FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD43 Clone DF-T1
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1. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clone DF T1 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS636 ENGLISH Intended use Synonyms for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 117325 003 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clone DF T1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments Antibodies against CD43 may be useful for the identification of low grade B cell lymphomas peripheral T cell lymphomas and myeloid disorders 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Leukosialin gpL115 sialophorin leucocyte sialoglycoprotein 2 Human CD43 is a single chain integral membrane protein with an apparent molecular weight between 95 000 and 135000 2 The mucin like 234 amino acid extracellular domain is extensively glycosylated with 70 85 O linked carbohydrate chains containing the sialyl Lewis X epitope Thus the molecule may act as a ligand for P2. Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 ul Anwendungsvolumen oder FLEXRTUS3 300 ul Anwendungsvolumen Autoprogramm CD43 ohne Gegenf rbung oder CD43H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte bei Raumtemperatur durchf hren N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Die optimalen Bedingungen k nnen sich je nach Probe und Pr parationsverfahren unterscheiden und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogramm
3. ren myeloiden Tumoren reagierten alle untersuchten Proben stark positiv auf CD43 unabh ngig vom Differenzierungsgrad der myeloischen Zellen 1 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder der Gebrauchsanweisung f r das jeweilige IHC Detektionsverfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Proben 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper gel st in einem Puffer der Stabilisierungsprotein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon DF T1 4 Isotyp IgG1 Kappa KG1 Zellen myeloblastische Zelllinie Die Reaktivit t des Antik rpers im Western Blot bzw bei immunzytochemischen Verfahren entspricht derjenigen geclusterter CD43 Antik rper Dar ber hinaus reagiert der Antik rper stark mit COS 7 Zellen Nierenzelllinie des Affen die mit dem CD43 Gen transfiziert wurden nur mit dem Vektor transfizierte Kontrollzellen dagegen sind negativ 4 Der Antik rper f hrt bei normalen Leukozyten sowie bei T Zellen und myeloischen monozytischen Zelllinien zur schnellen und heftigen Zellaggregatbildung 5 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als unge
4. autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de details se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doiven
5. der T Zell Lymphome mit dem Antik rper Von 20 B Zell Lymphomen waren 4 von 6 vom kleinzelligen Iymphozytischen Typ und 1 von 2 vom diffus kleinzellig gespaltenen Typ Zentrozyten Lymphom positiv alle 6 follikul ren 2 diffus gro zellige und 2 Haarzellenleuk mien dagegen waren negativ 4 Bei Meningiomen wurden infiltrierende T Zellen in 29 der 34 F lle mit dem Antik rper markiert 7 Bei der immunohistochemischen Analyse von 51 F llen von multiplem Myelom Plasmazytom wurde in 59 der F lle eine positive Markierung mit dem DF T1 Antik rper beobachtet 8 Bei 3 von 32 Patienten mit Myelodysplasiesyndrom wurde auf den meisten h matopoetischen Zellen eine erniedrigte CD43 Expression beobachtet 9 References References Literatur 1 Leong A Cooper K Leong F Manual of diagnostic antibodies for immunohistology 2 edition Greenwich Medical Media 2003 p 167 170 2 Horejsi V CD guide CD43 In Mason D Andre P Bensussan A Buckley C Civin C Clark E et al editors Leucocyte typing VII White cell differentiation antigens Proceedings of the 7th International Workshop and Conference 2000 Jun 19 23 Harrogate United Kingdom New York Oxford University Press Inc 2002 p 790 1 3 Ostberg JR Barth RK Frelinger JG The Roman god Janus a paradigm for the function of CD43 Immunology Today 1998 19 546 50 Stross WP Warnke RA Flavell DJ Flavell SU Simmons D Gatter KC et al Molecule detected in formalin fixed tissue by
6. limitation Use by Limites de temperature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Hersteller Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS636 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
7. protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics IS636 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRANCAIS Utilisation prevu Synonymes de l antig ne R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 117325 003 Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IR750 Cells labeled by the antibody display membranous staining Normal tissues M
8. r activit immunohistochimique de l anticorps sont identiques aux anticorps anti CD43 En outre l anticorps r agit fortement aux cellules COS 7 lign e cellulaire r nale de singe transfect es avec le g ne du CD43 alors que les cellules de contr le transfect es uniquement avec le vecteur sont n gatives 4 Cet anticorps entra ne une agr gation rapide et forte des leucocytes normaux d une part et des lign es cellulaires my lo des monocytaires et T d autre part 5 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions
9. Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue s
