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GEN-PROBE APTIMA HPV 16 18/45 Genotype Assay Package Insert

1. 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du test R sultat du test Int stati HPV Aptima AHPV GT nterpretation Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 8 1 3 37 5 4 2 37 pos HPV 18 45 HPV 18 45 2 0 16 4 0 9 12 3 Pos HPV 16 Pos HPV 16 0 0 17 0 0 17 n g HPV 18 45 uniquement 0 0 15 5 0 0 14 3 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 15 0 3 20 10 0 2 20 pos HPV 18 45 uniquement 3 9 30 6 1 0 22 8 Positif as EVE os ans cane pos HPV 18 45 POS HPV 16 et 18 45 S O 0 0 S O 0 0 3 6 4 111 2 7 3 111 N g HPV 16 18 45 Pos aut HPV HR g os autres 1 2 6 2 0 7 4 7 Pos ou n g Pos HPV HR 4 7 1 148 3 4 5 148 2 6 6 1 1 6 4 3 a X 0 9 2 230 0 4 1 230 N g HPV 16 18 45 N g HPV HR N gatif eg eg 0 1 2 2 0 0 1 6 Pr valence 2 4 9 378 1 6 6 378 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 14 3 4 28 14 3 4 28 pos HPV 18 45 HPV 18 45 4 8 26 4 5 0 21 9 Pos HPV 16 Pos HPV 16 26 7 4 15 26 7 4 15 n g HPV 18 45 uniquement 6 4 47 9 6 5 43 1 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 0 0 12 0 0 12 pos HPV 18 45 uniquement 0 0 21 5 0 0 18 6 Positif a EG os 0 0 0 1 0 0 0 1 Pos HPV 16 et 18 45 sn pos HPV 18 45 S id 0 0 93 4 0 0 93 1 A 3 6 3 83 1 2 1 83 N g HPV 16 18 45 Pos aut HPV HR g os autres 1 0 7 8 0 0 4 1 6 3 7 111 4 5 5 111 Pos i Pos HPV HR os ou n g os 3 3 8 9 2 3 5 4
2. 1 7 10 9 ae 1 9 4 210 1 0 2 210 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR da O o Pr valence 3 9 10 256 2 0 5 256 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 48 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Syst me Assay Le risque relatif de maladie d apr s les r sultats positifs et n gatifs du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont pr sent s dans le tableau 26 Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 11 1 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN2 et 22 8 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes ne pr sentant aucun type de HPV haut risque Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 2 1 fois plus de probabilit d avoir une l sion CIN2 et 4 0 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque Tableau 26 Population ASC US 2 21 ans risque relatif de l sion 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sul
3. Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancer Total ptima Pos HPV 16 n g HPV 18 45 Pos HPV 16 1 26 18 11 15 0 71 N g HPV 16 Pos Positif pos HPV 18 45 HPV 18 45 3 F4 2 1 1 Pos HPV 16 Pos HPV 16 pos HPV 18 45 et 18 45 9 4 i l o 3 N g HPV 16 Pos autres n g HPV 18 45 HPV HR 2 132 a ae 10 o 23r Total 6 182 104 37 29 1 359 N gatif N g N g HPV HR 13 450 75 10 4 0 552 g HPV 16 18 45 S9 Total 19 632 179 47 33 ce 911 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay CIN1 n oplasie intra pith liale cervicale de grade 1 HR haut risque N g n gatif Pos Positif Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux lors du test final ou apr s la r solution des r sultats initiaux non valides par la proc dure 19 femmes se sont rendues la consultation de colposcopie mais n ont pas pu b n ficier d un diagnostic pour les raisons suivantes lt 5 chantillons de biopsie ont tous r v l des r sultats histologiques normaux CIN1 n 15 aucune biopsie n a t pr lev e n 3 et les lames de biopsie ont t perdues n 1 Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Une femme a pr sent un ad nocarcinome in situ AIS Le risque absolu de maladie 2 CIN2 et 2 CIN3 selon les r sultats du Aptima HPV 16 18 45
4. changer m langer ou combiner les r actifs de test ou les calibrateurs issus de kits portant des num ros de lots diff rents R Les liquides de test Aptima le conservateur de liquide syst me Aptima Tigris DTS System uniquement et les r actifs Auto Detect ne font pas partie du lot de r f rence n importe quel lot peut donc tre utilis S Il est n cessaire de m langer soigneusement les r actifs du test pour obtenir des r sultats pr cis T Des embouts de pipette munies de filtres hydrophobes doivent tre utilis es Conditions de conservation et de manipulation des r actifs Veuillez ne pas utiliser les r actifs au del de la date de p remption inscrite sur les flacons Consultez les informations ci dessous pour obtenir des instructions de conservation suppl mentaires A Les r actifs suivants se conservent entre 2 C et 8 C r frig ration d s leur r ception R actif d amplification du HPV 16 18 45 R actif enzymatique du HPV 16 18 45 R actif sonde du HPV 16 18 45 R actif de contr le interne du HPV 16 18 45 Calibrateurs positifs du HPV 16 18 45 et calibrateurs n gatifs du HPV 16 18 45 B Les r actifs suivants se conservent entre 15 C et 30 C temp rature ambiante Solution de reconstitution de l amplification du HPV 16 18 45 Solution de reconstitution enzymatique du HPV 16 18 45 Solution de reconstitution de sonde du HPV 16 18 45 R actif de capture de cible du HPV 16 18 45 R actif de
5. dose toxique moyenne TCIDs9 dose infectant 50 des cultures de tissus Transcrit in vitro test Bien qu aucune r activit crois e n ait t observ e avec la Trichomonas vaginalis des interf rences ont t not es voir ci dessous La sensibilit analytique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay en pr sence de microorganismes a t valu e avec le m me panel que celui d crit dans le tableau 20 auquel a galement t ajout une faible concentration de cellules SiHa et HeLa toutes infect es par HPV respectivement 1 6 cellule par r action et 0 3 cellule par r action Les crit res de l tude pour valuer l effet de la pr sence de microorganismes sur la sensibilit du test se sont appuy s sur le taux de positivit La presence de microorganismes n a pas interf r avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a l exception de Trichomonas vaginalis TV Des interferences ont t observ es avec la TV lorsque cette derni re est pr sente des concentrations sup rieures 3 x 10 cellules ml Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 42 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Interf rence Les substances d crites dans le tableau 21 ont t individuellement ajout es des chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPep group s dilu s a 1 2 9 dans du STM aux concentrations sp cifi es dans le tableau Toutes les substances ont t test es av
6. 16 3615 18 3615 0 3615 131 3615 S O sans objet HR a haut risque Pos positif Remarque Les femmes ayant obtenu des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me ont t d sign es comme n gatives avec le Aptina HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me aux fins de l analyse Types de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 et 68 Dans la population NLIM les sujets dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me n ont pas tous t test s avec le Aptima 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Systeme Concernant l analyse par site de test les r sultats de ces femmes ont t al atoirement r partis dans l un des 3 sites de test Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 44 AW 11504 901 Rev 003 FR Apti ma Performance du Panther Syst me Assay Performance du Panther Syst me Assay Conception de l tude clinique portant sur le Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay utilis sur le Panther Syst me a t valu l aide d chantillons cytologiques de suivi recueillis sur des femmes ayant donn leur consentement pendant l tude clinique am ricaine multicentrique prospective nomm e essai CLEAR L essai CLEAR a t men pour d terminer la performance clinique du Aptima HPV assay sur le Tigris DT
7. 4 0 0 2 1 6 Pr val 9 1 3 8 LM 81 892 34 892 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 47 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Tableau 25 Population ASC US 2 21 ans risque absolu de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par groupe d age gt CIN2 gt CIN3 R sultat du test R sultat du test Int stati HPV Aptima AHPV GT nterpr tation Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 27 4 20 73 16 4 12 73 pos HPV 18 45 HPV 18 45 19 0 36 2 10 3 22 5 Pos HPV 16 Pos HPV 16 29 4 15 51 19 6 10 51 n g HPV 18 45 uniquement 18 8 41 1 11 3 28 5 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 15 0 3 20 5 0 1 20 Positif pos HPV 18 45 uniquement 3 6 34 6 0 2 21 6 Pos HPV 16 100 2 2 50 0 1 2 Pos HPV 16 et 18 45 21 29 ans pos HPV 1845 G 27 0 100 2 9 97 1 17 1 25 146 5 5 8 146 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 12 7 21 7 2 8 8 6 20 5 45 219 9 1 20
8. 9 7 1 3 100 7 Pos HPV HR 4 9 21 2 par rapport a n g HPV HR 1 9 12 7 2 7 164 7 Pr valence 2 5 20 808 1 4 11 808 Cl intervalle de confiance HR a haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 54 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Syst me Assay Les rapports de vraisemblance l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont indiqu s dans le tableau 34 r sultats corrig s pour tenir compte du biais de v rification et dans le tableau 35 non corrig s Les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 17 1 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN2 et 21 9 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN3 Tableau 34 Population NLIM 2 30 ans rapports de vraisemblance pour les l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sultats du Aptima Assay Rapport de vraisemblance Rapport de vraisemblance CI 95 CI 95 P 11 2 24 1 Positif au HPV 16 et
9. Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Une femme a pr sent un ad nocarcinome in situ AIS Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 26 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Le risque absolu de maladie 2 CIN2 et 2 CIN3 selon les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay sont pr sent s dans le tableau 3 Le risque de 2 CIN2 chez les femmes pr sentant des types de HPV 16 18 et ou 45 tait de 29 1 par rapport 14 3 chez les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque et de 2 2 chez les femmes ne pr sentant pas de types de HPV haut risque Les risques absolus sont indiqu s par groupe d age dans le tableau 4 Tableau 3 Population ASC US 2 21 ans risques absolus de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay R it AE 2 CIN2 2 CIN3 sultat du ima gees HPV pee R sultat du test AHPV GT Interpr tation Risque absolu Risque absolu Cl a 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 29 1 34 117 16 2 19 117 pos HPV 18 45 HPV 18 45 22 4 36 0 11 4 21 1 Pos HPV 16 Pos HPV 16 35 7 25 70 20 0 14 70 n g HPV 18 45 uniquement 26 1 45 9 12 6 28 0 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 15 9 7 44 9 1 4 44 Positif pos HPV 18 45 uniquement 7 2 28 3 2 9 19 5 Pos HPV 16 66 7 2 3 33 3
10. C J L M Meijer S Franceschi and the IARC HPV Prevalence Surveys Study Group Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal women in the International Agency for Research on Cancer HPV prevalence surveys a pooled Analysis 2005 The Lancet 366 991 Stoler M H T C Wright Jr J Cuzick J Dockter J Reid D Getman C Giachetti Aptima HPV assay performance in women with atypical squamous cells of undetermined significance cytology results 2013 American Journal of Obstetrics amp Gynecology 208 2 144 145 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 62 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima wu WD CE Hologic Inc 10210 Genetic Center Drive EMERGO EUROPE San Diego CA 92121 USA Molenstraat 15 2513 BH The Hague Service clients 1 844 Hologic 1 844 465 6442 Pays Bas customersupport hologic com Service technique 1 888 484 4747 molecularsupport hologic com Pour obtenir des coordonn es suppl mentaires visitez le site www hologic com Ce produit est destin tre utilis uniquement pour des diagnostics in vitro humains Hologic Aptima DTS Panther PreservCyt ThinPrep et Tigris sont des marques commerciales et ou des marques d pos es d Hologic Inc et ou de ses filiales aux Etats Unis et ou dans d autres pays RAININ est une marque commerciale de Rainin Instruments LLC SUREPATH et PREPSTAIN sont des marques commerciales de TriPath Imaging Inc Toutes les autres marque
11. l tude a inclus 404 femmes valuables de 21 ans ou plus avec des r sultats cytologiques ASC US et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me et pour lesquelles les chantillons cytologiques de suivi r pondaient aux crit res de test avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me Parmi ces 404 femmes 45 ne disposaient pas d un chantillon cytologique de suivi en volume suffisant pour tre test dans cette tude et 6 pr sentaient des diagnostics pathologiques ind termin s apr s analyse des valeurs manquantes elles nont pas t inclues dans les calculs de performance Les 353 femmes valuables disposant d un statut pathologique concluant ont pr sent des r sultats valides avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me ces r sultats se sont fond s sur la r alisation automatique du test apr s un r sultat positif avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me Soixante sept 67 femmes avaient des l sions 2 CIN2 et 30 des l sions 2 CIN3 Sur les 353 femmes valuables pr sentant des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me 118 ont pr sent des r sultats positifs avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me indiquant ainsi la pr sence de HPV 16 et ou HPV 18 45 235 ont montr des r sultats n gatifs indiquant la pr sence d un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque d tect s
12. s avec chacun des trois lots de r actifs pour un total de 90 r plicats Le test a eu lieu pendant 6 jours avec 3 s ries par jour et 5 r plicats d un g notype donn test s dans chaque s rie Le seuil de d tection 95 tableau 18 a t calcul par une analyse de r gression Probit des r sultats de positivit pour chaque panel de dilution Tableau 18 Seuil de d tection du seuil clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Cible Seuil de d tection CI 95 HPV 16 57 3 46 5 74 6 HPV 18 84 8 66 1 115 6 HPV 45 60 0 46 6 82 3 SiHa 1 2 0 9 1 7 HeLa 0 4 0 3 0 5 MS751 2 6 1 9 4 2 copies par r action pour les transcrits in vitro et cellules par r action pour les lign es cellulaires Pr cision du test La pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu e dans deux tudes avec le m me panel de 22 chantillons L tude 1 a t men e dans 3 sites de test externes afin de d terminer la reproductibilit du test L tude 2 a t men e en interne afin de d terminer la pr cision intra laboratoire Le panel comprenait 14 chantillons positifs au HPV 16 et ou 18 45 avec des concentrations gales ou sup rieures au seuil de d tection du test positivit attendue 2 95 5 chantillons positifs au HPV 16 et ou 18 45 avec des concentrations inf rieures au seuil de d tection du test positivit attendue gt 0 lt 25 et 3
13. sum de la concordance indiquant les r sultats pr vus respectivement pour le HPV 16 et le HPV 18 45 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 38 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Tableau 19a Etudes 1 et 2 de pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Description du panel et concordance en pourcentage avec les r sultats escompt s pour le HPV 16 eeu R sultat Concordance en pourcentage CI 95 Description du panel D z cellules r action escompte pour Etude 1 Etude 2 le HPV 16 3 sites de test 1 site de test Cellules SiHa 3 0 cellules Positif i H Cellules HeLa 0 6 cellule N gatif E a Cellules MS751 11 0 cellules N gatif Don ee do chantillon clinique 1 HPV 16 Positif vo er chantillon clinique 1 HPV 18 45 N gatif Brenig ace pe Cellules SiHa 1 6 cellule et Positif 100 108 108 98 8 160 162 cellules HeLa 3 3 cellules 96 6 100 95 6 99 7 Cellules SiHa 1 6 cellule et Positif 100 108 108 99 4 161 162 cellules MS751 42 5 cellules 96 6 100 96 6 99 9 Cellules SiHa 15 7 cellule et Positif 100 108 108 100 161 161 cellules HeLa 0 3 cellules 96 6 100 97 7 100 Cellules SiHa 15 7 cellule et Positif 100 108 108 100 162 162 cellules MS751 4 3 cellules 96 6 100 97 7 100 A 3 97 2 105 108 98 8 160 162 Cellules SiHa 1 6 cellules Positif 92 1
14. tude NLIM incluait des femmes de 30 ans ou plus avec des r sultats cytologiques NLIM Des femmes issues de 18 sites cliniques principalement des cliniques d obst trique gyn cologie refl tant une vaste distribution g ographique et une population diverse ont subi des analyses Au cours de l essai CLEAR les chantillons Pap de suivi r siduels ont t test s la fois avec le Aptima HPV assay et avec un test DNA HPV disponible dans le commerce Dans l essai clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay les chantillons provenant des chantillons Pap de suivi r siduels ont t test s avec Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Les femmes de l tude ASC US ont toutes t orient es vers une colposcopie quels qu aient t les r sultats de leur Aptima HPV assay ou du test DNA HPV disponible dans le commerce Un curetage endocervical CEC et des biopsies cervicales a l emporte pi ce 1 biopsie de chacun des 4 quadrants ont t r alis es En cas de l sion visible une biopsie a l emporte pi ce a t r alis e m thode dirig e 1 biopsie par l sion et les quadrants exempts de l sion visible ont t biopsi s la jonction pavimento cylindrique m thode al atoire Dans l tude NLIM les femmes dont les r sultats se sont r v l s positifs avec le Aptima HPV assay et ou le test DNA HPV disponible dans le commerce ainsi que les femmes s lectionn es au hasard et dont les r sultats ont t n gatif
15. une commande de calibrateurs suppl mentaires B Temp rature La temp rature ambiante est d finie comme se situant entre 15 C et 30 C C Poudre de gant Comme avec tout syst me de r actif l exc s de poudre sur certains gants peut entra ner la contamination des tubes ouverts Il est recommand d utiliser des gants sans poudre Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 13 AW 11504 901 Rev 003 FR Panther Syst me Aptima Panther Systeme R actifs et mat riels fournis Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay 100 tests 3 boites n de r f 303236 Les calibrateurs peuvent tre achet s s par ment Consultez le num ro de r f rence individuel de la boite ci dessous Boite r frig r e Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay conserver entre 2 C et 8 C d s r ception Symbole Composant Quantit A R actif d amplification du HPV 16 18 45 Acides nucl iques non infectieux d shydrat s dans une solution tamponn e contenant lt 5 de diluant 1 flacon E R actif enzymatique du HPV 16 18 45 Transcriptase inverse et RNA polym rase d shydrat es dans une solution tamponn e HEPES contenant lt 10 de diluant 1 flacon P R actif sonde du HPV 16 18 45 Sondes DNA Acide d soxyribonucl ique chimiluminescentes non infectieuses lt 500 ng flacon d shydrat es dans une solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent 1 flacon IC R actif de contr le inte
16. vitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs 6 Ne pas remplir nouveau les flacons de r actif Le Panther Syst me reconna t et rejette les flacons qui ont t remplis nouveau D Manipulation des chantillons 1 Laissez les chantillons calibrateurs chantillons et tout chantillon externe de contr le de qualit fourni par l utilisateur parvenir temp rature ambiante avant de les traiter 2 Ne m langez pas les chantillons au vortex 3 Inspectez les tubes d chantillon avant de les charger dans le portoir Si un tube d chantillon pr sente des bulles ou un volume inf rieur celui g n ralement observ centrifugez le tube pendant 5 minutes 420 FCR pour vous assurer qu il n y a pas de liquide dans le bouchon Remarque Le non respect de l tape 3 peut entra ner un coulement de liquide depuis le bouchon du tube d chantillon E Pr paration du syst me Configurez le syst me conform ment aux instructions du Panther System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Panther Syst me et la section Remarques concernant la proc dure ci dessous V rifiez que des portoirs de r actifs et des adaptateurs TCR de taille appropri e sont utilis s Remarques concernant la proc dure A Calibrateurs 1 Pour travailler correctement avec le logiciel du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me deux r plicats du calibrateur n gatif et de chaque calibra
