 05 Anticuerpos monoclonales conjugados en un derivado de isoluminol en tampon fosfato ASB surfactante ProClin 300 al 0 1 y sulfato de gentamicina al 0 05 Conjugado 8 0 ml CONJ ensayos ProClin 300 es una marca comercial registrada de Rohm and Haas Co Todos los reactivos suministrados estan listos para su uso El orden de los reactivos refleja la disposicion de los contenedores en el integral de reactivos Componentes adicionales que no forman parte del integral de reactivos Ant geno fecal tamp n fosfato surfactante ASB ProClin 300 al 0 1 y CALI pala S sulfato de gentamicina al 0 05 Reconstituya en 1 ml de agua destilada o 4 x 1 ml liofilizado desionizada Antigeno fecal tamp n fosfato surfactante ASB ProClin 300 al 0 1 y ICAL 2 Pads Sara sulfato de gentamicina al 0 05 Reconstituya en 1 ml de agua destilada o desionizada 4x1ml liofilizado es318920 39336 1 13 1 Suero de cerdo tampon Tris surfactante ProClin 300
14. l producto P270 No coma beba ni fume mientras utiliza este producto 6 PREPARACION DEL INTEGRAL DE REACTIVOS A la hora de manipular los reactivos tenga en cuenta las siguientes precauciones importantes Resuspension de particulas magneticas Antes de colocar el integral en el instrumento debe lograr la completa resuspension de las particulas magneticas Para ello siga las instrucciones que se indican a continuacion Antes de quitar el sello gire la rueda peque a del compartimento de part culas magn ticas hasta que la suspension adopte un color marr n Agite suavemente y con cuidado de lado a lado para facilitar la suspensi n de las part culas magn ticas sin formar espuma Compruebe visualmente el fondo del contenedor de part culas magn ticas para cerciorarse de que no hayan quedado part culas magn ticas sedimentadas Repita el procedimiento cuantas veces sean necesarias hasta lograr la completa resuspensi n de las part culas magn ticas Despu s de quitar el sello limpie cuidadosamente la superficie de cada pared para eliminar los posibles restos de l quido si fuera necesario Formaci n de espuma en los reactivos Para garantizar el resultado ptimo del integral debe evitarse la formaci n de espuma en los reactivos Para ello siga esta recomendaci n Antes de utilizar el integral examine visualmente los reactivos para asegurarse de que no presentan espuma Si hay espuma despu s de la resuspensi n de las part
15. las muestras de heces en un recipiente limpio herm tico y sin conservantes Las muestras deben guardarse a 2 8 C y analizarse lo antes posible tras su recepci n no obstante pueden almacenarse a 2 8 C hasta un m ximo de 72 horas Si no fuera posible analizarlas antes de 72 horas congele las muestras a 20 C o menos inmediatamente despu s de recibirlas Antes de utilizarlas deje las muestras de heces a temperatura ambiente y m zclelas tan a fondo como sea posible Evite ciclos repetidos de congelaci n y descongelaci n es318920 39336 1 13 3 9 CALIBRADORES DE NIVEL 1 y2 Los calibradores LIAISON H pylori SA se suministran liofilizados Reconstituya cada vial con 1 0 ml de agua destilada o desionizada Deje reposar los viales a temperatura ambiente durante 5 minutos Mezcle bien mediante una inversion suave para garantizar su total reconstituci n Transfiera un minimo de 900 ul calibraci n triplicada a un tubo de vidrio o pl stico para muestras Adhiera al tubo la etiqueta de c digo de barras que corresponda y col quelo en el analizador LIAISON Calibre el ensayo como se describe en el manual del operador de LIAISON Los calibradores LIAISON H pylori SA han demostrado ser estables durante 8 horas cuando se almacenan a temperatura ambiente 18 25 C Cada calibrador tiene el volumen suficiente para 1 calibraci n El numero de lote de los calibradores y del integral de reactivos corresponde a un lote especifico No utilice
16. lizador de DiaSorin apropiado para su an lisis Elimine el tubo para mezclas unidad de filtro azul en un recipiente para desechos biol gicos apropiado conforme a las normas vigentes Limpie el rea de trabajo con una soluci n de lej a al 10 hipoclorito s dico al 0 5 Examine el sobrenadante El sobrenadante Peligro biol gico Dispositivo de un solo uso puede aparecer turbio pero no debe A presentar restos ni burbujas visibles es318920 39336 1 13 11 DiaSorin Inc 1951 Northwestern Avenue EC DiaSorin S p A P O Box 285 Ed 13040 Saluggia VC Italy Stillwater MN 55082 0285 es318920 39336 1 13 12
