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FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Carcinoembryonic
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1. 4 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen Clone Il 7 Ready to Use Staining interpretation Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS622 Performance characteristics ENGLISH Intended use For in vitro diagnostic use FRANCAIS FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen CEA Clone Il 7 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels the CEA positive glycocalyx surface of gastrointestinal cells and is useful for the identification of colon carcinomas 1 Antibodies to CEA may also be useful for Utilisation prevue the identification of medullary carcinoma of the thyroid 2 In addition the characteristic CEA expression of secretory meningiomas is labeled by the antibody 3 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Summary CEA is an oncofetal heterogeneous family of related glycoproteins 4 designated CD66 5 The family consists of more than 17 expressible and explanation closely related genes belonging to the immunoglobulin superfamily 5 CEA is normally present during fetal life but occurs at low concentrations in adults and circulates i
2. FACE appartiennent g n ralement aux groupes d epitopes GOLD 1 ou 3 L anticorps monoclonal de souris anti antig ne carcino embryonnaire ACE humain clone Il 7 appartient au groupe d pitopes GOLD 1 8 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption imprim e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient
3. Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probleme li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L epaisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pretraitement avec d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVisionT FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m m
4. erdem markierte der Antik rper 31 von 31 sekretorischen Meningeomen 2 Antik rpertests auf medull re Schilddr senkarzinome ergaben positive Reaktionen References References Literatur 1 ZoubirF Zeromski J Sikora J Szmeja J Hedin A Hammarstr m S Tumor specificity of monoclonal antibodies to carcinoembryonic antigen Tumor Biol 1990 11 5 19 2 Probst Cousin S Villagran Lillo R Lahl R Bergmann M Schmid KW Gullotta F Secretory meningioma Clinical histologic and immunohistochemical findings in 31 cases Cancer 1997 79 2003 15 3 Uribe M Fenogjlio Preisler CM Grimes M Feind C Medullary carcinoma of the thyroid gland Am J Surg Pathol 1985 9 577 94 4 Hedin A Zoubir F Lundgren T Hammarstr m S Epitope specificity and cross reactivity pattern of a large series of monoclonal antibodies to carcinoembryonic antigen Mol Immunol 1986 23 1053 61 5 Skubitz KM Micklem K van der Schoot E M14 CD66 and CD67 cluster workshop report In Schlossman SF et al eds Leucocyte Typing V White Cell Differentiation Antigens Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1995 889 99 6 Larsson Ghosh R Hammarstr m S Relative positions of some epitopes on carcinoembryonic antigen Cancer Immunol Immunother 1989 30 92 6 N Leong AS Y Cooper K Leong FJW M Manual of diagnostic antibodies for immunohistology 1 ed London Oxford University Press 1999 p 37 8 8 Hammerstrom S Shively JE Paxton RJ Beatty BG Lars
5. par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi L ACE est une famille h t rog ne oncof tale de glycoprot ines 4 apparent es d sign es sous le nom de CD66 5 Cette famille comprend plus de 17 g nes d expression troitement apparent s appartenant la superfamille des immunoglobulines 5 L ACE est normalement pr sent pendant la vie f tale Il est retrouv de faibles concentrations chez l adulte et circule de fortes concentrations chez les patients atteints de certains cancers en particulier les tumeurs pith liales 3 La partie prot ique de l ACE consiste en une seule cha ne polypeptidique contenant un domaine N terminal de 107 acides amin s et trois domaines hautement homologues de 178 acides amin s L ACE est s cr t la surface du glycocalyx des cellules gastro intestinales d o son association particuli re avec les carcinomes du tractus gastro intestinal 6 par exemple les ad nocarcinomes du c lon de l estomac et du pancr as De plus PACE est retrouv dans les ad nocarcinomes du poumon et du sein 7 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dur
6. ako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using Pr paration des aqueous or permanent mounting medium chantillons The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater y compris le mat riel adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended requis mais non fourni Staining procedure The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps including materials and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols required but not supplied Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram CEA without counterstaining or CEAH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Servi
7. and e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et le c lon et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique et membranaire Dans les coupes de tissus de c lon sain lACE est principalement localis au niveau de la bordure apicale des cellules pith liales Dans les coupes de tissus de carcinome du c lon lACE est principalement localis au niveau de la bordure apicale des structures glandulaires alors qu un marquage cytoplasmique est pr dominant dans certaines parties plus solides de la tumeur Tissus sains L anticorps marque le c lon sain Les cellules pith liales de la muqueuse du c lon indiquent une coloration mod r e forte sur la surface luminale et la surface du glycocalyx Dans l amygdale les cellules pith liales squameuses indiquent de mani re focalis e une coloration cytoplasmique faible mod r e Tissus tumoraux L anticorps a marqu 6 cas sur 6 de carcinomes du c lon 2 cas sur 2 de carcinomes de la v sicule
