LIAISON® FT4 (REF 311611) - Annar Diagnóstica Import
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1. ID rota DiaSorin S p A C Via Crescentino snc 13040 Saluggia VC Italy www diasorin com Modificaciones 4 10 11 Supresiones 8 10 LIAISON FT4 REF 311611 1 FINALIDAD DEL ENSAYO Ensayo in vitro para la determinaci n cuantitativa de tiroxina libre FT4 en suero y plasma humanos El ensayo debe realizarse en la serie de instrumentos LIAISON Analyzer 2 RESUMEN Y EXPLICACI N DEL ENSAYO La gl ndula tiroidea libera tiroxina T4 al torrente sangu neo donde m s del 99 9 de la hormona queda enlazado a prote nas de transporte 1 3 Sin embargo nicamente la fracci n libre de T4 FT4 es fisiol gicamente activa 2 6 La FT4 induce la estimulaci n metab lica y act a como realimentaci n de control del eje hipot lamo hip fisis tiroides A diferencia de lo que ocurre con la T4 total la medici n de la FT4 es independiente de las prote nas transportadoras TBG TBPA alb mina Por tanto debido a su mayor sensibilidad y especificidad para los trastornos tiroideos siempre debe determinarse la FT4 en pacientes con anomal as de las prote nas transportadoras 4 Entre las anomal as de las prote nas transportadoras figuran las siguientes 7 cong nitas como hipertiroxinemia disalbumin mica familiar s ndrome FDH hipertiroxinemia asociada a la prealb mina o deficiencia cong nita de TBG fisiol gicas como embarazo puerperio 5 farmacol gicas como anticonceptivos salicilatos hepar2. Solo para uso diagn stico in vitro Todos los materiales de origen humano utilizados para la fabricaci n de los componentes de este kit se han analizado y se han encontrado no reactivos para la presencia de HBsAg anti VHC anti VIH 1 y anti VIH 2 Sin embargo puesto que ning n m todo de an lisis puede asegurar la ausencia de agentes pat genos todo el material de origen humano deber considerarse potencialmente infeccioso y manipularse como tal 6 NORMAS DE SEGURIDAD No coma beba fume ni se maquille en el laboratorio donde se realiza el ensayo No pipetee las soluciones con la boca Evite el contacto directo con todos los materiales potencialmente infecciosos utilizando prendas protectoras como batas de laboratorio gafas protectoras y guantes desechables L vese cuidadosamente las manos al terminar el ensayo Evite las salpicaduras o la formaci n de aerosoles El reactivo vertido debe limpiarse con una soluci n de hipoclorito s dico al 5 y eliminarse como si se tratase de material potencialmente infeccioso Todas las muestras los reactivos biol gicos y los materiales usados en el ensayo deben considerarse posibles transmisores de agentes infecciosos Por consiguiente deben eliminarse de conformidad con las disposiciones y normas generales establecidas por las autoridades con jurisdicci n sobre el laboratorio y con las leyes vigentes en cada pa s 7 PREPARACI N DE LOS REACTIVOS 7 1 Integral de reactivos Para manipular l
3. se resuspenden por completo en el analizador Consulte el manual del usuario del analizador para introducir las muestras y comenzar el ensayo 7 2 Controles Para preparar y manipular los controles de forma correcta consulte las instrucciones del set LIAISON Control Thyroid 1 LIAISON Control Thyroid 2 LIAISON Control Thyroid 3 8 CONSERVACI N Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS 8 1 Integral de reactivos Sellado Estable a 2 8 C hasta la fecha de caducidad Abierto en el instrumento o a 2 8 C Estabilidad 2 semanas consulte 12 Si los controles permanecen dentro de los rangos previstos se puede seguir usando el integral despu s de este intervalo de tiempo Use siempre el mismo LIAISON Analyzer con un integral de reactivos ya abierto Mantenga el integral de reactivos en posici n vertical durante la conservaci n para facilitar la resuspensi n de las part culas magn ticas Use las gradillas suministradas con la serie de instrumentos LIAISON Analyzer para mantener el integral de reactivos en posici n vertical Evite su exposici n a luz directa LIAISON FT4 REF 311611 279 ES F 2012 05 07 9 RECOGIDA Y PREPARACI N DE LAS MUESTRAS Tome las muestras mediante los procedimientos habituales Material de las muestras suero plasma Si la prueba no se realiza el mismo d a de la recogida de la muestra el suero plasma debe separarse del sedimento y conservarse en un tubo diferente Conservaci n a 2 8 C 4
