FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD7 Clone CBC.37
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1. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD7 Clone CBC 37 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15643 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 117050 002 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD7 Clone CBC 37 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments CD7 is expressed by the majority of peripheral blood T cells NK cells and all thymocytes This antibody is useful for the identification of T cell lymphoma 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist CD7 is a 40 kDa transmembrane single chain glycoprotein belonging to the immunoglobulin superfamily 2 As one of the earliest surface antigens on T and NK cell lineages the presence or absence of CD7 is a useful marker for the classification of T and NK cell malignancies CD7 expression is found on most immature T cell malignant cells i e acute lymphocytic leukemia ALL and T cell lymphobla2. Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen IS643 EFG SSM 2009 06 09 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Die St rke der verwendeten Gewebeschnitte sollte ca 4 um betragen Es ist eine Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8015 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung entparaffinierter formalinfixierter paraffineingebetteter Gewebeschnitte sollte mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Die Vorbehandlung gem der Beschreibung
3. T positifs la CD3 et la CD7 prend toute son importance dans le diagnostic du r le jou par le ganglion lymphatique dans le lymphome cutan lymphocytes T En observant des cas de maladie de Hodgkin n 15 de cat gories diff rentes les cellules n oplasiques taient clairement n gatives et les cellules de Reed Sternberg taient souvent entour es de petits lymphocytes T fortement marqu s Tous les lymphomes B l exception d un sur 35 taient n gatifs l anticorps qui ne marquait que les petits lymphocytes T r actifs Les tumeurs non lympho des n 69 taient invariablement n gatives l exception du marquage attendu des petits lymphocytes T r actifs 1 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD7 Clone CBC 37 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt CD7 wird von den meisten T Zellen im peripheren Blut NK Zellen und allen Thymozyten exprimiert Dieser Antik rper unterst tzt die Identifizierung von T Zelleniymphomen 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Untersuchung mit geeigneten Kontrollen erg nzt und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer Tests vorgenommen werden CD7 ist ein einkettiges transmembranes Glykoprotein mit einem Molekularge
4. aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides R f S3003 IS643 EFG SSM 2009 06 09 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Aufbewahrung 117050 002 Le syst me de visualisation recommand est EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 rempla ant la High pH Target Retrieval Solution de ce kit avec la EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8015 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont preprogrammes dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume d application de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume d application de 300 uL Programme automatique CD7 sans contre coloration ou CD7H avec contre col
5. in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8015 durchf hren F r PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorw rmtemperatur 65 Temperatur und Zeit f r E pitopdemaskierung 97 f r 20 1 Minuten auf 65 abk hlen Das Autostainer Objektktr gergestell mit den Objekttr gern aus dem PT Link Beh lter herausnehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 eintauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im Wash Buffer belassen Paraffineingebettete Schnitte Zur Probenpr paration kann f r Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link auch ein modifiziertes Verfahren verwendet werden Weitere Informationen siehe PT Link Benutzerhandbuch Nach erfolgter F rbung m ssen die Schnitte entw ssert gekl rt und mit permanentem Fixiermittel eingedeckt werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Vorbehandlung oder der anschlie enden immunhistochemischen F rbung nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte auf den Glas Objekttr gern werden Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 welches die High
6. pH Target Retrieval Solution dieses Systems durch EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8015 ersetzt Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 ul Anwendungsvolumen oder FLEXRTU3 300 ul Anwendungsvolumen Autoprogramm CD7 ohne Gegenf rbung oder CD7H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte bei Raumtemperatur durchf hren N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Die optimalen Bedingungen k nnen sich je nach Probe und Pr parationsverfahren unterscheiden und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew
7. r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone CBC 37 1 Isotype IgG2b kappa Lign e Iymphocytaire T CEM ATTC CCL 199 une lign e cellulaire lymphoblasto de T tablie partir d un patient atteint d une leuc mie aigu lymphoblastique 1 L analyse par SDS PAGE d immunoprecipites form s entre le lysat cellulaire CEM et l anticorps montre que l anticorps pr cipite un polypeptide de 40 kDa correspondant la CD7 1 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumul
