Capsicum annum L. var. glabriusculum sin. - Inicio
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1. una prueba de Chi cuadrada para analizar los niveles de cada factor se utiliz la prueba de rangos m ltiples de Dun can para la comparaci n de proporciones Caracterizaci n molecular de la variabili dad gen tica del timpinchile Se realiz una selecci n de las 181 accesiones muestreadas en las diferentes zonas de la re gi n en estudio de stas se tomaron 10 mues tras al azar con una distancia entre ambas de 300 m para evitar la polinizaci n cruzada re presentativas del ejido Monterrey municipio de Villa Corzo Chiapas por lo que finalmente se seleccionaron 8 muestras y 5 testigos Una vez obtenidos los frutos se extrajeron las semillas para luego ser escarificadas para estimular la germinaci n Ram rez et al 2002 Se utiliz cido giber lico AG3 en la presenta ci n comercial de Biogib a una concentraci n de 5 000 mgL 1 se sumergieron las semillas durante 24 horas L pez y Arroyo 2006 Siembra de accesiones de timpinchile La siembra se realiz en el invernadero de la Facultad de Ciencias Agron micas se utilizaron charolas de unicel de 200 cavidades y el sustrato usado fue Cosmopeat La emergencia ocurri a partir de los ocho d as algunas emergieron entre los 15 y 20 d as despu s de la siembra el trasplante se realiz cuando las pl ntulas ten an de 2 a 3 hojas verdaderas Se colectaron hojas verdaderas totalmente expandidas de plantas de aproximadamente un mes de edad Las muestras co2. el n mero 5 siempre expresa un nivel intermedio En el caso del car cter n mero de plantas por punto de muestreo se anot el n mero real 1 2 y 3 etc con base en las plantas encontradas en cada punto La pendiente se expres en porcentajes con los datos tomados con el nivel tipo A considerando cinco niveles de acuerdo con la FAO 1990 1 0 0 5 2 0 6 2 9 3 3 5 9 4 6 10 9 5 11 15 9 evalu ndose el total de muestras por cada valor de la pendiente se realiz una descripci n de las plantas de chile encontradas bajo condicio nes de sombra y bajo el sol Se determin la relaci n existente entre las variables correspondientes a las caracter sticas de los puntos de muestreo fuente de recolec ci n iluminaci n y con aquellas variables relacio nadas con la planta total de muestras n mero de plantas por punto de muestreo la apariencia general de la poblaci n de plantas y la variabili dad observada tambi n se evalu la influencia de la altitud sobre la variabilidad observada El procesamiento estad stico de la informaci n ob tenida se realiz mediante dos pruebas de Chi cuadrada una para comparar el comportamiento de las variables relacionadas con la planta entre las caracter sticas del sitio y otra para evaluar el comportamiento de las variables relacionadas con la planta dentro de cada caracter stica del sitio Para cada caracter stica del sitio y la relacio nada con la planta se utiliz
3. es probable que las condiciones clim ticas existentes en ese h bitat limiten el desarrollo y crecimiento de las plantas de tim pinchile En este sentido es importante citar que la baja densidad de rboles y las quemas son factores que imposibilitan la variabilidad Otro de los indicadores caracter sticos de las plantas es que se encuentran en condiciones favorables de conservaci n por lo tanto las condiciones que presentaron en cada una de las fuentes de recolecci n est n agrupadas con relaci n a la reproducci n bajo la sombra de los rboles aunque las condiciones de cada zona son diferentes en cuanto a temperaturas inter medias que disminuyen y favorecen su desa rrollo De esta forma se observa en la Figura 2 que en el terreno del campesino presenta una apariencia d bil sin embargo en el bosque tie ne una apariencia intermedia y en menor pro porci n vigorosa Las condiciones err ticas de la precipitaci n est n influyendo en la erosi n gen tica de esta especie por lo que es preci so realizar estudios profundos para determinar con exactitud su estado de reproducci n y de supervivencia Con respecto a la apariencia de las plantas y su relaci n con los niveles de pendiente se observa en el Cuadro 9 que en la pendiente P5 presenta el mayor n mero de plantas y una co rrelaci n positiva entre el nivel de pendiente y la reproducci n de plantas sin embargo en el mismo nivel con relaci n a la apariencia in
4. termedia destaca en menor proporci n el n mero de plantas encontradas El h bitat del timpinchile se encuentra en las partes m s altas de los ejidos Cuadro 8 Caracter sticas de las fuentes de recolecci n de plantas con relaci n a la variabilidad Variabilidad Variabilidad Variabilidad alta intermedia baja Huerto Oc 10a 2b Terreno de campesino 5c 31a 30b Bosque lc 48b 54a m Huerto Total de plantas Apariencia d bil m Terreno de campesino Apariencia intermedia E Bosque Apariencia vigorosa Figura 2 Apariencia de las plantas con relaci n a los sitios 14 Cuadro 9 Apariencia de las plantas con relaci n a los niveles de pendiente Pendiente Apariencia d bil P1 0 0 5 0 P2 0 6 2 9 2b P3 3 5 9 7b P4 6 10 9 154 P5 11 15 9 712 Apariencia Apariencia intermedia vigorosa 0 0 5a Oc 9a ic 5b ic 59b 6c Monterrey y Frailesca m s all de la Sierra Madre de Chiapas Para el caso de las flores en este chile las principales caracter sticas cualitativas fueron la posici n de las flores color del filamento color de la antera color de la corola y la exserci n del estigma Seg n Franco e Hidalgo 2003 las principales caracter sticas identificables en los chiles silvestres son las morfol gicas con estos caracteres se describen e identifican las especies los cuales en su gran mayor a tienen una alta heredabilidad El color de la flor fue en su mayor a de color b
5. Syst Zool 30 459 490 Sneath PH A y R R Sokal 1973 The principles and practice of numerical classification W H Freeman San Francisco 573 pp Sol s L M 2008 Diversidad gen tica de tres poblaciones de timpinchile Capsicum annuum L var grabriusculum Dunal Heiser amp Pickersgill de la Depresi n Central de Chiapas Tesis de Licenciatura Ingeniero Agr nomo en Producci n Vegetal Facultad de Ciencias Agron micas UNACH Villaflores Chiapas M xico 56 pp
