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1. and SOLID M tuberculosis 68 62 52 1 1 4 M avium intracellulare 170 159 89 36 2 3 M kansasii 7 7 5 0 0 1 M fortuitum 5 3 0 2 0 1 M bovis 1 1 0 0 0 M chelonae 9 8 4 0 0 0 M gordonae 30 20 3 10 0 4 M scrofulaceum 1 0 0 0 0 1 M xenopi 6 6 2 0 2 0 M szulgai 3 3 3 0 0 0 M species other 8 7 1 2 1 1 TOTAL 308 276 160 51 6 15 a The number of organisms recovered by any method from specimens tested by all three methods b The total number of organisms recovered in the VersaTREK ESP Culture System II c p lt 0 05 for comparison between VersaTREK ESP and BACTEC using the McNemar modification of the chi square test d p lt 0 05 for comparison between VersaTREK ESP and solid media using the McNemar modification of the chi square test TABLE 4 DIRECT TESTING OF POSITIVE VERSATREK ESP MYCO BOTTLES WITH ACCUPROBES Organism Total Initial Probe Initial Probe Initial Probe Probe Positive Positive Equivocal Negative After Retest M avium complex Blood specimens 51 43 84 3 8 15 7 0 51 100 Other specimens 226 199 88 1 24 10 6 3 1 3 226 100 M tuberculosis complex Blood specimens 1 1 100 0 0 1 100 Other specimens 37 29 78 4 6 16 2 2 5 4 37 100 M gordonae 38 37 97 4 1 2 6 0 38 100 TOTAL 353 310 38 5 353 a GenProbe San Diego CA b Multiple retests were required for a final identification of some isolates For MAC specimens from blood 1 96 For MAC specimens from sources
2. hydroxyde de sodium NALC NaOH ou acide oxalique est recommand e D autres m thodes de d contamination ont t test es en parall le avec le milieu de culture VersaTREK Myco Des d contaminants digestifs peuvent avoir des effets n fastes sur les mycobact ries 3 Les mycobact ries peuvent varier en ce qui concerne la rapidit acide suivant la souche l ge de la culture ainsi que d autres variables Tous les flacons au signal positif avec VersaTREK ESP Culture System Il ou apparaissant opaques doivent tre mis en sous culture dans des milieux mycobact riens la fois s lectifs et non s lectifs Les esp ces non mycobact riennes peuvent supplanter les mycobact ries pr sentes De tels flacons de culture doivent tre d contamin s et remis en culture 4 Les flacons VersaTREK Myco signal s positifs peuvent contenir une ou plusieurs esp ces de mycobact ries et ou d autres esp ces non mycobact riennes L identification des mycobact ries pr sentes n cessite la mise en sous culture et des proc dures compl mentaires pour identifier les organismes pr sents La constance de la morphologie microscopique dans les flacons VersaTREK Myco n a pas t tablie 5 Les flacons VersaTREK Myco sont incub s a 35 37 C pr venant potentiellement la r cup ration de mycobact ries n cessitant d autres temp ratures d incubation par ex M marinum M ulcerans M haemophilum La r cup ration de ces types d organismes de
3. H2O Processed Water 25 ml H2O Processed Water 25 ml PXB Polymyxin B 0 02 w v PXB Polymyxin B 0 02 w v AZL Azlocillin 0 0075 w v NA Nalidixic Acid 0 06 w v FOS Fosfomycin 0 054 w v AMB Amphotericin B 0 015 w v NA Nalidixic Acid 0 042 w v VAN Vancomycin 0 009 w v AMB Amphotericin B 0 015 w v SA Solubilizing Agent 5 w v STB Stabilizer 1 wiv FIL Filler 7 7 WN Adjusted and or supplemented to meet performance criteria PRECAUTIONS 1 For In Vitro Diagnostic Use 2 Refer to VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA Material Safety Data Sheets for complete hazard information 3 WARNING POTENTIAL INFECTIOUS TEST SPECIMEN Infectious agents may be present in specimens Reagents contain material of animal origin and so are potential carriers or transmitters of disease Follow Universal Precautions and institutional policy in handling and disposing of infectious agents 4 Working with M tuberculosis grown in culture the recommendation is for Biosafety Level 3 practices containment equipment and facilities 5 The VersaTREK Connector contains a sharp recessed needle that is sterile upon first removing the seal but is potentially contaminated upon termination of use Follow institutional policy for handling and disposing of blood contaminated devices Do not handle in a casual manner Sterilize prior to disposal Dispose in an approved sharps container Do not reuse 6 Visually inspect all bottles
4. la procedura in basso pu essere eseguita per test supplementari 1 Aggiungere 1 ml VersaTREK Myco GS e 0 5 ml VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA reidratato in un flacone di coltura VersaTREK Myco 2 Gli organismi QC possono essere utilizzati da aliquote congelate o medium solido Preparare una sospensione in soluzione fisiologica sterile 0 85 corrispondente a McFarland standard No 1 circa 10 CFU ml Lasciare depositare i grumi di organismo per 30 minuti Diluire organismo a 10 CFU ml in soluzione fisiologica sterile Inoculare il flacone con 1 ml di organismo diluito TABELLA 2 RISULTATI PREVISTI DEL CONTROLLO DI QUALIT Organismo ATCC CFU ml Giorni a risultato positivo Organismo ATCC CFU ml Giorni a risultato positivo M tuberculosis 25177 10 lt 14 M kansasii 12478 10 lt 14 M fortuitium 6841 10 lt 14 M scrofulaceum 19981 10 lt 14 M intracellulare 13950 10 lt 14 LIMITAZIONI 1 Il recupero di micobatteri nel flacone VersaTREK Myco dipende dalla qualit del campione raccolto dal numero di organismi colturabili nel volume del campione e dal metodo di trattamento Per un ottimale recupero dei micobatteri fondamentale attenersi alle istruzioni della procedura La contaminazione con micobatteri saprofitici nell acqua di rubinetto o altri reagenti e apparecchiature di laboratorio pu provocare risultati positivi ricupero di batteri ambientali al di fuori del campione clinico 2 consigliabile effettu
5. meios s lidos convencionais combinados detectaram 92 das amostras que desenvolveram micobact rias O Aparelho VersaTREK ESP Culture System Il demonstrou uma taxa de 1 1 falsos positivos sinal positivo sem microrganismos observados e de 0 6 falsos negativos sinal negativo subcultura AFB positiva A taxa de falsos negativos baseia se na colora o e ou subcultura de todas as amostras positivas obtidas atrav s de qualquer um dos m todos mais 10 das amostras negativas nos tr s m todos A taxa de contamina o inicial foi de 8 8 e a final de 4 2 As amostras positivas foram distribu das pelos seguintes tipos de amostras respirat ria 72 sangue 15 fezes 5 tecido 3 6 fluidos est reis 2 2 urina 1 4 e feridas 0 8 A utiliza o de sondas de cido nucleico para identifica o de micobact rias directamente de uma garrafa VersaTREK Myco positiva foi reconhecida como precisa e fi vel As garrafas VersaTREK Myco positivas n 360 foram testadas com duas sondas AccuProbe no dia da positividade tal como descrito no Procedimento As sondas utilizadas foram determinadas pela pigmentac o do sedimento pellet Um sedimento pellet amarelado foi testado com sondas espec ficas para complexo M tuberculosis e complexo M avium MAC enquanto que um sedimento pellet cromog nico foi testado com sondas espec ficas para MAC e M gordonae As garrafas que apresentaram resultados de sonda duvidosos foram incubados
6. n TABLA 1 INFORME DE RESULTADOS Frasco y estado del frotis Informe Se al AFB positivo Bacilos acido alcohol resistentes AFB Pendiente de identificaci n Se al Sin informe o muestra contaminada con organismos no micobacterianos AFB no se puede determinar la presencia ausencia de AFB CONTROL DE CALIDAD Se incluye un Certificado de an lisis con cada lote de VersaTREK Myco Cada lote est en conformidad con los criterios de garant a de calidad de TREK Si se desea se puede seguir el procedimiento siguiente para una comprobaci n adicional 1 A ada 1 ml de VersaTREK Myco GS y 0 5 ml de VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA rehidratado en un frasco de cultivo VersaTREK Myco 2 Pueden utilizarse organismos de control de calidad de al cuotas congelados o medios s lidos Prepare una suspensi n en equivalente salino est ril al 0 85 hasta un est ndar McFarland N 1 aproximadamente 10 CFU ml Deje asentar un conjunto de organismos durante 30 minutos Diluya el organismo a 10 CFU ml en una soluci n salina est ril Inocule el frasco con 1 ml de organismo diluido TABLA 2 RESULTADOS PREVISTOS DE CONTROL DE CALIDAD Organismo ATCC CFU ml Dias hasta positivo Organismo ATCC CFU ml Dias hasta positivo M tuberculosis 25177 10 lt 14 M kansasii 12478 10 lt 14 M fortuitium 6841 10 lt 14 M scrofulaceum 19981 10 lt 14 M intracellulare 13950 10 lt 14 LIMITACIONES 1 La recuperaci n de micobacter
7. w v STB Stabilisant 1 wiv FIL Filtre 7 7 wiv Les composants ou suppl ments peuvent tre ajust s pour r pondre des crit res de performances 20 PRECAUTIONS 1 Pour l utilisation dans le diagnostic in vitro 2 Voir les fiches de s curit de VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA pour les informations compl tes sur les dangers 3 ATTENTION ECHANTILLON TEST POTENTIELLEMENT INFECTIEUX Des agents infectieux peuvent tre pr sents dans les chantillons Les r actifs contiennent des mat riaux d origine animale et sont de ce fait des porteurs ou vecteurs potentiels de maladies Respecter les pr cautions universelles et les r gles professionnelles lors de la manipulation et de l limination des agents infectieux 4 Pour travailler avec M tuberculosis en culture on recommande la pratique du niveau 3 de bios curit quipement de conteneur et autres dispositifs 5 Le VersaTREK Connector contient une aiguille pointue r tractable qui est st rile lors de l enl vement du conditionnement mais potentiellement contamin e la fin de l utilisation Suivre les r gles professionnelles de traitement et d limination des mat riels contamin s par le sang Ne pas manipuler d une mani re d contract e St riliser avant d liminer Eliminer dans un conteneur agr pour les aiguilles Ne pas r utiliser 6 Examiner visuellement les flacons la recherche de contaminations fissures ou autres signes de
8. 0 5 VersaTREK Myco AS r hydrat ou VersaTREK Myco PVNA dans un flacon de culture VersaTREK Myco 2 Des organismes CQ peuvent tre utilis s a partir de fractions congel s ou de milieux solides Pr parer une suspension dans une solution st rile saline 0 85 quivalente la norme McFarland n 1 environ 10 CFU ml Laisser les rejets de l organisme se d poser pendant 30 minutes Diluer l organisme dans une solution st rile saline de 10 CFU ml Inoculer 1ml d organisme dilu dans la flacon TABLEAU 2 RESULTATS CQ ATTENDUS Organisme ATCC CFU ml Jours pour devenir positifs Organisme ATCC CFU ml Jours pour devenir positifs M tuberculosis 25177 10 lt 14 M kansasii 12478 10 lt 14 M fortuitium 6841 10 lt 14 M scrofulaceum 19981 10 lt 14 M intracellulare 13950 10 lt 14 LIMITATIONS 1 La r cup ration de mycobact ries dans le flacon VersaTREK Myco d pend de la qualit de l chantillon du nombre d organismes cultivables dans le volume de l chantillon et de la m thode de traitement Le respect des instructions de proc dure est essentiel pour une r cup ration optimale des mycobact ries La contamination par des mycobact ries saprophytiques dans l eau du robinet ou autres r actifs et mat riels de laboratoire peut provoquer des r sultats positifs erron s r cup ration de bact ries environnementales non pr sentes dans l chantillon clinique 2 La contamination par la m thode N ac tyl L cyst ine
9. BACTEC ESP SOLO SOLO SOLIDO ESP Y SOLIDO M tuberculosis 68 62 52 1 1 4 M avium intracellulare 170 159 89 36 2 3 M kansasii 7 7 5 0 0 1 M fortuitum 5 3 0 2 0 1 M bovis 1 1 0 0 0 M chelonae 9 8 4 0 0 0 M gordonae 30 20 3 10 0 4 M scrofulaceum 1 0 0 0 0 1 M xenopi 6 6 2 0 2 0 M szulgai 3 3 3 0 0 0 M species otros 8 7 1 2 1 1 TOTAL 308 276 160 51 6 15 a El n mero de organismos recuperados mediante cualquier m todo de las muestras comprobadas por los tres m todos b El n mero total de organismos recuperados en el VersaTREK ESP Culture System II c p lt 0 05 para comparar entre VersaTREK ESP y BACTEC utilizando la modificaci n de la prueba del chi cuadrado McNemar d p lt 0 05 para comparar entre VersaTREK ESP y medios s lidos utilizando la modificaci n de la prueba del chi cuadrado McNemar TABLA 4 COMPROBACI N DIRECTA DE FRASCOS VERSATREK ESP MYCO POSITIVOS CON ACCUPROBES Organismo Total Probeta inicial Probeta inicial Probeta inicial Probeta positiva positiva equ voca negativa tras 2 prueba Complejo M avium Muestras sangu neas 51 43 84 3 8 15 7 0 51 100 Otras muestras 226 199 88 1 24 10 6 3 1 3 226 100 Complejo M tuberculosis Muestras sangu neas 1 1 100 0 0 1 100 Otras muestras 37 29 78 4 6 16 2 2 5 4 37 100 M gordonae 38 37 97 4 1 2 6 0 38 100 TOTAL 353 310 38 5 353 a GenProbe San Diego CA b Fue necesario realizar prueb
10. VersaTREK Myco GS and for potentially contaminated specimens VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Myco PVNA should be used when delays greater than 8 hours are expected before processing The VersaTREK Connector is attached to each bottle to establish a sterile monitoring pathway with the VersaTREK ESP Culture System II instrument A hydrophobic membrane in the VersaTREK Connector prevents aerosolization Clinical information is entered into the system computer and the bottle is appropriately placed in the instrument for incubation at 35 37 C under stationary conditions VersaTREK ESP Culture System Il detects mycobacterial growth by automatically monitoring every 24 minutes the rate of consumption of oxygen within the headspace of the culture bottle and reports that growth response with a visible signal REAGENTS VersaTREK Myco Formula H20 Processed Water 11 5 ml MDK Middlebrook 7H9 Broth 0 56 w v CAS Casitone 0 12 w v GLY Glycerol 0 24 wiv SBC Sodium Bicarbonate 0 026 wiv VersaTREK Myco also contains sponges VersaTREK Myco GS Formula H20 Processed Water 50 ml BSA Bovine Serum Albumin 7 5 WIV DEX Dextrose 3 0 wiv OLA Oleic Acid 0 09 v v CAT Catalase 0 003 w v NaCl Sodium Chloride 1 27 wiv VersaTREK Myco AS and VersaTREK Myco PVNA contain a lyophilized mixture of antimicrobial agents that are rehydrated to 25 ml VersaTREK Myco AS Formula VersaTREK Myco PVNA Formula
11. contener micobacterias Las esponjas en los frascos VersaTREK Myco proporcionan una matriz de soporte del crecimiento y aumentan el rea de superficie expuesta al ox geno del espacio de aire La tecnolog a del VersaTREK ESP Culture System Il est basada en la detecci n de los cambios de presi n del espacio de aire en el interior de un frasco herm tico El VersaTREK ESP Culture System II monitoriza los cambios en la producci n o en el consumo de gas debido al crecimiento microbiano Se ha desarrollado un algoritmo especial para la detecci n de micobacterias de crecimiento muy lento PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO Las muestras debidamente preparadas se inoculan con una jeringuilla y aguja en los frascos VersaTREK Myco que incluyen VersaTREK Myco GS y VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA para muestras potencialmente contaminadas VersaTREK Myco PVNA debe utilizarse cuando est previsto un retraso superior a 8 horas antes del procesamiento El VersaTREK Connector se fija a cada frasco para establecer una ruta de monitorizaci n est ril con el instrumento del VersaTREK ESP Culture System Il Una membrana hidr foba en el VersaTREK Connector evita la formaci n de aerosol La informaci n cl nica se introduce en el ordenador del sistema y el frasco se coloca adecuadamente en el instrumento para una incubaci n a 35 37 C en condiciones estacionarias El VersaTREK ESP Culture System Il detecta el crecimiento de micobacterias monitorizando autom t
