Coamatic APC Resistance V S 82313863
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1. ventualit selon laquelle l analyse de plasmas pr lev s chez des patients pr sentant une activit inhibitrice lev e par exemple anticorps phospholipidiques pourrait donner lieu un temps de c phaline anormal et donc eventuellement des r sultats errones Dans ces cas l accroissement du facteur de dilution par exemple 1 9 ou 1 19 peut corriger le r sultat du test Comme pour tout test bas sur le temps de c phaline kaolin il convient de veiller viter une activation des pr l vements par contact tant donn qu une telle interf rence peut provoquer une activation du facteur VIII et du facteur V Valeurs de reference Les rapports de APC V obtenus par l analyse de plasmas pr lev s chez 61 sujets sains sur des appareils de mesure ACL et ST 4 et chez 390 sujets sains sur l appareil de mesure thrombolyzer taient compris entre 2 et 3 5 Aucune diff rence n a t mise en vidence en fonction du sexe Distribue en France par BIOGENIC S A 132 Rue du Lantissargues 34970 MAURIN AFSSAPS N R51542 D D aw CE ITALIANO Revisione dell inserto 03 2013 APC V ratio 3 5 T o 3 0 o 2 5 er ae normal genotype o Zu e heterozygous Q506 8 lan 8 e FV Q 1 5 ce bi homozygous B fat o FV Q506 1 0 Untreated OAC Heparin Fragmin Fraxiparin n 61 n 147 n 36 n 9 n 12 Gli APC V ratio dei campioni sono distribuiti secondo il genotipo del fattore V Per un dato genotipo si ottengono A2. Acad Sci 90 1004 1008 1993 2 Svensson P J and Dahlback B Resistance to activated protein C as a basis for venous thrombosis N Engl J Med 330 517 522 1994 3 Bertina RM et al Mutation in blood coagulation factor V associated with resistance to activated protein C Nature 369 64 67 1994 4 Voorberg J et al Association of idiopathic venous thromboembolism with single point mutation at Arg506 of factor V Lancet 343 1535 1536 1994 5 Greengard J S et al Activated protein C resistance caused by Arg506Gin mutation in factor Va Lancet 343 1361 1362 1994 6 Williamson D et al Factor V Cambridge A new mutation Arg306 gt Thr associated with resistance to activated protein C Blood 91 1140 1144 1998 Jorquera J et al Modified test for activated protein C resistance Lancet 344 1162 1163 1994 Trossa rt M et al Modified APC resistance assay for patients on oral anticoagulants Lancet 344 1709 1994 Svensson PJ et al Evaluation of original and modified APC resistance tests in unselected outpatients with clinically suspected thrombosis and in healthy controls Thromb Haemost 77 332 335 1997 10 Freyburger G et al Proposal for objective evaluation of the performance of various functional APC resistance tests in genotyped patients Thromb Haemost 78 1360 1365 1997 11 Hall C et al Evaluation of a modified APTT based method for determination of APC resistance in plasma from patients on heparin or ora
3. Futura unter Verwendung einer bestimmten Reagenzcharge und eines internen Laborstandards ermittelt Da f r die Bestimmung der APC Resistenz noch kein Internationaler Standard verf gbar ist sind die Werte des internen Laborstandard auf gefrorene Plasmaproben zur ckf hrbar die als homozygot bzw heterozygot f r APC Resistenz nachgewiesen wurden Probengewinnung Die Blutabnahme vornehmen nachdem sich der Patient 10 Minuten ausgeruht hat Das Blut 9 Teile in Natriumcitrat 0 1 mol L 1 Teil geben und innerhalb von 24 Stunden bei 2000 x g und Raumtemperatur zentrifugieren Das Plasma vorsichtig ohne Durchmischung mit Thrombozyten von den Zellen trennen Die Plasma Untersuchung mu innerhalb von 25 Stunden nach der Blutabnahme erfolgen Es besteht aber auch die M glichkeit die Blutproben rasch bei 70 C in 1 mL Einheiten oder kleiner tiefzufrieren und sie bei 70 C h chstens drei Jahre lang aufzubewahren Die Proben d rfen nicht in einer Gefriertruhe mit einem automatischen Abtausystem gelagert noch vor dem Test aufgetaut und wieder eingefroren werden Die Proben sind als potentiell infekti s zu behandeln Zus tzliche Informationen sind im NCCLS Dokument H21 A3 zu finden Testdurchf hrung 1 Alle Reagenzien vor Verwendung auf Raumtemperatur bringen Gefrorene Proben werden unter standardisierten Bedingungen rasch bei 37 C aufgetaut um Aktivit tsverluste von labilen Gerinnungsfaktoren bzw die Bildung von Kryopr zipitaten z
4. Metodeforskrift revision 03 2013 CE Venligst rekvirer den g ldende udgave af metodeforskriften pa dansk fra den lokale Chromogenix distributer ADVARSEL Alle donor portioner anvend til fremstilling af reagenser af human oprindelse er testet med FDA godkendte metoder for tilstedev relse af Hepatitis B overflade antigen og antistoffer mod HIV 1 og 2 samt Hepatitis C og fundet negative Da ingen analyse imidlertid kan udelukke tilstedev relsen af disse blodbarne sygdomme ber h ndtering af og affald fra reagenser af human oprindelse i dette produkt ske med omhu Fareklasse Ingen Risikos rninger Ingen Sikkerhedss tninger Ingen Dette produkt er til in vitro diagnostisk anvendelse SPORBARHED AF KALIBRATORER OG KONTROLLER De angivne veerdier blev bestemt ved gentagne analyser pa ACL Futura med en specifik reagens lot og mod en intern standard For APCR V analysen er der endnu ikke fastlagt en International Standard V rdierne er sat mod en intern standard som er sporbar til frosne plasma prover som er blevet bestemt til at veere henholdsvis homozygote og heterozygote for APCR Bibliography Literatur Bibliograf a Bibliographie Bibliografia Bibliografia Litteratur Litteraturf rteckning Bi6A1ioypagia _ Dahlb ck B et al Familial thrombophilia due to a previously unrecognized mechanism characterized by poor anti coagulant response to activated protein C Prediction of a cofactor to activated protein C Proc Natl
5. To rnpol v TIPOOPIZETAL yia SLAYVWOTIKN Xprion in vitro AVIXVEUGIH TNTA TWV UAIKWV EAEYXOU Kal 6a8uov mnonc Ol AVAMEPOLEVES TLH G TPOO LOPIOTNKAV HE TIOAAATI EG METPOELG OF Evav ava ut ACL Futura XPNOLNOTIOLWVTAG pia OUYKEKPINEVN NapTida AVTIOPAOTNPIWV KAL EVAVTL EVOC EOWTEPLKOU TIPOTUTIOU UALKOU Tia nv H TpNOoN Tou APCR V dev UTT PXOLV AKON OLEB VA TIP TUTIA Ol TIUEG rpoodlopioBnkav EvavTl EV G EOWTEPIKOU TIPOTUTIOU UALKOU TOU EiVAl AVIXVE OLUO EVAVTL KATEWUYLEVWV ELYHATWV TTAAONATOG TIPODSLOPIOUEVWV WC Ou guywv Kal ETepdoCuywv yia tnv APCR 12 National Committee for Clinical Laboratory Standards Specifications for reagent water used in the clinical laboratory NCCLS Approved Standard ASC 3 13 foe G et al Response to activated protein C upon storage of whole blood and plasma Thromb Res 93 89 95 1999 14 National Committee for Clinical Laboratory Standards Collection transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays NCCLS Document H21 A3 vol 11 No 23 15 National Committee for Clinical Laboratory Standards EP5 T2 User evaluation of clinical chemistry devises US Patent 5 443 960 EP 0 608 235 EP 0 690 991 Australia 666 484 690 535 Japan 2562000 Canada 2 119 761 New Zealand 261 190 LOT z 4 BH amp wal ec rer In Vitro Diagnostic Medical Device Batch code Use by Temperature limitation Consult instructions for use Control Biological risks Manufact
6. and instrument performance should be made and the analysis should be repeated See Calibration section for QC use of Control Plasma Level 1 and 2 Traceability of calibrators and control materials The reported values were determined over multiple runs on ACL Futura using a specific lot of reagent and against an internal House Standard As an International Standard is not still availablefor the APCR V assay the values have been assigned against a House Standard which is traceable to frozen plasma samples which have been determined to be homozygous or heterozygous respectively for factor V dependent APC Resistance Specimen collection The patient should be at rest for 10 min before sampling Collect blood 9 volumes in 0 1 mol L sodium citrate 1 volume and centrifuge within 24 hours at 2000 x g for 20 min at room temperature Take care to avoid contamination from the platelet layer into the plasma when the plasma is separated from the cells Analyse the plasma within 25 hours from blood sampling 3 Alternatively freeze rapidly at 70 C in aliquots of 1 mL or less and store for not more than 3 years at 70 C Specimens should not be stored in a self defrosting freezer and not be thawed and refrozen before assay Treat specimens as potentially infectious For more infor mation see NCCLS document H21 A3 14 Procedure 1 All reagents must be brought to room temperature before use Frozen plasma samples should be rapidly thawed at 37 C in a