17. 1 3 pos HPV 18 45 BOs TEM TOseh tte 15 2 98 2 1 8 84 6 gt 14 3 33 231 4 3 10 231 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 10 9 17 9 2 4 6 8 gt 19 3 67 348 8 3 29 348 Pos ou n g Pos HPV HR 17 1 21 3 6 9 9 4 pa 2 2 12 545 0 7 4 545 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 1 2 3 5 0 2 1 6 Pr valence Se BA 79 893 33 893 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 27 AW 11504 901 Rev 003 FR Performances du test avec le Tigris DTS System Aptima Tableau 4 Population ASC US 2 21 ans risques absolus de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par groupe d age 21 29 ans 30 a 39 ans 2 40 ans R sultat du 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du test PA Aptima HPV AHPV GT Interpr tation Risque absolu Risque absolu Assay CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 26 8 19 71 15 5 11 71 pos HPV 18 45 HPV 18 45 18 3 35 7 9 3 21 8 Pos HPV 16 Pos HPV 16 28 0 14 50 18 0 9 50 n g HPV 18 45 uniquement 17 5 39 6 9 9 26 9
18. 12 9 4 31 n g HPV 18 45 uniquement 4 0 26 0 4 3 23 8 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 10 0 3 30 6 7 2 30 pos HPV 18 45 uniquement 2 4 23 0 0 8 17 7 de N g HPV 16 Positif pos HPV 18 45 Pos HPV 16 et 18 45 S O 0 0 S O 0 0 3 4 8 237 1 7 4 237 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 1 7 5 3 0 6 3 2 5 0 15 298 3 4 10 298 Pos ou n g Pos HPV HR 3 6 6 2 2 3 3 9 er P 1 0 5 505 0 2 1 505 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 4 1 9 0 0 0 9 Pr valence 2 9 TE 20 803 11 803 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans objet Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 32 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Tableau 10 Population NLIM 2 30 ans risques absolus de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par groupe d age estimations non corrig es 30 a 39 ans 2 40 ans 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du R sultat du test Interpr tation Aptima HPV Assay AHPV GT p Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et
19. 16 et positif pour le HPV 18 45 positif pour le HPV 16 et n gatif pour le HPV 18 45 positif pour le HPV 16 et le HPV 18 45 ou non valide suivant les valeurs RLU du IC et les ratios S CO tel que d crit dans le tableau ci dessous Un r sultat de test peut aussi ne pas tre valide pour d autres param tres forme anormale de la courbe qui se situent en dehors des seuils normalement pr vus Les r sultats non valides d un test doivent tre r p t s Les chantillons recueillis dans le kit CSCT peuvent tre dilu s afin de contrecarrer l influence de substances potentiellement inhibitrices Diluez 1 volume de l chantillon non valide dans 8 volumes de milieu pour transport d chantillon il s agit de la solution dans les tubes du kit CSCT c est dire 560 ul d chantillon dans un nouveau tube du kit CSCT contenant 4 5 ml de milieu pour transport d chantillon Retournez doucement l chantillon dilu pour le m langer vitez de former de la mousse Testez l chantillon dilu selon la proc dure de test standard Remarque Ne diluez pas un chantillon dilu non valide Si un chantillon dilu donne un r sultat non valide il convient alors d obtenir un nouvel chantillon aupr s de la patiente R sultats du Aptima HPV 16 18 45 Crit res Genotype Assay RLU du IC du HPV 16 2 seuil IC et S CO du HPV 16 lt 1 00 et S CO du HPV 18 45 lt 1 00 S CO du HPV 16 lt 1 00 et S CO du HPV 18 45 2 1 00 e
20. 162 HPV pr par avec PreservCyt g 96 5 100 97 7 100 CI intervalle de confiance du score Remarque La concordance en pourcentage a pu tre affect e par des variations lors de l ajout de substances la dilution et ou l aliquotage Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 59 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Tableau 40b Etudes 1 et 2 de pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay description du panel et concordance en pourcentage avec les r sultats escompt s pour le HPV 18 45 Concordance en pourcentage CI 95 Description du panel R sultat f copies ou cellules r action escompt pour le 3 a t a paS 9 sites de tes site de tes HPV 18 45 FINOT 100 108 108 100 162 162 HPV 16 IVT 240 copies N gatif 96 6 100 97 7 100 ve 100 107 107 100 162 162 HPV 18 IVT 260 copies Positif 96 5 100 97 7 100 i 100 108 108 100 162 162 HPV 45 IVT 350 copies Positif 96 6 100 97 7 100 P aR PATE 100 108 108 100 162 162 Echantillon clinique 1 HPV 16 N gatif 96 6 100 97 7 100 z TA bi 100 108 108 100 161 161 chantillon clinique 1 HPV 18 45 Positif 966 100 On 7 100 Cellules SiHa 4 cellule et Positif 100 108 108 100 162 162 cellules HeLa 0 7 cellules 96 6 100 97 7 100 Cellules SiHa 0 4 cellule et
21. 219 Pos oun g Fos HPV HR 17 9 23 0 7 5 10 2 ait 4 2 7 166 0 6 1 166 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR don Don Pr valence 13 5 52 385 5 5 21 385 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 30 0 9 30 16 7 5 30 pos HPV 18 45 HPV 18 45 16 5 43 9 6 9 26 2 Pos HPV 16 Pos HPV 16 50 0 7 14 21 4 3 14 n g HPV 18 45 uniquement 24 2 74 2 5 1 41 6 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 13 3 2 15 13 3 2 15 mA pos HPV 18 45 uniquement 1 3 35 2 1 3 32 1 Positif R Pos HPV 16 0 0 1 0 0 1 Pos HPV 16 et 18 45 passons pos HPV 18 45 S j 0 0 93 5 0 0 93 3 12 1 7 58 3 4 2 58 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 5 7 19 5 0 5 8 5 18 2 16 88 8 0 7 88 POs QUINS os Hey HR 13 4 22 3 4 6 10 0 B 1 8 3 163 0 6 1 163 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR das na Pr valence 7 6 19 251 3 2 8 251 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 33 3 5 15 20 0 3 15 pos HPV 18 45 HPV 18 45 12 4 55 0 4 1 36 0 Pos HPV 16 Pos HPV 16 80 0 4 5 40 0 2 5 n g HPV 18 45 uniquement 36 8 99 0 6 3 78 2 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 10 0 1 10 10 0 1 10 pi pos HPV 18 45 uniquement 0 4 36 6 0 4 33 1 Positif Pos HPV 16 Pos HPV 16 et 18 45 0 0 0 0 2 40 ans pos HPV 18 45 7 0 0 0 0 l 3 2 1 31 0 0 31 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 0 1 13 2 0 0 7 8 13 0 6 46 6 5 3 46 Pos ou n g Pos HPV HR 6 1 19 7
22. 5 0 5 0 3 7 23 310 19 310 0 310 82 310 18 3671 17 3671 0 3671 136 3671 3 7 0 5 0 0 3 25 2 0 5 0 3 0 4 1 21 301 15 301 1 301 76 301 16 3509 12 3509 0 3509 144 3509 S O sans objet HR haut risque Pos positif Types de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 et 68 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 24 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Performances du test avec le Tigris DTS System Conception de l tude clinique portant sur le Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu l aide d chantillons Pap de suivi recueillis sur des femmes ayant donn leur consentement pendant l tude clinique am ricaine multicentrique prospective nomm e essai CLEAR Lessai CLEAR a t men pour d terminer la performance clinique du Aptima HPV assay dans la d tection des n oplasies intra pith liales cervicales de grade 2 ou de maladies cervicales plus graves 2 CIN2 Les femmes ont t inclues soit dans l tude ASC US soit dans l tude NLIM d apr s leurs r sultats cytologiques de suivi en milieu liquide ThinPrep issus du d pistage de routine du cancer du col de l ut rus La population de l tude ASC US comprenait des femmes de 21 ans et plus avec des r sultats cytologiques ASC US et la population de l
23. 7364 572 579 Monsonego J F X Bosch P Coursaget J T Cox E Franco Frazer R Sankaranarayanan J Schiller A Singer T C Wright Jr W Kinney C J Meijer J Linder E McGoogan and C Meijer 2004 Cervical cancer control priorities and new directions Int J Cancer 108 3 329 33 Erratum in Int J Cancer 108 6 945 Cuschieri K S M J Whitley H A Cubie 2004 Human papillomavirus type specific DNA and RNA persistence implications for cervical disease progression and monitoring J Med Virol 73 1 65 70 De Sanjose S et al 2010 Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer a retrospective cross sectional worldwide study The Lancet DOI 10 1016 S1470 2045 10 70230 8 Burger R A B J Monk T Kurosaki H Anton Culver S Vasilv M L Berman and S P Wilczynski 1996 Human Papillomavirus Type 18 Association with poor prognosis in early stage cervical cancer J Nat Cancer institute 88 19 1361 1368 Safaeian M M Schiffman J Gage D Solomon C Wheeler and P Castle 2009 Detection of Precancerous Cervical Lesions Is Differential by Human Papillomavirus Type Cancer Res 69 8 3262 3266 Khan M J P E Castle A T Lorincz S Wacholder M Sherman D R Scott B B Rush A G Glass and M Schiffman 2005 The elevated 10 year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus HPV type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinica
24. HPV 18 45 11 1 1 9 11 1 1 9 P pos HPV 18 45 uniquement 0 5 39 7 0 5 37 1 Positif Pos HPV 46 os pos HPV 18 45 Pos HPV 16 et 18 45 0 0 0 0 3 4 1 29 0 0 29 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 0 1 14 0 0 0 8 2 E 13 6 6 44 6 8 3 44 Pos ou n g Pos HPV HR 6 5 20 6 1 8 11 4 a 1 9 4 213 0 9 2 213 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 6 3 4 0 1 2 0 Pr valence 3 9 10 257 1 9 5 257 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 28 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Le risque relatif de maladie selon les r sultats positifs et n gatifs du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont pr sent s dans le tableau 5 Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 13 2 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN2 et 22 1 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes ne pr sentant pas de types de HPV a haut risque Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 2 0 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN2 et 3 8 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes pr sentant
25. N g HPV 16 Pos HPV 18 45 15 8 3 19 5 3 1 19 Bositit pos HPV 18 45 uniquement 3 7 36 3 0 2 22 5 ositi Pos HPV 16 100 2 2 50 0 1 2 pos HPV 18 45 POS HPV 16 et 18 45 27 0 100 2 9 97 1 17 0 25 147 5 4 8 147 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 12 6 21 5 2 8 8 5 A 20 2 44 218 8 7 19 218 Pos ou n g Pos HPV HR 17 6 22 5 7 1 9 8 T 3 6 6 165 0 6 1 165 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 1 5 6 9 0 0 2 7 Pr valence 13 1 50 383 5 2 20 383 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 32 3 10 31 16 1 5 31 pos HPV 18 45 HPV 18 45 19 0 45 9 7 0 25 4 Pos HPV 16 Pos HPV 16 50 0 7 14 21 4 3 14 n g HPV 18 45 uniquement 24 2 74 2 5 1 41 6 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 18 8 3 16 12 5 2 16 sis ae pos HPV 18 45 uniquement 3 0 40 6 1 3 30 8 ositi Pos HPV 16 0 0 1 0 0 1 pos HPV 18 45 POS HPV 16 et 18 45 0 0 93 5 0 0 93 3 12 7 7 55 3 6 2 55 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 6 2 20 5 0 6 9 1 19 8 17 86 8 1 7 86 Pos ou n g Pos HPV HR 15 1 23 9 4 7 10 3 Suns i k z 1 2 2 167 0 6 1 167 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 2 3 5 0 0 2 3 Pr valence 7 5 19 253 3 2 8 253 Pos HPV 16 etiou Pos HPV 16 et ou 33 3 5 15 20 0 3 15 pos HPV 18 45 HPV 18 45 12 4 55 0 4 1 36 0 Pos HPV 16 Pos HPV 16 66 7 4 6 33 3 2 6 n g HPV 18 45 uniquement 27 1 93 5 6 2 69 2 N g HPV 16 Pos
26. S O sans objet Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux valides lors du test initial ou apr s r solution des r sultats initiaux non valides par la proc dure 616 femmes avec des r sultats du Aptima HPV assay ne disposaient pas de r sultats du test DNA HPV en raison principalement d un volume insuffisant de l chantillon cytologique l es femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 51 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Les risques absolus corrig s de maladie l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay sont indiqu s dans le tableau 30a Le risque de l sions 2 CIN2 chez les femmes pr sentant des types de HPV 16 18 et ou 45 tait de 10 8 par rapport a 3 8 chez les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV a haut risque et de 1 0 chez les femmes ne pr sentant pas de types de HPV haut risque Les risques absolus non corrig s de maladie sont pr sent s de mani re globale dans le tableau 30b et par groupe d age dans le tableau 31 Tableau 30a Population NLIM 2 30 ans risque absolu de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima H
27. SurePath ont t recueillis aupr s de femmes canadiennes lors d une consultation de suivi en raison d un ou plusieurs frottis anormaux d une infection HPV ou d autres raisons Un aliquote 0 5 ml de chaque chantillon a t transf r dans un tube de transfert d chantillons Aptima puis a t trait par de la solution de transfert Aptima Un seul r plicat de chaque chantillon a t test avec le Aptima HPV assay n 481 Les chantillons positifs ont ensuite t test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et le Aptima HPV assay Les r sultats sont indiqu s dans le tableau 36 Des r sultats similaires sont indiqu s pour le test PCR HPV disponible dans le commerce qui distingue le HPV 16 et le HPV 18 mais pas le HPV 45 des autres g notypes a haut risque Le risque relatif de maladie avec des r sultats de g notype positifs et n gatifs sont indiqu s dans le tableau 37 pour le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et le test PCR HPV Tableau 36 Risque absolu de l sions 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et d un test PCR HPV disponible dans le commerce Risque absolu de Risque absolu de y eee l sions 2 CIN3 avec l sions 2 CIN3 avec R sultat HPV HR R sultat g notype Interpr tation Aptima PCR HPV IC 95 IC a 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 12 5 14 4 pos HPV 18 45 HPV 18 45 7 6 17 3 10 4 18 1 Pos HPV 16 et n
28. cumul de d velopper une maladie cervicale est 10 fois plus lev que le risque li d autres types de HPV haut risque 4 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 2 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Informations g n rales Principes de la proc dure Le test Aptina HPV 16 18 45 Genotype assay implique trois tapes principales qui se d roulent dans un tube unique capture de cible amplification de la cible m di e par la transcription Transcription Mediated Amplification TMA et d tection des produits d amplification amplicons par test de protection de I hybridation Hybridization Protection Assay HPA Le test contient un contr le interne Internal Control IC permettant de v rifier la capture de l acide nucl ique l amplification et la d tection et de rep rer d ventuelles erreurs de l op rateur ou de l appareil Les chantillons sont recueillis ou transf r s dans un tube contenant un milieu pour transport d chantillon Specimen Transport Media STM qui lyse les cellules lib re le mRNA Messager RNA et l emp che de se d grader pendant le stockage Lorsque le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay est effectu le mRNA Messager RNA cible est isol de l chantillon au moyen d oligom res de capture qui sont li s des microparticules magn tiques Les oligom res de capture contiennent les s quences compl mentaires des r gions pr cises des mol cules cibles du MRNA Messager RNA d
29. de d boucher des chantillons qui ont d j t test s et rebouch s les tubes doivent tre centrifug s pendant 5 minutes 420 FCR force centrifuge relative pour faire descendre la totalit du liquide au fond du tube Remarque Le transport des chantillons doit s effectuer conform ment aux r glementations locales nationales et internationales applicables en mati re de transport Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 7 AW 11504 901 Rev 003 FR Tigris DTS System Aptima Tigris DTS System R actifs et mat riels fournis Remarque Pour obtenir des informations sur les mentions de danger et de mise en garde qui pourraient tre associ es ces r actifs consultez la Safety Data Sheet Library Biblioth que des fiches techniques de s curit l adresse www hologic com sds Kit de Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay 100 tests 3 bo tes n de r f 303234 Les calibrateurs peuvent tre achet s s par ment Voir les r f rences individuelles des bo tes ci dessous Bo te r frig r e Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay conserver entre 2 C et 8 C d s r ception Symbole Composant Quantit A R actif d amplification du HPV 16 18 45 Acides nucl iques non infectieux d shydrat s dans une solution tamponn e contenant lt 5 de diluant 1 flacon R actif enzymatique du HPV 16 18 45 Transcriptase inverse et polym rase du RNA d shydrat es dans une solution tamponn
30. de sondes dont les cin tiques d mission de lumi re sont relativement plus lentes signal brillant Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 3 AW 11504 901 Rev 003 FR Informations g n rales Aptima Avertissements et pr cautions A Pour diagnostic in vitro B Pour d autres avertissements et pr cautions sp cifiques concernant l appareil consultez le Tigris DTS System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Tigris DTS System ou le Panther System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Panther Syst me Recommandations concernant les laboratoires C N utilisez que le mat riel de laboratoire jetable fourni ou recommand D Prenez les pr cautions de laboratoire habituelles Il est interdit de manger de boire ou de fumer dans les zones de travail signal es Portez des gants jetables sans poudre des lunettes de protection et des blouses de laboratoire pour manipuler les chantillons et les r actifs du kit Lavez vous bien les mains apr s avoir manipul les chantillons et les r actifs du kit E Avertissement Substances irritantes et corrosives vitez tout contact d Auto Detect 1 et Auto Detect 2 avec la peau les yeux et les muqueuses En cas de contact de ces liquides avec la peau ou les yeux lavez la zone affect e l eau En cas de d versement de ces liquides diluer le produit r pandu l eau avant de l essuyer F Les surfaces de travail pipettes et autre mat riel doivent
31. du HPV en s appuyant sur la d tection du DNA Acide d soxyribonucl ique du HPV cependant peu d tudes rapportent la pr valence en s appuyant sur la d tection du mRNA Messager RNA oncog ne du HPV Des femmes provenant de divers sites cliniques n 18 repr sentant une vaste distribution g ographique et une population vari e 10 tats au sein des tats Unis ont t inclues dans une tude clinique prospective nomm e essai CLEAR afin d valuer le Aptima HPV assay qui d tecte 14 types de HPV haut risque Les chantillons des femmes inclues dans l essai CLEAR dont les r sultats taient positifs apr s avoir t test s avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me ont t valu s dans 3 sites de test avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me dans une tude clinique s par e La pr valence du HPV 16 18 45 ainsi que des 11 types restants du HPV haut risque observ s dans l tude clinique qui s appuie sur les r sultats des tests men s avec le Aptima HPV assay et le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me a t class e de mani re globale par groupe d ge et par site de test Un r sultat n gatif avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me signale qu aucun des 14 types haut risque du HPV n est pr sent dans l chantillon qui est donc d sign comme n gatif avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me aux fins de l
32. g Pos HPV 16 16 4 16 8 HPV 18 45 uniquement 9 2 23 9 11 6 21 9 N g HPV 16 et ou Pos HPV 18 45 3 3 7 1 pos HPV 18 45 uniquement 0 1 13 2 1 0 18 8 Positif Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et 33 3 14 3 pos HPV 18 45 HPV 18 45 1 8 83 7 0 7 49 9 N g HPV 16 et ou 2 0 2 1 n g HPV 18 45 POS autres HPV HR 1 0 3 1 1 1 3 3 A 10 2 8 5 Pos ou n g Pos HPV HR 8 4 11 7 7 0 9 5 Poy N g HPV 16 et ou 4 1 0 1 1 N gatif n g HPV 18 45 Neg HPVHR 0 2 2 4 0 3 2 8 Pr valence 4 0 5 0 HR haut risque pos positif n g n gatif Le test PCR HPV fait uniquement la distinction de HPV 16 et HPV 18 par rapport aux 12 autres g notypes haut risque y compris HPV 45 Les femmes dont les r sultats taient n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 37 Risque relatif de l sions 2 CIN3 selon les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et d un test PCR HPV disponible dans le commerce R sultats du Aptima Assay R sultats du test PCR HPV Risque relatif de l sions Risque relatif de l sions Interpr tation des tests 2 CIN3 Interpr tation des tests 2 CIN3 IC a 95 IC a 95 Positif au HPV 16 et ou 18 45 par 13 1 Positif au HPV 16 et ou 18 45 par 12 6 rapport a n gatif au HPV HR 3 7 45 9 rapport a n gatif au HPV HR 3 8 41 9 Po
