Monoclonal Mouse
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1. Store at 2 8 C Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide 307140EFG_001 p 1 8 Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation Performance characteristics 117467 001 Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus C2. 0 B cell 7 7 T cell and 17 3 null cell Carcinomas derived from various organs have also been shown to be CD15 positive 56 including adenocarcinomas squamous cell carcinomas and undifferentiated large and small cell carcinomas 5 Ref 15062 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD15 clone Carb 3 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps est utile pour l identification des granulocytes matures des cellules mononucl aires de Hodgkin et des cellules de Reed Sternberg dans les cas de lymphomes hodgkiniens 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Antigene Lewis X Le 2 3 3 fucosyl N ac tyl lactosamine 3 FAL 4 hapt ne X 3 5 antig ne embryonnaire sp cifique au stade 1 SSEA 1 2 3 lacto N fucopentaose III LNFP III 3 Le CD15 est exprim sur les cellules de Reed Sternberg de la maladie de Hodgkin et par plusieurs autres types de cellules notamment les cellules my loides et pith liales 3 6 Les anticorps dirig s contre le CD15 reconnaissent une s quence pentasaccharide qui se produit dans l
3. 7 8 References Bibliographie Literaturangaben Catalogue number R f rence du catalogue Bestellnummer Manufacturer Fabricant Hersteller Use by Utiliser jusque Verwendbar bis PT0020 Rev C Edition 09 07 117467 001 Hypophyse 3 3 von 3 endokrinen Zellen der Adenohypophyse 75 100 zytoplasmatisch 2 von 3 Nervenfilzzellen der Neurohypophyse 75 100 diffus Prostata 2 1 von 2 Dr senepitheln 50 zytoplasmatisch Speicheldr sen 3 1 von 3 Duktusepitheln 100 apikal zytoplasmatisch 1 von 3 Dr senepitheln 20 zytoplasmatisch Skelettmuskulatur 3 0 von 3 Haut 3 0 von 3 D nndarm 3 1 von 3 Schleimhautepitheln 20 apikal zytoplasmatisch Milz 3 3 von 3 Myleoidzellen 100 zytoplasmatisch Magen 3 3 von 3 F llen von Magenschleimhau 100 zytoplasmatisch Hoden 3 0 von 3 Thymus 3 2 von 3 Hassall K rperchen 100 nicht zellul r Schilddr se 2 0 von 2 Mandeln 3 2 von 3 berlagernden Plattenepitheln 50 100 zytoplasmatisch Uterus 2 2 von 2 Dr senepitheln 15 75 zytoplasmatisch Temperature limitation Limites de temp rature Zulassiger Temperaturbereich Ci Pathologisches Gewebe Eine Studie von Arber et al hat gezeigt dass sich Antik rper gegen CD15 bei 87 der F lle von Morbus Hodgkin positiv f rben einschlie lich nodul rer Sklerose gemischtzelligem Morbus Hodgkin und Lymphozytendeplet
4. Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellulare Farbemuster ist membrangebunden bzw zytoplasmatisch 1 5 Gesundes Gewebe Gewebetyp Anz getestet Gewebeelemente mit positiver Farbung Nebenniere 3 3 von 3 Nebennierenrindenzellen 100 zytoplasmatisch Knochenmark 3 2 von 3 Myelozyten 100 zytoplasmatisch 1 von 3 Fallen von allen Zellen 100 zytoplasmatisch Brust 2 2 von 2 Duktusepitheln 25 100 zytoplasmatisch Gehirn Zerebellum 3 3 von 3 F lle wei er Substanz grauer Substanz 100 diffus Gehirn Zerebrum 3 3 von 3 F lle wei er Substanz grauer Substanz 100 diffus Zervix 2 Ovon2 Dickdarm 2 1 von 2 Schleimhaut Dr senepitheln 50 punktuell apikal zytoplasmatisch 1 von 2 Schleimhautepitheln 20 apikal zytoplasmatisch Speiser hre 2 2 von 2 nichtbasalen Plattenepitheln 100 zytoplasmatisch Herz 3 0 von 3 3 von 3 kortikalen Tubulusepitheln 100 zytoplasmatisch Niere 3 2 von 3 kortikalen und medull ren Endothelien 100 zytoplasmatisch Leber 3 1 von 3 sinusoidalen Endothelien 40 zytoplasmatisch Lunge 3 0 von 3 Mesothelzellen 3 2 von 3 Mesothelzellen 100 zytoplasmatisch Nerv 3 0 von 3 Eierstock 3 0 von 3 Pankreas 3 2 von 3 Azinuszellen 20 50 zytoplasmatisch Nebenschilddr se 3 0 von 3 307140EFG_001 p