7. bei 15 25 C oder 1 Monat bei 2 8 C in der Orginalflasche APTT Reagenz Haltbarkeit der ge ffneten Flasche 1 Woche bei 15 25 C oder 1 Monat bei 2 8 C in der Orginalflasche Nicht einfrieren APC CaCl Haltbarkeit nach dem L sen 2 Stunden bei 37 C 8 Stunden bei 15 25 C 5 Tage bei 2 8 C oder 3 Monate bei 20 C oder k lter in der Orginalflasche Siehe ANMERKUNG Kontrollplasma Level 1 Haltbarkeit nach dem L sen 6 Stunden bei 2 25 C oder 3 Monate bei 20 C oder k lter in der Orginalflasche Siehe ANMERKUNG Kontrollplasma Level 2 Haltbarkeit nach dem L sen 2 Stunden bei 2 25 C oder 3 Monate bei 20 C oder k lter in der Orginalflasche Siehe ANMERKUNG ANMERKUNG Das gefrorene Reagenz mu bei 37 C aufgetaut und vor Verwendung vorsichtig durchmischt werden Nicht wieder einfrieren Qualit tskontrolle Die Kontrollplasmen Level 1 und Level 2 sollten zur Best tigung der Patientenergebnisse mitgetestet werden Level 1 ist ein Plasma mit normaler Reaktion wogegen Level 2 eine dem Vorhandensein der Faktor V Q5 Mutation entsprechende Reaktion zeigt Die zu erwartenden APC V Ratio Kontrollbereiche sind im chargenspezifischen Beipacktext angegeben Liegen die erhaltenen Werte au erhalb der angegebenen Kontrollbereiche sollten Reagenzien bzw Ger t berpr ft und der Test wiederholt werden R ckf hrbarkeit der Werte von Kalibratoren und Kontrollen Die angegebenen Werte wurden in mehreren Analysenserien auf ACL
8. como 0 8 veces la media de la raz n de APC V cuando es mas bajo que 2 8 y como 0 75 veces la media de la raz n de APC V cuando es 2 8 o mas alto 6 La raz n de APC V para el Plasma Control Nivel 1 deber a estar dentro del rango normal La raz n de APC V para el Plasma Control Nivel 2 deberia ser inferior al valor de corte Sensibilidad Coatest APC Resistance 5 proporciona un 100 de sensibilidad para FV Q determinado en Thrombolyzer n 447 ACL n 295 ST 4 n 248 y MLA Electra n 50 Limitaciones factores de interferencia No hay interferencias significativas entre los resultados obtenidos entre muestras de plasma fresco y congelado La sensibilidad y especificidad para la mutaci n del factor V Q5 en el an lisis de plasma de pacientes con TAO no esta afectada por el valor de INR El procedimiento descrito para el ensayo permite el an lisis de plasma de pacientes heparinizados con niveles de heparina de 1 Ul mL en plasma heparina no fraccionada y de bajo peso molecular Aunque la prediluci n 1 4 disminuye dr sticamente las interferencias no puede ser excluido que el an lisis de plasmas de pacientes con una alta actividad inhibidora anticuerpos contra fosfolipidos tengan un tiempo de APT anormal y entonces podrianobtenerse falsos resultados En algunos casos aumentando el factor de diluci n e g 1 9 o 1 19 puede corregirse el resultado del test Al hacer el ensayo de APTT es conveniente evitar la activaci n p
9. e anti HIV 1 2 No entanto deve se manipular com precau o como potencialmente infeccioso Classe de risco nenhuma Frases de risco nenhuma Frases de seguran a nenhuma Este reagente destina se a utiliza o em diagn stico in vitro TRA ABILIDADE DAS MATERIAS DOS CALIBRADORES E DOS CONTROLOS Os valores apresentados foram determinados atrav s de m ltiplos ensaios no ACL Futura utilizando um lote especifico de reagente e contra um Padrao Caseiro interno Para o ensaio de APCR V o Padrao Internacional ainda nao est dispon vel Os valores foram determinados contra um Padrao Caseiro que tra vel at rs amostras de plasma ongelado que foram determinadas como sendo Homozigotas e Heterozigotas para a APCR COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 SVENSK Instick revision 03 2013 CE F r aktuell revision av detta insticksblad pa svenska ber vi Er att kontakta Chromogenix distribut r FORSIKTIGHETSATGARDER OCH VARNINGAR Materialet i denna produkt har testats med FDA godkanda metoder och befunnits negativt for Hepatit B ytantigen HBsAg Anti HCV och HIV antikroppar Produkten skall hanteras som potentiellt smittsam Faroklass ingen Riskfraser ingen Skyddsfraser ingen Denna produkt r f r in vitro diagnostiskt anv ndande SP RBARHET AV KALIBRATORER OCH KONTROLLMATERIAL Angivna v rden best ms genom upprepade analyser p ACL Futura med anv ndande av en specifik reagenslot Kalibrering g rs mot en int
10. l eliminazione di reagenti di origine umana utilizzati in questo prodotto richiedono attenzione Simbolo di pericolo nessuno Frasi di rischio nessuno Consigli di prudenza nessuno Per l impiego diagnostico in vitro Materiali necessari ma non forniti Acqua deionizzata filtrata attraverso membrane da 0 22 um o Pipette di precisione Coagulometri automatici o semiautomatici a determinazione ottica o meccanica NOTA Nel caso di utilizzo di strumenti automatici o semiautomatici riferirsi sempre al manuale dell operatore fornito dalla azieda produttrice per l esatta procedura Conservazione e stabilit NCCLS tipo Il 12 reagenti sigillati sono stabili a 2 8 C fino alla data di scadenza stampata sull etichetta Evitare la contaminazione dei reagenti da parte dei microorganismi 1 V DEF Plasma Stabilit dopo ricostituzione 8 ore a 15 25 C 24 ore a 2 8 C 3 mesi a 20 C o a temperatura inferiore conservato nel flacone originale Vedi NOTA 2 CaCl Una volta aperto rimane stabile 7 giorni a 15 25 C o un mese a 2 8 C 3 Reagente APTT Una volta aperto rimane stabile 7 giorni a 15 25 C o un mese a 2 8 C Non congelare CHROMOGENIX Instrumentation Laboratory Company Bedford MA 01730 2443 USA Instrumentation Laboratory SpA V le Monza 338 20128 Milano Italy ec Rep 2 CaCl Estabilidad una vez abierto 7 dias a 15 25 C o 1 mes a 2 8 C en el vial original 3 APTT reactivo Est
11. und mit angemessener Sorgfalt gehandhabt werden Gefahrenklasse keine Risikoeinstufung keine Sicherheitseinstufung keine Dieses Produkt ist nur f r die in vitro Diagnostik geeignet Zus tzlich ben tigte Materialien Entionisiertes Wasser 0 22 um filtriert oder Wasser NCCLS Typ II 12 Kalibrierte Pipetten GerinnungsmeBgerat zur Bestimmung der Gerinnungszeit Automatische bzw halbautomatische Gerinnungsme ger te mit mechanischer oder optischer Messmethodik k nnen verwendet werden ANMERKUNG Bei Verwendung von automatischen oder halbautomatischen Ger ten sind die Angaben des Ger teherstellers zu befolgen Haltbarkeit und Lagerungsbedingungen Die verschlossenen Reagenzien sind bei 2 8 C bis zum aufgedruckten Verfalldatum haltbar Eine Kontamination mit Mikroorganismen ist zu vermeiden 1 V DEF Plasma Haltbarkeit nach dem L sen 8 Stunden bei 15 25 C 24 Stunden bei 2 8 C oder 3 Monate bei 20 C oder k lter in der Orginalflasche Siehe ANMERKUNG D o gt a op COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 PORTUGUES Revis o do folheto 03 2013 CE Para a revisao actual deste folheto informativo em Portugues contacte o representante da Chromogenix da sua area PRECAU ES E ADVERTENCIAS O material utilizado neste produto foi analisado com testes aprovados pela FDA e verificou se a aus ncia de reac o ao Antig nio de Superf cie da Hepatite B HBsAg aos anticorpos anti HCV
12. 36 n 9 n 12 Die Verteilung der APC V Ratios entspricht dem Faktor V Genotyp Innerhalb eines Faktor V Genotyps werden unabhangig von der Probenkategorie ahnliche APC V Ratios erhalten Typische durchschnittliche Werte sind 2 6 normaler Genotyp 1 7 heterozygoter FV Q5 und 1 2 homozygoter FV Q5 Die Ausgangs APTT bei nicht therapierten Personen kann sich im Vergleich zur COATEST APC Resistenz Originalmethode leicht verandern Testeigenschaften REPRODUZIERBARKEIT UND PRAZISION 22 APC V Ratios von Kontrollplasma Level 1 wurden mit 11 verschiedenen Reagenzkombinationen an verschiedenen Tagen auf einem ACL Gerinnungsautomaten getestet APC V Rati Innerhal r Serien Zwischen den Serien Kontrollplasma Level 1 2 0 CV 4 CV 4 Doppelbestimmungen der Plasmen von 630 Personen auf drei verschiedenen Instrumenten ST 4 Thrombolyzer und MLA Electra 900 ergaben einen CV innerhalb der Serie von 3 bzw 5 f r die Gerinnungszeiten ohne bzw mit APC NCCLS Referenz EP5 T2 Kalibrierung Im Vergleich zur COATEST APC Resistance Originalmethode werden mit der V DEF Plasma Methode niedrigere Ratios erhalten Es wird empfohlen da jedes Labor f r das verwendete Ger t einen eigenen APC Resistenz cut off Wert festlegt 1 Durchf hrung von f nf voneinander unabh ngigen Dreifachbestimmungen einer Probe mit normaler APC Response Die inter und intra Variation der APC R Ratios mu unter 7 liegen F r den Fall da mit der Originalmethode
13. AO 7 11 Fundamento del metodo La muestra de plasma es prediluida en Plasma DEF V e incubada con el reactivo APTT durante un periodo de tiempo est ndar La coagulaci n se inicia al a adir CaCl en ausencia y presencia de APC y se registra el tiempo de formaci n del coagulo REACTIVOS 1 V DEF Plasma 2 viales Plasma humano estabilizado y liofilizado con un bajo nivel de actividad en factor V conteniendo el antagonista de la heparina Polibrene Reconstituir con 4 mL de agua NCCLS tipo II 1 Se puede mantener 30 min a 20 25 C Agitar suavemente antes de usar 2 CaCl 2 viales 2 mL de cloruro c lcico 0 025 mol L en tamp n Tris conteniendo 0 5 de alb mina bovina 3 APTT reactivo 2 viales 4 mL de fosfolipidos purificados con silica coloidal como activador de contacto Contiene un conservante Agitar vigorosamente en un vortex antes de usar 4 APC CaCl 2 viales Proteina C activada humana coliofilizada con CaCl Reconstituir con 2 mL de agua NCCLS tipo 11 12 Se puede mantener durante 30 minutos a 20 25 C mezclar suavemente antes de usar 5 Control Plasma Nivel 1 1 vial Plasma humano liofilizado Reconstituir con 1 0 mL de agua NCCLS tipo 11 12 Se puede mantener durante 30 minutos a 20 25 C agitar suavemente antes de usar 6 Control Plasma Nivel 2 1 vial Plasma humano liofilizado Reconstituir con 1 0 mL de agua NCCLS tipo II Se puede mantener durante 30 minutos a 20 25 C agitar suavemente antes de usar Los react