33. les r actifs seront pr par s Nettoyez les plans de travail et les pipeteurs avec une solution d hypochlorite de sodium dos e de 2 5 3 5 0 35 M a 0 5 M Laissez la solution d hypochlorite de sodium au contact des plans de travail et des pipeteurs pendant au moins 1 minute avant de rincer l eau Ne laissez pas s cher la solution d hypochlorite de sodium Couvrez la surface de la paillasse sur laquelle les r actifs seront pr par s avec des protections absorbantes propres a base en plastique pour paillasse de laboratoire B Pr paration des r actifs d un nouveau kit Remarque La reconstitution des r actifs doit tre effectu e avant d entreprendre toute t che sur le Tigris DTS System 1 Afin de reconstituer le r actif d amplification le r actif enzymatique et le r actif sonde combinez les flacons de r actif lyophilis la solution de reconstitution Si les solutions de reconstitution sont r frig r es laissez leur temp rature s quilibrer temp rature ambiante avant de les utiliser a Faites correspondre chaque solution de reconstitution avec son r actif lyophilis b V rifiez les num ros de lot sur la fiche de code barres du lot de r f rence pour vous assurer que les r actifs sont associ s correctement c Ouvrez le flacon de r actif lyophilis et ins rez fermement l extr mit encoche du collet de reconstitution dans l ouverture du flacon figure 1 tape 1 d Ouvr
34. par le bouchon du tube d chantillon E Pr paration du syst me Configurez le syst me et la liste de travail selon les instructions du Tigris DTS System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Tigris DTS System et la section Remarques concernant la proc dure ci dessous Remarques concernant la proc dure A Calibrateurs 1 Chaque liste de travail doit contenir 2 r plicats du calibrateur n gatif et de chaque calibrateur positif Pour utiliser correctement le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Software le calibrateur n gatif doit se trouver dans la premi re position du tube du premier portoir de la liste de travail le calibrateur positif 1 dans la deuxi me position du tube du premier portoir de la liste de travail et le calibrateur positif 2 dans la troisi me position du tube du premier portoir de la liste de travail Toute tentative de pipeter plus de deux r plicats d un tube de calibrateur peut entra ner des erreurs d insuffisance du volume Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 12 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Tigris DTS System 3 Les calibrateurs doivent tre utilis s avec le lot de r f rence des r actifs correspondant L op rateur doit s assurer que le lot appropri de calibrateurs est utilis avec le lot de r f rence de r actifs du kit qui lui correspond tel qu indiqu sur la fiche des codes a barres du lot de r f rence Le num ro de lot appropri doit tre r f renc lors d
35. s lection du HPV 16 18 45 Solution de lavage R actif huileux Tampon pour solution de d sactivation R actif Auto Detect 1 R actif Auto Detect 2 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 5 AW 11504 901 Rev 003 FR Informations g n rales Aptima Aptima System Fluid Preservative Conservateur de liquide syst me Aptima Tigris DTS System uniquement C Apr s reconstitution les r actifs suivants restent stables pendant 30 jours lorsqu ils sont conserv s entre 2 C et 8 C R actif d amplification du HPV 16 18 45 R actif enzymatique du HPV 16 18 45 R actif sonde du HPV 16 18 45 D Le r actif de capture de cible working Target Capture Reagent WTCR est stable pendant 30 jours lorsqu il est conserv entre 15 C et 30 C Ne pas r frig rer E Jetez tous les r actifs reconstitu s et le WTCR non utilis s apr s 30 jours ou apr s la date de p remption du lot de r f rence la premi re ch ance pr valant F Les r actifs Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont stables et peuvent tre conserv s pendant 48 heures cumul es quand ils sont int gr s dans le Tigris DTS System G Les r actifs du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont stables pendant 72 heures cumul es quand ils sont conserv s bord du Panther System H Le r actif sonde et le r actif sonde reconstitu sont photosensibles Conservez les r actifs labri de la lumi re I Ne congelez pas les r actifs Collecte et conserva
36. toute contamination crois e lors des tapes de manipulation des chantillons Veillez viter tout contact entre les diff rents r cipients d chantillons et ne pas passer au dessus d un r cipient ouvert en jetant le mat riel usag Changez de gants en cas de contact avec l chantillon K Sous certaines conditions le liquide peut s couler du bouchon des tubes s il vient tre perfor Consultez la Proc dure de test pour le Tigris DTS System ou la Proc dure de test pour le Panther Syst me pour plus d informations L Les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep et les chantillons recueillis dans des kits de pr l vements et de transport pour chantillons cervicaux Cervical Specimen Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 4 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Informations g n rales Collection and Transport CSCT Aptima doivent tre rejet s si un dispositif de pr l vement est rest dans le tube d chantillon M Les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath doivent tre rejet s si le flacon ne contient de dispositif de pr l vement Recommandations concernant les tests N Conservez les r actifs aux temp ratures indiqu es Les r sultats du test peuvent tre affect s par l utilisation de r actifs mal conserv s O vitez de contaminer les r actifs par des microbes ou des ribonucl ases N utilisez pas ce kit apr s la date de p remption Q Veuillez ne pas
37. un cancer Les substances suivantes sont susceptibles d interf rer avec les performances du test si elles sont pr sentes des concentrations sup rieures celles sp cifi es lubrifiants vaginaux contenant du Polyquaternium 15 1 p v cr me antifongique contenant du tioconazole 0 03 p v mucus 0 3 p v hormones intravaginales contenant de la progest rone 1 p v Trichomonas vaginalis 3 x 10 cellules ml Des concentrations lev es de HPV 45 peuvent diminuer la capacit du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a d tecter la pr sence du HPV 16 a des faibles niveaux Les effets d autres variables potentielles telles que les d charges vaginales l utilisation de tampons etc et les variables de collecte d chantillons n ont pas t valu s L emploi de ce dispositif peut tre limit au personnel form l utilisation du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay La contamination crois e des chantillons peut entra ner des faux positifs Le taux de contamination de transfert du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Tigris DTS System et le Panther Syst me a t estim dans des tudes non cliniques 0 35 et 0 19 respectivement Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 22 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Limites Q L interpr tation des r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay doit tre effectu e en relation avec les autres donn es cliniques et de laboratoire d
38. un ou plusieurs des 11 autres types de HPV a haut risque Tableau 5 Population ASC US 2 21 ans risques relatifs de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay La 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sultats du Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI 95 CI 95 Positif au HPV 16 et ou 18 45 13 2 22 1 par rapport n gatif au HPV HR 7 0 24 7 7 7 63 8 Positif au HPV 16 et ou 18 45 2 0 3 8 par rapport positif aux autres HPV HR 1 3 3 1 1 8 7 8 Positif aux autres HPV HR 6 5 5 9 par rapport n gatif au HPV HR 3 4 12 3 1 9 18 6 Positif au HPV HR 8 7 11 4 par rapport n gatif au HPV HR 4 8 15 9 4 0 32 0 Pr valence 8 8 79 893 3 7 33 893 CI intervalle de confiance HR haut risque Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Les rapports de vraisemblance l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont indiqu s dans le tableau 6 Les types de HPV 16 18 et ou 45 ont 4 2 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN2 et 5 1 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN3 Tableau 6 Population ASC US 2 21 ans rapports de vraisemblance pour
39. une colposcopie ind pendamment des r sultats de leur test HPV Un curetage endocervical CEC et des biopsies cervicales l emporte pi ce 1 biopsie de chacun des 4 quadrants ont t effectu s Une biopsie a l emporte pi ce a t men e m thode dirig e 1 biopsie par l sion chaque fois qu une l sion tait visible et les quadrants exempts de l sion visible ont t biopsi s la jonction pavimento cylindrique m thode al atoire Dans l tude NLIM les femmes dont les r sultats se sont r v l s positifs avec le Aptima HPV assay sur le Tigris DTS System et ou avec le test DNA HPV approuv par la FDA ainsi que les femmes s lectionn es al atoirement et dont les r sultats ont t n gatifs avec les deux tests ont t orient es vers une colposcopie pour l valuation initiale Un CEC a t r alis sur chacune des femmes ayant subi une colposcopie Des biopsies l emporte pi ce ont t men es uniquement sur les l sions visibles m thode dirig e 1 biopsie par l sion Dans l tude NLIM le suivi des femmes ne pr sentant pas de r sultats 2 CIN2 est en cours depuis 3 ans au moyen d examens cytologiques annuels Les femmes r v lant des r sultats cytologiques ASC US ou plus graves pendant la p riode de suivi sont orient es vers une colposcopie bas e sur la m me proc dure de biopsie que celle utilis e lors de l valuation initiale Le statut pathologique a t d termin partir d
40. valu e dans deux tudes avec le m me panel de 24 chantillons L tude 1 a t men e dans 3 sites de test externes afin de d terminer la reproductibilit du test L tude 2 a t men e en interne afin de d terminer la pr cision intra laboratoire Le panel comprenait 17 chantillons positifs au HPV 16 et ou 18 45 avec des concentrations gales ou sup rieures au seuil de d tection du test positivit attendue 2 95 3 chantillons positifs au HPV 16 et ou 18 45 avec des concentrations inf rieures au seuil de d tection du test positivit attendue gt 0 lt 25 et 4 chantillons n gatifs au HPV Les chantillons du panel positifs au HPV 16 et ou 18 45 ont t pr par s en ajoutant des transcrits in vitro ou des cellules de culture infect es par le HPV SiHa HeLa et MS751 ATCC Manassas Virginia des groupes d chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep r siduels ou en diluant des chantillons cliniques de HPV 16 18 et ou 45 dans des groupes d chantillons cytologiques r siduels en milieu liquide ThinPrep Les chantillons du panel n gatifs au HPV ont t pr par s avec des groupes d chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep ou avec une solution PreservCyt Dans l tude 1 2 op rateurs pr sents sur chacun des 3 sites de test 1 appareil par site ont r alis 2 listes de travail du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay par jour pendant 3 jours Les tests ont t r a
41. 0 C pendant 90 minutes maximum Laissez le wTCR parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit n a pas disparu Si le r actif de s lection contient un pr cipit chauffez le 60 C 1 C pendant 45 minutes maximum pour faciliter la dissolution du pr cipit M langez d licatement le flacon toutes les 5 10 minutes Laissez le r actif de s lection parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu M langez bien chaque r actif en le retournant doucement avant de le charger dans le syst me vitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs N ajoutez pas davantage de r actif les aux flacons de r actif Le Tigris DTS System d tecte et rejette les flacons dans lesquels plus de r actif a t ajout D Manipulation des chantillons 1 2 3 Laissez les chantillons calibrateurs et pr l vements parvenir temp rature ambiante avant de les traiter Ne m langez pas les chantillons au vortex V rifiez les tubes d chantillons avant de les charger dans les portoirs Si un tube d chantillon contient des bulles ou un volume inf rieur celui g n ralement observ centrifugez le pendant 5 minutes 420 FCR pour vous assurez qu il ne reste pas de liquide dans le bouchon Remarque Le non respect de l tape 3 peut entra ner un coulement de liquide
42. 1000 ul conductifs d tecteur de liquide Kit de transfert d chantillon Aptima Kit de collecte et de transport Aptima pour chantillon cervical Bouchons p n trables Aptima Bouchons non p n trables de remplacement Bouchons de rechange pour coffrets de 100 tests Solutions de reconstitution pour r actif d amplification et r actif sonde Solution de reconstitution pour r actif enzymatique TCR et r actif de s lection Eau de javel solution d hypochlorite de sodium 5 ou 0 7 M minimum N de r f rence 105118 301191 104772 02 900907 900931 105523 302382 301048 302380 10612513 Tecan 301154C 302657 105668 103036A CL0041 CL0041 501604 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 9 AW 11504 901 Rev 003 FR Tigris DTS System Aptima Eau pour Tigris DTS System Consultez le Tigris DTS System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Tigris DTS System pour les sp cifications Gants jetables Kit de solution de transfert Aptima uniquement pour les chantillons SurePath 303658 Mat riel optionnel N de r f rence Optimiseur d eau de javel pour nettoyage 302101 Proc dure de test pour le Tigris DTS System Remarque Consultez le Tigris DTS System Operator s Manual Manuel de l op rateur du Tigris DTS System pour de plus amples informations sur la proc dure avec ce syst me A Pr paration de la zone de travail Nettoyez les plans de travail sur lesquels
43. 14 R actifs et mat riels fournis 8 R actifs et mat riels fournis 14 Mat riel requis mais disponible s par ment 9 Mat riel requis mais disponible s par ment 15 Proc dure de test pour le Tigris DTS System 10 Proc dure de test pour le Panther Syst me 16 Remarques concernant la proc dure 2200 12 Remarques concernant la proc dure 18 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 1 AW 11504 901 Rev 003 FR Informations g n rales Aptima Informations g n rales Usage pr vu Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay est un test in vitro d amplification d acide nucl ique pour la d tection qualitative du RNA messager mRNA viral E6 E7 des types haut risque 16 18 et 45 du virus du papillome humain Human Papillomavirus HPV dans les chantillons de femmes dont les r sultats taient positifs avec le test Aptima HPV assay Le mRNA Messager RNA du HPV est d tect dans des chantillons cytologiques de frottis cervicaux en milieu liquide recueillis dans des flacons ThinPrep contenant de la solution PreservCyt avant ou apr s un traitement Pap ou dans des chantillons recueillis avec le kit de collecte et de transport Aptima pour chantillon cervical Les chantillons cervicaux recueillis dans du liquide conservateur SurePath peuvent tre test s avec le Aptima HPV 1
44. 45 Genotype assay aux fins de l analyse Trois femmes ont pr sent un ad nocarcinome in situ AIS Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 50 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Syst me Assay Sur les 491 femmes pr sentant des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay et le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay r alis s tous deux sur le Panther Systeme 232 ont pr sent un statut pathologique non verifi incluant les statuts ind termin s tableau 29 Sur les 10 348 femmes issues de l essai CLEAR original et dont les r sultats se sont av r s n gatifs avec le Aptima HPV assay 9799 ont pr sent un statut pathologique non v rifi La proportion de femmes pr sentant un statut pathologique non v rifi s est r v l e lev e dans ce groupe 96 2 puisque l tude a t con ue de mani re orienter vers une colposcopie uniquement les femmes s lectionn es al atoirement et pr sentant des r sultats n gatifs la fois avec le Aptima HPV assay test sur le Tigris DTS System et le test DNA Acide d soxyribonucl ique approuv par la FDA Pour corriger ce biais de v rification une m thode d imputation multiple a t utilis e pour estimer le nombre de femmes atteintes de l sions qui aurait t identifi si l ensemble des femmes avaient subi une colposcopie Les estimations de performance corrig es pour tenir compte du biais de v rification et les estimations de perform
45. 6 18 45 Genotype assay Le test est utilis avec le Tigris DTS System et le Panther Syst me R sum et explication du test Le cancer du col de l ut rus est l un des cancers les plus courants chez les femmes de tous les pays Le virus HPV est l agent tiologique responsable de plus de 99 de l ensemble des cancers du col de l ut rus Le HPV est un virus DNA Acide d soxyribonucl ique couramment transmis par voie sexuelle qui comporte plus de 100 g notypes Le g nome viral du HPV est un DNA Acide d soxyribonucl ique circulaire double brin long d environ 7900 paires de base Ce g nome pr sente huit cadres de lecture ouverts open reading frames qui se chevauchent On d nombre six g nes pr coces E deux g nes tardifs L et une longue r gion de contr le non transcrite Les g nes L1 et L2 codent les prot ines principales et secondaires de la capside Les g nes pr coces r gulent la r plication du virus HPV Les g nes E6 et E7 des g notypes a haut risque sont des oncog nes connus Les prot ines exprim es par le MRNA Messager RNA polycistronique E6 E7 alt rent les fonctions de la prot ine du r tinoblastome et de la p53 cellulaire ce qui entra ne une perturbation des points de contr le du cycle cellulaire et une instabilit du g nome cellulaire Quatorze g notypes du HPV sont consid r s comme pathog nes ou haut risque en termes d volution d une maladie cervicale Plusieurs t
46. 7 femmes avaient des l sions 2 CIN2 et 29 des l sions 2 CIN3 Sur les 348 femmes valuables avec des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay 117 d entre elles avaient des r sultats positifs avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay qui indiquaient la pr sence de HPV 16 et ou HPV 18 45 231 avaient des r sultats n gatifs indiquant la pr sence d un ou plusieurs des 11 autres types de HPV a haut risque d tect s par le Aptima HPV assay par exemple les types de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 et 68 Par ailleurs 545 femmes valuable suppl mentaires g es de 21 ans ou plus avec des r sultats cytologiques ASC US ont pr sent des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay pendant l essai CLEAR Un r sultat n gatif avec le Aptima HPV assay signale qu aucun des 14 types haut risque du HPV n est pr sent ces femmes ont donc t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse La pr valence des r sultats CIN2 et 2 CIN3 chez les femmes valuables avec des r sultats cytologiques ASC US tait respectivement de 8 8 et de 3 7 Les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay par rapport aux r sultats du Aptima HPV assay et du diagnostic du panel d examen histologique consensuel sont pr sent s dans le tableau 2 Tableau 2 Population ASC US 2 21 ans r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par rapport au diagnostic du
47. 99 1 95 6 99 7 A 100 108 108 100 161 161 Cellules HeLa 0 3 cellule N gatif 96 6 100 97 7 100 pA 100 108 108 100 162 162 Cellules MS751 4 3 cellules N gatif 96 6 100 97 7 100 z fes jus 97 2 104 107 94 4 152 161 chantillon clinique 2 HPV 16 Positif 92 1 99 0 88 7 97 0 z are 100 108 108 100 162 162 Echantillon clinique 2 HPV 18 45 N gatif 96 6 100 97 7 100 TRER 85 2 92 108 84 6 137 162 Cellules SiHa 0 1 cellules N gatif 77 3 90 7 78 2 89 3 Aan 100 108 108 100 162 162 Cellules HeLa 0 02 cellule N gatif 96 6 100 97 7 100 ARS 100 108 108 100 162 162 Cellules MS751 0 04 cellules N gatif 96 6 100 97 7 100 Men ere 95 4 103 108 92 6 150 162 Echantillon clinique 3 HPV 16 N gatif 89 6 98 0 87 5 95 7 ae AA AR 100 108 108 99 4 161 162 Echantillon clinique 3 HPV 18 45 N gatif 96 6 100 96 6 99 9 z a Hesse ue 100 108 108 100 162 162 chantillon clinique 1 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 97 7 100 Ne er es 100 108 108 100 162 162 Echantillon clinique 2 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 97 7 100 De hd Eux 100 108 108 100 162 162 Echantillon clinique 3 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 97 7 100 Cl intervalle de confiance du score Remarque La concordance en pourcentage a pu tre affect e par des variations lors de l ajout de substances la dilution et ou l aliquotage Aptima HP
