Tres décadas del saneamiento de cultivares de cítricos en
Contents
1. Naranja Valencia Rio Farms Naranja Navel Rocky Hill Naranja Queen Naranja Pope Summer Naranja Hamlin Sel Regional Naranja Koethan Sweet Naranja Temprana Naranja Parson Brown Naranja Jardines Naranja Shamouti 1 Naranja Lue Gim Gong Naranja Washington Navel Foyos INIASEL 45 Naranja Valencia Delta Seedless INIASEL 363 Naranja Midknight IVIA 368 Naranja Ambersweet IVIA 430 Mandarinas H bridos 1 Mandarina Clementard IVIA 65 2 2 Mandarina Oroval IVIA 8 34 3 Mandarina Clementina 4 Mandarina Clemenules IVIA 22 19 5 Mandarina Parson s Special 6 Mandarina Dancy Mejorada 7 Mandarina Valles IVIA 17 3 8 Mandarina Satsuma Tropical 9 Mandarina Page IVIA 79 1 Mandarina Sunburst IVIA 200 C 1 11 Mandarina Lee 12 Tangelo Nova IVIA 74 7 13 Mandarina Fairchild IVIA 83 3 14 Mandarina Fairchild 15 Mandarina Maribel 16 Mandarina Fortune INIASEL 80 Limas 1 Lima mexicana 2 Lima Persa H 1 3 Lima Persa SRA 58 4 Lima Persa 98 5 Lima Rangpur 6 Lima mexicana sin espinas Limones 1 Lim n Fino IVIA 49 5 Limon Frost Eureka Limon L 1 Limon Meyer Lim n Franc s Lim n Ariel JAUN Cidras 1 Cidra Arizona 861 S 1 2 Cidra Etrog 60 13 Revista CitriFrut Vol 24 No 2 2007 17 Mandarina Honey 18 Mandarina Kinnow 19 Mandarina Frua 20 Tangor Murcott 21 Tangelo Ugly 22 Tangelo Orlando 23 Tangelo Minneola 24 Tangor Dweet 25 Tangor Clemelin 11 20 26 Tangor Ellendale IVIA 194 1 27 Tangor O2. Agric Jorge Dimitrov Bayamo Cuba Pe a M Gonz lez y J M P rez 1983 Eliminaci n de la exocortis en un clon de toronja rosada Thompson C paradisi Macf me diante el microinjerto n vitro Cienc Tec Agric C tricos y otros Frutales 6 2 149 152 Revista CitriFrut Vol 24 No 2 2007 P rez J M A De Bernard y C B Moya 1977 Una virosis que afecta a los c tricos su semejanza con el crinkly leaf V Reuni n Nacional de Investigaciones de C tricos y otros Frutales Jag ey Grande Matanzas Cuba Tomo Il 157 169 P rez J M N Valdivia y A De Bernard 1980 Resultados de prue bas virales durante el periodo 76 79 Primer Forum de la Estaci n Nacional de Sanidad de C tricos Ciudad de La Habana Cuba P rez J M N Matos A De Bernard M Gonz lez J Gonz lez e Pe a 1981 Revisi n de los estudios realizados con una enferme dad similar al crinkly leaf Memorias Congreso Nacional de C tricos y otros Frutales Palacio de las Convenciones Ciudad de La Haba na Cuba Tomo Il 265 281 P rez J M y N Matos 1982 Caracter sticas y m todos de detec ci n de enfermedades virales en c tricos Conferencia Curso de Citricultura 16 p IIFT Cuba P rez J M M Gonz lez A De Bernard O Fern ndez Z Acosta y M Rodr guez 1989 Situaci n del empleo de m todos de diagn s tico y de lucha en la prevenci n de agentes pat genos en los bancos de yemas de c tricos
3. Simposio XX Aniversario de la ENSAC Ciudad de La Habana Cuba P rez J M V Zamora M Gonz lez y A R os 1995 Separaci n de viroides de la exocortis y caquexia mediante la t cnica de microinjerto n vitro de pices caulinares Taller Internacional de Biotecnolog a Vegetal en Pastos C tricos y Ca a de Az car Indio Hatuey Matanzas Cuba P rez J M I Pe a K Vel zquez L Arias M Alonso L Batista y J Cueto 2002 Detecci n de agentes de tipo viral en un sistemade Pro ducci n de Materialde Propagaci n Certificadode C tricos Simposio Internacional Sobre Vigilancia Fitosanitaria y en Relaci n con la Protec ci n al Entorno Palaciode Convencionesde La Habana Cuba P rez J M Pe a L Batista y E L pez 2007 Manual t cnico de procedimientos para el diagn stico biol gico de enfermedades trans misibles por injerto en los c tricos En prensa UNECIT MINAG Cuba 1987 Programa para la producci n de mate rial de propagaci n certificado de c tricos Servicio de Inspecci n y Certificaci n de Semillas Zamora V M Gonz lez y T Rodr guez 1995a Posibilidades de utilizaci n de diferentes patrones en la t cnica de microinjerto jn vitro en c tricos Datos no publicados Zamora V J M P rez O Mas A R os y T Rodr guez 1995b Introducci n de un grupo de variedades de c tricos a trav s del sistema de cuarentena Taller Internacional de Biotecnolog a Ve
4. n en el programa de saneamiento y en un sistema de cuarentena para c tricos IICF Cuba Hartman H T y E Kester 1964 Propagaci n de plantas principios y pr cticas M xico Editorial Continental S A 814 p IIFT Cuba 1996 Sistema para la Producci n de Material de Propa gaci n Certificado de C tricos Lecha L M Gonz lez V Barrios F P rez F Guerra M Wong J F Guerra 2006 Impacto econ mico de las exportaciones de ma terial de propagaci n certificado como aporte al financiamiento en MLC a las investigaciones frut colas XVI Forum de Ciencia y T cni ca Ciudad de la Habana Cuba Mas O A Campos y A Rios 1989 Esterilizaci n de varetas de c tricos para su cultivo n vitro Simposio XX Aniversariode la ENSAC Ciudad de La Habana Cuba Mas O A R os B Morales M Mirabal A Campos y M Gonz lez 1991 Metodolog a para la introducci n de material de propagaci n vegetativo de c tricos a traves de cultivos n vitro Comunicaci n breve Centro Agr cola 18 3 75 78 Matos N De Bernard A J M P rez y M Gonz lez 1981 Estudio de las enfermedades virales y afines de los c tricos en Cuba pro blem tica y perspectivas futuras Memorias Congreso Nacional de C tricos y otros Frutales Palacio de las Convenciones Ciudad de La Habana Cuba Tomo Il 265 281 Murashige T and F Skoog 1962 A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture Physio
