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Agilent 8453 Système de spectroscopie UV

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1. 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV Comment trouver le maximum d ab visible Agilent 8453 de e la caf Comment trouver le maximum d absorbance de la caf ine Cette section explique comment trouver le maximum d absorbance de votre chantillon de caf ine chantillon de qualification de l installation 1 V rifiez que vous tes en mode Standard Le mode est indiqu dans la barre d outils de votre session ChemStation Agilent 845x UV Visible System 1 Offline Thomas Klink olx Fie Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help uono M o Ee r 2 S lectionnez l option Spectrum Peaks Spectre Pics dans la zone de s lection du tableau de bord d analyse Task Spectrum Peaks Fixed Wavelengths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Utilisez le bouton Setup Configurer du tableau de bord d analyse pour ouvrir la bo te de dialogue des param tres Task Spectrum Peaks M AA 76 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 4 Tapez 2 comme nombre de pics trouver et d sactivez l option Valley find Trouver les vall es Indiquez Absorbance comme type de donn es et r glez l affichage du spectre sur une plage de longueurs d onde comprise entre 190 et 400 nm dans le champ Display spectrum Afficher le spectre de la bo te de dialogue Cliquez
2. 60 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 6 Appuyez sur le bouton Blank sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Blank Mesure blanc dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure Sampling Manual x 7 M morisez l orientation de la cuve dans le porte cuve Relevez le levier pour lib rer la cuve retirez celle ci et rincez la trois fois avec environ 1 ml de T chantillon de caf ine Puis remplissez la cuve d environ 3 ml d chantillon de caf ine V rifiez que les fen tres de la cuve sont propres et remettez la cuve dans la m me position que pour la mesure de r f rence Rabaissez le levier du porte cuve 8 Appuyez sur le bouton Sample Echantillon sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Sample dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure 9 La vue montre le spectre de l chantillon de caf ine avec une ligne verticale indiquant la longueur d onde sp cifi e Le tableau des chantillons r sultats Sample Result Table sous le spectre montre l absorbance mesur e 273 nm Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 61 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Enregistrement de vos param tres en tant que m thode Cette section explique comment enr
3. A titre d initiation rapide un talonnage utilisant la loi de Beer et un seul talon ainsi que l analyse d un chantillon sont d crits ci apr s La seule limite au nombre d chantillons et d talons est la capacit de la m moire de votre ChemStation Agilent Pour cette exp rience nous utilisons comme talon l chantillon de caf ine de qualification de l installation et une dilution 1 pour 1 dans de l eau distill e comme chantillon Pour l talonnage nous utilisons les donn es d absorbance 273 nm Configuration 1 V rifiez que vous tes en mode Standard Le mode est indiqu dans la barre d outils de votre session ChemStation Agilent 845x UY Yisible System 1 Offline Thomas Klink ioj x File Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help MID P o voe E oe ea F 2 S lectionnez la t che Quantification dans la zone de s lection du tableau de bord d analyse Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 87 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Task Quantification M Fixed Wavelengths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Un nouveau tableau de bord s affiche pour la t che et la bo te de dialogue Quantification Parameters Param tres de quantification s ouvre automatiquement Task Si vous tes d j dans la t che Quantification utilisez Setup Configuration da
4. La plupart des modes vous permettent de d finir votre t che analytique par le biais d un ensemble de param tres et le cas ch ant de donn es Un ensemble de param tres et de donn es peut tre enregistr sur le disque en tant que m thode Cela permet de r ex cuter une t che analytique dans des conditions d finies il suffit de charger la m thode et de lancer l analyse des chantillons T ches du mode Standard Les modes du logiciel ChemStation offrant galement la possibilit de se concentrer sur un aspect particulier il faudra g rer un grand nombre de param tres pour personnaliser un mode en fonction d une application donn e Pour surmonter cette complexit le mode Standard est principalement orient t ches Le mode Standard du logiciel de spectroscopie UV visible usage g n ral est ax sur les t ches les plus commun ment ex cut es dans un laboratoire d analyses utilisant la spectroscopie UV visible Quatre t ches sont disponibles Longueur d onde fixe e Spectre Pics e Ratio Equation Quantification Les t ches sont s lectionn es et activ es dans la zone de s lection du tableau de bord d analyse Task Fixed Wavelengths Fixed Wayvelenaths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 25 1 26 Pr sentation du syst me Cette primaut des t ches permet de configurer rapidement le lo
5. Utilisation du passeur de cuves 84 Analyse quantitative avec des talons 87 Configuration 87 Etalonnage 90 Analyse 92 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Sommaire Comment tre s r que mon Agilent 8453 fonctionne correctement 94 Autotest du Agilent 8453 94 Comment mieux comprendre le principe de la spectroscopie UV visible 97 Quand faut il effectuer une mesure blanc 99 Index 101 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 7 Sommaire 8 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Agilent 8453 Syst me de spectroscopie UV visible Manuel de l op rateur 1 Pr sentation du syst me Spectrophotom tre Agilent 8453 pr sentation g n rale 10 Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale 18 Le syst me sera beaucoup plus facile utiliser si vous comprenez les mod les mis en uvre Les mod les th oriques d acquisition d valuation et de traitement des donn es vous aideront en tirer le meilleur parti Le syst me de spectroscopie est compos d un spectrophotom tre Agilent 8453 et du logiciel de spectroscopie UV visible usage g n ral ChemStation Agilent qui fonctionne sur les PC quip s d un syst me d exploitation Microsoft compatible Ces deux l ments sont reli s par une liaison r seau Cette liaison est tr s soupl
6. cut es dans l ordre indiqu ci dessus pour tous les spectres du conteneur des donn es brutes Les r sultats sont enregistr s dans le conteneur des r sultats Le contenu pr c dent des conteneurs de spectres trait s de longueur d onde utilis e et de r sultats est remplac Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 31 1 32 Pr sentation du syst me Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale Traitement l aide d talons Dans la quatri me t che des talons sont utilis s en plus de vos donn es d chantillons Pour cela il a fallu tendre le concept ci dessus pour int grer les talons Deux groupes de conteneurs ind pendants sont utilis s l un pour les talons et l autre pour les chantillons Tous les conteneurs de traitement sont galement d doubl s Comme pour le traitement des chantillons seuls toutes les tapes d valuation sont effectu es en parall le sur les chantillons et les talons Echantillons Etalons Traitement des spectres Acc s aux donn es Evaluation des donn es Etalonnage Les calculs de quantification sont bas s sur un talonnage r alis avec des talons Les coefficients sont calcul s en fonction des param tres de la m thode et des talons pr sents dans la m moire du logiciel ChemStation Cela signifie que les r sultats sont d sormais fonction