48. Acide nucl ique non infectieux dans une solution tamponn e contenant une phase solide lt 0 5 mg ml 1 flacon Collets de reconstitution 3 Fiche des codes a barres de lot de r f rence 1 fiche Boite de calibrateurs Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay n de r f 303235 conserver entre 2 C et 8 C d s r ception Symbole Composant Quantit PCAL1 Calibrateur positif HPV 16 18 45 1 Transcrits in vitro non infectieux de HPV 18 750 copies par ml dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 5 tubes PCAL2 Calibrateur positif HPV 16 18 45 2 Transcrit in vitro de HPV 16 non infectieux a la concentration de 1000 copies par ml dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 5 tubes NCAL Calibrateur n gatif HPV 16 18 45 Solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 5 tubes Mat riel requis mais disponible s par ment Remarque Les r f rences du mat riel disponible chez Hologic sont indiqu es sauf indication contraire Tigris DTS System Kit pour s ries Tigris DTS System Unit s multi tube Multi tube Units MTU Sac pour embouts MTU usag s D flecteur de d chets pour MTU Couvre d chets pour MTU Kit de liquides pour tests Aptima Solution de lavage Aptima tampon pour solution de d sactivation Aptima et r actif huileux Aptima Kit Auto Detect Aptima Kit de conservateur de liquide syst me Aptima Embouts
49. Aptima HPV assay et le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et a t class e de mani re globale par groupe d ge et par site de test Les r sultats sont indiqu s dans le tableau 1 pour les populations avec des atypies des cellules malpighiennes de signification ind termin e Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance ASC US et les populations n gatives aux l sions intra pith liales ou malignes NLIM Tableau 1 Pr valence du MRNA Messager RNA du HPV haut risque dans les populations par groupe d ge site de test et combination de la totalit des facteurs Taux de positivit en x n Population ASC US Population NLIM 2 21 ans 2 30 ans Pos Pos Pos Pos Hos Pos Pos Pos HPV 16 et 11 autres HPV HPV 16 et 11 autres HPV 16 HPV 18 45 18 45 de HR HPV 16 HPV 18 45 18 45 HPV de HR Tous 7 8 5 2 0 3 25 5 0 4 0 4 0 3 9 71 912 47 912 3 912 233 912 47 10 846 47 10 846 0 10 846 421 10 846 Groupe d age en ann es x 13 2 4 9 0 5 38 3 Fee 51 386 19 386 2 386 148 386 SO Se a FT 30 39 5 4 7 0 0 4 21 8 0 7 0 6 0 5 3 14 257 18 257 1 257 56 257 30 4188 27 4188 0 4188 221 4188 gt 40 2 2 3 7 0 10 8 0 3 0 3 0 3 0 a 6 269 10 269 0 269 29 269 17 6658 20 6658 0 6658 200 6658 Site de test 4 9 0 4 3 0 7 24 9 0 4 0 5 0 3 8 27 301 13 301 2 301 75 301 13 3666 18 3666 0 3666 141 3666 2 7 4 6 1 0 26 5 0
50. C 16 2 625 000 et lt 4 000 000 RLU 2 625 000 et lt 4 000 000 RLU C Seuil IC Le seuil IC est d termin par le signal d analyte du IC 16 produit par les r plicats valides du calibrateur n gatif Seuil IC 0 5 x moyenne RLU du IC 16 des r plicats valides du calibrateur n gatif D Seuil de l analyte 16 Le seuil d analyte pour le HPV 16 est d termin par le signal RLU du IC 16 produit par les r plicats valides du calibrateur n gatif et les r plicats valides du calibrateur positif 2 Seuil de analyte 16 2 x moyenne RLU du IC 16 des r plicats valides du calibrateur n gatif euil de l analyte 16 0 1 x moyenne RLU du IC 16 des r plicats valides du calibrateur positif 2 E Seuil de l analyte 18 45 Le seuil d analyte pour le HPV 18 45 est d termin par le signal RLU du HPV 18 45 produit par les r plicats valides du calibrateur n gatif et les r plicats valides du calibrateur positif 1 1 x moyenne RLU du HPV 18 45 des r plicats valides du calibrateur n gatif Seuil de l analyte 18 45 oi i 0 18 x moyenne RLU du HPV 18 45 des r plicats valides du calibrateur positif 1 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 20 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Interpr tation des tests Interpr tation des tests Les r sultats des tests sont automatiquement d termin s par le logiciel de test Un r sultat de test peut tre n gatif pour le HPV 16 et le HPV 18 45 n gatif pour le HPV
51. Genotype assay et du Aptima HPV assay sont pr sent s dans le tableau 24 Le risque de l sions 2 CIN2 chez les femmes pr sentant des types de HPV 16 18 et ou 45 tait de 28 8 par rapport a 14 0 chez les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque et de 2 6 chez les femmes ne pr sentant pas de types de HPV a haut risque Le risque absolu est indiqu par groupe d age dans le tableau 25 Tableau 24 Population ASC US 2 21 ans risque absolu de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay R suitet au test 2 CIN2 2 CIN3 sultat du tes Fr HPV Aptima R sultat du test AHPV GT Interpr tation Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou pos Pos HPV 16 et ou 28 8 34 118 16 9 20 118 HPV 18 45 HPV 18 45 22 2 35 7 12 1 21 8 Pos HPV 16 Pos Pos HPV 16 37 1 26 70 21 4 15 70 n g HPV 18 45 uniquement 27 4 47 4 13 8 29 5 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 13 3 6 45 8 9 4 45 Positif pos HPV 18 45 uniquement 5 5 25 1 2 9 19 1 Pos HPV 16 66 7 2 3 33 3 1 3 pos HPV 18 45 ROS PNA Te RES 15 2 98 2 1 8 84 6 14 0 33 235 4 3 10 235 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 10 7 17 7 2 3 6 7 19 0 67 353 8 5 30 353 Pos ou n g Pos HPV HR 16 8 21 1 7 1 9 6 ae 5 2 6 14 539 0 7 4 539 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 1 5
52. HOLOGIC Aptima Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay Pour diagnostic in vitro R serv l exportation hors Etats Unis Informations g n rales 2 US AG PM te te a a a D Sy D de De 2 R sum et explication du test 2 Principes dela proc dure 4 4 44244siusuibnaside us vue museau 3 Avertissements et pr cautions 4 Conditions de conservation et de manipulation des r actifs 5 Collecte et conservation des chantillons 6 Interpr tation des tests 21 Limites 2 ee aimer a ana uma au Homes emma rardeutr aider 22 R sultats escompt s avec le Tigris DTS System pr valence du mRNA Messager RNA du HPV haut risque 24 Performances du test avec le Tigris DTS System 25 R sultats escompt s avec le Panther Systeme pr valence du mRNA Messager RNA du HPV haut risque 44 Performance du Panther Syst me Assay 45 Bibliographie sia traie ia agaa a E ia E demain 62 Tigris DTS System Panther Systeme Tigris DTS System 0 0 eeeseseeeessseeeseeenssseeesseeeeseeeseeseeees 8 Panther Syst me
53. HPV Assay test AHPV GT p Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 12 6 9 5 pos HPV 18 45 HPV 18 45 3 7 21 4 2 1 16 8 Pos HPV 16 Pos HPV 16 14 5 12 1 n g HPV 18 45 uniquement 2 1 26 9 0 7 23 4 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 10 7 6 9 pos HPV 18 45 uniquement 0 0 22 5 0 0 16 2 Positif Pos HPV 16 pos HPV 18 45 Pos HPV 16 et 18 45 S O S O N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 34 1 8 5 1 2 5 6 0 1 3 5 A 5 0 3 2 Pos ou n g Pos HPV HR 2 6 7 5 1 3 5 2 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 06 0 4 3 9 0 1 1 2 0 0 0 7 Pr valence 0 9 0 5 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans objet Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 9b Population NLIM 2 30 ans risques absolus de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du Aptima R sultat du are HPV Assay test AHPV GT Interpr tation Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou HPV 11 5 7 61 9 8 6 61 pos HPV 18 45 18 45 5 4 18 9 4 6 15 2 Pos HPV 16 Pos HPV 16 12 9 4 31
54. M 2 30 ans classification des femmes NLIM valuables par le Aptima HPV assay le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay les r sultats du test DNA HPV le statut pathologique 2 CIN2 et 2 CIN3 et le statut de v rification de la maladie Statut pathologique Statut pathologique Fu v rifi gt CIN2 v rifi 2 CIN3 P gidu non v rifi R sultat du R sultats Test Aptima HPV du test Total femmes Femmes F S Femmes Femmes Femmes avec A AHPV GT DNA HPV non lt non un statut ssay 5 atteintes atteintes g ses atteintes Das atteintes pathologique de l sions Se del sions ae 6 gt CIN2 de l sions 2 CIN3 de l sions inconnu E 2 CIN2 T 2 CIN3 inconnu Positif Positif 83 6 48 5 49 29 34 9 Positif N gatif 9 1 5 1 5 3 33 3 Positif Aucun 2 0 1 0 1 1 50 0 r sultat Positif N gatif Positif 271 7 171 4 174 93 34 3 N gatif N gatif 137 1 52 0 53 84 61 3 mee Aucun 7 N gatif r sultat 13 0 6 0 6 7 53 8 Total 515 15 283 10 288 217 42 1 07 Positif 306 3 178 1 180 125 40 8 kkk A H 0 N gatif S O N gatif 9420 1 322 0 323 9097 96 6 S O Aucun 605 1 0 0 1 604 99 8 r sultat Total 10 846 20 783 11 792 10 043 92 6 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay S O sans objet Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux valides lors du test initial ou apr s la r solution des r su
55. PV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du R sultat du Interpr tation test HPV Aptima test AHPV GT P Risque absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 9 7 8 5 pos HPV 18 45 HPV 18 45 4 6 20 2 3 8 19 2 Pos HPV 16 Pos HPV 16 10 4 10 3 n g HPV 18 45 uniquement 4 0 27 1 3 9 27 1 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 8 8 6 5 i 2 9 26 4 1 7 25 1 Positif pos HPV 18 45 uniquement Pos HPV 16 0 0 0 0 pos HPV 18 45 Pos HPV 16 et 18 45 N g HPV 16 18 45 P t HPV HR 32 1 8 g os autres 1 6 6 3 0 6 4 9 2 4 6 3 2 Pos ou n g Pos HPV HR 2 8 7 4 1 7 5 9 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR QE 0 2 egati ES g 0 2 2 5 0 0 4 8 Pr valence 1 1 0 8 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans objet Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 30b Population NLIM 2 30 ans risque absolu de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es R sultat du test HPV Z GINZ ZIRIN dn apie R sultat du test AHPV GT Interpr tation Risque
56. Positif 100 108 108 100 162 162 cellules HeLa 7 cellules 96 6 100 97 7 100 peace 100 108 108 99 4 161 162 Cellules SiHa 0 4 cellules N gatif 96 6 100 96 6 99 9 ne 100 108 108 100 162 162 Cellules HeLa 0 7 cellule Positif 966 100 On 7 100 Pe 99 1 107 108 88 7 141 159 Cellules MS751 0 2 cellules Positif 94 9 99 8 84 5 93 5 PATER 100 107 107 100 162 162 HPV 16 IVT 24 copies N gatif 96 5 100 97 7 100 me 99 1 107 108 100 162 162 HPV 18 IVT 26 copies Positif 94 9 99 8 97 7 100 s sa 99 1 107 108 98 1 159 162 HPV 45 IVT 35 copies Positif 94 9 99 8 94 7 99 4 P 3 ae 100 107 107 100 162 162 Echantillon clinique 2 HPV 16 N gatif 96 5 100 97 7 100 P se FRET 100 108 108 100 162 162 chantillon clinique 3 HPV 16 N gatif 96 6 100 97 7 100 z a SA 100 107 107 95 7 155 162 Echantillon clinique 2 HPV 18 45 Positif 96 5 100 91 7 98 0 z nae Pe 100 108 108 98 8 160 162 Echantillon clinique 3 HPV 18 45 Positif AE 358 007 reer 100 108 108 100 161 161 Cellules SiHa 0 001 cellules N gatif 96 6 100 97 7 100 Pie 97 2 105 108 98 1 159 162 Cellules HeLa 0 001 cellule N gatif 92 1 99 1 94 7 99 4 re 75 0 81 108 88 3 143 162 Cellules MS751 0 006 cellules N gatif 66 1 82 2 84 2 93 2 chantillon clinique 1 n gatif au HPV N gatif Fou 9 00 8 on 1007 chantillon clinique 2 n gatif au HPV N g
57. Positif au HPV 16 et ou 18 45 2 9 5 6 3 5 7 0 1 6 1 1 Positif aux autres HPV HR 1 2 2 1 0 6 1 8 nn 0 3 0 2 N gatif au HPV HR 0 2 0 4 0 1 0 4 Cl intervalle de confiance HR a haut risque Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 49 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Population NLIM 2 30 ans performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Au total l tude a inclus 512 femmes valuables de 30 ans ou plus pr sentant des r sultats cytologiques NLIM et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me pour lesquelles les chantillons cytologiques de suivi r pondaient aux crit res de test avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Parmi celles ci 21 femmes 11 femmes ayant subi une colposcopie et 10 n en ayant pas eu ne disposaient pas d un chantillon cytologique de suivi en volume suffisant pour tre test dans cette tude apr s analyse des valeurs manquantes elles n ont pas t inclues dans les calculs de performance Les 491 femmes valuables ont pr sent des r sultats valides avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Parmi celles ci 273 ont eu une colposcopi
58. S System en termes de d tection des n oplasies intra pith liales cervicales de grade 2 ou de maladies cervicales plus graves 2 CIN2 Les femmes ont t inclues soit dans l tude ASC US soit dans l tude NLIM d apr s leurs r sultats cytologiques de suivi en milieu liquide ThinPrep issus du d pistage de routine du cancer du col de l ut rus La population de l tude ASC US comprenait des femmes de 21 ans et plus pr sentant des r sultats cytologiques ASC US et la population de l tude NLIM incluait des femmes de 30 ans ou plus pr sentant des r sultats cytologiques NLIM Des femmes provenant de 18 sites cliniques principalement des cliniques d obst trique gyn cologie refl tant une vaste distribution g ographique et une population vari e ont subi des analyses Au cours de l essai CLEAR des chantillons cytologiques de suivi r siduels ont t test s la fois avec le Aptima HPV assay sur le Tigris DTS System et avec un test DNA HPV approuv par la FDA Les chantillons cytologiques de suivi r siduels de l essai CLEAR r pondant aux crit res de s lection ont t test s avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me Dans l essai clinique sur le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay les chantillons provenant des chantillons cytologiques de suivi r siduels ont t test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me Les femmes de l tude ASC US ont toutes t orient es vers
59. V 16 18 45 Genotype Assay 39 AW 11504 901 Rev 003 FR Performances du test avec le Tigris DTS System Aptima Tableau 19b tudes 1 et 2 de pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Description du panel et concordance en pourcentage avec les r sultats escompt s pour le HPV 18 45 Concordance en pourcentage CI 95 Description du panel R sultat i cellules r action escompt pour le 3 nae l t 1 Suge g t HPV 18 45 3 sites de test 1 site de test ER 100 108 108 98 8 160 162 Cellules SiHa 3 0 cellules N gatif 96 6 100 95 6 99 7 de 93 5 101 108 98 1 159 162 Cellules HeLa 0 6 cellule Positif 87 2 96 8 94 7 99 4 vs 92 6 100 108 92 6 150 162 Cellules MS751 11 0 cellules Positif 86 1 96 2 87 5 95 7 z ee AEN 100 107 107 100 162 162 Echantillon clinique 1 HPV 16 N gatif 96 5 100 97 7 100 z z ra ae 99 1 107 108 99 4 161 162 Echantillon clinique 1 HPV 18 45 Positif 94 9 99 8 96 6 99 9 Cellules SiHa 1 6 cellule et Positif 100 108 108 100 162 162 cellules HeLa 3 3 cellules 96 6 100 97 7 100 Cellules SiHa 1 6 cellule et Positif 100 108 108 99 4 161 162 cellules MS751 42 5 cellules 96 6 100 96 6 99 9 Cellules SiHa 15 7 cellule et Positif 63 9 69 108 67 7 109 161 cellules HeLa 0 3 cellules 54 5 72 3 60 1 74 4 Cellules SiHa 15 7 cellule
60. V 18 45 uniquement 0 1 13 8 1 0 18 8 Positif Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et 25 0 14 3 pos HPV 18 45 HPV 18 45 1 3 75 2 0 7 49 9 N g HPV 16 et ou 2 5 2 1 n g HPV 18 45 POS autres HPV HR 1 4 3 7 1 1 3 3 9 8 8 5 Pos ou n g Pos HPV HR 8 1 11 2 7 0 9 5 PAT N g HPV 16 et ou 1 0 1 1 N gatif i Sgan n g HPV 18 45 Negi RPV HIR 0 2 2 4 0 3 2 8 Pr valence 4 9 5 0 HR haut risque pos positif n g n gatif Le test PCR HPV fait uniquement la distinction de HPV 16 et HPV 18 par rapport aux 12 autres g notypes haut risque y compris HPV 45 Les femmes dont les r sultats taient n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 16 Risque relatif de l sions 2 CIN3 selon les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et d un test PCR HPV disponible dans le commerce R sultats du Aptima Assay R sultats du test PCR HPV Risque relatif de Risque relatif de Interpr tation des tests l sions 2 CIN3 Interpr tation des tests l sions 2 CIN3 IC a 95 IC a 95 Positif au HPV 16 et ou 18 45 par 14 8 Positif au HPV 16 et ou 18 par 12 6 rapport a n gatif au HPV HR 4 3 50 3 rapport a n gatif au HPV HR 3 8 41 9 Positif au HPV 16 et ou 18 45 par 2 0 Positif au HPV 16 et ou 18 par 3 9 rapport a positif aux autres HPV HR 0 8 4 6 rapport a positif aux a
61. V HR 6 3 69 3 7 2 120 8 Pos HPV 16 et ou 18 45 3 7 5 3 par rapport pos autres HPV HR 1 5 9 5 1 5 18 2 Pos autres HPV HR 5 6 5 6 par rapport n g autres HPV HR 1 8 17 7 1 2 26 0 Pos HPV HR 8 5 10 1 par rapport n g HPV HR 2 9 24 8 2 7 38 2 Pr valence 0 9 0 5 CI intervalle de confiance HR haut risque Pos positif N g n gatif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 12 Population NLIM 2 30 ans risques relatifs de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI a 95 CI a 95 Pos HPV 16 et ou 18 45 11 6 49 7 par rapport a n g HPV HR 3 8 35 4 6 1 406 Pos HPV 16 et ou 18 45 3 4 5 8 par rapport a pos autres HPV HR 1 3 9 0 1 7 20 0 Pos autres HPV HR 3 4 8 5 par rapport n g autres HPV HR 1 1 10 3 1 0 75 8 Pos HPV HR 5 1 16 9 par rapport n g HPV HR 1 9 13 8 2 2 132 Pr valence 2 5 20 803 1 4 11 803 Cl intervalle de confiance HR haut risque Pos positif N g n gatif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Apti
62. a Un seul r plicat de chaque chantillon a t test avec le Aptima HPV assay n 494 Les chantillons positifs ont ensuite t test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Un aliquote distinct 1 ml de chaque chantillon a t pr lev pour tre valu avec un test PCR HPV disponible dans le commerce n 557 Le risque absolu de maladie l sions 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay est indiqu dans le tableau 15 Des r sultats similaires sont indiqu s pour le test PCR HPV disponible dans le commerce qui distingue le HPV 16 et le HPV 18 mais pas le HPV 45 des autres g notypes a haut risque Le risque relatif de maladie avec des r sultats de g notype positifs et n gatifs sont indiqu s dans le tableau 16 pour le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et pour le test PCR HPV Tableau 15 Risque absolu de l sions 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et d un test PCR HPV disponible dans le commerce Risque absolu de l sions Risque absolu de l sions R sultat HPV HR R sultat g notype Interpr tation 2 CIN3 avec Aptima 2 CIN3 avec PCR HPV IC 95 IC 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 14 6 14 4 pos HPV 18 45 HPV 18 45 9 6 19 5 10 4 18 1 Pos HPV 16 et n g Pos HPV 16 19 4 16 8 HPV 18 45 uniquement 12 0 26 8 11 6 21 9 N g HPV 16 et ou Pos HPV 18 45 3 3 7 1 ste pos HP
63. absolu Risque absolu CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 10 8 7 65 9 2 6 65 pos HPV 18 45 HPV 18 45 5 1 17 7 4 3 14 2 Pos HPV 16 Pos HPV 16 12 5 4 32 12 5 4 32 n g HPV 18 45 uniquement 3 7 25 2 3 9 23 1 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 9 4 3 32 6 3 2 32 i 2 2 21 8 0 9 16 8 Positif pos HPV 18 45 uniquement Pos HPV 16 0 0 0 1 0 0 0 1 pos HPV 18 45 oe BE oe 0 0 93 5 0 0 93 4 3 6 7 194 2 1 4 194 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 1 7 6 0 0 7 3 9 5 4 14 259 3 9 10 259 Pos ou n g Pos HPV HR 3 7 6 8 2 6 4 5 Sui J 1 1 6 549 0 2 1 549 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 5 1 9 0 0 0 8 Pr val 2 5 14 EROS 20 808 11 808 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans objet Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 52 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Systeme Assay Tableau 31 Population NLIM 2 30 ans risque absolu de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par groupe d ge estimations non corrig es
