CD3-4-8 Gems™
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1. deben ser manipulados siguiendo buenas pr cticas de laboratorio y tomando las precauciones adecuadas Asimismo todas las muestras de pacientes se deben manipular con las precauciones adecuadas No pipetee con la boca y lleve guantes durante el proceso El ensayo debe ser realizado por t cnicos de laboratorio debidamente cualificados y autorizados Contacte con el fabricante si el kit de ensayo original est da ado Extracci n y preparaci n de muestras Procesamiento de la muestra de sangre Extraiga una muestra de sangre venosa de forma as ptica por punci n venosa en un tubo con anticoagulante EDTA La muestra de sangre se debe conservar a temperatura ambiente 20 a 25 C hasta su procesamiento Procese la muestra de sangre dentro de las 12 horas siguientes a la extracci n Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo m ximo de tiempo tras la extracci n de sangre cuando sea necesario procesar muestras de sangre m s de 12 horas despu s de su extracci n Requisitos del instrumento Nota 1 Aseg rese de que el CELL DYN Sapphire est calibrado correctamente utilizando microesferas de calibraci n fl CELL DYN de Abbott Nota 2 Se recomienda realizar con regularidad la calibraci n y el mantenimiento del instrumento M IQ Products BV Rozenburglaan 13a 9727 DL Groningen Pa ses Bajos Tel fono 31 0 50 57 57 000 Fax 31 0 50 57 57 002 www iqproducts nl marketingOiqproducts nl2. IQP 300 versi n 2 o oducts CD3 4 8 Gems bright fluorescence Cuantificaci n de los linfocitos T y las subpoblaciones CD4 y CD8 en sangre humana total anticoagulada con EDTA utilizando el analizador CELL DYN Sapphire de Abbott REF IQP 300 Y 50 tests Bi prospecto Para uso diagn stico in vitro C Este producto est registrado como producto para uso diagn stico in vitro en los pa ses que pertenecen a la Comunidad Europea En todos los dem s pa ses se deber etiquetar como s lo para uso en investigaci n Uso previsto El kit CD3 4 8 Gems se utiliza para la cuantificaci n de los linfocitos T y las subpoblaciones CD4 y CD8 en sangre humana total anticoagulada con EDTA Los linfocitos colaboradores inductores son una subpoblaci n de los linfocitos T CD3 positivos que son CD4 positivos CD4 La cantidad de linfocitos T CD3 CD4 colaboradores inductores puede servir para caracterizar y controlar algunas formas de inmunodeficiencia y enfermedades autoinmunes La cantidad de linfocitos T colaboradores inductores puede ser til en la monitorizaci n de pacientes infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana VIH Estos pacientes muestran generalmente una disminuci n estable de los linfocitos T colaboradores inductores durante el progreso de la infecci n Principio del ensayo El kit CD3 4 8 Gems se utiliza para la cuantificaci n de los linfocitos T y las subpoblaciones CD4 y CD8 y
3. a del c digo de barras 54 uds Tubo 1 barras naranjas Etiqueta B Etiqueta del c digo de barras 54 uds Tubo 2 barras verdes 1 3 ES Cada kit contiene suficientes reactivos y etiquetas para realizar 50 ensayos y requiere el uso de un tubo con reactivo CD3 CD4 con la etiqueta del c digo de barras del Tubo 1 y un tubo con reactivo CD3 CD8 con la etiqueta del c digo de barras del Tubo 2 Materiales de laboratorio necesarios pero no suministrados Centr fuga de laboratorio viales de 2 ml tubos 13x75 de 3 5 ml sin aditivos n cat 454045 Z tubos de 3 5 ml sin aditivos Vacuette Greiner Bio one tubos de extracci n de sangre con anticoagulante EDTA micropipetas y puntas ajustables CELL DYN Sapphire de Abbott SK Almacenamiento Una vez recibido conserve el kit a una temperatura de 2 a 8 C Evite la luz solar directa Los reactivos almacenados seg n las instrucciones de almacenamiento se aladas son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta Para ensayos reiterados conserve los reactivos inmediatamente despu s del uso a una temperatura de 2 a SE AS Advertencias y precauciones Los reactivos que contienen azida de sodio pueden reaccionar con ca er as de plomo o cobre formando acumulaciones de azidas met licas explosivas Una vez desechado el producto deje correr una cantidad abundante de agua para evitar acumulaciones de azidas Todos los reactivos