12. d t rioration Ne pas utiliser des flacons qui semblent opaques ou endommag s 7 Utiliser uniquement des seringues aiguille verrouill e 8 Passer tous les flacons VersaTREK Myco dans l autoclave avant de les liminer 9 Si l tanch it est hors d usage NE PAS UTILISER VersaTREK Connector et le d classer dans un conteneur pour aiguilles ENTREPOSAGE VersaTREK Myco Conserver 15 30 C l abri de la lumi re NE PAS CONGELER Les bouillons de culture doivent tre incolores ne pas les utiliser s ils sont opaques VersaTREK Myco GS Conserver 2 8 C l abri de la lumi re VersaTREK Myco AS et VersaTREK Myco PVNA Conserver 2 8 C Apr s r hydratation conserver 2 8 C et utiliser dans les 5 jours ou fractionner et entreposer 20 C et utiliser dans les 3 mois Une fois d gel ne pas recongeler PRINCIPES DE COLLECTE DES ECHANTILLONS Les chantillons des sources suivantes ont t utilis s pendant l valuation clinique du VersaTREK ESP Culture System II respiratoire y compris lavage expectoration etc fluides corporels comme liquide c phalorachidien liquide synovial liquide pleural etc urine mati res f cales aspirations gastriques tissus sang et moelle osseuse Collecter et traiter des chantillons de diff rents sites du corps comme mentionn dans Public Health Mycobacteriology A Guide for te Level III Laboratory et dans le Clinical Microbiology Procedures Handbook o
13. de gua esterilizada destilada ou desionizada atrav s do septo desinfectado utilizando uma agulha e uma seringa Obter reagente suficiente para 50 garrafas 3 Identifique com uma etiqueta a garrafa de cultura VersaTREK Myco com a informa o do doente 4 Desinfecte a tampa da garrafa com lcool 5 Adicione assepticamente 1 ml de VersaTREK Myco GS injectando atrav s do septo com uma agulha e seringa 6 Adicione assepticamente 0 5 ml de solu o VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA injectando atrav s do septo com uma agulha e seringa 7 Adicione 1 ml de amostra biol gica concentrada com uma agulha e seringa NOTA O sobreenchimento significativo da garrafa poder originar resultados positivos falsos e no caso de amostras de sangue de tubos isoladores pode levar a uma inibi o do crescimento Inocule 0 1 ml de amostra numa placa de agar Middlebrook 7H10 ou outro meio s lido micobacteriano com base de ovo NOTA Alternativamente as etapas 2 e 5 a 7 podem ser efectuados abrindo as garrafas e adicionando os reagentes e a amostra utilizando pipetas esterilizadas Dever ter o cuidado de manter a t cnica ass ptica A tampa e c psula devem ser devidamente encaixadas de forma a garantir um sistema estanque Se a tampa e a c psula n o forem encaixadas devidamente ir ocorrer um erro de fuga na garrafa 8 Limpe a garrafa de cultura e a tampa com desinfectante micobactericida 9Homogeneize invertendo v rias vezes 10 Rem
14. de tuberculina est riles con agujas permanentemente colocadas Pipetas est riles opcional Desinfectante micobactericida ej Amphyl OMNI etc Tampones de alcohol Mezclador de vortice Tubos centrifugadores c nicos est riles de polipropileno 50 ml Armaz n de seguridad biol gica Microscopio Materiales para muestras de tinci n Organismos de control de calidad M tuberculosis ATCC 25177 M kansasii ATCC 12478 M fortuitum ATCC 6841 M scrofulaceum ATCC 19981 M intracellulare ATCC 13950 Inoculacion de frascos de cultivo VersaTREK Myco 1 Desinfecte el tap n del frasco VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA con alcohol 2 Reconstituya as pticamente VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA inyectando 25 ml de agua destilada o desionizada est ril a trav s del septo desinfectado con una aguja y jeringuilla Habra suficiente reactivo para 50 frascos 3 Etiquete el frasco de cultivo VersaTREK Myco con la informaci n del paciente 4 Desinfecte el tap n del frasco con alcohol 5 A ada as pticamente 1 ml de VersaTREK Myco GS inyectando a trav s del septo con una aguja y jeringuilla 6 A ada as pticamente 0 5 ml de soluci n VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA inyectando a trav s del septo con una aguja y jeringuilla 7 A ada hasta 1 ml de muestra cl nica concentrada con una aguja y jeringuilla NOTA Un llenado excesivo del frasco puede provocar falsos resultados positivos y en el caso de muestras sangu neas en
15. eliminada Esterilize o conte do da garrafa antes da elimina o RESULTADOS A detec o de crescimento microbiol gico no VersaTREK ESP Culture System Il baseia se na medi o sens vel da produ o de g s e ou consumo de g s dentro do espa o livre de uma garrafa de cultura selado Esta informa o utilizada para criar uma curva para cada garrafa Um algoritmo interno analisa a informa o de forma a determinar o estado de cada amostra Quando um determinado conjunto de condi es cumprido uma garrafa assinalada positiva Existem aproximadamente 10 CFU ml de micobact rias na altura da detec o TABELA 1 REPORTAR RESULTADOS Relat rio de Estado do Frasco e Colheita Sinal AFB positivo Bacilos cido resistentes AFB identifica o pendente Sinal Sem relat rio ou amostra contaminada com organismos nao micobacterianos AFB nao possivel determinar a presenca aus ncia de AFB CONTROLO DE QUALIDADE Um Certificado de An lise inclu do em cada lote VersaTREK Myco Cada lote esta em conformidade com os crit rios de certifica o de qualidade da TREK Se necess rio o procedimento em baixo pode ser cumprido para testes adicionais 1 Adicione 1 ml de VersaTREK Myco GS e 0 5 ml de VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA re hidratado garrafa de cultura VersaTREK Myco 2 Os microrganismos de CQ podem ser utilizados a partir de al quotas congeladas ou meio s lido Prepare a suspens o equivalente ao p
16. for contamination cracks or other signs of deterioration Do not use bottles that appear turbid or damaged 7 Use only needle locking syringes 8 Autoclave all VersaTREK Myco bottles prior to disposal 9 If seal is broken DO NOT USE VersaTREK connector and discard in sharps container STORAGE VersaTREK Myco Store at 15 30 C Protect from light DO NOT FREEZE Broth should appear colorless do not use if turbid VersaTREK Myco GS Store at 2 8 C Protect from light VersaTREK Myco AS and VersaTREK Myco PVNA Store at 2 8 C Upon rehydration store at 2 8 C and use within 5 days or aliquot store at 20 C and use within 3 months Once thawed do not refreeze SPECIMEN COLLECTION PRINCIPLES Specimens from the following sources were used during the clinical evaluation of the VersaTREK ESP Culture System Il respiratory including sputum lavage etc body fluids such as CSF synovial fluid pleural fluid etc urine stool gastric aspirates tissues blood and bone marrow Collect and process specimens from different body sites as described in Public Health Mycobacteriology A Guide for the Level III Laboratory and in the Clinical Microbiology Procedures Handbook or as described in your laboratory procedure manual Note Blood and bone marrow specimens must be processed using one of the following procedures before inoculating VersaTREK Myco bottles 1 Isolator tubes Follow the Isolator manufacturer s directions for lysis and c
17. growth Inoculate 0 1 ml of specimen on a Middlebrook 7H10 agar plate or other mycobacterial solid agar or egg based medium NOTE Alternatively steps 2 and 5 7 may be performed by opening the bottles and adding the reagents and sample using sterile pipettes Care must be taken to maintain aseptic technique The stopper and cap must be reseated properly to guarantee a sealed system If the stopper and cap are not seated properly a leak bottle error will occur 8 Wipe the culture bottle and stopper with mycobactericidal disinfectant 9 Mix by inverting several times 10 Remove the seal from the bottom of a VersaTREK Connector Place the needle end of the connector over the culture bottle neck and press vertically down to puncture the culture bottle stopper NOTE Do not invert the culture bottle while the VersaTREK Connector is on the bottle Fluid in the needle may interfere with the pressure readings for the bottle 11 Record the desired patient information in the VersaTREK ESP Culture System Il computer 12 Place the culture bottle with VersaTREK Connector into the instrument 13 When the instrument indicates via a steady red light that a particular bottle location contains a positive culture remove the bottle according to the procedures specified in the VersaTREK ESP Culture System Il Operator s Manual 14 Allow the bottle to vent through the VersaTREK Connector In a biological safety cabinet remove the VersaTREK Connector from
18. inadvertida Esterilizar antes de eliminar Eliminar num contentor aprovado para objectos contundentes Nao reutilizar 6 Inspeccione visualmente todas oas garrafas no que respeita a contaminag o fissuras ou outros sinais de deterioragao Nao utilize garrafas que se apresentem turvas ou com fissuras 7 Utilize apenas seringas com bloqueio de agulha 8 Proceda autoclavagem de todas as garrafas VersaTREK Myco antes da eliminac o 9 Se o selo tiver sido violado NAO UTILIZE o VersaTRECK connector e elimine o num contentor para objectos contundentes ARMAZENAMENTO E VersaTREK Myco Conservar entre 15 e 30 C Proteger da exposi o solar N O CONGELAR O caldo dever ser incolor n o utilizar se parecer turvo VersaTREK Myco GS Conservar entre 2 a 8 C Proteger da exposic o solar VersaTREK Myco AS e VersaTREK Myco PVNA Conservar entre 2 e 8 C Depois de re hidratado conservar entre 2 e 8 C e utilizar dentro de 5 dias ou aliquotare conservar a 20 C utilizar dentro de 3 meses Depois de descongelado n o voltar a congelar PRINC PIOS DA COLHEITA DE AMOSTRAS Foram utilizadas amostras dos seguintes tipos de produtos durante a avalia o cl nica do VersaTREK ESP Culture System Il respirat rias incluindo expectorac o lavagens etc fluidos corporais como LCR l quido sinovial fluido pleural etc urina fezes aspira o g strica tecidos sangue e medula ssea Colha e processe as amostras a parti
19. of the incubation period 6 weeks or as defined by your laboratory procedure manual a bottle not exhibiting a positive growth response should be visually inspected for turbidity If the bottle is turbid obtain a sample for acid fast staining and subculture as described above If evidence of turbidity is lacking the bottle may be discarded Sterilize bottle contents prior to disposal RESULTS The detection of microbial growth in the VersaTREK ESP Culture System Il is based on the sensitive measurement of gas production and or gas consumption within the headspace of a sealed culture bottle This information is used to generate a curve for each bottle An internal algorithm analyzes the information to determine the status of each specimen When a certain set of conditions is met a bottle is flagged as positive There are approximately 10 CFU ml of mycobacteria at the time of detection TABLE 1 REPORTING RESULTS Bottle and Smear Status Report Signal AFB positive Acid Fast Bacilli AFB identification pending Signal No report or specimen contaminated with non mycobacterial organisms AFB unable to determine presence absence of AFB QUALITY CONTROL A Certificate of Analysis is included with each lot of VersaTREK Myco Each lot conforms to TREK s quality assurance criteria If desired the procedure below can be followed for additional testing 1 Add 1 ml VersaTREK Myco GS and 0 5 ml rehydrated VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PV
20. species other 8 7 1 2 1 TOTAL 308 276 160 51 6 15 a Nombre d organismes r cup r s par toutes les m thodes au d part d chantillons test s par les trois m thodes b Nombre total d organismes r cup r s dans le VersaTREK ESP Culture System Il c p lt 0 05 pour la comparaison entre VersaTREK ESP et BACTEC en utilisant la modification McNemar et le test du chi carr d p lt 0 05 pour la comparaison entre VersaTREK ESP et les milieux solides en utilisant la modification McNemar et le test du chi carr TABLEAU 4 TEST DIRECT DU VERSATREK ESP POSITIF FLACONS MYCO AVEC ACCUPROBES Organisme TOTAL Sonde initiale Sonde initiale Sonde initiale Sonde positive positive quivoque n gative apr s re test Complexe M avium Echantillons de sang 51 43 84 3 8 15 7 0 51 100 Autres chantillons 226 199 88 1 24 10 6 3 1 3 226 100 Complexe M tuberculosis Echantillons de sang 1 1 100 0 0 1 100 Autres chantillons 37 29 78 4 6 16 2 2 5 4 37 100 M gordonae 38 37 97 4 1 2 6 0 38 100 TOTAL 353 310 38 5 353 a GenProbe San Diego CA b De nombreux tests suppl mentaires ont t n cessaires pour l identification finale de certains isolats Pour les chantillons de sang MAC 1 96 Pour les chantillons MAC autres que du sang 1 33 Pour les chantillons M tuberculosis autres que du sang 5 4 24 INFORMATIONS SUR LES RISQUES VersaTREK Myco PVNA Xn Nocif R42 43 P
21. strains can result in treatment failure and patient mortality To address these issues clinical microbiologists are urged to use the most rapid and sensitive diagnostic tests that provide reliable results Experts at the Centers for Disease Control CDC have made several recommendations regarding mycobacterial testing including the use of both a liquid and a solid medium for mycobacterial culture VersaTREK ESP Culture System Il combines a liquid culture medium VersaTREK Myco a growth supplement VersaTREK Myco GS and for potentially contaminated specimens an antibiotic supplement VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA for optimal recovery of mycobacteria with a detection system that automatically incubates and continuously monitors culture bottles inoculated with specimens suspected of containing mycobacteria The sponges in the VersaTREK Myco bottles provide a growth support matrix and increase the surface area exposed to headspace oxygen The technology of the VersaTREK ESP Culture System Il is based on the detection of headspace pressure changes within a sealed bottle The VersaTREK ESP Culture System ll monitors changes in either gas production or gas consumption due to microbial growth A special algorithm has been developed for detection of very slow growing mycobacteria PRINCIPLES OF THE PROCEDURE Appropriately prepared specimens are inoculated with a syringe and needle into VersaTREK Myco bottles that have been supplemented with
22. the bottle and dispose of it in an approved sharps infectious waste container 15 Vortex the specimen thoroughly to dislodge organisms from the sponge 16 After the bottle stopper has been disinfected obtain specimens for acid fast staining and subculture using a syringe and needle If acid fast organisms are found on the smear proceed with organism identification If no organisms are seen on the smear attach a new VersaTREK Connector return the bottle to the VersaTREK ESP Culture System Il Instrument and continue incubation If non acid fast organisms are seen on the smear the bottle contents may be reprocessed through another decontamination procedure and inoculated into a fresh VersaTREK Myco bottle or discarded and another specimen requested 17 Organism identification may be determined using nucleic acid probes AccuProbe Remove 1 0 ml from a well mixed VersaTREK bottle centrifuge at 3500 x g for 15 minutes to concentrate the growth If the isolate is from a blood culture the pellet should be resuspended in 0 67M phosphate buffer pH 6 8 vortexed and recentrifuged This should be repeated until the supernatant is clear Resuspend pellets with 7H9 broth to a McFarland 1 equivalent and assay using the AccuProbe GenProbe San Diego CA kit following manufacturer s instructions for broth culture method It is recommended that if the RLU value falls within the equivocal range 10 000 29 000 RLUs the specimen is retested 18 At the end
23. Fibrosi Cistica Un totale di 363 campioni sono risultati positivi nel confronto VersaTREK ESP Culture System II BACTEC 460 rappresentante un rapporto di positivit del 12 Di queste colture positive 306 84 sono state recuperate nello strumento VersaTREK ESP Culture System Il e 268 74 nel sistema BACTEC Nel confronto tutti i media solidi convenzionali combinati hanno rilevato il 92 dei campioni che hanno riportato crescita micobatterica Lo strumento VersaTREK ESP Culture System Il ha dimostrato un rapporto positivo falsato di 1 1 segnale positivo assenza di organismo e un rapporto negativo falsato 0 6 segnale negativo sottocoltura AFB positiva Il rapporto negativo falsato si basa sulla colorazione e o la sottocoltura di tutti i campioni positivi con qualsiasi metodo pi il 10 dei campioni negativi con i tre metodi Il rapporto di contaminazione iniziale era 8 8 mentre quello finale 4 2 I campioni positivi sono stati distribuiti tra le seguenti provenienze di campioni respiratorio 72 sangue 15 feci 5 tessuto 3 6 liquidi sterili 2 2 urina 1 4 e ferita 0 8 stato dimostrato che l impiego di sonde nucleotidiche per l identificazione micobatterica direttamente da un flacone positivo VersaTREK Myco fornisce risultati precisi e attendibili 5 flaconi positivi VersaTREK Myco n 360 sono stati testati con due sonde AccuProbe il giorno del risultato positivo come descritto nella Procedura Le sonde util
