Monoclonal Mouse
Contents
1. English Intended use Summary and explanation Reagent provided Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied 117011 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Inhibin o Clone R1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15053 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Anti Human Inhibin Clone R1 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of ovarian tumors such as ovarian sex cord stromal tumors SCST The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Inhibin is a dimeric glycoprotein hormone comprised of an a and B subunit It is a member of the transforming growth factor R TGF R superfamily and inhibits the production or secretion of pituitary gonadotropins preferentially follicle stimulating hormone FSH 2 3 Inhibin with activin a closely related dimeric glycoprotein hormone comprised of two subunits create a fine tuned endocrine feedback loop Inhibin decreases while activin increases the biosynthesis and release of FSH Inhibin and activin have been de2. t observ e dans les cellules stromales lut inis es ou pseudo th cales dans le stroma des tumeurs pith liales de l ovaire et les carcinomes ovariens m tastatiques 2 Lors de tests l anti inhibine a clone R1 sur divers tissus ovariens anormaux une immunor activit a t observ e dans 77 tumeurs de la granulosa sur 80 12 tumeurs de Sertoli Leydig sur 12 2 sous types r tiformes de tumeurs de Sertoli Leydig sur 2 2 tumeurs de Sertoli sur 2 2 gynadroblastomes sur 2 9 th comes sur 18 et 6 tumeurs cellules steroides sur 6 3 7 Quinze cas sur 16 de tumeurs stromales du cordon sexuel testiculaire test s avec l inhibine a clone R1 ont pr sent une immunor activit positive 2 Tous les fibromes myxomes tumeurs stromales scl rosantes carcinomes divers cellules germinales tumorales carcinomes petites cellules lymphomes et tissus malins de cancer de la prostate mal diff renci s ont pr sent une immunor activit tumorale n gative aux anticorps anti inhibine ct 3 7 8 307132EFG_ 001 p 5 8 Deutsch Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erklarung Geliefertes Reagenz Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 117011 001 Code Nr 15058 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Anti Human Inhibin Clone R1 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie
3. a tait faible et focale mais forte dans toutes les tumeurs virilisantes L expression de l inhibine a tait variable dans les carcinomes adr nocorticaux ind pendamment de l activit hormonale tant soit fortement positive soit compl tement n gative donc globalement l expression de l inhibine a sp cifique une zone tait forte dans les cellules adr nocorticales productrices d androg nes 4 Dans les tissus malins du sein l anti inhibine a a pr sent une immunor activit positive mod r e forte dans les cellules pith liales des n oplasmes b nins une immunor activit positive intense dans les cellules pith liales apocrines de la maladie fibrokystique et une immunor activit positive faible mod r e dans les cellules pith liales n oplasiques ainsi qu une immunor activit positive dans les cellules endoth liales des l sions malignes 5 Un cas de cellules tumorales de la granulosa du syst me nerveux central SNC a pr sent une r activit positive l anti inhibine a clone R1 Dans 7 tumeurs endocrines de divers sites du syst me gastroent ro pancr atique sur 70 une immunor activit positive l anti inhibine a clone R1 a t observ e dans quelques rares cellules Une immunor activit positive a t observ e dans 1 cas sur 1 de gastrinome cellules G du duod num et 1 cas sur 2 de gastrinome cellules G du pancr as dans 2 cas sur 3 de VIPomes du pancr as dans 1 cas sur 1 de cellul
