FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CDX2 Clone DAK
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1. Va KO English Intended use Synonym for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage 119006 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CDX2 Clone DAK CDX2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS080 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CDX2 Clone DAK CDX2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments Antibodies to CDX2 may be useful for the identification of cells from adenocarcinomas and carcinoids of the gastrointestinal tract The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Caudal type homeobox protein 2 1 Cdx2 is the human homologue of a Drosophila caudal type homeobox gene that encodes a transcription factor expressed in intestinal epithelial cells of adult mammals CDX2 transcription factor regulates both cell proliferation and differentiation of intestinal epithelial cells 1 3 Members of the Cdx gene family are thought to play an important role in establishing and maintaining the intestinal phenotype during development through transcriptional activation of differentiated intestinal genes 22. 3 The CDX2 protein is expressed in the nuclei of intestinal epithelial cells from the duodenum to the rectum 4 CDX2 expression has been observed in normal adult intestinal epithelial cells such as absorptive goblet endocrine and Paneth cells Scattered expression has been reported in pancreatic ductules but no expression was observed in other normal tissues cells tested including adipocytes adrenal cortex and medulla bile duct epithelium breast epithelium gall bladder gastric mucosa excluding glands with intestinal metaplasia kidney cortex and medulla liver lung alveoli lymph node mesothelium ovary skin Squamous epithelia and sweat glands testis or thyroid gland 4 5 CDX2 expression has been reported in 86 100 of colorectal adenocarcinomas including primary and metastatic tumors 4 8 Expression of CDX2 has also been reported in 22 70 of gastric adenocarcinomas and in carcinoids of the Gl tract with a high degree of positivity observed in carcinoids of the midgut region 5 9 CDX2 expression has been observed in mucinous ovarian adenocarcinoma 11 100 and adenocarcinomas of the urinary bladder 47 100 pancreas 82 60 and prostate 2 6 4 8 10 11 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Co
3. 3 0 3 Cerveau h misph res c r braux 3 ES Sein 2 0 2 Col de l ut rus 3 0 3 C lon 3 3 3 pith lium glandulaire 10 75 sophage 3 0 3 Rein 3 0 3 Poumon 3 0 3 Ovaire 3 0 3 Pancr as 3 1 3 pith lium des ductules 1 Hypophyse 3 0 3 Prostate 3 0 3 Peau 3 0 3 Estomac 3 1 3 pith lium gastrique lt 1 Thyro de 3 0 3 Ut rus 3 0 3 Code Nr IRO80 Zur In Vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CDX2 Klon DAK CDX2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Geraten bestimmt CDX2 Antik rper dienen zur identifizierung von Zellen aus Adenokarzinomen und Karzinoiden des Magen Darm Traktes Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Caudal type homeobox protein 2 1 Cdx2 ist ein humanes Homolog eines caudal type homeobox gene von Drosophila und kodiert einen Transkriptionsfaktor der in den Darmepithelzellen erwachsener S ugetiere exprimiert wird Der CDX2 Transkriptionsfaktor reguliert sowohl die Proliferation als auch die Differenzierung von intestinalen Epithelzellen 1 3 Es wird angenommen dass Mitglie
4. pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 temp rature et dur e du d masquage d pitope 97 pendant 20 1 minutes refroidissement jusqu 65 Retirer le porto ir a lames Autostainer contenant les lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex station de rin age du PT Link r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 dilu a temp rature ambiante Laisser les lames dans le tampon de lavage pendant 1 a 5 minutes Coupes incluses en paraffine Comme pr paration alternative des chantillons le deparaffinage et le d masquage d pitope peuvent tre r alis s dans l appareil PT Link en utilisant une proc dure modifi e Consulter le Guide d utilisation du PT Link pour obtenir des instructions Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es claircies et mont es a l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides r f S3003 Le syst me de visualisatio
5. recombinant correspondant aux acides amin s 1 a 165 Par Western Blot de lysats de cellules Caco 2 l anticorps marque une bande de 37 kDa et une bande de 40 kDa correspondant au poids mol culaire attendu de CDX2 2 L anticorps marque galement des bandes suppl mentaires 17 kDa et 19 kDa 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaNs un produit chimique hautement toxique sous sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales 307725EFG_001 p 3 8 Conservation Preparation des echantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Procedure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration 119006 001 Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date limite de p remption in
