TG Color GPO-PAP AA líquida
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1. CE LINEA LIQUIDA TG Color GPO PAP AA M todo enzim tico para la determinaci n de triglic ri dos en suero o plasma SIGNIFICACION CLINICA Los triglic ridos son l pidos absorbidos en la dieta y tambi n producidos en forma end gena a partir de los carbohidratos Su medici n es importante en el diagn stico y manejo de las hiperlipidemias Estas enfermedades pueden tener origen ge n tico o ser secundarias a otras tales como nefrosis dia betes mellitus y disfunciones end crinas El aumento de tri glic ridos se ha identificado como un factor de riesgo en en fermedades ateroscler ticas FUNDAMENTOS DEL METODO El esquema de reacci n es el siguiente lipoprotein lipasa triglic ridos gt glicerol cidos grasos ii ATP glicerol kinasa glicerol gt glicerol 1 P ADP glicerol 1 fosfato O gt H O dihidroxiacetonafosfato POD 2 H O 4 AF clorofenol gt quinonimina roja REACTIVOS PROVISTOS A Reactivo A soluci n conteniendo buffer Good pH 6 8 clorofenol lipoprotein lipasa LPL glicerol kinasa GK gli cerol fosfato oxidasa GPO peroxidasa POD adenosina trifosfato ATP y 4 aminofenazona 4 AFP S Standard soluci n de glicerol 2 26 mmol l equivale a 2 g l de triole na Concentraciones finales Buffer Good seriinin aida 50 mmol l pH 6 8 Ceilono i1 plo EEEE E A tas ai 2 mmol l lipoprotein lipasa siirinsesi gt 800 U I 2 500 U I A2. b Recuperaci n agregando cantidades conocidas de trio le na a distintos sueros se obtuvo una recuperaci n entre 96 y 101 para todo el rango de linealidad del m todo c Linealidad la reacci n es lineal hasta 10 g l de triglic ri dos Para valores superiores repetir la determinaci n con muestra diluida 1 2 con soluci n fisiol gica Multiplicar el re sultado obtenido por la diluci n efectuada d L mite de detecci n depende del fot metro empleado En espectrofot metros el cambio m nimo de concentraci n detectable en las condiciones de reacci n descriptas para una variaci n de absorbancia de 0 001 D O ser aproxima damente de 0 009 g l PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Para las instrucciones de programaci n debe consultarse el Manual del Usuario del Analizador en uso Para la calibraci n debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab de acuerdo a los requerimientos del analizador PRESENTACION 1x 100 ml C d 1780111 4x 100 ml C d 1780112 4 x 60 ml C d 1009318 4 x 60 ml C d 1009632 8 x 50 ml C d 1009274 BIBLIOGRAFIA Fossati P Clin Chem 28 10 2077 1982 McGowan M W et al Clin Chem 29 3 538 1983 Tietz N W Fundamentals of Clin Chem W B Saunders Co Philadelphia Pa 1970 p g 329 Expert Panel of National Cholesterol Education Program JAMA 285 19 2486 2001 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory T
3. E E A E S gt 1500 U I O D E EE E E E E E gt 900 U I 2 mmol l A E A EEE E E 0 4 mmol l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab para la t cnica autom tica INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos listos para usar PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagn stico in vitro Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de an lisis cl nicos No provisto en todas las presentaciones Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos son estables en refrigerador 2 10 C y al abrigo de la luz hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS El Reactivo A puede presentar una coloraci n rosada que no afecta su funcionamiento Lecturas del Blanco superiores a 0 250 D O o lecturas del Standard anormalmente bajas son indicios de deterioro del Reactivo A En tal caso desechar MUESTRA Suero o plasma a Recolecci n previo ayuno de 12 a 14 horas obtener sue ro o plasma Separar de los gl bulos rojos dentro de las 2 horas de extracci n b Aditivos en caso de emplear plasma se recomienda el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtenci n c Sustancias interferentes conocidas no se ob
4. ests AACC Press 4 ed 2001 864126522 01 p 2 9 Simbolos Los siguientes s mbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagn stico de Wiener lab CE Este producto cumple con los requerimientos pre vistos por la Directiva Europea 98 79 CE de pro ductos sanitarios para el diagn stico in vitro Representante autorizado en la Comunidad Eu ropea Uso diagn stico in vitro Contenido suficiente para lt n gt ensayos Fecha de caducidad L mite de temperatura conservar a No congelar Riesgo biol gico Volumen despu s de la reconstituci n Contenido N mero de lote SES E ag Elaborado por Nocivo Corrosivo Ca stico Irritante Consultar instrucciones de uso Calibrador Control Control Positivo Control Negativo N mero de cat logo el Wiener Laboratorios S A I C Riobamba 2944 2000 Rosario Argentina http www wiener lab com ar Dir T c Viviana E C tola Bioqu mica W Wiener lab Producto Autorizado A N M A T Cert N 3803 00 864126522 01 p 3 9 2000 Rosario Argentina UR120903
5. servan interferencias por bilirrubina hasta 15 mg dl hem lisis mar cadas no interfieren en la determinaci n Referirse a la bibliograf a de Young para los efectos de las drogas en el presente m todo d Estabilidad e instrucciones de almacenamiento los triglic ridos en suero son estables 3 d as en refrigerador 2 10 C No congelar MATERIAL REQUERIDO no provisto Espectrofot metro Micropipetas y pipetas para medir los vol menes indicados Cubetas espectrofotom tricas Ba o de agua a 37 C Reloj o timer CONDICIONES DE REACCION Longitud de onda 505 nm Temperatura de reacci n 37 C Tiempo de reacci n 5 minutos Volumen de muestra 10 ul Volumen de Reactivo A 1 ml Volumen final de reacci n 1 01 ml 864126522 01 p 1 9 PROCEDIMIENTO Homogeneizar la muestra antes de usar especialmente frente a sueros lechosos En tres cubetas espectrofotom tricas marcadas B Blan co S Standard y D Desconocido colocar B S D Muestra E 10ul Standard 10ul Reactivo A 1 mi 1 mi 1 mi Mezclar incubar 5 minutos a 37 C o 20 minutos a tempe ratura ambiente 18 25 C Enfriar y leer en espectrofot metro a 505 nm llevando el aparato a cero con agua des tilada Microt cnica Seguir el procedimiento indicado anteriormente pero utili zando 5 ul de Muestra y 500 ul de Reactivo A ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL El color de reacci n final es estable 60 min
6. utos por lo que la absorbancia debe ser le da dentro de este lapso CALCULO DE LOS RESULTADOS Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las lecturas corregidas para los c lculos 2 g l TG g l D x factor factor CONVERSION DE UNIDADES Triglic ridos g l 0 01 x Triglic ridos mg dl Triglic ridos mg dl x 0 0113 Triglic ridos mmol l METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Standatrol S E 2 niveles con concentraciones conocidas de triglic ridos con cada determinaci n VALORES DE REFERENCIA El panel de expertos del National Cholesterol Education Program NCEP provee los siguientes valores de Triglic ridos Deseable lt 1 50 g l Moderadamente elevado a elevado 1 50 1 99 g l Elevado 2 00 4 99 g l Muy elevado gt 5 00 g l No obstante se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos o valores de referencia LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los Blancos Las contaminaciones con glicerol producen resultados falsa mente aumentados PERFORMANCE a Reproducibilidad procesando simult neamente 20 re plicados de las mismas muestras se obtuvieron los siguien tes datos Nivel D S C V 0 76 g l 0 039 g l 0 50 3 73 g l 0 060 g l 0 16
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