XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo
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1. Cu ppm 2 Medio 1 8 Medio 4 medio 3 3 medio 1 6 medio 1 6 medio 1 6 medio 2 7 medio Zn ppm 1 3 Bajo 1 1 Bajo 1 3 bajo 1 5 bajo 2 bajo 2 3 bajo 1 3 bajo 1 6 bajo Fuente Laboratorios del SESA Tumbaco La reacci n de los suelos oscila entre 5 61 y 7 6 aptos para que ocurra el proceso de nodulaci n en leguminosas la mayor a de las leguminosas no nodulan en pH bajo cido El contenido de calcio es alto oscila entre 9 15 a 15 3 cmol kg actuando sobre la proliferaci n de los rizobios y la infecci n de las leguminosas el calcio modera el efecto t xico del aluminio y magnesio El contenido de f sforo es bajo en seis casos oscila de 3 2 a 9 8 ppm el potasio se mantiene en niveles de bajo 0 15 cmol kg a medio 0 20 cmol kg las deficiencias de f sforo y potasio se manifiestan principalmente en reducci n del crecimiento de las leguminosas lo cual a su vez reduce la fijaci n de nitr geno porque incide afectando la formaci n de los n dulos Estudios de campo realizados en Virginia EEUU citados por la FAO 19853 mostraron que los incrementos en el n mero de n dulos fueron mayores cuando se aplicaron los nutrientes f sforo y potasio estos resultados indican la importancia del balance nutricional El contenido de nitr geno es bajo oscila del 0 07 a 0 13 caracter stico de estos suelos siendo necesario continuar con la b squeda de alternativas para incrementar el contenido de este elemento en el suelo2. El contenido de hierro aprovechable de los suelos es bajo oscila de 6 4 a 18 1 ppm este elemento es importante porque la nitrogenasa enzima fijadora de nitr geno esta compuesta de hierro sin Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 3 POSGRAD OS Jo SNADE Ly XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo pEc g9 ECUAy NR cantidades adecuadas de este elemento la fijaci n de nitr geno no puede ocurrir El hierro adem s es un constituyente de la leghemoglobina del n dulo que protege a la nitrogenasa de la inactividad provocada por el ox geno a las leguminosas con deficiencias se aplicar quelatos de hierro a nivel foliar para obtener una buena nodulaci n FAO 1985 El contenido de zinc es bajo oscila de 1 1 a 2 3 ppm El contenido de manganeso de bajo a medio 2 3 33 4 ppm Estos dos elementos se requieren para el crecimiento del hu sped pero no afectan a la nodulaci n El contenido de cobre es medio oscila de 1 6 4 ppm su deficiencia resulta en el desarrollo de numerosos n dulos peque os FAO 1985 ANALISIS DE LAS VARIABLES ESTUDIADAS Contenido de nitr geno de ocho especies de leguminosas nativas En la Tabla 3 se presentan los resultados del an lisis foliar de los tres tratamientos analizados en el presente ensayo Tabla 3 Contenido de nitr geno registrado en la parte a rea de ocho leguminosas en tres tratamientos Catacocha 2008 ESPECIE
3. Gramos o Inoculado Figura 2 Promedios del peso seco de la parte a rea g de ocho leguminosas sometidas a prueba de eficiencia en invernadero Catacocha 2008 Las especies cuyos promedios de peso de materia seca de la parte a rea que sobresalieron en el tratamiento inoculado con respecto al testigo y al nitrogenado fueron Desmodium procumbens y AN Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 5 PESTEELDOS SNADE Ly XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo S A qn pEC gD ECU Wos A Mucuna sp sin embargo estas especies sometidas al an lisis estad stico no presentaron diferencias significativas Altura de plantas de ocho especies de leguminosas sometidas a prueba de eficiencia en invernadero Tabla 5 Efecto de la inoculaci n y la aplicaci n de nitr geno en la altura de la planta cm de ocho especies de leguminosas de Centro Loja y Valle de Casanga Catacocha 2008 Altura de la planta cm Especie Inoculada Nitrogenada Testigo Desmodium molliculum 24 8 41 3 11 7 Mimosa albida 17 8 17 2 15 0 Aeschynomene brasiliana 39 8 33 5 33 7 Crotalaria sp 22 2 27 7 23 3 Desmodium procumbens 13 3 15 3 10 0 Macroptilium sp 41 0 64 2 68 2 Clitoria sp 11 2 60 3 13 8 Mucuna sp 55 7 44 2 41 3 Fuente Autores 80 70 60 u e 50 O Nitrogenado E 40 m Testigo g O Inoculado Figura 3
