Panel Piccolo MetLac 12
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1. gt 6 fosfogluconato NADPH H La reacci n que limita la velocidad es la reacci n de HK El magnesio de la muestra activa la HK que a su vez cataliza la descomposici n de la glucosa para formar glucosa 6 fosfato G 6 P y ADP En presencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G 6 PDH G 6 P reacciona con la nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADP para formar fosfato de nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADPH y 6 fosfogluconato Esta es una reacci n de primer orden de velocidad La producci n de NADPH es directamente proporcional a la cantidad de magnesio presente en la muestra La absorbancia se mide bicrom ticamente a 340 nm y 405 nm F sforo PHOS El m todo enzim tico m s v lido para el sistema Abaxis utiliza sacarosa fosforilasa SP acoplada a trav s de la fosfoglucomutasa PGM y glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G6PDH Utilizando el sistema enzim tico para cada mol de f sforo presente en la muestra se forma un mol de NADH La cantidad de NADH formado puede ser medida como un criterio de valoraci n a 340 nm SP Sucrosa P gt Glucosa l fosfato G 1 P Fructosa PGM Mg GIP __ G 6 P G 6 PDH G 6 P NAD __ NADH 6 fosfogluconato H Potasio K Se han desarrollado m todos espectrofotom tricos que permiten la medici n de la concentraci n del potasio con instrumentaci n est ndar de qu mica cl nica El m todo enz2. mmol l 0 996 Magnesio mg dl 0 992 Pendiente 1 001 0 877 0 98 0 982 0 926 1 009 0 943 1 02 0 990 Intercepci n VER 0 3 0 22 0 1 0 21 0 17 0 31 1 1 1 84 0 0 0 15 2 8 3 89 1 2 4 69 0 08 0 19 0 0 0 16 P gina 18 de 22 N 261 100 111 120 260 251 91 126 44 Muestra M todo de Intervalo comparaci n 1 1 5 3 Paramax 1 5 5 0 Beckman 4 6 13 2 Beckman 71 118 Vitros 950 0 4 14 7 Paramax 72 422 Paramax 56 646 Beckman 0 30 9 88 i STAT 0 8 6 8 Espectrometria at mica de emisi n ptica por plasma de acoplamiento inductivo ICP OES Pagina 19 de 22 Tabla 7 Correlaci n del analizador qu mico Piccolo xpress con los m todos de comparaci n continuaci n F sforo mg dl 0 993 1 017 0 2 0 236 90 0 8 11 7 Vitros 950 Potasio mmol l 0 969 0 863 0 6 0 14 58 2 0 6 8 Radi metro KNA 2 Sodio mmol l 0 937 0 782 27 7 3 79 113 116 154 Radi metro KNA 2 Di xido de carbono 0 947 0 903 2 0 0 84 60 6 39 Cobas Fara total mmol 1 Nitr geno ureico 0 983 0 946 0 0 0 66 92 6 38 Beckman sangu neo mg dl 13 Bibliograf a 1 Howe PE The use of sodium sulfate as the globulin precipitant in the determination of proteins in blood J Biol Chem 1921 49 93 07 2 Howe PE The determination of proteins in blood a micro method J Biol Chem 1921 49 109 13 3 Wolfson WQ et al A rapid procedure for the estimation of total protein true albumin total globulin alpha globu
3. 0 03 VR 251 1 7 2 0 Sangre entera 2 Sitio 1 N 20 Media 0 72 0 70 0 71 DE 0 02 0 02 0 02 VR 2 2 2 5 27 Sangre entera 3 Sitio 1 N 20 Media 4 67 4 59 4 63 DE 0 17 0 10 0 15 VR 3 7 2 3 3 1 Sangre entera 4 Sitio 1 N 20 Media 4 13 4 17 4 15 DE 0 12 0 17 0 15 VR 3 0 4 1 3 5 Sangre entera 5 Sitio 2 N 20 Media 1 00 1 02 1 01 DE 0 03 0 02 0 03 VR 2 8 1 7 255 Sangre entera 6 Sitio 2 N 20 Media 1 09 1 12 1 10 DE 0 03 0 03 0 03 P gina 16 de 22 VR 2 6 2 3 2 7 Tabla 6 Precisi n continuaci n Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Lactato mmol l N 20 Sangre entera 7 Sitio 2 Media 6 18 6 38 6 28 DE 0 21 0 25 0 24 VR 3 4 3 9 3 9 Sangre entera 8 Sitio 2 N 20 Media 5 88 5 90 5 89 DE 0 32 0 17 0 25 VR 5 5 2 9 4 2 Sangre entera 9 Sitio 3 N 20 Media 0 88 0 88 0 88 DE 0 03 0 04 0 03 VR 3 3 4 3 3 8 Sangre entera 10 Sitio 3 N 20 Media 1 09 1 06 1 08 DE 0 03 0 03 0 03 VR 3 0 2 9 3 2 Sangre entera 11 Sitio 3 N 20 Media 5 93 5 86 5 89 DE 0 24 0 14 0 20 VR 4 1 2 5 3 3 Sangre entera 12 Sitio 3 N 20 Media 7 76 7 76 7 76 DE 0 28 0 28 0 27 VR 3 7 3 5 335 Pruebas de sangre entera realizadas en tres sitios point of care por dos operadores con 10 repeticiones por operador Cada operado realiz pruebas de dos muestras normales y dos elevadas Magnesio Control 1 Media 1 9 1 9 DE 0 03 0 06 VR 1 7 3 4 Control 2 Media 3 9 3 9 DE 0 04 0 10 VR 1 0 2 6 F sforo
4. Cali JP et al A reference method for the determination of total calcium in serum Jn Selected Methods of Clinical Chemistry Vol 8 GR Cooper ed Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1997 3 8 14 Kessler G M Wolfman An automated procedure for the simultaneous determination of calcium and phosphorus Clin Chem 1964 10 686 703 15 Michaylova V et al Photometric determination of micro amounts of calcium with arsenazo II Anal Chim Acta 1971 53 194 198 16 Scarpa A et al Metallochromic indicators of ionized calcium Ann NY Acad Sci 1978 307 86 112 17 Ono T et al A new enzymatic assay of chloride in serum Clin Chem 1988 34 552 3 18 Knoll VE et al Spezifische kreatininbestimmung im serum Z Klin Chem Klin Biochem 1970 8 582 587 19 Haeckel R et al Simplified determinations of the true creatinine concentration in serum and urine J Clin Chem Clin Biochem 1980 18 385 394 20 Moss GA et al Kinetic enzymatic method for determining serum creatinine Clin Chem 1975 21 1422 1426 21 Jaynes PK et al An enzymatic reaction rate assay for serum creatinine with a centrifugal analyzer Clin Chem 1982 28 114 117 22 Fossati P et al Enzymatic creatinine assay a new colorimetric method based on hydrogen peroxide measurement Clin Chem 1983 29 1494 1496 23 Whelton A et al Nitrogen metabolites and renal function In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 2 Ed Burtis CA Ashwood ER eds Phi
5. Ureasa haba blanca 0 05 U Amortiguadores surfactantes excipientes y conservantes Advertencias y precauciones e Para uso diagn stico in vitro e El envase del diluyente del disco reactivo se abre autom ticamente cuando se cierra el caj n del analizador Un disco con un contenedor diluyente abierto no puede volver a utilizarse Aseg rese de que la muestra o la prueba est colocada en el disco antes de cerrar el caj n e Los discos de reactivo usados contienen l quidos del cuerpo humano Siga las pr cticas de seguridad del laboratorio cuando manipule y elimine discos usados Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress para obtener instrucciones sobre la limpieza de derrames biopeligrosos e Los discos reactivos son de pl stico y pueden romperse o estallar si se caen Nunca use un disco que se haya ca do ya que puede esparcir material biol gico peligroso en el interior del analizador e El reactivo en soporte s lido puede contener sustancias cidas o causticas El usuario no entra en contacto con el reactivo en soporte s lido si sigue los procedimientos recomendados En el caso de que se manipule el reactivo en soporte s lido por ejemplo limpieza tras caerse y romperse un disco reactivo se debe evitar la ingesti n el contacto con la piel y la inhalaci n del mismo Instrucciones para la manipulaci n de los reactivos P gina 7 de 22 Los discos de reactivo pueden usarse inmediatamente despu