8. which only small T cells are strongly labeled 1 In tonsil the crowded T cells in the T zone show a strong staining reaction whereas isolated T cells in the germinal centers show a moderate to strong staining reaction Abnormal tissues Among 110 T cell lymphomas examined all T Iymphoblastic lymphomas were strongly positive with the antibody n 15 while only 25 95 of peripheral T cell neoplasms were positive Of note was the diagnostic value of the CD3 CD7 T cell phenotype in the diagnosis of lymph node involvement by cutaneous T cell lymphoma In Hodgkin s disease n 15 of different categories neoplastic cells were clearly negative and Reed Sternberg cells were often surrounded by strongly labeled small T Iymphocytes All but one of 35 B cell lymphomas were negative with the antibody which labeled only small reactive T cells Nonlymphoid tumors n 69 were invariably negative except for the expected labeling of small reactive T cells 1 Pour utilisation lors d un diagnostic in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD7 Clone CBC 37 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Le CD7 est exprim dans la majorit des lymphocytes T du sang p riph rique des cellules NK et dans tous les thymocytes Cet anticorps est utile pour l identification des Iymphomes T 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son ab
9. Autostainer Autostainer Plus Code K8015 Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes de tissus d paraffin s fix s au formol et inclus en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8015 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 temp rature et dur e de restauration de l pitope 97 pendant 20 1 minutes refroidiss ement 65 Retirer le portoir lames et les lames Autostainer de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve p ex PT Link Rinse Station r f PT109 contenant du EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 dilu temp rature ambiante Laisser les lames dans le Wash Buffer pendant 1 5 minutes Coupes incluses en paraffine comme pr paration alternative des chantillons le deparaffinage et la restauration de l pitope peuvent tre r alis s dans le PT Link l aide d une proc dure modifi e Se r f rer aux instructions du Guide d utilisation du PT Link Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l
10. EFG SSM 2009 06 09 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRANCAIS Utilisation pr vue R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni 117050 002 staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display membrane staining Normal tissues In thymus the antibody strongly labels Iymphoid cells in the medulla and cortex In lymph node and tonsil interfollicular T cell areas are strongly labeled No labeling is observed in other normal human tissues in
11. FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 replacing the High pH Target Retrieval Solution from this kit with EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8015 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 uL dispense volume Autoprogram CD7 without counterstaining or CD7H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the IS643
12. ation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur II n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probleme li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako
13. cation des symboks Erl uterung der Symbole Catalogue number Reference catalogue Be stellnumm er gcc Temperature limitation Use by A Limites de temp rature T Utiliser avant Zul ssiger Temper atur bereich Verwendbar bis Gebra uc hsan weis ung beachten In vito diagnostic medical devic e Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer IVD Dispositf medical de diagnostic in vitro V7 Contenu suffisant pour lt n gt tests mal Fabricant ESSEN Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Consult instructions for use Baich code ji Voir les instructions d utilisation LOT Numero de lot Chargenbezeichnung 117050 002 IS643 EFG SSM 2009 06 09 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
14. hough not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8015 Deparaffinized sections Pre treatment of de
15. hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten parallel zu den Patientenproben und nach demselben Protokoll angef rbt werden Als positives Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine Membranf rbung auf Gesundes Gewebe Beim Thymus ist der Antik rper ein wirksamer Marker f r lymphoide Zellen in Medulla und Kortex Bei Lymphknoten und Mandelgewebe werden Bereiche interfollikul rer T Zellen stark markiert Keine Markierung wird bei anderen gesunden menschlichen Geweben beobachtet in denen lediglich die kleinen T Zellen stark markiert werden 1 In den Mandeln zeigten die eng gepackten T Zellen in der T Zone eine starke F rbung wogegen die isolierten T Zellen in den Keimzentren eine m ige bis starke F rbung aufwiesen Pathologisches Gewebe Von 110 untersuchten T Zell Lymphomen reagierten alle T Iy
16. ler Maus Antik rper gel st in einem Puffer der Stabilisierungsprotein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon CBC 37 1 Isotyp IgG2b Kappa CEM T Zelllinie ATCC CCL 199 eine T Iymphoblastoide Zelllinie gewonnen aus einem Patienten mit akuter Lymphoblastenleuk mie 1 Die SDS PAGE Analyse von Immunpr zipitaten die zwischen CEM Zelllysat und dem Antik rper gebildet werden zeigt dass der Antik rper ein Polypeptid von 40 kDa ausf llt welches CD7 entspricht 1 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle
17. mphoblastischen Lymphome stark positiv mit dem Antik rper n 15 dagegen waren nur 25 von 95 peripheren T Zell Neoplasien positiv Interessant war der diagnostische Wert des CD3 positiven CD7 T Zell Ph notyps bei der Diagnose einer Lymphknotenbeteiligung beim kutanen T Zell Lymphom Bei verschiedenen Kategorien von Morbus Hodgkin n 15 waren neoplastische Zellen eindeutig negativ w hrend Reed Sternberg Zellen oft von stark markierten kleinen T Lymphozyten umgeben waren Von 35 B Zell Lymphomen reagierten mit einer einzigen Ausnahme alle negativ auf den Antik rper der nur kleine reaktive T Zellen markierte Nicht Iymphoide Tumore n 69 waren durchg ngig negativ abgesehen von der erwarteten Markierung kleiner reaktiver T Zellen 1 References References Literatur 1 Al Saati T Alibaud L Lamant L Boyes J March M Delsol G A new monoclonal anti CD7 antibody reactive on paraffin sections Appl Immunohistochem Mol Morphol 2001 9 289 96 2 Bowen MA TC8 CD7 Workshop Panel Report In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing Inc 1997 p 62 3 3 Sempowski GD Lee DM Kaufman RE Haynes BF Structure and function of the CD7 molecule Crit Rev Immunol 1999 19 331 48 Explanation o fsymbols Expli
18. oration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp amp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positif
19. paraffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8015 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 epitope retrieval temperature and time 97 for 20 1 minutes cool down to 65 Remove Autostainer sl ide rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code S3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision
20. s et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter les sch mas de r action d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration membranaire Tissus sains dans le thymus l anticorps marque fortement les cellules lympho des de la medulla et du cortex Dans le ganglion lymphatique et l amygdale les zones interfolliculaires des lymphocytes T sont fortement marqu es Aucun marquage n est observ dans les autres tissus humains normaux dans lesquels seuls les petits lymphocytes T sont fortement marqu s 1 Dans l amygdale les amas de lymphocytes T dans la zone T pr sentent une forte coloration alors que les lymphocytes T isol s ainsi que les macrophages dans les centres germinatifs pr sentent une coloration mod r e forte Tissus tumoraux sur les 110 lymphomes lymphocytes T examin s tous les lymphomes lymphoblastiques lymphocytes T taient fortement positifs l anticorps n 15 alors que seuls 25 n oplasmes lymphocytes T p riph riques sur 95 taient positifs La valeur diagnostique du ph notype des lymphocytes
21. sence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi La CD7 est une glycoprot ine transmembranaire de 40 kDa cha ne simple appartenant la superfamille des immunoglobulines 2 tant l un des antig nes de surface les plus pr coces sur les lign es lymphocytaires T et NK la pr sence ou l absence de la CD7 est un marqueur utile la classification des tumeurs malignes lymphocytes T et NK La CD7 est exprim e sur la plupart des cellules immatures dans les cas de tumeurs malignes lymphocytes T c est dire les leuc mies lymphocytaires aigu s ALL et les Iymphomes lymphoblastiques lymphocytes T On trouve aussi la CD7 dans les leuc mies cellules NK y compris les syndromes de leuc mie lymphocytaire aigu positifs au CD16 et au CD56 et le syndrome de lymphocytose grands lymphocytes granuleux avec cellules malignes CD7 et NK 3 La mol cule CD7 est absente d un sous ensemble de lymphocytes T humains dans certaines conditions physiologiques et pathologiques Ainsi une augmentation du nombre de lymphocytes T n gatifs la CD7 peut tre observ e dans certaines maladies cutan es inflammatoires alors que la CD7 est absente de bon nombre de n oplasmes lymphocytes T matures en particulier ceux du sous type cutan primaire 1 Se
22. stic Iymphoma cells CD7 is also found in NK cell leukemias including ALL syndromes that are CD16 CD56 and the syndrome of large granular lymphocytosis with malignant CD7 NK cells 3 The CD7 molecule is absent in a subset of human T cells under certain physiologic and pathologic conditions Thus an increase in CD7 negative T cells can be seen in some inflammatory skin diseases and CD7 is absent in a substantial part of mature T cell neoplasms especially of primary cutaneous subtype 1 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone CBC 37 1 Isotype IgG2b kappa CEM T cell line ATCC CCL 199 a T Iymphoblastoid cell line established from a patient with acute lymphoblastic leukemia 1 SDS PAGE analysis of immunoprecipitates formed between CEM cell lysate and the antibody shows that the antibody precipitates a 40 kDa polypeptide corresponding to CD7 1 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations t
23. wicht von 40 kDa das zur Superfamilie der Immunglobuline geh rt 2 Da es bei Zellen die von T und NK Zellen abstammen als eines der fr hesten Oberfl chenantigene auftritt ist das Vorhandensein bzw Fehlen von CD7 ein n tzlicher Marker f r die Klassifizierung von T Zell bzw NK Zellmalignomen Eine CD7 Expression wird bei den meisten unreifen malignen T Zellen beschrieben beispielsweise bei der Akuten Lymphatischen Leuk mie ALL und bei Iymphoblastischen T Zell Lymphomen CD7 findet sich ebenfalls bei NK Zell Leuk mien wie dem CD16 bzw CD56 positiven ALL Syndrom und der grobgranul ren Lymphozytose mit malignen CD7 positiven NK Zellen 3 Unter bestimmten physiologischen und pathologischen Bedingungen fehlt das CD7 Molek l bei einer Untergruppe menschlicher T Zellen So wird ein Anstieg der CD7 negativen Zellen bei einigen entz ndlichen Hauterkrankungen beobachtet CD7 fehlt ferner bei zahlreichen Neoplasien aus reifen T Zellen insbesondere bei denen des prim r kutanen Subtyps 1 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder der Gebrauchsanweisung f r das jeweilige IHC Detektionsverfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Proben 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklona
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