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DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS

1. Peso vivo y ganancias de peso Las diferencias en el peso vivo ocurrieron s lo entre los tratamientos P lt 0 01 Al finalizar el experimento los corderos que recibieron 25 y 100 larvas tuvieron mayor peso vivo 30 0 kg en ambos que los cor deros infectados con 50 larvas los cuales E 25 Larvas 100 Larvas AA Pastoreo Estabulaci n Etapas y d as por etapa FIGURA 2 Volumen celular aglomerado VCA de borregos de la cruza Katahdin x Pelibuey infectados con nematodos gastrointestinales 176 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N tuvieron el menor peso final 25 2 kg Tal como se esperaba el grupo de corderos sin infecci n tuvieron al final del experimento el mayor peso vivo 32 20 kg Tabla 3 Las ganancias de peso fueron mayores en los corderos sin infecci n en las tres etapas del experimento Tabla 3 Durante la primera etapa de infecci n experimental se not una disminuci n en el peso ganado kg de 22 en los corderos infectados con 25 larvas 60 en los infectados con 50 larvas y 61 en los animales infectados con 100 larvas En la tercera etapa el grupo de 100 L tuvo las mayores ganancias de peso Tabla 4 En cada una de las etapas el mayor peso correspondi a los corderos estabulados sin infecci n mientras que en los animales infectados aquellos que recibieron 50 L PV tuvieron el menor crecimie
2. Importancia del parasitismo gastrointestinal en ovinos y situaci n actual de la resistencia antihelm ntica en M xico En Gonz lez Gardu o R Berumen AAC editores Avances en el control de la parasitosis gastroin testinal de ovinos en el tr pico Universidad Aut noma Chapingo M xico p 1 11 Alba Hurtado F Mu oz Guzm n MA 2013 Immune responses associated with resistance to haemonchosis in sheep BioMed Res Intern 2013 1 11 DOI 10 1155 2013 162158 Aoac Association of Official Analytical Chemists 2005 Official Methods of Analysis 18th ed Washington Aoac Chapter 4 p 1 65 Balic A Bowles VM Meeusen ENT 2002 Me chanisms of immunity to Haemonchus con tortus infection in sheep Parasite Immunol 24 1 39 46 Baker RL 1995 Genetics of disease resistance in small ruminants in Africa En Gray GD Woolaston RR Eaton BT editores Breeding for resistance to infectious diseases of small ruminants ACIAR Monograph No 34 Cam berra Australia p 120 128 Benjamin MM 1991 Manual de patolog a cl nica en veterinaria M xico D F Limusa p 7 20 87 94 Bouix J Krupinski J Rzepecki R Nowosad B 1998 Genetic resistance to gastrointestinal INVESTIGACI N nematode parasites in Polish long wool sheep Int J Parasitol 28 11 1797 1804 Burke JM Miller JE 2004 Relative resistance to gastrointestinal nematode parasites in Dor per Katahdin and St Croix lambs under conditions encountered in
3. N TABLA 1 Cuadrados medios para las variables huevos de nematodos por gramo de heces HPG volumen celular aglomerado VCA peso vivo PV y ganancia diaria de peso GDP HPG VCA PV GDP Fuente de variaci n Cuadrado Cuadrado Cuadrado Cuadrado medio GI medio l medio G medio Tratamiento 3 26107183 3 0 008 3 105 3 35954 Etapa 2 47097688 2 0 005 2 2415 2 178626 Muestreo 5 11992068 3 0 017 3 14ns 4 130556 Tratamiento etapa 6 8526413 6 0 0007 6 ens 6 5806ns Tratamiento muestreo 15 2784186 9 0 001 9 Ze 12 22153 Etapa muestreo 4 8496382 2 e s 2 142095 liado 12 2885602 12 05 6 20725 etapa muestreo ns no significativo p lt 0 01 p lt 0 05 Gl Grados de libertad con 100 L PV 3 392 2 734 HPG y posteriormente se redujeron en el tiempo pero este grupo mantuvo los mayores conteos hasta el ltimo muestreo 1 642 1 183 HPG en comparaci n con los CFH con los corderos tratados con 50 L PV 1 140 1 313 HPG y 25 larvas por kg 458 371 HPG En la segunda etapa durante la infec ci n en pastoreo se observ que todos los corderos infectados en la primera etapa se mantuvieron con altos CFH a los 14 d as post infecci n 333 271 1 050 558 y 892 480 HPG respectivamente con lo cual se demuestra la baja eficiencia de levamisol ivermectina Tabla 2 TABLA 2 Porcentaje de reducci n y conteos fecales de huevos de nematodos al final de la primera etapa
4. Zajac AM 2003 Responses of hair and wool sheep to a single fixed dose of infective larvae of Haemonchus contortus Small Rumin Res 47 221 225 Papadopoulos E 2008 Anthelmintic resistance in sheep nematodes Small Rumin Res 76 99 103 Romero JR Boero CA 2001 Epidemiolog a de la gastroenteritis verminosa de los ovinos en las regiones templadas y c lidas de la Argentina Analecta Vet 21 1 21 37 SAS Institute 1999 The SAS system for Windows Version 8 Cary N C EUA SAS Institute Inc Sayers G Sweeney T 2005 Gastrointestinal ne matode infection in sheep a review of the alternatives to anthelmintics in parasite control Anim Health Res Rev 6 159 171 Smith WD Zarlenga DS 2006 Developments and hurdles in generating vaccines for controlling helminthes parasites of grazing ruminants Vet Parasitol 139 347 359 Terefe G Lacroux C Andreoletti O Grisez C Prevot E Bergeaud JP Penicaud J Rouillon V Gruner L Brunel JC Francois D Bouix J Dorchies P Jacquiet P 2007 Immune response Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 to Haemonchus contortus infection in susceptible INRA 401 and resistant Barbados Black Belly breeds of lambs Parasite Immunol 29 415 424 Thienpont D Rochette F VanParijs OFJ 1986 Diagn stico de las hemintiasis por medio del examen coprol gico 2 edici n Beerse B l gica Ed Janssen Research Foundation 205 p Torres VP Prada SGA M rqu