5. s Special Fig 2 Se observaron diferencias en el per o do en que las plantas estaban aptas para el microinjerto a partir de la fecha de siembra de las semillas y en el porcentaje de microinjertos exitosos Las plantas de Citrandarin estaban aptas a los 9 d as las de citrumelo Swingle entre los 9 12 y las restantes a los 12 d as Aunque con todos los patrones se obtuvieron plantas microinjertadas el Citrandarin y el Citrumelo Swingle fueron los m s favorables Zamora ef al 1995 En general la edad ptima de los patrones etiolados para realizarlos microinjertos comprende de 9 a 14 d as en dependencia del vigor de la especie que se utilice Medios de cultivoe influencia de cotiledones en el desarrollo de los microinjertos Para favorecer el prendimiento de los MIV y su desarrollo posterior se compararon los medios de cultivo de MS Murashige y Skoog 1962 y el de Hoagland con modificaciones Hartman y Kester 1964 tanto en la obtenci n de los patrones como en la calidad de las plantas microinjertadas Gonz lez ef a 1977b 1980a Este ensayo se cumpliment con la adici n de sacarosa en concentraciones de 30 40 50g l para el cultivo n vitrode los patrones y de 50 759 l para las plantas microinjertadas as como la supresi n o no de los cotiledones en los patrones al momento de ser microinjertados Se comprob la superioridad del medio MS sobre el de Hoagland para el cultivo de las plantas obtenidas por MIV Murashi
6. c tricos in cluyendo aquellos que no son eliminados por termoterapia Desde el punto de vista agrot cnico las plantas obtenidas conservan las caracter sticas genot picas de las plantas madres y no presentan los caracteres juveniles que aparecen en las plantas pro ducidas por semillas Navarro y Ju rez 1977 y Nava rro 1993 En Cuba comenzaron las investigaciones para el esta blecimiento de la t cnica de microinjerto en 1973 en la ENSAC Los primeros cultivares sanos se certificaron en 1976 y los resultados de las primeras investigacio nes fueron publicados en 1977 por Gonz lez ef al 1977a 1977b A partir de ese momento se continuo de manera ininterrumpida la optimizaci n y la aplica ci n de esta t cnica en los programas de producci n de material de propagaci n certificado de c tricos en el pa s y en otras investigaciones El objetivo de este trabajo es hacer un recuento de los aspectos m s importantes de esta trayectoria los re sultados alcanzados y su aplicaci n en los programas sanitario y de cuarentena para la producci n de mate rial de propagaci n certificado que garantice la sostenibilidad de la industria citr cola del pa s ESTABLECIMIENTO DE LA T CNICA DE MIV Los trabajos iniciales para el establecimiento de la t c nica de MIV permitieron definir aspectos fundamenta les para la realizaci n exitosa de la misma Revista CitriFrut Vol 24 No 2 2007 Tipos de cortes del microinjert
7. fidos El excedente de yemas producidas en los viveros de Alqu zar Isla de la Juventud y Ceiba se ha exportado seg n solicitudes de algunos pa ses de la regi n del Caribe como M xico Hait Rep blica Dominicana y Guatemala los que han adquirido m s de un mill n de yemas en los ltimos a os especialmente de los cultivares lima Persa naranjas Valencia Hamlin y China pomelos blancos y pigmentados mandarinas Dancy y Satsuma Por otra parte las semillas certificadas tambi n se han exportado con un monto de m s de 2 600Kg de los patrones Citrus macrophylla Citrus volkameriana y mandarina Cleopatra Citrus rehsni Hort ex Tan a Espa a M xico y Hait Lecha ef a 2006 Revista CitriFrut Vol 24 No 2 2007 Los esfuerzos realizados tanto en el perfeccionamiento de la t cnica de MIV como en la destreza del personal y en el desarrollo de nuevas t cnicas de diagn stico de las enfermedades trasmisibles por injerto han contribuido a que los resultados hayan ido en ascenso en cuanto al logro de microinjertos exitosos Tabla a la disminuci n del tiempo para obtener una planta certificada desde 30 meses en la primera etapa 23 24 meses cuando se aplic el reinjerto hasta 14 16 meses actualmente coincidiendo con Navarro efa 2002 Este per odo puede prolongarse unos 6 meses m s si la certificaci n de cachexia se realiza por ensayos biol gicos con la mandarina Parson s Special P rez ef al 2002 2007 a
