FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 18 Clone
Contents
1. 4 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 18 Clone DC 10 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code I1S618 ENGLISH Intended use For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 18 Clone DC 10 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels epithelial cells in those epithelia expressing cytokeratin 18 and hence the antibody is a useful tool for the differentiation and identification of epithelial tumors 1 and epithelioid hemangioendotheliomas 2 Antibodies to cytokeratin 18 may also be useful for the identification of seminomas 3 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Summary and explanation Cytokeratin 18 belongs to the intermediate filaments which create a cytoskeleton in almost all cells In contrast to other intermediate filaments cytokeratins CKs are made up of a highly complex multigene family of polypeptides with molecular masses ranging from 40 to 68 kDa Until now 20 distinct CK polypeptides 4 5 have been revealed in various human epithelial cells 6 They can be divided into an acidic type I and a neutral basic type2. B a IL a Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen Catalogue number Temperature limitation Use by vorzubeugen Reference catalogue Limites de temp rature Utiliser avant 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden Bestellnummer Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Contains sufficient for lt n gt tests PANNE Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro Lagerung In vitro Diagnostikum Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produ
3. produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conservation Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il ny a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais n
4. Il subfamily CK18 a 45 kDa protein belongs to the acidic type of cytokeratins and is typically expressed in simple nonstratified epithelia However CK18 is also expressed in basal and superficial cells of transitional epithelium as well as in the luminal secretory cells of complex epithelia 6 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Reagent provided Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone DC 10 7 Isotype IgG1 kappa Immunogen PCM 42 human breast carcinoma cell line 7 Specificity In Western blotting of cytokeratin preparations from BT 20 cells the antibody labels a single band of 45 kDa corresponding to CK18 7 In immunocytochemistry on human cultured cell lines the antibody labels tumor cells of epithelial origin whereas normal fibroblasts and tumor cells of non epithelial origin such as glioma melanoma and osteosarcoma are not labeled 7 Precautions 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as
5. le foie les cellules pith liales de la v sicule biliaire pr sentent une coloration mod r e forte alors que la coloration des membranes des cellules h patiques est faible mod r e Tissus tumoraux Dans les tumeurs du pancr as l anticorps a marqu 6 6 carcinomes cellules acinaires 1 1 pancr atoblastome 19 20 tumeurs neuroendocrines du pancr as et 10 19 tumeurs pseudopapillaires solides 9 De plus l anticorps a marqu 30 30 sarcomes synoviaux biphasiques 21 46 sarcomes synoviaux monophasiques et 8 17 sarcomes synoviaux mal diff renci s 10 Dans les cas de tumeurs vasculaires l anticorps a marqu les cellules endoth liales dans 17 17 h mangio endoth liomes pith lio des 9 14 angiosarcomes pith lio des 6 10 hemangiomes cellules fusiformes 2 7 lymphangiomes 10 48 angiosarcomes non pith lio des 3 13 hemangiomes veineux et 1 18 hemangiome capillaire Aucun marquage n a t observ dans 4 cas d hemangiomes caverneux et 6 cas de sarcomes de Kaposi 2 Le test par l anticorps sur s minome carcinome du poumon petites cellules carcinome cellules de Merkel et carcinome mammaire invasif a pr sent une r action positive DEUTSCH Zweckbestimmung Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 18 Clone DC 10 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten be
6. EX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended Staining procedure including materials required but not supplied The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 uL dispense volu
7. chnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CK18 ohne Gegenf rbung oder CK18H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzel
