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FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD79α Clone JCB117

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1. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD79a Clone JCB117 Ready to use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS621 ENGLISH Intended use Synonyms for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 115260 003 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD79a Clone JCB117 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels B cells and is useful for the identification of B cell neoplasms of all maturation stages 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Ig a mb 1 2 CD79is a disulphide linked transmembrane heterodimer with a molecular mass of 82 95 kDa belonging to the immunoglobulin superfamily It comprises the two glycoproteins CD79ca with a molecular mass of 40 45 kDa and CD79 with a molecular mass of 37 kDa CD79 is non covalently associated with surface lg forming the B cell receptor complex which is required for antigen recognition CD79 is essen
2. hinaus waren 15 von 15 Haarzellleuk mien 13 von 15 anaplastischen gro zelligen B Zelllymphomen und 10 von 20 Myelomen Plasmazytomen mit dem Antik rper positiv In der gleichen Studie waren alle 98 T Zell und nicht Iymphoiden Neoplasmen mit dem Antik rper negativ darunter auch 9 T Zell lymphoblastische Lymphome Leuk mien 10 Mycosis fungoides 32 periphere T Zelllymphome 8 angioblastische T Zelllymphome 11 T Zell anaplastische gro zellige Lymphome und 28 akute myeloide Leuk mien 1 Zwei sp tere Studien 5 6 haben eine positive Reaktion mit T Zellneoplasmen gezeigt Somit wurde mit Hilfe des Antik rpers gezeigt dass von den 149 CD3 positiven F llen von T Vorl ufer akuter Iymphoblastischer Leuk mie lymphoblastischem Lymphom in 14 F llen CD79a auf mehr als 90 der Blastzellen exprimiert wurde In 55 F llen waren 10 90 der Blastzellen positiv 5 Dar ber hinaus wurde in 4 von 94 intestinalen T Zelllymphomen vom enteropathischen Typ und in 1 von 11 nasalen CD3 positiven NK T Zelllymphomen die Mehrheit der Tumorzellen durch den Antik rper markiert 6 Von 149 F llen von T Iymphoblastischer Leuk mie lymphoblastischem Lymphom zeigten 10 eine ausreichend extensive CD79a Markierung mit dem Antik rper mehr als 90 positive Zellen um diagnostische Probleme bei der Unterscheidung zwischen B und T Zellneoplasmen zu verursachen Alle der 149 T Zellneoplasmen waren jedoch positiv f r den T Zellmarker CD3 w hrend keiner von 68 F lle
3. tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre
4. Inc 1997 p 180 2 5 Pilozzi E Pulford K Jones M M ller Hermelink H K Falini B Ralfkiaer E et al Co expression of CD79a JBC117 and CD3 by lymphoblastic lymphoma J Pathol 1998 186 140 3 6 Blakolmer K Vesely M Kummer JA Jurecka W Mannhalter C Chott A Immunoreactivity of B cell markers CD79a L26 in rare cases of extranodal cytotoxic peripheral T NK T cell lymphomas Mod Pathol 2000 13 766 72 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole Catalogue number Temperature limitation Use by Reference catalogue Limites de temperature Utiliser avant Bestellnummer Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis In vitro diagnostic medical device Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer Dispositif medical de diagnostic in vitro Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant In vitro Diagnostikum Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Consult instructions for use Batch code Voir les instructions d utilisation Numero de lot Gebrauchsanweisung beachten Chargenbezeichnung 115260 003 IS621 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
5. Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 Cells labeled by the antibody display membrane and or cytoplasmic staining Normal tissues Normal plasma cells in tissue samples are strongly positive with the antibody 1 In tonsil the antibody strongly labels cells present in T cell areas B cells in the mantle zone of tonsil show a moderate to strong staining reaction whereas B cells in the germinal centers of tonsil show a weak to moderate staining reaction Abnormal tissues The antibody labeled all of 331 B cell neoplasms including 41 lymphoblastic lymphomas leukemias 28 small lymphocytic 36 Iymphoplasmacytoid 17 mantle cell 53 follicular 29 MALT 95 large cell and 7 Burkitts lymphomas Additionally 15 15 hairy cell leukemias 13 15 B cell anaplastic large cell lymphomas and 10 20 myelomas plasmacytomas were positive with the antibody In the same study all of 98 T cell and non lymphoid neoplasms were negative with the antibody including 9 T cell lymphoblastic lymphomas leukemias 10 mycosis fungoides 32 peripheral T cell lymphomas 8 angioblastic T cell lymphomas 11 T cell anaplastic large cell lymphomas and 28 acute myeloid leukemias 1 Two later studies 5 6 have shown positive reaction with T cell neoplasms Thus in 149 cases of CD3 T precursor acute Iymphoblastic leukemia lymphoma 14 cases expressed CD79a on more than 90 of the blast cells as determined with the antibody In 55 cases 10 90 of the blast cells were