8. guez 1993 Primeros resultados en el microinjerto n vitrode Persea ameri cana Mill 3er Coloquio Intern de Biotecnolog a de las Plantas Villa Clara Cuba Gonz lez M Pe a J Gonz lez Rodr guez y V Zamora 1977a Eliminaci n del viroide de la exocortis en plantas de tangelo Ugly por injerto n vitro de pices de brotes V Reuni n Nacional de Invest de C tricos y otros Frutales Tomo Il 29 36 Jag ey Grande Matanzas Cuba Gonz lez M Pe a J Gonz lez V Zamora el Rodr guez 1977b Introducci n en Cuba del injerto n vitro de pices de brotes en el g nero Citrus y g neros afines como una forma de obtener plantas libres de virus Agrotecnia de Cuba 9 2 61 71 Gonz lez M Pe a e l Rodr guez 1980a Influencia de patrones y medios nutritivos sobre el prendimiento y desarrollo jn vitro de injerto de pices para la obtenci n de plantas libres del viroide de la exocortis a partir de un clon de Citrus limon infestado Agrotecnia de Cuba 12 6 67 76 Gonz lez M J Gonz lez Pe a V Zamora e Rodr guez 1980b La t cnica de microinjerto jn vitro como m todo de obtenci n de plantas libres de virus y o afines en el g nero Citrus Su introduc ci n y desarrollo en nuestro pa s Informe del quinquenio 76 80 Tema 09 72p Gonz lez M e l Pe a 1981 Influencia de los cotiledones sobre el prendimiento y desarrollo de microinjertos n vitro Memorias Con greso Naci
9. se estudi el efecto de dife rentes especies utilizadas como patrones las condi ciones de cultivo y la edad ptima de estos para reali zar los microinjertos En los trabajos iniciales solamente se utilizaron patro nestrifoliados Gonz lez efa 1977a 1977b y poste Fig 1 Microinjerto jn vitro Corte lateral en forma de ventana triangular con el pice implantado A y pice en crecimiento B Citrifrut 27 Zamora V etal Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba riormente para el saneamiento del cultivar de limonero L 1 Citrus limon L Burm Gonz lez efa 1980a se utilizaron adem s del citrange Troyer Citrus sinensis L Osb x Poncirus trifoliata L Raf pl ntulas de na ranjo agrio Citrus aurantium L y Citrus macrophylla Wester El prendimiento efectivo con crecimiento ob tenido fue de 17 5 para el agrio y el citrange Troyer mientras que ascendi a 45 con C macrophylla Cuando se utiliz este mismo patr n para el saneamien to de lima Persa Citrus latifolia Tan el promedio de prendimiento alcanz el 70 Gonz lez y Pe a 1981 Posteriormente se evaluaron el Poncirus trifoliata y al gunos de sus h bridos como los citrumelos Swingle y 1452 Citrus paradisi Macf x Poncirus trifoliata L Raf el Citrandarin Citrus reticulata Blanco x Poncirus trifoliata L Raf y el citrange Troyer en el saneamiento de naranja dulce Madame Vinous y mandarina Parson
10. utiliza en el pa s Ha permitido adem s que se disponga de una colecci n de cultivares y patrones de c tricos y g neros afines de 149 accesiones Anexo 1 certificada como libre de enfermedades transmisibles por injertos y ubicada en el Banco de GermoplasmaProtegi do Zamora ef a l 2005 La compleja situaci n fitosanitaria de las Am ricas implica la impostergable implementaci nde los sistemas de certificaci ndel ma terial de propagaci n en los cuales Cuba tiene una am pliaexperienciade trabajo y puede brindarapoyo a otros pa ses como se ha ido efectuando hasta la fecha BIBLIOGRAF A Biricolti S and A Chiari 1994 Meristem culture and micrografting of Passiflora edulis f edulis Adv Hort Sc 8 3 171 175 Bitters W P T Murashige T S Rangan E Nauer C N Roistacher and P B Holliday 1972 Healthy trees from the testtubes Citrograph 85 86 105 De Almeida Lima A and M A Pinto da Cunha 2004 Maracuj Produ o e Qualidade na Passicultura EMBRAPA Mandioca e Fruticultura Cruz das Almas Brasil 396 p De Lange J H 1978 Shoot tip grafting A modified procedure 7he Citrus and Subtropical Fruit Journa 13 15 Oct Fari as M E M Gonz lez V Zamora F Vigaud y T Rodr guez 1992 Primeros resultados en el microinjerto n vitro de Psidium guajava L III Taller de Fisiopatolog a Vegetal INIFAT Cuba 32 CitrifFrut Fari as M E M Gonz lez V Zamora F Vigaud y T Rodr