10. and E selectin Furthermore the CD43 antigen may associate with intercellular adhesion molecule 1 ICAM 1 CD54 The physiological understanding of the function of CD43 has been hindered by contradictory results and so far data in support of the following functions has been provided anti adhesion adhesion signalling and cytoskeletal interaction 3 CD43 is expressed typically at high levels on all leukocytes except most resting B lymphocytes The expression on platelets is weak CD43 is rapidly lost from lymphocyte and neutrophil surface by proteolytic shedding after activation with various stimuli 2 Although normal small B lymphocytes are negative for CD43 most low grade B cell lymphomas are positive However hairy cell leukaemia MALT lymphoma and follicle centre cell lymphomas are generally negative for CD43 Peripheral T cell lymphomas are more often positive than negative In a study of 28 extramedullary myeloid tumors all were intensely positive for CD43 irrespective of the differentiation of the myeloid cells 1 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer con
11. antibodies MT1 DF T1 and L60 Leu 22 corresponds to CD43 antigen J Clin Pathol 1989 42 953 61 1 5 de Smet W Walter H van Hove L A new CD43 monoclonal antibody induces homotypic aggregation of human leucocytes through a CD11a CD18 dependent and independent mechanism Immunology 1993 79 46 54 6 Beschorner R Horny HP Petruch UR Kaiserling E Frequent expression of haemopoietic and non haemopoietic antigens by reactive plasma cells an immunohistochemical study using formalin fixed paraffin embedded tissue Histol Histopathol 1999 14 805 12 Be L Mark SJ Nyland H An immunohistochemical study of monuclear cells in meningiomas Neuropathol Appl Neurobiol 1992 18 548 58 8 Petruch UR Horny HP Kaiserling E Frequent expression of haemopoietic and non haemopoietic antigens by neoplastic plasma cells an immunohistochemical study using formalin fixed paraffin embedded tissues Histopathology 1992 20 35 40 9 Kyriakou DS Alexandrakis M Tzardi M Stephanaki D Eliopoulos GD Downregulation of CD43 in RAEB and RAEB T patients Report of 3 cases Am J Hematol 2000 63 20 7 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 117325 003 Catalogue number Reference catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif medical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature
12. des stimuli divers le CD43 dispara t rapidement de la surface des lymphocytes et des neutrophiles par limination prot olytique 2 Bien que les lymphocytes B normaux de petite taille soient n gatifs au CD43 la plupart des lymphomes lymphocytes B de faible malignit sont positifs Cependant les leuc mies tricoleucocytes les lymphomes de MALT ainsi que les lymphomes cellules centro folliculaires sont g n ralement n gatifs au CD43 Les Iymphomes T p riph riques sont plus souvent positifs que n gatifs Dans une tude portant sur 28 tumeurs my lo des extra m dullaires toutes taient fortement positives au CD43 quel que soit le degr de diff rentiation des cellules my lo des 1 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone DF T1 4 Isotype IgG1 kappa Cellules KG1 lign e cellulaire my loblastique Le r sultat du test Western blot et la
13. ections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS 300 uL dispense volume Autoprogram CD43 without counterstaining or CD43H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory Ifthe evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the
14. er une contre coloration l aide d hematoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter les sch mas de r action d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IR750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration membranaire Tissus sains la plupart des cellules du cortex et de la medulla du thymus sont fortement marqu es L analyse de 36 chantillons comportant des cellules plasmatiques r actives a pr sent un marquage de plus de 1 de ces cellules dans 28 des cas 6 Dans l amygdale les amas de lymphocytes T dans la zone T pr sentent une forte coloration alors que les lymphocytes T isol s ainsi que les macrophages dans les centres germinatifs pr sentent une coloration mod r e forte Tissus tumoraux dans les tumeurs malignes h matolympho des 10 cas de Iymphomes lymphocytes T sur 15 se sont av r s positifs l anticorps Sur 20 lymphomes B 4 Iymphomes lymphocyta
15. f hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlic
16. h Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH IS636 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen
17. ierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten parallel zu den Patientenproben und nach demselben Protokoll angef rbt werden Als positive Kontrolle sollte Mandelgewebe verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die unter Leistungsmerkmale f r dieses Gewebe beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IR750 Mit dem Antik rper markierte Zellen weisen eine Membranf rbung auf Gesundes Gewebe Zellen in Kortex und Medulla des Thymus werden zumeist stark markiert Bei der Untersuchung von 36 Proben mit reaktiven Plasmazellen wiesen in 28 der F lle mehr als 1 der Plasmazellen eine Markierung auf 6 In den Mandeln zeigten die zusammengedr ngten T Zellen in der T Zone eine starke F rbung wogegen die isolierten T Zellen und die Makrophagen in den Keimzentren eine m ige bis starke F rbung aufwiesen Pathologisches Gewebe Bei h matolymphoiden Tumoren reagierten 10 von 15
18. ires petites cellules sur 6 et 1 des 2 Iymphomes diffus petites cellules clivees centrocytiques taient positifs alors que les 6 leuc mies folliculaires les 2 leuc mies diffuses grandes cellules et les 2 leuc mies tricoleucocytes ont r agi de mani re n gative l anticorps 4 Dans les m ningiomes le marquage des lymphocytes T infiltrants par l anticorps a t observ dans 29 cas sur 34 7 L analyse immunohistochimique de 51 cas de my lomes multiples plasmacytome a r v l un marquage positif par l anticorps anti DF T1 dans 59 des cas 8 Une r gulation la baisse de l expression du CD43 sur la plupart des cellules h matopo tiques a t signal e chez 3 des 32 patients souffrant d un syndrome my lodysplasique 9 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clone DF T1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Antik rper gegen CD43 k nnen beim Nachweis von schwach ausgepr gten B Zelllymphomen peripheren T Zelllymphomen und myeloiden St rungen behilflich sein 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Untersuchung mit geeigneten Kontrollen erg nzt und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer Tests vorgenommen werden Le
