FLEX Polyclonal Rabbit Anti-Human Alpha-1-Antitrypsin
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1. 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 172. ales 1 y leucocitos polimorfonucleares monocitos y sus precursores Los linfocitos las c lulas E en roseta los linfocitos activados con Con A linfocitos citol ticos espont neos eritrocitos y megacariocitos son negativos 4 Tejidos anormales En 13 pacientes con diferentes enfermedades hep ticas el anticuerpo marc los hepatocitos con y sin gl bulos AAT En muestras con gl bulos se puede usar una diluci n mayor del anticuerpo que indica una mayor concentraci n de AAT en estas muestras 1 1 Clausen PP Immunohistochemical demonstration of alpha 1 antitrypsin in liver tissue A methodological investigation Acta path microbiol scand Sect A 1980 88 299 306 2 Leong ASY Cooper K Leong FJWM Manual of diagnostic antibodies for immunohistology London Oxford University Press 1999 p 7 8 3 Perlmutter DH Liver injury in amp 1 antitrypsin deficiency an aggregated protein induces mitochondrial injury J Clin Invest 2002 110 1579 83 4 Hau y Nilsson M Skovgaard Jensen H J de Souza A Eriksen E Wandall LT Analysis of animal serum proteins using antisera against human analogous proteins Scand J Lab Anim Sci 1990 17 3 7 Explicaci n de los s mbolos e C Limitaci n de temperatura Fecha de caducidad Dispositivo m dico para Contiene suficiente para lt n gt 116618 002 IS505 ES MNI 2009 12 04 p 2 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax
3. car cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los 15505 ES MNI 2009 12 04 p 1 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluid
4. ducto contiene azida de sodio NaNz un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse de acuerdo con las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario debe comprobarlas No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras de pacientes En caso de observarse una coloraci n inesperada que no pueda explicarse por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche de la existencia de un problema con un anticuerpo cont ctese con la Asistencia T cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para mar
5. hep tica cr nica y carcinoma hepatocelular La forma cl sica de deficiencia de AAT se asocia con la acumulaci n de pol meros AAT en el ret culo endopl smico de las c lulas hep ticas 2 3 AAT est presente en hepatocitos normales histiocitos y monocitos y en una amplia variedad de tumores de diferenciaci n epitelial y mesenquimal 2 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n 9 Limitaciones generales El anticuerpo policlonal de conejo listo para su uso se suministra en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de NaN Alfa 1 antitripsina aislada de plasma humano El anticuerpo reacciona con la alpha 1 antitripsina humana Las trazas de anticuerpos contaminantes se eliminaron mediante absorci n de la fase s lida con prote nas plasm ticas humanas Inmunoelectroforesis cruzada Solamente aparece el arco de precipitaci n de alfa 1 antitripsina al utilizar 12 5 uL de Dako n mero de cat logo A0012 por cm de rea de gel frente a 2 uL de plasma humano Tinci n Coomassie Brilliant Blue 1 Para usuarios profesionales 2 Este pro
6. los en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n con hematoxicilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras de pacientes El control positivo de tejido debe incluir am gdala e h gado y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Rabbit Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15600 El patr n de tinci n celular es citoplasm tico Tejidos normales El anticuerpo marca hepatocitos norm
7. os en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus ne de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus utilizando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen de aplicaci n 300 uL Autoprogram AAT sin contratinci n o AATH con contratinci n El paso auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso auxiliar debe configurarse a ninguno De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protoco
8. y Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 116618 002 C FLEX Polyclonal Rabbit Anti Human Alpha 1 Antitrypsin Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 15505 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Polyclonal Rabbit Anti Human Alpha 1 Antitrypsin Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo resulta til para la identificaci n de alfa 1 antitripsina por ejemplo en los hepatocitos en la deficiencia de alfa 1 antitripsina 1 La interpretaci n cl nica de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un pat logo calificado dentro del contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas Alfa 1 antitripsina AAT es una glucoprote na de 51 kDa que principalmente se sintetiza en el h gado Es una prote na de fase aguda y funciona como el principal inhibidor de las serina proteasas tales como las elastasa colagenasa y quimotripsina de los neutr filos Los individuos con niveles gen ticamente bajos de AAT s rica presentan riesgo de desarrollar enfisema pulmonar enfermedad
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