17. ntraci n Microorganismo Concentraci croorganismo Concentraci en orden alfab tico final de variante en orden final de variante en la muestra alfabetico en la muestra Aeromonas hydrophila Aeromonas hydrophila 1 2 x 10 UFC ml Pseudomonas 1 2 x 10 UFC ml aeruginosa Campylobacter coli 1 2 x 10 UFC mi li 1 2 x 10 UFC ml Campylobacter fetus 1 2 x 10 UFC ml E Salmonella Grupo B 1 2 x 10 UFC ml Campriobaciorjeiar 2x10 VEGI E ae Grupo C 4 2 x 10 UFC m Candida albicans 42 x10 UFCImi Salmonella Grupo D 12x10 UEG Girobacter teundi 1 2x10 UFCImi_ Salmonella Grupo E 1 2 x 10 UFC Clostridium file 1 2x10 UFCImi Seratiaiquetacions 1 2 x 10 UFC Clostridium pertingens 1 2x10 UFCImi Shigella boydi 12 x10FUFCimi Clostridium sordel 1 2x10 UFCImi_ Shigela flexneri 1 2 10 FCm Enterobacter cloacae 1 2x10 UFCImi_ Shigella sonnei 12x10 UECIM Enterococcus faecalis 1 2 x 10 UFC ml N A lococcus 1 2 x 108 UFC mi Escherichia coli 1 2 x 10 UFC mi E Staphylococcus 1 2 x 10 UFC mi epidermidis Escherichia fergusonii 1 2 x 10 UFC ml ey 1 2 x 10 UFC ml parahaemolyticus Escherichia hermannii 1 2x10 UFC ml_ Yersinia enterocolitica 1 2 x 10 UFC m 8 1x 10 Klebsiella pneumonia 1 2 x 10 UFC ml E Adenovirus tipo 40 DICT so Im Lactobacillus delbrueckii 1 2 x 10 UFC ml Adenovirus tipo 41 ul DICT 50 ml 8 TI Listeria monocytogenes 1 2 x 10
18. o de DiaSorin Los resultados del paciente deben interpretarse como se indica a continuaci n Resultado Interpretaci n lt ane 90 Negativo Indica la ausencia de ant geno fecal de H pylori o bien que el nivel de ant geno es inferior al que puede detectar el ensayo 7 kad 90 Dudoso Las muestras con resultado dudoso deben analizarse de nuevo con una nueva extracci n de la muestra original a fin de confirmar el resultado inicial lt 1 10 Las muestras que dan positivo 2 1 10 en el segundo ensayo deben considerarse como positivas Las muestras que dan negativo lt 0 90 en el segundo ensayo deben considerarse como negativas Para muestras con resultado dudoso en el ensayo repetido ser necesario recoger y procesar muestras nuevas Indica la presencia de ant geno fecal de H pylori detectable es318920 39336 1 13 5 15 LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO 1 Los resultados del ensayo deben utilizarse junto con otros datos clinicos y de laboratorio para ayudar al m dico a decidir que tratamiento aplicar a cada paciente 2 Para obtener resultados fiables son imprescindibles una t cnica experta y el estricto cumplimiento de las instrucciones 3 Es conocido el efecto supresor que antibidticos inhibidores de bomba de protones y preparaciones a base de bismuto ejercen sobre la H pylori por lo que la ingestion de tales productos puede generar un resultado negativo falso 4 El ensayo LIAISON H pylori SA no ha
19. o del rango de lectura del ensayo Los calculos de precision se basan en la senal ULR de la muestra La dosis del kit de control negativo 17 5 L mite de detecci n LdD Seg n el m todo EP12 A2 de CLSI el limite de detecci n para el ant geno fecal de H pylori en el ensayo LIAISON H pylori SA es de 2 0 ng ml 17 6 Efecto de gancho a concentraciones altas No se ha observado efecto de gancho para concentraciones de ant geno fecal de H pylori medidas de hasta 2 000 ng ml es318920 39336 1 13 7 17 7 Sustancias interferentes Estudios controlados de las sustancias potencialmente interferentes a adidas a muestras de heces con niveles positivos bajos y niveles negativos altos no presentaron interferencias con el ensayo LIAISON H pylori SA a las concentraciones de cada sustancia que se reflejan en la lista siguiente Acido estearico 2 65 mg ml Pepto Bismol Prilosec 0 5 mg ml Glicol de polietileno 4600 es318920 39336 1 13 8 17 8 Reactividad cruzada La especificidad del ensayo LIAISON H pylori SA se ha determinado mediante el analisis de los microorganismos siguientes Las muestras de heces con niveles positivos bajos y niveles negativos i altos se enriquecieron con cada uno de los microorganismos y se analizaron posteriormente con el ensayo LIAISON H pylori SA Los resultados del ensayo no se vieron afectados positiva ni negativamente por ninguno de los organismos ncentraci n Microorganism nce