14. CHROMOGENIX COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 Intended use For determination of resistance to activated protein C APC caused by the factor V Q 5 factor V Leiden mutation in plasma from untreated individuals and from patients on oral anticoagulant OAC or heparin therapy Background and summary The APC resistance phenotype 1 is in more than 90 of the cases due to a mutation in the factor V gene resulting in a replacement of Arg 5 R with Gin Q in the factor V protein The selectivity for the factor V Q or other mutations in the factor V gene rendering the protein resistant to inactivation by APC is increased by normalizing the concentrations of other plasma proteins involved in formation and regulation of thrombin Hence by performing the APTT based APC resistance assay in the presence of an excess of factor V deficient plasma the sensitivity and specificity for the factor V Q 506 mutation is significantly increased Further this modification allows for the analysis of plasma from patients who are on OAC therapy 711 Measurement principle Sample plasma is prediluted in V DEF Plasma and incubated with the APTT reagent for a standard period of time Coagulation is triggered by the addition of CaCl in the absence and presence of APC and the time for clot formation is recorded REAGENTS 1 V DEF Plasma 2 vials Stabilized lyophilized human plasma with a low level of factor V activity containing th
15. IS ITALIANO PORTUGUES DANSK SWENSK GREEK TECHNICAL SPECS PAPER White paper 50 60 g m weight SIZE 11x 17 280 x 432 mm PRINT Front Back PRINT COLOR Top rule Orange Pantone 137 all remaining type in black Back All type in black CH ROMOG EN IX Instrumentation Laboratory Company Bedford MA 01730 2443 USA ual 302251 R3 03 2013 Instrumentation Laboratory SpA V le Monza 338 20128 Milano Italy ec rer N
16. PC V ratio analoghi nei diversi gruppi analizzati valori di mediana sono 2 6 normali 1 7 eterozigoti e 1 2 omozigoti Gli APTT basali dei soggetti non trattati possono differire moderatamente quando siano comparati al Coatest APC Resistance originale Caratteristiche del metodo ACCURATEZZA E PRECISIONE APC V Ratio sono stati calcolati su 22 replicati impiegando il Plasma di controllo APC Resistance Control Plasma Livello 1 su uno strumento ACL ed utilizzando 11 differenti combinazioni di reagenti in 11 differenti sedute de lavoro APC Resistance APC V Rati Intra seri Inter seri Plasma di controllo Livello 1 2 4 CV 4 CV 4 Test in doppio eseguiti su plasmi provenienti da 630 pazienti testati con tre differenti tipi di strumenti ST 4 Thrombolyzer ed MLA Electra 900 hanno fornito CV intraserie di 3 e 5 per tempi de coagulazione ottenuti in assenza ed in presenza di APC rispettivamente NCCLS documento EP5 T2 15 Calibrazione APC V Ratio ottenuti con il metodo Coatest APC Resistance 5 sono risultati pi bassi degli APC Ratio ottenuti con il metodo originale Coatest APC Resistance indipendentemente dallo strumento utilizzato Si raccomanda comunque che ciascun laboratorio stabilisca le proprie performances di reazione sul proprio strumento e stabilisca il valore di cut off per il metodo APC Resistance V seguendo le indicazioni di seguito riportate 1 Eseguire cinque determinazioni indipendenti di APC V Ratio utilizzando a
17. abilidad despu s de reconstituido 7 dias a 15 25 C o 1 mes a 2 8 C en el vial original No congelar 4 APC CaCl Estabilidad despu s de reconstituido 2 horas a 37 C 8 horas a 15 25 C 5 dias a 2 8 C o 3 meses a 20 C o temperatura inferior en el vial original Ver NOTA 5 Control Plasma Nivel 1 Estabilidad despu s de reconstituido 6 horas a 2 25 C o 3 meses a 20 C o temperatura inferior en el vial original Ver NOTA 6 Control Plasma Nivel 2 Estabilidad despu s de reconstituido 6 horas a 2 25 C o 3 meses a 20 C o temperatura inferior en el vial original Ver NOTA NOTA El reactivo congelado deberia ser atemperado a 37 C Agitar suavemente antes de usar No volver a congelar Controles de calidad Deben usare los Plasmas Control Nivel 1 y Nivel 2 para la validaci n de las series de pruebas El Nivel 1 muestra una respuesta normal a APC mientras que el Nivel 2 muestra una respuesta consecuente a la presencia de la mutaci n V Q5 S Los rangos de valores esperados para las razones de APC V estan especificados para cada lote Si se obtienen valores fuera de este rango debe realizarse una revision completa de los reactivos y de la funcionabilidad del instrumento y deben repetirse los an lisis Correlaci n de los calibradores y materiales de control Los valores obtenidos se determinaron mediante multiples mediciones en ACL Futura usando un lote especifico de reactivo y con un estandar interno En el aso del ensayo d
18. analyse de plasmas pr lev s chez des patients trait s par les ACO 71 Principe de mesure Le pr l vement plasmatique est pr dilu dans du plasma V DEF et incub avec le r actif pour le temps de c phaline kaolin pendant une dur e standard La coagulation est d clench e par l addition de CaCl en l absence et en pr sence d APC et le d lai n cessaire la formation du caillot est enregistr REACTIFS 1 Plasma V DEF 2 flacons Plasma lyophilis et stabilis d origine humaine comportant un taux faible d activit du facteur V et contenant Polybrene un antagoniste de I h parine Reconstituer l aide de 4 0 ml eau NCCLS type II 1 Laisser reposer pendant 30 minutes une temp rature de 15 25 C Agiter prudemment avant l emploi 2 CaCl 2 flacons 2 mL de chlorure de calcium 0 025 mol l dans un tampon Tris contenant 0 5 de s rumalbumine 3 R actif APTT pour temps de c phaline kaolin2 flacons 4 ml de phospholipides purifi s avec de la silice colloidale comme activateur de contact Contient un conservateur M langer soigneusement l aide d un vortex avant l emploi 4 APC CaCl 2 flacons Prot ine C activ e d origine humaine colyophilis e avec du CaCl Reconstituer l aide de 2 0 ml eau NCCLS type 11 72 Laisser reposer pendant 30 minutes une temp rature de 20 25 C et m langer prudemment avant l emploi 5 Contr le plasmatique 1 1 flacon Plasma lyophilis d origine humaine Reconstituer
19. bereits eine zufriedenstellende Testdurchf hrung festgestellt wurde kann dieser Schritt entfallen 2 Bestimmung der APC V Ratios von mindestens 30 gesunden Personen im Alter von 20 65 Jahren und der Kontrollplasmen Level 1 und 2 3 Die APC V Ratios der Kontrollplasmen m ssen innerhalb des angegebenen Kontrollbereiches liegen 4 Die mittlere APC V Ratio berechnen 5 Der cut off Wert bei einer durchschnittlichen Ratio von unter 2 8 betr gt 80 der ermittelten Durchschnittsratio Ist die durchschnittliche APC V Ratio z 2 8 so betr gt der cut off Wert 75 der Durchschnittsratio 6 Die APC V Ratio des Kontrollplasmas Level 1 mu innerhalb des Normalbereiches liegen die Ratio des Kontrollplasmas Level 2 mu unterhalb des cut off Wertes liegen Sensitivit t Die Sensitivit t f r die FV Q5 6 Mutation ist 100 erstellt auf Thrombolyzer n 447 ACL n 295 ST 4 n 248 und MLA Electra n 50 Grenzen des Verfahrens interferenzen Die APC V Ratios von frischen und gefrorenen Proben zeigen keine signifikanten Unterschiede Der INR von Patienten unter oraler Antikoagulanzientherapie beeinflu t nicht die Sensitivit t und Spezifilitat f r die Faktor V Q5 Mutation Diese APC V Methode erm glicht die Testung von heparinisierten Patienten mit einem Heparingehalt von 1 0 IE mL Plasma unfraktioniertes und niedermolekulares Heparin Obwohl die 1 4 Vorverd nnung eventuelle Interferenzen stark reduziert kann bei Patienten mit einer
20. de CaCl y APC CaCl a 37 0 5 C Prediluir un volumen de la muestra de plasma o de Plasma Control con 4 volumenes de Plasma DEF V Analizar la prediluci n de las muestras plasmaticas dentro de 45 minutos 4 A adir un volumen de plasma en un tubo de ensayo o cubeta entonces a adir un volumen igual de reactivo APTT Incubar a 37 C durante 5 min Aquellos instrumentos con diferente programaci n se deberia poder incubar durante al menos 3 minutos 5 A adir un volumen de CaCl y simult neamente empezar a cronometrar el tiempo de formaci n de co gulo Registrar el tiempo de formaci n del coagulo 6 Llevar a cabo un segundo an lisis con el plasma intercambiando el CaCl por APC CaClz y registrar el tiempo de formaci n del co gulo Resultados Calcular la raz n de APC relativa al factor V para las muestras y controles Tiempo de coagulaci n APC CaCl Tiempo de coagulaci n CaCl La resistencia a la APC debida a la mutaci n FV Q5 sucede cuando la raz n de APC V es inferior o igual al valor de corte ver calibraci n Los siguientes resultados ilustran la aplicabilidad del ensayo de Coatest APC Resistance 5 en el an lisis de plasmas de individuos sin tratamiento pacientes sometidos a terapias de anticoagulantes orales TAO INR 1 3 6 0 TAO y pacientes recibiendo heparina no fraccionada Heparina o heparinas de bajo peso molecular las que se muestran son Fragmin y Fraxiparin om Raz n APC 2 CaCl Stable une foi