4. el T testigo e I inoculado es verde Mimosa albida present n dulos en el TT y TI abundantes y muy abundantes rspectivamente El tama o predominante para el caso de testigo es peque o y para inoculados es mediano La nodulaci n en la ra z principal el testigo es nula y en el caso de inoculado es regular El color predominante para el testigo es verde y en el inoculado es rojo En Aeschynomene brasiliana los n dulos se muestran abundantes en los tratamientos el tama o predominante es peque o la nodulaci n en la ra z principal para el testigo fue regular mientras que para el TI fue predominante El color sobresaliente en los tratamientos fue rojo En Crotalaria sp la abundancia en los tratamientos va de mediana a abundante El tama o predominante es peque o La nodulaci n en la ra z principal para el testigo es nulo mientras que en el tratamiento inoculado es regular El color predominante en testigo es rojo verde y el inoculado es rojo En Desmodium procumbens la abundancia presentada en el testigo y en el inoculado es abundante El tama o predominante es peque o La nodulaci n en la ra z principal en el testigo es regular y en Inoculado es predominante El color predominante en el tratamiento testigo es blanco y en el Inoculado es rojo En Macroptilium sp presenta abundancia en el tratamiento inoculado y en el testigo es muy abundante El tama o predominante en el testigo es peque o y en el inoculado mediano La n
5. semilla fue colectada en los sitios de origen de la planta madre En el laboratorio de Fisiolog a Vegetal del AARNR de la UNL se desinfect y escarifico manualmente las semillas para proceder a su germinaci n En maceta con sustrato previamente humedecido con agua destilada se hicieron dos hoyos colocando dos pl ntulas de leguminosas transcurridos ocho d as de la siembra se ralearon las pl ntulas menos vigorosas dejando una planta por maceta Transcurridos seis d as del transplante se aplicaron 10 ml de soluci n A al tratamiento nitrogenado y 10 ml de soluci n B a los tratamientos testigo e inoculado las soluciones C y D se aplicaron 2 ml y de la soluci n E 3 ml a todos los tratamientos La frecuencia de aplicaci n fue dejando un d a hasta los 16 d as posteriores al transplante luego se increment la dosis a 25 ml de las soluciones A y B con frecuencia de tres d as mientras de las soluciones C D se aplicaron 2 ml y de la soluci n E 3 ml Paralelamente se dieron riegos con agua destilada hasta capacidad de campo Para la inoculaci n se prepararon soluciones salinas que contengan las bacterias de las cepas correspondientes a cada especie ocho se tom 12 ml de suspensi n bacteriana y se introdujo paralelamente a la ra z principal vertiendo 2 ml de in culo a cada planta maceta completando un total de 6 repeticiones por especie Luego de ocho semanas posteriores a la inoculaci n se evaluaron las leguminosas flo
6. NADEL XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo 9 ECUap o nd o e Dos ae EVALUACION AGRONOMICA DE OCHO ESPECIES DE LEGUMINOSAS HERBACEAS NATIVAS IDENTIFICADAS COMO POTENCIALES FIJADORAS DE NITROGENO ATMOSFERICO Jos Francisco Guam n D az y Magaly Yaguana Ar valo 1 Universidad Nacional de Loja Correo electr nico guamandiazQhotmail com INTRODUCCION Las leguminosas nativas de las zonas estacionalmente secas de la provincia de Loja son especies adaptadas a condiciones edafoclim ticas adversas siendo necesario realizar estudios que generen conocimientos para la sustentaci n de su uso como mejoradoras de la fertilidad de los suelos y su inserci n en los sistemas de producci n de las familias campesinas Las leguminosas establecen simbiosis con bacterias generalmente del g nero Rhizobium la planta suministra los carbohidratos necesarios para el metabolismo de las bacterias y stas los utilizan como fuente de energ a al transformar el nitr geno libre de la atm sfera en una forma asimilable para la planta y su posterior incorporaci n a las prote nas fijando de esta manera el nitr geno que ser incorporado al sistema agr cola esta asociaci n tiene mayor impacto en el rendimiento y la producci n del cultivo Esta propiedad es de gran importancia desde el punto de vista alimenticio y ecol gico porque su integraci n permite la restauraci n y mantenimiento de la fertilidad del suelo proveyendo de
