FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD23 Clone DAK
Contents
1. Rein 3 0 3 Muscle cardiaque 3 0 3 Thyro de 3 Muscle squelettique 3 0 3 Amygdale Nerf p riph rique 3 0 3 Uterus 3 0 3 Tissus tumoraux 7 l anticorps a marqu 8 cas sur 9 de LLC B et 3 cas sur 3 de lymphomes folliculaires Aucun marquage n a t observ dans 3 lymphomes du manteau P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 4 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 DEUTSCH Zweckbestimmung Synonym fur das Antigen Zusammenfassung und Erklarung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Hinweise und VorsichtsmaBnahmen Lagerung Kurzanleitung Probenvorbereitung Farbeverfahren 122095 001 Zur Verwendung fur In vitro Untersuchungen FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD23 Clone DAK CD23 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Geraten bestimmt Antik rper gegen CD23 dienen zum Nachweis von normalen B Lymphozyten und malignen Lymphomen Zusammen mit einem Antik rper Panel ist Anti CD23 besonders nutzlich fur die Differenzierung zwischen der chronisch lymphatischen B Zell Leukamie dem kleinzelligen lymphozytischen B Zelllymphom und dem Mantelzelllymphom 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden Farbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kont2. 9 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD23 Clone DAK CD23 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS781 ENGLISH Intended use Synonym for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Quick guide Specimen preparation Staining procedure 122095 001 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD23 Clone DAK CD23 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments Antibodies to CD23 are useful for the identification of both normal B lymphocytes and malignant lymphomas Together with a panel of antibodies anti CD23 is particularly useful for differentiation between B cell chronic lymphocytic leukemia small lymphocytic lymphoma and mantle cell lymphoma 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist FceRll BLAST 2 low affinity IgE receptor 2 3 CD23 is a 45 kDa type II membrane glycoprotein belonging to the C type lectin family and is identical to the low affinity IgE receptor Fc RII found on B cells 4 5 CD23 is primarily expressed on B cells and monocytes including a strong expression on EBV trans
3. anticorps marque une bande de 45 kDa correspondant au CD23 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaNs produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations pour former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique respecter les proc dures de manipulation appropri es 4 Porter un quipement de protection individuelle appropri pour viter tout contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la d ate de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n existe pas de signe particulier pour indiquer l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patients Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de s
4. 3 Bone marrow 3 0 3 Pancreas 3 0 3 Breast 3 0 3 Parathyroid 3 0 3 Cerebellum 3 0 3 Pituitary 3 0 3 Cerebrum 3 0 3 Prostate 3 0 3 Cervix 3 0 3 Salivary gland 3 1 3 Ductal epithelial cells Colon 3 0 3 Skin 3 0 3 Small intestine 2 2 2 Lymphoid tissue 10 membrane Spleen 3 1 3 Lymphoid tissue 15 membrane Kidney 3 0 3 2 3 Lymphoid tissue 50 membrane Liver 3 0 3 Stomach 2 0 2 Lung 3 3 3 Macrophages Testis 3 0 3 Mesothelial cells 2 0 2 Thymus 3 3 3 Scattered cells medulla cytoplasmic Muscle cardiac 3 0 3 Thyroid 3 1 3 Follicular epithelial cells Muscle skeletal 3 0 3 Tonsil 3 3 3 Nerve peripheral 3 0 3 Uterus 3 0 3 Abnormal tissues 7 The antibody labeled 8 9 cases of B CLL and 3 3 follicular lymphomas No labelling was observed in 3 mantle cell lymphomas Esophagus 3 0 3 P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 2 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 FRANCAIS Int r t Synonyme de l antig ne R sum et explication R actif fourni Immunog ne Sp cificit Pr cautions d emploi Conservation Guide rapide Pr paration des chantillons Proc dure de coloration 122095 001 Pour diagnostic in vitro L anticorps FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD23 Clone DAK CD23 Ready to Use D