6. caracterizaci n de cada uno de los puntos de muestreo tenien do en cuenta el propio descriptor de Capsicum y se evalu la latitud longitud y altitud utilizando el Sistema de Posicionamiento Global GPS la procedencia de la colecta huerto terreno del campesino y bosque total de muestras n mero de plantas muestreadas en cada punto y la apariencia general de la poblaci n mediante un criterio descriptivo acerca de las condiciones aparentes de la poblaci n de plantas de chiles consider ndose como d biles las representadas por plantas peque as enfermas o raqu ticas intermedias las representadas por plantas de ta ma o medio y con bajos niveles de severidad por fitopat genos y vigorosas las representadas por plantas fuertes y sanas la variabilidad observada se estim considerando el n mero de morfotipos encontrados en el punto de muestreo a partir de las diferencias fenot picas en las plantas mues treadas seg n lo sugerido por Dewitt y Bosland 1996 y Hern ndez et al 1999 clasific ndola como alta intermedia y baja Para el conjunto de valores se definieron escalas las cuales eran enmarcadas en un sistema de grado En el caso de los caracteres cualitativos apariencia y varia bilidad se tomaron en cuenta de acuerdo con el Descriptor Internacional de Capsicum de la siguiente forma el n mero 3 se asign a los va lores m s bajos o menor nivel del car cter y el n mero 7 al m s alto o de mayor valor
7. de fruto EF Espesor de la pared del fruto DS Di metro de semillas LA Longitud de antera LP Longitud de pedicelo DM Di metro de semillas LT Longitud de tallo LH Longitud de hoja Cuadro 3 Porcentaje de variabilidad gen tica en el chile silvestre timpinchile Funci n Valores Porcentaje Acumulado Correlaci n propios de la Varianza can nica 1 8 027 24 5 24 5 0 943 2 5 406 16 5 41 0 0 919 3 3 629 11 1 52 1 0 885 4 2 340 7 1 59 2 0 837 5 2 086 6 4 65 6 0 822 6 1 913 5 8 71 4 0 810 7 1 539 4 7 76 1 0 779 8 1 290 3 9 80 1 0 751 9 1 126 3 4 83 5 0 728 10 1 012 3 1 86 6 0 709 11 900 2 7 89 4 0 688 12 822 2 5 91 9 0 672 13 789 2 4 94 3 0 664 14 652 2 0 96 3 0 628 15 540 1 6 97 9 0 592 16 385 1 2 99 1 0 527 17 300 9 100 0 0 481 Cuadro 4 Porcentaje de la varianza para las tres primeras funciones discriminantes can nicas y los caracteres que la componen Proporci n 0 822 0 153 0 020 0 003 0 002 0 000 Acumulado 0 822 0 975 0 995 0 998 0 999 1 000 Variable Pci PC2 PC3 PC4 PC5 PC6 Altura de planta 0 608 0 791 0 063 0 014 0 006 0 005 Longitud de tallo 0 000 0 079 0 996 0 001 0 028 0 004 Di metro de copa 0 794 0 606 0 049 0 002 0 011 0 002 Di metro de tallo 0 006 0 000 0 006 0 006 0 052 0 154 Longitud de hoja 0 004 0 015 0 011 0 889 0 330 0 117 Di metro de hoja 0 003 0 009 0 001 0 278 0 143 0 222 Longitud de corola 0 000 0 000 0 000 0 005 0 002 0 056 Longitud de antera 0 000 0 004 0 00
8. de las mues tras son de manera exserta tan s lo 1 de las flores presentaban estigma a nivel de las anteras y 2 de las flores ten an el estigma inserto La importancia de este car cter cualitativo radica en que se considera la parte donde se lleva a cabo la polinizaci n cruzada y la mayor a de los morfotipos encontrados mantienen este car cter representativo de los silvestres Onus y Pickers gill 2004 El color del fruto intermedio de la planta de timpinchile Figura 3 se present en 43 de co lor anaranjado 38 de color morado y 19 de color amarillo de acuerdo con el muestreo reali zado Bran et al 2008 afirmaron que el color in termedio para la mayor a de los chiles silvestres es anaranjado sin embargo la presencia de co lores morados indica que algunos frutos mantie nen cierto grado de antocianina frecuentemente encontrados en los morfotipos de timpinchile que adem s presentaron color anaranjado Los otros morfotipos manifestaron cinco colores verde amarillo anaranjado rojo claro y rojo pero los chiles silvestres en estudio adem s de los cinco colores se le agrega el color morado El color verde o intermedio es debido a la alta concentraci n de clorofila que al madurar se tor na de color rojo causado por una alta cantidad de pigmentos rojos Licopersinas El color de los frutos a tenerse en cuenta ser aquel que cubra la mayor parte de ste ya que muchas veces el color no es homog neo y presen
9. el mejoramiento gen tico El an lisis de las funciones discriminantes ca n nicas Cuadro 3 efectuado en 17 caracteres evaluados permiti explicar 52 1 de variabi lidad en los 3 primeros niveles El timpinchile en el ejido Monterrey y zonas aleda as inclu yendo la Sierra Madre de Chiapas est repre sentado por un nivel intermedio de variabilidad esto explica la baja presencia de este recurso fitogen tico en la regi n present ndose en po cos meses por lo que es imprescindible estable cer estrategias para su conservaci n M ndez 1999 Nuez et al 2003 Al realizar el an lisis de los componentes principales para obtener el porcentaje de la va rianza para las tres primeras funciones discrimi nantes se obtuvo 0 99 de variabilidad Cuadro 4 sobresaliendo en el componente tres el ca r cter longitud de tallo tipos con caracter sticas representativas originales de este morfotipo re lacionados con arquitectura de la planta y en el Cuadro 2 Correlaci n entre variables y funci n discriminante Funci n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 DC 0 22 0 64 0 14 0 02 0 11 0 00 0 13 0 20 0 13 0 08 0 01 0 20 0 31 0 11 0 34 0 00 0 02 LC 0 04 0 07 0 00 0 53 0 05 0 43 0 35 0 21 0 03 0 10 0 06 0 07 0 35 0 13 0 00 0 14 0 39 DT 0 13 0 23 0 13 0 08 0 45 0 51 0 42 0 18 0 03 0 05 0 04 0 06 0 43 0 01 0 03 0 09 0 08 LF 0 08 0 06 0 11 0 42 0 11 0 22 0 13 0 09 0 49 0 23 0 05 0 15 0 34 0 29 0 27 0 27 0
10. m todos diferentes resultando m s eficiente el protocolo de CTAB En la Figura 5 se puede observar la amplifica ci n de todas las muestras de ADN del timpinchile utilizando el cebador ISSR UBC 862 obteniendo Ms A c D hi pace D W E F GH il 15 muestras y ocho bandas polim rficas Este sistema de amplificaci n fue utilizado por Sol s 2008 aportando patrones electrofor ticos ana lizables en 16 de 22 muestras obteniendo 12 bandas polim rficas en las que el rango de ta ma os moleculares explorados vari entre 220 y 2 000 pares de bases Se realiz la matriz b sica de datos con base en los electroforegramas obtenido de la amplifi caci n de las muestras de ADN En la matriz de ceros y unos se distingue la menor ausencia de la banda de 220 pb y la mayor presencia de la banda de 450 pb aproximadamente Matriz de similitud Los resultados obtenidos de la matriz de similitud Cuadro 10 se alan la correlaci n que existe en las diferentes muestras obtenidas al compararlas se distingue un alto grado de similitud en la mues tras colectadas en el ejido Monterrey ABCDE y el ejido Frailesca FGH con promedios de 0 750 a 1 0000 al compararlos con las muestras colecta E E G H Figura 4 Electroforegrama en gel de agarosa 1 2 Muestras de ADN gen mico de timpinchile 003 A M Marcador de peso molecular HyperLadderTM 1 16 mi y M2 Marcador de peso molecular A H Productos de amplificaci n d
