FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD138 Clone MI15
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1. FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD138 Clone MI15 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code I1S642 ENGLISH Intended use Synonym for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 117500 002 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD138 Clone MI15 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of malignancies involving terminally differentiated plasma cells and it is associated with multiple myeloma 1 2 Antibodies to CD138 may also be useful for the subclassification of diffuse large B cell lymphoma 3 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Syndecan 1 1 CD138 is a transmembrane proteoglycan bearing heparan sulfates and sometimes chondroitin sulfates It consists of a 30 5 kDa core protein and five glycosaminoglycans CD138 is a member of the syndecan family The reported Mr of CD138 ranges from 85 0002. FRANCAIS Utilisation prevue Synonyme de l antig ne Resume et explication Reactifs fournis Immunogene Specificite Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 117500 002 Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display membrane staining Normal tissues In tonsil the plasma cells show a moderate to strong staining reaction whereas the epithelial cells show a weak to moderate staining reaction No significant reaction is seen with leucocytes from normal peripheral human blood lt 5 and no significant reaction is seen in normal bone marrow lt 5 CD138 labeling is absent from CD34 positive stem cells 1 Abnormal tissues In bone marrow from multiple myeloma patients all plasma
3. au VIH 8 De plus l anti CD138 peut aider la sous classification de lymphomes diffus grands lymphocytes B utilis conjointement aux anti CD10 anti BCL 6 et anti MUM1 3 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone MI15 Isotype IgG1 kappa Un m lange de lign es cellulaires de my lome humain U266 et XG 1 2 9 Anti Human CD138 clone MI15 a t class comme un anti CD138 la 6th International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 6 Conf rence et Atelier Internationaux sur les Antig nes de Diff renciation des Leucocytes Humains 1 L pitope reconnu par l anti CD138 MI15 se trouve dans l ectodomaine partie extracellulaire de la prot ine de noyau du CD138 Les exp riences de blocage ont r v l que l pitope reconnu par le MI15 semble chevaucher en partie l pitope reconnu par un autre anticorps du CD
4. cell types are labeled including reticular polymorphous asynchronous and blastic plasma cells 2 Pour utilisation lors d un diagnostic in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD138 Clone MI15 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps permet l identification de tumeurs malignes impliquant les cellules plasmatiques en stade de diff renciation terminale et il est associ de multiples my lomes 1 2 Les anticorps au CD138 permettent aussi la sous classification des Iymphomes diffus grands lymphocytes B 3 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Syndecan 1 1 Le CD138 est un prot glycane transmembranaire portant des h parane sulfates et parfois des chondroitine sulfates Il consiste en une prot ine de noyau de 30 5 kDa et cinq glycosaminoglycanes Le CD138 fait partie de la famille des synd canes Le poids mol culaire rapport pour le CD138 varie entre 85 000 et 92 000 probablement en fonction de la forme glycosaminoglycane de la mol cule 1 Au sein du systeme h matopo tique le CD138 est surtout confin aux stades tardifs de la diff r
5. une cuve p ex PT Link Rinse Station r f PT109 contenant du EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 dilu temp rature ambiante Laisser les lames dans le Wash Buffer pendant 1 5 minutes Coupes incluses en paraffine comme pr paration alternative des chantillons le d paraffinage et la restauration de l Epitope peuvent tre r alis s dans le PT Link l aide d une proc dure modifi e Se r f rer aux instructions du Guide d utilisation du PT Link Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides R f S3003 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont preprogrammes dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume d application de 200 uL ou FLEXRTU3 volume d application de 300 uL Programme automatique CD138 sans contre coloration ou CD138H avec contre colorat