6. de di lisis renal Glucosa Alteraciones del metabolismo de carbohidratos incluida la diabetes mellitus e hipoglucemia del adulto y juvenil Lactato Las mediciones de lactato se utilizan para el diagn stico y el tratamiento de la acidosis de lactato el control de la hipoxia de tejidos y el diagn stico de la hiperlactatemia Magnesio Hipomagnesemia e hipermagnesemia F sforo Deshidrataci n diabetes paratiroidismo y nefropat a Potasio Enfermedad glomerular o tubular renal insuficiencia adrenocortical cetoacidosis diab tica tratamiento excesivo con potasio endovenoso sepsis panhipopituitarismo hem lisis in vitro hiperaldosteronismo malnutrici n hiperinsulinismo alcalosis metab lica y p rdida gastrointestinal Sodio Deshidrataci n diabetes ins pida p rdida de l quidos gastrointestinales hipot nicos intoxicaci n por sal depresi n selectiva del sentido de la sed p rdida cut nea quemaduras sudoraci n hiperaldosteronismo alteraciones del SNC hiponatremia por diluci n por depleci n y por delirio y s ndrome de secreci n inadecuada de HAD Di xido de carbono total Alcalosis y acidosis metab lica primarias y alcalosis y acidosis respiratoria primarias Nitr geno ureico sangu neo Enfermedades renales y metab licas BUN Al igual que con cualquier procedimiento diagn stico de prueba antes del diagn stico final hay que considerar todos los restantes procedimientos de prueba incluido e
7. un reactivo seco de muestra de referencia compuesto por amortiguador surfactantes excipientes y conservantes en cada disco para usar en el c lculo de las concentraciones de alb mina ALB cloruro CL calcio CA glucosa GLU lactato LAC magnesio MG f sforo PHOS potasio K sodio NA di xido de carbono total tCO2 y nitr geno ureico sangu neo BUN En el disco se incluye una muestra de referencia dedicada para calcular la concentraci n de creatinina CRE Cada disco contiene un diluyente que consta de surfactantes y estabilizantes Tabla 1 Reactivos Componentes Cantidad Disco N Acetil ciste na 60 ug Adenosina 5 difosfato 36 ug Adenosina 5 difosfato sal de litio 40 ug Adenosina 5 trifosfato 22 ug Adenosina 5 trifosfato sal dis dica 28 ug Acido cetoglut rico 19 pg 4 Aminoantipirina 27 ug 4 Aminoantipirina clorhidrato 4 ug Amilasa 0 036 U Arsenazo III sal s dica 1 7 pg Ascorbato oxidasa Cucurbita spp 0 3 U Brij 3 ug Purpura de bromocresol sal s dica 0 2 ug Acetato de calcio 25 ug Acido citrico 735 ug Acido c trico sal tris dica 567 ug 2 cloro 4 nitrofenil maltotriosida CNPG3 53 ug Creatina amidinohidrolasa Actinobacillus spp 3U Creatinina amidohidrolasa Pseudomonas spp IU cido 3 5 dicloro 2 hidroxibencenosulf nico sal s dica DHBSA 31 ug cido etilendiaminotetraac tico EDTA 182 ug cido etilendiaminotetraac tico EDTA sal dis dica 17 pg Acido etilenglicol bis a
8. y preparaci n de las muestras En la secci n Obtenci n de muestras del manual del operador del analizador qu mico Piccolo xpress se describen las t cnicas para la obtenci n de las muestras e El tama o m nimo de muestra requerido es 100 ul de sangre entera heparinizada plasma heparinizado o material de control La c mara de muestra del disco reactivo puede contener hasta 120 ul de muestra e Las muestras de sangre entera obtenidas por venopunci n deben ser homogeneizadas antes de transferir una muestra al disco reactivo Invierta suavemente el tubo de recogida varias veces antes de transferir la muestra No agite el tubo para obtenci n de muestras esto puede causar hem lisis e La hem lisis puede provocar resultados err neamente elevados en las pruebas de potasio Este problema puede pasar desapercibido cuando se analiza sangre entera la liberaci n de potasio de apenas 0 5 de los eritrocitos puede provocar aumentos en el nivel s rico del potasio de 0 5 mmol l Adem s a n las muestras no hemolizadas que no son procesadas con rapidez pueden tener aumento en los niveles de potasio debido a la p rdida intracelular e Las muestras de sangre entera obtenidas por venopunci n para la determinaci n del lactato requieren que el paciente est en reposo durante 2 horas evite cualquier ejercicio con los antebrazos y la sangre debe obtenerse sin un torniquete o bien inmediatamente despu s de aplicar el torniquete Se debe ana
9. 7 22 mg dl 2 5 7 9 mmol urea l BUN En Estados Unidos se utilizan las unidades SI para indicar el lactato No se observa diferencia entre la concentraci n de f sforo medido en sangre entera heparinizada y en plasma heparinizada Sin embargo se observ un aumento peque o 0 3 mg dl en el suero cuando se lo compar con sangre entera heparinizada y plasma heparinizada Este aumento es coherente con la diferencia entre el f sforo en suero y plasma que se describe en la literatura gt gt 12 Caracter sticas de eficacia Linealidad La qu mica para cada analito es lineal a lo largo del intervalo din mico enumerado a continuaci n cuando el analizador qu mico Piccolo xpress se maneja de acuerdo con el procedimiento recomendado consulte el manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress Tabla 5 Intervalos din micos del analizador Piccolo xpress Analito Unidades comunes Unidades SI Alb mina 1 6 5 g dl 10 65 g l Calcio 4 0 16 0 mg dl 1 0 4 0 mmol l Cloruro 80 135 mmol l 80 135 mmol l Creatinina 0 2 20 mg dl 18 1768 umol l Glucosa 10 700 mg dl 0 6 38 9 mmol l Lactato 2 7 90 0 mg dl 0 30 9 99 mmol l Magnesio 0 1 8 0 mg dl 0 04 3 3 mmol l F sforo 0 2 20 mg dl 0 06 6 5 mmol l Potasio 1 5 8 5 mmol l 1 5 8 5 mmol l Sodio 110 170 mmol l 110 170 mmol l Di xido de carbono total 5 40 mmol l 5 40 mmol l Nitr geno ureico sangu neo 2 180 mg dl 0 7 64 3 mmol urea l BUN P gina 14 de 22 Sensibilidad l mi
10. P gina 2 de 22 aa Creatinina amidohidrolasa Creatinina HO Creatina Creatina amidinohidrolasa Creatina H Q 2 gt 3 gt Sarcosina Urea Sarcosina oxidasa Sarcosina HO 0 _ Glicina formaldeh do H O Peroxidasa i Pos HO TBHBA 4 AAP _ Colorante rojo de quinoneimina HO Se utilizan dos cubetas para determinar la concentracion de creatinina en la muestra La creatina end gena se mide en la cubeta de referencia que es restada de la creatina end gena combinada y la creatina formada a partir de las reacciones enzimaticas en la cubeta de prueba Una vez eliminada la creatina end gena de los c lculos la concentraci n de creatinina es proporcional a la intensidad del color rojo producido El criterio de valoraci n de la reacci n final se mide como la diferencia en la absorbancia entre 550 nm y 600 nm eGFR calculada La creatinina s rica se mide de forma rutinaria como indicador de la funci n renal Debido a que la edad el sexo y la raza influyen en las concentraciones de creatinina no es posible detectar la nefropat a cr nica CKD tan solo mediante la creatinina s rica As pues el National Kidney Disease Education Program Programa Nacional de Educaci n sobre la Nefropatia recomienda encarecidamente que los laboratorios informen de forma rutinaria de la tasa de filtraci n glomerular estimada eGFR cua