5. 29 4 3 1 2 8 114 3 25 6 30 0 3 1 21 7 3 6 2 3 16 8 104 22b0 50 5 25 22 7 9 24 6 7 0 0 6 78 6 29 050 100 6 30 0 4 1 26 3 4 6 3 7 32 1 129 3 Letras diferentes en cada etapa entre peso inicial y final son significativas P lt 0 05 3 Cambio de peso respecto al grupo testigo en cada etapa Y Se mantuvieron en estabulaci n D E Desviaci n est ndar ESTEBAN ANDR S T AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 177 Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 INVESTIGACI N 32 gt e 0 Larvas 25 Larvas 50 larvas gt 100 Larvas 30 y 28 pad S ES a 24 4 s 22 20 1 21 42 14 28 1 21 Infecci n Pastoreo Estabulaci n Etapas y d as por etapa FIGURA 3 Peso vivo de corderos Katahdin x Pelibuey infectados con nematodos gastrointestinales larvas infectantes 100 L PV lo cual se atribuye a que tiene lugar una adaptaci n inmunol gica que permite una reducci n en la tasa de ovoposici n o bien la expul si n de los nematodos gastrointestinales con que se infectaron los animales Terefe et al 2007 Durante la primera etapa se pudo observar un periodo pre patente de 15 d as Sin embargo en la segunda etapa de infecci n en pastoreo no fue posible discriminar el periodo pre patente porque los conteos fecales de huevos de NGI no se redujeron postdesparasitaci n debido a la baja efectividad de
6. Drug resistance in veterinary helminthes Trends Parasitol 20 469 476 Citation Esteban Andr s D Gonz lez Gardu o R Garduza Arias G Ojeda Robertos NJ Reyes Montes F Guti rrez Cruz S 2013 Desarrollo de resistencia a nematodos gastrointes tinales en ovinos de pelo desafiados con diferentes niveles de infecci n Development of resistance to gastrointestinal nematode in hair sheep challenged with different levels of infection Rev Fac Med Vet Zoot 62 3 169 181 ESTEBAN ANDR S ET AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 181
7. cenizas valores obtenidos mediante la metodolog a indicada la AOAC 2005 la materia org nica MO 94 5 0 9 se obtuvo por la diferencia de 100 ce nizas La fibra en detergente neutro 37 1 2 5 la fibra en detergente cido 19 2 8 y la hemicelulosa 18 1 2 2 se obtuvieron mediante la metodolog a de Van Soest et al 1991 Los corderos se pesaron en los d as 21 36 y 42 postinfecci n Durante esta etapa los conteos fecales de huevos de nematodos N del E Suplemento nutricional de sencilla elaboraci n derivado de mezclar proporciones establecidas de ca a de az car madura y picada urea y sales mineralizadas lo cual se somete a fermentaci n antes de alimentar rumiantes INVESTIGACI N se determinaron a partir de los muestreos de heces realizados en los d as 14 21 28 36 y 42 postinfecci n A los 42 d as los corderos infectados fueron desparasitados simult neamente con ivermectina 0 2 mg kg PV y levamisol a la dosis alta reco mendada por el proveedor 7 5 mg kg PV ya que exist an indicios de resistencia antihelm ntica Gonz lez Gardu o et al 2010 Por otra parte se determin el volumen celular aglomerado VCA que se realiz los d as 21 y 42 postinfecci n para lo cual se extrajo sangre de la vena yugular Benjamin 1991 Despu s de la desparasitaci n se man tuvieron los corderos en estabulaci n 14 d as para su recuperaci n y llegada la segunda etapa se real
8. coordenadas 17 34 latitud Norte y 92 20 longitud Oeste El clima de la regi n es Af m w 1 g es decir c lido h medo con lluvias todo el a o la temperatura promedio anual es de 26 6 C y la precipitaci n de 3 289 1 mm Garc a 1988 Los an lisis coproparasitosc picos de las muestras y de sangre se realizaron en el laboratorio de la Unidad Regional Universitaria Sursureste URUSSE de la Universidad Aut noma Chapingo ubi cado en el Municipio de Teapa Tabasco Se utilizaron 24 corderos machos de siete meses de edad aproximadamente con un peso de 25 2 kg 4 5 Se distribuyeron seis ovinos en cuatro grupos que recibieron diferentes dosis de L como tratamientos 1 25 larvas por kg de peso vivo L PV 2 50 L PV 3 100 L PV y 4 el grupo testigo en el cual los animales no fueron infectados con larvas de nematodos Un animal del grupo testigo y otro infectado con 50 L se retiraron del experimento por problemas de salud al inicio del experimento Las larvas infectantes utilizadas se obtu vieron de coprocultivos realizados a partir de muestras fecales obtenidas de ovinos en pastoreo de la misma unidad de producci n con ocho d as de anticipaci n a la fecha de infecci n Las larvas infectantes fueron ad ministradas por v a oral de acuerdo al peso vivo de los animales En la identificaci n de las larvas Niec 1968 se observ 70 Hae monchus contortus y 30 Cooperia curticei especies tambi n