11. sitios o puntos de muestreo c Caracterizaci n molecular de la variabili dad gen tica del timpinchile En la caracterizaci n morfol gica se utilizaron los Descriptores morfol gico taxon micos pro puestos por el AVRDC IPGRI CATIE 1995 y se realiz en condiciones naturales de campo con el fin de deducir las distribuciones reales Para la caracterizaci n n situ de los chiles en contrados en los puntos de muestreo se evalua ron las caracter sticas cuantitativas y cualitativas altamente discriminantes consideradas por el IP GRI Las variables cuantitativas evaluadas a las plantas encontradas en cada punto de muestreo consistieron en altura de la planta cm di me tro de la copa cm longitud del tallo cm di metro del tallo cm longitud de hojas maduras cm di metro de hojas maduras cm longitud de corola cm longitud de anteras mm lon gitud de filamento mm n mero de flores por axila longitud de la placenta cm longitud de frutos cm di metro de frutos cm peso de frutos g longitud del pedicelo cm espesor de la pared frutos mm di metro de semillas mm peso de 1 000 semillas g y n mero de semillas por frutos y las caracter sticas cualita tivas fueron posici n de la flor color de la flor y de las anteras exserci n del estigma color del fruto en estado maduro e intermedio y forma del fruto 6 Para la clasificaci n e identificaci n de las muestras de plantas se
12. tud del filamento formaron grupos de gran va lor gen tico ya que en ambos se lleva a cabo la polinizaci n Estos caracteres influyen en el agrupamiento de los morfotipos en estudio y son caracter sticas que pueden diferenciar a las especies de Capsicum La mayor dispersi n fue presentada por los ca racteres di metro longitud y n mero de semillas por fruto estos caracteres manifiestan represen tatividad del germoplasma alojado en el fruto y se demuestra que la base gen tica de este mor fotipo est determinada por caracteres del fruto Las caracter sticas de este morfotipo en estudio utilizando caracteres cuantitativos como descrip tores m nimos se muestran en el Cuadro 5 y for man parte de los resultados obtenidos en campo representativos de esta especie en la regi n 0 88 Diferenciaci n fenot pica del Timpinchile EA AP DC DT LP LFR DF NSF DS LPL LC Varia bles LF LA LH DH PMS EF LT PF Figura 1 Diferenciaci n fenot pica del timpinchile con relaci n al coeficiente de distancia DC Di metro de copa LC Longitud de corola DT Di metro de tallo LF Longitud de filamento DF Di metro de fruto NSF N mero de semillas por fruto PMS Peso de mil semillas LPL Longitud de placenta LF Longitud de fruto PF Peso de fruto EF Espesor de la pared del fruto DS Di metro de semillas LA Longitud de antera LP Longitud de pedicelo DM Di metro de semillas LT Longitud de tallo LH Longitud
13. 12 DF 0 00 0 01 0 08 0 18 0 21 0 04 0 18 0 19 0 17 0 52 0 32 0 34 0 28 0 22 0 11 0 15 0 3 NSF 0 00 0 09 0 09 0 06 0 13 0 12 0 29 0 07 0 35 0 49 0 29 0 09 0 25 0 03 0 15 0 30 0 45 PMS 0 05 0 10 0 01 0 01 0 11 0 17 0 23 0 2 0 43 0 04 0 69 0 03 0 01 0 12 0 29 0 11 0 19 LPL 0 02 0 05 0 05 0 10 0 28 0 01 0 00 0 08 0 23 0 47 0 49 0 23 0 44 0 17 0 13 0 21 0 12 LF 0 05 0 02 0 12 0 12 0 27 0 01 0 02 0 05 0 24 0 47 0 48 0 20 0 44 0 16 0 13 0 2 0 16 PF 0 08 0 05 0 12 0 23 0 05 0 01 0 20 0 16 0 31 0 44 0 43 0 45 0 13 0 32 0 01 0 16 0 08 EF 0 01 0 07 0 04 0 01 0 10 0 27 0 23 0 02 0 00 0 50 0 02 0 09 0 61 0 35 0 21 0 13 0 10 DS 0 09 0 08 0 05 0 46 0 01 0 05 0 30 0 06 0 06 0 11 0 20 0 05 0 07 0 58 0 09 0 19 0 46 LA 0 05 0 07 0 03 0 02 0 00 0 07 0 07 0 11 0 10 0 12 0 17 0 07 0 13 0 11 0 76 0 47 0 23 LP 0 03 0 19 0 01 0 00 0 11 0 11 0 04 0 47 0 17 0 03 0 21 0 28 0 07 0 00 0 22 0 68 0 17 DM 0 19 0 06 0 17 0 30 0 20 0 19 0 30 0 45 0 08 0 12 0 01 0 12 0 06 0 03 0 11 0 56 0 29 LT 0 06 0 00 0 20 0 22 0 32 0 24 0 03 0 18 0 28 0 17 0 11 0 08 0 28 0 28 0 10 0 54 0 33 LH 0 03 0 01 0 03 0 28 0 46 0 29 0 30 0 34 0 03 0 09 0 08 0 03 0 09 0 16 0 12 0 54 0 19 DC Di metro de copa LC Longitud de corola DT Di metro de tallo LF Longitud de filamento DF Di metro de fruto NSF N mero de semillas por fruto PMS Peso de mil semillas LPL Longitud de placenta LF Longitud de fruto PF Peso
14. 4 Quehacer Cient fico en Chiapas 2012 1 13 4 18 Caracterizaci n morfol gica y molecularde la variabilidad gen tica del timpinchile Capsicum annum L var glabriusculum sin aviculare en Chiapas Morphological and molecular characterization of the genetic variability of timpinchile Capsicum annum L var glabriusculum sin aviculare in Chiapas REYNERIO ADRI N ALONSO Brant BEATRIZ ZAMBRANO CASTILLO RICARDO QUIROGA MADRIGAL Mar a DE LOS NGELES Rosales EsquincA Y PiLaR Ponce D az RESUMEN La investigaci n se realiz en Monterrey municipio de Villacorzo Chiapas con el prop sito de caracterizar 1 la variabilidad gen tica molecular del timpinchile para determinar la diversidad presente en esa microrregi n y 2 la variabilidad in situ debida a las condiciones de los sitios Se utilizaron los descriptores para Capsicum basado en caracter sticas cuantitativas y cualitativas Se realiz un an lisis discriminante y se evalu por zonas la diversidad con los Indices de Margalef y Simpson Se evalu adem s la pendiente altitud apariencia y variabilidad observada en los sitios de muestreo Para la extracci n de ADN se utiliz el m todo de Asemota y el ADN gen mico se amplific mediante PCR para la obtenci n de 15 bandas polim rficas utilizando el iniciador UBC 862 esta informaci n fue analizada con la ayuda del programa NTSYS mediante la construcci n de una matriz de similitud que gener un dendograma y que mostr a
15. 5 Di metro de copa 181 76 18 13789 1 240 1 1 46 40 60 91 3 45 Di metro de tallo 181 1 24 224 6 3 9 0 3 0 60 48 38 0 04 Longitud de hoja 181 7 72 1389 7 15 3 2 3 0 38 80 0 22 Di metro de hoja 181 3 26 590 6 8 2 0 8 1 20 36 63 0 09 Longitud de corola 181 0 92 166 6 1 3 0 5 0 10 11 15 0 01 Longitud de antera 181 2 16 392 7 3 5 0 2 0 44 20 37 0 03 Longitud de filamento 181 4 24 768 5 6 1 0 75 17 67 0 06 Longitud de placenta 181 0 69 124 2 0 4 0 11 16 24 0 01 Longitud del fruto 181 0 79 142 1 Val 0 5 0 12 14 78 0 01 Di metro del fruto 181 0 56 100 7 0 75 0 4 0 07 12 10 0 01 Peso del fruto 181 0 21 37 5 0 3 0 1 0 05 22 77 0 01 Longitud del pedicelo 181 2 53 457 7 3 85 1 1 0 40 15 65 0 02 Espesor del fruto 181 0 85 154 2 3 0 3 0 38 45 18 0 03 Di metro de semillas 181 3 50 633 7 5 0 3 0 44 12 52 0 04 Peso de mil semillas 181 3 49 630 9 3 6 3 3 0 06 1 66 0 01 N semillas por fruto 181 9 42 1705 0 18 2 2 79 29 50 0 21 tudiados manifiestan estabilidad en cuanto a los caracteres cuantitativos en esta regi n Se puede observar Cuadro 2 que la determi naci n de las variables de mayor magnitud rela tiva dentro de cada funci n discriminante est n agrupadas por flores semillas y frutos principal mente De acuerdo con los coeficientes de las 17 funciones discriminantes can nicas estandariza dos se estima que en la funci n discriminante 15 longitud de antera funci n discriminante 11 peso de mil semillas y en la funci n discrimina