11. Panel Piccolo MetLac 12 Ce Para uso diagn stico in vitro y uso profesional solamente Servicio y asistencia t cnica al cliente 800 822 2947 Los clientes fuera de EF UU deben ponerse en contacto con su representante local de Abaxis para solicitar servicio de atenci n al cliente Febrero 2014 PN 400 7192 Rev B 2013 Abaxis Inc Union City CA 94587 1 Uso previsto El disco reactivo para panel Piccolo MetLac 12 usado con el analizador qu mico Piccolo xpress se ha dise ado para proporcionar determinaciones cuantitativas in vitro de alb mina calcio cloruro creatinina glucosa lactato magnesio f sforo potasio sodio di xido de carbono total y nitr geno ureico sangu neo BUN en sangre entera con heparina de litio o plasma con heparina de litio en un mbito de laboratorio cl nico o una ubicaci n point of care 2 Resumen y explicaci n de las pruebas El disco reactivo Piccolo MetLac 12 y el analizador qu mico Piccolo xpress constituyen un sistema diagn stico in vitro que ayuda al m dico en el diagn stico de las siguientes enfermedades Alb mina Enfermedades del h gado y del ri n Calcio Enfermedades de la gl ndula paratiroides seas y nefropat as cr nicas t tanos Cloruro Deshidrataci n diarrea y v mitos prolongados tubulopat a renal hiperparatiroidismo quemaduras nefropatias perdedoras de sal sobrehidrataci n y tratamiento con tiazidas Creatinina Nefropatias y control
12. alvo donde se indiquen otras unidades Paracetamol 100 Acetoacetato 102 cido acetilsalic lico 50 Ampicilina 30 cido asc rbico 3 Bromuro 30 Cafe na 10 Cefalotina Keflin 400 P gina 10 de 22 Cloranfenicol 100 Cimetidina 16 Digoxina 5 D lactato 45 Dopamina 13 Epinefrina 1 Eritromicina 10 Glucosa 700 Tabla 2 Sustancias ex genas y terap uticas evaluadas continuaci n Interferente potencial Concentraci n maxima analizada mg dl salvo donde se indiquen otras unidades Glutationa 30 cido glic lico 7 6 Hidroclorotiazida 7 5 Hidroxiurea 0 7 Ibuprofeno 50 Isoniacida 4 Cetoprofen 50 L dopa 5 Lidocaina 1 Lactato de litio 84 Metformina 500 Meticilina 100 Metotrexato 0 5 Metronidazol 5 Nafcilina 1 Nitrofurantoina 20 Oxacilina 1 Oxaloacetato 132 Penicilina G 100 Fenitoina 5 5 Difenilhidantoina 3 Prolina 4 Piruvato 44 Rifampina 0 5 Acido salicilico 50 Sulfadiazina 150 Sulfanilamida 50 Teofilina 20 Acido trico 30 Probada solo para el lactato Omitida solo para el lactato En la Tabla 3 puede consultar una lista de los analitos en los que se observaron interferencias Tabla 3 Las siguientes sustancias mostraron un desv o superior al 10 en el resultado para una muestra en l mites normales Concentraci n a la Interferencia que se produce gt 10 observada Interferencia Alb mina Acetoacetato 102 18 dism Ampicilina 30 12 dism P gina 11 de 22 Cafe na 10 14 d
13. as El amon aco est cuantificado por una variedad de m todos incluidos la nesslerizaci n titulaci n cida la t cnica de Berthelot y reacciones enzim ticas acopladas Sin embargo los procedimientos de Berthelot catalizados son err ticos cuando se mide el amon aco Las reacciones enzim ticas acopladas son r pidas tienen una elevada especificidad para el amon aco y son las usadas habitualmente Una de estas reacciones fue propuesta como posible m todo de referencia En la reacci n de acoplamiento de enzimas la ureasa hidroliza la urea en amon aco y di xido de carbono Al combinarse el amon aco con a cetoglutarato y nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADH la enzima glutamato deshidrogenasa GLDH oxida la NADH en NAD Ureasa Urea HO 2NH CO GLDH NH a cetoglutarato NADH L Glutamato H O NAD El ndice de cambio de la diferencia de absorbancia entre 340 nm y 405 nm se debe a la conversi n de NADH en NAD y es directamente proporcional a la cantidad de urea en la muestra P gina 5 de 22 4 Principios de la operaci n Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress para obtener informaci n sobre los princ pios y limitaciones del procedimiento 5 Descripci n de los reactivos Reactivos Cada disco reactivo con panel Piccolo MetLac 12 contiene soportes s lidos reactivos secos espec ficos para la prueba descritos a continuaci n Se incluye
14. d Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 869 872 Fales FW Urea in serum direct diacetyl monoxime method In Selected Methods of Clinical Chemistry Vol 9 Faulkner WR and Meites S eds Washington DC AACC Press 1982 365 373 Van Slyke et al A permanent preparation of urease and its use in the determination of urea J Biol Chem 1914 19 211 228 Fawcett JK et al A rapid and precise method for the determination of urea J Clin Pathol 1960 13 156 159 Talke H et al Enzymatische harnstoffbestimmung in blut and serum im optischen test nach Warburg Klin Wochensch 1965 43 174 175 Hallett et al Reduced nicotinamide adenine dinucleotide coupled reaction for emergency blood urea estimation Clin Chim Acta 1971 35 33 37 Patton et al Spectrophotometric and kinetics investigation of the Berthelot reaction for the determination of ammonia Anal Chem 1977 49 464 469 Sampson EJ et al A coupled enzyme equilibrium method for the measuring urea in serum optimization and evaluation of the AACC study group on urea candidate reference method Clin Chem 1980 26 816 826 Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI formerly NCCLS Physician s office laboratory guidelines Tentative Guideline Second Edition NCCLS Document POL1 T2 Wayne PA NCCLS 1992 Scott M G Electrolytes and blood gases In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 Ed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders C
15. de la prueba La recolecci n completa de la muestra y los procedimientos paso por paso se detallan en el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress Calibraci n El analizador qu mico Piccolo xpress es calibrado por el fabricante antes de ser enviado El c digo de barras impreso en el anillo del c digo de barra del disco reactivo proporciona al analizador los datos de calibraci n espec ficos del disco Ver el Manual del operador del analizador qu mico Piccolo xpress Control de calidad Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress para obtener informaci n m s detallada sobre la realizaci n registro interpretaci n y extrapolaci n de los resultados de control Abaxis recomienda que las pruebas de control se hagan conforme a las recomendaciones federales estatales y locales 9 Resultados El analizador qu mico Piccolo xpress calcula autom ticamente e imprime las concentraciones de analitos en la muestra Los detalles de los c lculos del criterio de valoraci n y velocidad de la reacci n se encuentran en el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress En el Manual del usuario del analizador se detalla tambi n la interpretaci n de los resultados los cuales se imprimen en la cinta de resultados proporcionadas por Abaxis La parte posterior de la cinta de resultados es adhesiva para facilitar su colocaci n en los archivos del paciente 10 Limitaciones del procedimiento Las