21. doTNHEVOG xpnon Anv ndning Mepiopiopoi xenons ENEYXOU AVTITPOOWTIOG Xp on we Bepnokpaoiac CHROMOGENIX Instrumentation Laboratory Company Bedford MA 01730 2443 USA Instrumentation Laboratory SpA V le Monza 338 20128 Milano Italy ec rer ul 302251 R3 03 2013 CHROMOGENIX COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 Uso Para la determinaci n de la resistencia a la prote na C activada APC causada por la mutaci n en el factor V Q5 factor V Leiden tanto en plasma de individuos sin tratamiento como en pacientes sometidos a terapias de anticoagulantes orales TAO o heparinas Antecedentes y resumen El fenotipo del APC Resistance es en mas del 90 de los casos debido a una mutaci n en el gen del factor V que produce la sustituci n de Arg5 R por Gin Q en la prote na del factor V 3 La selectividad en el factor V Q5 u otras mutaciones en el gen del factor V que produzcan la resistencia de la prote na a la inactivaci n por APCS es aumentada al normalizar la concentraci n de las otras proteinas plasmaticas implicadas en la formaci n y regulaci n de la trombina Por tanto al llevar a cabo el APTT en el que se basa el ensayo de APC Resistance en presencia de un exceso de plasma deficiente en factor V la sensibilidad y especificidad para la mutaci n del factor V Q5 aumenta significativamente Ademas esta modificaci n permite el an lisis de plasma de pacientes que estan con terapias de T
22. due a la mutation FV Q est pr sente si le rapport de APC V est inf rieur ou gal la valeur seuil voir ETALONNAGE Les r sultats suivants montrent les r sultats du Coatest de r sistance du facteur V a l APC lors de l analyse de plasmas provenant de sujets non trait s Untreated de patients trait s par les ACO INR 1 3 6 0 OAC et de patients recevant de l h parine non fractionn e Heparin ou des h parines de bas poids mol culaire sont repr sent s sur le graphique Fragmine et Fraxiparine wor Rapport de l APC 4 APC CaCl Stabilit dopo ricostituzione 2 ore a 37 C 8 ore a 15 25 C 5 giorni a 2 8 C o 3 mesi a 20 C o a temperatura inferiore conservato nel flacone originale Vedi NOTA 5 Plasma di controllo Livello 1 Stabilit dopo ricostituzione 6 ore a 2 25 C 3 mesi a 20 C o a temperature inferiori conservato nel flacone originale Vedi NOTA 6 Plasma di controllo Livello 2 Stabilit dopo ricostituzione 6 ore a 2 25 C 3 mesi a 20 C o a temperature inferiori conservato nel flacone originale Vedi NOTA NOTA Il reagente congelato dovrebbe essere scongelato a 37 C e miscelato delicatamente prima dell uso Non ricongelare Controllo di qualita plasmi di controllo Livello 1 e Livello 2 dovrebbero essere utilizzati per la validazione dei risultati Il Livello 1 fornisce una risposta normale alla APC mentre il Livello 2 mostra una risposta relativa alla presenza della mutaz
23. e APCR V el estandar internacional aun no esta disponible Lo valores se han asignado frente al estandar interno el cual es correlacionable con muestras de plasma congelado que se han determinado como homocig ticas y heterocig ticas para APCR Toma de muestras El paciente debe haber estado en reposo durante al menos diez minutos antes de tomar la muestra Recoger la sangre 9 volumenes en 0 1 mol L de citrato de sodio 1 volumen y centrifugar dentro de las 24 horas siguientes a 2 000 x g durante 20 minutos a temperatura ambiente Evitar la contaminaci n del plasma con c lulas que forman parte de la capa de separaci n Analizar el plasma dentro de las 25 horas siguientes a la toma de muestras Como alternativa puede congelarse rapidamente a 70 C en alicuotas de 1 mL o menos y almacenar durante menos de tres a os a 70 C Las muestras no deben almacenarse en un congelador de descongelaci n autom tica y no deben ser descongeladas y congeladas nuevamente antes de la prueba Las muestras deben tratarse como potencialmente infecciosas Para mas informacion ver el documento H21 A3 NCCLS Procedimiento 1 Todos los reactivos deben estar a temperatura ambiente antes de usar Las muestras de plasma congelado deben ser rapidamente atemperadas a 37 C de manera estandarizada asegurando que la p rdida de actividad de los factores labiles de coagulaci n sea negligible y haya ausencia de crioprecipitado Precalentar un volumen suficiente
24. e colloidale come attivatore di contatto Contiene conservanti Miscelare accuratamente su un vortex prima dell uso 4 APC CaCl 2 fiale Proteina C attivata umana co liofilizzata con CaCl Ricostituire con 2 0 mL di acqua NCCLS tipo Il 2 Lasciare a temperatura ambiente 20 25 C per 30 minuti e miscelare delicatamente prima dell uso 5 Plasma di controllo Livello 1 1 fiala Plasma umano liofilizzato Ricostituire con 1 0 mL di acqua NCCLS tipo Il Lasciare a temperatura ambiente 20 25 C per 30 minuti e miscelare delicatamente prima dell uso 6 Plasma di controllo Livello 2 1 fiala Plasma umano liofilizzato Ricostituire con 1 0 mL di acqua NCCLS tipo Il Lasciare a temperatura ambiente 20 25 C per 30 minuti e miscelare delicatamente prima dell uso reagenti 3 e 4 non sono intercambiabili fra lotti diversi V DEF Plasma art N 82 3146 63 Plasma di controllo Livello 1 art N 82 2650 63 e Plasma di controllo Livello 2 art N 82 2668 63 sono disponibili anche separatamente dalla CHROMOGENIX ATTENZIONE Ciascuna unita di donatore utilizzata nella preparazione di un reagente di origine umana stata testata con metodi approvati dalla FDA per la presenza di anticorpi anti HIV 1 e 2 per l antigene di superficie dell epatite B ed epatite C ed stata trovata negativa Comunque poich nessun test in grado di escludere completamente la presenza di questi agenti infettivi trasmessi per via ematica l impiego
25. e heparin antagonist Polybrene Reconstitute with 4 0 mL of NCCLS type Il water 12 Allow to stand for 30 minutes at 20 25 C Swirl gently before use 2 CaCl 2 vials 2 mL of calcium chloride 0 025 mol L in Tris buffer containing 0 5 bovine serum albumin 3 3 APTT reagent 2 vials 4 mL of purified phospholipids with colloidal silica as contact activator Contains a preservative Mix thoroughly on a Vortex mixer before use 4 4 APC CaCl 2 vials Human activated protein C colyophilized with CaCl Reconstitute with 2 0 mL of NCCLS type Il water Allow to stand for 30 minutes at 20 25 C Swirl gently before use 5 5 Control Plasma Level 1 1 vial Lyophilized human plasma Reconstitute with 1 0 mL of NCCLS type II water Allow to stand for 30 minutes at 20 25 C Swirl gently before use 6 6 Control Plasma Level 2 1 vial Lyophilized human plasma Reconstitute with 1 0 mL of NCCLS type II water 2 Allow to stand for 30 minutes at 20 25 C Swirl gently before use Reagents 3 and 4 are not interchangeable between lots V DEF Plasma Art No 82 3146 63 Control Plasma Level 1 Art No 82 2650 63 and Control Plasma Level 2 Art No 82 2668 63 are also available separately from Chromogenix CAUTION Each donor unit used in the preparation of human source reagent has been tested by FDA approved methods for the presence of Hepatitis B surface antigen and antibodies to HIV 1 and 2 and Hepatitis C and found to be negative However
26. en double de plasma pr lev chez un ensemble de 630 sujets effectu es l aide de trois diff rents types d appareils de mesure ST 4 Thrombolyser et MLA Electra 900 ont donn lieu un CV intra s rie 3 et 5 pour les temps de coagulation obtenus respectivement en l absence et en pr sence d APC R f rence EP5 T2 du NCCLS 5 Etalonnage Les rapports de APC V obtenus par la m thode COATEST APC Resistance V sont plus faibles que les rapports de PAPC obtenus par la m thode COATEST APC Resistance ind pendamment de l appareil de mesure utilis Il est recommand chaque utilisateur d tablir les performances de son propre appareil de mesure et de d terminer la valeur seuil de r sistance l APC li e au facteur V l aide de la proc dure suivante 1 Proc der 5 d terminations ind pendantes du rapport de APC V en utilisant au moins des d terminations triples dans chaque s rie sur un pr l vement de plasma pr sentant une r ponse normale APC Confirmer que la variation inter dosage et intra dosage du rapport de APC V est inf rieure 7 Si des performances satisfaisantes ont d j t tablies par la m thode COATEST APC R sistance cette tape peut tre supprim e D terminer les rapports de APC V d au moins 30 plasmas pr lev s chez des sujets sains d un ge compris entre 20 et 65 ans Inclure le contr le plasmatique 1 et 2 pour la validation des tests V rifier que les rapport
27. ern husstandard Eftersom det nnu inte finns n gon internationell standard f r APCR V testet har v rden satts mot en intern husstandard som r sp rbar till frusna plasmaprover vilka har befunnits vara heterozygota resp homozygota f r faktor V beroende APC resistens 2 CaCl Opened reagent in the original vial is stable for 1 week at 15 25 C or 1 month at 2 8 C 3 APTT reagent Opened reagent in the original vial is stable for 1 week at 15 25 C or 1 month at 2 8 C Do not freeze 4 APC CaCl Stability after reconstitution is 2 hours at 37 C 8 hours at 15 25 C 5 days at 2 8 C or 3 months at 20 C or below when stored in the original vial See NOTE 5 Control Plasma Level 1 Stability after reconstitution is 6 hours at 2 25 C or 3 months at 20 C or below whenstored in the original vial See NOTE 6 Control Plasma Level 2 Stability after reconstitution is 6 hours at 2 25 C or 3 months at 20 C or below when stored in the original vial See NOTE NOTE Frozen reagent should be rapidly thawed at 37 C and gently mixed before use Do not refreeze Quality controls Control Plasma Level 1 and Level 2 should be used for validation of the assay series Level 1 shows a normal response to APC whereas Level 2 shows a response consistent with presence of the factor V Q 5 mutation Ranges of expected APC V ratios are provided with each batch If values outside the specified range are obtained a complete check of reagents