8. cielles de l pith lium transitionnel ainsi que dans les cellules luminales s cr toires des pith liums complexes 6 Se r f rer aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales R actifs fournis Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone DC 10 7 Isotype IgG kappa Immunog ne PCM 42 lign e cellulaire de carcinome mammaire humain 7 Sp cificit Lors d analyses par Western blot de pr parations de cytok ratine de cellules BT 20 l anticorps marque une seule bande de 45 kDa correspondant la CK18 7 En immunocytochimie sur les lign es de cultures cellulaires humaines l anticorps marque les cellules tumorales d origine pith liale alors que les fibroblastes normaux et les cellules tumorales d origine non pith liale ex gliomes m lanomes et ost osarcomes ne sont pas marqu s 7 Pr cautions 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN
9. de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram CK18 sans contre coloration ou CK18H avec contre coloration 115280 003 IS618 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es a temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le ser
10. hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Specimen preparation including materials required but not supplied The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FL
11. heiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Lebergewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Auswertung der F rbung Mit diesem Antik rper mar
12. kierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches F rbemuster auf Leistungsmerkmale Gesundes Gewebe Im Allgemeinen markiert der Antik rper einfache Epithelien und bergangsepithelien Geschichtete Epithel Komponenten sind dagegen negativ Die Markierung umfasst einfache Epithelien aus Darm Bronchialbaum und den Alveolen des Atmungsapparats aus Nierentubuli Galleng ngen Oberfl chenmukosa des Endometriums und der Endozervix dem Eileiterepithel und dem Netzepithel von Hoden und Eierst cken Au erdem markiert der Antik rper Hepatozyten und Azini des Pankreas Weiterhin markiert der Antik rper die mehrschichtigen Dr senepithelien der Brust Speichel und Schwei dr sen sowie das bergangsepithel der Harnblase 7 Die peridontalen Epithelzellen werden ebenfalls markiert 8 Von den nicht epithelialen Zellen markiert der Antik rper Endothelzellen in Venolen Lymphgef en und Kapillaren in Geweben wie etwa der Haut subkutanen Weichteilen Skelettmuskeln der Plazenta und z B die Schleimh ute des Atmungstrakts des Gastrointestinaltrakts sowie des Genitaltrakts 2 Epithelgewebe welche kein CK18 enthalten z B Epidermis Fu sohlenepidermis Vagina Ektozervix Speiser hre und myoepitheliale Zellen werden vom Antik rper nicht markiert 7 In der Leber zeigen die Gallen Epithelzellen eine m ige bis starke F rbereaktion w hrend die Membranen der Leberzellen eine schwache bis m ige F rbereaktion zeigen Pathologisches Gewebe Bei Pank
13. ktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Consult instructions for use Batch code Voir les instructions d utilisation Numero de lot Gebrauchsanweisung beachten Chargenbezeichnung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden 115280 003 IS618 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 115280 003 IS618 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
14. ma 1988 7 495 504 Sculean A Berakdar M Pahl S Windisch P Brecx M Reich E et al Patterns of cytokeratin expression in monkey and human periodontium following regenerative and conventional periodontal surgery J Periodont Res 2001 36 260 8 Geliefertes Reagenz Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon DC 10 7 Isotyp IgG1 Kappa NDN Immunogen PCM 42 Zelllinie des menschlichen Mammakarzinoms 7 ek 9 Notohara K Hamazaki S Tsukayama C Nakamoto S Kawabata K Mizobuchi K et al Solid pseudopapillary tumor of the pancreas immunohistochemical localization of Do Blotti Zvtokeratinpr BT 20 Zell kiert der Antik ine Band 45 kDa Zellen CK18 7 neuroendocrine markers and CD10 Am J Surg Pathol 2000 24 1361 71 EM NES SNS ONInO VON ZUORSISHNpIABAIAUONEN AUSE SNAAR MAKERE SEI ANNEOIDSF EINE SANS VON SEI SZENEN 7 9 Miettinen M Limon J Niezabitowski A Lasota J Patterns of keratin polypeptides in 110 biphasic monophasic and poorly differentiated synovial sarcomas Virchows Arch Bei der immunzytochemischen Untersuchung menschlicher kultivierten Zelllinien markiert der Antik rper Tumorzellen aus dem Epithel w hrend normale Fibroblasten und 2000 437 275 83 Nicht Epithel Tumorzellen aus Gliom Melanom oder Osteosarkom nicht markiert werden 7 Vorsichtsma nahmen 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt _
15. marque les cellules pith liales des pith liums exprimant la cytok ratine 18 et par cons quent facilite la diff renciation et l identification des tumeurs pith liales 1 et des hemangio endotheliomes pith lio des 2 Les anticorps dirig s contre la cytok ratine 18 peuvent galement s av rer utiles dans l identification des seminomes 3 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi R sum et explication La cytok ratine 18 fait partie des filaments interm diaires qui cr ent un cytosquelette dans presque toutes les cellules la diff rence des autres filaments interm diaires les cytok ratines CK sont constitu es d une famille multig nique hautement complexe de polypeptides dont les poids mol culaires varient entre 40 et 68 kDa A ce jour vingt polypeptides de CK distincts 4 5 ont t identifi s dans diverses cellules pith liales humaines 6 Les CK peuvent tre divis es en sous familles type acide et type Il neutre basique La CK18 une prot ine de 45 kDa appartient aux cytok ratines de type acide et est g n ralement exprim e dans les pith liums simples non stratifi s Cependant la CK18 est galement exprim e dans les cellules basales et superfi
16. me Autoprogram CK18 without counterstaining or CK18H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended 115280 003 IS618 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Positive and negative c
17. on fourni L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec demasquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Ref K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Ref K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure
18. ontrols should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include liver and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 Staining interpretation Cells labeled by the antibody display cytoplasmic staining Performance characteristics Normal tissues In general the antibody labels simple epithelia and transitional epithelium as opposed to stratified epithelial components which are negative The labeling includes simple epithelia from the intestine bronchial tree and alveoli of the respiratory system kidney tubuli bile ducts surface mucosa of endometrium and endocervix Fallopian tube epithelium and rete epithelium of testis and ovary Furthermore hepatocytes and pancreatic acini are labeled by the antibody In addition the antibody labels the complex glandular epithelia of breast salivary and sweat glands as well as the transitional epithelium of the urinary bladder 7 Also the epithelial cells of the periodontium are labeled 8 Of non epithelial cells the antibody labels endothelial cells in venules Iymphatics and capillaries in such tissues as skin subcutaneous soft tissues skeletal muscle placenta and e g respiratory gastrointestinal and genital t
19. ract mucosa 2 No labeling is observed in epithelial tissues which are known to lack CK18 e g epidermis foot sole epidermis vagina exocervix esophagus and myoepithelial cells 7 In liver the gall epithelial cells show a moderate to strong staining reaction whereas the membranes of the liver cells show a weak to moderate staining reaction Abnormal tissues In tumors of pancreas the antibody labeled 6 6 acinar cell carcinomas 1 1 pancreatoblastoma 19 20 pancreatic neuroendocrine tumors and 10 19 solid pseudopapillary tumors 9 Furthermore the antibody labeled 30 30 biphasic 21 46 monophasic and 8 17 poorly differentiated synovial sarcomas 10 In vascular tumors the antibody labeled endothelial cells in 17 17 epithelioid hemangioendotheliomas 9 14 epithelioid angiosarcomas 6 10 spindle cell hemangiomas 2 7 Iymphangiomas 10 48 non epithelioid angiosarcomas 3 13 venous hemangiomas and 1 18 capillary hemangiomas No labeling was observed in 4 cavernous hemangiomas and 6 Kaposi s sarcomas 2 Testing of the antibody on seminoma small cell lung carcinoma Merkel cell carcinoma and invasive breast carcinoma showed positive reaction FRANCAIS Utilisation prevue Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 18 Clone DC 10 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps
20. reastumoren markierte der Antik rper 6 von 6 Azinuszellkarzinomen 1 von 1 Pankreatoblastom 19 von 20 pankreatischen Neuroendokrintumoren und 10 von 19 soliden pseudopapill ren Tumoren 9 Au erdem markierte der Antik rper 30 von 30 biphasischen 21 von 46 monophasischen und 8 von 17 schlecht differenzierten synovialen Sarkomen 10 Bei vaskul ren Tumoren markierte der Antik rper Endothelzellen bei 17 von 17 epitheloiden H mangioendotheliomen 9 von 14 epitheloiden Angiosarkomen 6 von 10 Spindelzellh mangiomen 2 von 7 Lymphangiomen 10 von 48 nicht epitheloiden Angiosarkomen 3 von 13 ven sen H mangiomen und 1 von 18 kapillaren H mangiomen Bei 4 kavern sen H mangiomen und 6 Kaposi Sarkomen wurde keine Markierung beobachtet 2 Antik rpertests auf Seminome kleinzellige Lungenkarzinome Merkelzellkarzinome und invasive Mammakarzinome ergaben positive Reaktionen Polypeptide 4 5 in verschiedenen menschlichen Epithelzellen entdeckt 6 Die ZK lassen sich in einen sauren Typ A Klasse I und einen neutral basischen Typ B Klasse Il References References Literatur unterteilen CK18 ist ein Protein mit 45 kDa und ist ein Zytokeratin des sauren Typs das typischerweise in einfachen nichtgeschichteten Epithelien exprimiert wird Allerdings 1 Lane EB Alexander CM Use of keratin antibodies in tumor diagnosis review Semin Cancer Biol 1990 1 165 79 wird CK18 auch in Basal und oberfl chlichen Zellen von bergangsepithelien sowie in den L
21. stimmt Dieser Antik rper markiert Epithelzellen in Cytokeratin 18 exprimierenden Epithelien Folglich dient der Antik rper auch zur Differenzierung und Erkennung von Epitheltumoren 1 und epitheloiden H mangioendotheliomen 2 Au erdem dienen Antik rper auf Cytokeratin 18 der Erkennung von Seminomen 3 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Zusammenfassung und Erkl rung Cytokeratin 18 geh rt zu den Intermedi rfilamenten die in fast allen eukaryotischen Zellen ein Zytoskelett bilden Im Gegensatz zu anderen Intermedi rfilamenten bestehen Zytokeratine ZK aus einer hochkomplexen multigenen Familie von Polypeptiden deren Molekulargewicht von 40 bis 68 kDa reicht Bisher wurden 20 unterschiedliche ZK Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte S
22. t une coloration cytoplasmique Caract ristiques de performance Tissus sains En g n ral l anticorps marque les pith liums simples et l pith lium transitionnel contrairement aux composants pith liaux stratifi s qui sont n gatifs Le marquage inclut les pith liums simples de l intestin de l arbre bronchique et des alv oles du syst me respiratoire des tubules du rein des canaux biliaires de la muqueuse de surface de l endometre et de l endocol de l pith lium des trompes de Fallope ainsi que de l pith lium du rete testis et de l ovaire De plus les h patocytes et les acini pancr atiques sont marqu s par l anticorps L anticorps marque galement les pith liums complexes des glandes mammaires salivaires et sudoripares ainsi que epithelium transitionnel de la vessie 7 Les cellules pith liales du parodonte sont galement marqu es 8 Parmi les cellules non pith liales l anticorps marque les cellules endoth liales dans les veinules les vaisseaux lymphatiques et les capillaires dans des tissus comme la peau les tissus mous sous cutan s le muscle squelettique le placenta et par exemple la muqueuse des voies respiratoires g nitales et gastro intestinale 2 Aucun marquage n est observ dans les tissus pith liaux dont on sait qu ils manquent de CK18 par exemple l piderme l epiderme de la plante du pied le vagin l exocol sophage et les cellules myo pith liales 7 Dans
23. uminal Sekretzellen komplexer Epithelien exprimiert 6 2 Miettinen M Fetsch JF Distribution of keratins in normal endothelial cells and a spectrum of vascular tumors Implications in tumor diagnosis Hum Pathol 2000 31 1062 7 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren 3 Fogel M Lifschitz Mercer B Moll R Kushnir I Jacob N Waldherr R et al Heterogeneity of intermediate filament expression in human testicular seminomas Differentiation entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 1990 45 242 9 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen 4 Moll R Franke WW Schiller DL Geiger B Krepler R The catalog of human cytokeratins Patterns of expression in normal epithelia tumors and cultured cells review Cell 1982 31 11 24 Moll R L we A Laufer J Franke WW Cytokeratin 20 in human carcinomas A new histodiagnostic marker detected by monoclonal antibodies Am J Pathol 1992 140 427 47 Moll R Cytokeratins as markers of differentiation in the diagnosis of epithelial tumors review Subcell Biochem 1998 31 205 62 Lauerov L Kovafik J B rtek J Rejthar A Vojt amp Sek B Novel monoclonal antibodies defining epitope of human cytokeratin 18 molecule Hybrido
24. vice technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre le foie et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f 18750 Interpr tation de la coloration Les cellules marqu es par l anticorps pr senten
Download Pdf Manuals
Related Search