16. de referencia para el calcio es la espectroscopia por absorci n at mica sin embargo este m todo no es adecuado para su uso de rutina Los m todos espectrofotom tricos que usan los indicadores metalocr micos o cresolftale na complexona CPC o arsenazo III son los usados con m s frecuencia gt El arsenazo III tiene gran afinidad por el calcio y no depende de la temperatura como el CPC El calcio presente en la muestra del paciente se une al arsenazo III para formar un complejo de tintura de calcio Ca Arsenazo HI gt Complejo de Ca y arsenazo III La reacci n de punto final es controlada a 405 nm 467 nm y 600 nm La cantidad de calcio total en la muestra es proporcional a la absorbancia Cloruro CL El m todo para el cloruro de Abaxis se basa en la determinaci n de la activaci n de la actividad de a amilasa dependiente de cloruro La a amilasa desactivada se reactiva al a adir el ion cloruro permitiendo que el calcio se vuelva a asociar con la enzima La reactivaci n de la a amilasa es proporcional a la concentraci n de iones de cloruro en la muestra La a amilasa reactivada convierte el substrato 2 cloro p nitrofenil D maltotriosido CNPG3 en 2 cloro p nitrofenil CNP que produce color y a maltotriosa G3 La reacci n se mide bicrom ticamente y el aumento en la absorbancia es directamente proporcional a la actividad de la o amilasa reactivada y la concentraci n de cloruro en la
17. ecificado e Para la prueba de cloruro el bromuro a niveles t xicos gt 15 mmol l puede causar un efecto significativo gt 10 de aumento sobre el resultado del cloruro El yoduro a concentraciones muy altas 30 mmol l el nivel m s elevado que se ha probado no tiene efecto Los niveles fisiol gicos normales de bromuro y yoduro no interfieren en el Sistema de prueba del cloruro de Piccolo P gina 13 de 22 11 Valores esperados Se analizaron las muestras de aproximadamente 90 140 adultos varones y mujeres en el analizador qu mico Piccolo xpress para determinar los intervalos de referencia para los siguientes an lisis Estos intervalos s lo se proporcionan como una recomendaci n Se recomienda que su consultorio o instituci n establezca rangos normales para su poblaci n particular de pacientes Tabla 4 Intervalos de referencia del analizador qu mico Piccolo xpress Analito Unidades comunes Unidades SI Alb mina 3 3 5 5 g dl 33 55 g l Calcio 8 0 10 3 mg dl 2 0 2 58 mmol l Cloruro 98 108 mmol l 98 108 mmol l Creatinina 0 6 1 2 mg dl 53 106 imol l Glucosa 73 118 mg dl 4 1 6 6 mmol l Lactato 4 8 18 9 mg dl 0 53 2 10 mmol l Magnesio 1 6 2 3 mg dl 0 66 0 95 mmol l F sforo plasma 2 2 4 1 mg dl 0 71 1 32 mmol l F sforo suero 2 5 4 4 mg dl 0 81 1 42 mmol l Potasio 3 6 5 1 mmol l 3 6 5 1 mmol l Sodio 128 145 mmol l 128 145 mmol l Di xido de carbono total 18 33 mmol l 18 33 mmol l Nitr geno ureico sangu neo
18. evices Approved Guideline Second Edition CLSI Document EP5 A2 Wayne PA CLSI 2004 Clinical and Laboratory Standards Institute Quality management for unit use testing Proposed Guideline CLSI Document EP18 A Wayne PA CLSI 2002 Clinical and Laboratory Standards Institute Quality management for unit use testing Approved Guideline Second Edition CLSI Document EP18 A2 Wayne PA CLSI 2009 Clinical and Laboratory Standards Institute Method comparison and bias estimation using patient samples Approved Guideline CLSI Document EP9 A Wayne PA CLSI 1995 Clinical and Laboratory Standards Institute Method comparison and bias estimation using patient samples Approved Guideline Second Edition CLSI Document EP09 A2 IR Wayne PA CLSI 2010 Pagina 22 de 22
19. im tico Abaxis se basa en la activaci n de la piruvato quinasa con potasio y muestra una linealidad excelente y una susceptibilidad despreciable a las sustancias end genas La interferencia de los iones sodio y amonio se reduce al m nimo al a adir Kryptofix y glutamina sintetasa respectivamente En la reacci n de acoplamiento de enzimas la piruvato quinasa PK desfosforila al fosfoenolpiruvato para formar piruvato La lactatodeshidrogenasa LDH cataliza la conversi n de piruvato a lactato Al mismo tiempo NADH se oxida a NAD El ndice P gina 4 de 22 de cambio en la diferencia de absorbancia entre 340 y 405 nm se debe a la conversion de NADH en NAD y es directamente proporcional a la cantidad de potasio en la muestra K PK ADP PEP gt Piruvato ATP LDH Piruvato NADH H gt Lactato NAD Sodio NA Se han desarrollado m todos colorim tricos y enzim ticos que permiten la medici n de la concentraci n de sodio mediante instrumentales de qu mica cl nica estandar En la reacci n enzim tica de Abaxis la P galactosidasa es activada por el sodio presente en la muestra La enzima activada cataliza la reacci n i nitrofenil galactopiranosida ONPG a i nitrofenil y galactosa Na ONPG o Nitrofenol Galactosa P Galactosidasa Di xido de carbono total tCO El di xido de carbono total en suero o en plasma existe como di xido de carbono disuelt
20. ism Cloruro de calcio 20 17 dism Cefalotina Keflin 400 13 aum Ibuprofeno 50 28 aum a cetoglutarato 5 11 dism Nitrofurantoina 20 13 dism Prolina 4 12 aum Sulfadiazina 10 14 dism Sulfanilamida 50 12 dism Teofilina 20 11 dism Tabla 3 Las siguientes sustancias mostraron un desvio superior al 10 en el resultado para una muestra en limites normales continuaci n Concentraci n a la Interferencia que se produce gt 10 observada Interferencia Creatinina cido asc rbico 20 11 dism Dopamina 19 80 dism L dopa 5 71 dism Epinefrina 1 45 dism Glutationa 30 13 dism Glucosa Oxaloacetato 132 11 dism Piruvato 44 13 dism Lactato Dopamina 13 85 dism 0 52 No significativo L dopa 5 49 dism 0 50 No significativo Magnesio Ninguno Ninguno F sforo Nitrofurantoina 20 19 aum Oxaloacetato 132 14 dism Potasio Penicilina G 100 17 aum Sulfadiazina 150 12 dism Sodio Cefalotina 400 12 aum Metotrexato 0 5 11 aum Penicilina G 100 10 aum Di xido de carbono total Paracetamol 100 11 aum cido asc rbico 20 12 dism Cefalotina 400 13 aum Cimetidina 16 19 dism Eritromicina 10 21 dism Lidoca na 1 23 aum Metotrexato 0 5 80 dism Nitrofurantoina 20 13 aum Acido salicilico 50 17 dism Pagina 12 de 22 Sulfadiazina 150 25 dism Ay 5 ap a E E Ez r a dism disminuci n en la concentraci n del analito especificado aum aumento en la concentraci n del analito esp