5. 9 Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 5 1 minutes Auxiliary step 10 Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes 11 Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX Substrate Working Solution Codes DM823 and DM827 for 5 12 Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX Substrate Working Solution Codes DM823 and DM827 for 5 13 Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes 14 Counterstain slide with EnVision FLEX Hematoxylin Code K8018 for 5 1 minutes 15 Rinse in deionized water for 1 5 minutes 16 Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 5 1 minutes 17 Rinse in deionized water for 1 5 minutes 18 Mount slides with permanent mounting medium Programming grid for recommended assay NND minutes 1 1 minutes Programming Grid Edit lists Exit Help DC 3400 9808 03 Protocol Template Next af DAKO CORPORATION For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory
6. If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Controls Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 V3 40 IHC 26 08 11 10 22 Cells labeled by the antibody display membrane staining Normal tissues 7 In tonsil B cells in the mantle zone show a weak to moderate staining reaction and the follicular dendritic reticulum cells in the germinal centers show a moderate to strong staining reaction Tissue Type Positive Tissue Elements Tissue Type Positive Tissue Elements tested tested Adrenal 3 0 3 Ovary 3 0
7. la coupe de tissu avec 200 uL de tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 5 minutes 1 minute tape dite Auxiliary 10 Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 a 5 minutes 11 Incuber la coupe de tissu avec 200 uL de solution EnVision FLEX Substrate Working Solution r f DM823 et DM827 pendant 5 minutes 1 minute 12 Incuber la coupe de tissu avec 200 uL de solution EnVision FLEX Substrate Working Solution r f DM823 et DM827 pendant 5 minutes 1 minute 13 Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 5 minutes 14 Proc der une contre coloration de la lame avec le produit EnVision FLEX Hematoxylin r f K8018 pendant 5 minutes 1 minute 15 Rincer dans de l eau d ionis pendant 1 a 5 minutes 16 Incuber la coupe de tissu avec 200 uL de tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 5 minutes 1 minute 17 Rincer dans de l eau d ionis pendant 1 5 minutes 18 Monter les lames avec un milieu de montage permanent Grille de programmation pour le dosage recommand oo Nm ONE DB Programming Grid Slides File Edit lists Copy Be Auto Neg Ctl Pos ctl Help DC 3400 9808 03 Protocol Template Next 3 4 0 IHC 26 08 11 10 22 al DAKO CORPORATION Pour plus de d tails se reporter au Manuel de l op rateur
8. procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended After staining the slides should be mounted using permanent mounting medium Visualization The recommended visualization system is EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 1 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics 122095 001 Note Use diluted EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 for HIER Program Use the protocol given below Reagents must be appropriately diluted before use All steps should be performed at room temperature 20 25 1 Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent Code DM821 for 5 1 minutes Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes Incubate tissue section with 200 uL Primary Antibody Code IS082 for 20 1 minutes Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes EnVision FLEX Mouse LINKER 200 300 uL 15 minutes Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes Incubate tissue section with 200 uL EnVision FLEX HRP Code DM822 for 20 1 minutes Rinse in EnVision FLEX Wash Buffer Code K8007 for 1 5 minutes
9. product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date st amped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Step Comments gt Fixation Formalin oS SOS Negative Control FLEX Negative Control Mouse Dako 20 min incubation RES Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 i 20 min incubation 15 min Mouse LINKER incubation 2x5 min DAB incubation EnVision FLEX Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Control Tissue Membrane staining FLEX IHC M