28. ione del fattore V Q5 Per ogni lotto vengono forniti gli intervalli attesi espressi in APC V ratio Se si ottengono valori al di fuori dagll intervalli indicati opportuno controllare le performances dei reagenti e degli strumenti e successivamente ripetere il test Tracciabilit di Calibranti e materiale di Controllo Tutti i valori riportati sono stati determinati con analisi multiple su ACL Futura utilizzando uno soecifico lotto di reagente e contro un Standard Interno di Riferimento Poich per il test APCR V uno standard Internazionale non disponibile i valori sono stati assegnati contro uno Standard di Riferimento Interno proveniente da campioni di plasma congelati identificati come omozigoti e eterozigoti perAPCR Raccolta dei campioni Il paziente deve restare a riposo per 10 minuti prima del prelievo Nove parti di sangue raccolto vanno mescolate con una parte di citrato trisodico 0 1 mol L Centrifugare entro 24 ore a 2000 x g per 20 minuti a temperatura ambiente Avere cura di evitare la contaminazione piastrinica del plasma quando viene separato dalle cellule Analizzare il plasma entro 25 ore dal prelievo di sangue Alternativamente congelare rapidamente a 70 C in aliquote di 1 mL o meno e conservare per non oltre 3 anni a 70 C I campioni non vanno conservati in un congelatore autodisgelante e non vanno disgelati e ricongelati prima del test campioni vanno trattati come materiale potenzialmente infetto Per ulter
29. iori informazioni vedere il documento NCCLS H21 A3 14 Procedimento 1 Tutti i reagenti devono essere portati a temperatura ambiente prima dell uso campioni di plasma congelato devono essere scongelati rapidamente a 37 C in un modo standardizzato per evitare perdita di allivita dei fattori labili della coagulazione e per assicurare l assenza di crioprecipitato 2 Preriscaldare un volume sufficiente di CaCl e APC CaClp a 37 0 5 C Prediluire 1 volume di plasma campione o di plasma controllo con 4 volumi di plasma carente di fattore V Il plasma prediluito dovrebbe essere analizzato entro 45 minuti 4 Mettere 1 volume di plasma normale in una provetta ed aggiungere un uguale volume di reagente APTT Incubare a 37 C per 5 minuti Uno strumento configurato con un tempo di incubazione diverso pu essere usato a condizione che il tempo di incubazione sia almeno 3 minuti 5 Aggiungere 1 volume di CaCl e contemporaneamente iniziare la misurazione del tempo di coagulazione Registrare il tempo di formazione del coagulo 6 Eseguire un secondo test sostituendo CaCl con APC CaCl e registrare il tempo di formazione del coagulo Risultati Calcolare il ratio della APC fattore V correlata dei campioni e dei controlli come segue Tempo di coagulazione APC CaCl Tempo di coagulazione Call La resistenza alla proteina C attivata dovuta alla mutazione Leiden viene rilevata quando l APC V ratio inferiore o uguale al valore di cut off
30. ios obtained with the Coatest APC Resistance 5 method are lower than the APC ratios obtained with the original Coatest APC Resistance method independent of instrumentation used It is recommended that each user establishes the performance of his own instrument and determines the factor V related APC resistance cut off value through the following procedure 1 Perform five independent determinations of the APC V ratio using at least triplicates in each series of a plasma sample with normal APC response Confirm that the inter and intra assay variation of the APC V ratio is below 7 In case a satisfactory performance already has been established with the original Coatest APC Resistance method this step may be omitted 2 Determine the APC V ratios for at least 30 plasma samples from healthy individuals in the age range 20 65 years Include Control Plasma Level 1 and Level 2 for assay validation 3 Verify that the APC V ratios for the Control Plasmas are within their specified ranges 4 Calculate the median APC V ratio 5 Calculate the factor V related APC resistance cut off value as 0 8 times the median APC V ratio when below 2 8 and as 0 75 times the median APC V ratio when 2 8 or higher 6 The APC V ratio for Control Plasma Level 1 should be within the normal range The APC V ratio for Control Plasma Level 2 should be below the cut off value Sensitivity Coatest APC Resistance V provides 100 sensitivity for FV Q 506 as determined on Thr
31. ivos 3 y 4 no son intercambiables entre lotes Chromogenix suministra tambi n separadamente V DEF Plasma Art 82 3146 63 Plasma Control Nivel 1 Art 82 2650 63 y Plasma Control Nivel 2 Art 82 2668 63 PRECAUCION Cada muestra de donante empleada en la preparaci n de reactivos de procedencia humana ha sido ensayada con los m todos vigentes de la FDA Food and Drug Administration para determiner la presencia de antigenos de superficie de la hepatitis B y anticuerpos frente a VIH 1 y 2 y hepatitis C siendo todos los resultados negativos Sin embargo puesto que no existe ningun an lisis que descarte completamente la presencia de tales enfermedades sangu neas la manipulaci n y desechos de los reactivos de procedencia humana de este producto ha de realizarse con cuidado Indicaciones de peligro Ninguna Frase de Riesgo Ninguna Frase de Seguridad Ninguna Este producto es para diagn stico in vitro Material requerido pero no proporcionado Agua desionizada filtrada a trav s de un filtro de 0 22 um o agua NCCLS tipo 11 12 Pipetas calibradas Instrumentos de coagulaci n autom ticos o semi automaticos que empleen m todos de detecci n ptico o mec nico NOTA Cuando usamos instrumentos autom ticos o semi autom ticos consultar el manual de intrucciones del fabricante del instrumento para seguir el proceso correcto Condiciones de almacenamiento y estabilidad Los reactivos sin abrir son estables a 2 8 C has
32. kl rbar Diese Mutation f hrt genau an einer Spaltstelle durch aktiviertes Protein C zu einer Aminosauresubstitution Arg Gin im Faktor V Protein Durch diese nderung in der Aminosauresequenz wird die Spaltung und Inaktivierung des Faktor Va durch APC gehemmt Die Selektivitat f r diese oder andere Mutationen des Faktor VS wird durch Normalisierung der Konzentration anderer bei der Bildung und Regulierung von Thrombin beteiligten Plasmaproteinen erh ht Durch die Vorverd nnung der Patientenplasmen mit V DEF Plasma wird die Sensitivit t und Spezifit t des auf dem Grundprinzip der APTT Messung aufbauenden APC Resistenz Tests f r die Faktor V Q5 Mutation signifikant erh ht Au erdem erm glicht die Vorverd nnung auch die Testung von Patienten unter oraler Antikoagulanzientherapie Messprinzip Probenplasma wird mit V DEF Plasma vorverd nnt und f r einen festgesetzten Zeitraum mit dem APTT Reagenz inkubiert Die Zeitdauer bis zur Fibrinbildung wird nach Zugabe von CaCl mit und ohne APC gemessen REAGENZIEN V DEF Plasma 2 Flaschen Stabilisiertes lyophilisiertes humanes Plasma mit einer niedrigen Faktor V Restaktivit t und Polybrene als Heparinantagonist Aufl sen mit 4 0 mL Wasser NCCLS Typ 11 72 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen Vor Verwendung vorsichtig durchmischen CaCl 2 Flaschen 2 mL Calciumchlorid 0 025 mol L in Trispuffer mit 0 5 Rinderserumalbumin APTT Reagenz 2 Flaschen 4 mL gereinig
33. l aide de 1 0 ml eau NCCLS type II 1 Laisser reposer pendant 30 minutes une temp rature de 20 25 C et agiter prudemment avant l emploi 6 Contr le plasmatique 2 1 flacon Plasma lyophilis d origine humaine Reconstituer a l aide de 1 0 ml eau NCCLS type 2 Laisser reposer pendant 30 minutes une temp rature de 20 25 C et agiter prudemment avant l emploi Les r actifs 3 et 4 ne sont pas interchangeables entre les lots Le plasma V DEF Article N 82 3146 63 AFSSAPS N S62372 ainsi que le Contr le plasmatique 1 Article N 82 2650 63 AFSSAPS N M16062 et le Contr le plasmatique 2 Article N 82 2668 63 AFSSAPS N M17312 peuvent galement tre fournis s par ment par Chromogenix et ses distributeurs PRECAUTION Chaque unit provenant d un donneur et utilis e pour la pr paration d un r actif d origine humaine a t test e selon des m thodes approuv es par la FDA pour la recherche des anticorps anti VIH 1 et 2 et anti HCV et de l antigene HBS Cette recherche s est r v l e n gative N anmoins tant donn qu aucun test ne permet d liminer avec une certitude absolue la pr sence de l antig ne de surface de l h patite B et de l h patite C ou des anticorps dirig s contre le VIH le maniement et l limination des r actifs d origine humaine de ce produit devront faire l objet de toutes les attentions Classification risque Aucune Phrases risque Aucune Phrases s curit Aucune Ce prod