21. l estado cl nico del paciente 3 Principio del procedimiento Alb mina ALB Los primeros m todos usados para medir la alb mina inclu an t cnicas de fraccionamiento y contenido en triptofano de globulinas Estos m todos eran muy laboriosos y no presentaban alto nivel de especificidad Dos t cnicas inmunoqu micas son consideradas como m todos de referencia pero son caras y requieren mucho tiempo Los m todos usados con mayor P gina 1 de 22 frecuencia para la determinaci n de la alb mina son las t cnicas de uni n a colorantes El bromocresol verde BDG es el m s usado de estos m todos pero puede sobrestimar las concentraciones de alb mina especialmente en los l mites inferiores de los rs 7 r r r 8 9 l mites normales El bromocresol p rpura BCP es el m s espec fico de los colorantes en uso La p rpura de bromocresol BCP al unirse a la alb mina cambia su color de amarillo a azul La absorbancia maxima cambia con el cambio de color Surfactante BCP Alb mina gt Complejo BCP Alb mina pH cido La alb mina unida es proporcional a la concentraci n de alb mina presente en la muestra Se trata de una reacci n de punto final que se mide como la absorbancia a 600 nm Calcio CA Los primeros m todos usados para analizar calcio comprendieron el precipitado de calcio con un exceso de aniones Los m todos de precipitaci n son complicados y suelen ser imprecisos El m todo
22. la prueba se lleva a cabo inmediatamente despu s de abrir el tubo y lo m s pronto posible despu s de la obtenci n y procesado de la sangre en el tubo cerrado El aire contiene mucho menos di xido de carbono que el plasma y el di xido de carbono gaseoso disuelto escapar de la muestra al aire con la disminuci n resultante en el valor de di xido de carbono de hasta 6 mmol l en una hora e Comience la prueba en los 10 minutos siguientes a la transferencia de la muestra al disco reactivo 8 Procedimiento Materiales suministrados e Un disco reactivo para panel Piccolo MetLac 12 PN 400 1037 una caja de discos PN 400 0037 Materiales necesarios pero no suministrados e Analizador qu mico Piccolo xpress e Con cada analizador qu mico Piccolo xpress se suministran pipetas de transferencia de muestras volumen fijo de aproximadamente 100 ul y puntas y pueden solicitarse repuestos a Abaxis e Reactivos de control disponibles comercialmente recomendados por Abaxis p ngase en contacto con el Servicio T cnico de Abaxis para solicitar materiales de control homologados y valores de referencia e Cron metro Par metros de prueba El analizador qu mico Piccolo xpress opera a temperaturas ambientes entre 15 C y 32 C El tiempo de an lisis para cada disco reactivo para panel Piccolo MetLac 12 es de menos de 14 minutos El analizador mantiene el disco reactivo a una temperatura de 37 C durante el intervalo de medici n Procedimiento
23. lactatodeshidrogenasa LDH Por consiguiente en casos de trauma muscular extremo o niveles muy elevados de creatina quinasa CK el sistema Piccolo puede recuperar un valor de potasio K falsamente elevado En tales casos sera necesario confirmar los resultados de potasio inesperadamente elevados utilizando otra metodolog a e P ngase en contacto con el Servicio T cnico de Abaxis para obtener informaci n acerca de los niveles m ximos de sustancias end genas Efectos de las sustancias ex genas y terap uticas Para el lactato se seleccionaron 41 sustancias ex genas y terap uticas como interferentes potenciales para los m todos de prueba de Abaxis sobre la base de las recomendaciones de Young Para todos los dem s m todos se seleccionaron y probaron 35 sustancias ex genas y terap uticas Se define la interferencia significativa como un desv o superior al 10 en el resultado para una muestra en l mites normales Para el lactato las mezclas de plasma humano fueron enriquecidas con concentraciones conocidas de los f rmacos o qu micos y luego analizadas Para todos los dem s m todos se utilizaron mezclas de suero humano Consulte la Tabla 2 para ver una lista de las sustancias ex genas y terap uticas evaluadas Consulte la TABLA 3 para ver una lista de los analitos donde se observ interferencia Tabla 2 Sustancias ex genas y terap uticas evaluadas Interferente potencial Concentraci n m xima analizada mg dl s
24. ladelphia W B Saunders Company 1994 1513 1575 24 National Kidney Disease Education Program NKDEP Creatinine Standardization http www nkdep nih gov labprofessionals creatinine standardization htm Accessed September 2010 P gina 20 de 22 25 26 217 28 29 30 31 32 33 34 Van Pelt J Enzymatic determination of sodium potassium and chloride in serum compared with determination by flame 36 37 38 39 40 41 42 43 44 Chaney et al Urea and ammonia determinations Clin Chem 1962 8 130 132 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 National Kidney Disease Education Program NKDEP Creatinine Standardization Recommendations VD Manufacturers http www nkdep nih gov labprofessionals VD Manufacturers htm Accessed September 2010 National Kidney Foundation GFR Calculator http www kidney org professionals kls gfr calculator cfm Accessed September 2010 Folin O et al A system of blood analysis J Biol Chem 1919 38 81 110 Somogyi M A reagent for the copper iodometric determination of very small amounts of sugar J Biol Chem 1937 117 771 776 Nelson N et al A photometric adaptation of the Somogyi method for the determination of glucose J Biol Chem 1944 153 375 380 Kaplan LA Glucose In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2 Ed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 850 856 Tabata M et al Direct Spec
25. limitaciones generales del procedimiento se detallan en el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress e El nico anticoagulante recomendado para uso con el analizador qu mico sangu neo Piccolo o el analizador qu mico Piccolo xpress es heparina litio Abaxis ha realizado estudios que demuestran que EDTA fluoruro oxalato y cualquier otro anticoagulante que contenga iones de amon aco interferir n con por lo menos un producto qu mico contenido en el disco reactivo para panel Piccolo MetLac 12 e Las muestras con hematocritos que superan el 62 65 del volumen concentrado de eritrocitos una fracci n de volumen de 0 62 0 65 pueden dar resultados falsos Las muestras con un hematocrito elevado pueden ser analizadas como P gina 9 de 22 hemolizadas Estas muestras pueden ser centrifugadas para obtener plasma El plasma puede volver a analizarse en un nuevo disco reactivo e Todo resultado para una prueba particular que supere los valores del an lisis deber analizarse por otro m todo de prueba homologada o ser enviado a un laboratorio de referencia No diluya la muestra ni vuelva a analizarla en el analizador qu mico Piccolo xpress Advertencia Pruebas exhaustivas del analizador qu mico Piccolo xpress han demostrado que en casos muy raros la muestra aplicada al disco reactivo podr a no fluir con facilidad a la c mara de la muestra Debido al flujo irregular puede analizarse una cantidad inadecuada de muestra y los resu