24. M pH 6 8 y mezclarse en v rtice y recentrifugarse esto debe repetirse hasta que el sobrenadante sea claro Vuelva a suspender los gr nulos con caldo de cultivo 7H9 hasta un equivalente McFarland 1 y analice con el kit AccuProbe GenProbe San Diego CA seg n las instrucciones del fabricante sobre el m todo de cultivo Se recomienda repetir la prueba de la muestra si el valor RLU est en el intervalo equivoco 10 000 29 000 RLUs 18 Al final del per odo de incubaci n 6 semanas o seg n est definido en el manual de procedimiento de su laboratorio se deber inspeccionar visualmente la turbidez de un frasco que no muestre una respuesta de crecimiento positiva Si el frasco est turbio obtenga una muestra de cido alcohol resistente y subcultivo seg n se ha descrito anteriormente Si no hay signos de turbidez el frasco se puede desechar Esterilice el contenido del frasco antes de desecharlo RESULTADOS La detecci n del crecimiento microbiano en el VersaTREK ESP Culture System Il est basada en la medici n sensible de la producci n de gas y o el consumo de gas en el espacio de aire de un frasco de cultivo herm tico Esta informaci n se utiliza para generar una curva para cada frasco Un algoritmo interno analiza la informaci n para determinar el estado de cada muestra Cuando se cumplen unas condiciones determinadas un frasco se etiqueta como positivo Existen aproximadamente 10 CFU ml de micobacterias en el momento de la detecci
25. Myco PVNA 7113 42 VersaTREK Connector 7150 44 USO PREVISTO VersaTREK Myco con aggiunto VersaTREK Myco GS e VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA un medium di crescita liquido selettivo per Putilizzo sia con lo strumento VersaTREK sia con ESP Culture System II per il recupero in coltura di micobatteri provenienti da campioni corporei sterili e da campioni clinici fluidificati e decontaminati SOMMARIO E SPIEGAZIONE Il laboratorio microbiologico in grado di raccogliere un ampia variet di campioni per la coltura micobatterica Tra questi possono essere inclusi campioni respiratori sanguigni e altri liquidi corporei normalmente sterili urina feci tessuti e lavande gastriche metodi di coltura convenzionali riguardanti la fluidificazione e la concentrazione risultano efficaci nel rilevamento dei micobatteri tuttavia non sono disponibili risultati prima di 2 8 settimane Sono infatti necessarie diverse settimane per completare il test di suscettibilit Una diagnosi tempestiva di tubercolosi necessaria per l inizio di un adeguata terapia farmacologia e al fine di adottare misure atte a prevenire la diffusione di tale disturbo a elevato contagio Un intervento tardivo in particolare delle specie resistenti a trattamento farmacologico multiplo M tuberculosis MDR TB pu provocare un insuccesso nel trattamento e la morte del paziente Per questi problemi ai microbiologi clinici viene chiesto di utilizzare i test diagnostici p
26. NA to a VersaTREK Myco culture bottle 2 QC organisms may be used from frozen aliquots or solid medium Prepare a suspension in sterile 0 85 saline equivalent to a McFarland standard No 1 approximately 10 CFU ml Allow clumps of organism to settle for 30 minutes Dilute the organism to 10 CFU ml in sterile saline Inoculate the bottle with 1 ml of diluted organism TABLE 2 EXPECTED QC RESULTS Organism ATCC CFU ml Days to Positive Organism ATCC CFU ml Days to Positive M tuberculosis 25177 107 lt 14 M kansasii 12478 107 lt 14 M fortuitium 6841 10 lt 14 M scrofulaceum 19981 10 lt 14 M intracellulare 13950 10 lt 14 LIMITATIONS 1 Recovery of mycobacteria in the VersaTREK Myco bottle is dependent on the quality of specimen collected the numbers of culturable organisms in the specimen volume and the method of processing Adherence to procedural instructions is critical for optimum recovery of mycobacteria Contamination with saprophytic mycobacteria in tap water or other laboratory reagents and equipment may cause positive results recovery of environmental bacteria not in the clinical specimen 2 Decontamination by the N Acetyl L Cysteine Sodium Hydroxide NALC NaOH or Oxalic Acid method is recommended Other decontamination methods have not been tested in conjunction with VersaTREK Myco culture medium Digestant decontaminants may have harmful effects on mycobacteria 3 Mycobacteria may vary in acid fastness depend
27. REK ESP Culture System Il e prossiga com a incuba o Se forem encontrados microrganismos n o cido resistentes na colheita o conte do da garrafa pode voltar a ser descontaminado e inoculado numa garrafa VersaTREK Myco nova ou eliminado sendo solicitada nova amostra 28 17 A identifica o de microrganismo poder ser determinada utilizando sondas de cido nucleico AccuProbe Remova 1 0 ml de um frasco VersaTREK bem homogeneizado centrifugue a 3500 x g durante 15 minutos para concentrar o caldo Se o isolado resultar de uma cultura de sangue o sedimento pellet ser ressuspendido em tamp o de fosfato 0 67M pH 6 8 agitado e recentrifugado Esta operac o dever ser repetida at o sobrenadante ficar limpo Ressuspenda o sedimento pellet com caldo 7H9 para um equivalente a McFarland 1 e analise utilizando o AccuProbe GenProbe San Diego CA seguindo as instru es do fabricante relativamente ao m todo de cultura em caldo E recomendado que no caso do valor RLU se encontrar num intervalo duvidoso 10 000 a 29 000 RLU a amostra seja novamente testada 18 No final do per odo de incuba o 6 semanas ou como definido pelo manual de procedimentos laboratoriais uma garrafa que n o for assinalada positiva deve ser visualmente inspeccionada relativamente turva o Se a garrafa estiver turva retire uma amostra para a colora o cido resistente e subcultura como descrito em cima Se n o houver turva o a garrafa pode ser
28. TEERK DIAGNOSTIC SYSTEMS INDEX NDICE INDICE NDICE 2 7 English 8 13 Espa ol 14 19 Italiano 20 25 Francais 26 31 Portugu s Symbols S mbolos 32 35 Simboli Symboles S mbolos English VersaTREK Myco 7111 42 VersaTREK Myco GS 7112 42 VersaTREK Myco AS 7114 42 VersaTREK Myco PVNA 7113 42 VersaTREK Connector 7150 44 INTENDED USE VersaTREK Myco with VersaTREK Myco GS and either VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA added is a selective liquid growth medium for use with either the VersaTREK Instrument or the ESP Culture System Il for the culture recovery of mycobacteria from sterile body specimens and from digested decontaminated clinical specimens SUMMARY AND EXPLANATION The clinical microbiology laboratory may receive a variety of specimens for mycobacterial culture These may include respiratory specimens blood and other normally sterile body fluids urine stool tissue and gastric washes Conventional culture methods involving digestion and concentration provide detection of mycobacteria however results are not available for 2 8 weeks Several additional weeks are required to complete susceptibility testing Rapid diagnosis of tuberculosis is important for initiation of appropriate drug therapy and institution of measures to prevent the spread of this highly contagious disease Delayed treatment in particular of multiple drug resistant M tuberculosis MDR TB
29. a 35 C durante 1 a 3 dias antes da repeti o do ensaio Os resultados do estudo s o apresentados na Tabela 4 Sete isolados foram negativos para todas as sondas utilizadas e foram por fim identificados como outras esp cies de micobact rias TABELA 3 RESUMO DOS RESULTADOS CL NICOS Microrganismos Recuperados por Mycobacterium TOTAL TOTAL VersaTREK VersaTREK BACTEC S LIDO ESPECIE ISOLADOS VersaTREK ESP BACTEC ESP APENAS APENAS APENAS ESP e S LIDO M tuberculosis 68 62 52 1 1 4 M avium intracellulare 170 159 89 36 2 3 M kansasii 7 7 5 0 0 1 M fortuitum 5 3 0 2 0 1 M bovis 1 1 0 0 0 M chelonae 9 8 4 0 0 0 M gordonae 30 20 3 10 0 4 M scrofulaceum 1 0 0 0 0 1 M xenopi 6 6 2 0 2 0 M szulgai 3 3 3 0 0 0 Esp cies M outras 8 7 1 2 1 1 TOTAL 308 276 160 51 6 15 a O n mero de microrganismos recuperado por qualquer m todo de amostras testadas pelos tr s m todos b O n mero total de microrganismos recuperado no VersaTREK ESP Culture System II c p lt 0 05 por compara o entre o VersaTREK ESP e BACTEC utilizando a modifica o McNemar do teste qui quadrado d p lt 0 05 por compara o entre o VersaTREK ESP e meios s lidos utilizando a modifica o McNemar do teste qui quadrado TABELA 4 TESTE DIRECTO DE VERSATREK ESP POSITIVO GARRAFAS MYCO COM ACCUPROBE Microrganismo Total Sonda Inicial Sonda Inicial Sonda Inicial Sonda Positiva Positiva duvidosa Negativa Ap s Novo Teste Co
30. adr o1 McFarland aproximadamente 10 CFU ml numa soluc o salina 0 85 esterilizado Deixe a suspens o de microrganismos repousar durante 30 minutos Dilua a suspens o em 10 CFU ml de salina esterilizada Inocule o frasco com 1 ml de da dilui o TABELA 2 RESULTADOS DE QC ESPERADOS Microrganismo ATCC CFU ml Dias para Positivo Microrganismo ATCC UFC ml Dias para Positivo M tuberculosis 25177 107 lt 14 M kansasii 12478 107 lt 14 M fortuitium 6841 10 lt 14 M scrofulaceum 19981 10 lt 14 M intracellulare 13950 10 lt 14 LIMITA ES 1 A recupera o de micobact rias na garrafa VersaTREK Myco depende da qualidade da amostra recolhida do n mero de microrganismos cultiv veis no volume da amostra e do m todo de processamento O cumprimento das instru es de procedimento imprescind vel para uma boa recupera o das micobact rias A contamina o com micobact rias sapr fitas presentes na gua corrente ou noutros reagentes e equipamento de laborat rio pode originar resultados positivos recupera o de bact rias ambientais n o presentes na amostra biol gica 2 recomendada a descontamina o pelo Hidr xido de S dio N Acetil L Ciste na NALC NaOH ou m todo de Acido Ox lico Os restantes m todos de descontamina o n o foram testados com o meio de cultura VersaTREK Myco Os descontaminantes digestivos podem ter efeitos nocivos nas micobact rias 3 As micobact rias podem variar na sua capac
31. anger en renversant le tube plusieurs fois 10 Retirer la fermeture du dessous du VersaTREK Connector Placer l extr mit de l aiguille du VersaTREK Connector sur le goulot du flacon de culture et presser de bas en haut pour percer le bouchon du flacon NOTE Ne pas renverser le flacon pendant que le VersaTREK Connector est sur le flacon La pr sence de liquide dans l aiguille peut interf rer avec les r sultats de pression du flacon 11 Enregistrer les informations voulues du patient dans l ordinateur du VersaTREK ESP Culture System Il 12 Placer le flacon de culture avec le VersaTREK Connector dans l instrument 13 Quand l instrument indique par un voyant t moin stable qu un endroit particulier du flacon contient une culture positive retirer le flacon en respectant les proc dures sp cifi es dans le manuel de l op rateur du VersaTREK ESP Culture System Il 14 Laisser le flacon s venter par le VersaTREK Connector Dans une armoire de s curit biologique retirer le VersaTREK Connector du flacon et le jeter dans un conteneur de d chets infectieux agr 15 Centrifuger l chantillon compl tement pour d loger les organismes de l ponge 16 Quand le bouchon du flacon est d sinfect obtenir des chantillons pour la coloration acide rapide et la sous culture en utilisant une seringue et une aiguille Si des organismes acides rapides sont d couverts sur le frottis proc der l identification des organismes Si le frot
32. are la decontaminazione con metodo N acetil L Cisteina Idrossido di Sodio NALC NaOH o Acido Ossalico Non sono stati testati altri metodi di decontaminazione in unione al medium di coltura VersaTREK Myco decontaminanti fluidificatori possono avere effetti nocivi sui micobatteri 3 L acido resistenza dei micobatteri pu variare a seconda del ceppo del periodo della coltura e di altri fattori variabili Tutti i flaconi con segnale positivo VersaTREK ESP Culture System Il o apparenza torbida dovrebbero essere sottoposti a sottocoltura con media micobatterico selettivo e non Le specie non micobatteriche possono provocare un aumento eccessivo della presenza di micobatteri E consigliabile decontaminare e sottoporre nuovamente a coltura questo tipo di flaconi di coltura 4 flaconi VersaTREK Myco con un segnale positivo possono contenere una o pi specie di micobatteri e o altre specie non micobatteriche L identificazione dei micobatteri presenti richiede sottocoltura e procedure supplementari per identificare gli organismi presenti La consistenza di morfologia microscopica nei flaconi VersaTREK Myco non stata determinata 5 flaconi VersaTREK Myco vengono incubati a 35 37 C escludendo potenzialmente il ricupero di micobatteri che richiedano altre temperature di incubazione cio M marinum M ulcerans M haemophilum Il recupero di questi organismi richiede metodi di coltura supplementari Non possibile recuperare organismi c
33. articipant l tude taient g ographiquement situ s dans tous les Etats Unis et comprenaient des h pitaux universitaires de grande et petite envergure dont la population de patients variait y compris les patients souffrant du SIDA et de fibrose cystique Un total de 363 chantillons s est av r positif dans la comparaison VersaTREK ESP Culture System IIBACTEC 460 ce qui repr sente un taux de positivit de 12 Dans ces cultures positives 306 84 ont t r cup r es dans l instrument VersaTREK ESP Culture System Il et 268 74 ont t r cup r es dans le syst me BACTEC Dans la comparaison tous les milieux conventionnels solides combin s d tectaient 92 des chantillons qui pr sentaient des mycobact ries L instrument VersaTREK ESP Culture System Il a signal 1 1 de faux positifs signal positif mais pas d organismes et 0 6 de faux n gatifs signal n gatif sous culture AFB positive Le taux de faux n gatifs se base sur la coloration et ou la mise en sous culture de tous les chantillons positifs par toutes m thodes plus 10 des chantillons n gatifs par les trois m thodes Le taux initial de contamination tait de 8 8 et le final tait de 4 2 Les chantillons positifs provenaient des sources d chantillons suivantes respiratoire 72 sang 15 mati res f cales 5 tissu 3 6 fluides st riles 2 2 urine 1 4 et plaies 0 8 L utilisation de sondes a acide nucl ique pour l ident
34. as por los tres m todos El porcentaje de contaminaci n inicial era del 8 8 y el final de 4 2 Se distribuyeron muestras positivas entre las siguientes fuentes de muestras aparato respiratorio 72 sangre 15 heces 5 tejidos 3 6 fluidos est riles 2 2 orina 1 4 y herida 0 8 Se ha comprobado que el uso de probetas de cido nucleico para la identificaci n de micobacterias directamente de un frasco positivo VersaTREK Myco es un m todo preciso y fiable Se comprobaron frascos VersaTREK Myco con n 360 dos probetas AccuProbe en el d a del resultado positivo seg n se describe en el procedimiento Las probetas utilizadas fueron determinadas mediante pigmentaci n de gr nulos Un granulo de color amarillento fue comprobado con probetas espec ficas de complejo de M tuberculosis y complejo M avium MAC y un gr nulo cromog nico fue comprobado con probetas espec ficas de MAC y M gordonae Los frascos que indicaron resultados equ vocos de probeta fueron incubados a 35 C durante 1 a 3 d as antes de efectuar una repetici n de probeta Los resultados del estudio se muestran en la Tabla 4 Siete organismos aislados fueron negativos para todas las probetas utilizadas y en ltima instancia fueron identificadas como otras especies micobacterianas TABLA 3 RESUMEN DE RESULTADOS CL NICOS Microorganismos recuperados por ESPECIES TOTAL TOTAL VersaTREK VersaTREK BACTEC S LO de micobacterias AISLADOS VersaTREK ESP