6. should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operators Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include appendix and pancreas and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus
7. Code IS750 The cellular staining pattern is nuclear Normal tissues Tissue Type tested Positively Staining Tissue Elements Adrenal 2 0 2 Appendix 6 6 6 Nuclear epithelial cells Bone marrow 2 0 2 Brain cerebellum 3 0 3 Brain cerebrum 3 0 3 Breast 2 0 2 Cervix 3 0 3 Colon 3 3 3 Glandular epithelium 10 75 Esophagus 3 0 3 Kidney 3 0 3 Lung 3 0 3 Ovary 3 0 3 Pancreas 3 1 3 Ductule epithelium 1 Pituitary 3 0 3 307725EFG_001 p 2 8 Francais Utilisation pr vue Synonyme de l antigene Resume et explication Reactifs fournis Immunogene Specificite Precautions 119006 001 Prostate 3 0 3 Skin 3 0 3 Stomach 3 1 3 Gastric epithelium lt 1 Thyroid 3 0 3 Uterus 3 0 3 Ref IS080 Pour utilisation diagnostique in vitro L anticoros FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CDX2 Clone DAK CDX2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin tre utilis en immunohistochimie avec les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus Les anticorps dirig s contre CDX2 peuvent s av rer utiles pour l identification de cellules issues d ad nocarcinomes et de carcinoides du tractus gastro intestinal L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests
8. EX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung entparaffinierter formalinfixierter paraffineingebetteter Gewebeschnitte sollte mit dem System Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Die Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 durchf hren F r das PT Link System sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorw rmtemperatur 65 Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 f r 20 1 Minuten auf 65 abk hlen Das Autostainer Objektktr gergestel mit den Objekttr gern aus dem PT Link Beh lter herausnehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 eintauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im Wash Buffer belassen Paraffineingebettete Schnitte Alternativ k nnen Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link unter Verwendung eines modifizierten Verfahrens durchgef hrt werden Weitere Informationen finden Sie im PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl r
9. a Mod Pathol 2005 18 121 7 22 Werling RW Yaziji H Bacchi CE Gown AM CDX2 a highly sensitive and specific marker of adenocarcinomas of intestinal origin an immunohistochemical survey of 476 primary and metastatic carcinomas Am J Surg Pathol 2003 27 303 10 Kaimaktchiev V Terracciano L Tornillo L Spichtin H Stoios D Bundi M et al The homeobox intestinal differentiation factor CDX2 is selectively expressed in gastrointestinal adenocarcinomas Mod Pathol 2004 17 1392 9 Saqi A Alexis D Remotti F Bhagat G Usefulness of CDX2 and TTF 1 in differentiating gastrointestinal from pulmonarycarcinoids Am J Clin Pathol 2005 123 394 404 Herawi M De Marzo AM Kristiansen G Epstein Jl Expression of CDX2 in benign tissue and adenocarcinoma of the prostate Hum Pathol 2007 38 72 8 307725EFG_001 p 7 8 11 Mallo GV Rechreche H Frigerio JM Rocha D Zweibaum A Lacasa M et al Molecular cloning sequencing and expression of the mRNA encoding human Cdx1 and Cdx2 homeobox Down regulation of Cdx1 and Cdx2 mRNA expression during colorectal carcinogenesis Int J Cancer 1997 74 35 44 Catalogue number Temperature limitation In vitro diagnostic medical device R f rence du catalogue Limites de temp rature Dispositif m dical de diagnostic in vitro w Bestellnummer Zulassiger Temperaturbereich In vitro Diagnostikum LEC REP T Dako North America Inc Dako Denmark A S Manufacturer Batch code Contains sufficient for lt N gt tests 6392 V
10. der der Cdx Genfamilie bei der Ausbildung und der Aufrechterhaltung des intestinalen Ph notyps w hrend der Entwicklung eine wesentliche Rolle spielen indem sie die Transkription von in differenziertem Darmgewebe exprimierten Genen aktivieren 2 3 Das CDX2 Protein wird in den Zellkernen der intestinalen Epithelzellen vom Zw lffingerdarm bis zum Mastdarm exprimiert 4 CDX2 Expression wurde in normalen intestinalen Epithelzellen von Erwachsenen wie z B absorbierenden endokrinen Becher und Paneth Zellen beobachtet Es wurde eine vereinzelte Expression in den Ausf hrungsg ngen des Pankreas gezeigt w hrend in anderen getesteten normalen Geweben oder Zellen wie z B Fettzellen Nebennierenrinde und medulla Epithelzellen der Gallenwege Brustepithel Gallenblase Magenschleimhaut ausgenommen Dr sen mit intestinaler Metaplasie Nierenrinde und medulla Leber Lungenalveolen Lymphknoten Mesothel Ovar Haut Plattenepithel und Schwei dr sen Hoden und Schilddr se keine Expression beobachtet wurde 4 5 CDX2 Expression wurde bei 86 100 von kolorektalen Karzinomen gezeigt einschlie lich prim rer und metastatischer Tumore 4 8 CDX2 Expression wurde auch bei 22 70 gastrischer Adenokarzinome und bei Karzinoiden des Magen Darm Traktes gezeigt wobei Karzinoide in der Mitteldarmregion stark positiv waren 5 9 CDX2 Expression wurde bei muzin sen Ovarialadenokarzinomen 11 100 und Adenokarzinomen der Harnblase 47 100 des Pankrea
