FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD43 Clon DF-T1
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1. el ant geno CD43 puede asociarse con la mol cula 1 de adhesi n intercelular ICAM 1 CD54 Resultados contradictorios dificultaron la tarea de llegar a un acuerdo desde el punto de vista fisiol gico de la funci n de CD43 y hasta la fecha se ha suministrado informaci n para corroborar las siguientes funciones antiadhesi n adhesi n se alizaci n e interacci n citoesquel tica 3 La mol cula CD43 se expresa generalmente en niveles altos en todos los leucocitos excepto la mayor a de los linfocitos B en reposo La expresi n en plaquetas es d bil Las mol culas CD43 se pierden velozmente de la superficie de linfocitos y neutr filos debido al desprendimiento proteol tico despu s de la activaci n con diversos est mulos 2 A pesar de que los linfocitos B peque os normales son CD43 negativos la mayor a de los linfomas de c lulas B de bajo grado son positivos Sin embargo la leucemia de c lulas pilosas el linfoma MALT y el linfoma de centro folicular en general son CD43 negativos Los linfoma de c lulas T perif ricas son con m s frecuencia positivos que negativos Se realiz un estudio en 28 tumores mieloides extramedulares todos fueron altamente CD43 positivos independientemente de la diferenciaci n de las c lulas mieloides 1 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento2. met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse con arreglo a las normativas locales provinciales y nacionales IS636 ES MNI 2009 12 04 p 1 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de rendimiento Referencias bibliogr ficas 117419 003 Almacenar a 2 8 C No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas es responsabilidad del usuario comprobar dichas condiciones No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras del paciente Si observa una tinci n inesperada que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos del laboratorio y sospecha de la existencia de un problema con el anticuerpo p ngase en contacto con nuestros serv
3. n de tinci n fuerte mientras que las c lulas T aisladas as como los macr fagos en los centros germinales muestran una reacci n de moderada a fuerte Tejidos anormales en malignidades hematolinfoides 10 15 linfomas de c lulas T fueron positivos al anticuerpo De 20 linfomas de c lulas B 4 6 c lulas peque as y 1 2 c lulas peque as segmentadas difusas centroc ticas fueron positivas mientras que la totalidad de 6 leucemias foliculares 2 de c lulas grandes difusas y 2 de c lulas pilosas reaccionaron de forma negativa con el anticuerpo 4 En los meningiomas se document el marcado de c lulas T infiltradas con el anticuerpo en 29 de 34 casos 7 En un an lisis inmunohistoqu mico que incluy 51 casos de m ltiple mieloma plasmacitoma se observ marcado positivo con el anticuerpo DF T1 en el 59 de los casos 8 Se observ el descenso de la expresi n de la mol cula CD43 en la mayor a de las c lulas hematopoy ticas en 3 de 32 pacientes aquejados del s ndrome mielodispl sico 9 1 Leong A Cooper K Leong F Manual of diagnostic antibodies for immunohistology 2 edition Greenwich Medical Media 2003 p 167 170 2 Horejsi V CD guide CD43 In Mason D Andr P Bensussan A Buckley C Civin C Clark E et al editors Leucocyte typing VII White cell differentiation antigens Proceedings of the 7th International Workshop and Conference 2000 Jun 19 23 Harrogate United Kingdom New York Oxford University Pres
4. 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n 9 Limitaciones generales Anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar suministrado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de azida de sodio Clon DF T1 4 Isotipo IgG1 kappa C lulas KG1 l nea celular mielobl stica La transferencia de Western y la reactividad inmunohistoqu mica del anticuerpo resulta id ntica a la de los anticuerpos con c lulas CD43 agrupadas Adem s el anticuerpo reacciona intensamente a las c lulas COS 7 l nea celular de ri n de mono transfectadas con el gen CD43 mientras que las c lulas control transfectadas s lo con el vector son negativas 4 El anticuerpo produce una r pida y fuerte agregaci n entre los leucocitos normales y entre las l neas celulares T y mieloides monoc ticas 5 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida s dica NaNs un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificado como peligroso la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas
5. dad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El tejido de control positivo debe incluir am gdala y las c lulas y estructuras deben mostrar patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 19750 Las c lulas marcadas con el anticuerpo muestran una tinci n de membrana Tejidos normales la mayor a de las c lulas en la corteza y m dula del timo se ven fuertemente marcadas Se realiz un an lisis en 36 muestras con c lulas plasm ticas reactivas que demostr un marcado de m s del 196 de las c lulas plasm ticas en el 28 de los casos 6 En la am gdala las numerosas c lulas T en la zona T muestran una reacci
6. icios t cnicos El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el sig
7. ion of CD43 in RAEB and RAEB T patients Report of 3 cases Am J Hematol 2000 63 20 7 Explicaci n de los s mbolos O E E Limitaci n de temperatura Fecha de caducidad Dispositivo m dico para Contiene suficiente para Fabrican _ diagn stico in vitro in vitro lt n gt m ensays ss eus O 7 7 7 7 1 uso 117419 003 15636 ES MNI 2009 12 04 p 3 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
8. s Inc 2002 p 790 1 3 Ostberg JR Barth RK Frelinger JG The Roman god Janus a paradigm for the function of CD43 Immunology Today 1998 19 546 50 IS636 ES MNI 2009 12 04 p 2 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 4 Stross WP Warnke RA Flavell DJ Flavell SU Simmons D Gatter KC et al Molecule detected in formalin fixed tissue by antibodies MT1 DF T1 and L60 Leu 22 corresponds to CD43 antigen J Clin Pathol 1989 42 953 61 1 5 de Smet W Walter H van Hove L A new CD43 monoclonal antibody induces homotypic aggregation of human leucocytes through a CD11a CD18 dependent and independent mechanism Immunology 1993 79 46 54 6 Beschorner R Horny HP Petruch UR Kaiserling E Frequent expression of haemopoietic and non haemopoietic antigens by reactive plasma cells an immunohistochemical study using formalin fixed paraffin embedded tissue Histol Histopathol 1999 14 805 12 7 Be L Merk SJ Nyland H An immunohistochemical study of monuclear cells in meningiomas Neuropathol Appl Neurobiol 1992 18 548 58 8 Petruch UR Horny HP Kaiserling E Frequent expression of haemopoietic and non haemopoietic antigens by neoplastic plasma cells an immunohistochemical study using formalin fixed paraffin embedded tissues Histopathology 1992 20 35 40 9 Kyriakou DS Alexandrakis M Tzardi M Stephanaki D Eliopoulos GD Downregulat
9. uiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus usando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTUS volumen de aplicaci n 300 uL Autoprogram CD43 sin contratinci n o CD43H con contratinci n El paso Auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Auxiliar debe configurarse a ninguno De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensi
10. y Uso previsto Sin nimos del ant geno Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones 117419 003 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clon DF T1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 1S636 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clon DF T1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Los anticuerpos contra CD43 pueden resultar tiles en la identificaci n linfomas de c lulas B de bajo grado linfomas de c lulas T perif ricas y trastornos mieloides 1 La interpretaci n de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un anatomopat logo cualificado en el contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas Leucosialina gpL115 sialoforina leucocito sialoglucoproteina 2 La mol cula CD43 humana es una prote na de membrana integral de cadena simple con un peso molecular aparente de 95 000 y 135 000 2 El dominio extracelular de amino cido 234 de tipo mucina es fuertemente glucosilado con 70 85 cadenas de carbohidrato O ligadas que contienen el ep topo sialil Lewis X Por lo tanto la mol cula puede actuar como ligando de P selectina y E selectina Adem s
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