4. vue R sum et explication R actifs fournis Sp cificit 117011 001 immunoreactivity was demonstrated in one of one G cell gastinoma of the duodenum and one of two G cell gastinomas of the pancreas in two of three VIPomas of the pancreas in one of one undefined cell tumor of the jejunum and pancreas and in one of one A D cell tumor of the pancreas Otherwise anti inhibin demonstrated negative immunoreactivity in the remainder of tumors tested in the duodenum and pancreas as well as the appendix ileum rectum right colon and stomach of various cell types 6 In abnormal ovarian tissues inhibin has been demonstrated to be a sensitive marker for the majority of SCSTs Based on a survey of current literature 2 immunoreactive inhibin is present in nearly 100 of tumor cells in granulosa cell tumors Leydig cell tumors Sertoli Leydig cell tumors Sertoli cell tumors steroid cell tumors sex cord tumors and gynadroblastomas Anti inhibin stains the sex cord elements of gonadoblastomas and unclassified sex cord stromal tumors with a few exceptions However the Sertoli cell component in SCSTs was occasionally reported as negative for inhibin expression Inhibin is also expressed in a majority of luteinized stromal cells or theca lutein like cells in thecomas fibrothecomas stromal luteomas fibromas sclerosing stromal tumors stromal hyperplasias and hypertheocosis Expression of inhibin has also been observ
5. 566 6655 Tel 45 4485 9500 Authorized representative in the European Community 307132EFG_001 p 8 8
6. ains L expression de l inhibine a telle qu elle est d termin e par immunohistochimie est pr sente dans la majorit des l ments stromaux gonadiques du cordon sexuel Les l ments immunor actifs comprennent les cellules folliculaires de la granulosa et les cellules intrath cales de l ovaire les cellules testiculaires de Sertoli et Leydig et les cellules stroma th cales et hilaires lut inis es 2 L anti inhibine a clone R1 a pr sent une forte r activit dans la zone r ticul e du cortex surr nal sain une immunor activit plus faible dans la zone fascicul e et aucune r activit dans la zone glom rul e 4 Dans les tissus normaux du sein l expression de l inhibine a a t observ e dans les cellules pith liales canalaires et lobulaires mais pas dans les cellules myo pith liales 5 Les somatotropes hypophysaires sont aussi positifs par immunohistochimie 6 Aucun immunomarquage positif n a t observe dans les cellules endocrines pancr atiques ou gastro intestinales y compris les cellules du fundus de l antre du duod num du j junum de l il on de l appendice et du rectum 6 Tissus tumoraux L expression de l inhibine a dans le cortex surr nal hyperplasique tait fortement positive dans la zone r ticul e faiblement positive dans la zone fascicul e et n gative dans la zone glom rul e ainsi que dans les cellules m dullaires surr nales Dans les ad nomes adr nocorticaux l expression de l inhibine
7. aque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d hematoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e 307132EFG 001 p 4 8 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance 117011 001 Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre les cellules de Leydig ainsi que les cellules de Sertoli et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Le sch ma de coloration cellulaire est cytoplasmique Tissus s
8. ction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi L inhibine est une hormone glycoprot ine dim re compos e d une sous unite et B Elle fait partie de la superfamille des facteurs de croissance transformant TGF R et elle inhibe la production ou la s cr tion des gonadotrophines hypophysaires de pr f rence l hormone folliculostimulante FSH 2 3 L inhibine avec l activine une hormone glycoprot ine dim re tr s proche compos e de deux sous unit s R cr e une boucle de retour d endocrine r gl e de mani re pr cise L inhibine diminue la biosynth se et la lib ration de la FSH tandis que l activine l augmente L inhibine et l activine sont pr sentes dans divers tissus gonadiques et non gonadiques indiquant que ces peptides ont d autres fonctions en plus de la r gulation de la s cr tion de la FSH L inhibine est un antagoniste de l action de l activine dans de nombreux syst mes une propri t qui peut s av rer interessante dans la tumorigen se On pense aussi que l inhibine agit comme un suppresseur des tumeurs gonadiques alors que l activine peut favoriser la croissance tumorale via un processus de boucle autocrine 2 Se r f rer aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe
9. cumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption imprim e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Des r sul
10. de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone R1 Isotype IgG2a kappa L anti inhibine a clone R1 est dirig e contre la s quence d acides amin s 1 32 de la sous unite de l inhibine humaine Le clone R1 selon les r sultats d inhibition obtenus par radio immunoessais d montre une pr f rence nettement sup rieure pour la sequence 1 32 humaine que pour les peptides bovins 73 fois ou porcins 23 fois L anticorps r agit galement a certaines formes mol culaires multiples d inhibine pr sentes a la fois dans les liquides folliculaires bovins et humains 1 307132EFG_001 p 3 8 Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 117011 001 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des ac
11. e tumorale non d finie du j junum et du pancr as et dans 1 cas sur 1 de cellule tumorale A D du pancr as D autre part l anti inhibine a a pr sent une immunor activit n gative au reste des tumeurs test es dans le duodenum et le pancr as ainsi qu divers types de cellules de l appendice de l il on du rectum du c lon droit et de l estomac 6 Dans les tissus ovariens malins l inhibine a s est r v l e tre un marqueur sensible pour la majorit des SCST Sur la base de la documentation actuellement disponible 2 l inhibine a immunor active est pr sente dans pr s de 100 des cellules tumorales des tumeurs de la granulosa des tumeurs des cellules de Leydig des tumeurs des cellules de Sertoli Leydig des tumeurs des cellules de Sertoli des tumeurs des cellules st roides des tumeurs du cordon sexuel et des gynadroblastomes L anti inhibine a marque les l ments du cordon sexuel des gonadoblastomes et les tumeurs stromales du cordon sexuel non class es quelques exceptions pr s Cependant le composant cellule de Sertoli dans les SCST a quelquefois t signal comme tant n gatif l expression de l inhibine a L inhibine est aussi exprim e dans la majorit de cellules stromales lut inis es ou dans les cellules pseudo th cales des th comes fibroth comes lut omes stromaux fibromes tumeurs stromales scl rosantes les hyperplasies stromales et les hyperth ocoses L expression de l inhibine a a galement
12. ed in luteinized stromal or leca lutein like cells within the stroma of ovarian epithelial tumors and ovarian metastatic carcinomas 2 When testing various ovarian abnormal tissues with ant inhibin a clone R1 immunoreactivity was demonstrated in seventy seven out of eighty granulosa cell tumors all twelve Sertoli Leydig tumors both retiform subtype of Sertoli Leydig cell tumors both Sertoli tumors both gynadroblastoma nine of the eighteen thecomas and all six steroid cell tumors 3 7 Fifteen out of sixteen cases of testicular sex cord stromal tumor tested with inhibin a R1 demonstrated positive immunoreactivity 2 All fibromas myxomas sclerosing stromal tumors various carcinomas germ cell tumors small cell carcinomas lymphomas and malignant tissue of poorly differentiated prostate cancer demonstrated negative tumor immunoreactivity with anti inhibin antibodies 3 7 8 R f 15058 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Anti Human Inhibin a clone R1 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps est utile pour l identification des tumeurs ovariennes telles les tumeurs stromales du cordon sexuel SCST L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fon
13. ekttr gern wird die Verwendung von Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Gerate mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 ul Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 ul Abgabevolumen Autoprogram ohne Gegenfarbung Inhibin oder Autoprogram mit Gegenfarbung InhibinH Bei Farbedurchlaufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls hel
14. ent pas s cher lors du traitement ou lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides R f S3003 Le systeme de visualisation recommand est le EnvVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 ul ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 ul Autoprogram sans contre coloration Inhibin ou Autoprogram avec contre coloration InhibinH L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par ch