7. Promedios de altura cm de ocho especies de leguminosas sometidas a prueba de eficiencia bajo invernadero Catacocha 2008 Los promedios de altura de ocho especies de leguminosas nativas durante el periodo experimental evidencian diferencias importantes entre los tratamientos al analizar el tratamiento inoculado tres son las especies que superan al testigo Mimosa albida Aeschynomene sp y Mucuna sp Sin embargo el an lisis estad stico en altura con el tratamiento inoculado fue significante solamente para Aeschynomene brasiliana La respuesta de las leguminosas tropicales a la inoculaci n var an de un sitio a otro pero las caracter sticas del suelo no son determinantes en la relaci n de un inoculante sino el genotipo de la leguminosa Holliday 1985 Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 6 DESTEFADOS XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo Nodulaci n de las especies de leguminosas sometidas a prueba de eficiencia a nivel de invernadero Del estudio de los n dulos realizado al momento de la cosecha se determin lo siguiente La nodulaci n en Desmodium molliculum present las siguientes caracter sticas la abundancia en el tratamiento testigo es mediana y en el inoculado es abundante El tama o que predomina en los tratamientos es peque o significando una caracter stica intr nseca de la planta La nodulaci n en la ra z principal en el tratamiento testigo e inoculado es regular El color predominante en
8. S de nitr geno de parte a rea Inoculado Nitrogenado Testigo Desmodium molliculum 2 82 2 99 3 17 Mimosa albida 3 06 2 87 2 99 Aeschynomene brasiliana 3 09 3 4 3 07 Crotalaria sp 3 74 3 36 3 45 Macroptilium sp 3 62 2 93 3 22 Clitoria sp 4 05 2 7 2 82 Desmodium procumbens 3 80 3 92 3 80 Mucuna sp 1 70 2 33 2 62 Fuente Laboratorios SESA Tumbaco 2008 Los contenidos de nitr geno en la parte a rea de las leguminosas son muy variables entre especies y los valores entre tratamientos de una misma especie difieren notablemente como se expresa en la Figura 1 4 Desmodium molliculum Si Mimosa albida 2 Aeschynomene brasiliana gt Crotalaria sp e o E mu A e im E y Desmodium procumbens 4 M acroptilium sp 4 Clitoria sp Nitro genado Testigo Inoculado Mucuna sp Figura 1 Contenido de nitr geno de ocho especies de leguminosas sometidas a tres tratamientos Catacocha 2008 Q Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 4 POSGRADOS SNADE Ly XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo DEC go ECU NR El inter s de la presente investigaci n fue la respuesta de la inoculaci n de cepas por lo que a continuaci n se analiza las especies que presentaron mayor contenido promedio de nitr geno en el tratamiento inoculado as en Clitoria sp el contenido de N es superior con 4 05 para el tratamiento inoculado frente al t
9. a parte a rea en el tratamiento inoculado result significativo estad sticamente en Macroptilium sp gt La biomasa de la parte a rea result altamente significativo en el tratamiento nitrogenado en las siguientes especies Desmodium molliculum Aeschynomene brasiliniana Crotolaria sp Macroptilium sp y Clitoria sp gt La altura de la planta result altamente significativa para el tratamiento nitrogenado en las especies Desmodium molliculum Desmodium procumbens y Clitoria sp y significativa en el tratamiento inoculado en Aeschynomene brasiliniana mientras que en el tratamiento testigo fue para Macroptilium sp gt El Rhizobium inoculado vari en su efectividad siendo la cepa UNLO63 inoculada en Macroptilium sp la que concentr el mayor contenido de nitr geno en la parte a rea gt Los n dulos evaluados en abundancia tama o nodulaci n en la ra z principal y color en el tratamiento inoculado resaltaron en su orden Mimosa albida Macroptilium sp Clitoria sp Crotalaria sp y Aeschynomene brasiliana El color en todas estas especies fue rojo lo que indic la presencia de leghemoglobina activa s ntoma de fijaci n biol gica gt La caracterizaci n molecular reflej la existencia de tres grupos de cepas bien diferenciados el primero conformado por la UNLO64 Clitoria sp con similitud de 95 el segundo por UNLO0O01 Desmodium molliculum UNLOS8 Aeschynomene brasiliniana UNLO61 Crotalaria sp UNL062 Desmodiu