4. d en rangos 0 03 x 109 c lulas L a 7 1 x 109 c lulas L para CD3 0 03 x 109 c lulas L a 5 2 x 109 c lulas L para CD4 0 03 x 109 c lulas L a 1 8 x 109 c lulas L para CD8 Precisi n Variabilidad interensayo La medici n de diez muestras con un hemograma normal en dos analizadores diferentes result en los coeficientes de variaci n CV indicados en el cuadro ls Cuadro 1 Coeficiente de variaci n CV interensayo respecto a las mediciones en dos analizadores diferentes CD3 CD4 CD8 0 8 1 8 2 1 m x 2 3 m x 4 6 m x 4 9 Variabilidad intraensayo imprecisi n El coeficiente de variaci n intraensayo ha sido establecido por un t cnico analizando diez muestras con un hemograma normal por triplicado cuadro 2 Cuadro 2 Coeficiente de variaci n CV intraensayo para mediciones por triplicado CD3 CD4 CD8 1 4 1 8 4 3 m x 3 6 m x 5 2 m x 8 8 Recuento a fondo El recuento a fondo se determin colocando dos tubos de ensayo detr s de un tubo de muestra vac o Para el recuento total de WBC el valor promedio fue de 0 005x10 WBC L 0 003 CD3 CD4 y CD8 fueron equivalentes o inferiores a este valor Arrastre El arrastre desde el tubo 1 al tubo 2 se estableci realizando un ensayo sin la mezcla de anticuerpos CD3 CD8 en el tubo 2 El arrastre se estableci calculando el porcentaje de eventos CD3 CD8 positivos respecto al total de c l
5. do sometidos a pruebas en muestras con diferentes relaciones de CD4 CD8 Limitaciones del Procedimiento El personal con experiencia en t cnicas as pticas deber a realizar la extracci n de la muestra de sangre El personal deber a recibir formaci n para manipular el CELL DYN Sapphire y saber c mo interpretar los datos El kit CD3 4 8 Gems est dise ado para su uso en combinaci n con el CELL DYN Sapphire de Abbott pero no para el uso con citometr a de flujo o microscop a inmunofluorescente La eficacia del kit CD3 4 8 Gems con muestras que no son c lulas humanas no ha sido establecida El kit CD3 4 8 Gems ha sido dise ado para Uso Diagn stico In Vitro La exactitud de los resultados con el procedimiento CELL DYN depende de la alineaci n y calibraci n correcta del l ser as como de la configuraci n adecuada de la ventana de an lisis gate No se puede excluir un cambio en las cantidades y porcentajes de linfocitos T CD3 CD4 y CD3 CD8 detectados si las c lulas se conservan a temperatura ambiente durante m s de 12 horas CELL DYN indica si los tubos se han colocado en la m quina en orden incorrecto Si los reactivos se colocan en los tubos err neos la m quina NO indicar el error El t cnico deber comprobar las gr ficas de puntos dot plots tal y como se indican en la figura anterior La gr fica con CD3 4 FL1 FL 2 debe mostrar una poblaci n m s pe