35. as repetidas m ltiples para una identificaci n final de algunos organismos aislados Para muestras MAC de origen sangu neo 1 96 Para muestras MAC origen no sangu neo 1 33 Para muestras M tuberculosis de origen no sangu neo 5 4 12 INFORMACI N DE RIESGOS VersaTREK Myco PVNA Xn Nocivo R42 43 Posibilidad de sensibilizaci n por inhalaci n y por contacto con la piel S26 En caso de contacto con los ojos l vense inmediata y abundantemente con agua y ac dase a un m dico S36 Usese indumentaria protectora adecuada VersaTREK Myco AS Xn Harmful R42 43 Posibilidad de sensibilizaci n por inhalaci n y por contacto con la piel R48 23 24 25 T xico riesgo de efectos graves para la salud en caso de exposici n prolongada por inhalaci n contacto con la piel e ingesti n R45 Puede causar c ncer S7 Mant ngase el recipiente bien cerrado S22 No respirar el polvo 824 25 Ev tese el contacto con los ojos y la piel S26 En caso de contacto con los ojos l vense inmediata y abundantemente con agua y ac dase a un m dico S36 Usese indumentaria protectora adecuada S45 En caso de accidente o malestar ac dase inmediatamente al m dico si es posible mu stresele la etiqueta BIBLIOGRAF A pg 7 Para obtener informaci n adicional llame al Servicio de Asistencia T cnica de TREK al n mero 1 800 642 7029 13 Italiano VersaTREK Myco 7111 42 VersaTREK Myco GS 7112 42 VersaTREK Myco AS 7114 42 VersaTREK
36. at a Utilizzare esclusivamente sangue raccolto in tubi contenenti SPS o eparina Non possibile utilizzare tubi contenenti Acido Edetico EDTA poich tracce di EDTA potrebbero inibire la crescita micobatterica b Ruotare il tubo a 1000 RPM per 10 minuti c Utilizzando una pipetta rimuovere il buffy coat e la pi piccola quantit possibile di cellule sanguigne rosse Porre in un tubo sterile Utilizzare 1 ml del buffy coat per inoculare VersaTREK Myco 7 in basso PROCEDURA Materiali forniti VersaTREK Myco VersaTREK Myco GS VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Connector 15 Materiali richiesti ma non forniti Acqua distillata o deionizzata sterile Middlebrook 7H10 o altro agar micobatterico o medium a base di uovo Autoclave Polvere di N acetil L cisteina 0 067 M buffer fosfato sterile pH 6 8 Centrifuga Incubatrice alla CO a 37 C Siringhe sterili per tubercolina con aghi permanenti Pipette sterili opzionali Disinfettante micobatterico cio Amphyl OMNI ecc Tamponi imbevuti di alcool Mescolatore vortice Tubi di centrifuga da 50 ml in polipropilene conici sterili Cabina di sicurezza biologica Microscopio Materiali per la colorazione dei vetrini Organismi con Controllo di Qualita M tuberculosis ATCC 25177 M kansasii ATCC 12478 M fortuitum ATCC 6841 M scrofulaceum ATCC 19981 M intracellulare ATCC 13950 Inoculazione di Flaconi di Coltura VersaTREK Myco 1 Disinfetta
37. cido resistenti sullo striscio procedere con l identificazione dell organismo In assenza di organismi sullo striscio collegare un nuovo VersaTREK Connector rimettere il flacone nello strumento VersaTREK ESP Culture System Il e proseguire con l incubazione In assenza di organismi acido resistenti sullo striscio possibile sottoporre a ulteriore trattamento il contenuto del flacone durante un altra procedura di decontaminazione e quindi inocularlo in un nuovo flacone VersaTREK Myco o eliminarlo rendendo cos necessario un altro campione 16 17 L identificazione degli organismi pud avvenire utilizzando sonde ad acido nucleico AccuProbe Rimuovere 1 0 ml da un flacone ben mescolato di VersaTREK centrifugare a 3500 x g per 15 minuti per concentrare la crescita se l isolato proviene da coltura sanguigna consigliabile risospendere il precipitato in 0 67M di buffer fosfato pH 6 8 agitare vorticosamente e centrifugare nuovamente E consigliabile ripetere fino quando il supernatante risulta pulito Risospendere i precipitato con terreno di coltura 7H9 a un equivalente McFarland 1 e analizzare utilizzando il kit AccuProbe GenProbe San Diego CA attenendosi alle istruzioni del fabbricante per il metodo di brodocoltura E consigliabile ripetere il test del campione nel caso in cui il valore RLU sia compreso nell intervallo indeterminato 10 000 29 000 RLUs 18 Altermine del periodo di incubazione 6 settimane o quanto stabilito dal manuale di
38. cobacteriano b Centrifugue o tubo a 1000 RPM durante 10 minutos c Utilizando uma pipeta remova a camada leucocit ria e o m nimo de gl bulos vermelhos poss vel Coloque num tubo esterilizado Utilize 1 ml de camada leucocit ria para inocular o VersaTREK Myco N 7 em baixo PROCEDIMENTO Materiais Fornecidos VersaTREK Myco VersaTREK Myco GS VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Connector 27 Materiais Necess rios Mas Nao Fornecidos Agua destilada est ril ou desionizada Middlebrook 7H10 ou outro meio micobacteriano com base de ovo Autoclave N acetil L cisteina em p Tamp o de fosfato M 0 067 esterilizado pH 6 8 Centr fuga Incubador de CO 37 C Seringas de tuberculina esterilizadas com agulhas fixas permanentes Pipetas Esterilizadas opcional Desinfectante micobactericida por exemplo Amphyl OMNI etc Tamp es de lcool Misturador v rtex Tubos centr fugos de polipropileno c nicos de 50 ml esterilizados C mara de fluxo laminar Microsc pio Materiais de colora o para l minas Microrganismos de Controlo de Qualidade M tuberculosis ATCC 25177 M kansasii ATCC 12478 M fortuitum ATCC 6841 M scrofulaceum ATCC 19981 M intracellulare ATCC 13950 Inoculagao de Garrafas de Cultura VersaTREK Myco 1 Desinfecte a tampa da garrafa VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA com lcool 2 Reconstitua assepticamente o VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA injectando 25 ml
39. ctor may interfere with the pressure readings for the bottle and is not recommended 7 Results from the AccuProbe should be interpreted in conjunction with other laboratory and clinical data available to the clinician A positive AccuProbe result does not rule out a mixed mycobacteria culture PERFORMANCE CHARACTERISTICS VersaTREK ESP Culture System Il permits recovery of mycobacteria from clinical specimens Isolation of mycobacteria in the VersaTREK ESP Culture System II from 3001 specimens was compared to the BACTEC 460 radiometric broth system in a multi center study A subset of the total 2805 specimens was also compared to conventional egg and agar based media The laboratories participating in the study were geographically distributed throughout the United States and included large and small teaching and private hospitals with varying patient populations including AIDS and Cystic Fibrosis patients A total of 363 specimens were positive in the VersaTREK ESP Culture System II BACTEC 460 comparison representing a positivity rate of 12 Of these positive cultures 306 84 were recovered in the VersaTREK ESP Culture System II Instrument and 268 74 were recovered in the BACTEC system In the comparison all of conventional solid media combined detected 92 of the specimens that grew mycobacteria The VersaTREK ESP Culture System Il Instrument demonstrated a 1 1 false positive signal positive no organisms seen and a 0 6 false negative rat
40. dal flacone 8 Strofinare il flacone di coltura e il tappo con disinfettante micobatterico 9 Mescolare invertendo pi volte 10 Rimuovere il sigillo dal flacone di un VersaTREK Connector Posizionare l estremit dell ago del Versa TREK Connector sul flacone di coltura e applicare una pressione verticale per praticare un foro nel tappo del flacone di coltura NOTA Non capovolgere il flacone di coltura mentre VersaTREK Connector si trova sul flacone Il liquido nell ago pu interferire con le letture della pressione del flacone 11 Registrare le informazioni del paziente desiderate nel computer del VersaTREK ESP Culture System Il 12 Posizionare il flacone di coltura con VersaTREK Connector nello strumento 13 Quando lo strumento indica mediante una luce rossa fissa che un particolare flacone contiene una coltura positiva rimuovere il flacone secondo le procedure specificate nel manuale dell operatore VersaTREK ESP Culture System ll 14 Lasciare svuotare il flacone mediante il VersaTREK Connector In una cabina di sicurezza biologica rimuovere il VersaTREK Connector dal flacone e smaltirlo in un apposito contenitore per rifiuti infetti con pericolo di lesione 15 Agitare vorticosamente il campione per staccare gli organismi dalla spugna 16 Una volta disinfettato il tappo del flacone ricavare i campioni per la colorazione acido resistente e la sottocoltura utilizzando una siringa e un ago In caso di rinvenimento di organismi a
41. dinating ed HD Isenberg American Society for Microbiology Washington DC 5 LaBombardi V J L Carter and S Massarella 1997 Use of nucleic acid probes to identify mycobacteria directly from Difco ESP Myco bottles J Clin Microbiol 35 1002 1004 TRES DIAGNOSTIC SYSTEMS For additional information call TREK Technical Support at 1 800 642 7029 TREK Diagnostic Systems 982 Keynote Circle Suite 6 Cleveland Ohio 44131 800 871 8909 EC REP TREK Diagnostic Systems Units 17 19 Birches Industrial Estate East Grinstead West Sussex RH19 1XZ UK L TDSTO13 8 2010 02 Espa ol VersaTREK Myco 7111 42 VersaTREK Myco GS 7112 42 VersaTREK Myco AS 7114 42 VersaTREK Myco PVNA 7113 42 VersaTREK Connector 7150 44 APLICACIONES PREVISTAS VersaTREK Myco y VersaTREK Myco GS junto con VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA es un caldo de cultivo selectivo para ser utilizado con el instrumento del VersaTREK o el ESP Culture System Il para la recuperaci n de micobacterias de muestras corporales est riles y de muestras clinicas digeridas y descontaminadas RESUMEN Y DESCRIPCI N El laboratorio de microbiolog a cl nica puede recibir varias muestras de cultivos de micobacterias Estos cultivos pueden incluir muestras del aparato respiratorio sangre y otros fluidos corporales generalmente est riles orina heces tejidos y lavados g stricos Los m todos convencionales de cultivo que implican la digesti n y conc
42. e signal negative subculture AFB positive The false negative rate is based upon the staining and or subculturing of all specimens positive by any method plus 10 of the specimens negative by all three methods The initial contamination rate was 8 8 and the final was 4 2 Positive specimens were distributed among the following specimen sources respiratory 72 blood 15 stool 5 tissue 3 6 sterile fluids 2 2 urine 1 4 and wound 0 8 The use of nucleic acid probes for mycobacteria identification directly from a positive VersaTREK Myco bottle has been shown to be accurate and reliable Positive VersaTREK Myco bottles n 360 were tested with two AccuProbe probes on the day of positivity as described under Procedure The probes used were determined by pellet pigmentation A buff colored pellet was tested with probes specific for M tuberculosis complex and M avium complex MAC while a chromogenic pellet was tested with probes specific for MAC and M gordonae Bottles yielding equivocal probe results were incubated at 35 C for 1 3 days before a repeat probe was performed Results of the study are shown in Table 4 Seven isolates were negative for all probes used and were ultimately identified as other mycobacteria species TABLE 3 SUMMARY OF CLINICAL RESULTS Microorganisms Recovered by Mycobacterium TOTAL TOTAL VersaTREK VersaTREK BACTEC SOLID SPECIES ISOLATES VersaTREK ESP BACTEC ESP ONLY ONLY ONLY ESP
43. e culturas de micobact rias a partir de amostras biol gicas est reis e de amostras clinicas descontaminadas RESUMO E EXPLICA O O laborat rio de microbiologia cl nica poder receber diferentes tipos de amostras para cultura micobacteriana Estas podem incluir amostras respirat rias de sangue e de outros fluidos corporais normalmente est reis tal como urina fezes tecido e lavagens g stricas Os m todos de cultura convencionais que envolvem a fluidifica o e concentra o permitem a detec o de micobact rias no entanto os resultados n o estar o dispon veis durante 2 a 8 semanas S o necess rias v rias semanas adicionais para concluir o teste de sensibilidade O diagn stico r pido da tuberculose importante para dar in cio a uma terapia medicamentosa apropriada e para o estabelecimento de medidas de preven o da dissemina o desta doen a altamente contagiosa O tratamento tardio do M tuberculosis em particular de estirpes resistentes a m ltiplos antibi ticos pode resultar numa falha do tratamento e na morte do doente De forma a obviar estas quest es os microbiologistas cl nicos dever o utilizar os testes de diagn stico mais r pidos e sens veis que forne am resultados fi veis Os peritos dos Centros de Controlo de Doen a CDC publicaram v rias recomenda es relativamente ao teste para micobact rias incluindo a utiliza o de meios l quidos e s lidos para cultura micobacteriana O VersaTREK ESP C
44. e de croissance positive doit tre examin visuellement pour voir s il n est pas opaque Si le flacon est opaque prendre un chantillon pour la coloration l acide rapide et la sous culture comme d crit ci dessus Si l on trouve des traces d opacit le flacon peut tre d class St riliser le contenu des flacons avant d liminer RESULTATS La d tection de la croissance microbienne VersaT REK ESP Culture System Il se base sur la mesure sensible de la production et ou la consommation de gaz dans la partie sup rieure d un flacon ferm L information est utilis e pour g n rer une courbe pour chaque flacon Un algorithme interne analyse l information pour d terminer l tat de chaque chantillon Quand on atteint un certain ensemble de conditions le flacon est consid r comme positif Il y a environ 10 CFU ml de mycobact ries au moment de la d tection TABLEAU 1 RESULTATS Etat frottis et flacon Rapport Signal AFB positif Bacilles acide rapide AFB Identification en cours Signal Pas de rapport ou chantillon AFB contamin par des organismes non mycobact riens impossible de d terminer la pr sence ou l absence de AFB CONTROLE QUALITE Un certificat d analyse est inclus avec chaque lot VersaTREK Myco Chaque lot est conforme aux crit res de l assurance qualit TREK Si on le souhaite la proc dure ci dessous peut tre suivie pour effectuer un test suppl mentaire 1 Ajouter 1 ml VersaTREK Myco GS et
45. e la luz NO LO CONGELE El caldo de cultivo debe ser incoloro no lo utilice si est turbio VersaTREK Myco GS Guarde a 2 8 C Proteja de la luz VersaTREK Myco AS y VersaTREK Myco PVNA Guarde a 2 8 C Despu s de la rehidrataci n guarde a 2 8 C y use antes de 5 d as si es al cuota guarde a 20 C y use antes de 3 meses Una vez descongelado no lo vuelva a congelar PRINCIPIOS DE RECOGIDA DE MUESTRAS Se utilizaron muestras del siguiente origen durante la evaluaci n cl nica del VersaTREK ESP Culture System Il aparato respiratorio incluidos esputo lavado etc fluidos corporales tales como CSF l quido sinovial l quido pleural etc orina heces aspirados g stricos tejidos sangre y m dula sea Recoja y procese las muestras de diferentes partes corporales seg n se describe en la gu a Public Health Mycobacteriology A Guide for the Level lll Laboratory y en el manual Clinical Microbiology Procedures Handbook o seg n el manual de procedimiento de su laboratorio Nota Las muestras de sangre y m dula sea deben ser procesadas mediante uno de los siguientes procedimientos antes de inocular frascos VersaTREK Myco 1 Tubos Isolator Siga las instrucciones del fabricante de Isolator para lisis y concentraci n Inocule VersaTREK Myco con 1 ml de sedimento 2 Lisis de agua destilada de c lulas sangu neas completas a Extraiga de 5 10 ml de sangre completa en un tubo Vacutainer que contenga polianetolsulfonato de