16. 6 0 013 0 013 0 248 Longitud de filamento 0 001 0 004 0 001 0 022 0 030 0 904 Longitud de placenta 0 000 0 000 0 002 0 010 0 019 0 004 Longitud del fruto 0 000 0 000 0 002 0 011 0 021 0 006 Di metro del fruto 0 000 0 000 0 000 0 007 0 013 0 002 Peso del fruto 0 000 0 000 0 000 0 001 0 000 0 001 Longitud pedicelo 0 002 0 002 0 011 0 028 0 025 0 136 Pared del fruto 0 001 0 000 0 005 0 002 0 007 0 090 Di metro de semillas 0 000 0 003 0 002 0 021 0 012 0 057 Peso mil semillas 0 000 0 000 0 001 0 002 0 003 0 001 Semillas por fruto 0 007 0 008 0 024 0 359 0 930 0 030 componente cinco sobresalen el car cter semillas por fruto en el componente seis destaca el car c ter longitud de filamento est representado por plantas con caracter sticas diferentes en las flores El car cter longitud de hoja representada en el componente cuatro por plantas con caracter sticas de arquitectura de la planta que incluyen a los caracteres altura de la planta y di metro de copa La variaci n gen tica se manifiesta en el tallo semillas y filamento principalmente El di metro y la longitud de los frutos son caracteres corre lacionados con el peso de stos poseen un alto valor discriminante y facilitan la identificaci n de los morfotipos El tama o del fruto es un car cter de herencia compleja resultado de la interacci n de varios genes pero est sujeto a modificaciones considerables por los factor
17. Chile colectado en la regi n la muestra Ch Esta ltima muestra perteneciente a un tipo de chile largo colectado entre los munici pios de Villaflores y Villa Corzo tiene caracter sticas diferentes en comparaci n con el timpinchile fruto de tama o largo presenta corrugosidad el c liz presenta constricci n entre el fruto es semierec to y sus colores intermedios son variados desde amarillo anaranjado naranja intenso hasta rojo por estas caracter sticas se asemeja a la especie Capsicum chinense y Capsicum frutescens por lo tanto en el dendograma indicado se aleja de las dem s muestras es probable que por la poliniza ci n cruzada estas especies hayan evolucionado a partir de las variedades originales convertidas en especies semicultivadas por la posici n de la flor y o fruto de forma semierecta Se evidencia con este estudio que la similitud de las muestras de timpinchile de la regi n en su mayor a son simi lares con excepci n de algunos caracteres cuan titativos que denotan cierta variabilidad entre las muestras destacando la longitud del fruto lon gitud del filamento peso de semillas n mero de semillas por fruto y peso de fruto CONCLUSIONES 1 Los caracteres longitud de antera peso de mil semillas y longitud de pedicelo manifestaron una marcada influencia en la discriminaci n del timpinchile 2 La mayor diversidad se encontr en la zona II con mayor n mero de plantas y reas monta o sas e
18. adem s a Mesoam rica M xico y Centroam rica como rea de m xima prioridad para la exploraci n y estudio de estos recursos fitogen ticos Di cha decisi n se tom en primer lugar por ser un g nero nativo de esta rea geogr fica y en segundo lugar por la gran cantidad de especies silvestres que todav a hoy se siguen descubrien do IPGRI 2001 La mayor parte de las colectas nacionales se han perdido principalmente la especie en estu dio Aunado a lo anterior en diversas regiones del estado de Chiapas especificamente en la regi n Frailesca y el municipio de Villa Corzo este morfotipo se encuentra amenazado por factores naturales de destrucci n de su h bitat y otros adversos Ante esta situaci n es prio ritaria la ejecuci n de programas de rescate conservaci n y aprovechamiento sostenible de los recursos gen ticos del g nero Capsicum a nivel nacional estatal regional y municipal con vistas a preservar la especie y a mantenerla en condiciones naturales Es importante conocer las limitantes que se presentan para su conservaci n caracter sticas morfol gicas que lo distinguen como el mejor chile y el conocimiento de las reas en donde se reproduce As mismo se debe realizar la ca racterizaci n de las zonas donde se ubican las poblaciones silvestres para establecer las rela ciones de las caracter sticas de stas con la su pervivencia y desarrollo de las plantas Considerando esta situaci n en el
19. criptores longitud de tallo di metro de copa espesor de la pared del fruto y altura de planta presentan resultados muy variables y el peso de mil semillas presenta un coeficiente de variaci n relativamente uniforme lo que indica que la mayor parte de los caracteres en estu dio presentan variaci n para la regi n del ejido Monterrey y Sierra Madre de Chiapas En el an lisis estad stico se puede observar que los caracteres longitud del tallo y di metro de copa tienen un CV mayor a 50 lo cual indica la m s alta variabilidad en la especie altura de la planta di metro del tallo longitud y di metro de hoja longitud de la antera peso del fruto espesor del fruto y n mero de semillas por fruto tienen un CV mayor a 20 con una variabilidad considerable dentro de la especie estudiada as mismo se observan nueve variables con un CV menor a 20 presentando baja variabilidad respecto a estos caracteres Al respecto Fran co e Hidalgo 2003 afirmaron que el grado de variabilidad de un car cter no indica necesaria mente la magnitud de su utilidad desde el punto de vista del cultivo ya que esto depende de los usos de la especie para tal efecto se cita que los niveles de variabilidad en los caracteres es Cuadro 1 Descriptores m nimos con estad sticos fundamentales Variables N X Suma Max Min D E c V E S Altura de planta 181 84 92 15371 0 260 22 38 70 45 57 2 88 Longitud de tallo 181 7 68 1391 6 58 0 5 8 80 11442 0 6