8. biliaire et 2 cas sur 3 de carcinomes de l ampoule de Vater De plus l anticorps a marqu 31 cas sur 31 de m ningiomes s cr toires 2 Le test de l anticorps sur le carcinome m dullaire de la thyro de a pr sent une r action positive Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen CEA Clone Il 7 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert die CEA positive Glykokalixoberfl che von gastrointestinalen Zellen und dient zur Identifizierung von Dickdarmkarzinomen 1 Au erdem wird die charakteristische CEA Expression von sekretorischen Meningiomen vom Antik rper markiert 2 Antik rper auf CEA dienen ebenfalls der Erkennung von medull ren Schilddr senkarzinomen 3 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Beim karzinoembryogenen Antigen CEA handelt es sich um eine onkof tale heterogene Familie verwandter Glykoproteine 4 mit der Bezeichnung CD66 5 Die Familie besteht aus mehr als 17 exprimierbaren eng verwandten Genen die der bergeordneten Famile der Immunglobuline angeh ren 5 CEA tritt n
9. ces Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the 115225 004 IS622 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 115225 004 evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include colon and tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for these tissues in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display cytoplasmic and membranous staining In tissue sections of normal colon CEA is mainly localized at the apical border of the epithelial cells In tissue sections of colon carcinoma CEA is mainly localized at the ap
10. e 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone Il 7 3 Isotype IgG kappa ACE humain purifi partir de m tastases h patiques provenant d un ad nocarcinome du poumon 4 Lors d un test ELISA l anticorps r agit aux pr parations d ACE provenant de carcinomes colorectaux d adenocarcinomes du poumon et aussi de la lign e cellulaire LS 174T issue d un carcinome du c lon alors que ce m me anticorps ne r agit pas aux antig nes isol s apparent s l ACE par exemple le NCA 55 le NCA 95 le NCA 160 et le BGP I 4 Selon le test ELISA utilisant un ACE r duit carboxym thyl et ayant t soumis une m thode de d gradation de Smith l anticorps devrait r agir un pitope d pendant de la conformation dans lequel les structures hydrates de carbone de la glycoprot ine ACE sont impliqu es 4 Lors de l utilisation de tests immunologiques par comp tition en phase solide les anticorps monoclonaux anti ACE ont t class s en cinq groupes d pitopes essentiellement non interactifs nomm s GOLD 1 5 Les anticorps monoclonaux ayant un haut degr de sp cificit
11. e proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides Ref K8020 IS622 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Zusammenfassung und Erkl rung Mitgelieferte Reagenzien Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung 115225 004 Le systeme de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram CEA sans contre colo
12. eactifs fournis Based on ELISA using reduced carboxymethylated and Smith degraded CEA the antibody is predicted to react with a conformation dependent epitope in which the carbohydrate structures of the CEA glycoprotein are involved 4 Using solid phase competitive immunoassays monoclonal antibodies to CEA have been classified into five essentially non interacting epitope groups called GOLD 1 5 Monoclonal antibodies with a high degree of CEA specificity generally belong to epitope groups GOLD 1 or 3 Immunogene Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen CEA Clone Il 7 belongs to epitope group GOLD 1 8 Specificite Precautions 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions
13. endete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen IS622 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu s
14. er Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrixprotokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTUS3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CEA ohne Gegenf rbung oder CEAH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnenmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVisionTM FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Auto
15. ical border of glandular structures whereas cytoplasmic labeling predominates in more solid parts of the tumor Normal tissues The antibody labels normal colon Epithelial cells of the colon mucosa show a moderate to strong staining reaction at the luminal surface and the glycocalyx In tonsil the squamous epithelial cells show focally a weak to moderate cytoplasmic staining reaction Abnormal tissues The antibody labeled 6 6 colon carcinomas 2 2 gall bladder carcinomas and 2 3 carcinomas of the Vater ampulla In addition the antibody labeled 31 31 secretory meningiomas 2 Testing of the antibody on medullary carcinoma of the thyroid showed positive reaction Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen CEA clone Il 7 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque la surface du glycocalyx des cellules gastro intestinales positive l antigene carcino embryonnaire ACE et facilite l identification des carcinomes du c lon 1 De plus l expression caract ristique de ACE des m ningiomes s cr toires est marqu e par l anticorps 2 Les anticorps dirig s contre ACE peuvent galement s av rer utiles dans l identification du carcinome m dullaire de la thyro de 3 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e
16. iehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision M FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software d
17. must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative Pr cautions controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Specimen preparation The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of including materials approximately 4 um required but not supplied Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen Conservation preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using D
18. n high concentrations in patients with certain malignancies particularly epithelial tumors 3 The protein part of CEA consists of a single polypeptide chain containing a 107 amino acid NH terminal domain and three highly homologous domains of 178 amino acids CEA is secreted into the glycocalyx surface of gastrointestinal cells and hence it is especially associated with Resume carcinomas from the gastrointestinal tract 6 e g adenocarcinomas of colon stomach and pancreas In addition CEA is found in et explication adenocarcinomas of lung and breast 7 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Reagent provided Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone Il 7 3 Isotype IgG1 kappa Immunogen Purified human CEA from liver metastasis of lung adenocarcinoma 4 Specificity In ELISA the antibody reacts with CEA preparations from both colo rectal carcinomas lung andenocarcinomas and the colon carcinoma cell line LS 174T whereas the antibody does not cross react with isolated CEA related antigens e g NCA 55 NCA 95 NCA 160 and BGP I 4 R
19. nomen und der Dickdarmkarzinom Zelllinie LS 174T w hrend der Antik rper keine Kreuzreaktion mit isolierten CEA verwandten Antigenen wie z B NCA 55 NCA 95 NCA 160 und BGP I aufweist 4 Auf der Basis des ELISA Tests l sst sich vorhersagen dass der Antik rper bei Verwendung von reduziertem karboxymethyliertem Smith abgebautem CEA mit einem konformationsabh ngigen Epitop reagiert bei dem die Kohlenhydratstrukturen des CEA Glykoproteins beteiligt sind 4 Mithilfe von kompetitiven Festphasen Immunassays wurden monoklonale Antik rper gegen CEA in f nf prinzipiell nicht miteinander interagierende Epitopgruppen mit der Bezeichnung GOLD 1 5 eingeteilt Monoklonale Antik rper mit einer h hergradigen CEA Spezifit t geh ren im Allgemeinen der Epitopgruppe GOLD 1 oder 3 an Monoclonal Mouse Anti Human Carcinoembryonic Antigen CEA Clone Il 7 geh rt zur Epitopgruppe GOLD 1 8 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verw
20. ormalerweise w hrend der F talphase auf taucht in geringen Konzentrationen jedoch auch bei Erwachsenen und bei Patienten mit bestimmten Malignit ten insbesondere mit epithelialen Tumoren auf 3 Der Proteinanteil von CEA besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette die einen NH terminalen Bereich mit 107 Aminos uren und drei stark homologe Bereiche mit 178 Aminos uren enth lt CEA wird in die Gilykokalixoberfl che von gastrointestinalen Zellen sezerniert und wird daher insbesondere mit Karzinomen im Magen Darm Trakt 6 wie z B Adenokarzinomen im Darm Magen und Pankreas assoziiert Au erdem tritt CEA in Adenokarzinomen der Lunge und Brust auf 7 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon Il 7 3 Isotyp IgG1 Kappa Gereinigtes menschliches CEA aus der Lebermetastase eines Lungenadenokarzinoms 4 Beim ELISA Test reagiert der Antik rper mit CEA Pr paraten von kolorektalen Karzinomen Lungenadenokarzi
21. ration ou CEAH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application spe amp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recomm
22. son Ghosh R et al Antigenic sites in carcinoembryonic antigen Cancer Res 1989 49 4852 8 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole Catalogue number R f rence catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro In Vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten 115225 004 Temperature limitation Use by Limites de temp rature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS622 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17
23. stainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe muss Zellen aus Dickdarm und Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches und membran ses F rbemuster auf In Gewebeschnitten eines gesunden Dickdarms wird CEA vorwiegend an der apikalen Grenze der Epithelzellen gefunden In Gewebeschnitten von Darmkarzinomen wird CEA vorwiegend am apikalen Rand von Dr senstrukturen gefunden w hrend die zytoplasmische F rbung in festeren Bestandteilen des Tumors berwiegt Gesundes Gewebe Der Antik rper markiert gesundes Dickdarmgewebe Epithelzellen der Darmschleimhaut weisen eine m ige bis starke F rbereaktion an der Luminal und Glykokalixoberfl che auf In Mandelgewebe weisen die Plattenepithelzellen fokal eine schwache bis m ige zytoplasmatische F rbereaktion auf Pathologisches Gewebe Der Antik rper markierte 6 von 6 Dickdarmkarzinomen 2 von 2 Gallenblasenkarzinomen und 2 von 3 Karzinomen der Vater Ampulle Au
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