46. emar del test del chi quadrato d p lt 0 05 per il confronto tra VersaTREK ESP e media solido utilizzando la modifica McNemar del test del chi quadrato TABELLA 4 TEST DIRETTO DEL VERSATREK ESP POSITIVO FLACONI MYCO CON ACCUPROBES Organismo Totale Sonda iniziale Sonda iniziale Sonda iniziale Sonda Positiva positiva indeterminata negativa dopo la controprova Complesso M avium Campioni di sangue 51 43 84 3 8 15 7 0 51 100 Altri campioni 226 199 88 1 24 10 6 3 1 3 226 100 Complesso M tuberculosis Campioni di sangue 1 1 100 0 0 1 100 Altri campioni 37 29 78 4 6 16 2 2 5 4 37 100 M gordonae 38 37 97 4 1 2 6 0 38 100 TOTALE 353 310 38 5 353 a GenProbe San Diego CA b Sono state necessarie controprove multiple per l identificazione finale di alcuni isolati Per campioni MAC di sangue 1 96 Per campioni MAC di provenienza non sanguigna 1 33 Per campioni M tuberculosis di provenienza non sanguigna 5 4 18 INFORMAZIONI SUI RISCHI VersaTREK Myco PVNA Xn Nocivo R42 43 Pu provocare sensibilizzazione per inalazione e contatto con la pelle S26 In caso di contatto con gli occhi lavare immediatamente e abbondantemente con acqua e consultare un medico S36 Usare indumenti protettivi adatti VersaTREK Myco AS Xn Nocivo R42 43 Pu provocare sensibilizzazione per inalazione e contatto con la pelle R48 23 24 25 Tossico pericolo di gravi danni alla salute in caso di e
47. enti antimicrobici reidratati a 25 ml Formula VersaTREK Myco PVNA Formula VersaTREK Myco AS H20 Acqua trattata 25 ml H20 Acqua trattata 25 ml PXB Polimixina B 0 02 p v PXB Polimixina B 0 02 p v AZL Azlocillina 0 0075 p v NA Acido nalidixico 0 06 p v FOS Fosfomicina 0 054 p v AMB Amfotericina B 0 015 p v NA Acido nalidixico 0 042 p v VAN Vancomicina 0 009 p v AMB Amfotericina B 0 015 p v SA Agente solubilizzante 5 p v STB Stabilizzatore 1 p v FIL Riempitivo 7 7 piv Modificati e o integrati per soddisfare i criteri di prestazione 14 PRECAUZIONI 1 Per l utilizzo diagnostico In Vitro 2 Fare riferimento alla documentazione per la sicurezza dei materiali VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA per informazioni complete sui rischi 3 AVVERTENZA CAMPIONE DI PROVA POTENZIALMENTE INFETTIVO campioni potrebbero contenere agenti infettivi reagenti contengono materiale di origine animale e sono quindi potenziali veicoli o trasmettitori di malattie Per la manipolazione e lo smaltimento di agenti infettivi attenersi alle normative istituzionali 4 Lavorando con M tuberculosis cresciuto in coltura la raccomandazione valida per le norme le apparecchiature di contenimento e le attrezzature di Livello di Sicurezza Biologica 3 5 Il VersaTREK Connector contiene un ago rientrante sterile subito dopo la rimozione del sigillo ma potenzialmente contaminato subito dopo Putilizzo Per la
48. entraci n permiten la detecci n de micobacterias Sin embargo los resultados no est n disponibles antes de 2 8 semanas Son necesarias varias semanas adicionales para completar las pruebas de sensibilidad El diagn stico r pido de la tuberculosis es importante para iniciar el tratamiento farmacol gico adecuado y para el establecimiento de medidas para evitar la propagaci n de esta enfermedad altamente contagiosa Un retraso en el tratamiento en especial para las cepas de M tuberculosis MDR TB resistentes a m ltiples farmacos puede ocasionar un fallo del tratamiento y la muerte de los pacientes Para solucionar estos problemas se insta a los microbidlogos clinicos a que utilicen las pruebas de diagn stico mas rapidas y sensibles que permitan ofrecer resultados fiables Los expertos de los Centros para el Control de Enfermedades CDC han realizado varias recomendaciones sobre las pruebas de micobacterias y han incluido el uso de medios de cultivo liquidos y s lidos para el cultivo de micobacterias VersaTREK ESP Culture System Il combina un caldo de cultivo l quido VersaTREK Myco un suplemento de crecimiento VersaTREK Myco GS y para muestras potencialmente contaminadas un suplemento antibidtico VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA para la recuperaci n ptima de micobacterias con un sistema de detecci n que incuba autom ticamente y monitoriza de forma continua los frascos de cultivo inoculados con muestras sospechosas de
49. equado 45 Em caso de acidente ou de indisposi o consultar imediatamente o m dico mostre lhe o r tulo logo que poss vel REFERENCIAS Pagina 7 Para informa es adicionais contacte o Apoio T cnico da TREK atrav s do 1 800 642 7029 31 Symbols S mbolos Simboli Symboles S mbolos GB Batch code ES C digo de lote LOT IT Codice del lotto FR Code du lot PT C digo do grupo GB Catalogue number ES N mero de cat logo IT Numero di catalogo FR R f rence du catalogue PT N mero de cat logo GB Manufacturer ES Fabricante Ml IT Fabbricante FR Fabricant PT Fabricante r 7 GB Consult instructions for use ES Consulte las instrucciones de uso BH IT Consultare le istruzioni per l uso FR Consulter les instructions d utilisation E si PT Consulte instru es para o uso GB Temperature limitation ES Limite de temperatura IT Limiti di temperatura FR Limites de temp rature A PT Limita o de temperatura GB Use By YYYYMMDD YYYYMM MM end of month ES Fecha de caducidad aaaammdd aaaamm mm fin del mes IT Utilizzare entro AAAAMMGG AAAAMM MM fine mese FR Date de p remption AAAAMMJJ AAAAMM MM fin de mois PT Uso perto YYYYMMDD YYYYMM MM fim do m s GB In Vitro Diagnostic Medical Device ES Producto sanitario para diagn stico in vitro IVD IT Dispositivo medico diagnostico in vitro FR Dispositif m dical de diagnostic in vitro PT In Vitro Dispositivo M dico Diagn stico GB Contains suff
50. er pH 6 8 Centrifuge CO incubator 37 C Sterile tuberculin syringes with permanently attached needles Sterile Pipettes optional Mycobactericidal disinfectant e g Amphyl OMNI etc Alcohol swabs Vortex mixer Sterile 50 ml conical polypropylene centrifuge tubes Biological safety cabinet Microscope Materials for staining slides Quality Control organisms M tuberculosis ATCC 25177 M kansasii ATCC 12478 M fortuitum ATCC 6841 M scrofulaceum ATCC 19981 M intracellulare ATCC 13950 Inoculation of VersaTREK Myco Culture Bottles 1 Disinfect the VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA bottle stopper with alcohol 2 Aseptically reconstitute VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA by injecting 25 ml sterile distilled or deionized water through the disinfected septum using a needle and syringe There will be enough reagent for 50 bottles 3 Label the VersaTREK Myco culture bottle with patient information 4 Disinfect the bottle stopper with alcohol 5 Aseptically add 1 ml of VersaTREK Myco GS by injecting through the septum with a needle and syringe 6 Aseptically add 0 5 ml of VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA solution by injecting through the septum with a needle and syringe 7 Add up to 1 ml of concentrated clinical specimen with a needle and syringe NOTE Significant overfilling of the bottle may cause false positive results and in the case of blood specimens from Isolator tubes may cause inhibition of
51. ersaTREK Myco PVNA para obtener informaci n completa de los riesgos 3 ADVERTENCIA MUESTRA DE PRUEBA POTENCIALMENTE INFECCIOSA Las muestras pueden contener agentes infecciosos Los reactivos contienen material de origen animal por lo que son posibles portadores o transmisores de enfermedades Siga las precauciones universales y la normativa del centro a la hora de manipular y desechar los agentes infecciosos 4 Si se trabaja con M tuberculosis en cultivos se recomiendan las pr cticas equipos de contenci n e instalaciones de nivel 3 sobre seguridad biol gica 5 El VersaTREK Connector contiene una aguja embutida y afilada esterilizada hasta que se retira el precinto pero que se puede contaminar despu s del uso Cumpla las normas de trabajo para la manipulaci n y eliminaci n de dispositivos contaminados con sangre No manipule los instrumentos de forma despreocupada Realice una esterilizaci n antes de desechar Deseche en un contenedor autorizado No vuelva a utilizar los dispositivos 6 Verifique visualmente todos los frascos en busca de contaminaci n grietas u otros signos de deterioro No utilice frascos que est n turbios o da ados 7 Utilice s lo jeringuillas con bloque de aguja 8 Esterilice en el autoclave todos los frascos de VersaTREK Myco antes de desecharlos 9 Sila junta est rota NO UTILICE el VersaTREK Connector y des chelo en un contenedor ALMACENAMIENTO VersaTREK Myco Guarde a 15 30 C Proteja d
52. eso volume AZL Azlocilina 0 0075 peso volume NA Acido Nalid xico 0 06 peso volume FOS Fosfomicina 0 054 peso volume AMB Anfotericina B 0 015 peso volume NA Acido Nalid xico 0 042 peso volume VAN Vancomicina 0 009 peso volume AMB Anfotericina B 0 015 peso volume SA Agente de Solubiliza o 5 peso volume STB Estabilizador 1 peso volume FIL Enchimento 7 7 peso volume Ajustada e ou suplementada para corresponder aos crit rios de comportamento funcional 26 PRECAUCOES 1 Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro 2 Consulte as Fichas de Seguran a do Material VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA para informa es completas sobre os riscos 3 AVISO AMOSTRA DE TESTE POTENCIALMENTE INFECCIOSA Pode haver agentes infecciosos nas amostras Os reagentes que cont m material de origem animal e similares s o potenciais portadores ou transmissores de doen a Siga as Precau es Universais e a pol tica institucional de manipula o e elimina o de agentes infecciosos 4 No trabalho com culturas de M tuberculosis recomendam se as pr ticas equipamento de conten o e instala es de N vel 3 de Bioseguran a 9 5 O VersaTREK Connector cont m uma agulha afiada encastrada e esterilizada aquando da remo o do selo mas potencialmente contaminada no final da sua utilizagao Siga a pol tica institucional para manipula oe elimina o de dispositivos contaminados com sangue N o manipular de forma
53. ette retirer la couche tampon et une quantit aussi faible que possible de globules rouges Placer dans un tube st rile Utiliser 1 ml de la couche tampon pour inoculer VersaTREK Myco 7 ci dessous PROCEDURE Mat riels fournis VersaTREK Myco VersaTREK Myco GS VersaTREK Myco AS et VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Connectors 21 Mat riels n cessaires mais non fournis Eau st rile distill e ou d min ralis e Milieu de Middlebrook 7H10 ou autre milieu base de g lose ou d albumine Autoclave Poudre N acetyl L cyst ine Tampon de phosphate st rile 0 067 M pH 6 8 Centrifugeuse Incubateur sous CO 37 C Seringue st rile tuberculinique avec aiguilles attach es en permanence Pipettes st riles en option D sinfectant mycobat ricide par ex Amphyl OMNI etc Tampons d alcool M langeur Vortex Tubes centrifuges coniques de 50 ml st riles Armoire de s curit biologique Microscope Mat riaux pour lames de coloration Organismes de contr le de la qualit M tuberculosis ATCC 25177 M kansasii ATCC 12478 M fortuitum ATCC 6841 M scrofulaceum ATCC 19981 M intracellulare ATCC 13950 Inoculation des flacons de culture VersaTREK Myco 1 D sinfecter le bouchon du flacon VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA a l alcool 2 Reconstituer en milieu st rile VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA en injectant 25 ml d eau st rile distill e ou d min ralis e dans le septum en utilisant une aiguille et
54. eut provoquer une sensibilit par inhalation et contact avec la peau S26 En cas de contact avec les yeux rincer imm diatement et abondamment l eau puis consulter un m decin S36 Porter des v tements de protection appropri s VersaTREK Myco AS Xn Nocif R42 43 Peut provoquer une sensibilit par inhalation et contact avec la peau R48 23 24 25 Toxique risque d effets graves pour la sant en cas d exposition prolong e par inhalation par contact avec la peau et par ingestion R45 Peut causer le cancer S7 Conserver le r cipient ferm 22 Ne pas inhaler les mati res volatiles 24 25 Eviter le contact avec la peau et les yeux 26 En cas de contact avec les yeux rincer imm diatement et abondamment a l eau puis consulter un m decin 36 Porter des v tements de protection appropri s 45 En cas d accident ou de malaise consulter imm diatement un m decin lui montrer l tiquette si possible REFERENCES Page 7 Pour toute information compl mentaire appeler l assistance technique TREK au 1 800 642 7029 25 Portuqu s VersaTREK Myco 7111 42 VersaTREK Myco GS 7112 42 VersaTREK Myco AS 7114 42 VersaTREK Myco PVNA 7113 42 VersaTREK Connector 7150 44 UTILIZAGAO PREVISTA O VersaTREK Myco Suplementado com VersaTREK Myco GS e VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA funciona como um meio l quido selectivo para utiliza o no Aparelho VersaTREK ou no ESP Culture System Il permitindo a recupera o d
55. i rapidi e sensibili in grado di fornire risultati attendibili Gli esperti dei Centri federali per il Controllo delle Malattie CDC hanno divulgato numerosi consigli riguardo i test micobatterici compreso l utilizzo d medium sia solido che liquido per la coltura micobatterica VersaTREK ESP Culture System Il combina un medium di coltura liquido VersaTREK Myco con un supplemento di crescita VersaTREK Myco GS e per i campioni potenzialmente contaminati con un supplemento antibiotico VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA per un ottimale recupero dei micobatteri con un sistema di rilevazione che procede all incubazione automatica e al monitoraggio continuato dei flaconi di coltura inoculati con campioni sospetti o contenenti micobatteri Le spugne nei flaconi di VersaTREK Myco forniscono una matrice di supporto alla crescita e aumentano l area di superficie esposta all ossigeno presente nella parte superiore dei flaconi La tecnologia del VersaTREK ESP Culture System Il si basa sulla rilevazione delle variazioni di pressione nella parte superiore all interno di un flacone sigillato Il VersaTREK ESP Culture System Il monitora le variazioni della produzione e del consumo di gas dovute a crescita microbica Per il rilevamento di micobatteri a crescita molto lenta stato elaborato uno speciale algoritmo PRINCIPI DELLA PROCEDURA campioni adeguatamente preparati vengono inoculati con una siringa e un ago nei flaconi di VersaTREK Myco a c
56. ias en el frasco VersaTREK Myco depende de la calidad de la muestra obtenida de la cantidad de organismos cultivables en el volumen de muestra y del m todo de procesamiento El cumplimiento de las instrucciones del procedimiento es fundamental para la recuperaci n ptima de micobacterias La contaminaci n con micobacterias saprof ticas del agua del grifo u otros reactivos y equipos de laboratorio pueden ocasionar resultados positivos recuperaci n de bacterias ambientales que no est n en la muestra cl nica 2 Se recomienda la descontaminaci n mediante el m todo de hidr xido de sodio N Acetil L ciste na NALC NaOH o cido ox lico No se han comprobado otros m todos de descontaminaci n en conjunci n con el caldo de cultivo VersaTREK Myco Los descontaminantes digestivos pueden tener efectos da inos en las micobacterias 3 Las micobacterias pueden variar en la resistencia al cido seg n la cepa la edad del cultivo y otras variables Todos los frascos con una se al positiva del VersaTREK ESP Culture System Il o cuyo aspecto sea turbio deben ser subcultivados en medios micobacterianos selectivos y no selectivos Las especies no micobacterianas pueden hacer crecer en exceso las micobacterias presentes Estos frascos de cultivo deben ser descontaminados y recultivados 4 Los frascos VersaTREK Myco con una sefial positiva pueden contener una o m s especies de micobacterias y o otras especies no micobacterianas La identificaci n de las
