Dako Autostainer/Autostainer Plus
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1. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CE Epithelial Membrane Antigen Clone E29 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS629 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation 115261 003 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Epithelial Membrane Antigen Clone E29 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of epithelial cells in a wide variety of tissues and is a useful tool for the identification of neoplastic epithelia 1 EMA is present on the membrane of secretory epithelia The absence of EMA staining with monoclonal mouse anti human epithelial membrane antigen clone E29 is considered to be strongly suggestive of non epithelial neoplasia 2 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Epithelial membrane antigen EMA belongs to a heterogenous population of human milk fat globule HM2. Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS 300 uL dispense
3. nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision M FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen inallen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellul re F rbemuster ist zytoplasmatisch und membran s Gesundes Gewebe Der Antik rper markiert Epithelzellen in einer Vielfalt unterschiedlicher Gewebe und Mesothelzellen Hierzu z hlen Schwei dr seng nge und Talgdr sen der Haut Epithel des Gastrointestinaltrakts Acini und G nge der B
4. volume Autoprogram EMA without counterstaining or EMAH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operators Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer platform please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory Ifthe evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patter
5. 8 232 15 Mills SE Gaffey MJ Watts JC Swanson PE Wick MR Kivolsi VA Nappi O Weiss LM Angiomatoid carcinoma and Angiosarcoma of the thyroid gland Anatomic Pathol 1994 102 322 Explanation o fsymbols Explication des symboks Erl uterung der Symbole Catalogue number e R f rence catalogue sch c Limites de temp rature Be stel In umm er Tem perature limitation Use by 2 Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis I Voir les instructions d utilisation LOT Gebrauchsanweisung beachten In vitro diagnostic medical device Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer IVD Dispositif medical de diagnostic in vitro y Contenu suffisant pour lt n gt tests sell Fabricant in vitro Diagnostkum Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hers teller Consult instructions for use Batch code Nu m ro de lot Charge nb ezeichnung 115261 003 IS629 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
6. FG proteins HMFG is a complex secretory product of mammary epithelium and EMA can be recovered from the aqueous phase of skimmed milk following extraction in chloroform and methanol Besides in milk these proteins are present in a variety of epithelia of both normal and neoplastic types A number of monoclonal and polyclonal antisera have been raised against these molecules and anti EMA has been extensively studied in a large number of neoplastic conditions most often in conjunction with other antibodies 2 EMA is valuable as a marker in the detection of breast carcinoma metastases in histological sections of liver lymph node and bone marrow and is useful for differentiating anaplastic carcinoma from malignant Iymphomas and for the recognition of spindle cell epithelial malignancies 1 3 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to Use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L NaN Clone E29 Isotype Ig2a kappa Human milk fat globule membrane preparation 1 4 In Western blotting of the immunogen the antibody labels bands of 265 400 kDa 1 1 For profession