34. l anticoagulant therapy Thromb Res 89 203 209 1998 COON Symbols used Verwendete Symbole S mbolos utilizados Symboles utilis s Simboli impiegati S mbolos utilizados Xenomorom vra o u6oAa ENGLISH Insert revision 03 2013 CE APC V ratio 3 5 o 3 0 o 2 5 G 3 A normal 7 8 genotype 2 0 heterozygous Q506 8 lus amp FV Q eo 5 ts homozygous A fat 0 Fv Q506 Untreated OAC Heparin Fragmin Fraxiparin n 61 n 147 n 36 n 9 n 12 Sample APC V ratios are distributed according to the factor V genotype For a given genotype similar APC V ratios are obtained regardless of patient group Typical median values are 2 6 normal 1 7 heterozygous FV Q 5 and 1 2 homozygous FV Q 5 Basal APT times for untreated individuals may differ moderately as compared to the original Coatest APC Resistance assay Performance Characteristics PRECISION APC V ratios were calculated from 22 single replicate analyses of Control Plasma Level 1 on an ACL instrument using 11 different reagent combinations on 11 different occasions V Within seri V Between seri Control Plasma Level 1 APC V ratio 2 4 4 4 Duplicate analyses of plasma from altogether 630 individuals on three different types of instruments ST 4 Thrombolyzer and MLA Electra 900 resulted in within series CV 3 and 5 for the clotting times obtained in the absence and presence of APC respectively NCCLS document EP5 T2 5 Calibration APC V rat
35. lmeno tre replicati per ciascuna serie di un plasma che presenti una risposta normale all APC Confermare che i CV inter ed intra serie dell APC V Ratio siano al di sotto del 7 Nel caso di performances ugualmente soddisfacenti con il metodo originale Coatest APC Resistance questo passaggio pu essere omesso 2 Determinare l APC V Ratio di almeno 30 campioni provenienti da individui sani di et compresa tra i 20 e 65 anni Si consiglia di includere i plasmi di controllo APC Resistance Control Plasma Livello 1 e 2 per la validazione del dosaggio Verificare che APC V Ratio per i plasmi di controllo sia all interno dei ranges specificati Calcolare la media degli APC V Ratio Calcolare il valore di cut off dell APC Resistance V moltiplicando per 0 8 il valore medio dell APC Ratio quando questo al di sotto di 2 8 e moltiplicare per 0 75 il valore medio dell APC Ratio nel caso questo sia pari a 2 8 o maggiore 6 LAPC V Ratio del plasma di controllo APC Resistance Control Plasma Livello 1 dovrebbe cadere all interno dell intervallo di normalit LAPC V Ratio del plasma di controllo APC Resistance Control Plasma Livello 2 dovrebbe cadere all interno del valore di cut off Sensibilit Coatest APC Resistance V ha dimostrato una sensibilit per il FV Q pari al 100 come da prove effettuate su Thrombolyzer n 447 ACL n 295 ST 4 n 248 ed MLA Electra n 50 Limitazioni fattori interferenti Non sono state otte
36. nute differenze significative tra campioni freschi e congelati Sensibilit e specificit alla mutazione del fattore FV Q5 per campioni di plasma provenienti da pazienti in trattamento con anticoagulanti orali non sono modificate dal valore di INR La procedura di dosaggio descritta sopra consente l analisi di un plasma di un paziente in trattamento con eparina fino a livelli 1 Ul mL di eparina non frazionata o a basso peso molecolare Sebbene la prediluizione 1 4 diminuisca fortemente le interferenze non si pu escludere che l analisi di campioni provenienti da pazienti che presentino un inibitore es anticorpi antifosfolipidi possa dare tempi di coagulazione anormali e pertanto con possibilit di risultati errati In tali casi aumentando il fattore di diluizione es 1 9 o 1 19 possibile la correzione dei risultati anomali Come per qualsiasi test basato sull APTT occorre assicurarsi che i campioni non subiscano attivazione da contatto poich questa potrebbe condurre all attivazione dei fattori VIII e V Valori di riferimento APC V Ratio ottenuti da campioni di plasma provenienti da 61 donatori sani su ACL e ST 4 e da 390 individui sani su Thrombolyzer rientravano nell intervallo 2 3 5 Nessuna differenza stata trovata in relazione al sesso rw 302251 R3 03 2013 COATEST APC Resistance VS 82 3138 63 Printed Insert Sheet 302251 Revision R3 Issued 03 2013 C O 433362 LANGUAGES ENGLISH DEUTSCH ESPANOL FRANCA
37. ombolyzer n 447 ACL n 295 ST 4 n 248 and MLA Electra n 50 Limitation interfering factors No significant differences are obtained between fresh and frozen samples The sensitivity and specificity for the factor V Q 5 mutation on analysis of plasma from OAC patients is not affected by the INR value The prescribed assay procedure allows for the analysis of plasma from heparinized patients at heparin levels lt 1 IU mL plasma unfractionated and low molecular weight heparins Although the 1 4 predilution strongly decreases interferences it can not be excluded that analysis of plasma from patients with high inhibitor activity e g phospholipid antibodies may give an abnormal APT time and thus possibly misleading results In such cases increasing the dilution factor e g 1 9 or 1 19 may correct the test result As for any APTT based assay care should be taken to avoid contact activation of samples since this may lead to activation of FVIII and FV Reference values The APC V ratios obtained from analysis of plasmas from 61 healthy individuals on ACL and ST 4 and from 390 healthy individuals on Thrombolyzer were in the range 2 3 5 No difference is found between sexes CE DEUTSCH Beipackzettel Version 03 2013 APC V ratio 3 5 Le 3 0 o 2 5 er g 5 normal 8 genotype o 2 0 e 7 heterozygous 8 ne amp FV Q506 ee i homozygous A Aa D FV Q506 1 0 Untreated OAC Heparin Fragmin Fraxiparin n 61 n 147 n
38. on una Glicina Q nella proteina fattore V 3 La selettivit per il fattore V Leiden o altre mutazioni nel gene del fattore V che rendono la proteina resistente allinattivazione da parte della APC aumentata dalla normalizzazione delle concentrazioni di altre proteine plasmatiche coinvolte nella formazione e nella regolazione della trombina Perci eseguendo test di resistenza alla APC basati su APTT in presenza di un eccesso di plasma carente di fattore V la sensibilit e la specificit per la mutazione Leiden sono significativamente aumentate Inoltre questa modificazione permette di analizzare i plasmi di pazienti in terapia anticoagulante orale Principio del metodo Il plasma campione prediluito nel plasma carente di fattore V e incubato con il reagente APTT per un tempo standard La coagulazione innescata dall aggiunta di CaCl in assenza e in presenza della APC quindi si registra il tempo necessario alla formazione del coagulo REAGENTI 1 V DEF Plasma 2 fiale Plasma umano liofilizzato e stabilizzato con bassi livelli di attivita di fattore V contenente Polybrene come antagonista eparinico Recostituire con 4 0 mL di aqua NCCLS tipo II 1 Lasciare a temperatura ambiente 20 25 C per 30 minuti Miscelare delicatamente prima dell uso 2 CaCl 2 fiale 2 mL di calcio cloruro 0 025 mol L in tampone Tris contenente albumina serica bovina 0 5 3 Reagente APTT 2 fiale 4 mL di fosfolipidi purificati con silic
39. or contacto de las muestras ya que podria provocar la activaci n del FVIII y FV Valores de referencia Las razones de APC V obtenidas en el an lisis de plasma de 61 individuos sanos en ACL y ST 4 y de 390 individuos sanos en Thrombolyzer estan en el rango 2 3 5 No se han encontrado diferencias entre sexos rw FRAN AIS R vision de la notice 03 2013 APC V ratio 3 5 T o 3 0 o 2 5 er 8 z normal 8 genotype 2 0 e Mi heterozygous 8 Vs 8 e FV Q506 15 ooo homozygous A u 0 FV Q506 1 0 Untreated OAC Heparin Fragmin Fraxiparin n 61 n 147 n 36 n 9 n 12 Les rapports de APC V des pr l vements sont distribu s selon le g notype du facteur V Pour un g notype donn des rapports de l APC V analogues sont obtenus ind pendamment du groupe de patients Les m dianes typiques sont les suivantes 2 6 g notype normal 1 7 FV Q3 h t rozygote et 1 2 FV Q5 homozygote Les temps de c phaline kaolin de base peuvent pr senter des diff rences mod r es chez les sujets non trait s par rapport au Coatest de r sistance l APC initial Evaluation du coffret REPETABILITE ET PRECISION Les rapports APC V ont t calcul s partir de 22 diff rentes analyses en double de plasma t moin de niveau 1 sur un appareil de mesure ACL utilisant 11 diff rentes combinaisons de r actifs 11 occasions diff rentes R rt APC V Intras ri Inters ri Contr le plasmatique 1 2 4 CV 4 CV 4 Les analyses
40. re 1 Amener tous les r actifs la temp rature ambiante avant l emploi D congeler rapidement 37 C les pr l vements de plasma congel de fa on standardis e en veillant exposer le pr l vement une perte n gligeable de l activit des facteurs de coagulation labiles et en v rifiant l absence de cryopr cipit s Pr chauffer un volume suffisant de CaCl et d APC CaCL a 37 0 5 C Pr diluer un volume du pr l vement de plasma ou du contr le plasmatique dans quatre volumes de plasma V DEF L analyse doit tre effectu e dans les 45 minutes qui suivent la pr dilution 4 Ajouter un volume de plasma dans l prouvette ou dans la cuvette puis compl ter par un volume identique du r actif pour le temps de c phaline kaolin Faire incuber a 37 C pendant 5 minutes Un appareil de mesure comportant une dur e d incubation diff rente pr r gl e peut tre utilis a condition que la dur e soit au minimum de 3 minutes 5 Ajouter un volume de CaCl et commencer simultan ment a chronom trer la formation du caillot Enregistrer le d lai n cessaire a la formation du caillot 6 6 Proc der une seconde analyse du pr l vement plasmatique en rempla ant CaCl par APC CaCl et enregistrer le d lai de la formation du caillot R sultats Calculer le rapport de l APC li au facteur V pour les pr l vements et les contr les Temps de coagulation APC CaCl Temps de coagulation CaCl Une r sistance APC