57. icamente cada 24 minutos el porcentaje de consumo de ox geno en el interior del espacio de aire del frasco de cultivo y notifica la respuesta de crecimiento con una se al visible REACTIVOS F rmula de VersaTREK Myco H20 Agua procesada 11 5 ml MDK Caldo Middlebrook 7H9 0 56 w v CAS Casitona 0 12 w v GLY Glicerol 0 24 wiv SBC Bicarbonato s dico 0 026 w v VersaTREK Myco tambi n contiene esponjas F rmula de VersaTREK Myco GS H20 Agua procesada 50 ml BSA Alb mina de suero bovino 7 5 w v DEX Dextrosa 3 0 wiv OLA Acido oleico 0 09 v v CAT Catalasa 0 003 w v NaCI Cloruro s dico 1 27 wiv VersaTREK Myco AS y VersaTREK Myco PVNA contienen una mezcla liofilizada de agentes antimicrobianos que son rehidratados hasta 25 ml F rmula de VersaTREK Myco AS F rmula de VersaTREK Myco PVNA H20 Agua procesada 25ml H20 Agua procesada 25 ml PXB Polimixina B 0 02 w v PXB Polimixina B 0 02 w v AZL Azlocilina 0 0075 w v NA Acido nalidixico 0 06 w v FOS Fosfomicina 0 054 w v AMB Anfotericina B 0 015 w v NA cido nalid xico 0 042 w v VAN Vancomicina 0 009 w v AMB Anfotericina B 0 015 w v SA Agente solubilizante 5 w v STB Estabilizante 1 w v FIL Relleno 7 7 WN Ajustado y o suplementado para cumplir los criterios de rendimiento PRECAUCIONES 1 Para aplicaciones de diagn stico in vitro 2 Consulte la documentaci n de seguridad del VersaTREK Myco AS o V
58. icient for lt n gt tests ES Contenido suficiente para lt n gt ensayos IT Contenuto sufficiente per lt n gt saggi FR Contenu suffisant pour lt n gt tests PT Contem suficiente para lt n gt testes 32 GB Authorized Representative in the European Community ES Representante autorizado en la Comunidad Europea EC REP IT Mandatario nella Comunit Europea FR Mandataire dans la Communaut europ enne PT Representante autorizado na Comunidade Europeia Aly GB Keep away from heat pe al ES Mantener alejado de fuentes de calor FA IT Tenere lontano dal calore om FR Conserver l abri de la chaleur 5 PT Manter afastado do calor GB Contains ES Contiene IT Contiene FR Contient PT Cont m GB For use with the VersaTREK and ESP Il Systems to cultivate and detect mycobacteria use ES Para utilizar con los Sistemas VersaTREK y ESP II para cultivar y detectar micobacterias IT Da usare con i sistemi VersaTREK e ESP II Systems per coltivare rilevare micobatteri FR A utiliser avec les Systemes VersaTREK et ESP II pour cultiver et d tecter les mycobact ries PT Para utiliza o com os sistemas VersaTREK e ESP Il para cultura e detecc o de micobact rias GB Processed Water ES Agua procesada H20 IT Acqua trattata FR Eau trait e PT Agua processada GB Middlebrook 7H9 Broth ES Caldo Middlebrook 7H9 MDK IT Terreno di coltura Middlebrook 7H9 FR Bouillon de culture 7H9 de Middlebrook PT Caldo Middlebro
59. idade cido resistente dependendo da estirpe idade da cultura e outras vari veis Todas as garrafas com um sinal VersaTREK ESP Culture System Il positivo ou que se apresentem turvas devem ser subcultivadas nos meios micobacterianos selectivos e n o selectivos As contamina es podem ser superiores quantidade de micobact rias presentes Essas garrafas de cultura devem ser descontaminadas e recultivadas 4 As garrafas VersaTREK Myco com um sinal positivo podem conter uma ou mais esp cies de micobact rias e ou outras esp cies n o micobacterianas A identifica o de micobact rias presentes requer uma subcultura e procedimentos adicionais para identifica o dos microrganismos presentes A consist ncia da morfologia microsc pica em garrafas VersaTREK Myco n o foi estabelecida 5 As garrafas VersaTREK Myco s o incubadas a 35 37 C eliminando potencialmente a recupera o de micobact rias que necessitem de outras temperaturas de incuba o p ex M marinum M ulcerans M haemophilum A recupera o desses microrganismos requer m todos de cultura adicionais Os microrganismos com requisitos de crescimento especiais p ex M haemophilum podem n o ser recuperados no VersaTREK Myco mesmo quando incubados temperatura adequada Os seguintes isolados foram recuperados em estudos cl nicos ou estudos anal ticos M tuberculosis M avium intracellulare M kansasii M fortuitum M bovis M chelonae M gordonae M scrof
60. ification des mycobact ries directement dans un flacon VersaTREK Myco positive a d montr sa pr cision et sa fiabilit Les flacons VersaTREK Myco positifs n 360 ont t test s avec deux AccuProbe le jour o ils ont t signal s positifs comme d crit dans la proc dure Les sondes utilis es ont t d termin es par la pigmentation de la pastille Une pastille couleur chamois a t test e avec des sondes sp cifiques pour le complexe M tuberculosis et le complexe M avium MAC alors qu une pastille chromog nique a t test e avec des sondes sp cifiques pour MAC et M gordonae Les flacons donnant des r sultats de sondage quivoques ont t incub s 35 C pendant 1 3 jours avant qu un deuxi me sondage soit effectu Les r sultats de l tude sont indiqu s dans le Tableau 4 Sept isolats taient n gatifs pour toutes les sondes utilis es et ont t finalement identifi s comme des esp ces de mycobact ries TABLEAU 3 RESUME DES RESULTATS CLINIQUES Microorganismes r cup r s par Mycobact ries TOTAL TOTAL VersaTREK VersaTREK BACTEC SOLIDE ESPECES ISOLATS VersaTREK ESP BACTEC ESP SEUL SEUL SEUL ESP et SOLIDE M tuberculosis 68 62 52 1 1 4 M avium intracellulare 170 159 89 360 2 3 M kansasii 7 7 5 0 0 1 M fortuitum 5 3 0 2 0 1 M bovis 1 1 0 0 0 M chelonae 9 8 4 0 0 0 M gordonae 30 20 3 10 0 4 M scrofulaceum 1 0 0 0 0 1 M xenopi 6 6 2 0 2 0 M szulgai 3 3 3 0 0 0 M
61. ing on strain age of culture and other variables All bottles with a positive VersaTREK ESP Culture System II signal or appearing turbid should be subcultured to both selective and non selective mycobacterial media Non mycobacterial species may overgrow mycobacteria present Such culture bottles should be decontaminated and recultured 4 VersaTREK Myco bottles with a positive signal may contain one or more species of mycobacteria and or other non mycobacterial species Identification of mycobacteria present requires subculture and additional procedures to identify organisms present The consistency of microscopic morphology in VersaTREK Myco bottles has not been established 5 VersaTREK Myco bottles are incubated at 35 37 C potentially precluding the recovery of mycobacteria requiring other incubation temperatures e g M marinum M ulcerans M haemophilum Recovery of such organisms requires additional culture methods Organisms with special growth requirements e g M haemophilum may not be recovered in VersaTREK Myco when incubated at the appropriate temperature The following isolates have been recovered either in clinical studies or analytical studies M tuberculosis M avium intracellulare M kansasii M fortuitum M bovis M chelonae M gordonae M scrofulaceum M xenopi M szulgai M phlei M smegmatis M simiae M marinum M malmoense 6 Inversion of the VersaTREK Myco bottles after attachment of the VersaTREK Conne
62. izzate sono state determinate da pigmentazione del precipitato E stato testato un precipitato color camoscio con sonde specifiche per il complesso M tuberculosis e il complesso M avium MAC mentre stato testato un precipitato cromogenetico con sonde specifiche per MAC e M gordonae flaconi che hanno fornito risultati di sonda indeterminati sono stati incubati a 35 C per 1 3 giorni prima di eseguire una nuove ispezione con sonda risultati dello studio sono illustrati nella Tabella 4 Sette isolati sono risultati negativi a tutte le sonde utilizzate e alla fine sono stati identificati come altre specie di micobatteri TABELLA 3 SOMMARIO DEI RISULTATI CLINICI Microrganismi ricuperati da Micobatterio TOTALE TOTALE VersaTREK VersaTREK BACTEC SOLIDO SPECIE ISOLATI VersaTREK ESP BACTEC SOLO ESP SOLO SOLO ESP e SOLIDI M tuberculosis 68 62 52 1 1 4 M avium intracellulare 170 159 89 365 2 3 M kansasii 7 7 5 0 0 1 M fortuitum 5 3 0 2 0 1 M bovis 1 1 0 0 0 M chelonae 9 8 4 0 0 0 M gordonae 30 20 3 10 0 4 M scrofulaceum 1 0 0 0 0 1 M xenopi 6 6 2 0 2 0 M szulgai 3 3 3 0 0 0 M species other 8 7 1 2 1 1 TOTALE 308 276 160 51 6 15 a Il numero di organismi recuperati con un metodo qualsiasi da campioni testati con i tre metodi b ll numero complessivo di organismi recuperati nel VersaTREK ESP Culture System ll c p lt 0 05 per il confronto tra VersaTREK ESP e BACTEC utilizzando la modifica McN
63. mande des m thodes de culture compl mentaires Les organismes ayant des exigences sp ciales de croissance ex M haemophilum peuvent ne pas tre r cup r s dans VersaTREK Myco quand ils sont incub s a la temp rature ad quate Les isolats suivants ont t r cup r s soit dans des tudes cliniques soit dans des tudes analytiques M tuberculosis M avium intracellulare M kansasii M fortuitum M bovis M chelonae M gordonae M scrofulaceum M xenopi M szulgai M phlei M smegmatis M simiae M marinum M malmoense 6 Renverser les flacons VersaTREK Myco apr s avoir attach le VersaTREK Connector peut interf rer avec les valeurs de pression du flacon et n est pas recommand 23 7 Les r sultats d AccuProbe devraient tre interpr t s en corollaire avec les autres donn es cliniques et de laboratoire accessibles au clinicien Un r sultat AccuProbe positif n indique pas obligatoirement une culture m lang e de mycobact ries CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES Le VersaTREK ESP Culture System II permet la r cup ration de mycobact ries dans les chantillons cliniques L isolation des mycobact ries dans 3001 chantillons avec le VersaTREK ESP Culture System Il a t compar e au syst me de bouillon de culture radiom trique BACTEC 460 dans une tude multicentres Un sous ensemble de 2805 chantillons a galement t compar au milieu conventionnel base d agar agar ou d albumine Les laboratoires p
64. manipolazione e lo smaltimento di dispositivi contaminati con sangue attenersi alle normative istituzionali Maneggiare con attenzione Sterilizzare prima dello smaltimento Per lo smaltimento utilizzare appositi contenitori per rifiuti con pericolo di lesione Non riutilizzare 6 Verificare che nessun flacone presenti segni di contaminazione rottura o altro segno di deterioramento Non utilizzare flaconi dall aspetto torbido o con segni di danneggiamento 7 Utilizzare solo siringhe con sistema di bloccaggio ago 8 Sterilizzare in autoclave tutti i flaconi di VersaTREK Myco prima dello smaltimento 9 In caso di sigillo danneggiato NON UTILIZZARE VersaTREK Connector ed eliminare nel contenitore per rifiuti con pericolo di lesione CONSERVAZIONE VersaTREK Myco Conservare a una temperatura di 15 30 C in luogo protetto dalla luce NON CONGELARE Il terreno di coltura dovrebbe essere incolore non utilizzare se dall aspetto torbido VersaTREK Myco GS Conservare a una temperatura di 2 8 C in luogo protetto dalla luce VersaTREK Myco AS e VersaTREK Myco PVNA Conservare a 2 8 C In caso di reidratazione conservare a 2 8 C e procedere all utilizzo entro 5 giorni o parte conservare a 20 C e procedere all utilizzo entro 3 mesi Una volta scongelato non congelare nuovamente NORME PER LA RACCOLTA DEI CAMPIONI Durante la valutazione clinica del VersaTREK ESP Culture System Il sono stati utilizzati campioni della seguente provenienza re
65. micobacterias presentes requiere un subcultivo y procedimientos adicionales para identificar los organismos presentes La uniformidad de la morfolog a microsc pica en los frascos VersaTREK Myco no ha sido demostrada 5 Los frascos VersaTREK Myco se incuban a 35 37 C excluyendo potencialmente la recuperaci n de micobacterias que requieren otras temperaturas de incubaci n ej M marinum M ulcerans M haemophilum La recuperaci n de estos organismos requiere utilizar m todos de cultivo adicionales Es posible que los organismos con requisitos especiales de crecimiento ej M haemophilum no sean recuperados en VersaTREK Myco cuando se incuban a la temperatura adecuada Los siguientes organismos aislados han sido recuperados en estudios cl nicos o anal ticos M tuberculosis M avium intracellulare M kansasii M fortuitum M bovis M chelonae M gordonae M scrofulaceum M xenopi M szulgai M phlei M smegmatis M simiae M marinum M malmoense 6 La inversi n de los frascos VersaTREK Myco tras la colocaci n del VersaTREK Connector puede interferir en las lecturas de presi n del frasco por lo que no se recomienda 11 7 Los resultados del AccuProbe deben ser interpretados junto con otros datos cl nicos y de laboratorio que disponga el investigador cl nico Un resultado positivo del AccuProbe no excluye un cultivo de micobacterias mezcladas CARACTER STICAS DE RENDIMIENTO VersaTREK ESP Culture System Il permi
66. mplexo M avium Amostras de sangue 51 43 84 3 8 15 7 0 51 100 Outras amostras 226 199 88 1 24 10 6 3 1 3 226 100 Complexo M tuberculosis Amostras de sangue 1 1 100 0 0 1 100 Outras amostras 37 29 78 4 6 16 2 2 5 4 37 100 M gordonae 38 37 97 4 1 2 6 0 38 100 TOTAL 353 310 38 5 353 a GenProbe San Diego CA b M ltiplos novos testes foram necess rios para uma identifica o final de alguns isolados Para amostras MAC do sangue 1 96 Para amostras MAC de outros produtos para al m do sangue 1 33 Para amostras de M tuberculosis de outros produtos para al m do sangue 5 4 30 INFORMAGAO DE RISCO VersaTREK Myco PVNA Xn Nocivo R42 43 Pode causar sensibilizac o por inalac o e em contacto com a pele S26 Em caso de contacto com os olhos lavar imediata e abundantemente com gua e consultar um m dico S36 Usar vestu rio de protec o adequado VersaTREK Myco AS Xn Nocivo R42 43 Pode causar sensibiliza o por inala o e em contacto com a pele R48 23 24 25 T xico risco de efeitos graves para a sa de em caso de exposi o prolongada por inala o em contacto com a pele e por ingest o R45 Pode causar cancro S7 Manter o recipiente bem fechado S22 N o respirar as poeiras 824 25 Evitar o contacto com a pele e olhos S26 Em caso de contacto com os olhos lavar imediata e abundantemente com gua e consultar um m dico S36 Usar vestu rio de protec o ad
67. oduite dans l ordinateur du syst me et le flacon est plac correctement dans l instrument pour incubation 35 37 C dans des conditions stationnaires VersaTREK ESP Culture System Il d tecte la croissance mycobact rienne en surveillant automatiquement toutes les 24 minutes le taux de consommation d oxyg ne dans la partie sup rieure du flacon de culture et transmet cette r ponse de croissance par un signal visible REACTIFS Formule de VersaTREK Myco H20 Eau trait e 11 5 ml MDK Bouillon de culture 7H9 de Middlebrook 0 56 w v CAS Casitone 0 12 w v GLY Glyc rol 0 24 wiv SBC Bicarbonate de sodium 0 026 w v VersaTREK Myco contient galement des ponges Formule de VersaTREK Myco GS H20 Eau trait e 50 ml BSA Albumine de s rum bovin 7 5 w v DEX Dextrose 3 0 wiv OLA Acide ol ique 0 09 v v CAT Catalase 0 003 w v NaCl Chlorure de sodium 1 27 wiv VersaTREK Myco AS et VersaTREK Myco PVNA contiennent un m lange lyophilis d agents antimicrobiens qui sont r hydrat s a 25 ml Formule de VersaTREK Myco AS Formule de VersaTREK Myco PVNA H20 Eau trait e 25 ml H20 Eau trait e 25 ml PXB PolymyxineB 0 02 w v PXB Polymyxine B 0 02 w v AZL Azlocilline 0 0075 w v NA Acide nalidixique 0 06 w v FOS Fostomycine 0 054 w v AMB Amphot ricine B 0 015 w v NA Acide nalidixique 0 042 w v VAN Vancomycine 0 009 w v AMB Amphot ricine B 0 015 w v SA Agent diluant 5
68. ok 7H9 GB Casitone ES Casitona CST IT Casitone FR Casitone PT Casitona GB Glycerol ES Glicerol GLY IT Glicerolo FR Glyc rol PT Glicerol 33 Sodium Bicarbonate ES Bicarbonato s dico SBC IT Bicarbonato di sodio FR Bicarbonate de sodium PT Bicabornato de S dio GB Bovine Serum Albumin ES Alb mina de suero bovino BSA IT Albumina di siero bovino FR Albumine de s rum bovin PT Albumina S rica Bovina GB Dextrose ES Dextrosa DEX IT Destrosio FR Dextrose PT Dextrose GB Oleic Acid ES Acido oleico OLA IT Acido oleico FR Acide ol ique PT Acido Oleico GB Catalase ES Catalasa CAT IT Catalasi FR Catalase PT Catalase GB Sodium Chloride ES Cloruro s dico NaCl IT Cloruro di sodio FR Chlorure de sodium PT Cloreto de S dio GB Polymyxin B ES Polimixina B PXB IT Polimixina B FR Polymyxine B PT Polimixina B GB Azlocillin ES Azlocilina AZL IT Azlocillina FR Azlocilline PT Azlocilina GB Fosfomycin ES Fosfomicina FOS IT Fosfomicina FR Fostomycine PT Fosfomicina 34 GB Nalidixic Acid ES Acido nalid xico NA IT Acido nalidixico FR Acide nalidixique PT Acido Nalid xico GB Amphotericin B ES Anfotericina B AMB IT Amfotericina B FR Amphot ricine B PT Anfotericina B GB Vancomycin ES Vancomicina VAN IT Vancomicina FR Vancomycine PT Vancomicina GB Stabilizer ES Estabilizante STB IT Stabilizzatore FR Stabilisant PT Estabilizado