6. ach Bindung des Antigens an Oberfl chen Ig Der zytoplasmatische Anteil von CD79a und CD79 enth lt mehrere Kinasen Phosphorylierungssignale ber diese Kinasen f hren zu B Zellen Aktivierung Differenzierung und in einigen F llen Apoptose 2 3 4 Die Expression von CD79 ist weitgehend auf Zellen der B Zelllinie beschr nkt CD79a wird jedoch mit CD3 ko exprimiert wobei das Verh ltnis dem von T Iymphoblastischer Leuk mie T Iymphoblastischen Lymphom entspricht 5 In Vorl ufer B Zellen werden die CD79 Proteinketten bereits im Zytoplasma exprimiert CyCD79 Die Oberfl chenexpression von CD79 beginnt w hrend der Pro B Zell Phase und dauert w hrend der gesamten B Zelldifferenzierung an CD79a wird von B Zellen in der follikul ren Mantelzone st rker exprimiert als von B Zellen des Keimzentrums was darauf hinweist dass die Aktivierung reifer B Zellen die CD79 Expression herunterreguliert Die CD79 Expression wird zu Beginn der Plasmazelldifferenzierung beendet wobei nur ein Teil der Plasmazellen CD79 enth lt 2 4 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfe
7. aterialien hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen F rbeverfahren Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und und erfo
8. cytes B sur 15 et 10 cas de my lomes plasmocytomes sur 20 taient positifs l anticorps Au cours de la m me tude chacun des 98 n oplasmes non lympho des et lymphocytes T taient n gatifs l anticorps dont 9 cas de lymphome leuc mie lymphoblastes T 10 mycoses fongo des 32 l ymphomes p riph riques lymphocytes T 8 lymphomes angioblastiques lymphocytes T 11 Iymphomes anaplasiques grands lymphocytes T et 28 leuc mies my lo des aigu s 1 Deux tudes post rieures 5 6 ont montr une r action positive avec les n oplasmes lymphocytes T Ainsi dans 149 cas de lymphomes leuc mies lymphoblastiques aigu s pr curseurs des lymphocytes T positifs la CD3 14 cas ont exprim la CD79 sur plus de 90 des blastocytes tel que d termin par l anticorps Dans 55 cas de 10 90 des blastocytes taient positifs 5 De plus dans 4 cas sur 94 de lymphome lymphocytes T intestinal de type ent ropathique et dans 1 cas sur 11 de lymphome lymphocytes T NK nasal qui taient positifs la CD3 la majorit des cellules tumorales taient marqu es par l anticorps 6 Dans 149 cas de lymphomes leuc mies Iymphoblastes T 10 ont pr sent un marquage suffisamment important de la CD79 par l anticorps plus de 90 de cellules positives pour entra ner des probl mes de diagnostic li s la distinction des n oplasmes lymphocytes B et T Cependant chacun des 149 cas de n oplasmes lympho
9. cytes T s est av r positif au marqueur des lymphocytes T savoir la CD3 alors qu aucun des 68 cas de lymphomes leuc mies Iymphoblastiques lymphocytes B n tait positif la CD3 5 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD79a Clone JCB117 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert B Zellen und dient zur Identifizierung von B Zellen Neoplasmen aller Reifestadien 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Ig a mb 1 2 CD79 ist ein ber Disulfid Br cken verbundenes Transmembran Heterodimer mit einem Molekulargewicht von 82 95 kDa und geh rt zur Superfamilie der Immunglobuline Es umfasst die beiden Glykoproteine CD79a mit einem Molekulargewicht von 40 45 kDa und CD79 mit einem Molekulargewicht von 37 kDa CD79 ist nicht kovalent mit dem Oberfl chen Ig verbunden Dabei entsteht der B Zellen Rezeptorkomplex der f r die Antigenerkennung erforderlich ist CD79 ist f r eine effiziente Oberfl chenexpression des B Zellrezeptors unerl sslich und ist ebenfalls notwendig bei der Signal bertragung in das Zytoplasma n
10. enf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen inallen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Auswertung der F rbung Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine zytoplasmatische und oder membran se F rbung auf Leistungsmerkmale Gesundes Gewebe Normale Plasmazellen in Gewebeproben reagieren mit dem Antik rper stark positiv 1 In Mandelgewebe markiert der Antik rper in starkem Ausma B Zellen in T Zellbereichen Die B Zellen in der Mantelzone von Mandelgewebe zeigen eine m ige bis starke F rbereaktion w hrend B Zellen in den Keimzentren von Mandelgewebe eine schwache bis m ige F rbereaktion aufweisen Pathologisches Gewebe Der Antik rper markierte alle 331 B Zellneoplasmen einschlie lich 41 lymphoblastische Lymphome Leuk mien 28 kleine Lymphozyten 36 Lymphoplasmazytoiden 17 Mantelzellen 53 follikul re 29 MALT 95 gro zellige und 7 Burkitt Lymphome Dar ber