26. lin beta globulin and gamma globulin in 10 mL of serum Am J Clin Pathol 1948 18 723 30 4 Saifer A Gerstenfeld S Vacsler F Photometric microdetermination of total serum globulins by means of a tryptophan reaction Clin Chem 1961 7 626 36 5 Saifer A Marven T The photometric microdetermination of serum total globulins with a tryptophan reaction a modified procedure Clin Chem 1966 12 414 17 6 Gendler SM Albumin In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2 Ed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 1029 33 7 Webster D Bignell AHC Attwood EC An assessment of the suitability of bromocresol green for the determination of serum albumin Clin Chim Acta 1974 53 101 8 8 Louderback A Mealey EH Taylor NA A new dye binding technic using bromcresol purple for determination of albumin in serum Clin Chem 1968 14 793 794 Abstract 9 Pinnell AE Northam BE New automated dye binding method for serum albumin determination with bromcresol purple Clin Chem 1978 24 80 86 10 Kramer B et al A simple technique for the determination of calcium and magnesium in small amounts of serum J Biol Chem 1921 47 475 481 11 Clark EP et al A study of the Tisdall method for the determination of blood serum calcium with suggested modification J Biol Chem 1925 63 461 464 12 Katzman E et al The determination of serum calcium by titration with ceric sulfate J Biol Chem 1937 118 539 544 13
27. lizar el lactato o separar las c lulas sangu neas del plasma lo antes posible despu s de la extracci n El lactato en sangre entera aumenta r pidamente a consecuencia de la glicolisis El lactato en sangre aumenta de 0 01 a 0 02 mmol I minuto a temperatura ambiente si no hay presente ning n agente antiglicol tico e Para todos los dem s m todos las muestras de sangre entera obtenidas por venopunci n deben ser analizadas dentro de los 60 minutos posteriores a la extracci n Las concentraciones de glucosa se ven afectadas por el tiempo transcurrido desde que el paciente ingiri alimentos y el tipo de muestra obtenida del paciente Para determinar los resultados de glucosa con precisi n deben obtenerse muestras de un paciente que haya ayunado por lo menos durante 12 horas Las concentraciones de glucosa disminuyen aproximadamente 5 12 mg dl por hora en muestras no centrifugadas almacenadas a temperatura ambiente e Larefrigeraci n de muestras de sangre entera puede provocar cambios significativos en las concentraciones de creatinina y glucosa La muestra puede separarse en plasma y suero y almacenarse en tubos de ensayo con tapa a 2 8 C si la muestra no se analiza dentro de los 60 minutos e Para las muestras de sangre o plasma use s lo tubos de recolecci n de muestras tratados con heparina de litio tap n verde P gina 8 de 22 e La concentraci n de di xido de carbono total es determinada con mayor precisi n cuando
28. ltados obtenidos pueden quedar fuera de los valores de referencia La muestra puede volverse a analizar con un nuevo disco reactivo Interferencia Se probaron sustancias como factores de interferencia con los analitos Para el lactato se prepararon mezclas de plasma humano para todos los dem s analitos mezclas de suero humano Cada factor de interferencia potencial se evalu a una concentraci n basada en los niveles de prueba conforme a las directrices EP7 P y EP7 A2 del CLSI antiguamente NCCLS Efectos de las sustancias end genas e Los factores de interferencia fisiol gicos hem lisis ictericia y lipidemia provocan cambios en las concentraciones analizadas de algunos analitos Los ndices de la muestra est n impresos en la base de cada cinta de resultados para informar al usuario sobre los niveles de factores de interferencia presentes en cada muestra e El analizador qu mico Piccolo xpress suprime cualquier resultado que sea afectado por m s del 10 de interferencia por hem lisis lipidemia o ictericia En lugar del resultado la tarjeta tendr impreso HEM LIP o ICT respectivamente e Los niveles de amilasa muy elevados gt 9 000 U L tendr n un efecto significativo superior al 10 de aumento sobre el resultado del cloruro El sistema Piccolo no eval a la concentraci n de amilasa de cada muestra e La prueba de potasio en el sistema Piccolo es una prueba de acoplamiento de piruvato quinasa PK
29. mg dl N 80 Control 1 Media 3 1 3 1 DE 0 12 0 14 VR 3 7 a Control 2 Media 7 3 7 3 DE 0 09 0 15 VR 1 3 2 0 Potasio mmol l N 120 Control 1 Media 6 12 6 12 DE 0 32 0 32 Pagina 17 de 22 VR 5 2 5 7 Control 2 Media 4 10 4 10 DE 0 24 0 26 VR 5 9 6 3 Sodio mmol l N 80 Control 1 Media 143 5 143 5 DE 2 28 2 28 VR 1 6 1 6 Control 2 Media 120 0 120 0 DE 2 13 2 13 Y VR 1 8 1 8 Tabla 6 Precisi n continuaci n Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Di xido de carbono total mmol l N 120 Control 1 Media 21 4 21 4 DE 2 29 2 29 VR 10 7 10 7 Control 2 Media 10 5 10 5 DE 0 90 0 90 VR 8 6 8 6 Nitr geno ureico mg dl N 80 Control 1 Media 19 19 DE 0 35 0 40 VR 1 9 2 1 Control 2 Media 65 65 DE 1 06 1 18 VR 1 6 1 8 Correlaci n Para el lactato se obtuvieron muestras de sangre entera con heparina de litio y se analizaron en el analizador qu mico Piccolo xpress y mediante un m todo de comparaci n Para todos los dem s m todos se obtuvieron y analizaron muestras de suero Las muestras fueron seleccionadas para cumplir con los valores de distribuci n en las directrices EP9 A y EP09 A2 IR del CLSI antiguamente NCCLS 7 Tabla 7 Correlaci n del analizador qu mico Piccolo xpress con los m todos de comparaci n Coeficiente de correlaci n Alb mina g dl 0 854 0 896 Calcio mg dl 0 980 Cloruro mmol l 0 978 Creatinina mg dl 0 993 Glucosa mg dl 0 987 0 997 Lactato
30. minoetil ter N N N N tetraac tico EGTA 19 ug B Galactosidasa 0 005 U Glucosa 1 6 difosfato 1 pg Acido L glutamico 9 2 ug Glucosa 6 fosfato deshidrogenasa 0 1U Glutamato deshidrogenasa 0 1 U Glutamina sintetasa 0 17 U Hexoquinasa 0 1 U Imidazol 29 ug Lactato deshidrogenasa coraz n de pollo 0 13 U Lactato oxidasa 0 002 U Hidr xido de litio monohidrato 23 ug Acetato de magnesio tetrahidrato 67 ug Cloruro de magnesio hexahidrato 2 ug Sulfato de magnesio 33 ug Malato deshidrogenasa 0 1 U Pagina 6 de 22 Cloruro de manganeso 10 ug D manitol 1051 ug Tabla 1 Reactivos Componentes Cantidad Disco Ciclodextrina metilada 314 ug 2 Metil 4 isotizolina 3 uno clorhidrato MIT 4 2 ug B Nicotinamida adenina dinucle tido NAD 83 ug B Nicotinamida adenina dinucle tido fosfato sal s dica NADP 30 ug B Nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADH 36 ug o Nitrofenil a D galactopiranosida ONPG 22 ug n Octilglucosida 31 ug 4 7 13 16 21 Pentaoxa 1 10 diazabiciclo 8 8 5 tricosano Kryptofix 221 86 ug Peroxidasa r bano 1U Fosfoenolpiruvato 57 ug Fosfoenolpiruvato carboxilasa 0 001 U Fosfoglucomutasa 0 035 U F68 plur nico l ug Polietilenglicol 8000 4 ug Ferrocianuro de potasio 0 7 ug Piruvato quinasa 0 01 U Sarcosina oxidasa microorganismos 1U Sacarosa 74 ug Sacarosa fosforilasa 0 07 U Cloruro de sodio 69 ug cido 2 4 6 Tribromo 3 hidroxibenzoico TBHBA 188 ug Trietanolamina clorhidrato 214 ug Triton X 100 26 ug