7. l aide d un c ble torsad pour r seau local soit directement connect au r seau local Ne connectez pas l adaptateur de r seau local de votre PC l interface CAN du spectrophotom tre Agilent 8453 Vous risqueriez de s rieusement l endommager car la tension de r gime de l interface CAN 12 V est sup rieure celle l adaptateur de r seau local 5 V AVERTISSEMENT V rifiez que le spectrophotom tre est connect une prise secteur L instrument doit toujours tre connect une prise secteur avec terre Utilisez uniquement le cordon secteur pr vu pour votre pays Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Installation et d marrage 2 Avant de mettre le spectrophotom tre sous tension assurez vous que le serveur d initialisation CAG est bien install sur votre PC ou que l administrateur du r seau a affect une adresse IP votre spectrophotom tre Pour plus de d tails voir le chapitre Communication avec le r seau local installation connexion et configuration du manuel Installation du syst me de spectroscopie UV visible PC V rifiez que tous les p riph riques de votre PC sont connect s au secteur V rifiez que le logiciel de spectroscopie UV visible usage g n ral est install Une imprimante doit tre configur e sur votre PC R glez la taille du papier par exemple Lettre A4 R glez l orientation sur Portrait Le protocole TCP IP
8. ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale Spectre Pics rscumress f seun Dans la t che Spectre pics Spectrum Peaks ce sont les minima et maxima d absorbance qui vous int ressent L accent est ici mis davantage sur la longueur d onde mais vous obtenez en plus les mesures d absorbance correspondantes Ratio Equation ie Fils 217 De HAUTE weri 1 Ph 2 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 27 1 28 Pr sentation du syst me La t che Ratio quation Ratio Equation permet de r soudre une quation d finie par l utilisateur sur la base des donn es mesur es et des informations sur l chantillon Une quation peut tre d finie partir de donn es d chantillons jusqu six longueurs d onde et des donn es de poids et de volume entr es avec les chantillons mesur s Avec une quation par exemple les r sultats d une analyse effectu e l aide de kits de tests chimiques peuvent tre automatiquement calcul s et pr sent s dans un rapport Une autre application consiste utiliser un ratio de valeurs de donn es pour contr ler l identit ou la puret d un chantillon Quantification Task La t che Quantification permet d effectuer une analyse monocomposant partir de quatre types diff rents de courbes d talonnage et d un ensemble d talons Gr ce l acquisition du spectre des
9. ration 20 op ration sur les spectres 30 optimisation 33 orifice qui dirige le faisceau 11 ouvertures 49 P papier orientation 37 taille 37 papier optique 44 parall lisme 41 param tres 62 param tres d analyse affichage 88 demander les infos chantillon 88 talonnage 88 longueur d onde 88 type de donn es 88 unit de concentration 88 particules 48 passeur de cuves 84 7 cuves 86 8 cuves 84 connecteur 16 passivation des cuves neuves 44 PC 38 photod gradation 49 photodiodes barrette 13 pi geage des bulles 44 pipette 46 plage de concentrations 28 plastique porte 17 poids 28 pointeur 21 pompe p ristaltique 82 104 pompe chantillon 44 82 param tre 83 test de d bit 83 porte d acc s aux lampes 17 porte cuve standard monocuve 53 porte cuve thermostatable 50 poussi re 48 pr cision photom trique insuffisante 42 protocole TCP IP 37 puret 28 pyridine 47 Q qualification de l installation 59 quantification 25 87 rapport r sultats 73 rapport signal bruit 49 ratio 25 rayonnement source 10 r actions photochimiques 49 r f rence 38 r f rence interne 26 30 r gulation de la temp rature 48 reproductibilit des longueurs d onde 34 r seau 10 13 administrateur 37 connexion 38 local 56 r seau holographique 10 13 r seau local 36 r sultat 33 r sultats 31 pr cis 57 r sultats pr cis 40 RS232C connecteur 16
10. talons avant ou apr s vos chantillons et au del du nombre minimum requis d utiliser autant d talons que vous voulez pour l talonnage e Optimisation facile Du fait qu il est possible d acc der toutes les donn es brutes chantillons et talons il est tr s facile d optimiser les param tres de votre m thode en choisissant une longueur d onde d talonnage diff rente et en r talonnant votre syst me Et pour supprimer les donn es hors limites de votre talonnage il suffit de supprimer l talon concern Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 33 1 34 Pr sentation du syst me M thode talonn e Quand vous enregistrez votre m thode les talons pr sents dans la m moire sont toujours enregistr s avec la m thode Quand vous chargez une m thode vous pouvez analyser directement vos chantillons Optimisation pour un chantillon particulier Vous pouvez en outre optimiser vos param tres de longueur d onde pour un chantillon situ en dehors de la plage de lin arit de l talonnage en cours Gr ce l excellente reproductibilit des longueurs d onde de votre spectrophotom tre vous pouvez s lectionner une longueur d onde ayant un coefficient d extinction inf rieur pour effectuer une analyse pr cise de cet chantillon R sum Le fait que les donn es spectrales brutes soient accessibles vous donne de nombreuses possibilit s
11. S sample bouton poussoir 15 secteur 37 interrupteur 14 prise d alimentation 17 sensibilit 42 serveur d initialisation 56 serveur d initialisation CAG 37 38 session analyse des donn es uniquement 23 commande de l instrument 23 session de commande de l instrument 23 session ouverte 38 solution 50 solutions 97 am lioration de la sensibilit 97 d termination de la puret 97 solutions visqueuses 49 solvant 40 56 solvants 46 solvants courants 46 solvants volatils 48 source de rayonnement 10 soustraction du bruit de fond 26 28 sp cifications optiques des cuves 41 spectre 25 spectres trait s 30 spectrographe 12 fente 10 lentille 10 spectrophotom tre 33 36 vue arri re 16 vue avant 13 spectroscopie d riv e 97 spectroscopie UV visible principes fondamentaux 97 Standard bouton poussoir 15 Stop bouton poussoir 15 substances photosensibles 49 sulfure de carbone 47 surfaces optiques 44 symbole 20 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 syst me d chantillonnage 80 vue 22 26 manuel 80 chantillons 61 78 pompe chantillon 82 talonnage 87 syst me d exploitation 38 talons 87 syst me de spectroscopie 9 r sultats 87 92 syst me optique 10 vue arri re du spectrophotom tre 16 syst me pompe chantillonneur 48 vue avant du spectrophotom tre 13 syst me UV visible Agilent 8453 usage g n ral 56
12. aucun cas Agilent ne peut tre tenu respon sable des ventuelles erreurs conte nues dans ce document ni des dommages directs ou indirects pou vant d couler des informations conte nues dans ce document de la fourniture de l usage ou de la qualit de ce document Si Agilent et l utilisa teur ont souscrit un contrat crit dis tinct dont les conditions de garantie relatives au produit couvert par ce document entrent en conflit avec les pr sentes conditions les conditions de garantie du contrat distinct se substituent aux conditions stipul es dans le pr sent document Licences technologiques Le mat riel et le logiciel d crits dans ce document sont prot g s par un accord de licence et leur utilisation ou reproduction sont soumises aux termes et conditions de ladite licence Limitation des droits L utilisation du logiciel dans le cadre d un contrat principal ou de sous traitance avec le Gouvernement am ricain est soumise la r glementation f d rale des Etats Unis r gissant les logiciels informatiques com merciaux DFAR 252 227 7014 juin 1995 ou les produits commerciaux FAR 2 101 a ou les logiciels informatiques sous licences FAR 52 227 19 juin 1987 ou toute r gle mentation ou clause de contrat quivalente L utilisation la duplication ou la publication de ce logiciel est soumise aux termes de la licence commerciale standard d livr e par Agilent Technologies Conform ment la directive FA