11. 2 patrones sin cotiledones Fig 3 Influencia de los medios de siembra de patrones y de cultivo de plantas microinjertadas y de la presencia o no de cotiledones en el porcentaje de microinjertos exitosos y el desarrollo de las plantas Tiempo de permanencia n vitro y del trasplante a tierra Se realizaron ensayos para determinar el per o do de permanencia n vitro de las plantas microinjertadas Los resultados mostraron que en los per odos de cultivo de 90 150 d as el porciento de supervivencia de las plan tas fue de 61 mientras que cuando este se redujo entre 30 60 d as la supervivencia fue de 92 Fueron evaluados per odos entre 2 y 8 semanas para la adaptaci n de las plantas microinjertadas a las condi ciones ambientales de cultivo alcanz ndose en general un 90 de supervivencia en todos los casos por lo que adopt el tiempo de 2 semanas como el m s adecuado Gonz lez efa 1977a 19977b 1980b A finales de 1974 se logr la supervivencia al trasplante a tierra de las primeras plantas obtenidas por esta t cni ca en nuestro pa s Gonz lez eta 1977a 1977b Los resultados establecidos hasta ese momento permitie ron obtener plantas de varios cultivares que portaban originalmente diferentes enfermedades de tipo viral y de las cuales resultaron liberadas como se comprob pos teriormente mediante los diagn sticos biol gicos efec tuados a las mismas P rez ef a 1980 Matos ef al 1981 P rez y Mato
12. ICACI N PTOPTa ma Saneamiento 4 promeno promeno gador Cuarentena har e e Muttiplicador comercia comercia Fig 5 Esquema del Sistema de Producci n de Material de Propagaci n Certificado de C tricos en Cuba B G P Banco de Germoplasma Protegido P E A Parcela de Evaluaci n Agron mica C B P S Campo B sico de Producci n de Semillas C R P S Campo Registrado de Producci n de Semillas 30 C trifFrut variedades comerciales fundamentales el Vivero Pro pagador y el Vivero Multiplicador fueron establecidos en aisladores de malla anti fidos en la Unidad Cient fi co Tecnol gica de Base de Alqu zar de la provincia de La Habana Como medida preventiva ante una posible infecci n por CTV las variedades comerciales utiliza das en el pa s fueron procesadas mediante la t cnica de MIV y certificadas nuevamente Las yemas certificadas producidas en este sistema se emplean para establecer los 6 viveros Multiplicadores protegidos en las principales Empresas del pa s Victoria de Gir n en Jag ey Grande y Ceballos en Ciego de Avila con una producci n anual aproximada de 300 000 yemas Ceiba del Agua alrededor de 100 000 Contramaestre 50 000 Banes 40 000 e Isla de la Juventud 20 25 000 Para fortalecer la protecci n del material de siembra los viveros comerciales de las Empresas de Jag ey Grande Ceiba del Agua y Contramaestre se establecieron en instalaciones cubiertas con tela anti
13. Zamora V etal Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba Victoria Zamora Mar a Gonz lez In s Pe a B rzaga y Juana Mar a P rez Castro Instituto de Investigaciones en Fruticultura Tropical Ave 7 No 3005 e 30 y 32 Miramar Playa La Habana Cuba Email victoriazamora iift cu RESUMEN La t cnica de microinjerto n vitro de pices caulinares en el cultivo de los c tricos se desarroll como consecuencia de las dificultades que presentaban las otras formas de saneamiento para la obtenci n de plantas libres de enfermedades transmisibles por injerto En Cuba se comenzaron los primeros ensayos para el establecimiento de la t cnica en 1973 y en 1977 se informaron los primeros resultados y los cultivares saneados En este trabajo se describe el desarrollo de este procedimiento y su aplicaci n en el programa de producci n de material de propagaci n certificado de c tricos durante tres d cadas En el per odo de estandarizaci n se increment el n mero de injertos exitosos mediante la realizaci n de un corte lateral en la pl ntula patr n para la implantaci n del pice a injertar Otro resultado importante fue la introducci n del reinjerto de las plantas microinjertadas en patrones vigorosos cultivados en mace tas Esto permiti acelerar el desarrollo vegetativo de las plantas para la certificaci n de su estado sanitario el que se realiza me
14. a s por Mas efa 1989 1991 Las introduc ciones de nuevas especies y variedades c tricas se han realizado desde Francia Estados Unidos California y Florida Jamaica y Viet Nam pero en mayor cuant a proceden de las colecciones de Espa a Zamora etal 1995b 1997 2005 En 1987 se procedi al saneamiento de 18 cultivares in cluidos en el Programa de Mejoramiento para la produc ci n de material de propagaci n certificado de c tricos UNECIT 1987 Estos cultivares incluyeron 3 pomelos 8 naranjasdulces 4 mandarinase h bridos 2 limas cidas y un lim n cuyo proceso de saneamiento concluy en 1990 Gonz lez ef a 1990a y P rez etal 1989 En el 2006 Zamora ef al revisaron y actualizaron una metodolog a detallada sobre la t cnica de microinjerto que recog a la experiencia acumulada en el desarrollo de estostrabajosa partirde una preliminarelaboradaen 1990 por Gonz lez ef a 1990b Con la detecci n en Cuba del Virus de la tristeza de los c tricos y el Toxoptera citricida Kirk en 1993 se inici un fuertetrabajo de perfeccionamientodel Sistema de Pro ducci n de Material de Propagaci n Certificadode C tri cos Fig 5 incluyendo la elaboraci n del documento rector IIFT 1996 en el que la t cnica de MIV constitu ye la base fundamental Cada componente del Sistema tales como el Banco de Germoplasma Protegido de los cultivares saneados el Bloque de Fundaci n con las PROGRAMA DE CERTIF