10. 8007 inkubieren 10 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len 11 Gewebeschnitte 5 1 Minuten mit 200 uL EnVision FLEX Substrate Working Solution Code Nr DM823 und DM827 inkubieren 12 Gewebeschnitte 5 1 Minuten mit 200 uL EnVision FLEX Substrate Working Solution Code Nr DM823 und DM827 inkubieren 13 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len 14 Objekttr ger 5 1 Minuten mit EnVision FLEX Hematoxylin Code Nr K8018 gegenf rben 15 1 5 Minuten mit entionisiertem Wasser sp len 16 Gewebeschnitte 5 1 Minuten mit 200 uL EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 inkubieren 17 1 5 Minuten mit entionisiertem Wasser sp len 18 Objekttr ger mit einem permanenten Fixiermittel fixieren Or ON eI Programmierraster fur empfohlenes Assay Programming Grid m Pos Ctl Help DC 3400 9808 03 Protocol Template Next 3 4 0 IHC 26 08 11 10 22 af DAKO CORPORATION Nahere Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Gerat entnehmen Bei Farbedurchlaufen mit 10 oder weniger Objekttragern sollte der Zusatz Schritt auf rinse buffer eingestellt werden F r Farbedurchlaufe mit mehr als 10 Objekttragern den Zusatz Schritt auf none einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen La
11. V White cell differentiation antigens Proceedings of the 5th International Workshop and Conference 1993 Nov 3 7 Boston USA Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1995 p 530 3 Pallesen G B2 5 The distribution of CD23 in normal human tissues and in malignant lymphomas In McMichael AJ Beverley PCL Cobbold S Crumpton Mu Gilks W Gotch FM et al editors Leucocyte typing Ill White cell differentiation antigens Proceedings of the 3rd International Workshop and Conference 1986 Sep 21 26 Oxford England Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1987 p 383 6 M7312 Document D04962 Report on file Explanation of symbols Explication des symboles Erlauterung der Symbole Catalogue number Temperature limitation Use by R f rence catalogue Limites de temp rature Utiliser avant Bestellnummer Zulassiger Temperaturbereich Verwendbar bis In vitro diagnostic medical device Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer Dispositif m dical de diagnostic in vitro Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant In vitro Diagnostikum Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Consult instructions for use Batch code Voir les instructions d utilisation Num ro de lot Gebrauchsanweisung beachten Chargenbezeichnung 122095 001 P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 7 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
12. ako Autostainer Autostainer Plus est destin a tre utilis en immunohistochimie avec les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus Les anticorps dirig s contre le CD23 sont utiles pour identification des lymphocytes B normaux et des lymphomes malins Coupl avec un panel d anticorps l anticorps anti CD23 est particuli rement utile pour permettre la diff renciation entre la leuc mie lymphocytaire chronique a cellules B le lymphome lymphocytaire a petits lymphocytes et le lymphome du manteau 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi FceRll BLAST 2 r cepteur de faible affinit des IgE 2 3 Le CD23 est une glycoprot ine membranaire de type II de 45 kDa appartenant la famille des lectines de type C identique au r cepteur de faible affinit des IgE FcXRIl retrouv sur les lymphocytes B 4 5 Le CD23 est exprim principalement sur les lymphocytes B et les monocytes son expression est galement forte sur les lymphoblastes B transform s par l EBV 2 3 La stimulation par les interleukines 4 et 13 augmente l expression du CD23 sur les lymphocytes B 4 Sur les lymphocytes B le CD23 est exprim de mani re s lective sur les cellules porteuses la fois d IgM s cr
13. auf die Objekttrager aufgebracht werden Visualisierung Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 Hinweis Verd nnte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 f r HIER verwenden Programm Das unten aufgef hrte Protokoll verwenden Reagenzien m ssen vor dem Einsatz entsprechend verd nnt werden Alle Schritte bei Raumtemperatur 20 25 durchf hren P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 5 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Auswertung der F rbung Leistungseigenschaften 122095 001 Gewebeschnitte mit 200 uL EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent Code Nr DM821 f r 5 1 Minuten inkubieren 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len Gewebeschnitt 20 1 Minuten mit 200 uL Prim rantik rper Code Nr IS082 inkubieren 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len EnVision FLEX Mouse LINKER 200 300 uL 15 Minuten 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len Gewebeschnitte 20 1 Minuten mit 200 uL EnVision FLEX HRP Code Nr DM822 inkubieren 1 5 Minuten in EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K8007 sp len 9 Gewebeschnitte 5 1 Minuten Zusatz Schritt mit 200 uL EnVision FLEX Wash Buffer Code Nr K