20. de hoja Cuadro 5 Descriptores m nimos representativos del timpinchile Altura de planta 85 cm Primera bifurcaci n 8 cm Di metro de copa 78 cm Di metro de tallo 1 5 cm Longitud de hoja madura 8 cm Di metro de hoja madura 3 cm Longitud de corola 1 cm Longitud de antera 3 mm Longitud de filamento 4 mm N mero de flores por axila 1 Longitud de la placenta 0 7 cm Longitud del fruto 0 8 cm Di metro del fruto 0 6 cm Longitud del pedicelo 3 cm Di metro de semillas 4 mm Peso de mil semillas 0 3g N mero de semillas por fruto 9 En la mayor parte de la regi n se realizaron estudios de indicadores de diversidad y para ello se muestrearon cinco diferentes zonas uti lizando el Indice de Diversidad de Riqueza de Margalef que se ala que al obtener valores mayores a 4 ya se puede considerar que existe diversidad significativa o variabilidad Los resul tados obtenidos representados en el Cuadro 6 en cuanto a la diversidad de las zonas indicaron que en todas las zonas en estudio existe diversi dad de esta especie sobresaliendo la zona II y la zona V En la zona II se manifest una alta ri queza de diversidad con respecto a las otras zo nas de muestreo donde se detect un n mero significativo de muestras con altitudes que van de 650 a 750 m y que indudablemente tienen influencia en la diversidad obtenida En cuanto al ndice de Dominancia de Simp son en el que el valor m nimo dentro de las zo nas presenta mayor d
21. do de Doctor en Ciencias Agr colas Universidad Agraria de La Habana Instituto Nacional de Ciencias Agr colas La Ha bana Cuba 240 p Dice L R 1945 Measures of the amount of ecologic asso ciation between species Ecology 26 297 302 Dewitt D y Bosland P W 1996 Peppers of the world An identification guide Editorial Ten speed Press 219 p FAO 1990 Guidelines for Soil Profile Description 3rd edition revised Food and Agriculture Organization of the United Nations International Soil Reference Information Centre Land and Water Development Division Rome FAO FAO 1983 Estudio de los chiles Capsicum FAO Roma Italia Franco T L e Hidalgo R 2003 An lisis estad stico de datos de caracterizaci n morfol gica de recursos fitogen ticos Bolet n T cnico n 8 Instituto Internacional de Recursos Fitogen ticos IPGRI Cali Colombia 89 p Hern ndez V S Guevara G R Rivera G B V zquez F Y Oyama C K 1999 Los parientes silvestres del chile Cap sicum spp como recursos gen ticos Bolet n de la Socie dad Bot nica de M xico vol 62 n 12 pp 171 181 Instituto Nacional de Estad stica Geograf a e Inform tica INEGI 2000 Integraci n territorial del XII Censo Ge neral de Poblaci n y Vivienda 2000 Estado 07 Chiapas M xico p 346 IPGRI 2001 Manual t cnico para la planificaci n de una colecta de germoplasma Roma 56 pp L pez C B y M E Arroyo D 2006 Germinaci n de
22. ds using primer UBC 862 This information was analyzed with the NTSYS program through the construction of a similarity matrix which led a dendogram Such a dendogram showed genetic affinity between the studied accessions and assisted to distinguish a single grouping among them Characters like anther length seed weight and pedicel and placenta length showed the highest discriminant value Discriminant analysis led to four groups of characters for the morphological characterization fruits leaves architecture of plant and flowers The Margalef and Simpson indices were appropriated to assess diversity Zone II presented the greatest diversity This research showed that there is low and intermediate variability in slope and plants sources of collection Keywords diversity descriptor genes INTRODUCCI N El cultivo de chile Capsicum spp es uno de los m s importantes en M xico y el mundo Eviden cia de ello es la gran variabilidad de formas cul tivadas que se usan en el pa s resultado de la amplia diversidad de ambientes agroecol gicos y de culturas precolombinas En la actualidad existe una extensa gama de chiles de diferentes formas colores aromas sabores y tama os que cons tituyen una valiosa contribuci n de M xico a la gastronom a mundial Chiapas se localiza en una de la diez regiones con mayor biodiversidad en el planeta entre sus recursos fitogen ticos nativos se encuentra el timpinchile Capsicum annuum L var glabriusc
23. e muestras de Timpinchile Ch Chile largo Figura 5 Electroforegrama en gel de agarosa 2 Productos de amplificaci n de muestras de timpinchile A N M1 mar cador de peso molecular HyperLadderTM I M2 marcador de peso molecular HyperLadderTM IV CN control negativo Cuadro 10 Matriz de similitud A B c D E F G H I J K L M N Ch A 1 0000 B 1 0000 1 0000 0 889 0 889 1 0000 D 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 E 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 1 0000 F 0 750 0 750 0 889 0 750 0 750 1 0000 G 0 750 0 750 0 889 0 750 0 750 1 0000 1 0000 H 0 750 0 750 0 889 0 750 0 750 1 0000 1 0000 1 0000 1 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 1 0000 0 750 0 750 0 750 1 0000 J 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 1 0000 0 750 0 750 0 750 1 0000 1 0000 K 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 1 0000 0 750 0 750 0 750 1 0000 1 0000 1 0000 L 1 0000 1 0000 0 889 1 0000 1 0000 0 750 0 750 0 750 1 0000 1 0000 1 0000 1 0000 M 0 857 0 857 0 750 0 857 0 860 0 571 0 571 0 571 0 857 0 857 0 857 0 857 1 0000 N 0 750 0 750 0 889 0 750 0 750 1 0000 1 0000 1 0000 0 750 0 750 0 750 0 750 0 571 1 0000 Ch 0 571 0 571 0 500 0 571 0 570 0 571 0 571 0 571 0 571 0 571 0 571 0 571 0 333 0 571 1 0000 das del mismo ejido pero de diferentes poblacio nes sobresalen IJKLMN con promedios de 0 571 a 1 0000 y la menor similitud es la muestra Ch que es una muestra de chiles colectados en la regi n En su mayor a presentan promedios de 0 571 La mayor a de las muestras analizadas permitieron indicar variabilidad e
24. ejido Monte rrey municipio de Villa Corzo Chiapas se realiz la caracterizaci n morfol gica in situ y molecu lar de la variabilidad gen tica del timpinchile adem s se caracterizaron los sitios y puntos de muestreo teniendo en cuenta el medio ambien te relacionado con el estado de conservaci n de las plantas La caracterizaci n molecular se utiliz como herramienta para evaluar la diversidad de esta especie y compararla con las caracter sticas morfol gicas de acuerdo con los siguientes obje tivos caracterizar n situ la variabilidad del chile silvestre timpinchile las condiciones de los sitios o puntos de muestreo y caracterizar molecular mente su variabilidad gen tica MATERIALES Y M TODOS La investigaci n se realiz en el ejido Monterrey y zonas aleda as a la Sierra Madre de Chiapas ubicados entre los 920 25 42 longitud oeste y 160 13 41 latitud norte y zonas colindantes del municipio de Villa Corzo Chiapas a una altitud de 580 msnm se localiza adem s a 20 km de la cabecera municipal Se puede apreciar durante la mayor parte del a o un clima c lido subh medo excepto en los meses de noviembre diciembre y parte de enero cuando disminuye la temperatu ra y se torna templado El estudio se efectu en el per odo comprendido entre agosto de 2009 y mayo de 2010 y se dividi en tres etapas a Caracterizaci n morfol gica in situ de la variabilidad del timpinchile b Caracterizaci n de los