5. Goyert SM Mason DY Miyasaka M Moretta L Okumura K Shaw S Springer TA Sugamura K Zola H eds Leucocyte Typing VI White Cell Differentiation Antigens Garland Publishing Inc New York 1998 348 51 4 Gocht A Struckhoff G L hler J Invited review CD15 containing glycoconjugates in the central nervous system Histol Histopathol 1996 11 1007 28 5 Arber DA Weiss LM CD15 a review Applied Immunohistochem 1993 1 1 17 30 6 Kornstein MJ Bonner H Gee B Cohen R Brooks JJ Leu M1 and S100 in Hodgkin s disease and non Hodgkin s lymphomas AJCP 1986 85 4 433 7 7 Unpublished Dako In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro ml In vitro Diagnostikum Lec REP Dako North America Inc Dako Denmark A S Batch i Contains li for lt N gt tests 6392 Via Real Produktionsvej 42 LOT Code du lat Contenu suffisant pour lt n gt tests Carpinteria California 93013 USA DK 2600 Glostrup Denmark Chargenbezeichnung Inhalt ausreichend f r n Ans tze Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Consult instructions for use Authorized representative in the European Community Consulter les instructions d utilisation EC REP Repr sentant Autoris dans la Communaut Europ enne F2 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Gebrauchsanweisung beachten Autorisierter Reprasentant in der EU Technical Support 800 424 0021 Customer Service 800 235 5763 www dako com 307140EFG_001 p 8 8
6. Parathyro de 3 0 3 Hypophyse 3 3 3 des cellules endocrine de l ad nohypophyse 75 100 cytoplasmiques 2 3 neuropile de la neurohypophyse 75 100 diffus Prostate 2 1 2 pith lium glandulaire 50 cytoplasmique Glande salivaire 3 1 3 pith lium canalaire 100 cytoplasmique 1 3 pith lium glandulaire 20 cytoplasmique Muscle squelettique 3 0 3 Peau 3 0 3 Intestin gr le 3 1 3 pith lium des muqueuses 20 cytoplasmique Rate 3 3 3 des cellules my lo des 100 cytoplasmiques Estomac 3 3 3 de la muqueuse gastrique 100 cytoplasmiques Testicule 3 0 3 Thymus 3 2 3 corpuscules de Hassal 100 non cellulaires Thyro de 2 0 2 Amygdale 3 2 3 pith lium squameux recouvrant 50 100 cytoplasmiques Ut rus 2 2 2 pith lium glandulaire 15 75 cytoplasmiques Tissus tumoraux Une r vision effectu e par Arber et al a indiqu que les anticorps dirig s contre le CD15 pr sentent une coloration positive dans 87 des cas de maladie de Hodgkin y compris la scl rose nodulaire la cellularit mixte et la d pl tion des lymphocytes alors que la variante dominante des lymphocytes affiche un taux de positivit plus faible 37 Parmi les lymphomes non hodgkiniens 13 expriment le CD15 dont 4 1 lymphocytes B 21 lymphocytes T et 17 cellules nulles L expression du CD15 a
7. Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER ist erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte sollte mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 durchf hren F r PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorwarmtemperatur 65 C Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 C f r 20 1 Minuten auf 65 C abk hlen lassen Schnitte mit auf Raumtemperatur gebrachtem verd nntem EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 absp len 307140EFG_001 p 6 8 Farbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der Farb
8. d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 K8014 Coupes d paraffin es Le pr traitement des coupes de tissus d paraffin s fix s au formol et inclus en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link Temp rature de pr chauffage 65 C temp rature et dur e de restauration de l epitope 97 C pour 20 1 minutes laisser refroidir jusqu 65 C Rincer les coupes avec un EnVision FLEX Wash Buffer 10x dilu temp rature ambiante Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Coupes incluses en paraffine Comme pr paration alternative des chantillons le d paraffinage et la restauration de l pitope peuvent tre r alis s dans le PT Link l aide d une proc dure modifi e Se r f rer aux instructions du Guide d utilisation du PT Link Une fois que la proc dure de co
9. gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Ref IS750 Le sch ma de coloration cellulaire est cytoplasmique et ou membranaire 1 5 Tissus sains Type de tissus nbre test s l ments de tissus color s positivement Surr nale 3 3 3 des cellules endocrines du cortex surr nal 100 cytoplasmiques Moelle osseuse 3 2 3 my locytes 100 cytoplasmiques 1 3 de toutes les cellules 100 cytoplasmiques Sein 2 2 2 pith lium canalaire 25 100 cytoplasmiques Cerveau cervelet 3 3 3 mati re blanche mati re grise 100 diffus Cerveau cervelet 3 3 3 mati re blanche mati re grise 100 diffus Col de l ut rus 2 0 2 1 2 pith lium glandulaire des muqueuses 50 ponctu es C lon 2 apicales cytoplasmiques 1 2 pith lium des muqueuses 20 cytoplasmique sophage 2 2 2 pith lium squameux non basal 100 cytoplasmiques C ur 3 0 3 Rein 3 3 3 pith lium tubulaire cortical 100 cytoplasmiques 2 3 endoth lium cortical et m dullaire 100 cytoplasmiques Foie 3 1 3 endoth lium sinuso dal 40 cytoplasmique Poumon 3 0 3 Cellules m soth liales 3 2 3 des cellules m soth liales 100 cytoplasmiques Nerf p riph rique 3 0 3 Ovaire 3 0 3 Pancr as 3 2 3 des cellules acinaires 25 50 cytoplasmiques
10. 9 English Intended use Synonyms for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied 117467 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD15 Clone Carb 3 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S062 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD15 Clone Carb 3 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of mature granulocytes mononuclear Hodgkin s cells and Reed Sternberg cells in Hodgkin s lymphoma 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Lewis X Le antigen 2 3 3 fucosyl N acetyllactosamine 3 FL 4 X hapten 3 5 stage specific embryonic antigen 1 SSEA 1 2 3 lacto N fucopentaose III LNFP III 3 CD15 is expressed on Reed Sternberg cells of Hodgkin s disease and by various other cell types including myeloid cells and epithelial cells 3 6 Antibodies to CD15 recognize a pentasaccharide sequence occurring in lacto N fucopentaose lIl ceramide also referred to as
11. X hapten of Le found in higher glycolipids and glycoproteins 2 5 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L NaN3 Clone Carb 3 Isotype IgM kappa Affinity isolated X hapten oligopeptide fragment from myelomonocytic leukemia cells In Western blotting of HL60 cell lysates the antibody labels a major band of 220 kDa corresponding to the expected molecular weight of CD15 7 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN3 a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations
12. de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommandee 307140EFG_001 p 4 8 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance 117467 001 Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre des neutrophiles des osinophiles et des macrophages des centres germinatifs et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n
13. docrine cells of adenohypophysis 75 100 cytoplasmic 2 3 Neuropil of neurohypophysis 75 100 diffuse Prostate 2 1 2 Glandular epithelium 50 cytoplasmic Salivary gland 3 1 3 Ductal epithelium 100 apical cytoplasmic 1 3 Glandular epithelium 20 cytoplasmic Skeletal muscle 3 0 3 Skin 3 0 3 Small intestine 3 1 3 Mucosal epithelium 20 apical cytoplasmic Spleen 3 3 3 Myeloid cells 100 cytoplasmic Stomach 3 3 3 Gastric mucosa 100 cytoplasmic Testis 3 0 3 Thymus 3 2 3 Hassel s corpuscles 100 non cellular Thyroid 2 0 2 Tonsil 3 2 3 Overlying squamous epithelium 50 100 cytoplasmic Uterus 2 2 2 Glandular epithelium 15 75 cytoplasmic Abnormal tissues A review by Arber et al has reported that antibodies to CD15 demonstrate positive staining in 87 of Hodgkin s disease including nodular sclerosing mixed cellularity and lymphocyte depletion whereas the lymphocyte predominant variant exhibits a lower rate of positivity 37 Among non Hodgkin s lymphoma 13 express CD15 including 4 1 B cell 21 T cell and 17 null cell CD15 expression has also been demonstrated in acute myeloid leukemia 65 and chronic myelogenous leukemia 96 chronic phase and 54 blast phase A relatively low level of CD15 expression has been reported in acute lymphoblastic leukemia 5 7 overall with positivity observed in 7 7 common or precursor B cell