6. wertvoll sein 8 Dar ber hinaus kann Anti CD138 zusammen mit Anti CD10 Anti BCL 6 und Anti MUM1 bei der Subklassifizierung von diffusen gro en B Zell Lymphomen helfen 3 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon MI15 Isotyp IgG1 Kappa Eine Mischung aus menschlichen U266 und XG 1 Myelomzelllinien 2 9 Anti Human CD138 Klon MI15 wurde bei dem der 6th International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 6 Internationale r Workshop und Konferenz ber leukozytendifferenzierende Antigene als Anti CD138 geclustert 1 Das von Anti CD138 MI15 erkannte Epitop befindet sich innerhalb der Ektodom ne extrazellul rer Teil des CD138 Kernproteins Blockierungsexperimente haben gezeigt dass das von MI15 erkannte Epitop anscheinend das Epitop das von einem anderen Antik rper gegen CD138 Klon B B4 erkannt wird teilweise berlappt 1 5 Anti CD138 MI15 reagiert stark mit CD138
7. with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Lin
8. 138 le clone B B4 1 5 L anti CD138 MI15 r agit fortement avec le CD138 exprim par de multiples lign es cellulaires d riv es de my lomes comme les lign es U266 et XG 1 9 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattend
9. das von multiplen Myelom abgeleiteten Zelllinien wie U266 und XG 1 exprimiert wird 9 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von f
10. du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d hematoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter les sch mas de r action d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration membranaire Tissus sains dans les amygdales les cellules plasmatiques ont pr sent une coloration mod r e forte tandis que la coloration des cellules pith liales tait faible mod r e Aucune r action significative n est observ e avec les leucocytes de sang humain p riph rique normal lt 5 ni dans la moelle osseuse nor
11. enciation des lymphocytes B Il s exprime normalement une densit cellulaire lev e dans les cellules plasmatiques normales et malignes 4 5 et dans les cellules lymphoplasmocyto des 4 Dans les tissus matures le CD138 s exprime dans les pith liums simples et stratifi s les fibroblastes les k ratinocytes stratifi s et les cellules endoth liales 1 La fonction du CD138 est encore inconnue pour sa plus grande part Toutefois la queue intracellulaire du CD138 semble se fixer au cytosquelette par des composants cellulaires 1 et la partie extracellulaire de la mol cule semble se lier des ligands diff rents Le CD138 joue probablement un r le dans les fonctions cellulaires comme la prolif ration la mort programm e de la cellule la matrice cellulaire et l adh sion entre les cellules 5 par exemple il est le m diateur de l adh sion des cellules de myelomes au collag ne de type 6 L expression du CD138 est r duite durant la transformation tumorale de divers pith liums 7 et l antig ne est rapidement perdu divis par les cellules de my lomes entrant en apoptose et donc le CD138 est un marqueur des cellules de my lomes viables 1 6 Le CD138 est perdu au moment de la d g n rescence en tissu tumoral de plusieurs pith liums stratifi s 7 Avec l anti BCL 6 et l anti IRF4 l anti CD138 peut tre pr cieux pour le diagnostic des lymphomes non hodgkiniens associ s au SIDA et aux lymphomes hodgkiniens li s
12. gepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX H matoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Code Nr K8018 ausgef hrt werden Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine Membranf rbung auf Gesundes Gewebe Bei Mandelgewebe zeigen die Plasmazellen eine m ige bis starke F rbereaktion w hrend die Epithelzellen eine schwache bis m ige F rbereaktion zeigen Bei Leukozyten aus normalem peripheren menschlichen Blut wird keine signifikante Reaktion festgestellt lt 5 und bei normalem Knochenmark wird keine signifikante Reaktion festgestellt lt 5 Eine CD138 Markierung fehlt auf CD34 positiven Stammzellen 1 Pathologisches Gewebe Beim Knochenmark von Patienten mit multiplem Myelom werden alle Plasmazelltypen markie
13. i H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing Inc 1997 p 249 52 2 Costes V Magen V Legouffe E Durand L Baldet P Rossi J F et al The MI15 monoclonal antibody anti syndecan 1 is a reliable marker for quantifying plasma cells in paraffin embedded bone marrow biopsy specimens Hum Pathol 1999 30 1405 11 Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des an