7. HMFG human milk fat globule proteins an HMFG ist ein komplexes Sekretionsprodukt des menschlichen Milchdr senepithels EMA kann von der w ssrigen Phase der Magermilch nach Extraktion in Chloroform und Methanol r ckgewonnen werden Au er in der Milch sind diese Proteine in diversen Epithelzellen in sowohl gesunden als auch neoplastischen Geweben vorhanden Verschiedene monoklonale und polyklonale Antiseren wurden gegen diese Molek le entwickelt und Anti EMA wurde ausgiebig bei einer gro en Anzahl neoplastischer Erkrankungen untersucht und zwar am h ufigsten in Kombination mit anderen Antik rpern 2 EMA ist ein wertvoller Marker beim Nachweis von Metastasen des Mammakarzinoms in histologischen Schnitten von Leber Lymphknoten und Knochenmark und ist auch hilfreich bei der Abgrenzung eines anaplastischen Karzinoms von einem malignen Lymphom sowie bei der Erkennung von malignen epithelialen Spindelzellentartungen 1 3 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein u
8. ako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu IS629 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 115261 003 positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Le sch ma de coloration cellulaire est cytoplasmique et membranaire Tissus sains L anticorps marque les cellules pith liales d un grand nombre de tissus et de cellules m soth liales Figurent notamment les canaux sudoripares et les glandes s bac es de la p
9. al users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date sta mped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide
10. chemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram EMA ohne Gegenf rbung oder EMAH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von IS629 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je
11. d le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS volume de distribution de 300 uL Autoprogram EMA sans contre coloration ou EMAH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur la plateforme Dako Autostainer utilis e contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin D
12. duit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de details se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Ret
13. eau l pith lium de l appareil digestif les acini et canaux mammaires les cellules exocrines du pancr as l epithelium de la vessie les tubules distaux du rein le col de l ut rus l endom tre l pith lium respiratoire la thyro de et les canaux biliaires Aucun marquage n a t observ au niveau de l piderme des cellules endocrines du pancr as des glom rules et des tubules proximaux du rein du syst me nerveux central du syst me nerveux p riph rique du tissu conjonctif des h patocytes et du tissu lympho de l exception de quelques cellules plasmatiques 1 Tissus tumoraux Les ad nocarcinomes du rein du sein du c lon de l estomac du pancr as du poumon de l endom tre et de l ovaire taient tous positifs lors de l analyse immunocytochimique utilisant l anti EMA E29 Les sch mas de coloration taient principalement cytoplasmiques mais une r activit apicale et une coloration luminale intracellulaire et membranaire p riph rique a galement t not e 6 Sont galement positifs l anticorps les carcinomes anaplasiques petites cellules cellules squameuses et cellules transitionnelles ainsi que les m soth liomes 6 L anticorps pr sentait galement une r activit dans les cas de tumeurs somatiques 7 de carcinomes des cellules r nales 8 9 de m ningiomes 10 de chordome classique 11 et de carcinome neuroendocrine cellules de Merkel 12 Les tumeurs et les n
14. nd 0 015 mol L NaN enth lt Klon E29 Isotyp Ig2a Kappa HMFG Membranpr parat 1 4 Beim Western Blotting markiert der Antik rper Banden zwischen 265 und 400 kDa 1 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische K
15. ns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 The cellular staining pattern is cytoplasmic and membranous IS629 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Performance characteristics FRANCAIS Utilisation prevue Resume et explication Reactifs fournis Immunogene Specificite Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 115261 003 Normal tissues The antibody labels epithelial cells in a wide variety of tissues and mesothelial cells Included are sweat ducts and sebaceous glands of the skin epithelium of the gastrointestinal tract acini and ducts of the breast exocrine cells in pancreas bladder epithelium distal tubules of the kidney cervix endometrium respiratory epithelium thyroid and bile ducts No labeling was observed in epidermis endocrine cells in pancreas glomeruli and proximal tubules of the kidney central nervous system peripheral nervous system connective tissue hepatocytes and lymphoid tissue except for occasional plasma cells 1 Abnormal tissues Adenocarcinomas of the kidne