9. se le proporcionaron 3 kg por d a Los corderos se pesaron en los d as 7 13 y 21 despu s de iniciada la estabulaci n y durante estas mismas fechas se realizaron muestreos de heces directamente del recto para deter minar los conteos de HPG La determinaci n de la carga para sitaria se realiz mediante la t cnica de McMaster la cual se usa para obtener una estimaci n del n mero de huevos de nematodos gastrointestinales por gramo de heces Thienpont et al 1986 Tambi n se tomaron muestras de sangre para de terminar el volumen del paquete celular aglomerado VCA Los datos se analizaron usando el proce dimiento Mixed del SAS SAS 1999 El n mero de huevos de nematodos en heces se transform a logaritmo Log HPG 1 para homogeneizar la varianza y obtener una aproximaci n a la distribuci n nor mal Este procedimiento se ha utilizado en estudios similares Bouix et al 1998 D az et al 2000 Se utiliz el modelo de medidas re petidas en el tiempo y la separaci n de medias mediante la prueba de Duncan Y 4 D El T DL EPT DEPT C Esa NI 0 o Donde Y u variable respuesta paquete de volu men celular aglomerado huevos por gramo de heces peso vivo ganancia de peso Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 u Media poblacional D Efecto fijo del i simo tratamiento G 0 50 75 y 100 L Kg de peso vivo Et Efecto fijo de la j
10. sima etapa de evaluaci n j infecci n pastoreo y es tabulaci n T Efecto fijo del k simo muestreo k 1 2 9 D T Efecto conjunto del tratamiento y Muestreo Er T Efecto de la j sima etapa de evaluaci n y Muestreo D Et T Efecto del tratamiento la etapa de e aan y muestreo C Efecto aleatorio del l simo cordero en cada tratamiento a NI 0 o error experimental normal independiente con media cero y varianza 0 RESULTADOS La significancia de las variables estudiadas huevos de nematodos por gramo de heces HPG volumen celular aglomerado VCA peso vivo PV y ganancia diaria de peso GDP se observan en la Tabla 1 Conteo fecal de huevos de nematodos En la primera etapa la eliminaci n de huevos de nematodos inici a los 15 d as posteriores a la infecci n experimental con valores promedio de 33 HPG en el grupo de corderos tratados con 100 L PV 230 HPG en los infectados con 50 L PV y no se observaron huevos de nematodos en el grupo infectado con 25 L Fue a partir del d a 21 que se registr conteo fecal de huevos de nematodos CFH expresado como HPG en todos los animales infecta dos A los 28 d as postinfecci n los CFH fueron mayores en los ovinos infectados ESTEBAN ANDR S ET AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 173 Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 INVESTIGACI
11. 0 en los de 50 larvas y 61 en los de 100 larvas El grupo infectado con 100 larvas obtuvo durante la segunda etapa el menor HPG 2 033 2 553 HPG un incremento del VCA 27 8 y mayor ganancia de peso 3 7 kg que los otros grupos por lo que se concluye que con la dosis de 100 L se obtienen menores conteos fecales de huevos de NGI mayor VCA y mejor ganancia de peso bajo condiciones de reinfecci n en pastoreo Palabras clave Cooperia curticei Haemonchus contortus peso vivo volumen celular aglomerado DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP CHALLENGED WITH DIFFERENT LEVELS OF INFECTION ABSTRACT 24 Katahdin x Pelibuey male lambs were used The lambs were random in four groups with the following treatments a 25 infective larvae L of gastrointestinal nematodes GIN per kg of body weight BW b 50 L BW c 100 L BW and the control group 0 L The experiment was divided into three stages 1 Experimental infection in stabling 2 grazing infection and 3 housed lambs At each stage were determined the number of nematode eggs per gram of feces EPG body weight and packed cell volume PCV The Unidad Regional Universitaria Sursureste Universidad Aut noma Chapingo Km 7 carretera Teapa Vicente Guerrero Tabasco M xico Divisi n Acad mica de Ciencias Agropecuarias Universidad Ju rez Aut noma de Tabasco Km 25 carretera Villahermosa Teapa Tabasco M xico Autor para