15. eugen Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen ES Bei 2 8 C aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Flaschchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilitat Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten Farbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erklaren lasst und auf ein Problem mit dem Antikorper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verstandigen Der Antikorper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um Starke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER ist erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung der entparaffinier
16. fen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das Farbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Leydig und Sertoli Zellen enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellul re F rbemuster ist zytoplasmatisch Gesundes Gewebe Ein Gro teil der gonadalen Keimstrang Stromaelemente weist eine durch immunhistochemische Verfahren festgestellte Inhibin a Expression auf Zu den immunreaktiven Elementen geh ren Follikelzellen und Theca interna der Eierst cke Sertoli und Leydig Zellen der Hoden und luteinisierte stromal thekale und hil re Zellen 2 Anti Inhibin a Klon R1 zeigte starke Immunreaktivitat in der Zona reticularis der gesunden Nebennierenrinde schw chere Immunreaktivit t in der Zona fasciculata und keine Reaktivit t mit Zelle
17. hough not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 C Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 307132EFG_ 001 p 1 8 Staining
18. hungen verschiedener pathologischer Eierstockgewebe mit Anti Inhibin a Klon R1 wurde bei 77 von 80 Granulosazelltumoren 12 von 12 Sertoli Leydig Zelltumoren 2 von 2 netzf rmigen Untertypen der Sertoli Leydig Zelltumoren 2 von 2 Sertoli Zelltumoren 2 von 2 Gynandroblastomen 9 von 18 Thekomen und 6 von 6 Steroidzelltumoren Immunreaktivit t nachgewiesen 3 7 F nfzehn von 16 F llen eines mit Inhibin a Klon R1 getesteten testikul ren Keimstrang Stromatumors zeigten positive Immunreaktivit t 2 Alle Fibrome Myxome Stromatumoren mit sklerosierender Degeneration verschiedene Karzinome Keimzelltumoren kleinzellige Karzinome Lymphome und maligne Gewebe schlecht differenzierter Prostatakarzinome zeigten negative Tumor Immunreaktivit t mit Anti Inhibin a Antik rpern 3 7 8 1 Groome N Hancock J Betteridge A Lawrence M Craven R Monoclonal and polyclonal antibodies reactive with the 1 32 amino terminal sequence of the alpha subunit of human 32K inhibin Hybridoma 1990 9 1 31 2 Zheng W Lauchlan SC Inhibin and activin their roles in ovarian tumorigenesis and their diagnostic utility in surgical pathology practice Applied Immuno amp Mol Morph 1999 7 1 29 3 Costa MJ Ames PF Walls J Roth LM Inhibin immunohistochemistry applied to ovarian neoplasms a novel effective diagnostic tool Human Path 1997 28 11 1247 4 Arola J Liu J Heikkil P Voutilainen R Kahri A Expression of inhibin in the human adrenal gland and ad
19. igner Neoplasmen stark positive Immunreaktivit t bei den apokrinen Epithelzellen der fibrozystischen Mastopathie und schwach bis m ig positive Immunreaktivit t bei epithelialen neoplastischen Zellen ebenso wie positive Immunreaktivit t bei Endothelzellen maligner L sionen 5 Ein Fall eines Granulosazellen Tumors des Zentralnervensystems ZNS zeigte positive Reaktivit t mit Anti Inhibin a Klon R1 Bei 70 endokrinen Tumoren an unterschiedlichen Stellen im gastroenteralen pankreatischen System wurde bei wenigen Zellen von sieben der 70 Tumoren eine positive Immunreaktivit t mit Anti Inhibin a Klon R1 307132EFG_001 p 7 8 References Bibliographie Literaturangaben Catalogue number R f rence du catalogue Bestellnummer Manufacturer Fabricant Hersteller Use by Utiliser jusque Verwendbar bis PT0020 Rev C Edition 09 07 117011 001 iil Consult instructions for use Consulter les instructions d utilisation EC REP Repr sentant Autoris dans la Communaut Europ enne Fax 805 2 6688 Baer Fax 45 4485 9595 Gebrauchsanweisung beachten Autorisierter Repr sentant in der EU Technical Support Customer Service 800 235 5763 www dako com festgestellt Eine positive Immunreaktivit t ergab sich bei einem von einem G Zell Gastrinom des Duodenums und einem von zwei G Zell Gastrinomen des Pankreas bei zwei von drei Vipomen des Pankreas bei einem von einem unbestimmten Tumor von Jejunum und Pankreas und bei einem von e