31. muestra a Amilasa CNPG3 gt CNP G3 Cl Ca Creatinina CRE El m todo Jaff presentado en 1886 sigue siendo el m todo usado con mayor frecuencia para la determinacion de los niveles de creatinina en la sangre El m todo de referencia actual combina el uso de tierra de Fuller floridina con la t cnica de Jaff para aumentar la especificidad de la reacci n Se desarrollaron m todos enzim ticos que son m s espec ficos para la creatinina que las distintas modificaciones de la t cnica de Jaff 2 2 Los m todos que utilizan la enzima creatinina amidohidrolasa eliminan los problemas de la interferencia del i n amon aco que se encuentra en las t cnicas que usan la creatinina iminohidrolasa En las reacciones de acoplamiento de enzimas la creatinina amidohidrolasa hidroliza la creatinina en creatina Una segunda enzima la creatina amidinohidrolasa cataliza la formaci n de sarcosina a partir de la creatina La sarcosina oxidasa provoca la oxidaci n de sarcosina a glicina formaldeh do y per xido de hidr geno H202 En una reacci n de Trinder la peroxidasa cataliza la reacci n entre el per xido de hidr geno cido 2 4 6 tribromo 3 hidroxibenzoico TBHBA y 4 aminoantipirina 4 AAP en un colorante rojo de quinoneimina Se agregan ferrocianuro de potasio y ascorbato oxidasa a la mezcla de la reacci n para reducir al m nimo la interferencia potencial de la bilirrubina y el cido asc rbico respectivamente
32. ndo se mida la creatinina s rica en los pacientes mayores de 18 a os La comunicaci n de forma rutinaria de la eGFR junto con todas las determinaciones de creatinina s rica permite a los laboratorios ayudar a identificar a los individuos con funci n renal reducida y contribuye a facilitar la detecci n de la CKD Los valores calculados de la eGFR lt 60 ml min generalmente est n asociados a un mayor riesgo de resultados adversos de la CKD 2926 Piccolo calcula la eGFR usando la edad el sexo y la raza del paciente El m todo de Piccolo para la creatinina es comparable con el m todo de referencia para la creatinina IDMS de forma que se puede utilizar la siguiente forma de la ecuaci n MDRD para el c lculo de la eGFR TFG ml min 1 73 m 175 x SJ x edad x 0 742 si es mujer x 1 212 si es afroamericano Glucosa GLU Las primeras mediciones de la concentraci n de glucosa fueron realizadas mediante m todos de reducci n del cobre como Folin Wu y Somogyi Nelson La falta de especificidad en las t cnicas de reducci n del cobre llev al desarrollo de procedimientos cuantitativos con las enzimas hexoquinasa y glucosa oxidasa La prueba de glucosa incorporada en el disco reactivo con panel renal Piccolo es una versi n modificada del m todo de la hexoquinasa que se propuso como la base para el m todo de referencia de la glucosa La reacci n de glucosa con adenosina trifosfato ATP catalizada por la hexoquinasa HK p
33. o derivados carbaminos de las prote nas iones de bicarbonato y carbonato y cido carb nico El di xido de carbono total puede ser medido por el indicador de pH el electrodo de CO y m todos enzim ticos espectrofotom tricos todos los cuales producen resultados precisos y exactos El m todo enzim tico es apropiado para uso con un analizador qu mico sangu neo habitual sin a adir complejidad al proceso En el m todo enzim tico la muestra se hace primero alcalina para convertir todas las formas de di xido de carbono CO3 a bicarbonato HCOs El fosfoenolpiruvato PEP y el HCO reaccionan para formar oxaloacetato y fosfato en presencia de fosfoenolpiruvato carboxilasa PEPC La malato deshidrogenasa MDH cataliza la reacci n de oxaloacetato y nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADH a NAD y malato La velocidad del cambio en la absorbancia debido a la conversi n de NADH en NAD es directamente proporcional a la cantidad de tCO en la muestra PEPC PEP HCO p Oxaloacetato fosfato MDH Oxaloacetato NADH H gt NAD Malato Nitr geno ureico sangu neo BUN La urea puede ser medida tanto directa como indirectamente La reacci n de diacetil monoxima el nico m todo directo para medir urea es la usada m s com nmente pero emplea reactivos peligrosos Los m todos indirectos miden amon aco creado a partir de la urea el uso de la enzima ureasa aument la especificidad de estas prueb
34. ompany 1999 1058 1059 D B Sacks Carbohydrates in Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 Ed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders Company 1999 Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI Blood Gas and pH Analysis and related measurements Approved Guidelines Second Edition Document C46 A2 Vol 29 No 8 February 2009 Clinical and Laboratory Standards Institute Procedures for the handling and processing of blood specimens Approved Guidelines Second Edition CLSI Document H18 A2 Wayne PA CLSI 1999 Clinical and Laboratory Standards Institute Procedures for the handling and processing of blood specimens Approved Guidelines Third Edition CLSI Document H18 A3 Wayne PA CLSI 2004 Overfield CV et al Glycolysis a re evaluation of the effect on blood glucose Clin Chim Acta 1972 39 35 40 Pagina 21 de 22 Sl 58 59 60 61 62 63 69 70 71 12 73 Rehak NN Chiang BT Storage of whole blood effect of temperature on the measured concentration of analytes in serum Clin Chem 1988 34 2111 4 Scott M G Electrolytes and blood gases In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 ed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders Company 1999 1065 6 Clinical and Laboratory Standards Institute Interference testing in clinical chemistry Proposed Guideline CLSI Publication EP7 P Wayne PA CLSI 1986 Clinical and Laboratory Standards Institute Inte
35. rference testing in clinical chemistry Approved Guideline Second Edition CLSI Document EP7 A2 Wayne PA CLSI 2005 Young DS Effects of drugs on clinical laboratory tests 3rd Ed Washington DC AACC Press 1990 National Committee for Clinical Laboratory Standards How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory Approved Guidelines Second Edition NCCLS Document C28 A2 Wayne PA NCCLS 2000 Clinical and Laboratory Standards Institute How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory Approved Guidelines Third Edition CLSI Document C28 A3c Wayne PA CLSI 2010 Lum G Gambino S Serum vs plasma determinations in routine chemistry Clin Chem 1972 18 7 Abstr 134 710 Lum G Gambino S A comparison of serum vs hepirinized plasma for routine chemistry tests Am J Clin Pathol 1974 61 1 108 13 Carothers J Kurtz N Lehmann J Jr Error introduced by specimen handling before determination of inorganic phosphate concentrations in plasma and serum Clin Chem 1976 22 11 1909 12 Ladenson J et al Serum vs heparinized plasma for routine chemistry tests Am J Clin Path 1974 62 4 545 52 Clinical and Laboratory Standards Institute Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices Approved Guideline CLSI Document EP5 A Wayne PA CLSI 1999 Clinical and Laboratory Standards Institute Evaluation of precision performance of clinical chemistry d