10. able que cada uno de los grupos encontrados correspondan a especies bacterianas determinadas La asignaci n de cada uno de stos grupos a una determinada especie del g nero Rhizobium deber ser comprobada posteriormente mediante secuenciamiento del gen del ARN ribosomal 165 oo BD ws BDD ws B oss PTA E Tut i UNL He ii PE Aa 4 KJ UNLI uus MEDI pa Mi H L OEE o s BE ETTET TEEST ETTA o2 057 on 0s 100 Cociident Figura 8 Dendrograma basado en los patrones de fingerpriting de ERIC BOX y REP PCR que muestran la similaridad de cepas del g nero Rhizobium Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 9 QESERRD OS SAD XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo Ec Aa 3a ig A S dos g CONCLUSIONES gt El contenido de las formas aprovechables de macronutrientes de los suelos sustratos fue bajo mientras que el contenido de micronutrientes va de medio a bajo gt En el contenido promedio de nitr geno de la parte a rea las leguminosas sometidas al tratamiento inoculado que presentaron valores superiores fueron Clitoria sp 4 05 Crotalaria sp 3 14 Macroptilium sp 3 62 frente al testigo de 2 84 3 45 y 3 21 respectivamente gt De las especies se aladas anteriormente y contrastadas con el ndice de Efectividad de Inoculaci n las que respondieron fueron Crotalaria sp Macroptilium sp y Clitoria sp gt El contenido de nitr geno de l
11. btenidos fueron visualizados por electroforesis RESULTADOS Y DISCUSIONES CARACTERISTICAS QUIMICAS DE LOS SUELOS DE LOS SITIOS DE COLECTA DE LAS LEGUMINOSAS En la Tabla 2 se presentan los resultados de las caracter sticas qu micas de suelos correspondientes a las ocho especies de leguminosas herb ceas plantas madres estudiadas Tabla 2 Caracter sticas qu micas de los suelos de Centro Loja y Valle de Casanga cantones Paltas y Gonzanam provincia de Loja 2008 Especie Desmodium Mimosa Aeschynomene Crotalaria Desmodium Macroptilium Clitoria Mucuna An lisis molliculum albida brasiliana sp procumbens sp sp sp pH 5 61 L Acido 6 5 Neutro 6 05 L cido 6 27 L cido 6 78 neutro 5 82 L cido 6 69 neutro 7 6 L alcal MO 1 45 Medio 1 81 Medio 3 60 alto 4 41 alto 1 33 medio 2 55 alto 2 14 alto 2 67 alto N total 0 07 Bajo 0 09 Bajo 0 18 medio 0 22 medio 0 07 bajo 0 13 bajo 0 11 bajo 0 13 bajo P ppm 9 8 Bajo 3 2 Bajo 5 5 bajo 8 0 bajo 3 2 bajo 3 2 bajo 16 medio 12 5 medio K cmol kg 0 20 medio 0 20 medio 0 15 bajo 0 20 medio 0 15 bajo 0 15 bajo 0 15 bajo 0 92 alto Ca cmol kg 12 5 Alto 15 3 Alto 11 3 alto 9 15 alto 10 95 alto 14 85 alto 10 7 alto 12 7 alto Mg cmol kg 2 38 Alto 32 51 Alto 5 51 alto 3 79 alto 51 85 alto 28 80 alto 6 09 alto 2 63 alto Fe ppm 16 Bajo 7 7 Bajo 17 6 bajo 26 medio 6 4 bajo 10 8 bajo 11 7 bajo 18 1 bajo Mn ppm 18 6 Alto 33 4 Alto 2 4 bajo 19 3 alto 2 3 bajo 14 3 medio 11 1 medio 3 5 bajo
12. estigo con 2 82 seguido de Crotalaria sp cuyo contenido de nitr geno para el tratamiento inoculado es de 3 74 frente al testigo de 3 45 En tercer lugar se apreci a Macroptilium sp con contenidos de nitr geno de 3 62 para el tratamiento inoculado frente al testigo con 3 21 y el cuarto lugar corresponde a Mimosa albida con un contenido de nitr geno para el tratamiento inoculado de 3 06 frente al testigo de 3 En Aeschynomene brasiliana el contenido de nitr geno promedio para el tratamiento Inoculado es superior al testigo con 0 02 por lo que resulta interesante seguir trabajando con esta especie Desmodium molliculum Desmodium procumbens y Mucuna sp no presentaron promedios favorables a la inoculaci