69. on particolari requisiti di crescita cio M haemophilum in VersaTREK Myco se incubati alla temperatura richiesta In studi clinici e studi analitici si sono recuperati i seguenti isolati M tuberculosis M avium intracellulare M kansasii M fortuitum M bovis M chelonae M gordonae M scrofulaceum M xenopi M szulgai M phlei M smegmatis M simiae M marinum M malmoense 6 Il capovolgimento del flaconi VersaTREK Myco in seguito al collegamento di VersaTREK Connector pu interferire con le letture della pressione del flacone ed pertanto sconsigliato 17 7 risultati dl AccuProbe dovrebbero essere interpretati insieme ad altri dati clinici e di laboratorio disponibili presso il clinico Un esito positivo di AccuProbe non esclude una coltura micobatterica mescolata CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI VersaTREK ESP Culture System Il consente il recupero di micobatteri da campioni clinici L isolamento micobatterico nel VersaTREK ESP Culture System Il da 3001 campioni stato confrontato con il sistema con terreno di coltura radiometrico BACTEC 460 in uno studio multicentro E stato inoltre confrontato un sottogruppo del totale 2805 campioni con i media convenzionali a base di uovo e agar laboratori che hanno partecipato allo studio erano geograficamente diffusi negli Stati Uniti e includevano ospedali privati e cliniche universitarie di diverse dimensioni con popolazioni varie di pazienti compresi pazienti affetti da AIDS e
70. oncentration Inoculate VersaTREK Myco with 1 ml of sediment 2 Distilled water lysis of whole blood cells a Collect 5 10 ml whole blood into a sterile Vacutainer tube containingSodium Polyanetholesulfonate SPS or heparin A minimum specimen of at least 5 ml is preferred Invert the tube several times Transfer the total specimen to a conical 50 ml centrifuge tube Add sterile distilled water to the 40 ml mark on the tube This will cause lysis of the cells Centrifuge at 3000 x g for 20 minutes Decant the supernatant Add 1 2 ml of phosphate buffer to the sediment Use 1 ml of the resulting specimen to inoculate VersaTREK Myco 7 below o DOO 3 Buffy coat procedure Use only blood received in tubes containing SPS or heparin Tubes containing Edetic Acid EDTA are unacceptable because even trace amounts of EDTA inhibit mycobacterial growth b Spin the tube at 1000 RPM for 10 minutes c Using a pipette remove the buffy coat and as small an amount of red blood cells as possible Place in a sterile tube Use 1 ml of the buffy coat to inoculate VersaTREK Myco 7 below w PROCEDURE Materials Provided VersaTREK Myco VersaTREK Myco GS VersaTREK Myco AS or VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Connector Materials Required But Not Provided Sterile distilled or deionized water Middlebrook 7H10 or other mycobacterial agar or egg based medium Autoclave N acetyl L cysteine powder Sterile 0 067 M phosphate buff
71. other than blood 1 33 For M tuberculosis specimens from sources other than blood 5 4 HAZARD INFORMATION VersaTREK Myco PVNA Xn Harmful R42 43 May cause sensitization by inhalation and skin contact S26 In case of contact with eyes rinse immediately with plenty of water and seek medical advice S36 Wear suitable protective clothing VersaTREK Myco AS Xn Harmful R42 43 May cause sensitization by inhalation and skin contact R48 23 24 25 Toxic danger of serious damage to health by prolonged exposure through inhalation in contact with skin and if swallowed R45 May cause cancer S7 Keep container tightly closed S22 Do not breathe dust S24 25 Avoid contact with skin and eyes S26 In case of contact with eyes rinse immediately with plenty of water and seek medical advice S36 Wear suitable protective clothing S45 In case of accident or if you feel unwell seek medical advice immediately show the label where possible REFERENCES 1 Tenover F C J T Crawford R E Huebner L J Geiter C R Horsburgh Jr and R C Good 1993 The resurgence of tuberculosis Is your laboratory ready J Clin Microbiol 31 767 770 2 Stratton C W 1992 The resurgence of tuberculosis Inf Dis Newsl 11 73 80 3 Kent P T and G P Kubica 1985 Public health mycobacteriology A guide for the level III laboratory USDHHS Centers for Disease Control Atlanta GA 4 Master R M 1992 Clinical microbiology procedures handbook Coor
72. ova o selo do fundo de um VersaTRECK Connector Coloque a extremidade da agulha do conector sobre o gargalo da garrafa de cultura e force para baixo de forma a perfurar a tampa da garrafa NOTA N o inverta a garrafa de cultura enquanto o VersaTREK Connector est na garrafa O fluido na agulha pode interferir com as leituras de press o da garrafa 11 Registe a informa o do doente no computador VersaTREK ESP Culture System II 12 Coloque a garrafa de cultura com o VersaTREK Connector no aparelho 13 Quando o aparelho indicar atrav s de uma luz vermelha fixa que uma determinada localiza o de garrafa cont m uma cultura positiva remova a garrafa de acordo com os procedimentos especificados no Manual do Utilizador do VersaTREK ESP Culture System II 14 Deixe que a garrafa ventile atrav s do VersaTREK Connector Numa c mara de fluxo laminar remova o VersaTREK Connector da garrafa e elimine o num contentor aprovado para res duos infecciosos contundentes 15 Agite vigorosamente em Vortex a amostra para soltar os microrganismos dos tamp es 16 Depois da tampa da garrafa ter sido desinfectada recolha amostras para colora o cido lcool resistente e subcultura utilizando uma agulha e seringa Se forem encontrados microrganismos cido resistentes na colheita proceda identifica o do microrganismo Se n o forem encontrados microrganismos na colheita fixe um novo VersaTREK Connector volte a colocar a garrafa no Aparelho VersaT
73. procedimientos especificados en el Manual del operario del VersaTREK ESP Culture System ll 14 Deje purgar el frasco a trav s del VersaTREK Connector En un armaz n de seguridad biol gica retire el VersaTREK Connector del frasco y des chelo en un contenedor de desechos infecciosos autorizado 15 Ponga la muestra en un mezclador de v rtice para extraer los organismos de la esponja 16 Cuando se haya desinfectado el tap n del frasco obtenga muestras para tinciones cido alcohol resistentes y subcultivos por medio de una jeringuilla y aguja Si se encuentran organismos acido alcohol resistentes en el frotis contin e con la identificaci n de organismos Si no se encuentran organismos en el frotis ponga un nuevo VersaTREK Connector vuelva a colocar el frasco en el instrumento VersaTREK ESP Culture System Il y siga con la incubaci n Si no encuentran organismos acido alcohol resistentes en el frotis el contenido del frasco puede volver a procesarse mediante otro procedimiento de descontaminaci n e inocularse en un nuevo frasco VersaTREK Myco o bien se puede desechar y solicitar otra muestra 10 17 La identificaci n de organismos se puede determinar utilizando probetas de cido nucleico AccuProbe Extraiga 1 0 ml de un frasco bien mezclado de VersaTREK centrifugue a 3500 x g durante 15 minutos para concentrar el crecimiento si se a sla desde un cultivo sangu neo el gr nulo puede volver a suspenderse en un tamp n de fosfato 0 67
74. procedura del laboratorio consigliabile esaminare in modo visivo un flacone che non abbia dato risposta di crescita positiva per individuare la presenza di torbidit Se il flacone si presenta torbido ottenere un campione per la colorazione acido resistente e la sottocoltura come descritto in precedenza In mancanza di prova di torbidita il flacone pu essere eliminato Prima dello smaltimento sterilizzare il contenuto del flacone RISULTATI La rilevazione della crescita micobatterica nel VersaTREK ESP Culture System II si basa sulla misurazione sensibile della produzione e o del consumo di gas all interno della parte alta di un flacone di coltura stagno Questa informazione utilizzata per generare una curva per ogni flacone Un algoritmo interno analizza le informazioni per stabilire lo stato di ogni campione In presenza di determinate condizioni un flacone viene etichettato come positivo Sono presenti circa 10 CFU ml di micobatteri al momento del rilevamento TABELLA 1 RAPPORTO SUI RISULTATI Stato del Flacone e della Macchia Rapporto Segnale AFB positivo Bacilli acido resistenti AFB Identificazione in sospeso Segnale Assenza di rapporto o campione contaminato con organismi non micobatterici AFB impossibile stabilire la presenza assenza di AFB CONTROLLO DI QUALITA Insieme a ogni lotto VersaTREK Myco incluso un Certificato di Analisi Tutti i lotti sono conformi ai criteri di garanzia di qualita TREK Se richiesto
75. r GB Filler ES Relleno FIL IT Riempitivo FR Filtre PT Enchimento GB Solubilizing Agent ES Agente solubilizante SA IT Agente solubilizzante FR Agent diluant PT Agente de Solubilizagao 35
76. r de diferentes locais do corpo como descrito em Public Health Mycobacteriology A Guide for the Level III Laboratory e em Clinical Microbiology Procedures Handbook ou como descrito no manual de procedimentos laboratorial Nota As amostras de sangue e medula ssea s poder o ser processadas utilizando um dos seguintes procedimentos antes da inoculac o das garrafas VersaTREK Myco 1 Tubos isoladores Siga as instru es do fabricante do isolador para lise e concentra o Inocular o VersaTREK Myco com 1 ml de sedimento 2 Lise de todas as c lulas sangu neas em gua destilada a Recolha de 5 a 10 ml de sangue total para um tubo Vacutainer esterilizado contendo Polianetolsulfonato de S dio SPS ou heparina De prefer ncia uma amostra m nima de pelo menos 5 ml inverta o tubo diversas vezes b Transfira a amostra total para um tubo de centr fuga c nico de 50 ml c Adicione gua destilada esterilizada ao tubo at marca de 40 ml Isto provocar a lise das c lulas d Centrifugue a 3000 x g durante 20 minutos Decante o sobrenadante e Adicione 1 a 2 ml de tamp o de fosfato ao sedimento Utilize 1 ml da amostra resultante para inocular o VersaTREK Myco N 7 em baixo 3 Procedimento para a camada leucocit ria a Utilize apenas sangue colhido em tubos que contenham SPS ou heparina Os tubos que contenham Acido Ed tico EDTA n o s o aceit veis uma vez que qualquer vest gio de EDTA inibe o crescimento mi
77. re il tappo del flacone VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA con alcool 2 Ricostituire asetticamente VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA iniettando attraverso il setto disinfettato 25 ml di acqua deionizzata o distillata sterile utilizzando un ago e una siringa La quantita di reagente consente di riempire 50 flaconi 3 Etichettare il flacone di coltura VersaTREK Myco con le informazioni del paziente 4 Disinfettare il tappo del flacone con alcool 5 Aggiungere asetticamente 1 ml di VersaTREK Myco GS iniettando attraverso il setto con un ago e una siringa 6 Aggiungere asetticamente 0 5 ml di soluzione di VersaTREK Myco o VersaTREK Myco PVNA iniettando attraverso il setto con un ago e una siringa 7 Aggiungere fino a 1 ml di campione clinico concentrato con una ago e una siringa NOTA Un eccessivo riempimento del flacone potrebbe dare luogo a risultati falsati con esito positivo e nel caso di campioni sanguigni provenienti da tubi Isolator inibire la crescita Inoculare 0 1 ml di campione su una piastra agar Middlebrook 7H10 o altro agar solido micobatterico o medium a base di uovo NOTA In alternativa possibile eseguire le fasi 2 e 5 7 aprendo i flaconi e aggiungendo i reagenti e i campioni utilizzando delle pipette sterili Avere cura di mantenere la tecnica asettica Il tappo deve essere adeguatamente rimesso in sede per garantire un sistema stagno Se il tappo non adeguatamente messo in sede si verificher una perdita
78. sodio SPS o heparina Se recomienda una muestra m nima de al menos 5 ml Invierta el tubo varias veces b Transfiera toda la muestra a un tubo centrifugador c nico de 50 ml c A ada agua destilada est ril hasta la marca de 40 ml en el tubo lo que provocar la lisis de las c lulas d Centrifugue a 3000 x g durante 20 minutos Decante el sobrenadante e A ada de 1 a 2 ml de tamp n de fosfato en el sedimento Use 1 ml de la muestra resultante para inocular VersaTREK Myco punto 7 a continuaci n 3 Procedimiento de capa leucocitaria a Use s lo sangre recibida en tubos que contengan SPS o heparina Los tubos que contengan cido ed tico EDTA no son aceptables porque incluso trazas de EDTA inhiben el crecimiento de micobacterias b Haga girar el tubo a 1000 RPM durante 10 minutos c Con una pipeta retire la capa leucocitaria y la cantidad m s peque a de hemat es posible P ngala en un tubo est ril Use 1 ml de la capa leucocitaria para inocular VersaTREK Myco punto 7 a continuaci n PROCEDIMIENTO Materiales suministrados VersaTREK Myco VersaTREK Myco GS VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Connector Materiales necesarios pero no suministrados Agua destilada o desionizada est ril Middlebrook 7H10 u otro agar micobacteriano o caldo de cultivo basado en huevos Autoclave Polvo N acetil L ciste na Tamp n de fosfato est ril 0 067 M pH 6 8 Centrifugador Incubadora COs 37 C Jeringuillas
79. spiratori inclusi sputo lavaggio ecc liquidi corporei come CSF liquido sinoviale liquido pleurico ecc urina feci liquidi aspirati gastrici tessuti sangue e midollo osseo Raccogliere e trattare i campioni prelevati da diverse parti del corpo come descritto in Public Health Mycobacteriology A Guide for the Level III Laboratory e in Clinical Microbiology Procedures Handbook o come descritto nel manuale di procedura del vostro laboratorio Nota campioni di midollo osseo e sangue devono essere trattati utilizzando una delle seguenti procedure prima dell inoculazione dei flaconi di VersaTREK Myco 1 Tubi Isolator Seguire le istruzioni del fabbricante dell Isolator per la lisi e la concentrazione Inoculare VersaTREK Myco con 1 ml di sedimento 2 Lisi di acqua distillata di cellule sanguigne intere a Raccogliere 5 10 ml di sangue intero in un tubo Vacutainer sterile contenente Polianetol sulfonato di sodio SPS o eparina preferibile un campione minimo di almeno 5 ml Capovolgere il tubo pi volte b Trasferire l intero campione in un tubo di centrifuga conico di 50 ml c Aggiungere acqua distillata sterile fino all indicatore di 40 ml del tubo Questo dar origine alla lisi cellulare d Centrifugare a 3000 x g per 20 minuti Decantare il supernatante e Aggiungere 1 2 ml di buffer fosfato al sedimento Utilizzare 1 ml del campione risultante per inoculare VersaTREK Myco 7 in basso 3 Procedura di buffy co
80. sposizione prolungata per inalazione a contatto con la pelle e per ingestione R45 Pu provocare il cancro S7 Conservare il recipiente ben chiuso 22 Non respirare le polveri S24 25 Evitare il contatto con gli occhi e con la pelle 26 In caso di contatto con gli occhi lavare immediatamente e abbondantemente con acqua e consultare un medico S36 Usare indumenti protettivi adatti S45 In caso di incidente o di malessere consultare immediatamente il medico se possibile mostrargli l etichetta RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI pg 7 Per maggiori informazioni contattare l Assistenza Tecnica di TREK al numero 1 800 642 7029 19 Francais VersaTREK Myco 7111 42 VersaTREK Myco GS 7112 42 VersaTREK Myco GS 7114 42 VersaTREK Myco PVNA 7113 42 VersaTREK Connector 7150 44 UTILISATION PREVUE VersaTREK Myco avec VersaTREK Myco GS et VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA est un milieu de croissance s lectif a utiliser avec l instrument VersaTREK ou le ESP Culture System Il pour la r cup ration de mycobact ries dans des chantillons corporels st riles et dans des chantillons cliniques dig r s d contamin s RESUME ET EXPLICATION Le laboratoire de microbiologie clinique peut recevoir une vari t d chantillons pour une mise en culture mycobact rienne Ceci peut inclure des chantillons respiratoires du sang et autres fluides corporels normalement st riles de l urine des mati res f cales tissus et conten