64. analyse Les r sultats sont indiqu s dans le tableau 22 pour les populations avec des atypies des cellules malpighiennes de signification ind termin e atypical squamous cells of undetermined significance ASC US et NLIM n gatives aux l sions intra pith liales ou malignes Tableau 22 Pr valence du MRNA Messager RNA du HPV haut risque dans les populations par groupe d ge site de test et combinaison de la totalit des facteurs Taux de positivit en x n Population ASC US Population NLIM 2 21 ans 2 30 ans Pos Pos Pos Pos Pos Pos Pos Pos HPV 16 et 11 autres HPV 16 et 11 autres HPV 16 HPV 18 45 18 45 HPV HR HPV 16 HPV 18 45 18 45 HPV HR Tous 7 8 5 3 0 3 26 0 0 5 0 5 lt 0 1 3 6 71 911 48 911 3 911 237 911 50 10 839 49 10 839 1 10 839 391 10 839 Groupe d age en ann es x 13 4 5 2 0 5 37 9 ae 52 388 20 388 2 388 147 388 S9 a ao S O 30 39 5 5 6 7 0 4 23 1 0 7 0 7 0 5 1 14 255 17 255 1 255 59 255 31 4183 31 4183 0 4183 215 4183 gt 40 1 9 4 1 0 11 6 0 3 0 3 lt 0 1 2 6 7 5 268 11 268 0 268 31 268 19 6656 18 6656 1 6656 176 6656 Site de test 4 5 6 6 6 0 3 27 0 0 4 0 4 lt 0 1 3 6 17 304 20 304 1 304 82 304 16 3610 16 3610 1 3610 130 3610 2 9 6 3 6 0 3 26 4 0 5 0 4 0 3 6 29 303 11 303 1 303 80 303 18 3614 15 3614 0 3614 130 3614 3 8 2 5 6 0 3 24 7 0 4 0 5 0 3 6 25 304 17 304 1 304 75 304
65. ance non corrig es fond es sur les 808 femmes disposant d un statut pathologique v rifi ont t pr sent es Tableau 29 Population NLIM 2 30 ans classification des femmes NLIM valuables d apr s les r sultats du Aptima HPV assay du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay du test DNA HPV du statut pathologique l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 et de l tat de v rification de la maladie Statut Statut pathologique Statut pathologique v rifi gt CIN2 v rifi 2 CIN3 Pathologique non R sultat du R sultat du verme Test DNA Total Femmes Femmes Femmes avec Sesta e HPV femmes Femmes non Femmes non un statut Aptima AHPV GT atteintes atteintes a atteintes a atteintes pathologique de Ieslons de l sions de lesions de l sions inconnu gt gt CIN2 lt cinz CIN lt CIN3 inconnu Positif Positif 88 6 52 5 53 30 34 1 Positif N gatif 10 1 5 1 5 4 40 0 Positif Aucun 2 0 1 0 1 1 50 0 r sultat Positif N gatif Positif 291 7 169 4 172 115 39 5 N gatif N gatif 85 0 14 0 14 71 83 5 ae Aucun N gatif pare 15 0 4 0 4 11 73 3 Total 491 14 245 10 249 232 47 3 S O Positif 282 3 177 1 179 102 36 2 kkk A H 0 N gatif S O N gatif 9467 2 362 0 364 9103 96 2 S 0 pucUn 599 1 4 0 5 594 99 2 r sultat Total 10 839 20 788 11 797 10 031 92 5 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay
66. ar 2 1 3 4 319 0 0 319 N g HPV 16 18 45 N g HPV HR N gatif eg eg 0 4 2 3 0 0 0 8 Pr valence 2 6 11 430 1 2 5 430 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR a haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans objet Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 53 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Le risque relatif de maladie selon les r sultats positifs et n gatifs du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont pr sent s dans le tableau 32 r sultats corrig s pour tenir compte du biais de v rification et le tableau 33 r sultats non corrig s Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 12 7 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN2 et 18 4 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes ne pr sentant aucun type de HPV haut risque Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 2 9 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN2 et 3 8 fois plus de probabilit d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque Tableau 32 Population NLIM 2 30 ans risque relatif de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultat
67. atif 1708 6 100 or 1007 chantillon 1 n gatif au N aatif 100 107 107 100 162 162 HPV pr par avec PreservCyt g 96 5 100 97 7 100 chantillon 2 n gatif au N oatif 100 107 107 100 162 162 HPV pr par avec PreservCyt g 96 5 100 97 7 100 CI intervalle de confiance du score Remarque La concordance en pourcentage a pu tre affect e par des variations lors de l ajout de substances la dilution et ou l aliquotage Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 60 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Syst me Assay R activit crois e Les tests avec des organismes pr sentant une ventuelle r activit crois e avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay ont t men s au moyen du Tigris DTS System Consulter R activit crois e tableau 20 dans la section Tigris DTS System pour voir les r sultats Interf rence Les tests avec les substances susceptibles d interf rer avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay ont t men s au moyen du Tigris DTS System Consulter nterf rence tableau 21 dans la section du Tigris DTS System pour voir les r sultats Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 61 AW 11504 901 Rev 003 FR Bibliographie Aptima Bibliographie 1 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Walboomers J M M V Jacobs M M Manos F X Bosch J A Kummer K V Shah P J Snijders J Peto C J Me
68. chantillons n gatifs au HPV Les chantillons du panel positifs au HPV 16 et ou 18 45 ont t pr par s en ajoutant des cellules de culture infect es par le HPV SiHa HeLa et MS751 ATCC Manassas Virginia des groupes d chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep r siduels ou en diluant des chantillons cliniques du HPV 16 18 et ou 45 dans des groupes d chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep r siduels Les chantillons du panel n gatifs au HPV ont t pr par s avec des groupes d chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Dans l tude 1 2 op rateurs pr sents sur chacun des 3 sites de test 1 appareil par site ont r alis 2 listes de travail du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay par jour pendant 3 jours Le test a t effectu en utilisant 1 lot de r actif Chaque liste de travail contenait 3 r plicats de chacun des chantillons du panel de reproductibilit Cent huit 108 tubes d chantillon individuel ont t test s pour chaque chantillon du panel 3 sites x 1 appareil x 2 op rateurs x 1 lot x 2 listes de travail par jour x 3 jours x 3 r plicats Dans l tude 2 le test a t men en interne pendant 20 jours avec un total de 162 r actions test es pour chaque chantillon du panel 1 site x 3 appareils x 3 op rateurs x 3 lots x 2 listes de travail x 3 r plicats Les chantillons du panel sont d crits dans le tableau 19a et le tableau 19b accompagn s d un r
69. de confiance du score Remarque La concordance en pourcentage a pu tre affect e par des variations lors de l ajout de substances la dilution et ou l aliquotage Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 40 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System R activit crois e La sp cificit analytique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu e avec des groupes d chantillons cytologiques r siduels en milieu liquide ThinPrep dilu s 1 2 9 dans le STM comparables aux chantillons transf r s dans des tubes de transfert Aptima auxquels ont t ajout es des cultures de bact ries de levures ou de champignons microscopiques des cultures de virus ou des transcrits in vitro de HPV non cibl s Les organismes et les concentrations test es pour lesquels aucune r activit crois e n a t observ e sont indiqu s dans le tableau 20 Les crit res de l tude pour valuer l effet de la pr sence de microorganismes sur la sp cificit du test se sont appuy s sur le taux de positivit Tableau 20 Panel de sp cificit analytique Organismes et concentration ne pr sentant pas de r activit croisee Concentration Concentration Organisme test e ne pr sentant Organisme test e ne pr sentant pas de r activit pas de r activit crois e crois e Bact ries Acinetobacter Iwof
70. des femmes valuables de l tude ASC US et de l tude NLIM ayant des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay ont t admis pour tre test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay La performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu e pour la d tection des 2 CIN2 et des n oplasies cervicales intra pith liales de grade 3 ou pour des maladies cervicales plus graves 2 CIN3 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 25 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Population ASC US 2 21 ans performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Au total l tude a inclus 400 femmes valuables de 21 ans ou plus avec des r sultats cytologiques ASC US et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay pour lesquelles les chantillons Pap de suivi taient admissibles pour le test avec Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Parmi ces 400 femmes 46 ne disposaient pas d chantillons Pap de suivi disponibles pour le test et 6 pr sentaient des diagnostics pathologiques ind termin s ces 46 femmes ont t exclues de l analyse Les 348 femmes valuables restantes disposant d un tat pathologique concluant avaient des r sultats valides avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay issus de la r alisation automatique du test suite un r sultat positif avec le Aptima HPV assay Soixante sept 6
71. du panel d examen histologique consensuel R sultat du R sultat du test coat Diagnostic du panel d examen histologique consensuel test HPV x Interpr tation Aptima AHPV GT Ind termin Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancer Total Pos HPV 16 n g HPV 18 45 Pos HPV 16 2 28 0 0 3 1 34 N g HPV 16 postit pos HPV 18 45 Pos HPV 18 45 1 28 1 1 0 2 33 Pos HPV 16 Pos HPV 16 et pos HPV 18 45 18 45 g 1 o 9 9 1 N g HPV 16 Pos autres n g HPV 18 45 HPV HR 1 K 12 2 4 9 205 Total 14 232 13 4 7 3 273 N gatif N g N g HPV HR 31 527 16 5 1 0 580 g HPV 16 18 45 9 Total 45 759 29 9 8 orate 853 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR a haut risque Pos Positif N g n gatif Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux valides lors du test initial ou apr s r solution des r sultats initiaux non valides par la proc dure 45 femmes se sont rendue a une consultation de colposcopie mais n ont pas pu b n ficier d un diagnostic pour les raisons suivantes aucun consensus n a pu tre atteint en raison d chantillons inad quats n 29 aucune biopsie n a t pr lev e en raison de facteurs sous jacents n 13 aucune biopsie n a t pr lev e ou examin e en raison d une erreur n 3 l es femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18
72. e Quatorze 14 femmes pr sentaient des l sions 2 CIN2 et 10 des l sions 2 CIN3 245 femmes pr sentaient une histologie normale CIN1 14 femmes pr sentaient un statut pathologique ind termin Sur les 259 femmes valuables pr sentant un statut pathologique concluant et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me 65 avaient des r sultats positifs avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me indiquant la pr sence du HPV 16 et ou HPV 18 45 194 avaient des r sultats n gatifs indiquant la pr sence d un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque Les r sultats de 549 femmes valuable suppl mentaires g es de 30 ans ou plus avec des r sultats cytologiques NLIM et un statut pathologique concluant se sont r v l s n gatifs avec le Aptima HPV assay sur le Panther Syst me Un r sultat n gatif avec le Aptima HPV assay signale qu aucun des 14 types haut risque du HPV n est pr sent dans l chantillon ce dernier est donc d sign comme n gatif avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me aux fins de l analyse Les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay par rapport au r sultat du Aptima HPV assay et au diagnostic du panel d examen histologique consensuel sont pr sent s dans le tableau 28 Tableau 28 Population NLIM 2 30 ans r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par rapport au diagnostic
73. e HEPES contenant lt 10 de r actif diluant 1 flacon R actif sonde du HPV 16 18 45 Sondes DNA Acide d soxyribonucl ique chimiluminescentes non infectieuses lt 500 ng flacon d shydrat es dans une solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent 1 flacon R actif de contr le interne du HPV 16 18 45 Transcrit de RNA non infectieux dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 1 flacon Boite a temp rature ambiante Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay conserver entre 15 C et 30 C d s r ception Symbole Composant Quantit AR Solution de reconstitution de l amplification du HPV 16 18 45 Solution aqueuse contenant des conservateurs 1 flacon ER Solution de reconstitution enzymatique du HPV 16 18 45 Solution tamponn e HEPES contenant un surfactant et du glyc rol 1 flacon PR Solution de reconstitution de sonde du HPV 16 18 45 Solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent 1 flacon R actif de s lection du HPV 16 18 45 Solution tamponn e de borate 600 mM contenant un surfactant 1 flacon Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 8 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Boite a temp rature ambiante Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay conserver entre 15 C et 30 C d s r ception Symbole Composant Tigris DTS System Quantit TCR R actif de capture de cible du HPV 16 18 45
74. e l analyse Tableau 14 Population NLIM 2 30 ans rapports de vraisemblance et probabilit s de maladie pour les 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Rapport de vraisemblance Rapport de vraisemblance CI a 95 CI a 95 5 1 7 9 Pos HPV 16 et ou 18 45 2 3 9 1 3 5 12 9 1 4 1 2 Pos autres HPV HR 0 7 2 2 0 4 2 3 are 0 4 0 1 N gatif au HPV HR 0 1 0 7 0 0 0 6 Cl intervalle de confiance HR haut risque Pos positif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 35 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath Des chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath ont t recueillis aupr s de femmes canadiennes lors d une consultation de suivi en raison d un ou plusieurs frottis anormaux d une infection HPV ou d autres raisons Un aliquote 0 5 ml de chaque chantillon a t transf r dans un tube de transfert d chantillons Aptima puis a t trait par de la solution de transfert Aptim
75. e n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Trois femmes ont pr sent un ad nocarcinome in situ AIS Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Sur les 515 femmes disposant de r sultats positifs avec le Aptima HPV assay et de r sultats avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay 217 ont pr sent un tat pathologique non v rifi incluant les tats ind termin s tableau 8 Sur les 10 331 femmes issues de l essai CLEAR original disposant de r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay 9826 ont pr sent un tat pathologique non v rifi La proportion de femmes avec un statut pathologique non v rifi tait lev dans ce groupe 96 6 puisque seules les femmes s lectionn es al atoirement disposant de r sultats n gatifs au Aptima HPV assay et au test DNA HPV disponible dans le commerce ont t orient es vers une colposcopie Pour corriger ce biais de v rification une m thode d imputation multiple a t utilis e pour estimer le nombre de femmes malades qui aurait t identifi si l ensemble des femmes avaient subi une colposcopie Les estimations de performance corrig es pour tenir compte du biais de v rification et les estimations de performance non corrig es bas es sur les 803 femmes disposant d un statut pathologique v rifi ont t pr sent es Tableau 8 Population NLI
76. e pour la d tection de HPV 16 18 et 45 risque lev Les r sultats sont pr sent s dans le tableau 17 Tableau 17 Concordance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genoytpe assay sur le Tigris DTS System pour la d tection des HPV haut risque 16 18 et 45 dans des chantillons CSCT M thode de r f rence Pos HPV 16 N g HPV 16 Pos HPV 16 N g HPV 16 Total n g HPV pos HPV pos HPV n g HPV 18 45 18 45 18 45 18 45 Pos HPV 16 n g HPV 18 45 125 0 0 126 N g HPV 16 Aptima HPV pos HPV 18 45 0 A3 1 Le 16 18 45 Genotype Assay Pos HPV 16 0 0 8 1 9 pos HPV 18 45 N g HPV 16 n g HPV 18 45 1 0 197 199 Total 126 44 9 199 378 Pos positif N g n gatif Concordance positive 98 3 176 179 CI 95 95 2 99 4 Concordance n gative 99 0 197 199 CI 95 96 4 99 7 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 37 AW 11504 901 Rev 003 FR Performances du test avec le Tigris DTS System Aptima Sensibilit analytique Le seuil de d tection SD du seuil clinique est une concentration qui est positive au dessus du seuil clinique 95 du temps Le SD du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t d termin en testant des chantillons cytologiques individuels n gatifs cliniques en milieu liquide ThinPrep auxquels on a ajout diverses concentrations de transcrits in vitro de HPV Trente r plicats de chaque taux de copie ont t test
77. ec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay en la pr sence ou l absence de cellules de culture infect es par HPV SiHa 1 6 cellule r action et HeLa 0 3 cellule r action Des interf rences ont t observ es avec les substances suivantes lorsqu elles sont pr sentes a des concentrations sup rieures a celles sp cifi es lubrifiants vaginaux contenant du Polyquaternium 15 1 p v cr me antifongique contenant du tioconazole 0 03 p v mucus 0 3 p v hormones intravaginales contenant de la progest rone a 1 p v Tableau 21 Substances test es pour valuer d ventuelles interf rences avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Cat gorie de produit Type ou marque de produit Concentration maximale ayant t test e sans interf rer avec la performance du test Liquide sensation naturelle KY 10 viv Lubrifiant vaginal Liquide lubrifiant personnel up amp up marque Target Astroglide 1 piv Spermicide gel e Mousse contraceptive vaginale MCV eer 0 contraceptive Gel contraceptif vaginal Conceptrol Options up amp up marque Target miconazole 3 10 piv Cr mes antifongiques Pack combin Monistat 3 up amp up marque Target Tioconazole 1 0 03 p v Summer s Eve Douche Douchage 10 viv up amp up marque Target douchage feminin Spray d odorant f minin Summer s Eve Spray intime f minin 10 piv Spray d odorant f minin FDS M
78. ent tre conserv s entre 2 C et 25 C pendant 7 jours maximum 5 Les chantillons SurePath transf r s doivent tre trait s par la solution de transfert Aptima avant d tre test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Les chantillons trait s peuvent tre conserv s entre 2 C et 8 C pendant 17 jours maximum avant d tre test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Consulter la notice du kit de transfert d chantillons pour obtenir de plus amples d tails Echantillons de kit de collecte et de transport Aptima pour chantillon cervical 1 Transportez et conservez les chantillons entre 2 C et 30 C pendant 60 jours maximum 2 Si une dur e de conservation sup rieure est n cessaire les chantillons du kit de transport peuvent tre conserv s de 20 C 70 C pendant 24 mois maximum C Conservation des chantillons apr s les tests 1 Les chantillons qui ont t test s doivent tre rang s dans un portoir en position verticale 2 Les tubes d chantillons doivent tre recouverts avec une nouvelle barri re de plastique ou d aluminium propre 3 Si certains des chantillons test s doivent tre congel s ou envoy s retirez les bouchons p n trables et placez de nouveaux bouchons non p n trables sur les tubes d chantillons Si les chantillons doivent tre envoy s dans un autre tablissement pour y tre test s les temp ratures sp cifi es doivent tre maintenues Avant
79. et Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 33 AW 11504 901 Rev 003 FR Performances du test avec le Tigris DTS System Aptima Les risques relatifs de maladie selon les r sultats positifs et n gatifs du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont pr sent s dans le tableau 11 corrig pour tenir compte du biais de v rification et le tableau 12 non corrig Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 20 9 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN2 et 29 4 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes ne pr sentant pas de types de HPV a haut risque Les femmes pr sentant les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 3 7 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN2 et 5 3 fois plus de risques d avoir une l sion 2 CIN3 que les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque Tableau 11 Population NLIM 2 30 ans risques relatifs de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou 18 45 20 9 29 4 par rapport n g HP