4. 8 h Para periodos de almacenamiento m s prolongados congelar por debajo de 20 C Evite los ciclos repetidos de congelaci n y descongelaci n Las muestras almacenadas deben agitarse bien antes de su uso agitador Vortex No use muestras fuertemente hemolizadas o lip micas ni muestras que presenten part culas o evidente contaminaci n microbiana No use muestras coaguladas El volumen m nimo de muestra necesario para una determinaci n es 200 uL 50 uL de muestra 150 uL de volumen muerto 10 CALIBRACI N El an lisis de los calibradores espec ficos del ensayo permite ajustar los valores RLU detectados a la curva maestra asignada Es posible realizar un m ximo de 6 calibraciones en total La recalibraci n debe realizarse por triplicado cada vez que se verifique al menos una de las siguientes condiciones Se usa un nuevo lote de integral de reactivos o de reactivos starter La calibraci n anterior se realiz hace m s de 14 d as El analizador se ha sometido a una intervenci n de asistencia t cnica Los valores de los controles est n fuera de los rangos esperados LIAISON Analyzer los valores del calibrador est n almacenados en los c digos de barras de la etiqueta del integral LIAISON XL Analyzer los valores del calibrador est n almacenados en la etiqueta de identificaci n por radiofrecuencia RFID 11 PROCEDIMIENTO OPERATIVO Para obtener unos resultados anal ticos correctos hay que respetar es
5. V n 0 39 2 4 20 0 48 4 8 23 0 90 1 6 20 0 90 3 7 31 1 47 1 1 20 1 53 2 9 32 3 00 2 4 20 3 02 3 3 31 6 36 2 0 20 6 36 3 2 30 n mero de determinaciones LIAISON FT4 REF 311611 4 5 ES F 2012 05 07 15 6 Precisi n con LIAISON XL Analyzer Para determinar la repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo es decir las variaciones intra ensayo e inter ensayo se utilizaron muestras con diferentes concentraciones de FT4 Variaci n intra ensayo Variaci n inter ensayo Valor medio A Valor medio o P mg dL CV n mg dL CV n 0 33 3 3 20 0 35 4 4 20 0 89 2 0 20 1 01 2 9 20 2 22 2 0 20 3 09 2 5 20 7 24 2 1 20 8 13 2 0 20 n mero de determinaciones 15 7 Veracidad La precisi n de este ensayo se ha demostrado en diferentes correlaciones con kits radiactivos y no radiactivos en medidas tanto externas como internas 15 8 Sensibilidad anal tica La sensibilidad anal tica se define como la dosis m nima detectable que puede distinguirse de cero con 2 desviaciones est ndar Sensibilidad anal tica Serie de instrumentos LIAISON Analyzer 0 1 ng dL LIAISON FT4 REF 311611 5 5 ES F 2012 05 07
6. es de T4 y de prote na transportadora aparecen disminuidos o elevados simult neamente mientras que la tiroxina libre se encuentra dentro del rango normal El hipotiroidismo en cambio siempre est asociado a valores disminuidos de la tiroxina libre mientras que en el caso del hipertiroidismo ocurre lo contrario En estas enfermedades las anomal as de las prote nas transportadoras pueden deberse a cambios en las concentraciones de TBG TBPA y TBA o a alteraciones en la afinidad de uni n de dichas prote nas Por lo tanto los hallazgos cl nicos siempre deben tener en cuenta todas las alteraciones fisiol gicas patol gicas o farmacol gicas en las condiciones y capacidades de uni n de estas prote nas Los niveles de FT4 en suero no demuestran por s solos la presencia o ausencia de enfermedad tiroidea Siempre deben interpretarse en el contexto del cuadro cl nico y en combinaci n con otros procedimientos diagn sticos Cada decisi n terap utica debe ser tomada caso por caso Aunque se a adan agentes capaces de neutralizar los anticuerpos humanos anti rat n HAMA las concentraciones de HAMA extremadamente elevadas podr an influir en los resultados del ensayo Los integrales no se deben intercambiar entre diferentes tipos de analizadores LIAISON y LIAISON XL Despu s de introducir un integral en un tipo de analizador determinado deber usarse siempre en l hasta que se haya acabado Por motivos de trazabilidad relacionados con lo ant