12. INVESTIGACI N Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS DE PELO DESAFIADOS CON DIFERENTES NIVELES DE INFECCI N D Esteban Andr s R Gonz lez Gardu o G Garduza Arias N J Ojeda Robertos E Reyes Montes S Guti rrez Cruz Art culo recibido 5 de marzo de 2013 Aprobado 10 de octubre de 2013 RESUMEN Se utilizaron 24 corderos Katahdin x Pelibuey distribuidos al azar en cuatro grupos desafiados con los siguientes tratamientos a 25 larvas infectantes L de nematodos gastrointestinales NGI por kg de peso vivo PV b 50 L PV c 100 L PV y el grupo testigo 0 larvas El experimento se dividi en tres etapas 1 infecci n experimental y estabulaci n de corderos 2 reinfecci n en pastoreo y 3 estabulaci n En cada etapa se determin el n mero de huevos de nematodos por gramo de heces HPG el peso vivo PV y el volumen celular aglomerado VCA El an lisis se realiz con medidas repetidas en el tiempo Los corderos infectados con 100 L tuvieron mayor HPG 1 642 1 183 que los infectados con 50 L 1 140 1 313 HPG y los de 25 L 458 371 HPG Con 50 L los corderos tuvieron el menor VCA 23 7 4 8 Con 100 L se observ menor VCA que el grupo testigo y el de 25 L 26 2 3 9 28 0 4 1 y 27 3 4 2 respectivamente Las ganancias de peso se redujeron respecto al testigo en un 22 en los de 25 larvas 6
13. celulares desarrollados por el sistema inmune que impiden su esta blecimiento o alteran las funciones de los par sitos reduciendo la infecci n Balic ez al 2002 Por otra parte en parasitolog a la resiliencia es la capacidad de un animal para compensar los efectos negativos del parasitismo y mantener el nivel productivo Alba Hurtado y Mu oz Guzm n 2013 Dada la gran variabilidad en la elimina ci n de huevos de nematodos encontrada entre razas y dentro de razas es factible la selecci n de ovinos con resistencia gen tica a nematodos gastrointestinales por lo que un aspecto importante es conocer el nivel de infecci n ante el cual es posible determinar una respuesta adquirida en los corderos ello con el fin de seleccionarlos lo antes posible para implementar posteriormente un programa de selecci n de individuos con resistencia a nematodos gastrointestinales Por tanto este estudio se propuso como objetivo determinar el HPG VCA y peso vivo de corderos de la cruza Katahdin x Pelibuey infectados experimentalmente con diferentes dosis de larvas de nematodos gastrointestinales a fin de evaluar la respuesta de la reinfecci n natural en pastoreo MATERIALES Y M TODOS El estudio se desarroll en una unidad de producci n de ovinos con un sistema de semipastoreo en Pueblo Nuevo Municipio Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 de Salto de Agua Chiapas M xico a una altitud de 10 msnm y con
14. correspondencia robgardu hotmail com 169 Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 INVESTIGACI N data analysis was performed using a repeated measures model in time The lambs infected with 100 L had higher EPG 1642 1183 in comparison with the treatment of 50 L 1140 1313 EPG and 25 L 458 371 EPG With 50 L the lambs had the lowest PCV 23 7 4 8 With the application of 100 L also had lower PCV than control group and 25 L 26 2 3 9 28 0 4 1 and 27 3 4 2 respectively It was observed a decrease in weight gain of all infected groups compared to the control group by 22 in lambs with 25 larvae 60 in the 50 larvae and 61 in animals of 100 larvae During the second stage the group infected with 100 larvae there was a reduction of EPG 2033 2553 EPG an increase in PCV 27 8 and increased kg 3 7 kg with respect to other infected for this reason was concluding that lambs receiving 100 L3 had lowest nematode faecal egg count highest PCV and gain daily weight during the grazing reinfection Keywords Cooperia curticei Haemonchus contortus live weight packed cell volume INTRODUCCI N Los par sitos gastrointestinales son uno de los principales problemas que afectan a los ovinos en pastoreo Torres Acosta y Hoste 2008 stos originan reducci n en la productividad de los reba os en muchos pa ses principalmente los ubicados en las regiones tropicales
15. del mundo D az et al 2000 El control de los nematodos gastrointestinales NGI se ha basado en el uso de antihelm nticos desde hace muchos a os Wolstenholme et al 2004 inicialmente los resultados eran eficientes ya que con su uso se podr an obtener los m ximos valores de producci n en la industria ovina Sin embargo el uso constante de antihelm nticos ha favorecido en gran medida la aparici n y desarrollo de resistencia a estos productos Papado poulos 2008 Sayers y Sweeney 2005 Ante tal situaci n se han buscado alternativas para minimizar el impacto de los nematodos gastrointestinales y reducir las p rdidas econ micas Aguilar Caballero et al 2009 Dobson etal 2011 por lo que se han desarrollado l neas de investigaci n relacionadas con alternativas naturales para el control de NGI en ru miantes Torres et al 2007 Algunas de estas son el consumo de forrajes ricos en metabolitos secundarios procedentes de plantas con acci n antihelm ntica control biol gico de par sitos a trav s del uso de hongos suplementaci n nutricional del hospedero Krecek y Waller 2006 desarrollo de vacunas Knox et al 2003 Smith y Zarlenga 2006 y mejoramiento gen tico para la obtenci n de animales resistentes a NGI Morris et al 2000 Una soluci n que ha retomado impor tancia es utilizar la resistencia gen tica del hu sped para el control de los nematodos y en este contexto las razas ovinas de pelo en los t