25. ente se emple el programa MXCOMP de NTSYS pc ver 2 2 para calcular la correlaci n cofen tica existente entre la matriz de valores cofen ticos y la correspondiente ma triz de similitudes mediante el coeficiente de correlaci n momento producto r y la prueba de Mantel estad stico Z que sirven para medir el grado de relaci n que existe entre las matri ces comparadas Mantel 1967 Se utiliz el Programa SPSS versi n 17 0 para el an lisis discriminantes y los componentes principales se obtuvieron con el programa STAT GRAPHIC versi n 5 1 Se utiliz el programa COMPAPRO para las pruebas de Chi cuadrada y comparaci n de las medias a trav s de la prueba de Duncan y la caracterizaci n del sitio en todas las variables evaluadas RESULTADOS Y DISCUSI N Los resultados preliminares de la caracterizaci n n situ para caracteres cuantitativos indicaron que las poblaciones de plantas de timpinchile comprenden caracteres relacionados con la ar quitectura de la planta hojas flores frutos y semillas Cuadro 1 La desviaci n est ndar en la mayor a de las variables es baja su disper si n se manifiesta con los valores bajos de las medias sin embargo para los descriptores lon gitud de tallo y di metro de copa la desviaci n est ndar presenta valores m s altos la inten sidad de estos caracteres se manifiesta en las poblaciones de plantas de esta especie Con relaci n al coeficiente de variaci n los des
26. epeticiones realizadas Las bandas se evaluaron tomando el n mero 1 como bien si estaban presentes y O como ausencia De esta forma se obtuvieron las diferentes matrices b sicas de datos identificando cada banda con una letra del abecedario seguido de su tama o molecular aproximado en pares de bases para el caso de intermicrosat lites Matriz de similitud El an lisis de la similitud se llev a cabo mediante el coeficiente de asociaci n de Dice D Dice 1945 Sneath y Sokal 1973 Nei Li 1979 Para obtener esta matriz de similitud se utiliz el programa SI MQUAL de NTSYS pc ver 2 2 Rohlf 1990 An lisis de agrupamientos El an lisis de agrupamientos se realiz a partir de la matriz de similitud mediante el procedimien to UPGMA Sneath y Sokal 1973 para obtener el dendograma fen tico o fenograma y el pro grama SAHN clustering de NTSYS pc ver 2 2 La representaci n gr fica de los agrupamientos en dendogramas se realiz mediante el programa TREE de NTSYS pc ver 2 2 Rohlf 1990 Para evaluar la medida en que el fenogra ma representa los valores de la matriz de si militud se obtuvo el coeficiente de correlaci n cofen tica Para ello se construy a partir de la matriz del dendograma obtenida con el pro grama SAHN clustering de NTSYS pc ver 2 2 una nueva matriz sim trica conocida como ma triz cofen tica Rohlf y Sokal 1981 mediante el programa COPH de NTSYS pc ver 2 2 Rohlf 1990 Posteriorm
27. es del medio ambiente Bran 2009 El coeficiente de distancia representa la simi litud como la proximidad de las variables o acce siones con respecto a las dem s son medidas de diferencias en las cuales los valores elevados indi can una menor similitud En la Figura 1 se puede observar la distancia de las diferentes variables de timpinchile donde los caracteres fenol gicos forman grupos relacio nados con arquitectura de la planta flores frutos y semillas El dendograma representado con la dis tancia Euclideana muestra el nivel de similitud con la longitud de la placenta y la del fruto El primer car cter es de mucha importancia porque est co rrelacionado con el peso de los frutos es en el que se manifiesta la resistencia con relaci n al grosor de la placenta y semillas presentes adem s la vida de anaquel y es donde se almacena la mayor cantidad de capsicina que determina lo picante de los frutos Bran 2009 Estas tres variables son las que conservan las semillas y son las que guardan la informaci n gen tica de la especie adem s de ser la forma de conservaci n y dispersi n La longitud y di metro de las hojas altura de la planta y el di metro de copa se relacionaron con el di metro del tallo Es evidente que en condiciones favorables esta planta logra desarrollar una altura de 1 50 m y un grosor de tallo de m s de 2 cm as como un di metro de copa de 2 m Los caracteres longitud de la corola y longi
28. finidad gen tica entre las accesiones estudiadas al distinguirse un solo agrupamiento entre ellas Los caracteres longitud de antera peso de mil semillas y longitud de pedicelo y placenta presentaron mayor valor discriminante Como resultado del an lisis discriminante se formaron cuatro grupos de caracteres de valor para la caracterizaci n morfol gica del timpinchile frutos hojas arquitectura de la planta y flores Los ndices de riqueza de Margalef y de dominancia Simpson fueron adecuados para evaluar la diversidad la zona II fue la que mayor diversidad present El trabajo en su conjunto permite afirmar que existe variabilidad baja e intermedia en pendiente y fuentes de recolecci n de plantas Palabras Clave diversidad descriptor genes ABSTRACT The research took place in the community so called Monterrey municipality of Villa Corzo Chiapas with the objective of cha racterizing 1 the molecular genetic variability of timpinchile to determine its diversity in this microregion and 2 variability in situ due to the conditions of recollection sites Descriptors for Capsicum based on quantitative and qualitative characteristics were used Discriminant analysis was conducted and assessed by zones with the diversity indices of Margalef and Simpson Slope altitude appearance and observed variability in sampling sites were assessed Asemota method was used for DNA extraction of and genomic DNA amplified by PCR to obtain 15 polymorphic ban
29. iversidad o variabilidad se puede notar una marcada dominancia en la zona II los datos tambi n son significativos en las zo nas V y I pero stas con menor dominancia En el Cuadro 7 se observa que de acuerdo con los niveles de pendiente en relaci n con la variabilidad donde se ubic el mayor n mero de plantas de timpinchile es en la pendiente cinco 11 15 9 con un total de 85 plantas Cuadro 6 Diversidad de las poblaciones de timpinchile por zonas con relaci n a los niveles de altitud ZONAS Altitud ZI ZII Z III ZIV ZV 650 700 0 77 6 0 701 750 22 40 0 0 751 800 0 7 801 850 0 2 14 851 900 0 0 13 Subtotal 22 117 6 9 27 Total 22 117 6 9 27 Rm 33 8591766 Rm 4 040015 22 31628 0 961908 1 539053 5 001924 AE 0 051653 0 001826 0 694444 0 308642 0 034294 Rm ndice de Riqueza de la diversidad de Margalef A Indice de Dominancia de Simpson Cuadro 7 Niveles de pendiente con relaci n a la variabilidad observada Pendiente Variabilidad Variabilidad Variabilidad alta intermedia baja P1 0 0 5 0 0 0 P2 0 6 2 9 Oc 6a 1b P3 3 5 9 3c 7a 7a P4 6 10 9 lc 8b 12a P5 11 15 9 2c 49b 85a con variabilidad baja y 49 plantas en variabili dad intermedia Con relaci n a las caracter sticas que pre sentaron las plantas en las fuentes de recolec ci n con respecto a la variabilidad se detect la variabilidad baja e intermedia en el bosque con el mayor n mero de plantas Cuadro 8 sin embargo