14. ich vom Glykosaminoglykanmuster des Molek ls ab 1 Im Rahmen des h matopoietischen Systems ist CD138 haupts chlich auf die sp ten Stadien der B Zellendifferenzierung beschr nkt Es wird typischerweise bei hoher zellul rer Dichte in normalen und malignen Plasmazellen 4 5 sowie in Iymphoplasmozytoiden Zellen exprimiert 4 Im reifen Gewebe wird CD138 durch einfache Epithelien und Schichtepithelien Fibroblasten Schichtkeratinozyten und Endothelzellen exprimiert 1 Die Funktion von CD138 ist weitgehend unbekannt Es scheint jedoch dass der intrazellul re Schwanz von CD138 das Zytoskelett mit zellul ren Komponenten zusammenbindet 1 und der extrazellul re Teil des Molek ls scheint sich an unterschiedliche Liganden zu binden CD138 spielt vermutlich eine Rolle bei zellul ren Funktionen wie Proliferation programmierter Zelltod Zellmatrix und Adh sion zwischen Zellen 5 So vermittelt es zum Beispiel die Adh sion zwischen Myelomzellen und Typ I Kollagen 6 Die Expression von CD138 ist w hrend der malignen Transformation verschiedener Epithelien verringert 7 und das Antigen wird von Myelomzellen die in die Apoptose bergehen schnell abgesto en CD138 ist daher ein Marker lebensf higer Myelomzellen 1 6 CD138 geht bei der Malignisierung mehrerer Schichtepithelien verloren 7 Zusammen mit Anti BCL 6 und Anti IRF4 kann Anti CD138 f r die Diagnose von AIDS verwandten Nicht Hodgkin Lymphomen und HIV verwandten Hodgkin Lymphomen
15. ion L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire IS642 EFG SSM 07 04 08 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Synonym f r das Antigen Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 117500 002 individuellement Si le pathologiste qui r alise l amp evaluation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste
16. k User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 epitope retrieval temperature and time 97 for 20 1 minutes cool down to 65 Remove Autostainer slide rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code S3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software
17. male lt 5 Le marquage du CD138 est absent des cellules souches positives au CD34 1 Tissus tumoraux dans la moelle osseuse provenant de patients atteints de my lome multiple tous les types de cellules plasmatiques sont marqu s y compris les cellules r ticulaires polymorphes asynchrones et blastiques 2 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD138 Klon MI15 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt CD138 dient der Identifizierung von Malignomen die terminal differenzierte Plasmazellen einschlie en und wird mit dem multiplen Myelom in Verbindung gebracht 1 2 Antik rper gegen CD138 k nnen auch der Subklassifizierung von diffusen gro en B Zell Lymphomen 3 dienen Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Syndekan 1 1 CD138 ist ein Transmembranproteoglykan das Heparansulfate und manchmal auch Chondroitinsulfate tr gt Es besteht aus einem Kernprotein mit 30 5 kDa und f nf Glykosaminoglykanen CD138 ist ein Mitglied der Syndekanfamilie Die nachgewiesene relative Molek lmasse von CD138 reicht von 85 000 bis 92 000 und h ngt vermutl
18. nd anti MUM1 3 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone MI15 Isotype IgG1 kappa A mixture of U266 and XG 1 human myeloma cell lines 2 9 Anti Human CD138 clone MI15 was clustered as anti CD138 at the 6th International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 1 The epitope recognized by anti CD138 MI15 is found within the ectodomain extracellular part of the CD138 core protein Blocking experiments have revealed that the epitope recognized by MI15 seems to be partly overlapping the epitope recognized by another antibody to CD138 clone B B4 1 5 Anti CD138 MI15 reacts strongly with CD138 expressed by multiple myeloma derived cell lines such as U266 and XG 1 9 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush
19. nitte Zur Probenpr paration kann f r Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link auch ein modifiziertes Verfahren verwendet werden Weitere Informationen finden Sie im PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern werden Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Anwendungsvolumen oder FLEXRTU3 300 uL Anwendungsvolumen Autoprogramm CD138 ohne Gegenf rbung oder CD138H mit Gegenf rbung IS642 EFG SSM 07 04 08 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale References R f rences Literatur 1 Wijdenes J Cl ment C Klein B Dore J M New B cell CD antigens BC29 CD138 syndecan 1 workshop panel report In Kishimoto T Kikutan
20. of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 uL dispense volume Autoprogram CD138 without counterstaining or CD138H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics IS642 EFG SSM 07 04 08 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics
21. ormalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung mit hitzeinduzierter Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte sollte mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 durchf hren F r PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorw rmtemperatur 65 Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 f r 20 1 Minuten auf 65 abk hlen Das Autostainer Objektktr gergestell mit den Objekttr gern aus dem PT Link Beh lter herausnehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 eintauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im Wash Buffer belassen Paraffineingebettete Sch
22. oto T Morimoto C et al editors Leucocyte typing V White cell differentiation antigens Proceedings of the 5th International Workshop and Conference 1993 Nov 3 7 Boston USA Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1995 p 713 4 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 117500 002 Catalogue number R f rence catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temp rature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS642 EFG SSM 07 04 08 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17
23. rt einschlie lich retikul rer polymorpher asynchroner und blastischer Plasmazellen 2 3 Colomo L L pez Guillermo A Perales M Rives S Martinez A Bosch F et al Clinical impact of the differentiation profile assessed by immunophenotyping in patients with diffuse large B cell lymphoma Blood 2003 101 78 84 Sebesty n A Berczi L Mihalik R Paku S Matolcsy A Kopper L Syndecan 1 CD138 expression in human non Hodgkin Iymphomas Br J Haematol 1999 104 412 9 Gattei V Godeas C Degan M Rossi FM Aldinucci D Pinto A Characterization of anti CD138 monoclonal antibodies as tools for investigating the molecular polymorphism of syndecan 1 in human lymphoma cells Br J Haematol 1999 104 152 62 Jourdan M Ferlin M Legouffe E Horvathova M Liautard J Rossi JF et al The myeloma cell antigen syndecan 1 is lost by apoptotic myeloma cells Br J Haematol 1998 100 637 46 Inki P Jalkanen M The role of syndecan 1 in malignancies review Ann Med 1996 28 63 7 Carbone A Gloghini A Larocca LM Capello F Pierconti F Canzonieri V et al Expression profile of MUM1 IRF4 BCL 6 and CD138 syndecan 1 defines novel histogenetic subsets of human immunodeficiency virus related lymphomas Blood 2001 97 744 51 9 Horvathova M Gaillard JP Liautard J Duperray C Lavabre Bertrand T Bourquard P et al B30 6 Identification of novel and specific antigens of human plasma cells by mAb In Schlossman SF Boumsell L Gilks W Harlan JM Kishim
24. to 92 000 presumably depending on the glycosaminoglycan pattern of the molecule 1 Within the haematopoietic system CD138 is mainly confined to late stages of B cell differentiation It is typically expressed at high cellular density in normal and malignant plasma cells 4 5 and in Iymphoplasmocytoid cells 4 In mature tissue CD138 is expressed by simple and stratified epithelia fibroblasts stratified keratinocytes and endothelial cells 1 The function of CD138 is largely unknown However the intracellular tail of CD138 seems to bind together the cytoskeleton with cellular components 1 and the extracellular part of the molecule seems to bind different ligands Presumably CD138 plays a role in cellular functions such as proliferation programmed cell death cell matrix and cell cell adhesion 5 for example it mediates adhesion of myeloma cells to type collagen 6 CD138 expression is reduced during malignant transformation of various epithelia 7 and the antigen is rapidly lost shed by myeloma cells entering into apoptosis thus CD138 is a marker of viable myeloma cells 1 6 CD138 is lost upon malignization of several stratified epithelia 7 Together with anti BCL 6 and anti IRF4 anti CD138 may be of value for the diagnosis of AIDS related non Hodgkin lymphomas and HIV related Hodgkin Iymphomas 8 Additionally anti CD138 may aid in the subclassification of diffuse large B cell lymphoma together with anti CD10 anti BCL 6 a
25. ue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L epaisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 K8014 Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes de tissus d paraffin s fix s au formol et inclus en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link Ref PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Ref K8012 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 temp rature et dur e de restauration de l pitope 97 pendant 20 1 minutes refroidissement 65 Retirer le portoir lames et les lames Autostainer de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient
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