n m s bien el tratamiento testigo result superior por tanto no son eficientes Materia seca de la parte a rea Tabla 4 Efecto de la inoculaci n y la aplicaci n de nitr geno en la Biomasa g de la parte a rea de ocho especies de leguminosas silvestres de Centro Loja y Valle de Casanga Materia seca g Especie Inoculada Nitrogenada Testigo Desmodium molliculum 0 49 1 27 0 07 Mimosa albida 0 77 1 11 0 79 Aeschynomene brasiliana 2 72 3 44 2 24 Crotalaria sp 2 29 3 75 2 34 Desmodium procumbens 1 29 1 20 0 91 Macroptilium sp 0 73 2 43 1 38 Clitoria sp 0 53 2 01 0 24 Mucuna sp 4 03 3 58 2 86 Fuente Autores D Nitrogenado D Testigo
13. idad Central de Venezuela Maracay Venezuela 33 p Cadavil L 1995 Utilizaci n de abonos verdes en suelos dedicados a la siembra de yuca Centro Internacional de Agricultura tropical CIAT Cali Colombia 17 p D az G y K Estupi an 2004 La mucuna como cultivo de cobertura alternado con el ma z Bolet n divulgativo N 03 Universidad T cnica Estatal de Quevedo Los R os Ecuador 20 p CIAT 1988 Simbiosis Leguminosa Rizobio Manual de m todos de evaluaci n selecci n y manejo agron mico 1 ed Cali Colombia 178 p Cunachi A 2006 Autenticaci n y eficiencia de cepas de Rhizobium leguminosarum biovariedades viceae y trifolii y de Rhizobium meliloti Tesis Ing Agr noma ESPOCH Riobamba Ecuador 46 p FAO ORGANIZACION DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA ALIMENTACION 1985 Manual T cnico de la fijaci n simbi tica del nitr geno Rhizobium Leguminosa Italia 61 p Garcia M E Treto y M Alvarez 2000 Los abonos verdes una alternativa para la econom a del nitr geno en el cultivo de la papa Estudio comparativo de diferentes especies Revista Cultivos tropicales 21 1 La Habana Cuba 5 11 p Garassini L A 1967 Microbiolog a Agraria Edit Universidad Central de Venezuela Maracay Venezuela 200 220 p Graham P 1999 www rhizobium umn edu Guam n F y M Yaguana 2007 Caracterizaci n morfofisiol gica de bacterias fijadoras de N en leguminosas herb ceas nativa
14. m procumbens y UNLO63 Macroptilium sp muestran similitud mayor al 98 y un tercer grupo donde se ubica UNLO78 Mucuna sp y UNLOO3 Mimosa albida agrupadas con similitud del 83 gt Con las especies de leguminosas silvestres que resultaron eficientes Crotalaria sp Macroptilium sp y Clitoria sp continuar investigando a nivel de laboratorio invernadero y campo para determinar los aportes de nitr geno a los suelos de las zonas secas gt Las leguminosas asociadas a rizobios nativos y probadas en el ensayo de autenticaci n seguirlas asociando en los sistemas de producci n de las zonas secas gt Profundizar estudios de cepas eficientes por especie de leguminosa en diversas localidades de la provincia de Loja con la finalidad de determinar la m s apta para formulaci n de inoculantes Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 10 POSGRADOS XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo aa BIBLIOGRAFIA Alvarado A J Iglesias y O Guell 2005 An lisis multielemental de material foliar por medio de ICP MS Revista Agronom a Costarricense 29 1 17 28 p Bernal G 2006 La fijaci n biol gica de nitr geno componente clave de la fertilidad de los suelos y el rendimiento de cultivos en el Ecuador 1 ed Quito Ecuador 145 p Borges D 1975 Aislamiento Autenticaci n y efectividad de dos cepas de dos cepas de Rhizobium de fr jol Vigna sinensis L Informe t cnico Facultad de Agronom a Univers
15. nitr geno a bajo costo FAO 1985 La presente investigaci n estudi la efectividad y eficiencia de la fijaci n biol gica de N al inocular cepas de Rhizobium aisladas de ocho leguminosas nativas herb ceas de zonas secas de Centro Loja y Valle de Casanga las cuales han sido producto de estudios y caracterizaciones anteriores Los objetivos planteados fueron 1 Determinar la necesidad nutritiva de ocho leguminosas herb ceas nativas de Centro Loja y Valle de Casanga 2 Establecer un ensayo de autenticaci n y eficiencia a nivel de invernadero para determinar cepas eficientes MATERIALES Y METODOS Las leguminosas nativas motivo de estudio