11. diagnostiques par un pathologiste qualifi Prot ine hom oboite de type caudal 2 1 Cdx2 est homologue humain d un g ne a hom oboite de type caudal de la drosophile codant un facteur de transcription exprim dans les cellules pith liales intestinales des mammif res adultes Le facteur de transcription CDX2 r gule la fois la prolif ration cellulaire et la diff renciation des cellules pith liales intestinales 1 3 On pense que les membres de la famille de g nes Cdx jouent un r le important dans l tablissement et le maintien du ph notype intestinal au cours du d veloppement via l activation transcriptionnelle de g nes intestinaux diff renci s 2 3 La prot ine CDX2 est exprim e dans les noyaux des cellules pith liales intestinales du duod num au rectum 4 L expression de CDX2 a t observ e dans les cellules pith liales intestinales adultes normales telles que les cellules absorbantes les cellules caliciformes les cellules endocrines et les cellules de Paneth Une expression diss min e a t signal e dans les ductules pancr atiques mais aucune expression n a t observ e dans d autres tissus cellules normaux test s y compris les adipocytes le cortex et la m dulla de la surr nale l pith lium des canaux biliaires la v sicule biliaire la muqueuse gastrique l exception des glandes pr sentant une m taplasie intestinale le cortex et la m dulla du rein le foie les alv oles p
12. diqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patients Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Pour obtenir des r sultats optimaux pr traiter les tissus l aide du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Coupes d paraffin es Il est recommand de pr traiter les coupes de tissus fix s au formol et inclus en paraffine qui ont t d paraffin es l aide de l appareil PT Link de Dako r f PT100 PT101 Pour plus de d tails se reporter au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High
13. e controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support 307725EFG_001 p 1 8 Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation Performance characteristics 119006 001 The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 epit ope retrieval temperature and time 97 for 20 1 minutes cool down to 65 Remove Autostainer slide
14. ebrum 3 Brust 2 Zervix 3 Kolon 3 Speiser hre 3 Niere 3 Lunge 3 Ovar 3 Pankreas 3 Hypophyse 3 0 2 6 6 Epithelzellen nukle r 0 2 0 3 0 3 0 2 0 3 3 3 Drusenepithel 10 75 0 3 0 3 0 3 0 3 1 3 Duktales Epithel 1 0 3 Prostata 3 0 3 Haut 3 0 3 Magen 3 1 3 Gastrisches Epithel lt 1 Schilddr se 3 0 3 Uterus 3 0 3 10 Drummond F Putt W Fox M Edwards YH Cloning and chromosome assignment of the human CDX2 gene Ann Hum Genet 1997 61 393 400 Suh E Chen L Taylor J Traber PG A homeodomain protein related to caudal regulates intestine specific gene transcription Mol Cell Biol 1994 14 7340 51 Suh E Traber PG An intestine specific homeobox gene regulates proliferation and differentiation Mol Cell Biol 1996 16 619 25 Moskaluk CA Zhang H Powell SM Cerilli LA Hampton GM Frierson HF Jr Cdx2 protein expression in normal and malignant human tissues an immunohistochemical survey using tissue microarrays Mod Pathol 2003 16 913 9 Barbareschi M Murer B Colby TV Chilosi M Macri E Loda M Doglioni C CDX 2 homeobox gene expression is a reliable marker of colorectal adenocarcinoma metastases to the lungs Am J Surg Pathol 2003 27 141 9 Suh N Yang XJ Tretiakova MS Humphrey PA Wang HL Value of CDX2 villin and alpha methylacyl coenzyme A racemase immunostains in the distinction between primary adenocarcinoma of the bladder and secondary colorectal adenocarcinom
15. i und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen MB Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien nicht entsprechend den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen die Bedingungen vom Anwender gepr ft werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet den technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FL
16. ia Real Produktionsvej 42 Fabricant Code du lot Contenu suffisant pour lt n gt tests S Carpinteria California 93013 USA DK 2600 Glostrup Denmark Hersteller Chargenbezeichnung Inhalt ausreichend f r n Ans tze Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Fax 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Use by Consult instructions for use Authorized representative in the European Community Utiliser jusque Consulter les instructions d utilisation Repr sentant Autoris dans la Communaut Europ enne Verwendbar bis Gebrauchsanweisung beachten Autorisierter Repr sentant in der EU Technical Support 800 424 0021 Customer Service 800 235 5763 www dako com PT0020 Rev C Edition 04 08 119006 001 307725EFG_001 p 8 8
17. n recommand est le syst me EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des appareils Dako Autostainer Autostainer Plus a l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 uL Programme automatique CDX2 sans contre coloration ou CDX2H avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es a temp rature ambiante Pour plus de d tails se reporter au Manuel de l operateur sp cifique a l appareil Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l appareil Dako Autostainer utilis contacter l assistance technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un ingenieur d application un sp cialiste de l assistance technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du pro