14. bor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Gegenf rbung Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Eindeckmedium Kontrollen Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die unter Leistungsmerkmale f r dieses Gewebe beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine Membranf rbung auf Gesunde Gewebe 7 Die B Zellen in der Mantelzone von Mandelgewebe zeigen eine schwache bis m ige F rbereaktion w hrend die follikul ren dendritischen Retikulumzellen in Keimzentren eine m ige bis starke F rbereaktion aufweisen Positive Gewebe Elemente Gewebetyp Positive G
15. d den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen die Bedingungen vom Anwender gepr ft werden Es gibt keine offensichtlichen Anhaltspunkte f r die m gliche Instabilit t dieses Produkts Es sollten daher die Positiv und Negativkontrollen gleichzeitig mit den Patientenproben mitgef hrt werden Falls eine unerwartete F rbung auftritt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Sehritt P Anmerkungen Fixierung Formalin OOOO Formale Vorbehandlung EnVision FLEX Low pH Code Nr K8005 20 Min HIER 3 in 1 Gebrauchsfertig 20 Min In ubation Dilution Buffer Den Antik rper nicht verd nnen FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer 20 Min Inkubation Autostainer Plus Code Nr IS750 EnVision FLEX Dako Autostainer Autostainer 20 Min Inkubation 15 Min Mouse LINKER Plus Code Nr K8012 Inkubation 2 x 5 Min DAB Inkubation Gegenfarbung EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer 5 Min Inkubation Autostainer Plus Code Nr K8018 Kontrollgewebe Membranf rbung Fixierung Fixieru g erforderlich Code Nr S3425 Der Anwender muss stets die Packungsbeilage lesen um sich ber die detaillierten Anweisungen f r das F rbeverfahren und die Handhabung des Produkts zu informieren Paraffinschnitte Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffi
16. es r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus par la m thode HIER l aide de la solution de d masquage des pitopes EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x r f K8005 dilu e Le d paraffinage la r hydratation et le d masquage des pitopes peuvent tre r alis s dans l appareil PT Link de Dako r f PT100 PT101 Pour plus de d tails se reporter au Guide d utilisation du PT Link Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 temp rature et dur e du d masquage des pitopes 97 pendant 20 minutes 1 minute laisser refroidir jusqu 65 Retirer le portoir de lames de la cuve PT et plonger imm diatement les lames dans une jarre cuve par ex station de rin age du PT Link r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu temp rature ambiante r f K8007 Laisser les lames dans le tampon de lavage pendant 1 a 5 minutes Les coupes de tissu ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique qui suit Pour une meilleure adh rence des coupes de tissu sur les lames de verre il est recommand d utiliser les lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 Apr s coloration un montage permanent des lames est recommand Visualisation le syst me de visualisation recommand est le syst me EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autos
17. ewebe Elemente Anz getestet Eierstock 3 0 3 Pankreas 3 0 3 Parathyroida 3 0 3 Hypophyse 3 0 3 Gewebetyp Anz getestet Nebenniere 3 0 3 Knochenmark 3 0 3 Brust 3 0 3 Zerebellum 3 0 3 Zerebrum 3 0 3 Prostata 3 0 3 Zervix 3 0 3 Speicheldr se 3 1 3 Duktale Epithelzellen Kolon 3 0 3 Haut 3 0 3 D nndarm 2 2 von 2 lymphoiden Geweben 10 Membran Milz 3 1 von 3 Iymphoiden Geweben 15 Membran Niere 3 0 3 2 von 3 lymphoiden Geweben 50 Membran Leber 3 0 3 Magen 2 0 2 Lunge 3 3 3 Makrophagen Hoden 3 0 3 Mesothelzellen 2 0 2 Thymus 3 3 von 3 vereinzelten Zellen Medulla zytoplasmatisch Herzmuskel 3 0 3 Thyroida 3 1 3 Follikelepithelzellen Skelettmuskulatur 3 0 3 Mandel 3 3 3 Nerv peripher 3 0 3 Uterus 3 0 3 Pathologische Gewebe 7 Der Antik rper markierte 8 von 9 F llen von B CLL und 3 von 3 follikul ren Lymphomen In 3 Mantelzell lymphomen wurde keine Markierung beobachtet Speiser hre 3 0 3 P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 6 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 References References Literatur 1 2 Rossi S Laurino L Furlanetto A Chinellato S Orvieto E Canal F et al Rabbit monoclonal antibodies a comparative study between a novel category of immunoreagents and the corresponding mou