7. es expuesto es necesario terminar el seguimiento de los pacientes con el mismo tipo de analizador En los seguimientos debe utilizarse un nico tipo de analizador LIAISON o LIAISON XL 15 PRESTACIONES METODOL GICAS DEL KIT 15 1 Especificidad anal tica La especificidad anal tica se define como la capacidad del ensayo para detectar analitos espec ficos en presencia de factores potencialmente interferentes en la matriz de la muestra por ejemplo hem lisis lipemia bilirrubinemia 15 2 Interferencia Estudios controlados de factores potencialmente interferentes han demostrado que la eficacia del ensayo no depende de las concentraciones de bilirrubina lt 0 125 mg mL de hemoglobina lt 1000 mg dL o de triglic ridos lt 30 mg mL 15 3 Reacciones cruzadas Reactividades cruzadas del anticuerpo anti tiroxina empleado L tirosina 0 L T3 lt 2 D T3 lt 2 15 4 Interferencias con f rmacos No se han encontrado reactividades cruzadas con cido acetilsalic lico cido salic lico fenilbutazona difenilhidanto na amiodarona ANS furosemida ni DL propranolol en dosis terap uticas 15 5 Precisi n con LIAISON Analyzer Para determinar la repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo es decir las variaciones intra ensayo e inter ensayo se utilizaron muestras con diferentes concentraciones de FT4 Variaci n intra ensayo Variaci n inter ensayo Valor medio E Valor medio A A ng dL CV n mad C
8. ina debidas a enfermedades graves NTI no tiroideas subyacentes como insuficiencia renal cr nica infarto de miocardio hepatitis aguda cirrosis hep tica anorexia nerviosa infecciones graves estados posquir rgicos y postraum ticos La T4 libre permite distinguir cl nicamente las hipertiroxinemias eutiroideas del hipertiroidismo y las hipotiroxinemias eutiroideas del hipotiroidismo 3 PRINCIPIO DEL ENSAYO El m todo para la determinaci n cuantitativa de FT4 est basado en el principio SPALT t cnica de luminiscencia con ant genos en fase s lida Las part culas magn ticas fase s lida est n recubiertas con un conjugado de prote na T4 un anticuerpo monoclonal est enlazado a un derivado de isoluminol conjugado de isoluminol anticuerpo Durante la incubaci n la FT4 compite con el conjugado de prote na T4 por los sitios de uni n del anticuerpo marcado Despu s de la incubaci n se elimina el material no unido mediante un ciclo de lavado A continuaci n se a aden los reactivos starter que inducen una reacci n de quimioluminiscencia La se al luminosa y por lo tanto la cantidad de conjugado de anticuerpo isoluminol se mide con un fotomultiplicador en unidades relativas de luz RLU relative light units e indica la concentraci n de FT4 presente en los calibradores en las muestras o en los controles 4 MATERIALES SUMINISTRADOS El orden de los reactivos refleja el orden con el que se han ensamblado los contenedo
9. nsulte el manual del usuario del analizador para obtener informaci n detallada Aunque los calibradores y los controles pueden generar resultados de RLU o dosis distintos en LIAISON y LIAISON XL los resultados de los pacientes son equivalentes LIAISON FT4 REF 311611 3 5 ES F 2012 05 07 13 1 Estandarizaci n El ensayo se ha calibrado mediante di lisis sim trica 13 2 Intervalo de ensayo LIAISON FT4 mide concentraciones de hasta 10 ng dL Factor de conversi n 1 pmol L x 0 078 1 ng dL x 12 870 1 ng dL 1 pmol L 13 3 Rango de referencia evaluado en suero Rango normal percentil 1 99 0 8 1 7 ng dL 10 29 21 88 pmol L Este rango se evalu en 517 individuos sin enfermedad tiroidea