15. diante pruebas biol gicas an lisis electrofor ticos t cnicas inmunoenzim ticas y m todos moleculares La aplicaci n de esta t cnica en los Programas de saneamiento y de Cuarentena en Cuba ha permitido la recuperaci n de los recursos fitogen ticos nacionales y la introducci n de especies y variedades de inter s comercial Debido a este trabajo la colecci n del material saneado del pa s cuenta con 149 accesiones disponibles en el Banco de Germoplasma Protegido como base para el Sistema de Producci n de Material de Propagaci n Certificado de C tricos Palabras clave microinjerto jn vitro saneamiento c tricos certificaci n ABSTRACT The shoot tip grafting n vi rotechnique was developed as a consequence of the difficulties that presented the other forms of sanitation to obtain plants free of graft transmissible diseases in the citrus crop The first experiments for the establishment of this technique started in Cuba in 1973 and the first results obtaining healthy cultivars were reported in 1977 The development of this procedure and its application in the production program of citrus certified propagation material during three decades are described in this paper During the standarization period the number of successful grafts was increased by means of a lateral cut in the rootstock plantlet for the implantation of the shoot tip to be grafted Another importantresult was the introduction of the regrafting of the micrografted plants
16. erial de propaga ci n de los cultivares en producci n En este per odo se realiz la introducci n de cultivares certificados desde California en 1969 y se estableci la Estaci n de Virolog a de losAgrios posteriormentellamada Estaci n Nacional 26 C itrifrut de Sanidad de C tricos ENSAC Los objetivosprincipa les de esta estaci n fueron el desarrollo de m todos de diagn stico la determinaci nde las enfermedades pre sentesen las plantaciones la selecci nde plantaslibres de enfermedadesde tipo viral y el establecimientode los m todos de obtenci n de plantas sanas La t cnica de microinjerto n vitro de pices caulinares MIV surgi como consecuencia de las dificultades e inconvenientes que presentaban otros m todos de ob tenci n de plantas libres de enfermedades transmisi bles por injertos en los c tricos tales como la selecci n y an lisis de viejos clones existentes la termoterapia la selecci n de progenies nucelares o el cultivo de nucelos vulos y pices n vitro Esta t cnica fue des crita por primera vez en 1972 por Murashige ef al y por Bitters efa M s tarde Navarro etal 1975 publi caron los resultadosde ampliosestudiosen que evalua ron diferentes variables y establecieron las condiciones ptimas para su realizaci n Hasta el momento es la t cnica m s efectiva desde el punto de vista sanitario para la eliminaci n de todos los pat genos transmisibles por injerto en
17. ge etal 1972 Navarro ef al 1975 Gonz lez efa 1977b 1980a Se observ una relaci n inversa entre el prendimiento efectivo y la concentraci n de sacarosa en el medio de siembra ya que los mejores resultados se obtuvieron con la adici n de 309 l Para las plantas microinjertadas las dos concentracionesutilizadasfueron favorables Gonz lez et al 1980b Las plantas microinjertadas crecieron adecuadamente cuando se sembraron y cultivaron en el medio de MS lo que indica que el mismo posee un nivel de nutrientes que compensa la ausencia de cotiledones en esta etapa de desarrollo de las plantas Gonz lez ef a 1980a Fig 3 1007 m M Parson s Special E N Madam Vinous M Parson s Special Microinjerto exitoso Madame Vinous C Swingle C 1452 P trifoliata Patrones 90 4 80 4 704 60 4 50 4 404 30 4 20 4 10 1 m Citrandarin C Troyer Fig 2 Porcentaje de microinjertos n vitro exitosos de mandarina Parson s Special y naranja Madam Vinous con diferentes patrones trifoliados 28 Citrifrut Revista CitriFrut Vol 24 No 2 2007 Microinjertos exitosos ALLLLEELE 15740 N d El RHDH 2H3 45 Medios de cultivo G cultivo patrones C cultivo plantas MIV A medio agar H medio Hoagland M medio Murashige y Skoog 1 patrones con cotiledones