16. omes anaplasiques et des lymphomes malins ainsi que pour la reconnaissance des tumeurs pith liales cellules fusiformes 1 3 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L de NaN Clone E29 Isotype Ig2a kappa Preparation de membrane de globules gras de lait humain 1 4 Dans les analyses par Western blot de l immunogene l anticorps marque des bandes de 265 400 kDa 1 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout pro
17. oplasmes non r actifs l anti EMA E29 sont notamment le carcinome des cellules basales 3 les seminomes 7 les carcinomes embryonnaires 7 les schwannomes 10 les l iomyosarcomes de la vessie 13 les l iomyosarcomes pith lio des de la peau et des tissus sous cutan s 14 les hemangioblastomes capillaires 8 les tumeurs des cellules de la granulosa ovarienne 15 et les n oplasmes angiosarcomateux de la thyro de 15 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Epithelial Membrane Antigen Clone E29 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Epithelzellen unterschiedlichster Gewebe und dient zur Identifizierung neoplastischer Epithelien 1 EMA ist auf der Membran sekretorischen Epithelgewebes vorhanden Das Fehlen einer EMA F rbung mit monoklonalem Maus Anti Human Epithelmembran Antigen EMA Klon E29 gilt als deutliches Anzeichen f r eine nicht epitheliale Neoplasie 2 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Das Epithelmembran Antigen EMA geh rt einer heterogenen Population menschlicher Milchfettglobuline
18. r toires L absence de coloration de EMA l anticorps monoclonal de souris dirig contre l antig ne de la membrane pith liale humain EMA clone E29 est consid r e comme une forte indication d une n oplasie non pith liale 2 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi L antigene de la membrane pith liale EMA appartient une population h t rog ne de prot ines de globules gras de lait humain HMFG Les HMFG sont un produit s cr toire complexe de l pith lium mammaire et l EMA est pr sent dans le lait cr m en phase aqueuse apr s extraction dans du chloroforme et du m thanol Outre le lait ces prot ines sont galement pr sentes dans un grand nombre d epitheliums la fois de types normaux et n oplasiques Plusieurs anti serums monoclonaux et polyclonaux ont t test s sur ces mol cules et l anti EMA a t largement tudi dans un grand nombre de conditions n oplasiques le plus souvent en association avec d autres anticorps 2 L EMA est un important marqueur de d tection des m tastases du carcinome mammaire dans les coupes histologiques du foie des ganglions lymphatiques et de la moelle osseuse et est utile pour la diff renciation des carcin
19. rieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Le systeme de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mo
20. rust exokrine Pankreaszellen Blasenepithel distale Nierentubuli Zervix Endometrium Epithel der Atemwege Schilddr se und Galleng nge Bei folgenden Geweben konnte keine Markierung festgestellt werden Epidermis endokrine Pankreaszellen Glomeruli und proximale Nierentubuli zentrales und peripheres Nervensystem Bindegewebe Hepatozyten sowie Iymphoides Gewebe mit Ausnahme gelegentlicher Plasmazellen 1 Pathologisches Gewebe In immunzytochemischen Verfahren mit Anti EMA E29 ergaben alle Adenokarzinome in Niere Brust Darm Magen Pankreas Lunge Endometrium und Eierst cken positive Resultate Die F rbemuster waren berwiegend zytoplasmatisch allerdings wurden auch F rbungen der apikalen und peripheren Membran sowie eine intrazellul r luminale F rbung beschrieben 6 Ebenfalls positiv f r den Antik rper waren Plattenepithel bergangsepithel und kleinzellige anaplastische Karzinome sowie Mesotheliome 6 Der Antik rper zeigte zudem eine Reaktivit t mit somatischen Tumoren 7 renalen Zellkarzinomen 8 9 Meningiomen 10 Chordomen 11 und neuroendokrinen Merkel sche Tastzellen Karzinomen 12 Zu den mit Anti EMA E29 nicht reaktiven Tumoren und Neoplasmen geh ren Basalzellenkarzinome 3 Seminome 7 embryonale Karzinome 7 Schwannome 10 Blasenleiomyosarkome 13 Epitheloid Leiomyosarkome der Haut und des Unterhautgewebes 14 H mangioblastome der Kapillaren 8 Granulosazelltumore der Eierst cke 15 und Angio