13. caract ris s par une faible longueur d onde et une nergie lev e sont ceux qui risquent le plus de d grader les chantillons photosensibles En cas de probl me vous pouvez bloquer de mani re s lective certaines parties du spectre UV l aide d un filtre d obturation Il existe pour le spectrophotom tre une roue porte filtre optique ainsi que trois filtres d obturation La longueur d onde de coupure du filtre choisi doit tre suffisamment faible pour ne pas liminer d informations spectrales importantes et suffisamment lev e pour bloquer la lumi re susceptible de d grader l chantillon Si vous utilisez un filtre avec les chantillons vous devez utiliser le m me filtre pour la mesure blanc Mise hors tension de la lampe au deut rium Le rayonnement de courte longueur d onde susceptible de provoquer une photod gradation est celui qui est mis par la lampe au deut rium Pour les applications o les mesures sont prises des longueurs d onde sup rieures 400 nm la lampe au deut rium peut tre teinte L intensit lumineuse de la lampe au tungst ne est suffisante pour obtenir un bon rapport signal bruit dans le domaine compris entre 400 et 1100 nm Quand vous utilisez des cuves avec de petites ouvertures v rifiez le rapport signal bruit en effectuant des mesures de l chantillon dans les conditions de votre application Agitation des chantillons et r gulation de la temp rature L
14. de soustraction du bruit de fond l aide de techniques telles que la mesure d une r f rence interne ou un calcul de correction proportionnelle Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Ces donn es sont enregistr es dans le conteneur de longueur d onde utilis e Dans la t che Longueur d onde fixe par exemple on peut afficher ces donn es sous forme de tableau dans la fen tre Sample Results Table Tableau des chantillons r sultats R sultats L tape suivante est l valuation des donn es recueillies Calculation Name Equation WL1 WL6 WE Y Unit Caffeine wai 0 09 mg 1 Weight Volume Use Weight wt Volume Y a Unit Dans la t che Ratio Equation par exemple cette donn e de longueur donde utilis e est trait e par l valuation de l quation sp cifi e Cette op ration suppl mentaire g n re les r sultats du calcul Ces valeurs sont enregistr es dans le conteneur des r sultats Les r sultats sont report s dans le tableau des chantillons r sultats ES ample Result T able OI x Show Sample Info Last Spectrum ete 5 nalyze Name Dilut Factor __ Caffeine mg L Abs lt 273nm gt 1 f Caffeine 1 00000 0 26527 0 53053 R sum Le traitement de base des donn es comprend trois tapes 1 le traitement des spectres 2 l acc s aux donn es 3 l valuation des donn es Ces tapes sont toujours ex
15. des mesures effectu es sur un jeu d talons et des concentrations sp cifi es pour ces talons Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Logiciel ChemStatio Processed Standard Spectra Agilent a usage general pour lol xl Calibration Curve Pr sentation du syst me visible pr lol x 14 05 a 12 z z 1 2 DE z 0s 08 F mg 3 02 0 4 m 2 02 ie DE nd n 200 250 300 o 0 25 05 0 75 Wavelength nm Analyte Value Path sentation general fi Calibration Table Show Standard Info Show Coefficients Delete Selectedistandard Standard Name Caffeine mg L Abs lt 273nm gt Error L1 Caffeine Omg L 10 00000 __053053 000 olx Calibrate Ces coefficients sont ensuite utilis s pour calculer la concentration des chantillons en m moire La m me proc dure appliqu e aux donn es des chantillons et aux donn es des talons donne les r sultats les plus pr cis Avantages 1 Un spectrophotom tre barrette de diodes associ aux puissantes fonctions d valuation des donn es du logiciel ChemStation pr sente de nombreux avantages par rapport aux syst mes traditionnels On trouvera ci apr s une description succincte de quelques uns de ces avantages du point de vue pratique e Un nombre d talons pratiquement illimit Ce principe d analyse des donn es vous permet de mesurer vos
16. faisceau collimat 10 faisceau lumineux 41 44 fen tre 22 graphique 22 tableau 22 tableau des chantillons r sultats 31 fen tre de l application principale 23 fente 10 13 fente spectrale largeur 12 filtre d obturation 49 filtre de correction de la lumi re parasite 10 12 filtre optique 49 formation de bulles 48 formiate de m thyle 47 G gamme de longueurs d onde utile des solvants 46 glyc rine 47 GPIB connecteur 17 GPIO connecteur 16 hexane 47 homog n it 50 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 identit 28 imprimante 37 38 configur e 73 indicateur 14 indicateur d tat 14 informations chantillon 28 installation 36 instrument composition 10 description 13 pr chauffage 57 structure 10 syst mes lectroniques 10 syst mes m caniques 10 instrument monofaisceau 40 interface utilisateur l ments 19 intervalle d chantillonnage 12 J JetDirect 36 K kit de test 28 L lampe au deut rium 10 lampe au tungst ne 10 lampes 11 acc s par la porte 17 deut rium 10 tungst ne 10 argeur de la fente 12 entille 10 entille de la source 10 11 evier de s curit 17 igne de message 38 ogiciel g n ral 9 18 argeur nominale de la fente spectrale 12 oi de Beer 87 ongueur d onde 30 ongueur d onde de coupure 49 ongueur d onde fixe 25 26 59 ongueur d onde utilis e 31 ongueur du t
17. homog n it de la solution peut tre un probl me notamment en cas de solutions visqueuses Il arrive que du fait de gradients induits par convection des changements rapides d absorbance donnent des donn es non reproductibles Ces changements peuvent tre observ s par spectroscopie en prenant des mesures avec de courtes dur es d int gration Pour limiter les Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 49 3 50 Bonnes pratiques de mesure effets de la convection maintenez l chantillon la m me temp rature que le porte cuve ou l air ambiant Ces probl mes peuvent aussi tre r duits en utilisant un porte cuve thermostatable et ou un agitateur Un effet similaire peut se produire en cas de m lange incomplet notamment lorsque la densit ou la miscibilit du solvant et des compos s sont tr s diff rentes L encore l agitation permet de pr venir ce type de probl me Dans une cuve qui n a pas t agit e on observe parfois une photod gradation localis e des compos s sensibles Le volume d chantillon travers par le faisceau lumineux tant tr s faible le fait d agiter l chantillon r duit le temps pendant lequel une mol cule quelconque du compos se trouve dans le faisceau lumineux On diminue ainsi la photod gradation et on augmente l homog n it L emploi d une cuve circulation continue peut donner des r sultats similaires Liste de contr le
18. illumin es par le faisceau lumineux soient parfaitement parall les Le parall lisme est d termin en mesurant l angle form par les deux parois oppos es de la cuve Nous recommandons d utiliser des cuves ayant un trajet optique de 10 mm avec un angle inf rieur 0 1 degr d arc Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 41 3 Bonnes pratiques de mesure Parois parall les Parois non parall les Faisceau lumineux entrant Faisceau lumineux sortant Faisceau lumineux entrant 7 Faisceau lumineux sortant Figure 4 D calage du faisceau lumineux du spectrophotom tre d au non parall lisme des parois d une cuve Cuves ouverture 42 Dans les applications o le volume de l chantillon est limit on utilise des cuves ouverture ou microcuves La largeur de ces cuves est r duite pour diminuer le volume et la partie aveugle de la cuve doit tre noircie pour viter toute transmission et reflet ind sirables travers les parois lat rales Si les parois lat rales ne sont pas noircies on obtiendra une pr cision photom trique insuffisante et en cas de concentrations diff rentes une mauvaise lin arit L inconv nient des cuves ouverture et des microcuves est qu une partie du faisceau est bloqu e Toute la lumi re ne traverse pas l chantillon et il peut y avoir une perte de sensibi