80. et Positif 98 1 106 108 92 0 149 162 cellules MS751 4 3 cellules 93 5 99 5 86 8 95 3 LCR 100 108 108 99 4 161 162 Cellules SiHa 1 6 cellules N gatif 96 6 100 96 6 99 9 7 71 3 77 108 92 5 149 161 Cellules HeLa 0 3 cellule Positif 62 1 79 0 87 4 95 7 a 86 1 93 108 69 1 112 162 Cellules MS751 4 3 cellules Positif 78 3 91 4 61 6 75 7 z esi Be 100 107 107 99 4 160 161 Echantillon clinique 2 HPV 16 N gatif 96 5 100 96 6 99 9 z bo me 88 0 95 108 79 6 129 162 Echantillon clinique 2 HPV 18 45 Positif 80 5 92 8 72 8 85 1 per 100 108 108 100 162 162 Cellules SiHa 0 1 cellules N gatif 96 6 100 97 7 100 Ps 92 6 100 108 86 4 140 162 Cellules HeLa 0 02 cellule N gatif 86 1 96 2 80 3 90 9 a 97 2 105 108 98 1 159 162 Cellules MS751 0 04 cellules N gatif 92 1 99 1 94 7 99 4 Z fe ane 100 108 108 99 4 161 162 Echantillon clinique 3 HPV 16 N gatif 96 6 100 96 6 99 9 i Pre 80 6 87 108 81 5 132 162 Echantillon clinique 3 HPV 18 45 N gatif 72 1 86 9 74 8 86 7 z a PET Sara 100 108 108 99 4 161 162 chantillon clinique 1 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 96 6 99 9 z MEY saii pett 100 108 108 100 162 162 Echantillon clinique 2 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 97 7 100 z ae ee ate a 100 108 108 99 4 161 162 Echantillon clinique 3 n gatif au HPV N gatif 96 6 100 96 6 99 9 Cl intervalle
81. ez la solution de reconstitution correspondante et posez le bouchon sur une surface de travail propre et couverte e Tout en tenant le flacon de solution sur la paillasse ins rez fermement l autre extr mit du collet de reconstitution dans louverture du flacon figure 1 tape 2 f Retournez d licatement l assemblage de flacons Laissez la solution s couler depuis le flacon dans le flacon en verre figure 1 tape 3 g Faites tournoyer en douceur la solution dans le flacon pour bien la m langer vitez de faire de la mousse en faisant tournoyer le flacon figure 1 tape 4 h Attendez que le r actif lyophilis se dissolve puis retournez nouveau les flacons assembl s en les inclinant un angle de 45 pour minimiser la formation de mousse figure 1 tape 5 Laissez la totalit du liquide retourner dans le flacon en plastique Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 10 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Tigris DTS System k Retirez le collet de reconstitution et le flacon figure 1 tape 6 Rebouchez le flacon en plastique Enregistrez les initiales de l op rateur ainsi que la date de reconstitution sur l tiquette figure 1 tape 7 Jetez le collet de reconstitution et le flacon figure 1 tape 8 Avertissement vitez de faire de la mousse en reconstituant les r actifs La mousse interf re avec le d tecteur de niveau du Tigris DTS System Remarque M langez bien les r ac
82. fii 1x10 CFU ml Lactobacillus acidophilus 1x105 CFU ml Actinomyces israelii 1x10 CFU ml Lactobacillus crispatus 1x10 CFU ml Alcaligenes faecalis 1x10 CFU ml Listeria monocytogenes 1x10 CFU ml Atopobium vaginae 1x10 CFU ml Mobiluncus curtisii 1x10 CFU ml Bacteroides fragilis 1x10 CFU ml Mycoplasma genitalium 2 5x10 copies ml Bifidobacterium adolescentis 1x105 CFU ml Mycoplasma hominis 1x10 CFU ml Campylobacter jejuni 1x10 CFU ml Neisseria gonorrhoeae 1x10 CFU ml Chlamydia trachomatis 1x10 IFU ml Peptostreptococcus magnus 1x10 CFU ml Clostridium difficile 1x10 CFU ml Prevotaella bivia 1x10 CFU ml Corynebacterium genitalium 1x10 CFU ml Propionibacterium acnes 1x10 CFU ml Cryptococcus neoformans 1x10 CFU ml Proteus vulgaris 1x10 CFU ml Enterobacter cloacae 1x10 CFU ml Pseudomonas aeruginosa 1x10 CFU ml Enterococcus faecalis 1x10 CFU ml Staphylococcus aureus 1x10 CFU ml Escherichia coli 1x10 CFU ml Staphylococcus epidermidis 1x10 CFU ml Fusobacterium nucleatum 1x10 CFU ml Streptococcus agalactiae 1x10 CFU ml Gardnerella vaginalis 1x10 CFU ml Streptococcus pyogenes 1x10 CFU ml Haemophilus ducreyi 1x10 CFU ml Ureaplasma urealyticum 1x10 CFU ml Klebsiella pneumoniae 1x10 CFU ml G notypes du HPV a haut risque non cibl s HPV 31 2 5x10 copies ml HPV 56 2 5x10 copies ml HPV 33 2 5x10 copies ml HPV 58 2 5x10 copies ml HPV 35 2 5x10 copies ml HPV 59 2 5x10 copies ml HPV 39 2 5x10 copie
83. ijer N Mu oz 1999 Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide J Pathol 189 12 19 Li N Franceschi S Howell Jones R Snijders P J F Clifford G M Human papillomavirus type distribution in 30 848 invasive cervical cancers worldwide Variation by geographical region histological type and year of publication Int J Cancer 2011 128 927 935 doi 10 1002 ijc 25396 Czegledy J C Losif B G Hansson M Evander L Gergely and G Wadell 1995 Can a test for E6 E7 transcripts of human papillomavirus type 16 serve as a diagnostic tool for the detection of micrometastasis in cervical cancer Int J Cancer 64 3 211 5 Doorbar J 2006 Molecular biology of human papillomavirus infection and cervical cancer Clin Sci Lond 110 5 525 41 Burd E M 2003 Human papillomavirus and cervical cancer Clin Microbiol Rev 16 1 1 17 Lambert P F H Pan H C Pitot A Liem M Jackson and A E Griep 1993 Epidermal cancer associated with expression of human papillomavirus type 16 E6 and E7 oncogenes in the skin of transgenic mice Proc Natl Acad Sci U S A 90 12 5583 7 Kjaer S K A J C van den Brule G Paull E l Svare M E Sherman B L Thomsen M Suntum J E Bock P A Poll and C J L M Meijer 2002 Type specific persistence of high risk human papillomavirus HPV as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial lesions in young women population based prospective follow up study BMJ 325
84. inad quats pour le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Les r sultats du test peuvent tre affect s par un recueil une conservation ou un traitement incorrects de l chantillon Le contr le interne v rifie les tapes de capture de cible d amplification et de d tection du test Il n est pas destin contr ler l ad quation des chantillons cervicaux Un r sultat n gatif du test Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay n exclut pas la possibilit d anomalies cytologiques ou la pr sence sous jacente ou future de CIN2 CIN3 ou d un cancer Le test Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay fournit des r sultats qualitatifs Il n est donc pas possible d tablir une corr lation entre la magnitude d un signal de test positif et l expression du taux de mRNA Messager RNA dans un chantillon La d tection du mRNA Messager RNA du HPV haut risque type 16 18 et 45 d pend du nombre de copies pr sentes dans l chantillon et peut tre affect e par les m thodes de recueil de l chantillon les facteurs li s au patient le stade de l infection et la pr sence de substances interf rentes Une infection au HPV ne constitue pas un indicateur de l sions cytologiques HSIL ou de l sions CIN de haut grade sous jacentes pas plus qu elle ne suppose le d veloppement de l sions CIN2 CIN3 ou d un cancer La plupart des femmes infect es par un ou plusieurs types de HPV haut risque ne d veloppent pas de l sions CIN2 CIN3 ou
85. l Optimiseur d eau de javel pour nettoyage N de r f rence 303095 303096 303014 303013 104772 02 902731 902714 10612513 Tecan 301154C 302657 105668 103036A CLO041 CL0041 501604 303658 N de r f rence 302101 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 15 AW 11504 901 Rev 003 FR Panther Syst me Aptima Proc dure de test pour le Panther Syst me Remarque Consultez le Panther System Operator s Manual manuel de l op rateur du Panther Syst me pour de plus amples informations sur la proc dure du Panther Syst me A Pr paration de la zone de travail Nettoyez les plans de travail sur lesquels les r actifs et les chantillons seront pr par s Essuyez les plans de travail avec une solution d hypochlorite de sodium de 2 5 a 3 5 0 35 M 0 5 M Laissez la solution d hypochlorite de sodium au contact des surfaces pendant au moins 1 minute puis rincez l eau Ne laissez pas s cher la solution d hypochlorite de sodium Couvrez la surface de la paillasse sur laquelle les r actifs et les chantillons seront pr par s avec des protections de laboratoire absorbantes propres avec envers plastifi B Pr paration des r actifs d un nouveau kit Remarque La reconstitution des r actifs doit tre effectu e avant d entreprendre toute t che sur le Panther Syst me 1 Afin de reconstituer le r actif d amplification le r actif enzymatique et le r actif sonde combi
86. l practice J Natl Cancer Inst 97 14 1072 1079 ASCCP American Society for Colposcopy and Cervical Pathology HPV Genotyping Clinical Update 2009 http Awww asccp org Portals 9 docs pdfs Consensus 20Guidelines clinical_update_20090408 pdf Accessed March 22 2012 Wright T C S Massad C J Dunton M Spitzer E J Wilkinson and D Solomon 2007 2006 Consensus guidelines for the management of women with abnormal cervical screening tests Journal of Lower Genital Tract Disease 11 4 201 222 Kacian D L and T J Fultz 1995 Nucleic acid sequence amplification methods U S Patent 5 399 491 Arnold L J P W Hammond W A Wiese and N C Nelson 1989 Assay formats involving acridinium ester labeled DNA probes Clin Chem 35 1588 1594 Nelson N C A BenCheikh E Matsuda and M Becker 1996 Simultaneous detection of multiple nucleic acid targets in a homogeneous format Biochem 35 8429 8438 Datta S D L A Koutsky S Ratelle E R Unger J Shlay T McClain B Weaver P Kerndt J Zenilman M Hagensee C J Suhr and H Weinstock 2008 Human Papillomavirus Infection and Cervical Cytology in Women Screened for Cervical Cancer in the United States 2003 2005 Annals Int Med 148 493 Clifford G M S Gallus R Herrero N Mu oz P J F Snijders S Vaccarella P T H Anh C Ferreccio N T Hieu E Matos M Molano R Rajkumar G Ronco S de Sanjos H R Shin S Sukvirach J O Thomas S Tunsakul
87. les l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sultats du Aptima Assay Rapport de vraisemblance Rapport de vraisemblance CI 95 CI 95 se 4 2 5 1 Positif au HPV 16 et ou 18 45 3 0 5 8 3 4 6 9 ge 1 7 1 2 Positif aux autres HPV HR 1 3 2 3 0 6 1 9 eer 0 2 0 2 N gatif au HPV HR 0 1 0 4 0 1 0 4 Cl intervalle de confiance HR haut risque Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 29 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Population NLIM 2 30 ans performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay et du Aptima HPV Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Au total l tude a inclus 540 femmes valuables de 30 ans ou plus avec des r sultats cytologiques NLIM et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay pour lesquelles les chantillons Pap de suivi taient admissibles pour le test avec Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Parmi ces 540 femmes 25 ne disposaient pas d chantillons Pap de suivi disponibles pour le test ces 25 femmes ont toutes t exclues de l analyse Les 515 femmes valuables restantes dispo
88. les r actifs en les retournant doucement avant de les charger dans le syst me Evitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs C Pr paration des r actifs ant rieurement reconstitu s 1 Les r actifs sonde d amplification et enzymatiques prec demment reconstitu s doivent parvenir a temp rature ambiante entre 15 C et 30 C avant le d but du test Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 17 AW 11504 901 Rev 003 FR Panther Syst me Aptima 2 Sile r actif sonde reconstitu contient un pr cipit qui ne se dissout pas temp rature ambiante chauffez le 60 C maximum pendant 1 2 minutes Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu 3 Sile WTCR contient un pr cipit chauffez le une temp rature entre 42 C et 60 C pendant 90 minutes maximum Laissez le WTCR parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit n a pas disparu 4 Sile r actif de s lection contient un pr cipit chauffez le 60 C 1 C pendant 45 minutes maximum pour faciliter la dissolution du pr cipit M langez d licatement le flacon toutes les 5 10 minutes Laissez le r actif de s lection parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu 5 M langez bien chaque r actif en le retournant doucement avant de le charger dans le syst me
89. lis s au moyen de 2 lots de r actifs Chaque liste de travail contenait 3 r plicats de chacun des chantillons du panel de reproductibilit Cent huit 108 tubes d chantillon individuel ont t test s pour chaque chantillon du panel 3 sites x 1 appareil x 2 op rateurs x 2 lots x 3 jours x 3 r plicats Dans l tude 2 le test a t men en interne pendant 13 jours avec un total de 162 r actions test es pour chaque chantillon du panel 1 site x 3 appareils x 3 op rateurs x 3 lots x 2 listes de travail x 3 r plicats Les chantillons du panel sont d crits dans le tableau 40a et le tableau 40b accompagn s d un r sum de la concordance indiquant les r sultats pr vus respectivement pour le HPV 16 et le HPV 18 45 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 58 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Systeme Assay Tableau 40a Etudes 1 et 2 de pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay description du panel et concordance en pourcentage avec les r sultats escompt s pour le HPV 16 TA R sultat Concordance en pourcentage CI 95 Description du panel not po r copies ou cellules r action p e p Etude 1 Etude 2 le HPV 16 3 sites de test 1 site de test HPV 16 IVT 240 copies Positif oe 6 100 107 7 100 HPV 18 IVT 260 copies N gatif oe 5 100 OT 100 HPV 45 IVT 350 copies N ga
90. ltats initiaux non valides par la proc dure 620 femmes avec des r sultats du Aptima HPV assay n avaient pas de r sultats de test DNA HPV en raison principalement du volume insuffisant de l chantillon cytologique Toutes les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Les risques absolus corrig s de maladie 2 CIN2 et 2 CIN3 selon les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay result et du Aptima HPV assay sont indiqu s dans le tableau 9a Le risque de 2 CIN2 chez les femmes pr sentant des types de HPV 16 18 et ou 45 tait de 12 6 par rapport a 3 4 chez les femmes pr sentant un ou plusieurs des 11 autres types de HPV a haut risque et de 0 6 chez les femmes ne pr sentant pas de types de HPV a haut risque Les risques absolus non corrig s de maladie sont indiqu s de mani re globale dans le tableau 9b et par groupe d age dans le tableau 10 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 31 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Tableau 9a Population NLIM 2 30 ans risques absolus de 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 R sultat du R sultat du iteroc tation Aptima
91. ltiples copies de l amplicon du RNA partir de la matrice de copie du DNA Acide d soxyribonucl ique La d tection de l amplicon s effectue au moyen du test HPA avec des sondes d acides nucl iques simple brin marqueurs chimiluminescents qui sont compl mentaires aux amplicons Les sondes d acides nucl iques marqu es s hybrident sp cifiquement aux amplicons Le r actif de s lection diff rencie les sondes hybrid es de celles qui ne le sont pas en d sactivant le marqueur sur les sondes non hybrid es Lors de l tape de d tection la lumi re mise par les hybrides RNA DNA marqu s est mesur e en signaux de photons nomm s unit s relatives de lumi re Relative Light Units RLU dans un luminom tre Les r sultats finaux du test sont interpr t s en s appuyant sur le signal d analyte divis par le seuil Signal to Cutoff S CO Un IC est ajout chaque r action par le biais du r actif de capture de cible Le IC v rifie les tapes de capture de cible d amplification et de d tection du test Le double test cin tique Dual Kinetic Assay DKA est une technique permettant de diff rencier les signaux du HPV du signal du IC Le IC et l amplicon du HPV 16 sont d tect s par des sondes mission lumineuse rapide signal clair Le signal du IC dans chaque r action est diff renti de celui du HPV 16 par la magnitude de l mission lumineuse Les amplicons sp cifiques du HPV 18 et 45 sont d tect s l aide
92. ma HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 34 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Les rapports de vraisemblance l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont indiqu s dans le tableau 13 r sultats corrig s pour tenir compte du biais de v rification et le tableau 14 r sultats non corrig s Les types de HPV 16 18 et ou 45 ont 17 1 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN2 et 21 9 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN3 Tableau 13 Population NLIM 2 30 ans rapports de vraisemblance pour les l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Rapport de vraisemblance Rapport de vraisemblance CI 95 CI 95 17 1 21 9 Pos HPV 16 et ou 18 45 6 2 46 9 7 3 65 2 4 2 3 8 Pos autres HPV HR 1 7 10 1 1 2 12 6 ae 0 7 0 7 N gatif au HPV HR 0 5 1 0 0 4 1 1 Cl intervalle de confiance HR haut risque Pos positif Les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins d
93. n du HPV a haut risque de type 16 18 et 45 sur le Panther Systeme a t valu e en utilisant les r sultats obtenus sur le Tigris DTS System comme m thode de r f rence Les concordances positives et n gatives en pourcentage ainsi que les intervalles de confiance du score a 95 qui y sont associ s ont t calcul s Les r sultats sont pr sent s dans le tableau 38 Tableau 38 Concordance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genoytpe assay sur le Panther Syst me pour la d tection des HPV a haut risque 16 18 et 45 dans les chantillons CSCT R sultat du Tigris DTS System Pos HPV 16 N g HPV 16 Pos HPV 16 N g HPV 16 n g pos pos n g HPV 18 45 HPV 18 45 HPV 18 45 HPV 18 45 Total Pos HPV 16 n g HPV 18 45 133 0 3 198 N g HPV 16 pos HPV 18 45 9 s4 o 9 LE R sultat du Pos HPV 16 Panther Syst 3 anther Syst me pos HPV 18 45 0 0 7 0 7 N g HPV 16 n g HPV 18 45 1 i 17 175 Total 195 35 8 176 414 Pos positif N g n gatif Concordance positive 98 7 235 238 CI 95 96 4 99 6 Concordance n gative 98 3 173 176 CI 95 95 1 99 4 Sensibilit analytique Le seuil de d tection SD du seuil clinique est une concentration qui est positive sup rieure au seuil clinique 95 du temps Le SD du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu en testant des chantillons cytologiques n gatifs cliniques individuels ou gro
94. nez les flacons de r actif lyophilis la solution de reconstitution Si les solutions de reconstitution sont r frig r es laissez leur temp rature s quilibrer temp rature ambiante avant de les utiliser a Faites correspondre chaque solution de reconstitution avec son r actif lyophilis V rifiez que la solution de reconstitution et le r actif ont des tiquettes de couleur correspondantes avant de mettre en place le collet de reconstitution b V rifiez les num ros de lot sur la fiche de code barres du lot de r f rence pour vous assurer que les r actifs sont associ s correctement c Ouvrez le flacon de r actif lyophilis et ins rez fermement l extr mit du collet de reconstitution pr sentant une encoche dans louverture du flacon figure 2 tape 1 d Ouvrez la solution de reconstitution correspondante et posez le bouchon sur une surface de travail propre et couverte e Tout en tenant le flacon de solution sur la paillasse ins rez fermement l autre extr mit du collet de reconstitution dans le flacon figure 2 tape 2 f Retournez d licatement l assemblage de flacons Laissez la solution s couler depuis le flacon dans le flacon en verre figure 2 tape 3 g Faites tournoyer en douceur la solution dans le flacon pour bien la m langer vitez de faire de la mousse lorsque vous tournez le flacon figure 2 tape 4 h Attendez que le r actif lyophilis se dissolve puis retournez n
95. ns poudre Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 19 AW 11504 901 Rev 003 FR Proc dures de contr le de qualit Aptima Proc dures de contr le de qualit A Crit res de validit de la s rie Le logiciel d termine automatiquement la validit de la s rie Le logiciel invalidera une s rie si l une des conditions suivantes se produit e Plus d un r plicat non valide du calibrateur n gatif e Plus d un r plicat non valide du calibrateur positif 1 e Plus d un r plicat non valide du calibrateur positif 2 e Plus de 1 r plicat non valide sur les 6 r plicats de calibrateur combin s Une s rie peut tre invalid e par un op rateur si des difficult s techniques de l op rateur ou de l appareil sont observ es et document es pendant la r alisation du test Une s rie non valide doit tre r p t e Les s ries avort es doivent tre r p t es B Crit res d acceptation des calibrateurs Le tableau ci dessous d finit les crit res RLU des r plicats des calibrateurs n gatif et positif Tigris DTS System Panther System Calibrateur n gatif RLU 18 45 2 0 et lt 60 000 RLU 2 0 et lt 60 000 RLU RLU 1C 16 gt 75 000 et lt 300 000 RLU 2 75 000 et lt 300 000 RLU Calibrateur positif 1 RLU 18 45 2 850 000 et lt 2 200 000 RLU 2 800 000 et lt 2 200 000 RLU RLU IC 16 lt 475 000 RLU lt 475 000 RLU Calibrateur positif 2 RLU 18 45 lt 115 000 RLU lt 115 000 RLU RLU I