41. s de l APC V des contr les sont compris dans les limites de leurs gammes sp cifi es Calculer le rapport de APC V m dian Calculer la valeur seuil de r sistance APC li e au facteur V en multipliant le rapport de PAPC V m dian par 0 8 s il est inf rieur 2 8 et en multipliant le rapport de APC V m dian par 0 75 s il est gal ou sup rieur 2 8 Le rapport de lAPC V pour le contr le plasmatique 1 devra tre compris dans les limites de la gamme normale Le rapport de APC V pour le contr le plasmatique 2 devra tre inf rieur la valeur seuil Sensibilit Le test COATEST APC R sistance V pr sente une sensibilit de 100 pour FV Q effectu l aide de Thrombolyzer n 447 ACL n 295 ST 4 n 248 et MLA Electra n 50 Limitations facteurs interferents Aucune diff rence significative n a t obtenue entre les pr l vements de plasmas fra chement pr lev s et les plasmas congel s La sensibilit et la sp cificit pour la mutation du facteur V Q5 lors de l analyse de plasmas pr lev s chez des patients trait s par les ACO ne sont pas modifi es par la valeur INR La proc dure du test d crit permet l analyse de plasmas provenant de patients h parin s pr sentant une h parin mie inf rieure ou gale 1 Ul ml de plasma h parines non fractionn es et bas poids mol culaire Bien que la pr dilution de 1 4 r duise fortement les interf rences on ne peut pas exclure l
42. s diferentes tipos de instrumento ST 4 Thrombolyzer y MLA Electra 900 dan un resultado intra series de CV 3 y 5 para los tiempos de coagulaci n obtenidos en ausencia y presencia de APC respectivamente NCCLS reference EP5 T2 15 Calibraci n Las razones obtenidas con el m todo Coatest APC Resistance 5 son mas bajas que las razones obtenidas con el m todo Coatest APC Resistance independientemente del instrumento usado Se recomienda que cada usuario establezca el funcionamiento de su propio instrumento y determine el valor de corte de la resistencia a la APC relativa al factor V a trav s del siguiente proceso 1 Realizar cinco determinaciones independientes de razones de APC V ensayando al menos series por triplicado de una muestra de plasma con respuesta normal de APC Confirmar que la variaci n inter e intra ensayos de la razon de APC V es inferior al 7 En el caso de que ya se haya establecido un buen funcionamiento de la t cnica con el m todo original Coatest APC Resistance este paso podria ser omitido 2 Determinar las razones de APC V de al menos 30 muestras de plasmas procedentes de individuos sanos con edad comprendida entre 20 65 a os Incluir Plasma Control Nivel 1 y Plasma Control Nivel 2 para validar el ensayo Verificar que las razones de APC V para los plasmas control estan dentro de sus rangos especificos Calcular la razon mediana de APC V Calcular el valor de corte de la resistencia a la APC relativa al factor V
43. s le flacon entam pendant 1 semaine a 15 25 C ou pendant 1 mois a 2 8 C dans le flacon d origine 3 R actif APTT pour temps de c phaline kaolin Stable une fois le flacon entam pendant 1 semaine 15 25 C ou 1 mois 2 8 C dans le flacon d origine Ne pas congeler 4 APC CaCl Stable apr s la reconstitution pendant 2 heures 37 C pendant 8 heures 15 25 C pendant 5 jours 2 8 C ou pendant 3 mois 20 C ou des temp ratures inf rieures dans le flacon d origine Voir REMARQUE 5 Contr le plasmatique 1 Stable apr s la reconstitution pendant 6 heures 2 25 C ou pendant 3 mois 20 C ou des temp ratures inf rieures dans le flacon d origine Voir REMARQUE 6 Contr le plasmatique 2 Stable apr s la reconstitution pendant 6 heures 2 25 C ou pendant 3 mois 20 C ou des temp ratures inf rieures dans le flacon d origine Voir REMARQUE REMARQUE D congeler 37 C le r actif et m langer prudemment avant l emploi Ne pas recongeler Contr le de qualit Les contr les Plasma Niveau 1 et Niveau 2 devront tre utilis s pour la validation des s ries Le contr le Niveau 1 montre une r action normale l APC alors que le Niveau 2 montre une r ponse li e la pr sence d une mutation du facteur V Q5 Les normes pr visibles de ratios d APC V sont fournies pour chaque lot Si des valeurs hors normes sont obtenues une v rification complete des r actifs et de l instrument devra
44. sehr hohen Inhibitoraktivitat z B Phospholipid Antik rper eine Beeinflussung der APTT und somit des Testresultates nicht ausgeschlossen werden In solchen F llen kann eine h here Probenvorverd nnung 1 9 oder 1 19 eine korrekte Analyse erm glichen Wie bei allen APTT basierenden Tests mu eine Kontaktaktivierung der Proben vermieden werden da dies zur Aktivierung von FVIII und FV f hren kann Referenzwerte Die APC V Ratios von 61 gesunden Personen gemessen auf ACL und ST 4 bzw 390 gesunden Personen gemessen auf Thrombolyzer lagen im Bereich von 2 0 3 5 COATEST APCTM Resistance V S 82 3138 63 EAAHNIKA Avadewpnon eowkAeiotou 03 2013 CE Pia tnv TPEXOULOA avabewpNon AUTOU TOU EOWK EIOTOU ota EAANVIKA TAPaka OUUE ETMKOLVWVNOTE ME TOV TOTILKO AVTIMPOOWNO TNG IL MPOZOXH Kae uov a dipatoc mou XPNOLUOTIOLNINKE yia TTAPAOKEUN Twv AVTIOPAOTNPIWV AVHPWITLVNG TIPOEAEUONG EAEYXONKE HE HEB DOLG EYKEKPLUEVEC an TO FDA yia tnv rapouoia avTy vou ertupavelac ng Hnatitidac B kal avriowpata Evavr HIV 1 Kal 2 Kal Hnatitidac C Kal sup 8noav apvntik c Mavtwe KaBwc kapia SoKiwacia Sev arokAE EL TEAEIWC TNV TTAPOLOLA AUTWV TWV ADBEVELWV NOU HETADIOOVTAL HE TO Gia O XELPIOH G Kar n aNdplWN Twv AVTIOPAOTNPIWV avOpwrivnc TIPOEAEULONG AUTOU TOU TIPOLOVTOG TP TIEL va YiVETAL HE TIPOOOXT NPOEIAONOIHZEIZ KAI NPOOYAAE EIZ Zua K v bvou Katnyopia oud v Opdoeic ktvSUvou OU EV Opdoeic odnyiwv aomadouc xpnonc ovd v
45. since no test can completely rule out the presence of these blood borne diseases the handling and disposal of human source reagents from this product should be made with care Hazard class none Risk phrases none Safety phrases none This product is for in vitro diagnostic use Materials required but not provided Deionized water filtered through 0 22 um or NCCLS type Il water Calibrated pipettes Automated or semi automated coagulation instruments which employ mechanical or detection methods should be used NOTE When using automated or semi automated instruments always refer to the operator manual from the instrument manufacturer for exact procedures Storage conditions and stability The sealed reagents are stable at 2 8 C until the expiry date printed on the label Avoid contamination of the reagents by microorganisms 1 V DEF Plasma Stability after reconstitution is 8 hours at 15 25 C 24 hours at 2 8 C or 3 months at 20 C or below when stored in the original vial See NOTE optical COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 Verwendungszweck Zur Bestimmung der durch die Faktor V Q5 Faktor V Leiden Punktmutation verursachten Resistenz gegen aktiviertes Protein C APC bei nicht therapierten Personen und Patienten unter oraler Antikoagulation OAK bzw Heparintherapie Hintergrund und Zusammenfassung Mehr als 90 aller F lle von APC Resistenz sind durch eine Mutation im Faktor V Gen er
46. standardized way ensuring negligible loss of activity of labile coagulation factors and absence of cryoprecipitate 2 Pre warm a sufficient volume of CaCl and APC CaCl at 37 0 5 C 3 Pre dilute one volume of sample plasma or Control Plasma with four volumes of V DEF Plasma Pre diluted plasma should be analyzed within 45 minutes 4 Add one volume of plasma to a test tube or cuvette then add an equal volume of the APTT reagent Incubate at 37 C for 5 minutes An instrument with a different preset incubation time may be used provided it is at least 3 minutes Add one volume of CaCl and simultaneously begin timing of clot formation Record the time for clot formation 6 Perform a second analysis on the plasma exchanging CaCl with APC CaC and record the time for clot formation Results Calculate the factor V related APC ratio for the samples and controls Clot time APC CaCl Clottime Cath t i its APC resistance due to a factor V mutation is indicated when the APC V ratio is below or equal to the cut off value see Calibration The following results illustrate the applicability of the Coatest APC Resistance V assay on the analysis of plasma from untreated individuals Untreated patients on OAC therapy INR 1 3 6 0 OAC and patients receiving unfractionated heparin Heparin or low molecular weight heparins shown here are Fragmin and Fraxiparin APC ratio D CaCl Haltbarkeit der ge ffneten Flasche 1 Woche