19. la m me fa on pour tous les types de rapport disponibles L exemple suivant montre comment obtenir un aper u d un rapport de r sultats 1 S lectionnez Print Preview Results Aper u avant impression R sultats dans le menu File Fichier TER Edit Method Measure Instrument Math View W Load Save Import Export Selected Spectrum s New Method Load Method Save Method As Set Method Password Print gt Print To File gt Print Preview Current Views Printer Setup Selected window Method Besults Automation Method Eutomaton Hesalts Exit ChemStation lo In I Print Preview Results Report Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 73 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Aper u des rapports avant impression Pour imprimer un rapport de r sultats il faut que vous ayez correctement d fini tous les REMARQUE P pp l param tres et que vous ayez des donn es valuer Si vous n avez pas de donn es le message No results present Aucun r sultat pr sent risque de s afficher No results present 2 Le rapport g n r s affiche dans la fen tre d aper u Fixed Wavelength Report Method file lt untitled gt Information Default Method Data File C HPCHEM 15 DATAY ADVE XAM2 5D Created 02 06 1992 11 16 43 Overlaid Spectra Sample 1 Sample 2 Sample 3 09 08 FE
20. levier pour immobiliser la cuve dans le porte cuve 2 Appuyez sur le bouton Blank sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Blank Mesure blanc dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure Sampling Manual x wo f Standard Sample 3 M morisez l orientation de la cuve dans le porte cuve Relevez le levier pour lib rer la cuve retirez celle ci et rincez la trois fois avec environ 1 ml de l chantillon de caf ine Puis remplissez la cuve d environ 3 ml d chantillon de caf ine V rifiez que les fen tres de la cuve sont propres et remettez la cuve dans la m me position que pour la mesure de r f rence Rabaissez le levier du porte cuve 4 Appuyez sur le bouton Standard sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Standard dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure 90 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Standard Information Name Standard 1 Solvent water Comment a Value Caffeine fo mg L 5 Entrez les informations sur l talon dans la bo te de dialogue Standard Information Infos talon et cliquez sur OK 6 Le logiciel ChemStation Agilent effectue automatiquement l talonnage et affiche les r sultats Lorsque l talonnage est r ussi la courbe d talonnage du tableau de bord
21. ligne de base donne des indications suppl mentaires sur l absorbance des fen tres des cuves et du solvant Les zones de bruit important sont indirectement le signe d une forte absorbance Pour obtenir des mesures d une grande reproductibilit attendez que le spectrophotom tre et les lampes atteignent l quilibre thermique Le temps n cessaire d pend des conditions ambiantes Le spectrophotom tre devrait tre pr t au bout de 45 minutes 7 La mesure suivante est la mesure de votre chantillon Pour obtenir des r sultats exacts utilisez la m me cuve et conservez la m me orientation par rapport au faisceau lumineux Rincez la cuve trois fois environ l aide de la solution d chantillon et lancez la mesure en cliquant sur le bouton Sample chantillon du tableau de bord de l instrument ou en appuyant sur le bouton Sample du spectrophotom tre Pour plus de d tails sur l insertion de la cuve voir la section Insertion d une cuve page 53 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 57 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 D marrage du logiciel UV visible 58 Cette section d crit comment d marrer une session ChemStation Agilent sur votre PC Vous pouvez lancer une session en temps r el pour effectuer des mesures ou une session en diff r pour optimiser les param tres d analyse d une m thode recalculer des r sultats ou imprimer des rapport
22. pour des r sultats optimaux Cuve y La cuve est en quartz ou en verre y Les cuves ouverture ont des parois lat rales noircies Les cuves ouverture ont une ouverture sup rieure ou gale 3 mm Y Les fen tres des cuves sont d pourvues de traces de doigts et autres formes de contamination Y Une cuve circulation est utilis e la place de la cuve ouverture standard Mesures Y La solution dans la cuve ne contient pas de particules en suspension La solution dans la cuve et les parois de la cuve sont d pourvues de bulles La solution dans la cuve a t m lang e de mani re homog ne Le blanc mesur utilise le solvant de l chantillon La mesure blanc fait appara tre une ligne de base plate la Figure 9 et la Figure 10 pages 51 et 52 montrent une bonne et une mauvaise ligne de base Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 Y L orientation de la cuve pour la mesure blanc et la mesure de l chantillon est la m me Y L id al est de ne pas retirer la cuve entre les mesures ce qui suppose que l on effectue le remplissage rin age l aide d une pipette ou que l on emploie une cuve circulation Y Le temps qui s coule entre la mesure blanc et la mesure de l chantillon doit tre court 0 0015 0 0010 0 0005 0 0000 0 0005 0 0010 200 400 600 800 1000 Figure 9 Exemple d une mesu
23. sentation du syst me 1 Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale Fixed Wavelengths Fixed Wavelengths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification Tableau de bord de l instrument Le tableau de bord de l instrument se trouve sous le tableau de bord d analyse Il permet de visualiser et de piloter les dispositifs d chantillonnage et le spectrophotom tre Une partie des l ments graphiques du tableau sont des l ments actifs permettant par exemple d allumer ou d teindre les lampes ou de d marrer une pompe p ristaltique On reconna t les zones actives au fait que le pointeur change de forme quand il passe sur ces zones Un clic de la souris l int rieur d une zone active fait appara tre un petit menu avec un choix d options ou ex cute simplement une op ration Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 21 1 22 Pr sentation du syst me Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale Vous pouvez en outre s lectionner un syst me d chantillonnage dans la liste propos e Les param tres correspondants peuvent tre d finis au moyen du bouton Setup Configurer Vue IN Overlaid Sample Spectra Transmittance La zone situ e droite des tableaux de bord permet de visualiser un aspect d termin de la t che en c
24. sources de lumi re et de les diriger selon un axe commun vers la lentille de la source La lentille de la source forme un faisceau de lumi re collimat unique Celui ci traverse la zone du filtre correcteur de lumi re parasite obturateur puis l chantillon avant d atteindre la lentille et la fente du spectrographe Dans le spectrographe la lumi re est dispers e sur la barrette de photodiodes par un r seau holographique ce qui permet d acc der simultan ment toutes les longueurs d ondes Le r sultat est une am lioration notable de la vitesse d acquisition des spectres 10 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Obturateur filtre de lumi re parasite Lampe au tungst ne Fente Lentille de la source R seau Lentille de la source Barrette de photodiodes Figure 1 Syst me optique du spectrophotom tre Lampes La source de lumi re pour la gamme des UV est une lampe au deut rium munie d un orifice qui laisse passer le faisceau Du fait de la d charge de plasma dans le gaz deut rium basse pression la lampe met de la lumi re dans une plage comprise entre 190 et environ 800 nm La source de lumi re pour les longueurs d onde du domaine du visible et du proche infrarouge est une lampe au tungst ne faible bruit Cette lampe met de la lumi re dans la plage comprise entre 370 nm et 1100 nm e Lentille de la source La le
25. suppl mentaires d optimiser l talonnage et l analyse pour de meilleurs r sultats Cette optimisation est tr s rapide r aliser il suffit de d finir de nouveaux param tres pour la m thode Vous obtenez de nouvelles r ponses presque instantan ment Le concept d analyse mis en uvre garantit des r sultats coh rents et fiables Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Agilent 8453 Syst me de spectroscopie UV visible Manuel de l op rateur 2 Installation et d marrage R sum des instructions d installation du syst me UV visible usage g n ral Agilent 8453 36 D marrage d une session de mesures 38 Ce chapitre ne remplace pas les informations donn es dans le manuel Installation du syst me de spectroscopie UV visible Il r sume simplement les principales tapes de l installation et du d marrage du syst me ire Agilent Technologies 35 2 Installation et d marrage R sum des instructions d installation du syst me UV visible usage g n ral Agilent 8453 G n ralit s Vous trouverez une description d taill e du syst me UV visible Agilent 8453 dans le manuel Installation du syst me de spectroscopie UV visible Ce r sum rappelle les grandes lignes de l installation Spectrophotom tre ATTENTION V rifiez que la carte JetDirect a bien t install e dans le spectrophotom tre V rifiez que le spectrophotom tre est soit connect votre PC