18. ntrol 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone DAK CDX2 Isotype IgG1 kappa Recombinant human CDX2 corresponding to amino acids 1 165 In Western blotting of Caco 2 lysate the antibody labels a 37 kDa and 40 kDa band corresponding to the expected molecular weight of CDX2 2 Additional bands at 17 KDa and 19 kDa were also labeled by the antibody 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN3 a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date s tamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negativ
19. rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code S3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram CDX2 without counterstaining or CDX2H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step
20. s 32 60 und der Prostata 2 6 4 8 10 11 beobachtet Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako bzw den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen 307725EFG_001 p 5 8 Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat VorsichtsmaBnahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Farbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 119006 001 Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enthalt Klon DAK CDX2 Isotyp IgG1 Kappa Rekombinantes humanes CDX2 das den Aminos uren 1 165 entspricht Beim Western Blotting von Caco 2 Zelllysaten markierte der Antik rper Banden von 37 kDa und 40 kDa was mit dem erwarteten Molekulargewicht von CDX2 bereinstimmt 2 Weitere Banden bei 17 kDa und 19 kDa wurden ebenfalls vom Antik rper markiert 1 F r Fachpersonal 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN3 eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Ble
21. sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des 307725EFG_001 p 6 8 Auswertung der Farbung Leistungsmerkmale References Bibliographie Literaturangaben 119006 001 Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gewahrleistet wird dass das Farbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in Hamatoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Als positive Kontrollen sollte Appendix und Pankreasgewebe verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellul re F rbemuster ist nukle r Normales Gewebe Gewebetyp Gewebeelemente mit positiver F rbung Anz getestet Nebennieren 2 Appendix 6 Knochenmark 2 Gehirn Zerebellum 3 Gehirn Zer
22. t und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels fixiert werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Als Visualisierungssystem wird EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 empfohlen Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Anwendungsvolumen oder FLEXRTU3 300 uL Anwendungsvolumen Autoprogramm CDX2 ohne Gegenfarbung oder CDX2H mit Gegenfarbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttragern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und
23. tocole V rifier que les performances du protocole modifi sont toujours valides en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit la section Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l h matoxyline l aide du produit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons de patients Le tissu de contr le positif doit comprendre l appendice et le pancr as et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action semblables ceux d crits pour ces tissus la section Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le r actif de contr le n gatif recommand est le produit FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus r f 1S750 Le sch ma de coloration cellulaire est nucl aire 307725EFG_001 p 4 8 Caract ristiques de performance Deutsch Zweckbestimmung Synonym fir das Antigen Zusammenfassung und Erklarung 119006 001 Tissus sains Type de tissus l ments tissulaires color s positivement nbre test s Surr nale 2 0 2 Appendice 6 6 6 cellules pith liales nucl aires Moelle osseuse 2 0 2 Cerveau cervelet
24. ulmonaires le ganglion lymphatique le m soth lium l ovaire la peau pith lium squameux et glandes sudoripares le testicule ou la glande thyro de 4 5 L expression de CDX2 a t rapport e dans 86 100 des ad nocarcinomes colorectaux y compris les tumeurs primitives et m tastatiques 4 8 L expression de CDX2 a galement t rapport e dans 22 70 des ad nocarcinomes gastriques et dans les carcino des du tractus gastro intestinal avec un degr de positivit lev observ dans les carcino des de la r gion centrale des intestins 5 9 L expression de CDX2 a t observ e dans les ad nocarcinomes mucineux de l ovaire 11 100 et les ad nocarcinomes de la vessie 47 100 du pancr as 32 60 et de la prostate 2 6 4 8 10 11 Se reporter aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone DAK CDX2 Isotype lgG1 kappa CDX2 humain
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