47. ta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta Evitar la contaminaci n de los reactivos por microorganismos 1 V DEF Plasma Estabilidad despu s de la reconstituci n 8 horas a 15 25 C 24 horas a 2 8 C o 3 meses a 20 C o temperatura inferior en el vial original Ver NOTA COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 Utilization prevue D termination de la r sistance la prot ine C activ e APC provoqu e par une mutation du facteur V Q facteur V de Leyde dans le plasma provenant de sujets non trait s et de patients trait s par des anticoagulants oraux ACO ou de l h parine Contexte et resume Le ph notype de la r sistance l APC est d dans plus de 90 des cas une mutation du g ne du facteur V provoqu e par le remplacement d Arg R par Gin Q au niveau de la prot ine du facteur V3 La s lectivit pour le facteur V Q ou par d autres mutations au niveau du gene du facteur V rendant la prot ine r sistante l inactivation par PAPC est accrue par la normalisation des concentrations des autres prot ines plasmatiques impliqu es dans la formation et dans la r gulation de la thrombine La sensibilit et la sp cificit pour la mutation du facteur V Q5 est ainsi significativement accrue si l on proc de un test de resistance APC bas sur le temps de c phaline kaolin en pr sence d un exc s de plasma pauvre en facteur V Cette modification permet en outre l
48. te Phospholipide mit kolloidalem Silika als Kontaktaktivator Enthalt ein Konservierungsmittel Vor Verwendung vorsichtig auf einem Vortex Mixer durchmischen APC CaCl 2 Flaschen Humanes aktiviertes Protein C lyophilisiert in Kombination mit CaCl Aufl sen mit 2 0 mL Wasser NCCLS Typ II 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen und vor Verwendung vorsichtig durchmischen Kontrollplasma Level1 1 Flasche Lyophilisiertes humanes Plasma Aufl sen mit 1 0 mL Wasser NCCLS Typ 11 2 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen und vor Verwendung vorsichtig mischen Kontrollplasma Level 2 1 Flasche Lyophilisiertes humanes Plasma Aufl sen mit 1 0 mL Wasser NCCLS Typ 11 2 30 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen und vor Verwendung vorsichtig mischen Die Reagenzien 3 und 4 sind bei verschiedenen Kit Chargen nicht untereinander austauschbar V DEF Plasma Art Nr 82 3146 63 Kontrollplasma Level 1 Art Nr 82 2650 63 und Kontrollplasma Level 2 Art Nr 82 2668 63 sind auch separat von Chromogenix erh ltlich ACHTUNG Jede individuelle Blutspende die zur Herstellung der Reagenzien verwendet wurde ist mit FDA zugelassenen Methoden auf die Abwesenheit von Hepatitis B Oberflachenantigen und auf Antik rper gegen HIV 1 bzw 2 und Hepatitis C berpr ft Unabh ngig davon sollten alle aus menschlichen Blut gewonnenen Proben und Produkte wegen nie v llig auszuschlie ender Gef hrdung durch Krankheitserreger als potentiell infekti s angesehen
49. tre effectu e et l analyse refaite Tra abilit des talons et contr les Les valeurs indiqu es ont t d termin es par des essais multiples sur ACL et Futura par l utilisation d un lot sp cifique de r actif contre un talon interne Comme il n existe pas d talon international pour le dosage de la RPCA les valeurs des talons et des contr les ont t d termin es par rapport un talon interne provenant d chantillons de plasma congel s class s homozygote ou h t rozygote pour la RPCA Recueil des chantillons Effectuer le pr l vement apr s que le patient se soit repos pendant 10 minutes Recueillir le sang 9 volumes sur du citrate de sodium 0 1 mol l 1 volume et centrifuger 2000 g 20 minutes la temp rature ambiante dans un d lai maximal de 24 heures Veiller viter la contamination du plasma par la couche de plaquettes lorsque le plasma est s par des cellules L analyse du plasma doit intervenir dans les 25 heures suivant le pr l vement Une alternative consiste le congeler rapidement a 70 C en aliquotes de 1 ml ou moins puis le conserver pendant un maximum de 3 ans 70 C Les chantillons ne doivent pas tre conserv s dans un cong lateur d givrage automatique ni tre d congel s et recongel s avant le test Traiter les chantillons comme potentiellement infectieux Pour tout compl ment d informations se reporter au document H21 A3 NCCLS 14 Procedu
50. u vermeiden o gt a D 2 Die ben tigten Volumina CaCl und APC CaCl auf 37 0 5 C vorwarmen 3 1 Teil Probe oder Kontrollplasma mit 4 Teilen V DEF Plasma verd nnen z B 25 uL 100 uL Die Vorverd nnung im Plasma ist innerhalb 45 Minuten zu analysieren 4 Einen Teil verd nntes Plasma in ein Testr hrchen oder eine K vette pipettieren und das gleiche Volumen APTT Reagenz hinzuf gen 5 Minuten bei 37 C inkubieren Ger te mit davon abweichenden vorprogrammierten Inkubationszeiten k nnen verwendet werden vorausgesetzt die Inkubationsdauer betr gt mindestens 3 Minuten 5 Einen Teil CaCl hinzuf gen und gleichzeitig mit der Zeitmessung bis zur Fibrinbildung beginnen 6 Einen zweiten Ansatz mit APC CaCl anstelle von CaCl durchf hren und abermals die Zeit bis zur Fibrinbildung stoppen Resultate Berechnung der Faktor V bezogenen APC Ratios f r Proben und Kontrollen Gerinnungszeit APC CaCl APC Ratio Gerinnungszeit CaCl Eine APC V Ratio kleiner oder gleich dem cut off Wert siehe KALIBRATION zeigt eine durch die FV Q5 S Mutation verursachte APC Resistenz an Die angef hrten Resultate zeigen die Eignung des COATEST APC Resistance 5 Tests bei der Analyse von nicht therapierten Personen Patienten unter OAK Therapie OAK INR 1 3 6 0 und Patienten mit unfraktionierter Heparingabe Heparin oder niedermolekularer Heparingabe Fragmin Fraxiparin COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 DANSK
51. uit est usage diagnostique in vitro Materiel necessaire mais non fourni Eau d sionis e filtr e sur filtre de 0 22 um ou eau NCCLS type II 2 Pipette talonn e Utiliser des appareils de mesure de la coagulation automatiques ou semi automatiques bas s sur des m thodes de d tection m caniques ou optiques REMARQUE Lors de l utilisation d appareils de mesure automatiques ou semi automatiques se rapporter toujours au manuel de l op rateur fourni par le fabricant de l appareil pour des proc dures exactes Conditions de conservation et stabilit Les r actifs scell s sont stables des temp ratures de 2 8 C jusqu la date de p remption imprim e sur l tiquette Eviter la contamination des r actifs par des microorganismes 1 Plasma V DEF Stable apr s la reconstitution pendant 8 heures 15 25 C pendant 24 heures 2 8 C ou pendant 3 mois 20 C ou a des temp ratures inf rieures dans le flacon d origine Voir REMARQUE COATEST APC Resistance V S 82 3138 63 Uso Determinazione della resistenza alla proteina C attivata APC causata dalla mutazione del fattore V Q5 fattore V Leiden nel plasma di soggetti non trattati e di pazienti in terapia anticoagulante orale TAO o in terapia eparinica Introduzione II fenotipo APC resistente dovuto in oltre il 90 dei casi a una mutazione nei gene del fattore V che comporta una sostituzione dell ArginiaS R c
52. urer Authorised representative In Vitro Diagnostikum Chargenbezeichnung Verwendbar bis Zul ssiger Gebrauchsanweisung beachten Kontrollen Biologisches Risiko Hersteller Bevollm chtigter Dispositif medical de diagnostique in vitro Codigo de lote Fecha de Temperaturebereich Consulte las instrucciones de uso Control Riesgo biol gico Fabricante Representante autorizado Producto sanitario para diagn stico in vitro Code du lot caducidad Limite de temperatura Consulter les instructions d utilisation Contr le Risque biologique Fabricant Mandataire Dispositivo medicodiagnostico in vitro Codice del lotto Utiliser jusque Limites de temp rature Consultare le istruzioni per uso Controllo Rischio biologico Fabbricante Rappresentanza autorizzata Dispositivo m dico para utiliza o em diagn stico in vitro N mero de lote Utilizzare entro Limite di temperatura Consultar as instru es de utiliza o Controlo Risco biol gico Fabricado por Representante autorizado Medicinsk udstyr til in vitro diagnostik Batchkoden Data l mite de L mite de temperatura Se instruktion f r brug Kontrol Milj oplysninger Producent Leverand r In vitro diagnostisk medicinsk produkt Tillverkningskod utiliza o Temperaturbegr nsning Ta del av instruktionen f re anv ndning Kontroll Biologiska risker Tillverkare Auktoriserad representant Npoldv yia Stayvwortikn Ap Naptidac Anvendelsesdato Temperatur grans ZUUBOUAEUTHTE TIG ONYIEG YALKO TIOLOTIKOU B oAoy koi Kiv6uvOL Kataokeuaotng EEoUOLO
53. vedi Calibrazione risultati seguenti mostrano l impiego del Coatest APC Resistance V sui campioni di plasma di soggetti non trattati di pazienti in terapia anticoagulante orale con INR 1 3 6 0 e pazienti in trattamento con eparina non frazionata o a basso peso molecolare Fragmin e Fraxiparin or Rapporto APC ul CE ESPANOL Revisi n Folleto 03 2013 APC V ratio 3 5 T o 3 0 o 2 5 er amp a normal 8 genotype o 20 e heterozygous s Q506 8 ie 8 e FV Q 1 5 4 ee ba bt homozygous A fai o FV Q506 1 0 Untreated OAC Heparin Fragmin Fraxiparin n 61 n 147 n 36 n 9 n 12 Las razones de APC V de las muestras estan distribuidas respecto al genotipo del factor V Para un genotipo dado se obtienen similares razones de APC V para un grupo de pacientes Los valores medios t picos son 2 6 normal 1 7 heterozigotos FV Q5 y 1 2 homozigotos FV Q Los tiempos de APT basal para individuos sin tratamiento podr an diferir moderadamente cuando se comparan con el ensayo original de Coatest APC Resistance Caracteristicas de rendimiento REPETIBILIDAD Y PRECISI N Las razones de APC V son calculadas a partir de 22 an lisis individuales de Plasma Control Nivel 1 en un instrumento ACL utilizando 11 combinaciones diferentes de reactivos en 11 ocasiones diferentes Raz n APC V Dentr ri De un tr ri Plasma de control nivel 1 2 4 CV 4 CV 4 An lisis duplicados de plasma de un total de 630 individuos en tre
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