corresponden a las zonas del Valle de Casanga y Centro Loja de los Cantones Paltas y Gonzanam La caracterizaci n edafoclim tica es de tipo subtropical seco comprende altitudes de 841 a 2 250 msnm con precipitaciones promedio anuales de 400 mm en la parte baja y 750 mm en la parte alta la temperatura fluct a de 19 a 29 C Presenta dos temporadas lluviosa de enero a mayo y seca de junio a diciembre La topograf a es bastante irregular con pendientes que van del 18 al 70 La vegetaci n es xerof tica con espacios de suelo desnudo y afloramientos rocosos debido a los altos procesos erosivos La investigaci n de autenticaci n y prueba de eficiencia de ocho especies de leguminosas bajo invernadero se llev a cabo en Catacocha a 1750 msnm por ser el centro de estudio de la zona Se mue
16. odulaci n en la ra z principal para el testigo y el inoculado es regular El color predominante es rojo Clitoria sp present abundancia mediana en el testigo mientras que para el inoculado es abundante El tama o predominante de n dulos es peque o la nodulaci n en la ra z principal para el testigo es nula mientras que para el inoculado es regular El color predominante para el tratamiento testigo es verde y para el Inoculado es rojo En Mucuna sp el registro de abundancia para los tratamientos es mediana El tama o predominante para testigo e inoculado es grande La nodulaci n de la ra z principal en el testigo es nulo y para el inoculado es regular El color predominante para el tratamiento testigo es blanco y para el inoculado es rojo Caracterizaci n molecular de cepas de Rhizobium spp Los resultados del aislamiento de ADN gen mico de ocho cepas de Rhizobium correspondiente a especies de leguminosas nativas se muestran en la figura 4 en donde claramente se puede observar la banda de ADN de alto peso molecular en la parte inferior Las cepas 01 49 58 61 62 63 y 64 presentan bandas completamente definidas Sin embargo la integridad del ADN de las muestras 03 y 78 no es tan buena como las anteriores En algunas muestras es posible observar la presencia de una gran cantidad de ARNr y ARNm debido a que la extracci n de ADN se realiz con cultivos que se encontraban en la fase de crecimiento exponencial o logar tmico La p
17. raci n periodo en que la nodulaci n y la tasa de fijaci n del nitr geno alcanzan niveles m ximos en este momento el contenido de nitr geno esta correlacionado con el que la planta tendr cuando llegue a su madurez Las variables registradas al momento de la cosecha fueron el peso fresco de la biomasa y de la ra z por separado posteriormente se tomaron pesos secos este peso constituye un par metro indicativo de la efectividad de la fijaci n de nitr geno Erdwan y Jeans 1952 citado por Borges 1975 En laboratorio de Bromatolog a se moli la parte a rea de las plantas se aire al ambiente por 12 horas y se enviaron al laboratorio de foliares del SESA Tumbaco para la determinaci n de nitr geno Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 2 POSGRADOS XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo PADE Ly o nd El Las ra ces se separaron cuidadosamente del suelo y se evaluaron mediante la metodolog a sugerida por el CIAT 1988 en donde se registraron par metros de abundancia color predominante nodulaci n en la ra z principal y tama a de n dulos El dise o aplicado en la presente investigaci n para cada una de las especies fue el de Dise o Completamente al Azar con tres tratamientos y seis repeticiones Finalmente con apoyo del Dr Carlos Rodr guez Genetista Molecular de la ESPOCH se realiz la caracterizaci n molecular de las cepas los patrones de bandas o