30. lanco caracter stica distintiva de los Capsicum annuum esto debido a que de las 181 muestras tomadas s lo seis plantas presentaban flores de color blanco verdoso La caracter stica cualitativa de posici n de la flor se manifiesta en la mayor parte de los chiles silvestres es un car cter dominante en cada una de las especies que lo conforman Para la especie en estudio se manifiesta de manera significativa Con los muestreos realizados se pudo observar que la posici n de la flor en las plantas de chile es de manera erecta 91 9 de las plantas presentaron flores con una posici n intermedia Con respecto a lo anterior Bran et al 2008 observaron que 92 de las muestras caracte rizadas de chiles silvestres presentaron flores de posici n erecta y 8 intermedia la posici n de la flor es considerada una caracter stica principal que identifica a esta especie Andrews 1995 Para el timpinchile se observaron 3 colores di ferentes con respecto al de las anteras sobresa liendo en stas el color azul p lido con 67 del total de las muestras y con 27 las anteras de color morado Bran et al 2008 observaron que espec ficamente el timpinchile C annuum se caracteriza por poseer flores con anteras de color azul p lido al observar que 59 de las muestras obtenidas presentaron ese color El estigma es la parte de las flores que recibe el polen durante la polinizaci n La exserci n del estigma se encontr que en 97
31. lectadas se lim piaron con etanol al 70 luego se pesaron 0 3 y 0 5 g y se congelaron en nitr geno l quido para llevar a cabo el proceso de extracci n de ADN mediante el m todo de Asemota 1995 Amplificaci n de las muestras mediante ISSR PCR Para la amplificaci n de las diferentes muestras de ADN se utiliz 1 uL de ADN molde y un vo lumen final de reacci n de 25 uL en tubos para PCR est riles con una capacidad de 500 pL Se utiliz el cebador ISSR UBC862 secuencia AG CAGCAGCAGCAGCAGC Tm 68 6 C La Taq polimerasa el amortiguador de reacci n y la mezcla de desoxirribonucle tidos dNTP s fue ron de la compa a BIOLINE Las reacciones de amplificaci n se realizaron con un termociclador ICYCLER de Bio Rad con una capacidad de 60 muestras El programa uti lizado fue un paso inicial de 5 min a 94 C seguido por 40 ciclos de 1 min a 94 C 1 min a 68 6 C y 2 min a 72 C con una extensi n final de 7 min a 72 C se a adi un paso a 4 C para conservar fr a la muestra antes de ser utilizada Al terminar la reacci n de PCR a cada uno de los tubos con los productos de amplificaci n se a adieron 2 uL de amortiguador de carga y pos teriormente se corri una electroforesis en gel de agarosa al 2 en amortiguador TAE 1X An lisis de datos con Programa NTSYS Matriz b sica de datos Las bandas polim rficas o monom rficas obte nidas en el an lisis fueron reproducidas en las diferentes r
32. nte 16 longitud de pedicelo son los que presentan una marcada influencia en la discriminaci n de tal modo que las caracter sticas de arquitectura de la planta del fruto y semilla se separaron del resto de manera significativa mientras que para la funci n discriminante dos di metro de copa contribuy en mayor medida a determinar las ca racter sticas altamente heredables relacionadas con la planta sin embargo en la funci n discri minante 13 espesor de la pared del fruto re presenta otra de las caracter sticas del fruto que contribuye a la discriminaci n del timpinchile Por lo tanto las caracter sticas de flores semillas y frutos pueden influir en la identificaci n de este chile lo que indica que es un car cter dominante heredable utilizado para estudios de mejoramien to gen tico Estos caracteres que influyeron en la discri minaci n se consideran sobresalientes porque representan la base gen tica obtenida n situ considerando que los caracteres que est n re lacionados con flores y semillas tienen influen cia en la preservaci n de la especie Lo anterior demuestra que estos caracteres son importantes para que esta variedad permanezca por a os en la regi n de tal forma que est n representados en toda la planta adem s con los resultados obtenidos se presenta un nuevo conjunto de ca racteres independientes que pueden utilizarse en estudios de variabilidad gen tica b squeda de genes de inter s para
33. ntre poblaciones Matriz de agrupamientos De acuerdo con los resultados obtenidos del den dograma a trav s del an lisis de agrupamientos con el m todo UPGMA Figura 6 la matriz de similitud represent un solo grupo principal que se asocia a un nivel de similitud de 0 55 El valor del coeficiente de correlaci n cofen tica r fue de 0 89 Se agruparon nueve muestras que provienen de los alrededores del ejido Monterrey encontra dos en AB Arroyo 1 y 2 D Caseta 1 E Mon terrey Rancher a IJ Monterrey Traguer a 1 KL Monterrey Arroyo 3 y 4 C Monterrey Caseta 2 M Monterrey Arroyo 5 FGH ejido La Frailesca N Monterrey Traguer a 2 y Ch Chile colectado en la regi n como muestra testigo Los resultados con firman la similitud que existe entre las muestras de timpinchile colectadas en el ejido Monterrey ejido La Frailesca y parte de la Sierra Madre de Chiapas aunque formaron diferentes subgrupos indican que pertenecen al g nero Capsicum incluyendo Ch 0 55 0 66 0 39 1 00 Coeficiente Figura 6 Dendograma de similitud de las 15 muestras de ADN de poblaciones silvestres de timpinchile analizadas en el ejido Monterrey y zonas aleda as de la Sierra Madre de Chiapas AB Arroyo 1 y 2 D Caseta 1 E Monterrey Rancher a IJ Mon terrey Traguer a 1 KL Monterrey Arroyo 3 y 4 C Monterrey Caseta 2 M Monterrey Arroyo 5 FGH Ejido La Frailesca N Monterrey Traguer a 2 y Ch