18. formed B lymphoblasts 2 3 Interleukin 4 and Interleukin 13 stimulation increase CD23 expression on B cells 4 On B cells CD23 is selectively expressed on sigM sigD double bearing cells and is lost upon differentiation into Ig secreting cells 2 CD23 is also present on a large variety of other cells such as T cells eosinophils platelets Langerhans cells and a subset of thymic epithelial cells 2 However CD23 is absent in a large number of normal non lymphoid human tissues such as bone cartilage central nervous system connective tissue endocrine glands gastrointestinal tract mesothelium muscles placenta peripheral nerves respiratory tissue skin synovium umbilical cord urinary and female male reproductive system and vessels 6 CD23 is typically detected in neoplastic cells from B cell chronic lymphocytic leukemia lymphoma B CLL and absent in mantle cell lymphoma 1 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system for instructions of IHC procedures Ready to use monoclonal rabbit antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone DAK CD23 Isotype IgG1 kappa Recombinant protein encoding amino acids 48 248 of human CD23 In Western blotting the antibody labels a 45 kDa band corresponding to CD23 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At
19. icroscope Slides Code K8020 Recommended for greater adherence Permanent Slides Mounting mounting required Instrumentation Dako Autostainer Austostainer Plus Use instrument specific vials Code S3425 The user must always read the package insert for detailed instructions of the staining procedure and handling of the product Paraffin sections The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues with HIER using diluted EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 Deparaffinization rehydration and epitope retrieval can be performed in Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to PT Link User Guide The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 epitope retrieval tempe rature and time 97 for 20 1 minutes cool down to 65 Remove slide rack from PT tank and immediately d ip slides in jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x Code K8007 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining
20. neingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Vorbehandlung Es ist eine Vorbehandlung der formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitte durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch HIER Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 erzielt werden Die Entparaffinierung Rehydrierung und Epitopdemaskierung k nnen im Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 durchgef hrt werden Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch F r PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorwarmtemperatur 65 Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 f r 20 1 Minuten auf 65 abk hlen Das Autostainer Objekttragergestell mit den Objekttragern aus dem Behalter herausnehmen und die Objekttrager sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 20X Code Nr K8007 eintauchen Die Objekttrager f r 1 5 Minuten im Wash Buffer belassen Die Gewebeschnitte d rfen wahrend der Behandlung oder des anschlieBenden immunhistochemischen Farbeverfahrens nicht austrocknen Fur eine bessere Haftung der Gewebeschnitte an den Glas Objekttragern werden FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Nach dem Farben sollten die Schnitte mit permanentem Eindeckmedium
21. rollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden FceRll BLAST 2 niedrig affiner IgE Rezeptor 2 3 CD23 ist ein Typ II Membranglykoprotein mit 45 kDa welches der C Typ Lektinfamilie angeh rt und mit dem niedrig affinen IgE Rezeptor Fc Rll welcher sich auf B Zellen findet identisch ist 4 5 CD23 wird vorwiegend auf B Zellen und Monozyten exprimiert die Expression ist besonders stark auf EBV transformierten B Lymphoblasten 2 3 Interleukin 4 und Interleukin 13 Stimulierung steigert die CD23 Expression auf B Zellen 4 Bei B Zellen wird CD23 selektiv auf slgM slgD positiven Zellen exprimiert und geht nach der Differenzierung zu Ig sekretierenden Zellen verloren 2 Ferner liegt CD23 auf zahlreichen weiteren Zellen vor so z B auf T Zellen Eosinophilen Thrombozyten Langerhans schen Zellen und einer Untergruppe der Thymusepithelzellen 2 Jedoch fehlt CD23 bei einer Gro zahl normaler nicht Iymphoider menschlicher Gewebe z B Knochen Knorpel Zentralnervensystem Bindegewebe endokrine Dr sen Magen Darm Trakt Mesothel Muskel Plazenta periphere Nerven respiratorisches Gewebe Haut Synovium Nabelschnur Harn und weibliches mannliches Reproduktionssystem sowie Gef e 6 CD23 wird normalerweise auf neoplastischen Zellen bei chronisch lymphatischen B Zell Leukamien Lymphomen B CLL nachgewiesen und is
22. sch mas de r action semblables ceux d crits pour ce tissu la section Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le produit FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus r f 18750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration membranaire Tissus sains 7 dans l amygdale les lymphocytes B de la zone du manteau pr sentent une coloration faible mod r e et les cellules r ticulaires dendritiques folliculaires des centres germinatifs pr sentent une coloration mod r e forte Type de tissu nb test s l ments tissulaires positifs Type de tissu nb test s l ments tissulaires positifs Surr nale 3 0 3 Ovaire 3 0 3 Moelle osseuse 3 0 3 Pancr as 3 0 3 Sein 3 0 3 Parathyro de 3 0 3 Cervelet 3 0 3 Pituitaire 3 0 3 Cerveau 3 0 3 Prostate 3 0 3 Col de l ut rus 3 0 3 Glande salivaire 3 1 3 cellules pith liales canalaires C lon 3 0 3 Peau 3 0 3 sophage 3 0 3 Intestin gr le 2 2 2 tissu lymphoide 10 membranaire Rate 3 1 3 tissu lympho de 15 membranaire 2 3 tissu lymphoide 50 membranaire Foie 3 0 3 Estomac 2 0 2 Poumon 3 3 3 macrophages Testicule 3 0 3 Cellules m soth liales 2 0 2 Thymus 3 3 3 cellules diss min es m dulla cytoplasmique 1 3 cellules pith liales folliculaires 3 3 3
23. se monoclonal antibodies Am J Clin Pathol 2005 124 295 302 Sarfati M BC7 CD23 Workshop Panel report In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishinginc 1997 p 144 7 Kikutani H Suemura M Owaki H Yamasaki K Barsumian EL Nakamura H et al B3 3 CD23 is a low affinity Fce receptor FceR regulation of FceR expression In McMichael AJ Beverley PCL Cobbold S Crumpton MJ Gilks W Gotch FM et al editors Leucocyte typing III White cell differentiation antigens Proceedings of the 3 International Workshop and Conference 1986 Sep 21 26 Oxford England Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1987 p 419 22 Aubry JP Bonnefoy JY De Vries JE Banchereau J B3 2 The CD23 antigen is the human lymphocyte receptor for IgE In McMichael AJ Beverley PCL Cobbold S Crumpton MJ Gilks W Gotch FM et al editors Leucocyte typing Ill White cell differentiation antigens Proceedings of the 3rd International Workshop and Conference 1986 Sep 21 26 Oxford England Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1987 p 417 9 Sarfati M Ishihara H Delespesse G B7 CD23 Workshop Panel report In Schlossman SF Boumsell L Gilks W Harlan JM Kishimoto T Morimoto C et al editors Leucocyte typing
24. sp cifique l appareil L tape dite Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration de 10 lames ou moins Pour les cycles de coloration de plus de 10 lames l tape dite Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela d termine des temps de lavage comparables Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste de l assistance technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit la section Caract ristiques de performance Contre coloration il est recommand d effectuer une contre coloration l aide du produit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Contr les des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps et en suivant le m me protocole que les chantillons de patients Le tissu de contr le positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des