26. sur OK pour valider vos param tres Spectrum Peaks Parameters Peak Valley find X Find and annotate up to F Find and annotate up to RP peaks valleys Prompt for sample information Data type Display spectrum From 190 Absorbance zl Prenez la cuve en quartz avec un trajet optique de 1 cm et remplissez la d eau distill e Relevez le levier sur la gauche du porte cuve Introduisez la cuve dans le porte cuve en veillant mettre les fen tres transparentes face l avant et l arri re du spectrophotom tre Rabaissez le levier pour immobiliser la cuve dans le porte cuve 6 Appuyez sur le bouton Blank sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Blank Mesure blanc dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 77 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Sampling 7 M morisez l orientation de la cuve dans le porte cuve Relevez le levier pour lib rer la cuve retirez celle ci et rincez la trois fois avec environ 1 ml de l chantillon de caf ine Puis remplissez la cuve d environ 3 ml d chantillon de caf ine V rifiez que les fen tres de la cuve sont propres et remettez la cuve dans la m me position que pour la mesure de r f rence Rabaissez le levier du porte cuve 8 Appuyez sur le bouton Sample Echant
27. tableau de bord de l instrument Sampling Manual M 2 Tapez la longueur du trajet optique en centim tres dans la bo te de dialogue Setup Manual Configuration manuelle Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Saisie de la longueur du trajet optique de la cuve Setup Manual 3 Cliquez sur OK pour valider la longueur de trajet optique indiqu e Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 81 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Commande de la pompe chantillon La pompe chantillon permet gr ce une pompe p ristaltique de transf rer un chantillon dans une cuve circulation pour effectuer la mesure Pour piloter la pompe chantillon par l interm diaire du logiciel ChemStation Agilent vous devez param trer le syst me d chantillonnage pour qu il prenne en compte la pompe chantillon D autres informations permettant de tenir compte de la longueur du tuyau du volume mort de la cuve circulation et du d bit de la pompe devront galement tre fournies Pour plus de d tails voir le manuel Installation et Jonctionnement de la pompe chantillon 1 S lectionnez Sipper Pompe chantillon dans la zone de s lection du tableau de bord de l instrument Sampling DD Multicell 7 cell Multicell 8 ce
28. 49 changeur de cuves 84 ChemStation Agilent affichage imprimante 75 aper u avant impression 73 chantillons 72 famille 23 fen tre graphique 69 m thode 62 mode 24 mot de passe 58 ouverture d une session 58 session 23 session de mesures 56 session en diff r 58 session en temps r el 57 58 station de travail 33 tableau de bord d analyse 59 76 tailles des fen tres d aper u 75 chloroforme 47 coefficient d extinction 34 commande 20 commande distance connecteur 16 compartiment chantillons 12 compos s analyser 40 comprendre traitement par la ChemStation Agilent 29 concentration 33 connecteur GPIB 17 passeur de cuves 16 RS232 16 connecteur CAN 17 connecteur d extension suppl mentaire 17 connecteur de commande distance 16 connecteur GPIO 16 101 Index connecteurs pour cartes MIO et suppl mentaires 17 connexion r seau 9 contexte 20 correction de la lumi re parasite 10 12 correction proportionnelle 26 30 courants de convection dans la solution 48 curseur de la souris 21 cuve 40 48 longueur du trajet optique 80 82 84 cuve circulation 44 cuve faces non parall les 41 cuve bouch e 48 cuve en plastique 41 cuve en quartz 41 cuve en verre 41 cuves circulation 53 cuves ouverture 42 cuves recommand es 43 cuves standard 53 cyclohexane 47 cyclopentane 47 D d charge de plasma 11 d gaz 48 d riv e 26 descrip
29. 5x UVY Visible System 1 Offline TK LES Edit Method Measure Instrument Math View Mod I Load Save Import Export Selected Spectrum s 2 S lectionnez l un de vos fichiers de donn es dans la bo te de s lection File name Nom du fichier de la bo te de dialogue Save Spectra As Enregistrer les spectres sous ou tapez un nom de fichier valide dans le champ File name Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 67 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Enregistrement et recherche de donn es Save Spectra s Paenesd DVEX8M2 5D DVEX84M3 5D ADVEXAM 4 5D ADYVEXAMS5 SD ADYVEXAM7 SD ADVEXAMS SD BENZENE SD CHROM SD Spectra SD STD c HARDDISK REMARQUE Un nom de fichier valide est compos de huit caract res alphanum riques et porte l extension sd ou std Habituellement l extension std est r serv e aux talons Si le nom de fichier existe d j un message s affiche pour vous proposer d abandonner ou de continuer l op ration en cours Save Spectra s 3 Cliquez sur OK pour lancer l op ration 68 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Enregistrement et recherche de donn es Enregistrement du spectre s lectionn 1 S lectionnez le spectre voulu dans la fen tre graphique
30. Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 Tableau 1 Limite inf rieure de propagation des UV pour quelques solvants courants Limite inf rieure Solvant 180 195 nm Acide sulfurique 96 Eau Ac tonitrile 200 210 nm Cyclopentane Hexane Glyc rine 2 2 4 Trim thylpentane M thanol 210 220 nm Alcool dibutylique Alcool isopropylique Cyclohexane Ether sulfurique 245 260 nm Chloroforme Ac tate d thyle Formiate de m thyle 265 275 nm T trachlorure de carbone Dim thylsulfoxyde Dim thylformamide Acide ac tique 280 290 nm Benz ne Tolu ne m xyl ne Au dessus de 300 nm Pyridine Ac tone Sulfure de carbone AVERTISSEMENT Beaucoup de solvants du Tableau 1 sont des produits dangereux Informez vous sur leurs propri t s avant de les employer Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 47 3 48 Bonnes pratiques de mesure Quand vous utilisez des solvants volatils comme l ac tone ou le chlorure de m thyl ne v rifiez que la cuve est bouch e L vaporation du solvant peut modifier la concentration du solut ou provoquer du bruit d des courants de convection dans la solution Dans les deux cas la pr cision des mesures sera alt r e Nous vous recommandons galement de recourir l agitation des chantillons et la r gulation de la temp rature quand vous employez des solvants volatils Quand vous utilisez de l eau comme solvant nous vous
31. Agilent 8453 ne nr Syst me de spectroscopie UV visible Manuel de l op rateur ire Agilent Technologies Avertissements Agilent Technologies Inc 2002 2003 Conform ment aux lois nationales et inter nationales relatives la propri t intellec tuelle toute reproduction totale ou partielle de ce manuel sous quelque forme que ce soit par quelque moyen que ce soit voie lectronique ou traduction est interdite sans le consentement crit pr alable de la soci t Agilent Technologies Inc R f rence du manuel 61115 93021 Edition 10 2003 Imprim en Allemagne Agilent Technologies Deutschland GmbH Hewlett Packard Strasse 8 76377 Waldbronn Microsoft est une marque de Microsoft Corporation d pos e aux Etats Unis Version du logiciel Ce manuel est destin aux versions A 10 xx du logiciel Agilent ChemStation o xx est un nombre de 00 99 d signant une version mineure du logiciel sans influence sur l exactitude technique du manuel Garantie Les informations contenues dans ce document sont fournies en l tat et pourront faire l objet de modifications sans pr avis dans les ditions ult rieures Dans les limites de la l gisla tion en vigueur Agilent exclut en outre toute garantie expresse ou implicite quant ce manuel et aux informations contenues dans ce der nier notamment mais sans s y res treindre toute garantie marchande et aptitude un but particulier En