aparente Cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia ya que pueden existir diferencias regionales 14 LIMITACIONES DEL ENSAYO Los reactivos deben usarse solamente en la serie de instrumentos LIAISON Analyzer Los componentes individuales del integral de reactivos no deben separarse del integral El kit no debe usarse despu s de la fecha de caducidad que figura en la etiqueta externa Para obtener resultados fiables es necesario atenerse estrictamente a las instrucciones y poseer una adecuada t cnica manual La contaminaci n bacteriana de las muestras o la inactivaci n mediante calentamiento pueden modificar los resultados de la prueba En condiciones eutiroideas los nivel
10. os reactivos es preciso adoptar una serie de precauciones importantes Resuspensi n de las part culas magn ticas Las part culas magn ticas deben estar completamente resuspendidas antes de colocar el integral en el instrumento Realice los pasos indicados a continuaci n para garantizar la suspensi n completa de las part culas Antes de quitar el precinto gire la rueda peque a del compartimento de part culas magn ticas hasta que la suspensi n adopte un color marr n Agite horizontalmente el integral de reactivos con delicadeza y sumo cuidado para facilitar la suspensi n de las part culas magn ticas evite la formaci n de espuma Controle visualmente el fondo del vial de part culas magn ticas para cerciorarse de que no hayan quedado part culas magn ticas sedimentadas Si es necesario repita el procedimiento hasta que las part culas magn ticas est n completamente resuspendidas Despu s de quitar el precinto seque con sumo cuidado la superficie de cada pared para eliminar el l quido residual si fuera necesario Formaci n de espuma en los reactivos Para garantizar las mejores prestaciones del integral se recomienda evitar la formaci n de espuma en los reactivos Respete las recomendaciones siguientes Antes de usar el integral controle visualmente los reactivos especialmente los calibradores situados en la segunda y tercera posici n del integral despu s del vial de part culas magn ticas para excluir la presencia de esp
11. res en el integral de reactivos Integral de reactivos para 100 determinaciones 23 mL SORB Fase s lida contiene part culas magn ticas recubiertas con conjugado de prote na T4 conejo y azida s dica al 0 09 10 mL Calibrador 1 bajo contiene suero humano enriquecido con ant geno T4 y azida s dica al 0 09 10 mL CAL 2 Calibrador 2 alto contiene suero humano enriquecido con ant geno T4 y azida s dica al 0 09 230 mL CONJ Conjugado contiene anticuerpo anti T4 monoclonal murino marcado con isoluminol y azida s dica al 0 09 Todos los reactivos se suministran listos para usar Materiales requeridos pero no suministrados relacionados con el sistema LIAISON XL Analyzer LIAISON Analyzer LIAISON Wash System Liquid REF 319100 LIAISON Wash System Liquid REF 319100 LIAISON XL Waste Bags REF X0025 LIAISON Waste Bags REF 450003 LIAISON XL Cuvettes REF X0016 LIAISON Module REF 319130 LIAISON XL Starter Kit REF 319200 LIAISON Starter Kit REF 319102 o LIAISON XL Starter Kit REF 319200 LIAISON XL Disposable Tips REF X0015 LIAISON Cleaning Kit REF 310990 LIAISON Light Check REF 319101 Otros materiales requeridos AAA AAA sa SABE aDca Aaza gt LIAISON Control Thyroid 1 REF 389219 LIAISON Control Thyroid 2 REF 389229 LIAISON Control Thyroid 3 REF 389239 LIAISON FT4 REF 311611 145 ES F 2012 05 07 5 ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