25. t bei Mantelzelllymphomen nicht zu finden 1 Anweisungen zu den IHC Verfahren finden Sie in den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder dem Detektionssystem Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon DAK CD23 Isotyp IgG 1 Kappa Rekombinantes Protein das die Aminos uren 48 248 von menschlichem CD23 umfasst Beim Western Blottingmarkiert der Antik rper eine Bande von 45 kDa welche CD23 entspricht 1 F r Fachpersonal 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Bei den in diesem Produkt verwendeten Konzentrationen kann Natriumazid obwohl nicht als gef hrlich klassifiziert mit in Wasserleitungen vorhandenem Blei oder Kupfer reagieren und zur Bildung von hochexplosiven Metallazidansammlungen f hren Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien nicht entsprechen
26. tainer Plus r f K8012 Remarque utiliser la solution EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x r f K8005 dilu e pour la m thode HIER P01741EFG_002_1S781 2011 10 p 3 7 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance 122095 001 Programme utiliser le protocole indiqu ci apr s Les r actifs doivent tre dilu s de la mani re appropri e avant leur utilisation Toutes les tapes doivent tre r alis es temp rature ambiante 20 25 1 Incuber la coupe de tissu avec 200 uL de r actif EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent r f DM821 pendant 5 minutes 1 minute Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 5 minutes Incuber la coupe de tissu avec 200 uL d anticorps primaire r f IS082 pendant 20 minutes 1 minute Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 5 minutes EnVision FLEX Mouse LINKER 200 300 uL 15 minutes Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 5 minutes Incuber la coupe de tissu avec 200 uL de produit EnVision FLEX HRP r f DM822 pendant 20 minutes 1 minute Rincer dans le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer r f K8007 pendant 1 5 minutes Incuber
27. toires et d IgD s cr toires et il dispara t lors de leur diff renciation en cellules s cr trices d Ig 2 Le CD23 est galement pr sent dans une large gamme d autres cellules comme les lymphocytes T les osinophiles les plaquettes les cellules de Langerhans et un sous ensemble de cellules pith liales thymiques 2 Toutefois le CD23 est absent dans un grand nombre de tissus humains sains non lymphoides comme l os le cartilage le syst me nerveux central le tissu conjonctif les glandes endocrines le tractus gastro intestinal le m soth lium les muscles le placenta les nerfs p riph riques le tissu respiratoire la peau la synoviale le cordon ombilical le syst me urinaire et les syst mes reproducteurs masculin et f minin ainsi que les vaisseaux 6 Le CD23 est g n ralement d tect dans les cellules n oplasiques du lymphome de la leuc mie lymphocytaire chronique cellules B LLC B et est absent dans le lymphome du manteau 1 Se reporter aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations Anticorps monoclonal de souris pr t a l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone DAK CD23 Isotype IgG1 kappa Prot ine recombinante codant les acides amin s 48 a 248 du CD23 humain Lors d un Western blot l
28. uspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako Etape Commentaires N Fixation LEO O S S O dilution FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus r f IS750 Ne pas diluer l anticorps Incubation de 20 minutes Visualisation EnVision FLEX Dako Autostainer Autostainer Plus r f K801 2 Incubation de 20 minutes incubation de 15 minutes avec le produit Mouse LINKER 2 incubations de 5 minutes avec le DAB Contre coloration EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Incubation de 5 minutes Autostainer Plus r f K8018 Tissu de contr le Amygdale Coloration membranaire Lames Montage FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 Recommand es pour une meilleure adh rence Milieu de montage permanent requis Appareillage Dako Autostainer Autostainer Plus Utiliser les flacons sp cifiques l appareil r f S3425 L utilisateur doit toujours lire la notice pour obtenir des instructions d taill es sur la proc dure de coloration et sur la manipulation du produit Coupes en paraffine l anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissu fix es au formol et incluses en paraffine L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Pr traitement le pr traitement des coupes de tissu fix es au formol et incluses en paraffine par d masquage des pitopes induit par la chaleur HIER est n cessaire D
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