16. ez LD 2007 Resis tencia antihelm ntica en los nematodos gastroin testinales del bovino Rev Med Vet 13 59 76 Torres Acosta JFJ Hoste H 2008 Alternative or improved methods to limit gastro intestinal parasitism in grazing sheep and goats Small Rumin Res 77 159 173 Torres Acosta JFJ C mara Sarmiento R P rez Cruz M Soto Barrientos N Chan P rez JI Aguilar Caballero AJ 2011 Par sitos resistentes a los desparasitantes en los reba os ovinos C mo podemos controlarlos ahora En Gonz lez GR Ber men AAC Montes de Oca R editores T pi cos selectos en producci n ovina Tabasco M xico Universidad Aut noma Chapingo p 131 141 Torres Hern ndez G Morteo G mez R 2009 Re sistencia gen tica del hospedero una herramienta m s para el control de los par sitos gastrointesti nales En Gonz lez GR Ber men AAC editores Avances en el control de la parasitosis gastroin testinal de ovinos en el tr pico Tabasco M xico Universidad Aut noma Chapingo p 93 106 Van Soest PJ Robertson JB Lewis BA 1991 Methods for dietary fibre neutral detergent fibre and non starch polysaccharides in relation to ani mal nutrition J Dairy Sci 74 10 3583 3597 Vanimisetti HB Greiner SP Zajac AM Notter DR 2004 Performance of hair sheep composite breeds Resistance of lambs to Haemonchus contortus J Anim Sci 82 595 604 Wolstenholme AJ Fairweather I Prichard Von Samson Himmelstjerna I Sangster NC 2004
17. identificadas por morfo metr a de espec menes adultos en estudios previos Gonz lez Gardu o et al 2011 Primera etapa infecci n experimental Los corderos se adquirieron a la edad de un mes postdestete cuatro meses en una ESTEBAN ANDR S ET AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 171 Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 unidad de producci n en el municipio del Centro Tabasco M xico en la cual se mantuvieron los corderos estabulados en la lactancia mientras las hembras sal an a pastoreo en el d a estos corderos se desparasitaron al momento del destete y se estabularon en jaulas elevadas Al mo mento de la compra se realiz un conteo fecal de huevos y se desparasitaron con levamisol a la dosis comercial 7 5 mg kg PV posteriormente se mantuvieron estabulados dos meses y medio hasta iniciar la primera etapa en la que los animales continuaron estabulados y alimentados con una dieta integral de saccharina enriquecida al 20 con ma z 84 ca a de az car molida 10 de ma z molido 1 de urea 4 soya 0 5 minerales 0 5 sulfato de magnesio fermentada por lo menos dos d as la cual se les proporcion a raz n de 2 kg animal d a La composici n qu mica de la dieta integral de saccharina fue 49 1 3 16 de materia seca MS 20 0 1 5 de prote na cruda PC 13 13 1 5 de prote na verdadera PV y 4 5 0 9 de
18. iz un muestreo fecal para determinar la eliminaci n de huevos de nematodos y la efectividad de los productos Segunda etapa infecci n en pastoreo Esta etapa dur 28 d as en la que los corderos salieron diariamente a pastoreo durante nueve horas en praderas de estrella de frica Cynodon plectostachyus y pasto humid cola Brachiaria humidicola en las cuales previamente hab an pastoreado ovejas en gestaci n y lactancia por lo que los potreros constituyeron el refugio de nematodos gastrointestinales Despu s del pastoreo se le proporcionaba a cada cordero 1 kg de saccharina enriquecida con 20 de ma z por d a Los corderos testigo permanecieron en estabulaci n en esta etapa alimentados con 2 kg de saccha rina Se registr el peso de los corderos y se determin la eliminaci n de HPG en los d as 1 14 y 28 postinfecci n Al inicio y al final de esta etapa se determin el VCA mediante la t cnica de micro hematocrito Benjam n 1991 172 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N Tercera etapa estabulaci n En la ltima etapa los corderos se mantu vieron en estabulaci n durante 21 d as para permitir que las L cosechadas durante el pastoreo evolucionaran a par sitos adultos y as obtener la m xima eliminaci n de HPG Durante esta etapa los corderos se alimentaron con saccharina enriquecida con 30 de ma z a cada animal