18. getal en Pastos C tricos y Ca a de Az car Indio Hatuey Matanzas Cuba Zamora V M Gonz lez Pe a J M P rez T Rodr guez M L pez y M del C Torres 1997 Establecimiento del Banco de Germoplasma Protegido de especies y variedades de c tricos cer tificadas Tercer Seminario Cient fico Internacional de Sanidad Ve getal Ciudad de La Habana Cuba Zamora V Pe a y A R os 2005 El saneamiento de cultivares c tricos mediante la t cnica de microinjerto jn vitro de pices caulinares C TRIFRUT 22 1 2 y 3 45 47 Zamora V I Pe a M Gonz lez y J Gonz lez 2006 Metodolog a paralat cnicade microinjertode pices caulinares n vitro IFT Cuba Citrifrut 33 Zamora V etal Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba Anexo 1 Accesiones de la Colecci n del Banco de Germoplasma Protegido Pomelos Pummelos H bridos Pomelo Ruby Red sel V Alonso Pomelo Star Ruby Pomelo Ruby selec Pomelo Ruby selec Pomelo Ruby selec Pomelo Ruby selec Pomelo Ruby selec 17 Pomelo Ruby Mejorada Pomelo Henderson IVIA 290 C 2 Pomelo Ray Ruby IVIA 291 C 1 Pomelo Rio Red IVIA 289 C 4 Pomelo Marsh Jibarito Pomelo Frost Marsh Pomelo Marsh JBC 430 Pomelo Duncan Pomelo Thompson Pomelo Thompson selec 3 Pomelo Red Mexican Pomelo Shambar Pomelo Marsh selec Pomelo Marsh selec Pomelo Marsh selec Pomelo Marsh selec OAN 00 YO Naranjas dulces Naranja Valenc
19. ia Criolla selec 14 Naranja Valencia 121 selec 18 Naranja Bayate Valencia selec 17 Naranja Valencia ENMC 27 Naranja Olinda Valencia Naranja Campbell Valencia Naranja Valencia de Contramaestre Naranja Valencia sel Cuba 1 Naranja China 2 Naranja Hamlin Naranja Victoria Naranja Salustiana Naranja Madame Vinous Naranja Navel Temprana 886 Naranja Pineapple Naranja Berna IVIA 43 1 Naranja Navelina IVIA 7 5 Naranja Valencia Temprana IVIA 25 1 Naranja Bonanza IVIA 67 4 Naranja Sucre a IVIA 32 7 Naranja Newhall IVIA 55 1 34 C itrifrut 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 Pomelo Marsh selec 10 Pomelo Marsh selec 11 Pomelo Marsh selec 12 Pomelo Marsh selec 13 Pomelo Marsh selec 14 Pomelo Marsh selec 15 Pomelo Marsh selec 16 Pomelo Marsh selec 18 Pomelo Marsh selec 19 Pomelo Marsh selec 20 Pomelo Marsh selec 21 Pomelo Marsh selec 22 Toronja Ho Chi Minh H brido Jag ey 95 Orangelo Chironja Agrionja Gran Tierra 4 Naranja Boba Pomelo Henderson IVIA 290 C 2 Colecci n J 10 Pomelo Ray Ruby IVIA 291 C 1 Colecci n J 10 Pomelo Rio Red IVIA 289 C 4 Colecci n J 10 Pomelo Ruby Red 43 Pomelo Ruby Red 19 5 Naranja Salustiana IVIA 125 3 Naranja Navelate IVIA 2 7 Naranja Lane Late IVIA 198 C 1 Naranja Fisher IVIA 199 C 1 Naranja Fisher Naranja San Miguel
20. in vigorous rootstocks cultured in pots This has permitted to accelerate the vegetative developmentfor the certification of its sanitary status which is carried out with biological tests electophoretic analysis immunoenzymatic techniques and molecular methods The application of this technique in sanitation and quarantine programs in Cuba has allowed the recovering of the national phytogenetic resources and the introduction of species and varieties of commercial interest Due to this work the collection of healthy plants in the country counts with 149 accessions available atthe Protected GermplasmBank as the basis forthe Production System of Citrus Certified Budwood Key words shoot tip grafting n vitro sanitation citrus certification INTRODUCCI N Las enfermedades causadas por virus viroides bacte rias y fitoplasmas presentes en las plantas de c tricos ocasionan importantes p rdidas econ micas Estos pat genos influyen de forma determinante en la pro ducci n y vigor de las plantas calidad de las frutas limitan el uso de varios patrones y pueden ocasionar la muerte de las mismas Para su control es imprescindi ble utilizar material de propagaci n certificado gen tica y sanitariamente que garantice rboles de alto poten cial productivo disminuir los da os y lograr plantacio nes con elevada producci n y de buena calidad Desde finales de la d cada del 60 se iniciaronlostraba jos en Cuba con vistas a mejorar el mat
21. l Plant 15 473 497 Murashige T W P Bitters E M Rangan E M Nauer C N Roistacher and P B Holliday 1972 A technique of shoot apex grafting and its utilization towards recovering virus free Citrus clones Hort Science 7 118 119 Navarro L C N Roistacher and T Murashige 1975 Improvement of shoot tip grafting n vitro for virus free Citrus J Amer Soc Hortic Sci 100 471 479 Navarro L and J Ju rez 1977 Elimination of citrus pathogens in propagative budwood Il In vitro propagation Proc Int Soc Citriculture 3 973 981 Navarro L J Ju rez J A Pina y J F Ballester 1984 The citrus quarantine station in Spain Proc 9 Conf IOCV 365 370 Riverside California Navarro L 1988 Application of Shoot tip Grafting in Vitro to Woody Species Acta Horticulturae 227 43 55 Navarro L 1993 Citrus Sanitation Quarantine and Certification Programs In Proc 12 Conf IOCV 383 391 IOCV Riverside California Navarro L J A Pina J Ju rez J F Ballester Olmos J M Arregui C Ortega A Navarro N Duran Vila J Guerra P Moreno M Cambra A Medina and S Zaragoza 2002 The Citrus Variety Improvement Program in Spain in the Period 1975 2001 In Proc 15 Conf IOCV 306 315 IOCV Riverside California Pe a l M Gonz lez N Matos y F Doval 1982 Efecto del calor ante el virus parecido al crinkly leaf de los c tricos II Jornada Cientifico T cnica del Inst Invest