81. te la recuperaci n de micobacterias de muestras cl nicas El aislamiento de micobacterias en el VersaTREK ESP Culture System Il a partir de 3001 muestras fue comparado con el sistema de caldo radiom trico BACTEC 460 en un estudio desarrollado en varios centros Un subconjunto del total 2805 muestras tambi n fue comparado con medios convencionales basados en agar y huevos Los laboratorios que participaron en el estudio estaban distribuidos geogr ficamente por todos los Estados Unidos e inclu an hospitales privados y de pr cticas con diferentes poblaciones de pacientes incluyendo pacientes con SIDA y fibrosis c stica Un total de 363 muestras dieron positivo en la comparaci n VersaTREK ESP Culture System II BACTEC 460 lo que representa un porcentaje de positividad del 12 De estos cultivos positivos 306 84 fueron recuperados en el instrumento del VersaTREK ESP Culture System Il y 268 74 fueron recuperados en el sistema BACTEC En la comparaci n todos los medios s lidos convencionales combinados detectaron un 92 de las muestras que desarrollaban micobacterias El instrumento del VersaTREK ESP Culture System II indic un 1 1 de falso positivo se al positiva no se detectan organismos y un porcentaje del 0 6 de falso negativo se al negativa subcultivo AFB positivo El porcentaje de falso negativo est basado en tinciones y o subcultivos de todas las muestras positivas mediante cualquier m todo m s un 10 de las muestras negativ
82. tis ne pr sente aucun organisme attacher un nouveau VersaTREK Connector remettre le flacon dans l instrument VersaTREK ESP Culture System Il et poursuivre incubation Si des organismes non acides sont d couverts sur le frottis le contenu du flacon peut tre retrait par une autre proc dure de d contamination et inocul dans un flacon frais VersaTREK Myco ou d class avec pr l vement d un nouvel chantillon 22 17 L identification des organismes peut tre effectu e en utilisant des sondes d acide nucl ique AccuProbe Retirer 1 0 ml d un flacon VersaTREK bien m lang centrifuger 3500 x g pendant 15 minutes pour concentrer la croissance Si l isolat provient d une culture de sang la pastille devrait de nouveau tre mise en suspension dans un tampon de phosphate de 0 67M au pH 6 8 pass au Vortex et la centrifugeuse Cette proc dure doit tre r p t e jusqu ce que le surnageant soit clair Remettre en suspension des pastilles dans un bouillon de culture 7H9 jusqu un quivalent McFarland 1 et faire valuer l aide d un kit AccuProbe GenProbe San Diego CA suivant les instructions du fabricant pour la m thode de culture en bouillon de culture Il est recommand de re tester l chantillon si la valeur RLU entre dans la plage quivoque 10 000 29 000 RLUs 18 A la fin de la p riode d incubation 6 semaines ou celle d finie par votre manuel de proc dure de laboratoire un flacon ne montrant pas de r pons
83. tubos Isolator puede ocasionar una inhibici n del crecimiento Inocule 0 1 ml de muestra en una placa de agar Middlebrook 7H10 o en otro agar s lido micobacteriano o caldo de cultivo basado en huevos NOTA Alternativamente los pasos 2 y 5 7 pueden efectuarse abriendo los frascos y agregando los reactivos y la muestra mediante pipetas est riles Se debe tener cuidado de mantener una t cnica as ptica El tap n y el capuch n deben recolocarse adecuadamente para garantizar un sistema herm tico Si el tap n y el capuch n no est n colocados correctamente se producir un error de p rdida en el frasco 8 Limpie el frasco y el tap n con desinfectante micobactericida 9 Mezcle invirtiendo varias veces 10 Extraiga la junta de la parte inferior de un VersaTREK Connector Ponga el extremo de la aguja del VersaTREK Connector sobre el cuello del frasco de cultivo y presione verticalmente hacia abajo hasta perforar el tap n del frasco de cultivo NOTA no invierta el frasco de cultivo mientras el VersaTREK Connector est en el frasco El l quido en la aguja puede interferir en las lecturas de presi n del frasco 11 Registre la informaci n del paciente en el ordenador del VersaTREK ESP Culture System Il 12 Ponga el frasco de cultivo con el VersaTREK Connector en el instrumento 13 Cuando el instrumento indique con una luz roja estable que una ubicaci n espec fica del frasco contiene un cultivo positivo retire el frasco seg n los
84. u suivant la description de notre manuel de proc dure en laboratoire Note les chantillons de moelle pini re doivent tre trait s en utilisant une des proc dures suivantes avant d inoculer les flacons VersaTREK Myco 1 Tubes Isolator Suivre les directives du fabricant de l Isolator propos de la lyse et de la concentration Inoculer VersaTREK Myco avec 1 ml de s diment 2 Lyse dans l eau distill e ou cellules sanguines enti res a Mettre 5 10 ml de cellules sanguines enti res dans un tube Vacutainer st rile contenant du polyan tholesulfonate de sodium SPS ou de l h parine Un chantillon minimal d au moins 5 ml est pr f rable Renverser le tube plusieurs fois b Transf rer tout l chantillon dans un tube centrifuge conique de 50 ml c Ajouter de l eau distill e jusqu a la marque 40 ml sur le tube Cela provoquera la lyse des cellules d Centrifuger 3000 x g pendant 20 minutes D canter le surnageant e Ajouter 1 2 ml de tampon de phosphate au s diment Utiliser 1 ml de l chantillon restant pour inoculer VersaTREK Myco 7 ci dessous 3 Proc dure de couche tampon a Utiliser uniquement du sang re u dans des tubes contenant du SPS ou de l h parine Les tubes contenant de l acide ethyl ne diamine t trac tique EDTA sont inacceptables car m me des traces d EDTA inhibent la croissance mycobact rienne b Centrifuger le tube a 1000 tours minute pendant 10 minutes c En utilisant une pip
85. ui stato aggiunto VersaTREK Myco GS e per campioni potenzialmente contaminati VersaTREK Myco AS o VersaTREK Myco PVNA E consigliabile utilizzare VersaTREK Myco PVNA in caso di ritardi previsti prima del trattamento superiori a 8 ore Viene collegato VersaTREK Connector a ogni flacone per stabilire un percorso di monitoraggio sterile con lo strumento VersaTREK ESP Culture System Il Una membrana idrofobica nel VersaTREK Connector previene l aerosolizzazione Le informazioni cliniche vengono inserite nel computer del sistema e quindi il flacone viene adeguatamente posto nello strumento per l incubazione a 35 37 C in condizioni stabili VersaTREK ESP Culture System Il rileva crescite micobatteriche monitorando automaticamente ogni 24 minuti la velocit di consumo dell ossigeno all interno della parte alta del flacone di coltura registrando la segnalazione della crescita con un segnale visivo REAGENTI Formula VersaTREK Myco H2O Acqua trattata 11 5 ml MDK Terreno di coltura Middlebrook 7H9 0 56 p v CAS Casitone 0 12 p v GLY Glicerolo 0 24 p v SBC Bicarbonato di sodio 0 026 p v VersaTREK Myco contiene anche delle spugne Formula VersaTREK Myco GS H20 Acqua trattata 50 ml BSA Albumina di siero bovino 7 5 p v DEX Destrosio 3 0 p v OLA Acido oleico 0 09 v v CAT Catalasi 0 003 p v NaCl Cloruro di sodio 1 27 p v VersaTREK Myco AS e VersaTREK Myco PVNA contengono una miscela liofilizzata di ag
86. ulaceum M xenopi M szulgai M phlei M smegmatis M simiae M marinum M malmoense 6 A invers o das garrafas VersaTREK Myco ap s a conex o do VersaTREK Connector pode interferir com as leituras de press o da garrafa e n o recomendada 29 7 Os resultados do AccuProbe devem ser interpretados em conjunto com outros dados laboratoriais e cl nicos dispon veis Um resultado AccuProbe positivo n o elimina a probabilidade de cultura micobacteriana mista CARACTER STICAS DE COMPORTAMENTO FUNCIONAL O VersaTREK ESP Culture System Il permite a recuperac o de micobact rias de amostras biol gicas O isolamento de micobact rias no VersaTREK ESP Culture System II de 3001 amostras foi comparado com o sistema radiom trico BACTEC 460 num estudo multi centro Um subconjunto do total 2805 amostras tamb m foi comparado com o meio convencional de agar com base de ovo Os laborat rios que participaram no estudo estavam distribu dos geograficamente pelos EUA e inclu ram grandes e pequenos hospitais privados e universit rios com diferentes popula es de pacientes incluindo pacientes com SIDA e Fibrose C stica Um total de 363 amostras foi positivo na compara o entre o VersaTREK ESP Culture System II BACTEC 460 representando uma taxa de positividade de 12 De entre estas culturas positivas 306 84 foram recuperadas no aparelho VersaTREK ESP Culture System Il e 268 74 foram recuperadas no sistema BACTEC Na compara o todos os
87. ulture System Il combina um meio de cultura l quido VersaTREK Myco um suplemento de crescimento VersaTREK Myco GS e para amostras potencialmente contaminadas um suplemento antibi tico VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA Esta combina o actuando num sistema de detec o que incuba automaticamente e monitoriza continuamente garrafas de cultura permite a recupera o eficaz de micobact rias nas amostras suspeitas de conter micobact rias Os tamp es nas garrafas VersaTREK Myco fornecem uma matriz de suporte de crescimento e aumentam a rea de superf cie exposta ao oxig nio do espa o livre A tecnologia do VersaTREK ESP Culture System II baseada na detec o das altera es de press o do espa o livre numa garrafa selada O VersaTREK ESP Culture System II monitoriza as altera es na produ o de g s e consumo de g s provocadas pelo crescimento microbiol gico Foi desenvolvido um algoritmo especial para detec o de micobact rias de crescimento lento PRINC PIOS DO PROCEDIMENTO As amostras depois de correctamente preparadas s o inoculadas com uma agulha e seringa e uma agulha nas garrafas Myco VersaTREK previamente preparadas com VersaTREK Myco GS e para amostras potencialmente contaminadas com VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA O VersaTREK Myco PVNA dever ser utilizado quando forem esperados atrasos superiores a 8 horas antes do processamento O VersaTREK Connector fixado a cada garrafa para estabelecer uma
88. une seringue Il y a suffisamment de r actif pour 50 flacons 3 Etiqueter la flacon de culture VersaTREK Myco en indiquant les informations du patient 4 D sinfecter le bouchon du flacon l alcool 5 Ajouter en milieu st rilez 1 ml de VersaTREK Myco GS en l injectant par le septum en utilisant une seringue et une aiguille 6 Ajouter en milieu st rile 0 5 ml de VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA en l injectant par le septum en utilisant une seringue et une aiguille 7 Ajouter jusqu 1 ml d chantillon clinique concentr avec une seringue et une aiguille NOTE Un remplissage exag r du flacon peut provoquer des r sultats positifs erron s en cas d chantillons de sang en tube Isolator et peut provoquer une inhibition de la croissance Inoculer 0 1 ml de l chantillon sur une lame base d agar agar Middlebrook 7H10 ou autre g lose mycobact rienne solide ou milieu base d albumine NOTE Alternativement les tapes 2 et 5 7 peuvent tre effectu es en ouvrant les flacons et en ajoutant les r actifs et l chantillon en utilisant des pipettes st riles L asepsie doit tre maintenue tout au long du processus Le bouchon et le capuchon doivent tre r install s correctement pour garantir l tanch it du syst me Si le bouchon et le capuchon ne sont pas replac s correctement la flacon aura une fuite 8 Essuyer le flacon de culture et le bouchon avec du d sinfectant mycobact ricide 9 M l
89. us gastriques Les m thodes de culture conventionnelles impliquant la digestion et la concentration permettent la d tection de mycobact ries cependant les r sultats ne sont pas disponibles avant 2 8 semaines Quelques semaines suppl mentaires sont n cessaires pour effectuer les tests de r ceptivit Un diagnostic rapide de la tuberculose est important pour introduire imm diatement la th rapie m dicamenteuse adapt e et la prise de mesures destin es pr venir la diss mination de cette maladie hautement contagieuse Un traitement retard en particulier des souches r sistantes aux th rapies m dicamenteuses multiples comme M tuberculosis MDR TB peut avoir pour cons quence un chec du traitement et le d c s du patient Pour contrer ces probl mes les microbiologistes cliniques doivent de toute urgence utiliser les tests de diagnostic les plus rapides et les plus sensibles qui donnent des r sultats cr dibles Les experts des centres de contr le des maladies CDC ont fait diverses recommandations concernant les tests mycobact riens y compris l utilisation d un milieu la fois liquide et solide pour la culture mycobact rienne VersaTREK ESP Culture System Il associe un milieu de culture liquide VersaTREK Myco un suppl ment de croissance VersaTREK Myco GS et pour les chantillons potentiellement contamin s un suppl ment antibiotique VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA pour une r cup ration optimale des m
90. via esterilizada de monitoriza o no aparelho VersaTREK ESP Culture System Il Uma membrana hidrof bica no VersaTREK Connector evita a produ o de aeross is A informa o cl nica introduzida no computador do sistema e a garrafa colocada no aparelho para incuba o a 35 37 C em condi es est veis O VersaTREK ESP Culture System Il detecta o crescimento micobacteriano monitorizando automaticamente a cada 24 minutos a taxa de consumo de oxig nio no espa o livre da garrafa de cultura e reportando essa resposta de crescimento atrav s de um sinal vis vel REAGENTES F rmula VersaTREK Myco H20 Agua Destilada Est ril 11 5 ml MDK Caldo Middlebrook 7H9 0 56 peso volume CAS Casitona 0 12 peso volume GLY Glicerol 0 24 peso volume SBC Bicabornato de S dio 0 026 peso volume O VersaTREK Myco tamb m cont m tamp es F rmula VersaTREK Myco GS H2O gua Destilada Est ril 50 ml BSA Albumina S rica Bovina 7 5 peso volume DEX Dextrose 3 0 peso volume OLA cido Oleico 0 09 peso volume CAT Catalase 0 003 peso volume NaCl Cloreto de S dio 1 27 peso volume O VersaTREK Myco AS e VersaTREK Myco PVNA cont m uma mistura liofilizada de agentes antibi ticos que s o re hidratados para 25 ml F rmula VersaTREK Myco AS F rmula VersaTREK Myco PVNA H20 gua Destilada Est ril 25 ml H20 Agua Destilada Est ril 25 ml PXB Polimixina B 0 02 peso volume PXB Polimixina B 0 02 p
91. ycobact ries avec un syst me de d tection qui incube automatiquement et surveille en permanence les flacons de culture inocul s d chantillons que l on suspecte d tre contamin s de mycobact ries Les ponges plac es dans les flacons VersaTREK Myco fournissent une matrice de support de croissance et augmentent la surface expos e l oxyg ne de la partie sup rieure du flacon La technologie du VersaTREK ESP Culture System Il se base sur la d tection des modifications de pression dans la partie sup rieure d un flacon ferm Le VersaTREK ESP Culture System Il surveille les modifications dans la production ou la consommation de gaz due la croissance microbienne Un algorithme sp cial a t d velopp pour d tecter les mycobact ries a croissance tr s lente PRINCIPES DE LA PROCEDURE Les chantillons pr par s de la mani re appropri e sont inocul s par une seringue et une aiguille dans les flacons VersaTREK Myco auxquels on a ajout du VersaTREK Myco GS et pour les chantillons potentiellement contamin s VersaTREK Myco AS ou VersaTREK Myco PVNA VersaTREK Myco PVNA devra tre utilis si l on s attend des d lais de plus de 8 heures avant traitement Le VersaTREK Connector est attach chaque flacon pour tablir une voie de surveillance st rile avec l instrument VersaTREK ESP Culture System Il Une membrane hydroponique plac e dans le VersaTREK Connector emp che la formation d a rosols L information clinique est intr

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