19. los antihelm nticos utilizados no obstante si fue posible com probar un incremento a los 28 d as despu s de iniciado el pastoreo segunda etapa producto de la reinfecci n en campo ya que como se ha indicado anteriormente el periodo pre patente es de cerca de 15 a 21 d as lo que origin que despu s de 21 d as de iniciado el pastoreo se incre mentaran los conteos fecales de huevos de NGI Romero y Boero 2001 La eliminaci n a los 21 d as ha coin cidido con los resultados obtenidos en un estudio desarrollado en Cuba M ndez y Cabo 1980 y en sentido general el tiempo que transcurre entre la infecci n y la eli minaci n fecal de huevos de NGI var a de tres a cuatro semanas en todas las especies de nematodos Romero y Boero 2001 Esta superposici n de conteos de huevos supone que los animales se infectaron de manera continua durante el pastoreo y el resultado fue un incremento en los CFH en todos los animales aunque en menor medida en el grupo inicialmente infectado con 100 L PV Los menores CFH de nematodos en los ovinos infectados con 100 L PV durante la segunda y tercera etapa coinciden con los resultados obtenidos en un estudio realizado en la raza Merino en la cual se indic que conforme los corderos sufren 178 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N desaf os los conteos de huevos de nemato dos van disminuyendo l
20. mero de huevos por gramo de heces HPG en borregos de la cruza Katahdin x Pelibuey infectados con nematodos gastrointestinales ESTEBAN ANDR S ET AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 175 Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 INVESTIGACI N TABLA 3 Peso vivo inicial y final ganancia de peso GDP y volumen celular aglomerado VCA en corderos Katahdin x Pelibuey infectados con nematodos gastrointestinales Tratamiento penes Peso inicial Peso final GDP porron Larvas kg 1 PV Promedio D E Promedio D E Promedio D E N Promedio D E Sin infecci n 5 25 6 3 6 32 2 3 1 72 5 19 0 30 28 0 4 1 25 L 6 24 8 5 2 30 0 3 1 49 1 18 0 35 27 3 4 2 50 L 5 24 6 57 25 20 8 0 49 1 17 0 30 23 1 4 8 100 L 6 25 8 4 4 30 0 4 7 5 5 21 6 36 26 2 3 9 N N mero de observaciones D E Desviaci n est ndar Letras diferentes en cada columna son significativas P lt 0 05 mente 24 8 y con 50 larvas el VCA se mantuvo constante 23 0 respecto a la etapa previa Figura 2 Durante la ltima fase de estabulaci n el VCA promedio 26 1 4 1 fue menor respecto a la etapa de pastoreo 26 4 4 0 y a la de infecci n experimental 26 4 5 0 35 gt 0 Larvas y estabulaci n 33 4 Q 50 Larvas 31 4 29 4 21 4 25 23 4 21 4 Volumen celular aglomerado 19 17 4 15 Infecci n experimental
21. n 16 8 respecto del grupo testigo Este comportamiento del grupo infectado con 100 L posiblemente se relaciona con el desarrollo de resistencia ya que durante la ltima etapa este grupo tuvo menor conteo de HPG respecto a los grupos de corderos infectados con 25 y 50 L Se podr a considerar que con una infecci n de 100 larvas es posible incrementar la inmunidad del hospedero al grado de permitir una reducci n de HPG un incremento en el VCA y me jores ganancias de peso que los corderos infectados con dosis menores de larvas de NGI ESTEBAN ANDR S ET AL DEVELOPMENT OF RESISTANCE TO GASTROINTESTINAL NEMATODE IN HAIR SHEEP 179 Rev Meb Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 CONCLUSIONES Con la aplicaci n de 25 larvas infectantes de nematodos gastrointestinales se observa eliminaci n de huevos de nematodos en corderos primoinfectados sin que se afecten la ganancia de peso y el VCA En los corderos infectados con 100 larvas por kg de PV se redujeron los conteos fecales de huevos de nematodos se increment el VCA y mejoraron las ganancias de peso posteriormente a la reinfecci n en pastoreo respecto a los corderos infectados con menores dosis BIBLIOGRAF A Adams DB 1988 Infection with Haemonchus contortus in sheep and the role of adaptive immunity in selection of the parasite Int J Parasitol 18 8 1071 1075 Aguilar Caballero AG Torres Acosta JF C mara Sarmiento R 2009
22. nto y en la tercera etapa cuando los anima Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 les estuvieron estabulados las mayores ganancias de peso se registraron en los corderos que se infectaron con 100 larvas por kg PV Tabla 4 y Figura 3 por lo que el tratamiento como efecto principal fue significativo P lt 0 01 DISCUSI N Tal como se ha observado en otros es tudios Notter et al 2003 Vanimisetti et al 2004 con una nica infecci n ocurre inicialmente un incremento en los conteos fecales de huevos de nematodos y posteriormente sucede una reducci n conforme transcurre el tiempo En el caso del presente estudio todos los corderos de los grupos infectados disminuyeron los conteos con el tiempo pero la mayor reducci n fue evidente en los corderos que recibieron la mayor concentraci n de TABLA 4 Peso final peso inicial y ganancia de peso GDP de corderos Katahdin x Pelibuey infectados con nematodos gastrointestinales Peso kg Cambio de Etapa Tratamiento N Peso final D E inicial ganados peso GDP Infecci n 0 5 28 6 3 5 25 6 3 1 3 0 74 78b00 25 6 27 7 4 1 24 8 5 2 2 3 22 0 31 20ede 50 5 25 8 6 8 24 6 5 1 1 2 60 0 20 9Pode 100 6 27 0 3 1 25 8 4 5 1 2 61 0 13 9 Pastoreo 0Y 5 29 8 3 5 28 8 3 4 1 0 28 6 gt ode 25 6 21 1 2 1 27 5 4 3 0 2 83 0 11 90 50 5 24 4 7 0 25 4 15 1 0 200 0 33 3 100 6 27 2 4 1 26 6 4 3 0 6 43 0 4 0 Estabulaci n 0 5 32 2 3 1
