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MANUAL DE INSTRUCCIONES
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1. Wiii MANUAL DE INSTRUCCIONES REDIAR REDIAR LISS Aditivo Soluci n potenciadora de baja fuerza i nica RESUMEN Se ha observado que las reacciones ant geno anticuerpo se ven potenciadas al reducir la fuerza i nica del medio de reacci n La fuerza i nica es uno de los factores m s importantes que determina la tasa y la cantidad de captaci n de anti cuerpos por parte de los eritrocitos El uso de medios de reacci n de baja fuerza i nica permite disminuir el tiempo de incubaci n y potenciar las reacciones de los anticuerpos sin incrementar las reacciones inespec ficas PRINCIPIO REDIAR LISS Aditivo es utilizado para reducir la fuerza i nica del medio de reacci n en los procedimientos de detecci n e identificaci n de anticuerpos y en las pruebas de compatibilidad La presencia de este reactivo refuerza la interacci n ant geno anticuerpo durante la incubaci n REACTIVO Se provee listo para su uso REDIAR LISS Aditivo est dise ado para ser agregado a las mezclas de suero y c lulas a diferencia de los utilizados para resuspensi n celular Contiene Glicina NaCl Na2HPO4 NaH2P04 2H20 y Alb mina Adem s contiene 0 9 g l de azida de sodio como preservante OBTENCI N Y PREPARACI N DE LAS MUESTRAS Obtener la muestra de sangre mediante una t cnica as ptica Para los proce dimientos de detecci n e identificaci n de anticuerpos y para las pruebas de compatibilidad se debe utilizar suero fresco Si la prueba se de
2. L Antiglobulin test in low ionic strength salt solution for rapid antibody screening and crossmatching Vox Sang 1974 26 53 2 Moore HC And Mollison PL Use of a low onic strength medium in manual tests for antibody detection Transfusion 1976 16 291 ELABORADO POR INVERCLYDE BIOLOGICALS _ ga 4 Teal Court Strathclyde Business Park Bellshill Lanarkshire ML4 FS 3NN Scotland IMPORTADO y FRACCIONADO POR FELSAN S R L Palpa 3811 C1427EBG C A B A Argentina Dir T cnico Roque FELSAN Luis Espinosa Consultas T cnicas laboratorioOfelsan com ar PRODUCTO DE DIAGN STICO DE USO IN VITRO AUTORIZADO POR LA ADMINISTRACI N NACIONAL DE MEDICAMENTOS Y TECNOLOG A M DICA Certificado N 5915 06
3. ar el sobrenadante en busca de hem lisis agitar suavemente para resuspender el bot n celular y examinar la aglutinaci n Registrar los resultados 8 Lavar exhaustivamente 3 4 veces como m nimo con salina isot nica cuidando de descartar la salina completamente luego de cada lavado 9 Agregar una o dos gotas de reactivo antiglobulina humana seg n las instrucciones del fabricante Mezclar bien Centrifugar a 1000 g durante 10 segundos o a otra combinaci n adecuada de g y tiempo Resuspender el bot n celular y examinar la presencia o ausencia de aglutinaci n Las reacciones negativas pueden examinarse mediante una ayuda ptica Registrar los resultados CONTROLES Los controles adecuados son necesarios en todos los procedimientos de laboratorio 1 Para confirmar la validez de las reacciones negativas se pueden utilizar c lulas sensibilizadas con IgG seg n las instrucciones del fabricante 2 La capacidad de este producto de potenciar la reactividad debe ser verificado peri dicamente Se puede ensayar con intervalos de una semana anticuerpos Rh d biles incompletos conocidos para evidenciar si la actividad potenciadora sigue presente 3 Se recomienda realizar un autocontrol para las pruebas de compatibilidad y los estudios de identificaci n de anticuerpos Tambi n se puede llevar a cabo un autocontrol en las pruebas de detecci n de anticuerpos INTERPRETACI N DE LOS RESULTADOS La hem lisis o la aglutinaci n repr
4. esentan un resultado positivo e indican la pre sencia de una reacci n ant geno anticuerpo Los resultados negativos se deben verificar por el agregado de c lulas control sensibilizadas con IgG Si las c lulas sensibilizadas no son aglutinadas las pruebas negativas deben ser conside radas inv lidas y el test debe ser repetido PRECAUCIONES PARA EL USO Y LA ELIMINACI N Este reactivo contiene 0 09 de azida s dica EC N 247 852 1 y est clasificado como nocivo Xn R22 nocivo si se ingiere La azida s dica puede reaccionar con plomo y cobre para formar compuestos explosivos Si se descarta por el desagote enjuagar con grandes vol menes de agua para prevenir la acumulaci n de azidas en las ca er as No usar el producto en caso de observarse turbidez Para uso diagn stico in vitro No congelar No emplear m s all de la fecha de caducidad NOTAS 1 Es importante que los vol menes de gl bulos rojos suero plasma y LISS Aditivo sean agregados como se indica en el Procedimiento o manteniendo la relaci n 1 1 suero plasma LISS Aditivo 2 Los anticuerpos fr os tienen menor tendencia a adherirse a los gl bulos rojos si la soluci n se mantuvo a 19 25 C durante su uso 3 No utilizar si se observa turbidez ALMACENAMIENTO Conservar entre 2 8 C Antes de su uso el reactivo debe alcanzar temperatura ambiente para evitar los inconvenientes creados por los anticuerpos fr os BIBLIOGRAF A 1 Low B and Messeter
5. morara la muestra se conservar a 2 8 C por no m s de 48 hs Los sueros conservados por m s de 48 horas o los plasmas provenientes de muestras con anticoagulantes pueden ser usados sin embargo esto podr a provocar fallas en detectar los anticuerpos dependientes del complemento Los eritrocitos a emplear en la prueba podr n ser gl bulos rojos reactivos comerciales muestras obtenidas con anticoagulante o c lulas de muestras coaguladas PROCEDIMIENTO Materiales provistos REDIAR LISS Aditivo Materiales adicionales requeridos no provistos Tubos de ensayo 12x75 mm o 10x75 mm soluci n salina de fuerza i nica normal pipetas incubador o ba o termostatizado a 37 C ayuda ptica centr fuga cron metro reactivo antiglobulina humana y c lulas sensibilizadas con IgG Procedimiento para la detecci n identificaci n de anticuerpos y pruebas de compatibilidad 1 Lavar los gl bulos rojos 3 veces en Soluci n Salina de Fuerza l nica Normal o en Buffer Fosfato Salino PBS pH 7 00 2 Preparar una suspensi n globular al 3 en Soluci n Salina de Fuerza l nica Normal o en PBS 3 Colocar dos gotas de suero o plasma en un tubo de ensayo limpio y rotulado 4 Agregar una gota de la suspensi n globular 5 Agregar dos gotas de REDIAR LISS Aditivo Mezclar bien 6 Incubar durante 15 minutos a 37 C en un ba o h medo 7 Centrifugar inmediatamente por 10 segundos a 1000 g o a otra combinaci n adecuada de g y tiempo Examin
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