PARACHECK MIF & BAILENGER
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1. L Truant Stephen H Elliott Michael T Kelly and Jerome H Smith 1981 Comparison of Formalin Ethyl Ether Sedimentation Formalin Ethyl Acetate Sedimentation and Zinc Sulfate Flotation Techniques for Detection of Intestinal Parasites J Clin Microblol Vol 13 No 5 882 884 Janitschke K et al 1986 Empfehlungen zur Laboratoriumsdiagnostik der Amoblasis Giardiasis Kryptosporidiose und weiterer Kokzidiosen herausgegeben von der Kommission des Bundesgesundheitsamtes Laboratoriumsdiagnostik Intestinaler und Pulmonaler Parasitosen Lab med 10 118 123 Mehlhorn H Duwel D Raether W 1986 Diagnose und Therapie der Parasiten von Haus Nutz und Heimtieren Gustav Fischer Verlag Stuttgart New York 1 1 Methoden Melvin D and M M Brooke 1974 Laboratory procedures for the diagnosis of intestinal parasites U S Department of Health Education and Welfare publication no CDC 75 8282 Center for Disease Control Atlanta GA Szabados A Mayerhofer K Tybus K Forgacs S 1992 Parasitologische StuhidiagnosUk Vorstellung eines neuentwickelten Konzepts mta 7 1992 9 894 899 ALL DIAG 8 rue Ettor Bugatti CS 28006 67038 STRASBOURG Cedex France T l 33 0 3 88 78 80 88 Fax 33 0 3 88 78 76 78 Site www alldiag com Mail infomalldiag com2. a OO 3 INSTRUCCIONES PARA SU USO PARACHECK MIF amp BAILENGER REF 5434 V 11 Significado de los pictogramas Pictogramas Significado Atenci n ver instrucciones de uso Solo para diagn stico in vitro Ti Conservar 2 entre 2 y 30 C Pruebas por kit E REC Directive 98 79 CE ALLDIAG 10 rue Ettor Bugatti BP 28006 67038 STRASBOURG Cedex 2 France Site www alldiag com E mail info Malldiag com PARACHECK MIF amp BAILENGER Sistema optimizado de concentraci n para el an lisis de par sitos en muestras de heces humanas y animales Ref 5434 Para su uso como diagn stico in vitro 1 INSTRUCCIONES Y PRINCIPIO DE LA PRUEBA Los dos m todos usados por el kit Paracheck permiten concentrar los elementos parasitaria cuando son muy escasos como para ser detectados por examen directo El kit Paracheck permite transportar almacenar filtrar y concentrar la muestra de heces 1 M todo BAILENGER Este m todo realiza una soluci n acuosa de heces y una diluci n de l pidos acetato de etilo Despu s de centrifugaci n se obtiene un sedimento liberado de todos los residuos lip filos Con este m todo se utiliza cido ac tico para ajustar la soluci n a pH 5 Este pH se reconoce como el m s favorable en la concentraci n de los elementos parasitarios 2 M todo MIF Esta t cnica es especialmente eficaz para la detecci n de huevos de schistosoma y scaris as como quistes de a
3. cilitar la elaboraci n del porta La muestra se debe examinar al menos dos veces para mejorar la exactitud de los resultados 13 Se recomienda la ampliaci n X 10 para un primer an lisis y para detectar los elementos m s grandes P Ej Helmintos huevos y larvas X 40 1000 para los protozoos los hongos y sobre todo levaduras son indicador de un proceso correcto de concentraci n Eosina L quido A Conservaci n m dio MIF o BAILENGER L quido B Etil acetato no suministrado L quido C Lugol suministrado para t cnica MIF Fig 7 fase de separaci n Fig 8 diagnostico con microscopio o 5 PRECAUCIONES Este kit contiene componentes t xicos por inhalaci n contacto con la piel o ingesti n Se recomienda trabajar con ventilaci n Aseg rese de que todos los viales quedan bien cerrados despu s de cada uso Las muestras pueden estar contaminados por agentes infecciosos Considere el material directamente en contacto con la muestras como contaminado Durante las pruebas tomar las precauciones necesarias para la manipulaci n de productos infecciosos Use una bata guantes y protecci n ocular durante la prueba Evitar todo contacto con la piel y ojos No comer beber o fumar durante la manipulaci n de muestras y durante la realizaci n de las pruebas S lo para diagn stico in vitro No utilice despu s de la fecha de caducidad Contiene Azida s dica NaNs 6 BIBLIOGRAFIA Allan
4. mebas y flagelados Tambi n se puede concentrar trofozo tos de ciertas amebas como Dientamoeba fragilis que quedan perfectamente identificables 2 COMPOSICI N DEL KIT gt 25 tubos 3 3ml del soluci n Bailenger Composici n de la soluci n del MIF CH COOH Acetato s dico Azida s dica NaNs Xi irritante gt 25 tubos 3 3ml del soluci n MIF Composici n de la soluci n del MIF Formaldeh do Glicerol gt Un frasco gotero de Eosina 3 ml gt Un frasco gotero de Lugol 3 ml gt 50 filtros n r n P Un manual de instrucciones t cnicas 3 ALMACENAMIENTO Y CADUCIDAD Los reactivos est n listos para su uso Todos los elementos del kit se pueden mantener a temperatura ambiente No utilizar despu s de la fecha de caducidad indicada en el kit NO CONGELAR 4 PROCEDIMIENTO 1 A adir 2 gotas de eosina en la soluci n de MIF Fig 1 2 Depositar la muestra en el tubo que contiene 3 3 ml de Bailenger o MIF L quido A Volumen de muestra Para una concentraci n ptima el colector de la muestra debe estar lleno hasta el ras del borde Fig 2 En el caso de heces l quidas recoger 1 ml La muestra se puede conservar en el tubo a temperatura ambiente 3 Una vez cerrado el tubo de muestra se homogeneiza V rtex o manual a fin de separar la muestra del colector y repartirla por el medio Fig 3 4 Antes de a adir disolvente se quitan el colector y el tap n de rosca del tubo de muestra 5 A adi
5. r 1 20 1 25 ml de acetato de etilo l quido B no suministrado al tubo de muestra Fig 4 Durante este paso con el tubo del MIF se puede a adir 0 2 ml de Lugol L quido C o esperar al paso n 11 6 Agitar bien el tubo de muestra 10 segundos con v rtex o 20 segundos con agitaci n manual A partir de este momento la muestra tiene que estar bien disuelta en la fase l quida 7 El tubo de filtro se conecta al tubo de ensayo y el sistema se une con un giro de 180 Fig 5 8 Se realiza una filtraci n activa con la mano hasta la fase l quida se transfiere al tubo de muestra Fig 6 9 Dejar reposar entre 1 y 2 minutos y la suspensi n del filtrado se centrifuga entre 5 y 10 minutos a 1 500 2 000 g varias horas de reposo conducen igualmente a la separaci n de fases 10 Despu s de retirar el tubo de muestra y cuando se elimina la fase l quida del tubo de filtro el sedimento contiene los elementos par sitos protozoos huevos de helmintos estados larvarios etc Fig 7 11 Si se utiliza el m todo MIF es posible una coloraci n de los sedimentos en el tubo de filtro con unas gotas de Lugol l quido C suministrado para una mejora de las identificaciones tambi n puede a adirse directamente sobre el porta 12 Una parte del sedimento se transfiere al porta Fig 8 Si no se utiliza el l quido C puede ser til a adir unas gotas de l quido de una soluci n fisiol gica o soluci n salina y mezclar con el concentrado para fa
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