18. resencia de estas mol culas no interferir en an lisis posteriores Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 7 SAD Ec Aa 3a ig ON S os ae POSGRADOS SAD XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo ANS A N j 15 12 07 ARN mensajero ne i koog ARN ribosomal m 4 ah a ADN gen mico pua j i EA g Y O UR A NN A a er A ES Figura 4 ADN gen mico extra do de cepas de Rhizobium sp En las Figuras 5 6 y 7 se presentan las bandas obtenidas a partir de la aplicaci n de patrones fingerpriting a cada una de las cepas en estudio al gt 3 de pa mw EN me a Figura 5 Patrones de bandas visualizados por electroforesis para ERIC PCR a ma pe i puma a Figura 6 Patrones de bandas visualizados por electroforesis para ERIC PCR Q UTE Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 8 PESTEFADOS XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo Spm S Figura 7 Patrones de bandas visualizados por electroforesis para ERIC PCR En la figura 8 claramente se puede observar tres grupos bien diferenciados El primer grupo esta formado por las cepas UNL049 y UNLO64 las mismas que comparten una similaridad del 95 El segundo grupo que corresponde a las cepas UNLO63 UNLO58 UNLO61 UNLOO1 UNLO62 y UNLO0O48 muestran una similaridad mayor al 98 Finalmente el ltimo grupo corresponde a las cepas UNLO78 y UNLOO3 agrupadas con una similaridad del 83 Es muy prob
19. s de Centro Loja y Valle de Casanga Edit Universitaria UNL Loja Ecuador 28 p Holliday J 1985 La fijaci n biol gica de nitr geno como una agrotecnolog a transferible en el tr pico Memorias de la X Reuni n Latinoamericana sobre Rhizobium Maracay Venezuela 6 p Jerez M 2004 Caracterizaci n fenot pica y gen tica de cepas de Bradyrhizobium spp en el cultivo de man y evaluaci n de eficiencia simbi tica para la producci n de inoculantes Tesis Ing Agr nomo Universidad Central Quito Ecuador 127 p Marcano Lisbeth et al 2001 Fijaci n biol gica de N por Pachecoa venezualensis en dos suelos de sabana Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 11 POSGRADOS XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo aa Mendez N y R Jes s 2002 Relaci n entre el peso seco total y los caracteres vegetativos y la nodulaci n de plantas de man Arachis hypogaea L Revista UDO Agr cola Departamento de agronom a Universidad de Oriente Matur n Venezuela 46 53 p Somasegaran P H Hoben y J Halliday 1981 Ejercicios pr cticos en tecnolog a Rhizobium Leguminosa Trad al espa ol por Cuautle Evangelina Chapingo M xico 87 p Soria N 2008 Nutrici n foliar y defensa natural de las plantas XI Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo Memorias de conferencias magistrales Quito 11 p Temprano F 2006 Evaluaci n de la capacidad simbi tica de aislamientos de Sonorhi
20. stre y colect el suelo de los sitios de origen de las leguminosas a una profundidad de 20 cm se separ una muestra de 500 g por especie para someterla al an lisis qu mico de laboratorio y el resto se proces como sustrato Se coloc 1 kg de sustrato en cada macetero previamente desinfectado e identificado Frente a los bajos contenidos nutritivos de los suelos sustratos se prepar soluciones nutritivas minerales tendientes a suplir las deficiencias mediante la formulaci n de soluciones madre como se expresa en la Tabla 1 Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 1 POSGRADOS MADE y XII Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del Suelo U4 ap la ia So S vos o Tabla 1 Composici n de soluciones nutritivas Catacocha 2 008 N Sustancia nutritiva Concentraci n Cantidad para 1 litro 1 KH PO 1M 136 1 g 2 K HPO 0 2 M 174 18 g 3 MgS0 7H 0 1M 251 51 g 4 Ca NOy 4H 0 1M 236 15 g 5 Na NO 1M 85 84 g 6 MnCl 4H 0 0 02 g 7 ZnCl 0 1 g 8 CuCl 2H 0 0 02 g 9 HBO 0 648 g 10 Cloruro f rrico 5 mg 11 Molibdato de Sodio 0 04 g Las soluciones nutritivas aplicadas por tratamiento fueron Soluci n A 1 2 3 4 5 6 7 8 Para aplicar al tratamiento nitrogenado Soluci n B 1 2 3 6 7 8 Para aplicar al testigo y al tratamiento inoculado Soluci n C 9 Soluci n D 10 5 Para aplicar a todos los tratamientos ensayo Soluci n E 11 La
21. zobium medicae procedentes de suelos de la Dehesa Andaluza y Extreme a con Medicago polimorpha Revista recursos silvopastoriles 95 100 p Zwart M et al 2005 Coberturas y la salud del suelo Revista EARTH Tierra Tropical 1 1 9 20 Las Mercedes del Gu cimo Costa Rica Santo Domingo 17 19 de Noviembre del 2010 12 PESTERADOS
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