6. l gico siguiendo las instrucciones del fabricante Consulte el Manual del Operador de los Sistemas CELL DYN Sapphire Secci n Ensayo CELL DYN Immuno T Cell CD3 4 8 Resultados Los resultados de la evaluaci n de las muestras de sangre del paciente son una fuente cuantitativa y fiable para determinar el porcentaje de linfocitos T CD3 CD4 y CD3 CD8 en sangre perif rica Los valores de referencia para donantes sanos que se han publicado son CD3 73 55 85 CD4 43 28 58 y CD8 29 10 48 1 2 CD3 4 FL1 FL2 CD3 8 FL1 FL2 Figura 1 Muestra de sangre de un donante VIH positivo con marcadores dobles de D3 CD4 y CD3 CD8 y analizada con la plataforma CELL DYN Sapphire de Abbott En la figura anterior se muestra un resultado t pico obtenido con el kit CD3 4 8 Gems La exactitud del ensayo depende en gran medida de la calibraci n correcta del CELL DYN Sapphire Los resultados de CD3 4 8 Gems son calculados por el software de CELL DYN Sapphire diferenciando los linfocitos del recuento de gl bulos blancos WBC y utilizando las se ales de CD3 CD4 y CD8 para clasificar las diferentes subpoblaciones de linfocitos T El CELL DYN Sapphire informa 2 3 m 09 autom ticamente de los diferentes valores del recuento de c lulas sangu neas CBC y los linfocitos T Control de Calidad Todos los reactivos en el kit CD3 4 8 Gems as como la linealidad y precisi n de la medici n han si
7. la etiqueta en el momento de la entrega al cliente No existe ninguna otra garant a expresa o impl cita que se extienda m s all de la descripci n en la etiqueta del producto IQ Products BV no ser responsable de los da os materiales da os personales o p rdidas econ micas causados por el producto Explicaci n de los s mbolos utilizados CE Instrucciones de uso N mero de producto Y Cantidad de tests por envase IVD Para uso diagn stico in vitro A Atenci n consultar documento adjunto ES Proteger de la luz Riesgos biol gicos x Conservar en un rango de temperatura C S lo para uso en investigaci n LOT C digo de lote z Uso por aaaa mm dd mi Fabricante EC REP Representante en la Comunidad Europea 2012 IQ Products BV Reservados todos los derechos Queda prohibida la reproducci n total o parcial de esta obra en cualquier forma sin la debida autorizaci n por escrito M 1Q Products BV Rozenburglaan 13a 9727 DL Groningen Pa ses Bajos Tel fono 31 0 50 57 57 000 Fax 31 0 50 57 57 002 www iqproducts nl marketingOiqproducts nl
8. que a monocitos a la derecha de la poblaci n inferior izquierda En caso de duda volver a realizar la muestra Una respuesta correcta del kit CD3 4 8 Gems depende de un recuento de gl bulos blancos WBC v lido Si sospecha que uno de los valores en el recuento de c lulas sangu neas CBC recuento completo de gl bulos blancos WBC no es v lido seg n las indicaciones en la pantalla o el informe impreso no realice el ensayo Se recomienda realizar un recuento a fondo con cada nuevo lote de CD3 4 8 Gems y despu s de la conexi n de nuevos buffers al sistema Los procedimientos de control de calidad se deben realizar con regularidad siguiendo las indicaciones del Manual de Operador suministrado con el CELL DYN Sapphire Valores previstos Cada laboratorio deber a establecer sus propios rangos normales de referencia M IQ Products BV Rozenburglaan 13a 9727 DL Groningen Pa ses Bajos Tel fono 31 0 50 57 57 000 Fax 31 0 50 57 57 002 www iqproducts nl marketingOiqproducts nl versi n 2 IQP 300 Caracter sticas anal ticas Especificidad de uni n de los anticuerpos Los tres anticuerpos han sido clasificados en los Talleres internacionales de ant genos de diferenciaci n de leucocitos humanos HLDA Linealidad Para determinar la linealidad la muestra con hemograma normal ha sido enriquecida en las c lulas y despu s se ha realizado una diluci n en serie Se ha mostrado linealida