20. sido evaluado con poblaci n pedi trica 5 No utilice muestras de heces conservadas en formalina al 10 merthiolate formalina acetato de sodio formalina o alcohol polivinilico ni muestras contenidas en medios de transporte como Cary Blair o C amp S 16 VALORES PREVISTOS La colonizaci n del estomago por parte de la bacteria H pylori es extremadamente comun en los humanos y se considera que aproximadamente las dos terceras partes de la poblaci n mundial esta infectada por H pylori Aunque por lo general no suele presentar sintomas puede generar la aparicion de ulceras duodenales y gastricas H pylori es la causante de mas del 90 de ulceras duodenales y de hasta el 80 de ulceras gastricas Las tasas de infeccion pueden oscilar del 20 al 30 en regiones econ micamente desarrolladas y del 80 al 90 en regiones en desarrollo 17 CARACTER STICAS ESPEC FICAS DEL RESULTADO 17 1 Diagnosis inicial El ensayo inicial por endoscopia se llev a cabo en doscientos un 201 sujetos con s ntomas en un centro de Italia Los pacientes con s ntomas objeto del estudio presentaban una amplia variedad de patolog as endosc picas positivas entre otras erosion antral n 18 gastritis antral n 138 duodenitis erosiva n 9 lcera duodenal n 4 pangastritis n 26 gastritis esof gica n 1 lcera g strica n 2 y otras condiciones diagn sticas observadas incluidas linfoma n 1 y enfermedad de Barrett n 2 Un total de 201 muestr
21. vice o un dispositivo similar mida y transfiera una muestra de heces de 5 mm de diametro el tama o de un guisante a un tubo para mezclas que contenga 850 ul del diluyente de muestras LIAISON H pylori SA Para garantizar que el gr nulo s lido de la cuchara se ha eliminado en el diluyente de muestras examine la cuchara del dispositivo de extracci n de heces tras efectuar la mezcla en el agitador v rtex paso 4 si no se ha eliminado golpee ligeramente la parte inferior del dispositivo colocado en el banco de ensayo para facilitar el desprendimiento de las heces Este paso puede repetirse como resulte necesario Es posible que necesite utilizar un dispositivo alternativo para traspasar las muestras de heces muy duras al diluyente de muestras del tubo para mezclas NOTA Para poder realizar el ensayo el volumen del sobrenadante final debe ser de 500 ul 3 Enrosque bien la unidad de filtro c nico azul en el tubo para mezclas Agite vigorosamente en v rtex durante 10 segundos para mezclar la muestra a fondo 5 Centrifugue el tubo en una centr fuga de cubeta oscilante a una velocidad de 2 2 000 x g durante 10 minutos y a temperatura ambiente con el extremo c nico del tubo mirando hacia arriba 6 Tras la centrifugaci n retire el tubo e invierta el LIAISON Stool Extraction Device de forma que el tubo conico quede mirando hacia abajo Centrifugue el tubo a una velocidad de 200 x g durante 1 minuto El dispositivo debe permanecer ahora en
22. yo ELISA para la detecci n de antigeno fecal de H pylori Los resultados se resumen en la tabla siguiente ELISA para la detecci n de antigeno fecal de H pylori LIAISON H pylori SA Positivo Dudoso Negativo 0 140 140 157 142 299 Coincidencia de positivos 157 157 100 0 95 Cl 97 7 100 0 Coincidencia de negativos 140 142 98 6 95 Cl 95 0 99 6 Coincidencia total 297 299 99 3 95 Cl 97 6 99 8 17 4 Precisi n Para determinar la repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo LIAISON H pylori SA 2 t cnicos utilizaron un lote de reactivos para preparar y analizar dos kits de control y 6 muestras basadas en tampon enriquecido con antigeno fecal de H pylori en DiaSorin Inc dos veces al dia y por duplicado durante doce 12 dias de trabajo en un analizador LIAISON Las muestras se prepararon conforme a los niveles siguientes 2 negativos 1 muestra de corte 3 positivos El ensayo se evaluo segun el documento EP5 A2 de CLSI Repetibilidad mese Ills Muestra KC KC 1 2 0 10 0 025 La dosis del kit de control negativo NKC quedaba por debajo del rango de lectura del ensayo Los c lculos de precisi n se basan en la se al ULR de la muestra Reproducibilidad N mero de determinaciones 48 48 48 4 Media indice 1 752 52 05 08 Desviaci n est ndar indice 140 0 21 0 06 0 07 Coeficiente de variaci n CV 8 4 12 9 NKC quedaba por debaj
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