23. o que supone que la inmunidad protectora del hospedero y espec ficamente la inmunidad adquirida hacen presi n sobre los par sitos Adams 1988 Y a pesar de que los conteos fecales en el grupo infectado con 100 L durante el pastoreo superaron el umbral para la aplicaci n de antihelm ntico superio res a 750 HPG indicado para ovinos Torres Acosta et al 2011 este grupo fue el que tuvo los menores conteos de huevos de NGI por lo que seguramente el nivel de desaf o se puede incrementar para generar una respuesta inmune que permita reducir a n m s la infecci n de nematodos y evaluar el grado de afectaci n en los animales Durante la ltima fase de estabulaci n se observ que el VCA tuvo el menor porcentaje respecto a las etapas previas que fueron las de pastoreo segunda eta pa y de infecci n experimental primera etapa Este comportamiento se esperaba porque a pesar de la desparasitaci n que se realiz al finalizar la primera etapa los animales siguieron infectados ya que el antihelm ntico no fue efectivo a lo anterior se sum el efecto de la segunda etapa en la que los animales se reinfecta ron durante el pastoreo Las diferencias del VCA en el tiempo y entre razas se han indicado en un estudio en el que se realiz una infecci n experimental con 20 000 L de H contortus en el cual se encontr que el HPG fue igual entre las razas Dorper y Katahdin pero el VCA fue mayor en Katahdin lo que sugiere una may
24. or tolerancia a la haemoncosis en dicha raza El VCA declin en mayor medida entre los d as 14 y 21 despu s de la infecci n y la mayor reducci n fue en Dorper en comparaci n con Katahdin y Santa Cruz lo que tambi n sugiere que Rev MeD Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 la raza Dorper es m s susceptible que Katahdin y Santa Cruz Burke y Miller 2004 De manera similar a lo hallado por estos autores en el presente estudio la reducci n m s fuerte ocurri entre el primer y tercer muestreo por ello a los 21 d as fue cuando se registr el menor VCA y posteriormente se increment De igual manera en otro estudio con ovinos de pelo y de lana el VCA declin a las cuatro semanas en los dos tipos de razas Notter et al 2003 Es importante recalcar que en el presente estudio se proporcion alimentaci n adicional al pastoreo durante la etapa en la que los corderos salieron al campo mientras que durante la estabulaci n la alimenta ci n no fue limitante para que existiera alguna interacci n entre alimentaci n y la respuesta productiva de los animales infectados por lo que se asume que los efectos sobre el VCA fueron debidos a la parasitosis En la ltima etapa los corderos infec tados con 100 larvas tuvieron mayores ganancias de peso que los corderos testigo Por su parte los grupos con 50 larvas tuvieron una ganancia de peso de 78 respecto al testigo y el grupo de 25 larvas s lo obtuvo u
25. r picos parecen tener habilidad gen tica para resistir o tolerar a los par sitos Baker 1995 De manera tradicional la resistencia a los NGI se ha medido me diante el conteo de huevos de nematodos en las heces huevos por gramo HPG el cual ha sido un indicador indirecto de la carga parasitaria y por lo tanto de f cil medici n y registro por lo que se puede mejorar a trav s de selecci n Dominik 2005 debido a que la resistencia a los NGI es moderadamente heredable h 0 23 0 41 Sin embargo los avances gen ticos al respecto han sido modestos Gonz lez Gardu o y Torres Hern ndez 2003 La selecci n de esta caracter stica implica conocer los dos mecanismos que participan en la resistencia a los nematodos 1 La resistencia innata que considera la iniciaci n y mantenimiento de la respues ta inmune del hospedero que previene 170 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N reduce o elimina la infecci n Balic et al 2002 y 2 la resistencia adquirida la cual est posiblemente controlada por genes diferentes los cuales se han estudiado en diversas razas como la Florida Pelibuey Blackbelly y otras m s Torres Hern ndez y Morteo G mez 2009 La resistencia adquirida se genera despu s de un desaf o y se hace evidente cuando ocurre una nueva infecci n y las larvas que alcan zan el tejido se enfrentan a mecanismos humorales o