22. o Se evaluarontres ti pos de cortes en el patr n para la implantaci n de los pices sobre el epicotilodecapitado y lateralesenforma de muesca o de ventana triangular Este aspecto fue el de mayor influencia sobre el prendimiento y desarrollo de los microinjertos De los tipos de corte evaluados los mejores resultados se lograron con los de tipo lateral y se escogi una ventana triangular a 2mm aproximada mente del extremo del epicotilo decapitado del patr n Gonz lez eta 1977b la que por sus buenos resulta dos se contin an utilizando hasta el presente Fig 1 Fuentes de brotes y tama o del pice Se evalu el efecto de las fuentes de brotes a partir de cultivares infectados artificialmente material procedente de r boles de campo o de reproducciones de ellos cultiva das en macetas De estas plantas se colectaron los brotes de hasta 3cm de longitud que constituyeron las fuentes de los pices que se insertaron con tama os de 0 2 0 5mm La procedencia de los brotes para obte ner los pices no incidi en la frecuencia de microinjertos exitosos como tampoco influy el tama o del pice implantado sin embargo este factor si incidi en el sa neamiento de las plantas obtenidas Para garantizar el estado sanitario de las mismas se estableci un tama o de pices entre 0 1 0 2mm lo que permite resulta dos satisfactoriosen el prendimiento y en el saneamien to Gonz lez ef al 1977b Patrones En este aspecto
23. onal de C tricos y otros Frutales Tomo l 241 256 Palacio de las Convenciones Ciudad de La Habana Cuba Gonz lez M Pe a y J M P rez 1983 Obtenci n de plantas de toronja Ruby C paradisi Macf liberadas de exocortis por microinjertaci n in vitro Cienc Tec Agric C tricos y otros Fruta les 6 4 125 130 Gonz lez M y F Vigaud 1987a Algunos aspectos del cultivo jn vitro de v stagos de c tricos y su aplicaci n a un sistema de cua rentena Il Jornada Cient fico T cnica de Sanidad Vegetal Ciudad de La Habana Cuba Gonz lez M 1987b Importancia de la t cnica de microinjerto jn vitro en un programa de saneamiento y un sistema de cuarentena para c tricos Ciencia y T cnica en la Agric C tricos y otros Frutales 10 2 37 45 Gonz lez M V Zamora F Vigaud y T Rodr guez 1989 Reduc ci n del tiempo de saneamiento de cultivares de c tricos mediante el reinjerto n vivo de las plantas obtenidas por microinjerto n vitro Simposio XX Aniversario de la ENSAC Ciudad de La Habana Cuba Gonz lez M Pe a J Gonz lez V Zamora Rodr guez F Vigaud y T Rodr guez 1990a Establecimiento desarrollo y aplicaci n de la t cnica de microinjerto n vitro en Cuba II Seminario Internacional de Sanidad Vegetal Cuba Gonz lez M Pe a J Gonz lez V Zamora y F Vigaud 1990b Metodolog a para la t cnica de microinjerto de pices caulinares n vitro y su utilizaci
24. osos de 6 u 8 meses El ensayo se reali z en el proceso de saneamiento de 22 selecciones de pomelos Marsh Ruby y Thompson Citrus paradisi Macf procedentes de la Isla de la Juventud La super vivencia con el reinjerto fue de 67 algo menor que la obtenida con el trasplante tradicional 84 Sin embar go esta diferencia se compens con la mayor velocidad de crecimiento la calidad y cantidad del material de pro pagaci n que se puede obtener en pocos meses Las plantas reinjertadas estuvieron listas para propagar y certificarseis meses antes que con el trasplanteen nues tras condiciones Gonz lez ef a 1989 Actualmente la supervivencia de los reinjertos alcanza m s del 95 de las plantas resultados similares a los obtenidos por Navarro ef al 2002 Fig 4 Citrifrut 29 Zamora V etal Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba B Fig 4 Variantes del paso a condiciones ambientales de las plantas microinjertadas A Trasplantedirecto B Reinjerto Se evalu el cultivo n vitro de varetas para fuentes de pices de acuerdo a la metodolog a de Navarro ef al 1984 como una alternativa segura para la introduc ci n de germoplasma for neo Con este procedimiento se reducen los riesgos de introducir al pa s pat genos que pueden estar presentes en el material importado Gonz lez y Vigaud 1987 Gonz lez 1987 1990b Otros aspectos de este procedimiento fueron evaluados en nuestro p
25. rtanique 28 Tangor Ortanique selec ENF 29 Tangor Clemelina 30 Tangor Valentina 31 Mandarina Willowleaf Patrones 1 Naranjo agrio Gou Tou 2 Sunki x Flying Dragon SS1 131 20 3 Citrumelo F 80 18 4 Citrumelo Swingle 5 Citrange C 35 6 Citrange Troyer 7 Citrange Carrizo 8 Citrus macrophylla 9 Citrus volkameriana 10 Mandarina Cleopatra 11 Citrus amblycarpa 12 Naranjo agrio de hoja fina 13 Cleopatra X Poncirus 1532 14 Poncirus trifoliata Rubidoux 15 Naranjo agrio 1 16 Flying dragon Otros 1 Citropsis gilletiana a CALIDAD al servicio de nuestros clientes El Comit T cnico de Normalizaci n de Frutas y Ve getales Frescos CTN No 54 tiene su sede en el Insti tuto de Investigaciones en Fruticultura Tropical con la participaci n de 28 entidades relacionadas con el sector hortofrut cola con el objetivo de elaborar Nor mas Cubanas NC regulatorias que amparen la acti vidad comercial del pa s Se encuentran elaboradas Normas de Especificacionesde calidad de los siguien tes productos NC 225 02 Ajo NC 226 02 Cebolla CONT CTENOS NC 131 01 Tomate NC 223 02 C tricos NC 224 02 Mango NC 340 04 Guayaba NC 356 04 Semilla de C tricos certificada Otras NC que se relacionan con Frutas y Hortalizas Muestreo NC 874 03 Determinaci n de S lidos Solubles Totales NC ISO 2173 01 y de Ac dez NC ISO 750 01 Email calidadOiift cu Citrifrut 35