96. nt tre transf r s dans un tube de transfert d chantillons Aptima dans les 105 jours suivant le recueil Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 6 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Informations g n rales 3 Avant le transfert les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep doivent tre conserv s entre 2 C et 30 C pendant 30 jours maximum a des temp ratures sup rieures a 8 C 4 Les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep transf r s dans un tube de transfert d chantillons Aptima peuvent tre conserv s entre 2 C et 30 C pendant 60 jours maximum 5 Si une dur e de conservation sup rieure est n cessaire l chantillon cytologique en milieu liquide ThinPrep ou l chantillon cytologique en milieu liquide ThinPrep dilu dans le tube de transfert d chantillon peut tre conserv a une temp rature de 20 C a 70 C pendant 24 mois maximum Echantillons cytologiques en milieu liquide SurePath 1 Transportez les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath entre 2 C et 25 C 2 Les chantillons doivent tre transf r s dans un tube de transfert d chantillons Aptima dans les 7 jours suivant le pr levement 3 Avant le transfert les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath doivent tre conserv s entre 2 C et 25 C 4 Les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath transf r s dans un tube de transfert d chantillons Aptima peuv
97. ont dispose le clinicien Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 23 AW 11504 901 Rev 003 FR R sultats escompt s avec le Tigris DTS System pr valence du mRNA Messager RNA du HPV haut risque Aptima R sultats escompt s avec le Tigris DTS System pr valence du mRNA Messager RNA du HPV a haut risque La pr valence de l infection par le HPV haut risque varie consid rablement et est influenc e par plusieurs facteurs dont le plus important est l ge De nombreuses tudes ont analys la pr valence des HPV en s appuyant sur la d tection du DNA Acide d soxyribonucl ique du HPV cependant peu d tudes valuent la pr valence en s appuyant sur la d tection des mRNA Messager RNA oncog nes du HPV Des femmes provenant de divers sites cliniques n 18 repr sentant une vaste distribution g ographique et une population vari e 10 Etats au sein des Etats Unis ont t inclues dans une tude clinique prospective nomm e essai CLEAR afin d valuer le test Aptima HPV assay qui d tecte 14 types de HPV a haut risque Les chantillons des femmes inclues dans l essai CLEAR disposant de r sultats de Aptima HPV assay positifs ont t valu es avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay dans une tude clinique s par e La pr valence du HPV 16 18 et 45 ainsi que des 11 types restants du HPV a haut risque observ s dans l tude clinique s est fond e sur les r sultats des tests men s avec le
98. ou 18 45 3 3 38 4 2 6 225 9 3 5 47 Positif aux autres HPV HR 1 3 9 4 0 7 29 8 tan 0 8 0 4 N gatif au HPV HR 0 6 1 1 0 1 2 2 Cl intervalle de confiance HR a haut risque Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 35 Population NLIM 2 30 ans rapports de vraisemblance pour les l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sultats du Aptima Assay Rapport de vraisemblance Rapport de vraisemblance CI 95 CI 95 J 4 8 7 4 Positif au HPV 16 et ou 18 45 2 1 8 5 3 3 12 0 p 1 5 1 5 Positif aux autres HPV HR 0 7 2 5 0 5 2 9 PE 0 4 0 1 N gatif au HPV HR 0 2 0 8 0 0 0 6 CI intervalle de confiance HR haut risque Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 55 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide SurePath Des chantillons cytologiques en milieu liquide
99. ou 8 8 3 34 5 9 2 34 pos HPV 18 45 HPV 18 45 2 2 17 8 1 0 13 3 Pos HPV 16 Pos HPV 16 0 0 0 17 0 0 0 17 n g HPV 18 45 uniquement 0 0 15 5 0 0 14 3 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 17 6 3 17 11 8 2 17 pos HPV 18 45 uniquement 3 2 35 4 1 3 27 0 one Pos HPV 16 Pos HPV 16 et os os e pos HPV 18 45 18 45 SOE oo 00 A 4 0 5 124 2 4 3 124 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 1 7 6 2 0 7 4 2 5 1 8 158 3 2 5 158 Pos ou n g Pos HPV HR 3 2 6 1 1 5 4 0 cb z 0 5 1 217 0 5 1 217 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 0 1 9 0 0 1 7 Pr valence 2 4 9 375 1 6 6 375 Pos HPV 16 et ou Pos HPV 16 et ou 14 8 4 27 14 8 4 27 pos HPV 18 45 HPV 18 45 4 7 27 3 5 1 22 8 Pos HPV 16 Pos HPV 16 28 6 4 14 28 6 4 14 n g HPV 18 45 uniquement 6 3 50 7 6 4 46 5 N g HPV 16 Pos HPV 18 45 0 0 0 13 0 0 0 13 pos HPV 18 45 uniquement 0 0 20 1 0 0 17 1 vate Pos HPV 16 Pos HPV 16 et os os e pos HPV 18 45 18 45 0100 3 02 00 2 7 3 113 0 9 1 113 N g HPV 16 18 45 Pos autres HPV HR 0 7 5 8 0 0 3 1 5 0 7 140 3 6 5 140 Pos ou n g Pos HPV HR 2 6 7 0 1 9 4 2 se 7 A 1 4 4 288 0 0 0 288 N gatif N g HPV 16 18 45 N g HPV HR 0 5 2 5 0 0 0 8 Pr valence 2 6 11 428 1 2 5 428 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif S O sans obj
100. ouveau l assemblage de flacons en l inclinant un angle de 45 pour minimiser la formation de mousse figure 2 tape 5 Laissez la totalit du liquide retourner dans le flacon en plastique i Retirez le collet de reconstitution et le flacon en verre figure 2 tape 6 j Rebouchez le flacon en plastique Notez les initiales de l op rateur ainsi que la date de reconstitution sur l tiquette figure 2 tape 7 k Jetez le collet de reconstitution et le flacon figure 2 tape 8 Avertissement vitez de faire de la mousse en reconstituant les r actifs La mousse interf re avec le d tecteur de niveau du Panther Syst me Remarque M langez bien les r actifs sonde d amplification enzymatiques et de s lection en les retournant en douceur avant de les charger sur le syst me Evitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 16 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Panther Syst me N en it YA Figure 2 Processus de reconstitution du Panther Systeme 2 Pr paration de la solution de r actif de capture de cible working Target Capture Reagent WTCR a b Faites correspondre les flacons appropri s de TCR et de IC V rifiez les num ros de lot des r actifs sur la fiche de code barres du lot de r f rence pour vous assurer que les r actifs appropri s du kit se correspondent Ouvrez le flacon de TCR e
101. panel d examen histologique consensuel R sultat du Diagnostic du panel d examen histologique consensuel x R sultats du test IE Aptima HPV Interpr tation i ae Assay AHPV GT Ind termin Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancer Total Pos HPV 16 n g HPV 18 45 Pos HPV 16 1 27 18 11 14 0 71 N g HPV 16 Pos F pos HPV 18 45 HPV 18 45 3 a3 i 3 3 1 af Reon Pos HPV 16 Pos HPV 16 os os pos HPV 18 45 et 18 45 2 1 i 0 N g HPV 16 Pos autres n g HPV 18 45 HPV HR z 125 E 23 10 9 233 Total 6 176 105 38 28 1 354 LT N g HPV N gatif 16 18 45 N g HPV HR 13 458 75 8 4 0 558 Total 19 634 180 46 32 1 912 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay CIN1 n oplasie intra pith liale cervicale de grade 1 HR haut risque N g n gatif Pos Positif Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux valides lors du test final ou apr s la r solution des r sultats initiaux non valides par la proc dure 19 femmes se sont rendues a la consultation de colposcopie mais n ont pas pu b n ficier d un diagnostic pour les raisons suivantes lt 5 chantillons de biopsie ont tous r v l des r sultats histologiques normaux CIN1 n 15 aucune biopsie n a t pr lev e n 3 et les lames de biopsie ont t perdues n 1 Toutes les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le
102. par le Aptima HPV assay par exemple les types de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 et 68 Les r sultats de 539 femmes valuables suppl mentaires g es de 21 ans ou plus avec des r sultats cytologiques ASC US se sont r v l s n gatifs avec le Aptima HPV assay r alis sur le Panther Syst me Un r sultat n gatif avec le Aptima HPV assay signale qu aucun des 14 types haut risque du HPV n est pr sent l chantillon est alors d sign comme n gatif avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me aux fins de l analyse La pr valence des l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 chez les femmes valuables pr sentant des r sultats cytologiques ASC US s levait 9 1 et 3 8 respectivement Fond s sur le test men sur le Panther Syst me les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont pr sent s dans le tableau 23 et compar s aux r sultats du Aptima HPV assay et du diagnostic du panel d examen histologique consensuel Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 46 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Syst me Assay Tableau 23 Population ASC US 2 21 ans r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par rapport au diagnostic du panel d examen histologique consensuel R sultat du R sultat du test ae Diagnostic du panel d examen histologique consensuel test HPV Interpr tation 7 ane Aoti AHPV GT Ind termin
103. port au diagnostic du panel d examen histologique consensuel R sultat du A Diagnostic du panel d examen histologique consensuel R sultats du test Pree Aptima HPV A Interpr tation Assay AHPV GT Ind termin Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancer Total Pos HPV 16 n g HPV 18 45 Pos HPV 16 2 27 0 0 3 1 33 N g HPV 16 Pos HPV pos HPV 18 45 18 45 1 28 i 1 o 2 4 ORA Pos HPV 16 Pos HPV 16 os os pos HPV 18 45 et 18 45 0 9 i 9 9 X 0 N g HPV 16 Pos autres n g HPV 18 45 HPV HR 16 218 i i 9 293 Total 19 271 12 5 7 3 317 Eai N g HPV N gatif 16 18 45 N g HPV HR 25 483 17 4 1 0 530 Total 44 754 29 9 8 grer 847 AHPV GT Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay HR haut risque Pos Positif N g n gatif Tous les chantillons disposaient de r sultats finaux valides lors du test initial ou apr s la r solution des r sultats initiaux non valides par la proc dure 44 femmes se sont rendue une consultation de colposcopie mais n ont pas pu b n ficier d un diagnostic pour les raisons suivantes aucun consensus n a pu tre atteint en raison d chantillons inad quats n 28 aucune biopsie n a t pr lev e en raison de facteurs sous jacents n 13 aucune biopsie n a t pr lev e ou examin e en raison d une erreur n 3 Toutes les femmes avec des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comm
104. r ml dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent PCAL2 Calibrateur positif 2 HPV 16 18 45 Transcrit in vitro de HPV 16 non infectieux a 1000 copies par ml dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent NCAL Calibrateur n gatif HPV 16 18 45 Solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 5 tubes 5 tubes Mat riel requis mais disponible s par ment Remarque Les r f rences du mat riel disponible chez Hologic sont indiqu es sauf indication contraire Panther Syst me Kit pour s ries Panther Kit de liquides pour test Aptima Solution de lavage Aptima tampon pour solution de d sactivation Aptima et r actif huileux Aptima Kit Auto Detect Aptima Unit s multi tube Multi Tube Units MTU Kit de sacs pour d chets Panther Couvre d chets Panther Embouts 1000 ul conductifs d tecteur de liquide Kit de transfert d chantillons Aptima Kit de collecte et de transport Aptima pour chantillon cervical Bouchons p n trables Aptima Bouchons non p n trables de remplacement Bouchons de rechange pour coffrets de 100 tests Solutions de reconstitution pour r actif d amplification et r actif sonde Solution de reconstitution pour r actif enzymatique TCR et r actif de s lection Eau de javel solution d hypochlorite de sodium 5 ou 0 7 M minimum Gants jetables Kit de solution de transfert Aptima uniquement pour les chantillons SurePath Mat riel optionne
105. rne du HPV 16 18 45 Transcrit de RNA non infectieux dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent 1 flacon Bo te temp rature ambiante Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay conserver entre 15 C et 30 C d s r ception Symbole Composant Quantit AR Solution de reconstitution de l amplification du HPV 16 18 45 Solution aqueuse contenant des conservateurs 1 flacon ER Solution de reconstitution enzymatique du HPV 16 18 45 Solution tamponn e HEPES contenant un surfactant et du glyc rol 1 flacon PR Solution de reconstitution de sonde du HPV 16 18 45 Solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent 1 flacon S R actif de s lection du HPV 16 18 45 Solution tamponn e de borate 600 mM contenant un surfactant TCR R actif de capture de cible du HPV 16 18 45 Acide nucl ique non infectieux dans une solution tamponn e contenant une phase solide lt 0 5 mg ml Collets de reconstitution 1 flacon 1 flacon 3 Fiche des codes barres de lot de r f rence 1 fiche Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 14 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Panther Syst me Boite de calibrateurs Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay n de r f 303235 conserver entre 2 C et 8 C d s r ception Symbole Composant Quantit PCAL1 Calibrateur positif 1 HPV 16 18 45 5 tubes Transcrit in vitro de HPV 18 non infectieux a 750 copies pa
106. s avec les deux tests ont t orient es vers une colposcopie pour l valuation initiale Une biopsie CEC a t r alis e sur chacune des femmes ayant subi une colposcopie Des biopsies l emporte pi ce ont t r alis es uniquement sur les l sions visibles m thode dirig e 1 biopsie par l sion Dans l tude NLIM le suivi des femmes ne pr sentant pas de l sions 2 CIN2 au d but de l tude est en cours depuis 3 ans par le biais d examens cytologiques annuels Les femmes r v lant des r sultats cytologiques ASC US ou plus graves pendant la p riode de suivi sont orient es vers une colposcopie bas e sur la m me proc dure de biopsie que celle de l valuation initiale Le statut pathologique a t d termin partir d un panel d examen histologique consensuel fond sur accord d au moins 2 pathologistes experts Le statut cytologique et HPV des femmes tait inconnu des pathologistes experts et aucun ne connaissait les diagnostics histologiques r alis s par l autre Les chercheurs les cliniciens ainsi que les femmes n ont pas eu connaissance des r sultats du Aptima HPV assay et du test DNA HPV disponible dans le commerce jusqu la r alisation de la colposcopie afin d viter les biais Pour valider l usage pr vu du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay soit un test mener automatiquement suite un r sultat positif du Aptima HPV assay les chantillons Pap de suivi r siduels provenant de la totalit
107. s commerciales qui peuvent apparaitre dans ce notice sont des marques commerciales de leurs d tenteurs respectifs 2007 2015 Hologic Inc Tous droits r serv s AW 11504 901 Rev 003 FR 2015 04 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 63 AW 11504 901 Rev 003 FR
108. s du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations corrig es pour tenir compte du biais de v rification 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI 95 CI 95 Pos HPV 16 et ou 18 45 12 9 53 3 par rapport n g HPV HR 3 1 54 6 1 5 gt 999 Pos HPV 16 et ou 18 45 3 0 4 8 par rapport pos autres HPV HR 1 1 8 8 1 2 19 2 Pos autres HPV HR 4 3 11 0 par rapport n g HPV HR 1 2 15 1 0 4 289 2 Pos HPV HR 6 1 20 2 par rapport n g HPV HR 1 8 21 0 0 7 567 7 Pr valence 11 0 8 CI intervalle de confiance HR haut risque Pos Positif N g n gatif Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Tableau 33 Population NLIM 2 30 ans risque relatif de l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay estimations non corrig es 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation du test Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI a 95 CI a 95 Pos HPV 16 et ou 18 45 9 9 50 7 par rapport a n g HPV HR 3 4 28 4 6 2 414 4 Pos HPV 16 et ou 18 45 3 0 4 5 par rapport pos autres HPV HR 1 1 8 2 1 3 15 4 Pos autres HPV HR 3 3 11 3 par rapport n g HPV HR 1 1
109. s ml HPV 66 2 5x10 copies ml HPV 51 2 5x10 copies ml HPV 68 2 5x10 copies ml HPV 52 2 5x10 copies ml Levures protozoaires Candida albicans 1x10 CFU ml Trichomonas vaginalis 1x10 cellules ml Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 41 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Tableau 20 Panel de sp cificit analytique Organismes et concentration ne pr sentant pas de r activit crois e suite Concentration test e ne pr sentant Concentration test e ne pr sentant Organisme pas de r activit Organisme pas de r activit crois e crois e Virus Ad novirus 5 25x10 PFU mI HIV 1 2 5x10 copies ml Cytom galovirus 1 58x10 TCIDgo ml Virus de l herp s simplex 1 3 39x10 TCIDso mI Virus Epstein Barr 1 59x10 TDso mI Virus de l herp s simplex 2 2 29x10 TCIDso mI Autres g notypes du HPV non cibl s HPV 6 2 5x10 copies ml HPV 53 2 5x10 copies ml HPV 11 2 5x10 copies ml HPV 67 2 5x10 copies ml HPV 26 2 5x10 copies ml HPV 69 2 5x10 copies ml HPV 30 2 5x10 copies ml HPV 70 2 5x10 copies ml HPV 34 2 5x10 copies ml HPV 73 2 5x10 copies ml HPV 42 2 5x10 copies ml HPV 82 2 5x10 copies ml HPV 43 2 5x10 copies ml HPV 85 2 5x10 copies ml HPV 44 2 5x10 copies ml CFU unit formatrice de colonie PFU unit formatrice de plaque TD
110. saient de r sultats valides avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Parmi ces 515 femmes 317 ont subi une colposcopie Quinze 15 femmes pr sentaient des l sions 2 CIN2 et 10 des l sions 2 CIN3 283 femmes pr sentaient une histologie normale CIN1 19 femmes avaient un tat pathologique ind termin Sur les 298 femmes valuables avec un tat pathologique concluant et des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay 61 avaient des r sultats positifs ave le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay indiquant la pr sence du HPV 16 et ou 18 45 237 avaient des r sultats n gatifs indiquant la pr sence d un ou plusieurs des 11 autres types de HPV haut risque Par ailleurs 505 femmes valuables suppl mentaires g es de 30 ans ou plus avec des r sultats cytologiques NLIM et un tat pathologique concluant ont pr sent des r sultats n gatifs avec le Aptima HPV assay pendant l essai CLEAR Un r sultat n gatif avec le Aptima HPV assay signale qu aucun des 14 types haut risque du HPV n est pr sent ces femmes ont donc t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay par rapport aux r sultats du Aptima HPV assay et du diagnostic du panel d examen histologique consensuel sont pr sent s dans le tableau 7 Tableau 7 Population NLIM 2 30 ans r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay par rap
111. sitif au HPV 16 et ou 18 45 par 2 0 Positif au HPV 16 et ou 18 45 par 3 9 rapport a positif aux autres HPV HR 0 7 5 4 rapport a positif aux autres HPV HR 1 6 9 5 Positif aux autres HPV HR par 6 6 Positif aux autres HPV HR par 3 2 rapport a n gatif au HPV HR 1 6 27 1 rapport a n gatif au HPV HR 0 8 12 8 Positif au HPV HR par 10 7 Positif au HPV HR par 7 4 rapport a n gatif au HPV HR 3 3 35 1 rapport a n gatif au HPV HR 2 3 24 3 Pr valence 4 0 Pr valence 5 0 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 56 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performance du Panther Systeme Assay Performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec des chantillons recueillis dans des kits de pr l vement et de transport pour chantillon cervical La performance du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t valu e l aide d chantillons CSCT recueillis dans des kits de pr levement et de transport pour chantillon cervical pr lev s sur des femmes orient es vers une visite de suivi a la suite d un r sultat anormal a un test de Pap Les chantillons ont d abord t test s avec le Aptima HPV assay n 651 Les chantillons dont les r sultats se sont r v l s positifs avec le Aptima HPV assay n 414 ont ensuite t test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Tigris DTS System et sur le Panther Syst me La concordance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay pour la d tectio