11. ine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 IS621 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Zweckbestimmung Synonyme f r das Antigen Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen 115260 003 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram CD79 sans contre coloration ou CD79H avec contre coloration L
12. is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram CD79 without counterstaining or CD79H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operators Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each ind
13. ividual laboratory Ifthe evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics IS621 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRANCAIS Utilisation prevue Synonymes de l antig ne R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni 115260 003 Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control
14. la CD79 cesse lors du d but de la diff renciation cellulaire plasmatique avec seulement une partie des cellules plasmatiques qui contiennent la CD79 2 4 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone JCB117 1 Isotype IgG1 kappa Prot ine recombinante contenant une partie de la portion extracellulaire de la glycoprot ine CD79a humaine 1 Anti Human CD79o clone JCB117 a t class comme un anti CD79o la Sixth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens Sixieme Conference et Atelier Internationaux sur les Antigenes de Differenciation des Leucocytes Humains HLDA en 1996 4 Dans les analyses par Western blot de Iysat de lymphocytes B Ramos l anticorps marque une bande correspondant la CD79a dans des conditions r ductrices et une bande correspondant la CD79a dans des conditions non r ductrices 1 L a
15. m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen IS621 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Lagerung Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Vorbereitung der Probe Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca und erforderliche aber 4 um St rke geschnitten werden nicht mitgelieferte Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen M
16. n der Iymphoblastischen Leuk mien Lymphome CD3 positiv war 5 References References Literatur 1 Mason DY Cordell JL Brown MH Borst J Jones M Pulford K et al CD79 a novel marker for B cell neoplasms in routinely processed tissue samples Blood 1995 86 1453 9 2 Comans Bitter WM De Bruin Versteeg S Broe MK De Groot R De Vries E Van Dongen JJM BC20 1 CD79 workshop intracellular CD79 expression in precursor B cells tested with the CD79 panel of monoclonal antibodies In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing Inc 1997 p 182 4 3 Nakamura T CD guide CD79 and CD79 In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing Inc 1997 p 1172 4 Nakamura T BC20 CD79 workshop panel report In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing
17. nalyse par immunoblot PAGE en pr sence de SDS d immunoprecipites form s entre l anticorps et marqu s l iode I l g rement d natur e et un lysat r duit de lymphocytes B Ramos a montr une faible r action avec un polypeptide de 43 kDa correspondant la CD79o 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doi
18. ose de deux glycoprot ines CD79a de masse mol culaire 40 45 kDa et CD79 de masse mol culaire 37 kDa La CD79 est associ e de mani re non covalente avec l Ig de surface formant le complexe du r cepteur des lymphocytes B qui est n cessaire la reconnaissance de l antig ne La CD79 est essentielle l expression de surface efficace du r cepteur des lymphocytes B et est galement n cessaire la transmission du signal vers le cytoplasme apr s la liaison de l antigene l Ig de surface La partie cytoplasmique de la CD79a et de la CD798 contient plusieurs kinases Les signaux de phosphorylation via ces kinases entra nent l activation des lymphocytes B la diff renciation et dans certains cas l apoptose 2 3 4 L expression de la CD79 est largement limit e aux cellules de la lign e B mais la CD79 est coexprim e avec la CD3 dans un certain pourcentage de lymphomes leuc mies lymphoblastes T 5 Dans les lymphocytes B pr curseurs les cha nes de la prot ine CD79 sont d j exprim es dans le cytoplasme CyCD79 L expression de surface de la CD79 commence au stade des cellules pro B et persiste tout au long de la diff renciation des lymphocytes B La CD79a est plus fortement exprim e par les lymphocytes B dans la zone du manteau folliculaire que par les lymphocytes B des centres germinatifs ce qui laisse penser que l activation de lymphocytes B matures r gule l expression de la CD79 la baisse L expression de
19. piration date sta mped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections
20. positive 5 Further in 4 94 of enteropathy type intestinal cell lymphomas and 1 11 nasal NK T cell lymphomas which were CD3 the majority of tumor cells were labeled by the antibody 6 Of 149 cases of T lymphoblastic leukemia lymphoma 10 showed sufficiently extensive CD79a labeling with the antibody more than 90 positive cells to cause diagnostic problems in distinguishing between B and T cell neoplasms All of the 149 T cell neoplasms were however positive for the T cell marker CD3 while none of 68 cases of B Iymphoblastic leukemia lymphoma were CD3 positive 5 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD79a Clone JCB117 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les lymphocytes B et facilite l identification des n oplasmes lymphocytes B tous les stades de maturation 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Ig a mb 1 2 La CD79 est un h t rodim re transmembranaire liaison disulfure dont la masse mol culaire est de 82 95 kDa et qui appartient la superfamille des immunoglobulines Elle se comp
21. r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique et ou membranaire Tissus sains Les cellules plasmatiques normales dans les chantillons de tissus sont fortement positives l anticorps 1 Dans l amygdale l anticorps marque fortement les cellules pr sentes dans les zones des lymphocytes T Les lymphocytes B de la zone du manteau des amygdales pr sentent une coloration mod r e forte tandis que la coloration des lymphocytes B des centres germinatifs des amygdales est faible mod r e Tissus tumoraux L anticorps a marqu chacun des 331 n oplasmes lymphocytes B dont 41 cas de lymphomes leuc mies Iymphoblastes 28 lymphomes lymphocytaires petites cellules 36 Ilymphomes lymphoplasmacyto des 17 Iymphomes cellules du manteau 53 lymphomes folliculaires 29 cas de MALT 95 Iymphomes grandes cellules et 7 lymphomes de Burkitt De plus 15 cas de leuc mies cellules chevelues sur 15 13 cas de lymphomes anaplasiques grands lympho
22. rderliche aber Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert nicht mitgelieferte Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Materialien Autoprogram CD79 ohne Gegenf rbung oder CD79H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Geg
23. rtiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon JCB117 1 Isotyp IgG1 Kappa Rekombinantes Protein das einen Teil der extrazellul ren Dom ne des menschlichen CD79a Glykoproteins enth lt 1 Anti Human CD79a Clone JCB117 wurde bei dem der 6th International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 6 Internationale r Workshop und Konferenz ber menschliche Leukozyten differenzierende Antigene in Kobe im Jahr 1966 als Anti CD79 geclustert 4 Beim Western Blotting von Ramos B Zelllysat markiert der Antik rper unter reduzierten Bedingungen eine CD79a entsprechende Bande und unter nicht reduzierten Bedingungen eine Bande die CD79o entspricht Die SDS PAGE Analyse der Immunpr zipitate die zwischen dem Antik rper und I markierten schwach denaturierten und reduzierten Lysaten aus Ramos B Zellen entstehen zeigt eine schwache Reaktion mit einem 43 kDa Polypeptid das CD79 entspricht 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs
24. stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone JCB117 1 Isotype IgG1 kappa Recombinant protein containing part of the extracellular portion of the human CD79a glycoprotein 1 Anti Human CD79a clone JCB117 was clustered as anti CD 79a at the Sixth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens held in Kobe in 1996 4 In Western blotting of Ramos B cell lysate the antibody labels a band corresponding to CD79 under reducing conditions and a band corresponding to CD79o under non reducing conditions 1 SDS PAGE analysis of immunoprecipitates formed between the antibody and I labeled mildly denatured and reduced lysate of Ramos B cells shows weak reaction with a 43 kDa polypeptide corresponding to CD79o 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after ex
25. tial for efficient surface expression of the B cell receptor and is also necessary for signal transmission into the cytoplasm following antigen binding to surface Ig The cytoplasmic portion of CD79a and CD79 contains several kinases Phosphorylation signals via these kinases result in B cell activation differentiation and in some cases apoptosis 2 3 4 The expression of CD79 is largely restricted to B linage cells but CD79a is coexpressed with CD3 in a proportion of T Iymphoblastic leukaemia lymphoma 5 In precursor B cells the CD79 protein chains are already expressed in the cytoplasm CyCD79 Surface expression of CD79 begins at the pro B cell stage and persists throughout the B cell differentiation CD79 is more strongly expressed by B cells in the follicular mantle zone than by germinal centre B cells suggesting that activation of mature B cells downregulates CD79 expression CD79 expression ceases around the onset of plasma cell differentiation with only a proportion of plasma cells containing CD79 2 4 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing
26. vent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de details se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraff

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