20. in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper dient zur Erkennung von Eierstocktumoren wie z B Keimstrang Stromatumoren SCST Sex Cord Stromal Tumor der Eierst cke Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Inhibin ist ein dimeres Glykoproteinhormon das aus einer und R Untereinheit besteht Es geh rt zur berfamilie der transformierenden Wachstumsfaktoren TGF R und hemmt die Produktion oder Absonderung von Hypophyse Gonadotropinen besonders der follikelstimulierenden Hormone FSH 2 3 Inhibin ergibt zusammen mit Activin einem eng verwandten dimeren Glykoproteinhormon mit zwei Untereinheiten eine fein abgestimmte endokrine Feedback Schleife Inhibin vermindert die Biosynthese und Abgabe von FSH w hrend Activin diese steigert Inhibin und Activin wurden in verschiedenen gonadalen und nicht gonadalen Gewebetypen gefunden Das deutet darauf hin dass diese Peptide noch andere Funktionen haben als nur die Steuerung der FSH Abgabe Inhibin wirkt der Wirkung von Activin in vielen Systemen entgegen was bei der Tumorentstehung eine Rolle spielen kann Zudem wird vermutet dass Inhibin als Hemmer gonadaler Tumore wirkt w hrend Activin ber ei
21. inem A D Zelltumor des Pankreas Ansonsten ergab Anti Inhibin eine negative Immunreaktivit t bei den verbleibenden getesteten Tumoren und zwar Neoplasmen unterschiedlicher Zelltypen von Duodenum und Pankreas ebenso wie Appendix Ileum Rektum rechtem Dickdarm und Magen 6 In pathologischen Eierstockgeweben hat sich Inhibin als empfindlicher Marker f r den Gro teil von SCSTs erwiesen Laut einer Untersuchung der aktuellen Fachliteratur 2 liegt das immunreaktive a bei fast 100 der Tumorzellen folgender Neoplasien vor Granulosazelltumoren Leydig Zell Tumoren Sertoli Leydig Zelltumoren Sertoli Zelltumoren Steroidzelltumoren Keimstrangtumoren und Gynandroblastomen Anti Inhibin f rbt mit wenigen Ausnahmen die Keimstrangelemente der Gonadoblastome und unklassifizierten Keimstrang Stromatumoren an Die Sertoli Zellkomponente bei SCSTs wurde jedoch gelegentlich als f r die Expression der Inhibin a Untereinheit negativ registriert Inhibin wird ebenfalls in der berwiegenden Anzahl luteinisierter Stromazellen oder Theca Lutein artiger Zellen bei Thekomen Fibrothekomen stromalen Luteomen Fibromen Stromatumoren mit sklerosierender Degeneration Stromahyperplasien und Hyperthekose exprimiert Eine Expression der a Untereinheit von Inhibin wurde auch bei luteinisierten Stromazellen oder Theca Lutein artiger Zellen innerhalb des Stromas von Epithel Eierstockkarzinomen und metastatischen Eierstockkarzinomen festgestellt 2 Bei Untersuc
22. l including cells of the fundus antrum duodenum jejunum ileum appendix and rectum 6 Abnormal tissues Inhibin expression in hyperplastic adrenal cortex was strongly positive in zona reticularis weakly positive in zona fasciculata and negative in zona glomerulosa as well as in adrenal medullary cells In adrenocortical adenomas inhibin expression was weak and focal but strong in all virilizing tumors Inhibin expression was variable in adrenocortical carcinomas regardless of hormonal activity being either strongly positive or completely negative therefore overall zone specific expression of inhibin was high in androgen producing adrenocortical cells 4 In abnormal breast tissues anti inhibin demonstrated moderate to strong positive immunoreactivity in the epithelial cells of benign neoplasms intense positive immunoreactivity in apocrine epithelial cells of fibrocystic disease and weak to moderate positive immunoreactivity in epithelial neoplastic cells as well as positive immunoreactivity in endothelial cells of malignant lesions 5 One case of granulosa cell tumor of the central nervous system CNS demonstrated positive reactivity with anti inhibin o clone R1 In seventy endocrine tumors from various sites in the gastroentero pancreatic system positive immunoreactivity with anti inhibin clone R1 was found in rare cells in seven of the seventy tumors Positive 307132EFG 001 p 2 8 Fran ais Utilisation pr