19. mes B de faible malignit de lymphomes T p riph riques et de troubles de type my lo de 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Leucosialine gpL115 sialophorine sialoglycoprot ine de leucocyte 2 Le CD43 humain est une prot ine membranaire monocat naire dont la masse mol culaire apparente se situe entre 95000 et 135000 2 Le domaine extracellulaire de l acide amin 234 de type mucine est largement glycosyl par 70 85 cha nes d hydrates de carbone li es par les atomes d oxyg ne contenant l pitope de type sialyl Lewis X Ainsi la mol cule peut agir comme ligand pour les s lectines P et E De plus l antig ne CD43 peut s associer la mol cule d adh sion intercellulaire 1 ICAM 1 CD54 La compr hension de la fonction physiologique du CD43 a t g n e par des r sultats contradictoires et ce jour on a pu obtenir des donn es confirmant les fonctions suivantes anti adh sion adh sion signalisation et interaction au niveau du cytosquelette 3 Le CD43 est exprim g n ralement des niveaux lev s sur tous les leucocytes l exception de la plupart des lymphocytes B au repos Son expression sur les plaquettes est faible Apr s activation par
20. nonyme f r das Antigen Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifit t Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 117325 003 L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectu
21. ost cells in the cortex and medulla of the thymus are strongly labeled Analysis of 36 specimens with reactive plasma cells showed labeling of more than 1 of the plasma cells in 28 of the cases 6 In tonsil the crowded T cells in the T zone show a strong staining reaction whereas the isolated T cells as well as the macrophages in the germinal centers show a moderate to strong staining reaction Abnormal tissues In haematolymphoid malignancies 10 15 T cell lymphomas were positive with the antibody Of 20 B cell lymphomas 4 6 small lymphocytic and 1 2 diffuse small cleaved cells centrocytic were positive whereas all of 6 follicular 2 diffuse large cell and 2 hairy cell leukemias reacted negatively with the antibody 4 In meningiomas labeling of infiltrating T cells with the antibody has been reported in 29 of 34 cases 7 Immunohistochemical analysis of 51 cases of multiple myeloma plasmacytoma revealed positive labeling with the DF T1 antibody in 59 of the cases 8 Downregulation of CD43 expression on most haematopoietic cells has been reported in 3 of 32 patients suffering from myelodysplastic syndrome 9 Pour utilisation lors d un diagnostic in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD43 Clone DF T1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Les anticorps anti CD43 peuvent tre utiles l identification de Iympho
22. t tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Le systeme de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume d application de 200 uL ou FLEXRTU3 volume d application de 300 uL Programme automatique CD43 sans contre coloration ou CD43H avec contre coloration IS636 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Interpretation de la coloration Caracteristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Sy
23. taining stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone DF T1 4 Isotype IgG1 kappa KG1 cells myeloblastic cell line Western blotting and immunohistochemical reactivity of the antibody is identical with that of CD43 clustered antibodies Additionally the antibody reacts strongly with COS 7 cells monkey kidney cell line transfected with the CD43 gene while control cells transfected with the vector only are negative 4 The antibody causes rapid and vigorous aggregation among normal leucocytes and among T and myeloid monocytic cell lines 5 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product
24. ukosialin gpL115 Sialophorin Leukozyten Sialoglycoprotein 2 Menschliches CD43 ist ein einkettiges integrales Membranprotein mit einem scheinbaren Molekulargewicht zwischen 95 000 und 135 000 2 Die muzinartige 234 Aminos uren lange extrazellul re Dom ne ist mit 70 85 O gebundenen Kohlenhydratketten die das Sialyl Lewis X Epitop enthalten stark glykosyliert Dadurch kann das Molek l als Ligand f r P und E Selektin agieren Dar ber hinaus kann sich das CD43 Antigen mit dem interzellul ren Adh sionsmolek l 1 ICAM 1 CD54 assoziieren Das Verst ndnis der physiologischen Funktion von CD43 wurde durch einander widersprechende Forschungsergebnisse erschwert Die bisher vorliegenden Daten weisen auf folgende Funktionen hin Anti Adh sion Adh sion Signal bertragung und Zytoskelett Interaktion 3 CD43 wird in der Regel mit hohen Expressionsniveaus auf allen Leukozyten mit Ausnahme der ruhenden B Lymphozyten exprimiert Auf Thrombozyten ist die Expression schwach CD43 l st sich nach Aktivierung durch verschiedene Stimuli schnell infolge von proteolytischer Abspaltung von Lymphozyten und Neutrophilenoberfl chen 2 Zwar sind normale kleine B Lymphozyten negativ f r CD43 die meisten schwach ausgepr gten B Zell Lymphome sind jedoch positiv Haarzellenleuk mie MALT Lymphome sowie Follikelzentrum Lymphome sind jedoch in der Regel CD43 negativ Periphere T Zelllymphome sind fter positiv als negativ In einer Studie an 28 extramedull
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