32. E P peop permettra de suivre les performances de l instrument dans le temps Il est galement possible de g n rer des repr sentations graphiques des historiques des autotests 96 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 i Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Comment mieux comprendre le principe de la spectroscopie UV visible Les principes fondamentaux de la spectroscopie UV visible sont expliqu s dans le syst me d aide Les informations donn es dans les Bases de la spectroscopie UV Visible du didacticiel couvrent l ensemble des principes l mentaires jusqu aux informations d taill es sur la spectroscopie d riv e Help Topics Basic Operation 2 x Contents Index Find Click a topic and then click Display Or click another tab such as Index ible Spectroscopy gt Basic Principles Instrumentation The Diode Array Advantages Instrumental Specifications K 2 Accessories Making Measurements Quantitative Analysis Multicomponent Quantification Kinetics Enzyme Kinetics Thermal Denaturation Derivative Spectroscopy Aa Solving nalytical Problems Print Cancel Des r ponses des questions concernant l analyse UV visible sont galement propos es Vous y trouverez de l aide sur des probl mes telles que Tam lioration de la sensibilit ou la d termination de la puret Manuel de l op rat
33. Ni Overlaid Sample Spectra 2 S lectionnez Save Selected Spectra As Enregistrer Spectres s lectionn s sous dans le menu File Fichier Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 69 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Enregistrement et recherche de donn es 845x UV Visible System 1 Offline TK Edit Method Measure Instrument Math View Mod Load d Al m Samples s Standards As Import Selected Spectra s Export Selected Spectrum s i FA l avertissement Select activate a window S lectionnez activez une fen tre peut HAVU gt on f s afficher sur la ligne des messages si vous n avez s lectionn ni la fen tre Overlaid Sample Spectra Spectres d chantillons superpos s ni la fen tre Sample Results Table Tableau des chantillons r sultats 3 S lectionnez l un de vos fichiers de donn es dans la bo te de s lection File name Nom du fichier de la bo te de dialogue Save Spectra As Enregistrer les spectres sous ou tapez un nom de fichier valide dans le champ File name Save Spectra s File name Folders c hpchem 1 data E c E gt HPCHEM C1 caffeine sd BENZENE SD i CHROM SD 4 Save file as type Drives Spectral 5D STD c HARDDISK 7 4 Appuyez sur OK pour lancer l op ration 70 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV vis
34. R 07 4 06 05 Fj 04 2 03 2 q 02 1 0 Name bs lt 414mm gt Name bs lt 414nme 1 Sample 1 0 62494 3 Sample 3 0 10637 2 Sample 0 21158 Report generated by TK Signature 74 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Cette fen tre vous permet de consulter le rapport page page Des barres de d filement apparaissent si la page ne tient pas dans la fen tre d aper u Vous pouvez en outre changer la taille de la fen tre d aper u Trois tailles sont disponibles dans la zone de s lection Selon la r solution de votre cran s lectionnez celle qui correspond le mieux vos besoins normal LOUE Q Les fonctions accessibles partir de la fen tre d aper u avant impression sont les suivantes e Les boutons Prev et Next permettent de feuilleter le rapport vers l arri re et l avant e Une bo te de s lection permet d aller directement une page donn e e Le bouton Print Imprimer transf re le rapport vers l imprimante affich e dans l angle inf rieur gauche de la fen tre d aper u avant impression HP Laseret 5L PCL on LPT1 44 210 x 297 mm Poitrait e Le bouton Close Fermer permet de fermer la fen tre d aper u avant impression et de quitter le rapport affich Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 75
35. R 52 227 19 c 1 2 juin 1987 les droits d utilisation accord s aux d par tements et agences rattach s au Gouverne ment am ricain sont limit s aux termes de la pr sente limitation des droits Les droits d utilisation accord s au Gouvernement am ricain dans le cadre des donn es tech niques sont limit s conform ment aux directives FAR 52 227 14 juin 1987 ou DFAR 252 227 7015 b 2 novembre 1995 Mentions de s curit ATTENTION Une mention ATTENTION signale un danger Si la proc dure le pro c d ou les consignes ne sont pas ex cut s correctement le produit risque d tre endommag ou les donn es d tre perdues En pr sence d une mention ATTENTION vous devez continuer votre op ra tion uniquement si vous avez tota lement assimil et respect les conditions mentionn es AVERTISSEMENT Une mention AVERTISSEMENT signale un danger Si la proc dure le proc d ou les consignes ne sont pas ex cut s correcte ment les personnes risquent de s exposer des l sions graves En pr sence d une mention AVERTISSEMENT vous devez con tinuer votre op ration uniquement si vous avez totalement assimil et respect les conditions men tionn es Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Dans ce manuel Pour vous permettre d utiliser rapidement votre nouveau syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 nous vous indiquons les proc dures d
36. Z T zone chantillons ouverte 40 zone active 21 tableau de bord 20 tableau de bord d analyse 20 94 tableau de bord de l instrument 21 tableau des chantillons r sultats 61 69 78 t che analyse quantitative 87 longueur d onde fixe 25 26 59 primaut 26 quantification 25 28 87 ratio quation 25 28 31 spectre pics 25 27 t che analytique 25 t che en cours 22 temps r el 23 test de d bit 83 t trachlorure de carbone 47 tolu ne 47 traitement 29 talons 32 spectres 30 traitement des spectres 31 transmission 26 travaux de routine 62 trim thylpentane 2 2 4 trim thylpentane 47 trouver les pics 77 trouver les vall es 77 V v rification des performances 94 volume 28 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Index 105 Index 106 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 www agilent com Dans ce manuel Pour vous permettre d utiliser rapidement votre nouveau syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 nous vous indiquons les proc dures d taill es accompagn es d exemples d op rations et de t ches l mentaires Agilent Technologies Deutschland GmbH 2002 2003 Imprim en Allemagne 10 2003 3021 ng pe Agilent Technologies
37. anche l op rateur peut d finir ses propres param tres Dans ce cas cette information est indiqu e dans la barre d outils et appara t sur les rapports imprim s Modes du logiciel ChemStation Les modes du logiciel ChemStation sont orient s application Chaque mode a son propre menu ses tableaux de bord ses op rations et ses vues Le logiciel de spectroscopie UV visible usage g n ral est une plate forme qui supporte tous les modes On distingue le mode Standard le mode Execute Advanced Method Ex cuter une m thode avanc e et le mode Verification and Diagnostics V rification et diagnostics Mode Standard Standard Advanced Kinetics Thermal Denaturation Dissolution Testing Multibath Dissolution Testing Combined Report Color Calculations Verification and Diagnostics Selon vos besoins ces modes sont disponibles pour les op rations en mode Advanced Avanc l ex cution de tests de dissolution et de tests de dissolution multibains l valuation de rapports combin s les mesures de cin tique les tudes de d naturation thermique et les calculs de couleurs Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Il est possible de changer de mode de fonctionnement en cours de session ChemStation Agilent Lorsque vous changez de mode toutes les donn es brutes courantes sont conserv es ce qui vous permet de traiter vos donn es de diff rentes fa ons