9. se basa en combinaciones de anticuerpos CD3 CD4 y CD3 CD8 y etiquetas en el kit junto con tubos de 13x75 de 3 5 ml sin aditivos n cat 454045 Z tubos de 3 5 ml sin aditivos VacuetteW Greiner Bio one Por favor tenga en cuenta que estos tubos no se suministran El ensayo est dise ado para el uso en los analizadores hematol gicos automatizados CELL DYN Sapphire de Abbott con los reactivos diluyente envolvente suministrados por Abbott y pertenecientes a la plataforma El CELL DYN Sapphire reconoce los diferentes tubos por las etiquetas de c digo de barras suministradas en el kit y realiza la evaluaci n correspondiente siguiendo el protocolo pertinente El primer tubo permite determinar el n mero de linfocitos T CD3 CD4 por los anticuerpos CD3 UCHT 1 y CD4 Edu 2 presentes en el c ctel El segundo tubo permite determinar el n mero de linfocitos T CD3 CD8 por los anticuerpos CD3 UCHT 1 y CD8 MCD8 utilizados en el segundo c ctel de anticuerpos El software de CELL DYN Sapphire reconoce autom ticamente las diferentes poblaciones de gl bulos blancos y calcula la poblaci n de CD3 CD4 la poblaci n de CD3 CD8 y la relaci n entre ambas poblaciones Contenido del kit Reactivo A Reactivo CD3 CD4 vial con tap n naranja Contiene 0 2 de BSA y 0 09 de NaN 0 5 ml Reactivo B Reactivo CD3 CD8 vial con tap n verde Contiene 0 2 de BSA y 0 09 de NaN 0 5 ml Etiqueta A Etiquet
10. ulas CD3 CD4 Respecto al ensayo CD3 4 8 Gems el arrastre fue inferior al 0 3 Evaluaci n cl nica Correlaci n Durante el estudio cl nico se evaluaron muestras EDTA de personas infectadas por VIH y no infectadas n 80 con el kit CD3 4 8 Gems y un kit CD3 4 8 alternativo registrado para IVD para la plataforma CELL DYN Durante el estudio los coeficientes de variaci n promedio entre el CD3 4 8 Gems y el ensayo alternativo para CD3 CD4 y CD8 fueron 1 7 3 1 y 3 4 respectivamente La correlaci n R entre CD3 CD4 y CD8 es superior a 0 975 para los marcadores individuales 3 3 ES 100 80 60 CD3 4 8 Gems IQ Products 20 0 0 1 0 20 0 30 0 40 0 50 0 60 0 70 0 80 0 90 0 100 Bibliograf a 1 J Pediatr 1997 Mar 130 3 388 93 2 Clin Immunol Immunopathol 1991 Aug 60 2 190 208 3 Manual del Operador de CELL DYN Sapphire Secci n 12 Ensayo CELL DYN Immuno T Cell CD3 4 8 9140424C Nov 2007 CELL DYN Sapphire CELL DYN Immuno T Cell y CELL DYN son marcas comerciales registradas de Abbott Laboratories Abbott Park Illinois Estados Unidos www abbottdiagnostics com Vacuette es una marca comercial registrada de Greiner Bio One Kremsmuenster Austria www vacuette gbo com Garant a nicamente se garantiza que los productos vendidos se corresponden con la cantidad y el contenido que figuran en
11. versi n 2 IQP 300 Procedimiento de ensayo CD3 4 8 Gems Nota 3 Antes de realizar el ensayo girar brevemente los dos envases viales con la mezcla de anticuerpos en la centr fuga para asegurar que todo el reactivo se deposite en la parte inferior del vial Nota 4 Aseg rese de utilizar puntas de pipeta nuevas con cada paso de pipeteo 1 Prepare un tubo de 3 5 ml Sin aditivos con un tap n perforable no suministrado adhiriendo una etiqueta del c digo de barras barras naranjas del Tubo 1 CD3 CD4 sobre la etiqueta blanca del tubo 2 A ada 10 pul de reactivo del vial CD3 CD4 tap n naranja en la PARTE INFERIOR de este Tubo 1 Evite que el reactivo se deslice por las paredes internas del tubo 3 Prepare un segundo tubo de 3 5 ml Sin aditivos con un tap n perforable adhiriendo una etiqueta del c digo de barras barras verdes del Tubo 2 CD3 CD8 sobre la etiqueta blanca del tubo 4 A ada 10 yl de reactivo del vial CD3 CD8 tap n verde en la PARTE INFERIOR de este Tubo 2 Evite que el reactivo se deslice por las paredes internas del tubo 5 Aseg rese de que los 10 pl est n en la parte inferior de los dos tubos y mantenga el tubo en posici n vertical 6 Coloque los tubos en el rack del analizador hematol gico detr s del tubo con la muestra de sangre del paciente anticoagulada con EDTA que se debe analizar Primero el Tubo 1 despu s el Tubo 2 7 Programe el analizador hemato
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