112. t RLU du HPV 18 45 lt 3 000 000 S CO du HPV 16 2 1 00 et RLU du IC du HPV 16 lt 4 000 000 et S CO DU HPV 18 45 lt 1 00 S CO du HPV 16 2 1 00 et Positif 16 RLU du IC du HPV 16 lt 4 000 000 et Positif 18 45 S CO du HPV 18 45 2 1 00 et RLU du HPV 18 45 lt 3 000 000 S CO du HPV 16 lt 1 00 et S CO du HPV 18 45 lt 1 00 et RLU du IC du HPV 16 lt seuil IC N gatif 16 N gatif 18 45 N gatif 16 Positif 18 45 Positif 16 N gatif 18 45 Non valide ou RLU du IC du HPV 16 gt 4 000 000 ou RLU du HPV 18 45 gt 3 000 000 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 21 AW 11504 901 Rev 003 FR Limites Aptima Limites A B Les types d chantillons autres que ceux qui sont identifi s dans l usage pr vu n ont pas t valu s La performance du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay n a pas t valu e chez les personnes vaccin es contre le HPV Le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay n a pas t valu dans les cas d abus sexuel soup onn La pr valence de l infection au HPV dans une population donn e peut affecter la performance Les valeurs pr dictives positives diminuent quand la population test e a un taux de pr valence bas ou que les individus n ont pas de risque d infection Les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep contenant moins de 1 ml apr s la pr paration de la lame du test ThinPrep Pap sont consid r s comme
113. t posez le bouchon sur une surface de travail propre et couverte Ouvrez le flacon de IC et versez la totalit du contenu dans le flacon de TCR Il est normal qu une petite quantit de liquide reste dans le flacon de IC Rebouchez le flacon de TCR et faites tournoyer d licatement la solution pour m langer le contenu Evitez de faire de la mousse pendant cette tape Notez les initiales de l op rateur ainsi que la date du jour sur l tiquette Jetez le flacon de IC et son bouchon Un pr cipit peut se former dans le wTCR et produire des r sultats non valides dus a des erreurs de v rifications du volume Il est possible de dissoudre le pr cipit en chauffant le WTCR entre 42 C et 60 C jusqu 90 minutes maximum Laissez le wTCR parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit n a pas disparu 3 Pr paration du r actif de s lection a V rifiez le num ro de lot du r actif sur la fiche des codes barres du lot de r f rence pour vous assurer qu il appartient au kit Si le r actif de s lection contient un pr cipit chauffez le 60 C 1 C pendant 45 minutes maximum pour faciliter la dissolution du pr cipit M langez d licatement le flacon toutes les 5 a 10 minutes Laissez le r actif de s lection parvenir a temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu Remarque M langez bien
114. t que le pr cipit n a pas disparu 3 Pr paration du r actif de s lection a V rifiez le num ro de lot du r actif sur la fiche des codes barres du lot de r f rence pour vous assurer qu il appartient au kit Si le r actif de s lection contient un pr cipit chauffez le 60 C 1 C pendant 45 minutes maximum pour faciliter la dissolution du pr cipit M langez d licatement le flacon toutes les 5 10 minutes Laissez le r actif de s lection Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 11 AW 11504 901 Rev 003 FR Tigris DTS System Aptima parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu Remarque M langez bien les r actifs en les retournant doucement avant de les charger dans le syst me Evitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs C Pr paration des r actifs ant rieurement reconstitu s 1 2 Les r actifs sonde d amplification et enzymatiques pr c demment reconstitu s doivent parvenir temp rature ambiante entre 15 C et 30 C avant le d but du test Si le r actif sonde reconstitu contient un pr cipit qui ne se dissout pas temp rature ambiante chauffez le 60 C maximum pendant 1 2 minutes Ne l utilisez pas tant que le pr cipit ou la turbidit n ont pas disparu Si le wTCR contient un pr cipit chauffez le une temp rature entre 42 C et 6
115. tats du Aptima Assay Risque relatif Risque relatif CI 95 CI 95 Positif au HPV 16 et ou 18 45 11 1 22 8 par rapport n gatif au HPV HR 6 2 20 0 8 0 65 6 Positif au HPV 16 et ou 18 45 2 1 4 0 par rapport positif aux autres HPV HR 1 3 3 1 1 9 8 2 Positif aux autres HPV HR 5 4 5 7 par rapport n gatif au HPV HR 2 9 9 9 1 8 18 1 Positif au HPV HR 7 3 11 5 par rapport n gatif au HPV HR 4 2 12 8 4 1 32 2 Pr valence 9 1 81 892 3 8 34 892 CI intervalle de confiance HR haut risque Les femmes dont les r sultats sont n gatifs avec le Aptima HPV assay ont t d sign es comme n gatives avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay aux fins de l analyse Les rapports de vraisemblance 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sont indiqu s dans le tableau 27 Les types de HPV 16 18 et ou 45 ont montr 4 1 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CIN2 et 5 2 fois plus de probabilit d tre pr sents chez une femme avec des l sions 2 CINS Tableau 27 Population ASC US 2 21 ans rapports de vraisemblance pour les l sions 2 CIN2 et 2 CIN3 d apr s les r sultats du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay et du Aptima HPV assay 2 CIN2 2 CIN3 Interpr tation des r sultats du Aptima Assay Rapports de vraisemblance Rapports de vraisemblance CI 95 CI a 95 4 1 5 2
116. teur positif sont n cessaires Un tube de chaque calibrateur peut tre charg dans une quelconque position de portoir d une quelconque rang e du compartiment des chantillons du Panther Syst me Le pipetage des chantillons commence quand l une des deux conditions suivantes est satisfaite a Un calibrateur positif et un calibrateur n gatif sont en cours de traitement par le Panther Syst me b Des r sultats valides pour les calibrateurs sont enregistr s dans le Panther Syst me 2 Une fois que les tubes de calibrateur ont t pipet s et qu ils sont en cours de traitement pour un kit de r actifs sp cifique il est possible de traiter les chantillons avec le kit de r actifs du test associ pendant 24 heures maximum sauf si a Les calibrateurs sont non valides Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 18 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Panther Syst me b Le kit de r actifs du test associ est retir du Panther Syst me c Le kit de r actifs du test associ a d pass ses limites de stabilit 3 Toute tentative de pipeter plus de deux r plicats d un tube de calibrateur peut entra ner des erreurs d insuffisance de volume B Temp rature La temp rature ambiante est d finie comme se situant entre 15 C et 30 C C Poudre de gant Comme avec tout syst me de r actif l exc s de poudre sur certains gants peut entra ner la contamination des tubes ouverts Il est recommand d utiliser des gants sa
117. tif ou Y w Ne 4 a Echantillon clinique 1 HPV 16 Positif 1708 6 100 OT 100 chantillon clinique 1 HPV 18 45 N gatif 1708 6 100 OPT 100 Cellules SiHa 4 cellule et ave 100 108 108 100 162 162 cellules HeLa 0 7 cellules 96 6 100 97 7 100 Cellules SiHa 0 4 cellule et Boshi 99 1 107 108 97 5 158 162 cellules HeLa 7 cellules 94 9 99 8 94 0 99 1 Cellules SiHa 0 4 cellules Positif od q ANS a q F Cellules HeLa 0 7 cellule N gatif 1708 6 100 OPT 100 Cellules MS751 0 2 cellules N gatif TOR 6 100 ve 00 HPV 16 IVT 24 copies Positif ORB 100 E y a pi HPV 18 IVT 26 copies N gatif 1708 6 100 OPT 100 HPV 45 IVT 35 copies N gatif 1708 6 100 OP 100 chantillon clinique 2 HPV 16 Positif su 50 ae re Echantillon clinique 3 HPV 16 Positif Mod q e 810 ts Echantillon clinique 2 HPV 18 45 N gatif 1708 5 100 OPT 100 Echantillon clinique 3 HPV 18 45 N gatif 1708 6 100 1077 100 Cellules SiHa 0 001 cellules N gatif Ne q 001 ou y 0 4 Cellules HeLa 0 001 cellule N gatif 1708 6 100 OPT 100 Cellules MS751 0 006 cellules N gatif 1708 6 100 OPT 100 chantillon clinique 1 n gatif au HPV N gatif 17085 100 OPT 100 Echantillon clinique 2 n gatif au HPV N gatif TOR 6 100 er 100 Echantillon 1 n gatif au Naati 100 107 107 100 162 162 HPV pr par avec PreservCyt 9 96 5 100 97 7 100 chantillon 2 n gatif au de 100 107 107 100 162
118. tifs sonde d amplification enzymatiques et de s lection en les retournant en douceur avant de les charger sur le syst me Evitez la formation de mousse pendant le retournement des r actifs 1 SN f 4 e ISA OO AY 5 6 NAG S lal fa 1 11 Figure 1 Processus de reconstitution du Tigris DTS System 2 Pr paration du WTCR a b Faites correspondre les flacons appropri s de TCR et de IC V rifiez les num ros de lot des r actifs sur la fiche des codes barres du lot de r f rence pour vous assurer que les r actifs appropri s sont associ s Ouvrez le flacon de TCR et posez le bouchon sur une surface de travail propre et couverte Ouvrez le flacon de IC et versez la totalit du contenu dans le flacon de TCR Il est normal qu une petite quantit de liquide reste dans le flacon de IC Rebouchez le flacon de TCR et faites tournoyer d licatement la solution pour m langer le contenu Evitez de faire de la mousse pendant cette tape Notez les initiales de l op rateur ainsi que la date du jour sur l tiquette Jetez le flacon de IC et son bouchon Un pr cipit peut se former dans le wTCR et produire des r sultats non valides dus a des erreurs de v rifications du volume Il est possible de dissoudre le pr cipit en chauffant le WTCR entre 42 C et 60 C jusqu 90 minutes maximum Laissez le WTCR parvenir temp rature ambiante avant l emploi Ne l utilisez pas tan
119. tion des chantillons A Recueil et traitement des chantillons Echantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep 1 l aide de dispositifs de recueil de type balai ou brosse cytologique spatule recueillez les chantillons cervicaux dans des flacons de test ThinPrep Pap contenant de la solution PreservCyt conform ment aux instructions du fabricant 2 Avant ou apr s le traitement avec le ThinPrep 2000 System ou le ThinPrep 3000 System transf rez 1 ml de l chantillon cytologique en milieu liquide ThinPrep dans un tube de transfert d chantillons Aptima conform ment a la notice du kit de transfert d chantillons Aptima Echantillons cytologiques en milieu liquide SurePath 1 Pr levez un chantillon cytologique en milieu liquide SurePath conform ment aux instructions d utilisation du test SurePath Pap et ou du PrepStain System 2 Transf rez l chantillon cytologique en milieu liquide SurePath dans un tube de transfert d chantillons Aptima conform ment aux instructions de la notice du kit de transfert d chantillons Aptima Echantillons de kit de collecte et de transport Aptima pour chantillon cervical Recueillez l chantillon en respectant les instructions d utilisation du kit CSCT B Transport et conservation avant le test Echantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep 1 Transportez les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep entre 2 C et 30 C 2 Les chantillons doive
120. tre r guli rement d contamin s avec une solution d hypochlorite de sodium dos e de 2 5 3 5 0 35 M 0 5 M Consultez la Proc dure de test pour le Tigris DTS System ou la Proc dure de test pour le Panther Syst me pour plus d informations Recommandations concernant les chantillons G Observez des conditions de temp rature ad quates pendant le transport et la conservation des chantillons afin de pr server leur int grit La stabilit des chantillons dans des conditions de transport et de conservation autres que celles recommand es n a pas t valu e H Les dates de p remption figurant sur les kits et les tubes de recueil transfert d chantillon concernent le site de transfert et non I tablissement effectuant les tests Les chantillons collect s transf r s avant ces dates de p remption sont valides pour des tests dans la mesure ou ils ont t transf r s et conserv s conform ment a la notice de test correspondante m me si ces dates de p remption sont d pass es depuis lors l Les chantillons peuvent tre infectieux Respectez les pr cautions universelles lors de la r alisation de ce test Le responsable du laboratoire devra avoir tabli des m thodes de manipulation et d limination des d chets ad quates Seul le personnel ayant regu une formation ad quate pour manipuler des substances infectieuses devra tre autoris a effectuer cette proc dure de diagnostic J vitez
121. u HPV ainsi qu une cha ne de r sidus de d oxyad nosine Lors de l tape d hybridation les r gions sp cifiques de la s quence des oligom res de capture se fixent sur des r gions pr cises des mol cules cibles du mRNA Messager RNA du HPV Le complexe oligom re de capture cible est ensuite captur hors de la solution en ramenant la temp rature de la r action temp rature ambiante Cette r duction de temp rature permet l hybridation de se produire entre la r gion d soxyad nosine de l oligom re de capture et les mol cules poly d soxythimidines li es par covalence aux particules magn tiques Les microparticules y compris les mol cules cibles du MRNA Messager RNA du HPV captur es qui leur sont li es sont attir es sur la paroi du tube r actionnel par des aimants puis le surnageant est aspir Les particules sont lav es afin d liminer la matrice r siduelle de l chantillon qui peut contenir des inhibiteurs d amplification Une fois la capture de cible termin e le mRNA Messager RNA du HPV est amplifi via la TMA une m thode d amplification de l acide nucl ique bas e sur la transcription qui utilise deux enzymes la transcriptase inverse MMLV et la polym rase du RNA T7 La transcriptase inverse sert g n rer une copie du DNA Acide d soxyribonucl ique de la s quence de mRNA Messager RNA cible contenant une s quence promoteur de la polym rase du RNA T7 La polym rase du RNA T7 produit de mu
122. ucus Mucine porcine 0 3 p v Cr me vaginale Estrace cestrog ne 10 piv Hormones intravaginales Cr me Crinone progest rone 1 piv Sang total Sang total 5 viv Leucocytes leucocytes 1x10 cellules ml Solution de lavage l acide A Cide ac tique glacial solution CytoLyt 2 6 viv ac tique glacial concentration dans l chantillon de test chantillon cytologique en milieu liquide ThinPrep dilu e 1 2 9 dans du STM comparable a un chantillon transf r dans un tube de transfert Aptima Lubrifiants personnels contenant du Polyquaternium 15 le sang total a interf r avec le test une concentration de test de 10 viv Ala solution de lavage a l acide ac tique glacial a t pr par e en m langeant 1 volume d acide ac tique glacial avec 9 volumes de solution Cytolyt tel qu indiqu dans le ThinPrep 2000 System Operator s Manual Manuel de l op rateur du ThinPrep 2000 System Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 43 AW 11504 901 Rev 003 FR R sultats escompt s avec le Panther Syst me pr valence du mRNA Messager RNA du HPV haut risque Aptima R sultats escompt s avec le Panther Syst me pr valence du mRNA Messager RNA du HPV haut risque La pr valence d une infection par le HPV haut risque varie consid rablement et est influenc e par plusieurs facteurs dont le plus important est l ge De nombreuses tudes ont analys la pr valence
123. udes ont associ les g notypes 16 18 31 33 35 39 45 51 52 56 58 59 66 et 68 la progression de la maladie Les patientes pr sentant une infection persistante par un de ces types ont un risque plus lev de d velopper une dysplasie cervicale grave ou un carcinome du col de l ut rus Des tudes ont montr que diff rents types de HPV a haut risque entra nent diff rent niveaux de risque en termes de d veloppement d une dysplasie cervicale grave ou d un carcinome du col de l ut rus Dans le monde les types de HPV 16 18 et 45 sont associ s a pr s de 80 de l ensemble des cancers cervicaux invasifs du col de l ut rus Ces trois types sont pr sents dans 75 de la totalit des carcinomes squameux le type 16 plus particuli rement est pr sent dans la plupart 85 de ces infections Dans les ad nocarcinomes les types de HPV 16 18 et 45 sont pr sents dans 80 a 94 des cas et les types 18 et 45 plus particuli rement sont pr sents dans pr s de la moiti de ces infections Il a t signal que la pr sence du HPV de type 18 dans un cancer du col de l ut rus en phase pr coce est associ e un pronostic d favorable Les types de HPV 18 et 45 sont sous d clar s dans les l sions pr canc reuses ce qui peut tre d la pr sence de l sions cach es du canal cervical inaccessibles un examen colposcopique Chez les femmes infect es par les types 16 et ou 18 du HPV le risque
124. un panel d examen histologique consensuel fond sur l accord d au moins 2 pathologistes experts Le statut cytologique et HPV des femmes tait inconnu des pathologistes experts et aucun ne connaissait les diagnostics histologiques r alis s par l autre Les chercheurs les cliniciens et les femmes n ont pas eu connaissance des r sultats du test HPV jusqu la r alisation de la colposcopie afin d viter les biais Pour valider l usage pr vu du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me savoir un test mener automatiquement la suite d un r sultat positif avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 45 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Aptima HPV assay les chantillons cytologiques de suivi r siduels provenant de la totalit des femmes valuables de l tude ASC US et de l tude NLIM pr sentant des r sultats positifs avec le Aptima HPV assay ont t admis pour tre test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me La performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Panther Syst me a t valu e en termes de d tection des l sions 2 CIN2 des n oplasies cervicales intra pith liales de grade 3 ou des maladies cervicales plus graves 2 CIN3 Population ASC US 2 21 ans performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons cytologiques en milieu liquide ThinPrep Au total
125. up s en milieu liquide ThinPrep auxquels ont t ajout es diverses concentrations de transcrits in vitro de HPV ou de cellules de culture infect es par le HPV SiHa HeLa et MS751 ATCC Manassas Virginia Concernant les panels de transcrits in vitro 60 r plicats de chaque taux de copie ont t test s avec chacun des deux lots de r actifs pour un total de 120 r plicats Concernant les panels de lign es cellulaires 30 r plicats de chaque taux de copie ont t test s avec chacun des deux lots de r actifs pour un total de 60 r plicats Le test a eu lieu pendant huit jours avec trois s ries minimum r alis es chaque jour et cinq r plicats d un g notype donn test s dans chaque s rie Le seuil de d tection 95 tableau 39 a t calcul par une analyse de r gression Probit des r sultats de positivit pour chaque panel de dilution Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 57 AW 11504 901 Rev 003 FR Performance du Panther Syst me Assay Aptima Tableau 39 Seuil de d tection du seuil clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay Cible rer ssl HPV 16 23 7 19 1 30 9 HPV 18 26 1 21 2 33 9 HPV 45 34 5 28 5 43 6 SiHa 0 4 0 3 0 7 HeLa 0 7 0 4 1 4 MS751 0 2 0 1 0 3 copies par r action pour les transcrits in vitro et cellules par r action pour les lign es cellulaires Pr cision du test La pr cision du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t
126. utres HPV HR 1 6 9 5 Positif aux autres HPV HR par 7 5 Positif aux autres HPV HR par 3 2 rapport a n gatif au HPV HR 2 0 28 6 rapport a n gatif au HPV HR 0 8 12 8 Positif au HPV HR par 10 0 Positif au HPV HR par 7 4 rapport a n gatif au HPV HR 3 0 32 7 rapport a n gatif au HPV HR 2 3 24 3 Pr valence 4 9 Pr valence 5 0 Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay 36 AW 11504 901 Rev 003 FR Aptima Performances du test avec le Tigris DTS System Performance clinique du Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay avec les chantillons recueillis dans des kits de pr l vements et de transports des chantillons cervicaux Les chantillons CSCT ont t pr lev s sur des femmes lors d un d pistage de routine ou d une visite de suivi ils ont ensuite t test s avec le Aptima HPV assay Les chantillons CSCT r siduels n 378 pour lesquels le r sultat de l Aptima HPV assay tait positif ont t test s avec le Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay sur le Tigris DTS System Le g notype HPV de chaque chantillon a t tabli l aide d un test de g notypage de l ADN Les chantillons pour lesquels les r sultats des tests ADN et Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay ne concordaient pas ont t analys s au moyen d un test RT PCR s quengage valid pour tablir leur statut HPV 16 HPV 18 et HPV 45 La concordance clinique positive et n gative du Aptima HPV 16 18 45 Genotype assay a t d termin

GEN-PROBE APTIMA HPV 16 18/45 Genotype Assay Package Insert

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