21. sarkom hnliche Neoplasmen der Schilddr se 15 References References Literatur 1 Cordell J Richardson TC Pulford KAF Ghosh AK Gatter KC Heyderman E et al Production of monoclonal antibodies against human epithelial membrane antigen for use in diagnostic immunocytochemistry Br J Cancer 1985 52 347 54 Gatter KC Heryet A Alcock C Mason DY Clinical importance of analyzing malignant tumors of uncertain origin with immunohistological techniques Lancet 1985 June 1302 3 Swanson PE Monoclonal antibodies to human milk fat globule proteins In Wick MR Siegal GP editors Monoclonal antibodies in diagnostic immunohistochemistry New York Basel Marcell Dekker Inc 1988 p 227 83 4 Sloane JP Ormerod MG Distribution of epithelial membrane antigen in normal and neoplastic tissues and its value in diagnostic tumor pathology Cancer 1981 47 1786 95 5 Heyderman E Strudley I Powell G Richardson TC Cordell JL Mason DY A new monoclonal antibody to epithelial membrane antigen EMA E29 A comparison of its immunocytochemical reactivity with polyclonal anti EMA antibodies and with another monoclonal antibody HMFG 2 Br J Cancer 1985 52 355 61 6 Pinkus GS Kurtin PJ Epithelial membrane antigen a diagnostic discriminant in surgical pathology Immunohistochemical profile in epithelial mesenchymal and hematopoietic neoplasms using paraffin sections and monoclonal antibodies Hum Pathol 1985 16 929 40 7 Wick MR Swan
22. son PE Manivel JC Placental like alkaline phosphatase reactivity in human tumors An immunohistochemical study of 520 cases Hum Pathol 1987 18 946 8 Hufnagel TJ Kim JH True LD Manuelidis EE Immunohistochemistry of capillary hemangioblastoma Immunoperoxidase labeled antibody staining resolves the differential diagnosis with metastatic renal cell carcinoma but does not explain the histogenesis of the capillary hemangioblastoma Amer J Surg Pathol 1989 13 207 9 Coffin CM Swanson PE Wick MR Dehner LP An immunohistochemical comparison of chordoma with renal cell carcinoma colorectal adenocarcinoma and myzopapillary ependymoma potential diagnostic dilemma in the diminutive biopsy Mod Pathol 1993 6 531 10 Schnitt SJ and Vogel H Meningiomas Diagnostic value of immunoperoxidase staining for epithelial membrane antigen Amer J Surg Pathol 1986 10 640 11 Walker WP Landas SK Bromley CM Sturm MTM Immunohisto chemical distinction of classic and chondroid chordomas Mod Pathol 1991 4 661 12 Smith KH Skelton HG Holland TT Morgan AM Lupton GP Neuroendocrine Merkel Cell carcinoma with an intraepidermal component Amer J Dermatopathol 1993 15 528 13 Mills SE Bova GS Wick MR Young RH Leiomyosarcoma of the urinary bladder A clinicopathologic and immunohistochemical study of 15 cases Amer J Surg Pathol 1989 13 480 14 Suster S Epithelioid leiomyosarcoma of the skin and subcutaneous tissue Amer J Surg Pathol 1994 1
23. undendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhisto
24. y breast colon stomach pancreas lung endometrium and ovary were all positive with immunocytochemical use of anti EMA E29 Staining patterns were mostly cytoplasmic but apical reactivity and peripheral membraneous and intracellular luminal staining was also noted 6 Also positive for the antibody were squamous cell transitional cell and small cell anaplastic carcinomas and mesotheliomas 6 The antibody also showed reactivity with somatic tumors 7 renal cell carcinomas 8 9 meningiomas 10 classic chordoma 11 and neuroendocrine Merkel cell carcinoma 12 Tumors and neoplasms that are nonreactive with anti EMA E29 include basal cell carcinoma 3 seminomas 7 embryonal carcinomas 7 schwannomas 10 leiomyosarcoma of the bladder 13 epithelioid leiomyosarcomas of the skin and subcutaneous tissues 14 capillary hemangioblastomas 8 ovarian granulosa cell tumors 15 and angiosarcomatous neoplasms of the thyroid 15 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Epithelial Membrane Antigen Clone E29 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps facilite l identification des cellules pith liales dans un grand nombre de tissus et constitue un outil utile pour l identification des pith liums n oplasiques 1 L EMA est pr sent sur la membrane des pith liums s c
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