34. ta zonas m s oscuras o m s claras que otras En cuanto al color del fruto maduro se obser varon tres colores caracter sticos el rojo rojo claro y rojo oscuro dominando en 71 el color rojo y en 27 se puede observar un color rojo claro En el ejido Monterrey se pueden encontrar frutos de timpinchile de tres formas diferentes que son casi redondo ovoide y alargado Para esta regi n las muestras obtenidas indicaron que 65 de las plantas muestreadas presentaron Color del fruto intermedio Anaranjado Morado Amarillo Figura 3 Color del fruto intermedio frutos casi redondos 24 de las plantas frutos de forma ovoide y s lo 11 frutos de forma alar gada De acuerdo con estas caracter sticas mu chos campesinos le atribuyen el nombre como la forma que representa el fruto y lo relacionan con la forma redonda o bolita Realmente la forma verdadera de este fruto es ovoide se relaciona con la forma de un huevo Las formas caracte r sticas de estos chiles tambi n son bastante co nocidas por Long 1998 quien manifest que el timpinchile o bolita es conocido como el chile de Chiapas Se puede observar en el electroforegrama que la extracci n de ADN con el m todo de Ase mota 1995 asegur la obtenci n de un ADN de buena calidad y cantidad tal como se observa en la Figura 4 Al respecto Sol s 2008 obtuvo tambi n buenos resultados al realizar la extrac ci n de ADN probando tres
35. timpin chile Capsicum annuum L var aviculare de la Depre si n Central de Chiapas Tesis de Licenciatura Facultad de Ciencias Agron micas UNACH Villaflores Chiapas M xico p 20 Mantel N A 1967 The detection of disease clustering and a ge neralized regression approach Cancer Res 27 209 220 M ndez F J E 1999 Especies con frutos comestibles En Fruticultura Tropical Lisboa pp 310 321 Moreno E C M todos para medir la biodiversidad My T Ma nuales y Tesis SEA vol 1 Zaragoza Espa a 2001 84 pp Nei M y W H Li 1979 Mathematical model for studying genetic variation in terms of restriction endonucleases Proc Natl Acad Sci 76 5269 5273 Nuez V F Gil O R Costa G R 2003 El cultivo de pimientos chiles y aj es Madrid Ediciones Mundi Prensa pp 94 97 Onus N A y Pickersgill B Unilateral Incompatibility in Capsi cum Solanaceae Occurrence and Taxonomic Distribu tion Annals of Botany 2004 vol 94 n 2 pp 289 295 Ram rez M M Pozo C O Rodr guez B L A Medina M T Villal n M H 2002 Production Technology for piquin pepper Capsicum annuum var aviculare In Procee dings of the 16th International Pepper Conference 16 2002 noviembre 10 12 Tampico p 23 Rohlf F J 1990 NTSYS pc Numerical taxonomy and multi variate analysis system Versi n 1 60 Exeter software New York 162 pp Rohlf F J y R R Sokal 1981 Comparing numerical taxono mic studies
36. ulum Dunal Heiser 8 Pickersgil En la actualidad se cultivan cinco especies de Capsicum de las cuales cuatro est n presentes en M xico siendo nuestro pa s adem s reconocido como centro de origen y diversidad de Capsicum annuum Se considera que M xico es un sitio es trat gico para la conservaci n y aprovechamien to de este recurso por poseer un gran n mero de tipos de chiles de importancia comercial y o regional en todo el pa s Por otro lado existe el pariente silvestre m s cercano Capsicum an nuum var glabriusculum sin aviculare conocido com nmente por la poblaci n como timpinchile con amplia distribuci n nacional que presenta diversidad morfol gica y gen tica en las regiones en donde se distribuye y forma parte importante de la econom a local 1 Universidad Aut noma de Chiapas Facultad de Ciencias Agron micas Carretera Ocozocoautla Villaflores Chiapas M xico C P 30470 Correo e branQunach mx Actualmente la diversidad presenta erosi n gen tica como consecuencia de desastres y destrucci n de reas naturales sustituci n de variedades criollas plagas y enfermedades en tre otras causas que se manifiesta en p rdida de genes de inter s agron mico y comercial En 1979 la FAO lo propuso como un cultivo de alta prioridad para los estudios de conservaci n por dos motivos fundamentales por su importancia econ mica y por la p rdida en alto grado de la variabilidad natural considerando
37. utilizaron las claves taxon micas de la FAO 1983 Con las variables cuantitativas se realiz un an lisis discriminante Franco e Hidalgo 2003 Como parte del an lisis discriminante se realiz la selecci n paso a paso de aquellas caracter sticas que mayor aporte representaron en la discriminaci n en tre las muestras obtenidas Se determinaron las variables de mayor magnitud relativa dentro de cada funci n discriminante considerando las que m s contribu an a la discriminaci n Para determinar la diversidad de chiles sil vestres n situ se evalu en todas las zonas de muestreo la riqueza de especies o diversidad alfa y la diversidad beta o diversidad entre h bitat Moreno 2001 La riqueza de especies se midi mediante el ndice de Margalef que mide la riqueza espec fica y el ndice de Dominancia de Simpson que mide la estructura de la comu nidad seg n las siguientes f rmulas ndice de Riqueza de Margalef Rm s 1 InN donde S es el n mero de morfotipos y N es el n mero total de individuos de todos los morfo tipos ndice de Dominancia de Simpson A 2 Pi donde Pi es el n mero de individuos de un mor fotipo dado entre el n mero total de individuos Caracterizaci n de los sitios o puntos de muestreo Para determinar las reas con los chiles en es tudio a evaluar se trazaron rutas de muestreos utilizando el mapa del estado de Chiapas editado por el INEGI 2000 Se realiz la
38. xistiendo en ellas condiciones adecuadas para la conservaci n de la variabilidad in situ 3 Existi variaci n en las poblaciones de plantas estudiadas 4 Las 10 poblaciones silvestres estudiadas mani festaron segmentos polim rficos amplificados por medio de ISSR PCR indicadores de la existencia de diversidad gen tica 5 Los mayores coeficientes de similitud repre sentados provienen de poblaciones de plantas del ejido Monterrey y en menor proporci n de la comunidad La Frailesca REFERENCIAS Andrews J Peppers 1995 The domesticated Capsicum New edition Austin University of Texas Press 186 p Asemota H N 1995 A fast simple and efficient miniscale method for the preparation of DNA from tissues of yam Dioscorea sp Plant Mol Biol Rep 13 214 218 AVRDC IBPGR CATIE 1995 Descriptores para Capsicum Capsicum spp Instituto Internacional de Recursos Fito gen ticos IBPGR AVRDC y CATIE Roma Italia 50 p Bran R A A C Moya A Cabrera Pilar P R Quiroga M A Rosales y J L Zuart 2008 Evaluaci n jn situ de la varia bilidad gen tica de los chiles silvestres Capsicum Spp en la regi n Frailesca del estado de Chiapas M xico Vol 29 n 2 Revista Cultivos Tropicales Cuba Bran R A A 2009 Caracterizaci n in situ de los recursos gen ticos de los chiles silvestres Capsicum spp y de las condiciones para su conservaci n en la Regi n Frai lesca del estado de Chiapas M xico Tesis de gra
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