FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Beta-Catenin Clon β
Contents
1. Dako Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 119492 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Beta Catenin Clon fB Catenin 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo IS702 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Beta Catenin Clone f catenin 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo resulta til en la identificaci n de tumores desmoides 1 y c ncer colorrectal 2 Los anticuerpos para la B catenina se pueden utilizar tambi n para la identificaci n del adenoma de colon 3 La interpretaci n de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un anatomopat logo cualificado en el contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas Las cateninas son prote nas citoplasm ticas con estructuras similares a las que se ha clasificado como alfa a beta B y gamma y en funci n de su movilidad electrofor tica 4 5 El gen de la B catenina se encuentra en el locus 3p21 y codifica una prote na de 88 kDa 4 5 Esta prote na citoplasm tica es po2. dos en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 Las c lulas marcadas con el anticuerpo muestran una tinci n de membrana Las c lulas neopl sicas pueden mostrar tinci n citoplasm tica difusa y nuclear Tejidos normales en el colon las c lulas epiteliales muestran una reacci n a la tinci n de moderada a fuerte En el h gado los hepatocitos muestran una tinci n de d bil a moderada Tejidos anormales el anticuerpo marc 24 30 tumores desmoides espor dicos y 8 12 tumores desmoides en pacientes con poliposis adenomatosa familiar 1 En un estudio de micromatices de tejidos acerca del c ncer colorrectal 657 1310 mostraron una reacci n de tinci n nuclear 1068 1310 citoplasm tica y 1107 1310 de membrana 2 El anticuerpo marc 1 1 adenomas de colon 1 Carlson JW Fletcher CDM Immunohistochemistry for fB catenin in the differential diagnosis of spindle cell lesions analysis of a series and review of the literature Histopathol 2007 51 509 14 2 Lugli A Zlobec l Minoo P Baker K Tornillo L Terracciano L et al Prognostic significance of the wnt signalling pathway molecules APC catenin and E cadherin in colorectal cancer a tissue microarray based analysis Histopathol 2007 50 453 64 3 Iwamoto M Ahnen DJ Franklin WA Maltzman TH Expression of catenin and full length APC protein in normal a
3. iliary debe configurarse a none De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir colon e h gado y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resulta
4. livalente y es imprescindible para el anclaje mediado por cadherina as como para la organizaci n del citoesqueleto 4 La f catenina interviene asimismo en la regulaci n de la expresi n del gen como mediador de la ruta de se alizaci n del Wnt Los niveles de B catenina celular los regula de forma rigurosa un complejo multiproteico compuesto por serina treonina quinasa GSK3P el gen supresor de tumores APC y la axina que facilita la fosforilaci n y la posterior degradaci n de la prote na B catenina La desregulaci n de la degradaci n de la f catenina conduce a la acumulaci n citoplasm tica de la prote na seguido de la translocaci n al n cleo La f catenina nuclear forma complejos con prote nas de uni n a ADN como por ejemplo TCF y LEF activando la transcripci n g nica 6 Consulte las General Instructions for Immunohistochemical Staining de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n y 9 Limitaciones generales Anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar suministrado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de azida de sodio Clon fB catenin 1 Isotipo lg G1 kappa Prote na de fusi n B catenina GST C
5. nd neoplastic colonic tissue Carcinogenesis 2000 21 1935 40 4 Bracke ME Van Roy FM Mareel MM The E cadherin catenin complex in invasion and metastasis Cur Top Microbiol Immunol 1996 213 Pt 1 123 61 5 Ozawa M Baribault H Kemler R The cytoplasmic domain of the cell adhesion molecule uvomorulin associates with three independent proteins structurally related in different species EMBO J 1989 8 1711 7 6 Willert K Nusse R Curr Opin Genet Dev 1998 8 95 102 7 Antibody Certification On file at DakoCytomation Corporation Explicaci n de los s mbolos Refere ncia s 8 C Limitaci n de temperatura e Fecha de caducidad Dispositivo m dico para Contiene suficie nte para X diagn stico in vitro lt n gt ensayos Fabricante Con sulte la s instruccio nes 5 di 1 MA de uso LOT REASON AA A 119492 001 15702 ES SSM 2009 02 02 p 2 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
6. on High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus usando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen de aplicaci n 300 uL Autoprograma BETACAT sin contratinci n o BETACATH con contratinci n El paso Auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Aux
7. terminal recombinante 7 En la inmunotransferencia de Western de las c lulas A431 del epitelio humano el anticuerpo marca una banda correspondiente a la prote na B catenina humana No se observ reacci n cruzada con la a catenina ni la y catenina 7 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaN un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto derivado de fuentes biol gicas deber n aplicarse los procedimientos adecuados de manejo 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n no utilizada debe desecharse con arreglo a las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario debe comprobarlas No existen signos evidentes que indiquen la inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea con las mues
8. tras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no pueda explicarse por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche de la existencia de un problema con un anticuerpo cont ctese con la Asistencia T cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 15702 ES SSM 2009 02 02 p 1 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Soluti
Download Pdf Manuals
Related Search