38. cer le passeur de cuves Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 85 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du passeur de cuves Multicell Transport Control cell 8 cell LE jlz ia J a Home m Dans une s quence automatis e le passeur de cuves peut tre utilis pour introduire REMARQUE q P P E automatiquement les chantillons Vous pouvez introduire jusqu huit chantillons Si vous sp cifiez plus de huit mesures un message d avertissement s affiche Automation Vous pouvez aussi piloter un passeur de cuves sept positions Les principales diff rences sont que vous ne pouvez pas indiquer de position de r f rence distincte et qu il y a une position de moins 86 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Analyse quantitative avec des talons Une analyse quantitative repose sur un talonnage avec des talons Apr s un talonnage r ussi les talons mesur s peuvent tre int gr s dans une m thode Celle ci pourra tre employ e directement pour l analyse quantitative des chantillons Apr s avoir mis votre m thode au point vous pouvez effectuer des analyses d chantillons talonn s Vous pouvez afficher plusieurs vues de vos talons et de l talonnage ainsi que des chantillons et des r sultats
39. d une mesure de r f rence qui est utilis e pour toutes les mesures d chantillons qui suivent jusqu ce qu une nouvelle mesure blanc soit effectu e A la suite de la mesure de r f rence le spectre de la ligne de base est mesur et affich sur le PC e SAMPLE le spectrophotom tre effectue l analyse d un chantillon ou d marre une s rie de mesures selon les param tres d finis dans votre logiciel e STANDARD le spectrophotom tre mesure un talon N cessite la saisie d informations suppl mentaires notamment la concentration dans le programme d application e STOP le spectrophotom tre et ou le logiciel interrompent l activit en cours et reviennent l tat pr t Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 15 1 Pr sentation du syst me Connecteur de commande distance mas en onnecteur du passeur de cuves Connecteur GPIO Connecteur RS 232 16 Vue arri re Tous les branchements s effectuent l arri re du spectrophotom tre voir la Figure 3 Connecteur et commutateurs GPIB Connecteur d extension pour vo 2 carte MIO Prise d alimentation secteur Deux connecteurs CAN Figure 3 Vue arri re du spectrophotom tre Le connecteur du passeur de cuves sert au branchement du c ble du passeur de cuves Le connec
40. de vue chimique la seule diff rence entre la mesure blanc et la mesure d un chantillon devrait tre la pr sence du ou des compos s analyser Pour les mesures sur des chantillons liquides le blanc doit tre une cuve que vous remplirez avec le solvant que vous avez l intention d utiliser Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 Mat riau des cuves Vous devez utiliser des cuves en quartz ou des cuves faces lat rales en quartz si vous voulez exploiter la totalit du domaine de longueur d onde de votre spectrophotom tre qui est compris entre 190 et 1100 nm Si vous avez l intention de travailler uniquement dans le domaine de la lumi re visible et ou du proche infrarouge c est dire entre 350 et 1100 nm vous pouvez utiliser des cuves en verre de bonne qualit Il existe galement des cuves en plastique jetables pour les mesures dans la gamme 400 1100 nm La qualit de ces cuves est variable et leur emploi n est g n ralement pas recommand Sp cifications optiques des cuves La pr cision des valeurs mesur es par un spectrophotom tre barrette de photodiodes est tr s sensible aux d calages spatiaux du faisceau lumineux Les cuves dont les parois oppos es ne sont pas parall les dites cuves faces non parall les provoquent un d calage spatial du faisceau lumineux voir Figure 4 Il faut donc que les parois oppos es de la cuve
41. des t ches s affiche en vert Cela signifie que votre m thode est pr te pour l analyse Task Quantification H cgo Les boutons Samples Echantillons et Standards Etalons du tableau de bord des t ches peuvent tre utilis s pour afficher la vue des chantillons ou des talons A ce stade vous pouvez aussi enregistrer votre m thode pour un usage ult rieur Voir la section Enregistrement de vos param tres en tant que m thode page 62 pour plus d informations Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 91 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Analyse 92 1 M morisez l orientation de la cuve dans le porte cuve Relevez le levier pour lib rer la cuve retirez celle ci et rincez la trois fois avec environ 1 ml d chantillon de caf ine dilution 1 pour 1 dans de l eau distill e Puis remplissez la cuve d environ 3 ml d chantillon de caf ine V rifiez que les fen tres de la cuve sont propres et remettez la cuve dans la m me position que pour la mesure de l talon Rabaissez le levier du porte cuve Appuyez sur le bouton Sample Echantillon sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Sample dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure Sample Information Name Solvent DOO O O Dilution Facto f O Comment i1 dilution of standard solution Entrez les informat
42. doit tre install et configur sur votre PC Y L adresse IP de votre spectrophotom tre doit tre configur e Si vous avez connect le spectrophotom tre directement au PC v rifiez que l application serveur d initialisation CAG est install e et d marre automatiquement quand vous allumez le PC Si vous vous connectez au spectrophotom tre par l interm diaire d un r seau local v rifiez que l administrateur du r seau a affect une adresse IP votre spectrophotom tre Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 37 2 Installation et d marrage D marrage d une session de mesures 38 Si votre spectrophotom tre est connect via un r seau il est important qu il soit reconnu par le logiciel Pour cela il faut qu une adresse IP unique soit attribu e votre spectrophotom tre au moment de la mise sous tension Cette op ration est effectu e par l application de serveur d initialisation CAG install e sur votre PC en cas de connexion directe au spectrophotom tre ou par une application serveur du r seau local en cas de connexion via le r seau local Il est donc important que l une ou l autre de ces applications soit active avant la mise sous tension du spectrophotom tre Y Allumez votre PC et d marrez le syst me d exploitation Si une imprimante est connect e au syst me allumez la Assurez vous que le serveur d initialisation CAG est op rationnel ou que vous a
43. e Thomas Klink Fie Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help ahelale tot MEN o E r 2 S lectionnez la t che Fixed Wavelength Longueur d onde fixe dans la zone de s lection du tableau de bord d analyse Analysis Panel Task Fixed Wavelengths Fixed Wayelenaths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Cliquez sur Setup Configurer dans le tableau de bord d analyse pour ouvrir la bo te de dialogue des param tres Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 59 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Mesure de l absorbance de la caf ine 273 nm Fired Wavelengths x setm 4 Tapez la longueur d onde voulue dans la section Wavelengths de la bo te de dialogue Fixed Wavelength s Parameters Param tres des longueurs d ondes fixes R glez l affichage des spectres dans une plage de longueurs d ondes comprise entre 190 et 400 nm dans la zone Display spectrum Afficher le spectre Cliquez sur OK pour valider vos param tres Fixed Wavelength s Parameters 5 Prenez la cuve en quartz avec un trajet optique de 1 cm et remplissez la d eau distill e Relevez le levier sur la gauche du porte cuve Introduisez la cuve dans le porte cuve en veillant mettre les fen tres transparentes face l avant et l arri re du spectrophotom tre Rabaissez le levier pour immobiliser la cuve dans le porte cuve
44. e elle permet non seulement une connexion directe entre le spectrophotom tre et le PC mais aussi l int gration dans un r seau d entreprise avec acc s au spectrophotom tre partir d un PC via le r seau Les t ches sont r parties entre les deux l ments de la mani re suivante le spectrophotom tre collecte et fournit au PC des donn es d absorbance qui sont trait es par le logiciel d application L affichage l valuation et le stockage des donn es sont effectu s au niveau du PC sous le contr le du logiciel che Agilent Technologies 9 1 Pr sentation du syst me Spectrophotom tre Agilent 8453 pr sentation g n rale On trouvera dans cette section une pr sentation g n rale du syst me optique ainsi que des panneaux avant et arri re du spectrophotom tre Sont galement expliqu es la structure et la composition du spectrophotom tre notamment les syst mes lectroniques et m caniques qui le composent Pr sentation du syst me optique Syst me optique La Figure 1 montre le syst me optique du spectrophotom tre La source de rayonnement combine une lampe au deut rium pour la gamme des longueurs d onde de l ultraviolet UV et une lampe au tungst ne pour le domaine de la lumi re visible et du proche infrarouge L image du filament de la lampe au tungst ne est focalis e sur l orifice de d charge de la lampe au deut rium dont l acc s par l arri re permet de combiner optiquement les deux