26. s como por la eficiencia del saneamiento que se increment de 90 4 en la etapa de establecimiento a 99 6 en la etapa actual La experiencia cubana con esta t cnica ha permitido la difusi n de los conocimientos a especialistas de dife rentes pa ses del rea Se han brindado asesor as o entrenamientos a especialistas nacionales y de M xi co Honduras Rep blica Dominicana Viet Nam y Do minica Especialmente importante ha sido el trabajo desarrollado en cuanto a entrenamiento de personal el establecimiento de un programa de producci n de ma terial de propagaci n certificado y el saneamiento de cultivares nacionales y for neos desarrollado en Veracruz M xico con la Empresa PROCIGO Otras formas de transmisi n de los conocimientos han sido por medio de conferencias y clases pr cticas en cursos de Citricultura Maestr as cursos a productores y viveristas as como a estudiantes del ISCAH y la Facultad de Bio log a de la Universidad de La Habana Tabla Porcentaje de microinjertos exitosos de un grupo de accesiones saneadas a partir de la d cada del 90 N mero de accesiones Grupos prendimiento presos total crecimiento del total Pomelos 67 99 40 27 Naranjas 67 41 48 74 Mandarinas Limas Limones Cidras Patrones Otros Citrifrut 31 Zamora V etal Tres d cadas del saneamiento de cultivares de c tricos en Cuba Otro re
27. s 1982 Esta etapa de establecimiento de la t cnica de MIV permiti de forma paralela obtener plantas saneadas a partir de material infectado La exocortis se elimin en el 89 5 la xiloporosis en el 74 y la psorosis se elimin de una sola planta obtenida por MIV a partir de una portadora inoculada La tristeza no fue detectada en ninguna de las plantas originales Gonz lez ef al 1977b 1980a 1980b 1983 Matos efa 1981 Pe a ef al 1983 La nica enfermedad transmisible por injerto no eliminada con esta t cnica fue el denominado virus parecido al crinkly leaf v p c l detectado en nuestro pa s P rez ef al 1977 No obstante la combinaci n de la termoterapia con el MIV permiti obtener resultados satis factorios en la eliminaci n de esta patolog a Pe a etal 1982 DESARROLLO Y APLICACI N DE LA T CNICA DE MIV En la d cada del 80 se continu trabajando en el perfec cionamiento del MIV para su aplicaci n en el programa de saneamiento de cultivares nacionales y el programa de cuarentena para la diversificaci n de los cultivares del pa s Las plantas obtenidas por MIV durante los meses pos teriores al trasplante a tierra poseen un lento desarrollo lo que ocasiona retraso para realizar los an lisis de diagn stico y comprobar su estado sanitario Para redu cir esta etapa se prob la variante propuesta por De Lange 1978 consistente en el reinjerto de dichas plantas en patrones vigor
28. sultado de la aplicaci n de la t cnica de MIV fue la separaci n de pat genos en infecciones mixtas pre sentes en el material original El denominado v p c l y l neas o componentes de este complejo fueron separa das de la infecci n por viroides de las fuentes originales Gonz lez ef a 1977b y P rez ef al 1981 En 1995 P rez efa corroboraronesta posibilidad al lograrla se paraci n de los viroides de la exocortis y la caquexia en plantas microinjertadasde mandarina Parson s Special Es necesario destacar la aplicaci n de esta t cnica en investigaciones con frutales no c tricos como la guaya ba y el aguacate Fari as ef a 1992 1993 El dominio de la t cnica en sus diferentes fases permite aplicarla para el saneamientode otrasespeciesde frutalescomo melocot n albaricoque ciruelo pistacho manzana uva fresa y maracuy entre otras Navarro 1988 De Almeida Lima y Pinto da Cunha 2004 Biricolti y Chiari 1994 Teniendo en cuenta todos estos a os de trabajo es de destacar que el esfuerzo realizado ha permitido que Cuba se encuentre entre los pa ses productores de c tricos que cuentan con un Sistema de Producci n de Material de Propagaci n Certificado tales como Espa a Esta dos Unidos Brasil Argentina y Sud frica entre otros Este Sistema est establecido con las t cnicas adecua das y el personal calificado necesarios para su funcio namiento y garantiza todo el material de propagaci n que se
Download Pdf Manuals
Related Search