26. the Southeastern region of the United States Small Rumin Res 54 43 51 D az RP Torres HG Osorio AMM P rez PH Pu lido AAR Becerril PAM Herrera HJG 2000 Resistencia gen tica a par sitos gastrointestinales en ovinos Florida Pelibuey y sus cruzas en el tr pico mexicano Agrociencia 34 1 13 20 Dobson RJ Hosking BC Besier RB Love S Larsen JWA Rolfe PE Bailey JN 2011 Minimizing the development of anthelmintic resistance and optimizing the use of the novel anthelmintic Monepantel for the sustainable control of nematode parasites in Australian sheep grazing systems Australian Vet J 89 5 160 166 Dominik S 2005 Quantitative trait loci for internal nematode resistance in sheep a review Gen Selec Evol 37 Suppl 1 583 96 Garc a E 1988 Modificaciones al sistema de clasifi caci n clim tica de K ppen 42 ed Instituto de Geograf a M xico D F Universidad Nacional Aut noma de M xico 217 p Gonz lez Gardu o R Torres Hern ndez G 2003 Estimaci n del ndice de repetici n de las cargas de nematodos gastrointestinales en ovinos tro picales En Memorias del XXVII Congreso de Buiatria junio 12 14 Villahermosa Tabasco M xico p 219 Gonz lez Gardu o R Cordero Ortega JC Torres Hern ndez G Arece Garc a J Mendoza de Gives P 2010 Efecto del hipoclorito de sodio y extracto de c tricos en la reducci n de la infestaci n con nematodos gastrointestinales resistentes a antihelm nticos en o
27. vinos de pelo Rev Mex Cienc Pecu 1 179 187 Gonz lez Gardu o R C rdova P rez C Torres Hern ndez G Mendoza de Gives P Arece Garc a J 2011 Prevalencia de par sitos gas trointestinales en ovinos sacrificados en un rastro de Tabasco M xico Vet Mex 42 2 125 135 Knox DP Redmond DL Newlands GF Skuce PJ Pettit D Smith WD 2003 The nature and prospects for gut membrane proteins as vaccine candidates for Haemonchus contortus and other ruminant trichostrongyloids Int J Parasitol 33 1129 1137 180 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N Krecek P Waller J 2006 Towards the implementation of the basket of options approach to helminth parasite control of livestock Emphasis on the tropics subtropics Vet Parasitol 139 270 282 M ndez M Cabo JL 1980 Determinaci n del per odo prepatente de Haemonchus contortus en ovinos Cienc Tec Agric 2 1 19 30 Morris CA VlassofF A Bisset SA Baker RL Watson TG West CJ Wheeler M 2000 Continued selection of Romney sheep for resistance or suscep tibility to nematode infection estimates of direct and correlated responses Anim Sci 70 17 27 Niec R 1968 Cultivo e identificaci n de larvas infectantes de nematodos gastroent ricos del bovino y ovino Manual T cnico No 3 Instituto Nacional de Tecnolog a Agropecuaria Buenos Aires Argentina 28 p Notter DR Andrew SA
28. vo tuvieron en promedio el menor VCA durante todo el experimento Con la aplicaci n de 100 L tambi n se observ 7000 4 0 Larvas y estabulaci n 6000 7 50 Larvas 5000 4 4000 3000 4 2000 Numero de huevos por gramo de heces 1000 Infecci n experimental Etapas y d as por etapa Rev Meb Ver Zoor 60 III SEPTIEMBRE DICIEMBRE 2013 169 181 un bajo VCA mientras que entre el grupo testigo 0 larvas y aquellos animales que recibieron la aplicaci n de 25 L no se observaron diferencias Tabla 3 Despu s de la primera etapa de infec ci n experimental el VCA se redujo en los corderos de los grupos infectados Al final de esta etapa los corderos infectados con 50 y 100 L tuvieron el menor VCA mientras que el grupo con 25 larvas se mantuvo en un valor de 27 similar al grupo testigo Figura 2 Durante la etapa de infecci n en pastoreo el mayor valor de esta variable correspondi al grupo testigo que no sali a pastoreo 29 6 a 30 en el grupo de 25 larvas el VCA se redujo de 27 5 a26 3 en el de 100 larvas de 26 3 a 25 5 y en el de 50 larvas el VCA se redujo de 23 2 a 22 4 Figura 2 En la tercera etapa en estabulaci n se observ un incremento del VCA en el grupo infectado con 100 larvas 27 8 mientras que el grupo infectado con 25 se redujo ligera E gt 25 Larvas 100 Larvas e 1 14 28 7 14 21 Pastoreo Estabulaci n FIGURA 1 N
29. y al inicio de la segunda etapa por tratamientos Tratamiento Etapa Promedio a er nal 25 L kg 27 2 Muestreo final HPG d a 42 Infecci n 458 370 7 Muestreo inicial HPG d a 1 Pastoreo 333 271 4 50 L kg 7 8 Muestreo final HPG d a 42 Infecci n 1 140 1 312 6 Muestreo inicial HPG d a 1 Pastoreo 1 050 557 9 100 L kg 45 6 Muestreo final HPG d a 42 Infecci n 1 642 1 183 4 Muestreo inicial HPG d a 1 Pastoreo 892 480 0 HPG Huevos de nematodos por gramo de heces 14 d as posteriores a la desparasitaci n segunda etapa 174 ESTEBAN ANDR S ET AL DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS GASTROINTESTINALES EN OVINOS INVESTIGACI N A los 28 d as de iniciada la segunda etapa se incrementaron los conteos a consecuencia de la reinfecci n en pastoreo El mayor conteo correspondi al grupo de corderos tratados con 50 L PV 1 500 2 035 En la tercera etapa se observ un aumento en los conteos fecales de huevos de NGI Figura 1 y se pudo notar que el grupo infectado experimentalmente con 100 L tuvo en esta etapa el menor CFH 2 033 2 553 mientras que los de las dosis baja 25 L superaron a todos los grupos en el ltimo muestreo 5 892 4 465 HPG incluyendo a los infectados con 50 L PV 4 675 4 069 Volumen celular aglomerado VCA El promedio general del VCA durante todo el experimento fue de 26 3 3 2 Los corderos infectados con 50 L por kg de peso vi

DESARROLLO DE RESISTENCIA A NEMATODOS

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