36. roduce glucosa 6 fosfato G 6 P y adenosina difosfato ADP La glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G 6 PDH cataliza la reacci n de G 6 P en 6 fosfogluconato y la reducci n de nicotinamida adenina dinucle tido NAD a NADH HK Glucosa ATP gt G 6 P ADP G 6 PDH G 6 P NAD gt 6 fosfogluconato NADH H La absorbencia se mide bicromaticamente a 340 nm y 850 nm La producci n de NADH es directamente proporcional a la cantidad de glucosa en la muestra Pagina 3 de 22 Lactato LAC En el m todo de Abaxis la lactato oxidasa LOX oxida el lactato LAC en piruvato y per xido de hidr geno H202 La peroxidasa cataliza la reacci n del HO 4 aminoantipirina 4 A AP y el cido 3 5 dicloro 2 hidroxibenzenesulf nico DHBSA en un colorante rojo de quinoneimina LOX Lactato O 2 gt gt Piruvato H O Peroxid y Son H 0 4 AAP DHBSA E gt Colorante rojo de quinoneimina H2O La velocidad de formaci n del colorante rojo es proporcional a la concentraci n de LAC en la muestra La reacci n se mide bicrom ticamente a 515 nm y 600 nm Magnesio MG El m todo de activaci n de la hexoquinasa HK para el magnesio es el m todo de mejor ajuste del sistema Piccolo en t rminos de sensibilidad precisi n y exactitud El m todo de magnesio enzim tico puede describirse como HK Glucosa ATP gt G 6 P ADP Mg G 6 PDH G 6 P NADP
37. s y en sangre entera en tres sitios point of care por dos operadores probando cada uno de ellos 10 duplicados en 10 analizadores Abaxis Los resultados de los estudios de precisi n se muestran en la Tabla 6 Tabla 6 Precisi n Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Alb mina g dl N 80 Control 1 Media 5 6 5 6 DE 0 09 0 11 VR 1 7 2 1 Control 2 Media 3 7 3 7 DE 0 07 0 11 VR 2 0 2 9 Calcio mg dl N 80 Control 1 Media 8 6 8 6 DE 0 21 0 25 VR 2 4 2 9 Control 2 Media 11 8 11 8 DE 0 39 0 40 VR 3 3 3 4 Cloruro mmol l N 160 Control 1 Media 97 8 97 8 DE 1 63 1 74 VR 1 7 1 7 Control 2 Media 113 6 113 6 DE 1 97 2 22 VR 1 7 2 0 Creatinina mg dl N 80 Control 1 Media 11 1 1 DE 0 14 0 14 VR 12 5 13 1 Control 2 Media 5 2 5 2 DE 0 23 0 27 VR 4 4 5 2 Glucosa mg dl N 80 Control 1 Media 66 66 P gina 15 de 22 DE 0 76 1 03 VR 1 1 1 6 Control 2 Media 278 278 DE 2 47 3 84 VR 0 9 1 4 Tabla 6 Precisi n continuaci n Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Lactato mmol l N 80 Control 1 Media 1 62 1 62 DE 0 03 0 04 VR 1 8 2 2 Control 2 Media 3 63 3 63 DE 0 05 0 08 VR 1 5 2 3 Control 3 Media 6 99 6 99 DE 0 18 0 36 VR 2 6 5 2 Mezcla de plasmas 1 N 40 Media 0 86 0 86 DE 0 02 0 02 VR 1 9 1 9 Mezcla de plasmas 2 N 40 Media 6 22 6 22 DE 0 20 0 20 VR 3 2 3 2 Sangre entera 1 Sitio 1 N 20 Operador 1 Operador 2 Media 1 52 1 50 1 51 DE 0 03 0 02
38. s de retirarse del refrigerador sin calentarlos previamente No permita que los discos permanezcan a temperatura ambiente m s de 48 horas antes de usar Abra la bolsa de aluminio sellada y saque el disco las instrucciones para la manipulaci n cuidadosa del reactivo recomiendan no tocar el anillo del c digo de barras ubicado en la parte superior del disco Utilizar de acuerdo con las instrucciones proporcionadas en el Manual del usuario del analizador qu mico Piccolo xpress Deseche los discos no usados transcurridos 20 minutos de la apertura de la bolsa Almacenamiento Almacene los discos de reactivo en sus bolsas selladas a 2 8 C No exponga los discos abiertos o sin abrir a la luz solar directa o a temperaturas superiores a los 32 C Los discos de reactivo pueden ser usados hasta la fecha de caducidad indicada en el paquete La fecha de caducidad tambi n aparece codificada en el c digo de barras impreso en el anillo del c digo de barras Si los reactivos han caducado aparecer un mensaje de error en la pantalla del analizador qu mico Piccolo xpress Indicaciones de inestabilidad deterioro del disco reactivo Una bolsa rasgada o rota puede permitir que la humedad Ilegue al disco sin usar y afecte de manera negativa la eficacia del reactivo No use discos de bolsas da adas 6 Instrumento Consulte el Manual del usuario del analizador quimico Piccolo xpress para recibir informacion completa sobre el uso del analizador 7 Obtenci n
39. tes de detecci n El l mite inferior del intervalo informable din mico para cada analito es alb mina 1 g dl 10 g l calcio 4 0 mg dl 1 0 mmol l cloruro 80 mmol l creatinina 0 2 mg dl 18 pmol l glucosa 10 mg dl 0 56 mmol 1 lactato 0 07 mmol L 0 6 mg dl magnesio 0 1 mg dl 0 04 mmol l f sforo 0 2 mg dl 0 06 mmol l potasio 1 5 mmol l sodio 110 mmol l di xido de carbono total 5 mmol l y nitr geno ureico sangu neo 2 0 mg dl 0 7 mmol urea 1 Precisi n Los estudios de precisi n se realizaron aplicando las directrices EP5 A y EP5 A2 del CLSI antiguamente NCCLS con modificaciones basadas en las directrices EP18 A y EP18 A2 del CLSI antiguamente NCCLS para equipos utilizados en unidad 7 Los resultados de precisi n intraserial y total fueron determinados por niveles de prueba de materiales de control disponibles comercialmente Los estudios utilizaron m ltiples instrumentos Las pruebas de precisi n para alb mina calcio creatinina glucosa sodio y nitr geno ureico fueron realizadas en un sitio las de potasio y di xido de carbono total fueron realizadas en dos sitios a lo largo de 20 d as y las de cloruro magnesio y f sforo se condujeron en dos sitios a lo largo de cinco d as Las pruebas de precisi n de lactato fueron realizadas en los controles 1 2 y 3 en dos sitios utilizando dos lotes de discos a lo largo de un per odo de cinco d as en mezclas de plasma en Abaxis a lo largo de un periodo de cinco d a
40. trophotometry of magnesium in serum after reaction with hexokinase and glucose 6 phophate dehydrogenase Clin Chem 1985 31 703 705 Schultz DW Passonneau JV Lowry OH An enzymic method for the measurement of inorganic phosphate determination Anal BioChem 1967 19 300 314 Tedokon M et al Enzymatic assay of inorganic phosphate with use of sucrose phosphorylase and phosphoglucomutase Clin Chem 1992 38 512 515 Berry MN et al Enzymatic determination of potassium in serum Clin Chem 1989 35 817 820 photometry coulometry and ion selective electrodes Clin Chem 1994 40 846 847 Hubl W et al Enzymatic determination of sodium potassium and chloride in abnormal hemolyzed icteric lipemic paraproteinemic or uremic serum samples compared with indirect determination with ion selective electrodes Clin Chem 1994 40 1528 1531 Helgerson RC et al Host guest complexation 50 Potassium and sodium ion selective chromogenic ionophores J Amer Chem Soc 1989 111 6339 6350 Kumar A et al Chromogenic ionophere based methods for spectrophotometric assay of sodium and potassium in serum and plasma Clin Chem 1988 34 1709 1712 Berry MN et al Enzymatic determination of sodium in serum Clin Chem 1988 34 2295 2298 Skeggs LT Jr An automatic method for the determination of carbon dioxide in blood plasma Am J Clin Pathol 1960 33 181 185 Korzun WJ Miller WG Carbon dioxide In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2 e
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