23. monstrated to be present in a variety of gonadal and nongonadal tissues indicating that these peptides have other functions in addition to regulating FSH secretion Inhibin antagonizes the action of activin in many systems which may be a property valid in tumorigenesis It is also thought that inhibin may act as a gonadal tumor suppressor while activin may promote tumor growth via an autocrine loop 2 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L NaNs Clone R1 Isotype IgG2a kappa Anti inhibin a clone R1 is directed against the 1 32 amino acid sequence of the human inhibin subunit Clone R1 according to inhibition results from radioimmunoassays demonstrates a much greater preference for human 1 32 than for bovine 73 fold or porcine 23 fold peptides The antibody also reacts with some of the multiple molecular forms of inhibin found in both bovine and human follicular fluids 1 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaNsz a chemical highly toxic in pure form At product concentrations t
24. n FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram without counterstaining Inhibin or Autoprogram with counterstaining InhibinH The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using En
25. n der Zona glomerulosa 4 In gesundem Brustgewebe wurde die Expression der Inhibin o Untereinheit in duktalen und lobularen Epithelzellen jedoch nicht in Myoepithelzellen beobachtet 5 Bei immunhistochemischen Verfahren reagierten auch Somatotrophe der Hypophyse positiv 6 Dagegen wurde eine positive Immunanf rbung bei endokrinen Pankreas oder Gastrointestinaltraktzellen ermittelt einschlie lich von Zellen aus Fundus Antrum Duodenum Jejunum Ileum Appendix und Rektum 6 Pathologisches Gewebe Die Expression der a Untereinheit von Inhibin war bei der hyperplastischen Nebennierenrinde in der Zona reticularis stark positiv schwach positiv in der Zona fasciculata und negativ in der Zona glomerulosa ebenso wie in Zellen der Medulla glandulae suprarenalis Bei Adenomen der Nebennierenrinde erwies sich die Expression der Inhibin a Untereinheit als schwach und rtlich begrenzt bei allen virilisierenden Tumoren dagegen als stark Bei Karzinomen der Nebennierenrinde wurde unterschiedliche Expression der Inhibin a Untereinheit festgestellt und zwar ungeachtet ihrer hormonellen Aktivit t Diese erwies sich entweder als stark positiv oder vollst ndig negativ Die zonenspezifische Expression der o Untereinheit von Inhibin war folglich in Androgen produzierenden Zellen der Nebennierenrinde insgesamt stark augespr gt 4 Bei pathologischen Brustgeweben zeigte Anti Inhibin eine m ig bis stark positive Immunreaktivit t bei den Epithelzellen ben
26. ne autokrine Schleife 2 das Tumorwachstum f rdern kann Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualitatskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L NaN enth lt Klon R1 Isotyp IgG2a Kappa Anti Inhibin Klon R1 ist gegen die 1 32 Aminos urensequenz der menschlichen Inhibin a Untereinheit gerichtet Klon R1 zeigt laut Ergebnissen von Radioimmunassays eine deutlich h here Pr ferenz f r menschliche 1 32 Peptide als f r Rinder 73 fach oder Schweinepeptide 23 fach Der Antik rper reagiert auch mit einigen der zahlreichen molekularen Formen von Inhibin in den Follikelfl ssigkeiten von Rindern und Menschen 1 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzub
27. procedure including materials required but not supplied Staining interpretation Performance characteristics 117011 001 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 C epitope retrieval temperature and time 97 C for 20 1 minutes cool down to 65 C Rinse sections with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code 3003 is recommended The recommended visualization system is EnVisio