12. trictamente las instrucciones del manual del usuario del analizador LIAISON Analyzer cada par metro del ensayo se identifica mediante el c digo de barras de la etiqueta del integral de reactivos Si la etiqueta del c digo de barras no se puede leer el cartucho no se debe utilizar y se tiene que tirar Consulte el manual del usuario del analizador para obtener informaci n detallada LIAISON XL Analyzer cada par metro del ensayo se identifica mediante la informaci n codificada en la etiqueta de identificaci n por radiofrecuencia RFID del integral de reactivos Si la etiqueta RFID no se puede leer el cartucho no se debe utilizar y se tiene que tirar Para obtener informaci n detallada consulte el manual del usuario del analizador El LIAISON Analyzer realiza las operaciones siguientes 1 Dispensa la muestra el calibrador o los controles en el m dulo de reacci n 2 Dispensa las part culas magn ticas revestidas fase s lida y el conjugado 3 Incuba 4 Lava con l quido de lavado l quido del sistema 5 A ade el reactivo starter y mide la luz emitida El LIAISON XL Analyzer realiza las operaciones siguientes 1 Dispensa la muestra el calibrador o los controles en la cubeta de reacci n 2 Dispensa las part culas magn ticas revestidas fase s lida y el conjugado 3 Incuba 4 Lava con l quido de lavado l quido del sistema 5 A ade el reactivo starter y mide la luz emitida 12 CONTROL DE CALIDAD Los con
13. troles LIAISON deben analizarse individualmente para determinar la eficacia del ensayo El control de calidad puede efectuarse analizando los sueros de control LIAISON o controles comerciales espec ficos por lo menos una vez por cada d a de trabajo cuando se usa un nuevo integral de reactivos cuando se calibra el kit cuando se usa un nuevo lote de reactivos starter cuando se determina la adecuaci n de las prestaciones del integral de reactivos abierto con m s de 2 semanas de anterioridad o seg n las normas o los requisitos establecidos en los reglamentos locales o por entidades autorizadas Las valores de los controles deben permanecer dentro de los rangos previstos Cada vez que el valor de uno de los controles no coincida con el rango esperado habr que repetir la calibraci n y analizar de nuevo los controles Si los valores de los controles siguen estando fuera de rango tras una calibraci n satisfactoria ser preciso repetir el ensayo usando un vial de control sin abrir Los resultados de los pacientes no deben notificarse si los valores de control est n fuera del rango previsto Antes de utilizar otros controles es preciso evaluar su compatibilidad con este ensayo Es indispensable establecer intervalos de valores adecuados para los materiales empleados en el control de calidad 13 INTERPRETACI N DE LOS RESULTADOS El analizador calcula autom ticamente las concentraciones de FT4 de las muestras y las expresa en ng dL Co
14. uma Si se observa la presencia de espuma tras la resuspensi n de las part culas magn ticas coloque el integral en el instrumento y deje que se disuelva la espuma El integral est listo para el uso una vez que se ha disuelto la espuma que ha permanecido en el instrumento y que se ha agitado Instalaci n del integral en el rea de reactivos LIAISON Analyzer Coloque el integral de reactivos en el rea de reactivos del analizador con la etiqueta de los c digos de barras orientada a la izquierda y espere 30 minutos antes de usarlo Las part culas magn ticas se agitan autom ticamente y se resuspenden por completo en el analizador Consulte el manual del usuario del analizador para introducir las muestras y comenzar el ensayo LIAISON XL Analyzer El LIAISON XL Analyzer i incorpora un dispositivo magn tico de fase s lida que favorece la dispersi n de las micropart culas antes de colocar un integral de reactivos en el rea de reactivos del analizador Consulte los detalles en el manual del usuario del analizador Coloque el integral de reactivos en la ranura espec fica Deje el integral de reactivos en el dispositivo magn tico de estado s lido durante al menos 30 segundos varios minutos como m ximo Si es necesario repita la operaci n Coloque el integral en el rea de reactivos del analizador con la etiqueta orientada a la izquierda y espere 15 minutos antes de utilizarlo Las part culas magn ticas se agitan autom ticamente y
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