14. e lacto N fucopentaose Ill c ramide galement appel hapt ne X de Le pr sent dans les glycolipides et glycoprot ines sup rieurs 2 5 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone Carb 3 Isotype IgM kappa Fragment d oligopeptide d haptene isol par affinit provenant de cellules leuc miques my lomonocytaires Par Western blot de lysats de cellules HL60 l anticorps marque une bande principale d environ 220 kDa correspondant au poids mol culaire attendu du CD15 7 307140EFG_001 p 3 8 Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 117467 001 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux co
15. enden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Lewis X Le Antigen 2 3 3 Fucosyl N Acetyllactosamin 3 FL 4 X Hapten 3 5 stadienspezifisches embryonisches Antigen 1 SSEA 1 2 3 Lacto N Fucopentaose III LNFP III 3 CD15 wird in den Reed Sternberg Zellen von Morbus Hodgkin und von verschiedenen anderen Zelltypen einschlie lich Myeloidzellen und Epithelzellen exprimiert 3 6 Antik rper gegen CD15 erkennen eine Pentasaccharid Sequenz die im Lacto N Fucopentaose Ill Ceramid auch als X Hapten von Le bezeichnet auftritt das sich in h heren Glykolipiden und Glykoproteinen findet 2 5 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 Farbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L NaN enth lt Klon Carb 3 Isotyp IgM Kappa Affinit tsisoliertes X Hapten Oligopeptid Fragment au
16. galement t d montr e dans la leuc mie aigu my lo de 65 et dans la leuc mie my lo de chronique 96 en phase chronique et 54 en phase blastique Un niveau relativement faible d expression du CD15 a t signal dans les leuc mies aigu s lymphoblastiques 5 7 globalement avec une positivit observ e dans 7 7 des pr curseurs des lymphocytes B ou des lymphocytes B courants 0 des lymphocytes B 7 7 des lymphocytes T et 17 3 des cellules nulles Les carcinomes li s plusieurs organes se sont galement av r s positifs au CD15 56 y compris les ad nocarcinomes les carcinomes cellules squameuses et les carcinomes petites et grandes cellules indiff renci s 5 307140EFG_001 p 5 8 Deutsch Zweckbestimmung Synonyme fiir das Antigen Zusammenfassung und Erklarung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 117467 001 Code Nr 15062 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD15 Clone Carb 3 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Geraten bestimmt Dieser Antik rper dient zur Erkennung von ausgereiften Granulozyten mononuklearen Hodgkin Zellen und Reed Sternberg Zellen im Hodgkin Lymphom 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintret
17. ion wobei die Variante mit Iymphozyt rer Pr dominanz eine niedrigere Positivit tsrate aufweist 37 Unter den Non Hodgkin Lymphomen exprimieren 13 CD15 einschlie lich 4 1 B Zellen 21 T Zellen und 17 Null Zellen Die CD15 Expression wurde zudem bei der akuten myeloischen Leuk mie 65 und der chronischen myelogenen Leuk mie 96 in der chronischen Phase und 54 in der Blastenphase nachgewiesen Eine relativ schwache CD15 Expression wurde bei akuter Lymphoblastenleuk mie insgesamt 5 7 nachgewiesen wobei eine Positivit t in 7 7 der allgemeinen oder Vorl ufer B Zellen 0 der B Zellen 7 7 der T Zellen und 17 3 der Null Zellen beobachtet wurde Es wurde nachgewiesen dass auch Karzinome unterschiedlicher Organe CD15 positiv sind 56 einschlie lich Adenokarzinome Plattenephitelkarzinome und undifferenzierte gro e und kleine Zellkarzinome 5 1 Pileri SA Ascani S Leoncini L Sabattini E Zinzani PL Piccaluga PP Pileri A Jr Giunti M Falini B Bolis GB Stein H Hodgkin s lymphoma the pathologist s viewpoint J Clin Pathol 2002 55 162 176 2 Ball ED CD15 cluster workshop report In Schlossman SF Boumsell L Gilks W Harlan JM Kishimoto T Morimoto C Ritz J Shaw S Silverstein R Springer T Tedder TF Todd RF eds Leucocyte Typing V White cell differentiation antigens Oxford Oxford Univ Press 1993 1 790 805 3 Kannagi R CD15 Workshop Panel report In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEGK
18. l reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 The cellular staining pattern is cytoplasmic and or membranous 1 5 Normal tissues Tissue Type tested Adrenal 3 Bone marrow 3 Positively Staining Tissue Elements 3 3 Endocrine cells of adrenal cortex 100 cytoplasmic 2 3 Myelocytes 100 cytoplasmic 1 3 All cells 100 cytoplasmic Breast 2 2 2 Ductal epithelium 25 100 cytoplasmic Brain cerebellum 3 3 3 White matter grey matter 100 diffuse Brain cerebrum 3 3 3 White matter grey matter 100 diffuse Cervix 2 0 2 1 2 Mucosal glandular epithelium 50 punctuate apical Colon 2 cytoplasmic 1 2 Mucosal epithelium 20 apical cytoplasmic Esophagus 2 2 2 Non basal squamous epithelium 100 cytoplasmic Heart 3 0 3 Kidney 3 3 3 Cortical tubular epithelium 100 cytoplasmic 2 3 Cortical and medullary endothelium 100 cytoplasmic Liver 3 1 3 Sinusoidal endothelium 40 cytoplasmic Lung 3 0 3 Mesothelial cells 3 2 3 Mesothelial cells 100 cytoplasmic Nerve 3 0 3 Ovary 3 0 3 Pancreas 3 2 3 Acinar cell 25 50 cytoplasmic Parathyroid 3 0 3 307140EFG_001 p 2 8 Frangais Utilisation pr vue Synonymes de l antig ne R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Sp cificit 117467 001 Pituitary 3 3 3 En
19. loration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ou lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides R f S3003 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 ul ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 ul Autoprogram sans contre coloration CD15 ou Autoprogram avec contre coloration CD15H L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique
20. ncentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment a l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption imprim e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes
21. ns with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include neutrophiles eosinophiles and germinal center macrophages and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative contro
22. ode K8010 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 C epitope retrieval temperature and time 97 C for 20 1 minutes cool down to 65 C Rinse sections with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code 3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram without counterstaining CD15 or Autoprogram with counterstaining CD15H The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining ru
23. s myelomonozytischen Leuk miezellen Beim Western Blotting von HL60 Zelllysaten erkannte der Antik rper eine bedeutende Bande bei 220 kDa die mit dem erwarteten Molekulargewicht von CD15 bereinstimmt 7 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in Konzentrationen die nicht als gef hrlich klassifiziert sind mit Blei und Kupferabflussrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen aro Bei 2 8 C aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein
24. te sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Neutrophile Eosinophile und Makrophagen des Keimzentrums enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control
25. ung Leistungsmerkmale 117467 001 Paraffineingebettete Schnitte Zur Probenpr paration kann f r Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link auch ein modifiziertes Verfahren verwendet werden Weitere Informationen siehe PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die Farbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 ul Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 ul Abgabevolumen Autoprogram ohne Gegenf rbung CD15 oder Autoprogram mit Gegenf rbung CD15H Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttragern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschrit
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