28. renocortical tumors Endo Res 1998 24 3 amp 4 865 5 Di Loreto C Reis FM Cataldi P Zuiani C Luisi S Beltrami CA Petraglia F Human mammary gland and breast carcinoma contain immunoreactive inhibin activin subunits evidence for a secretion into cystic fluid European J of Endo 1999 141 190 6 La Rosa S Uccella S Billo P Facco C Fausto S Capella C Immunohistochemical localization of a and RA subunits of inhibin activin in human normal endocrine cells and related tumors of the digestive system Virchows Arch 1999 434 29 7 Matias Guiu X Pons C Prat J Mullerian inhibiting substance alpha inhibin and CD99 expression in sex cord stromal tumors and endometrioid ovarian carcinomas resembling sex cord stromal tumors Human Path 1998 29 8 840 8 Mellor SL Richards MG Pedersen JS Robertson DM Risbridger GP Loss of the expression and localization of inhibin o subunit in high grade prostate cancer J of Clin Endocrinol and Metab 1998 83 3 969 Temperature limitation In vitro diagnostic medical device Limites de temp rature Dispositif m dical de diagnostic in vitro oul Zulassiger Temperaturbereich In vitro Diagnostikum LEC REP Dako North America Inc Dako Denmark A S Contains sufficient for lt N gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r n Ans tze 6392 Via Real Carpinteria California 93013 USA Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Batch code Code du lot Y ae Tel 805
29. tats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 K8014 Coupes d paraffin es Le pr traitement des coupes de tissus d paraffin s fix s au formol et inclus en paraffine est recommand a l aide du Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link Temp rature de pr chauffage 65 C temp rature et dur e de restauration de lepitope 97 C pour 20 1 minutes laisser refroidir jusqu 65 C Rincer les coupes avec un EnVision FLEX Wash Buffer 10x dilu temp rature ambiante Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 Coupes _incluses_en_paraffine Comme pr paration alternative des chantillons le d paraffinage et la restauration de l pitope peuvent tre r alis s dans le PT Link l aide d une proc dure modifi e Se r f rer aux instructions du Guide d utilisation du PT Link Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doiv
30. ten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte sollte mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 durchfuhren Fur PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorwarmtemperatur 65 C Temperatur und Zeit f r 307132EFG_001 p 6 8 Farbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der Farbung Leistungsmerkmale 117011 001 Epitopdemaskierung 97 C f r 20 1 Minuten auf 65 C abk hlen lassen Schnitte mit auf Raumtemperatur gebrachtem verd nntem EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 abspulen Paraffineingebettete Schnitte Zur Probenpraparation kann fur Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link auch ein modifiziertes Verfahren verwendet werden Weitere Informationen siehe PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobj
31. vVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include both the leydig cells sertoli cells and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 The cellular staining pattern is cytoplasmic Normal tissues Inhibin expression as determined by immunohistochemistry is found in the majority of gonadal sex cord stromal elements Immunoreactive elements include follicular granulosa cells and theca interna of the ovary testicular Sertoli and Leydig cells and luteinized stromal thecal and hilar cells 2 Anti inhibin a clone R1 demonstrated strong immunoreactivity in the zona reticularis of normal adrenal cortex weaker immunoreactivity in the zona fasciculata and was unreactive with cells of the zona glomerulosa 4 In normal breast tissue inhibin a expression was observed in ductal and lobular epithelial cells but not in myoepithelial cells 5 Also positive by immunohistochemistry are pituitary somatotrophs 6 No positive immunostaining has been observed in any pancreatic or gastrointestinal endocrine cel
Download Pdf Manuals
Related Search