45. e dialogue vous demande si vous voulez REMARQUE i enregistrer ou ignorer les modifications Save Method 64 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Recherche et impression d une m thode 2 La bo te de dialogue Load Method Charger la m thode s affiche Les informations de la m thode indiqu e apparaissent dans la zone File Information Informations fichier de la bo te de dialogue Load Method x File Name Directories CAFFE INE M c hpchem 1 methods mas gt methods List Files of Type Drives Method M c HARDDISK File Information c hpchem 1 methods caffeine m METHOD Method Type Standard Fixed WaveLength Created by TK LastUpdate Date 18 10 99 Time 14 52 29 Comment My first Caffeine method absorbance at 274 nm 3 Si vous voulez charger cette m thode cliquez sur OK Chaque fois que vous changez un param tre de la m thode en cours une indication 5 appara t dans la barre d outils dans le champ des modifications Cela d clenche la fen tre de rappel voqu e plus haut Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 65 4 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Recherche et impression d une m thode 4 Pour imprimer une m thode s lectionnez Print Method Imprimer M thode dans
46. ectrophotom tre Autotest du Agilent 8453 1 V rifiez que vous tes en mode Verification and Diagnostics V rification et diagnostics Le mode est indiqu dans la barre d outils de votre session ChemStation Agilent Mode Verification and Diagnostics M Hle 2 S lectionnez la t che Self Test Autotest dans la zone de s lection du tableau de bord d analyse 94 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Comment tre s r que mon Agilent 8453 fonctionne correctement Self Test 3 S lectionnez Self Test Start Autotest D marrer dans le menu Task T che ou cliquez sur Start pour commencer l autotest Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 95 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Comment tre s r que mon Agilent 8453 fonctionne correctement Le spectrophotom tre doit tre en tat de fonctionnement stable avant le d marrage du REMARQUE Hs 9 test Si ce n est pas le cas un message d avertissement peut s afficher Lamp on time too short 4 Les r sultats de l autotest s affichent accompagn s de la mention passed ou failed r ussite chec 1 8453 Instrument Self Test Results Les r sultats de l autotest peuvent tre enregistr s dans le spectrophotom tre Cela vous REMARQU
47. egistrer vos param tres pour une session ChemStation Agilent ult rieure Il suffira de charger votre m thode pour r gler la ChemStation Agilent et refaire les mesures Une biblioth que des m thodes facilite les travaux de routine du laboratoire Supposons que les param tres courants d finissent la m thode utilis e pour analyser un chantillon de caf ine Pour pouvoir refaire cette analyse vous pouvez stocker en permanence sur le disque tous les param tres d finis Cela vous permettra de charger cette m thode sur votre syst me ou m me de la transf rer un coll gue utilisant un syst me ChemStation Agilent 1 S lectionnez Save Method As Enregistrer la m thode sous dans le menu File Fichier ou cliquez sur l ic ne correspondante 845x UV Visible System 1 Online TK HW AE Edit Method Measure Instrument Math Vie DA Load gt Save gt Import gt Export Selected Spectrum s New Method Load Method Save Method s Set Method Password Print gt Print To File gt Print Preview gt Printer Setup Exit ChemStation 62 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 arametres en ta cnregistrement de vos pi 2 Ceci fait appara tre la bo te de dialogue Save Method As Enregistrer la m thode sous Tapez le nom de la m thode dans le champ File name No
48. el ChemStation Agilent la mesure de r f rence est combin e une mesure de ligne de base La ligne de base affich e renseigne sur la qualit de la r f rence actuellement utilis e En mode absorbance les donn es doivent tre proches de 0 DO et en mode transmission elles doivent tre proches de 100 Habituellement les mesures de r f rence pour des chantillons dilu s sont effectu es avec une cuve remplie du solvant employ Ici les propri t s d absorbance de la cuve et du solvant ont en plus une influence sur les donn es de r f rence Dans les gammes de longueur d onde o le solvant ou la cuve sont absorbants le bruit du spectre de la ligne de base est lev On ne peut s attendre des donn es d chantillon fiables dans ces domaines Par cons quent de nouvelles mesures de r f rence ou blanc sont n cessaires quand e vous changez de cuve ou vous modifiez l orientation de la cuve par rapport la position de mesure e vous utilisez un solvant diff rent ou m me un lot diff rent du m me solvant e le temps qui s coule entre la mesure de r f rence et la mesure d un chantillon est trop long e la vitesse de vieillissement des lampes et d ventuels changements des conditions ambiantes peuvent avoir une influence sur les mesures dans le temps En principe la derni re mesure blanc ne doit pas remonter plus d une demi heure Manuel de l op rateur du syst me de spectroscop
49. ent n cessiter l emploi du porte cuve r glable propos en option Celui ci vous permettra de bien centrer les cuves par rapport au faisceau lumineux 54 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Agilent 8453 Syst me de spectroscopie UV visible Manuel de l op rateur 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 D marrage de votre premi re session de mesures 56 D marrage du logiciel UV visible 58 Mesure de l absorbance de la caf ine 273nm 59 Enregistrement de vos param tres en tant que m thode 62 Recherche et impression d une m thode 64 Enregistrement et recherche de donn es 67 Aper u des rapports avant impression 73 Comment trouver le maximum d absorbance de la caf ine 76 Saisie de la longueur du trajet optique de la cuve 80 Commande de la pompe chantillon 82 Utilisation du passeur de cuves 84 Analyse quantitative avec des talons 87 Comment tre s r que mon Agilent 8453 fonctionne correctement 94 Comment mieux comprendre le principe de la spectroscopie UV visible 97 Quand faut il effectuer une mesure blanc 99 Apg Agilent Technologies 55 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 D marrage de votre premi re session de mesures 1 V rifiez que votre syst me UV visible Agilent 8453 a t correctement install Pour plus de d tails sur l installation reportez vous au manuel Installation du s
50. eur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 97 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Comment mieux comprendre le principe de la spectroscopie UV visible Des exemples plus sp cifiques incluant des donn es sont fournis dans la section Exemples de l aide du mode Standard Ils peuvent servir pour utiliser le logiciel ChemStation Agilent dans les applications sp cifiques indiqu es Help Topics Basic Operation gt Installation e Basic Operation w Standard Mode Using Tasks Calibration and Quantification of a Single Component Checking the Purity of a Sample by a Ratio Calculation Confirming the Identity of a Sample by Peak Comparison and Correcting for Background Absorbance Using an Internal Reference to Improve Reproducibility Using an Internal Reference to Improve the Sensitivity of a Q Using Derivative to Emphasize Differences between Spectra Lo m Execute Advanced Method Mode Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Quand faut il effectuer une mesure blanc Les donn es de mesure acquises par votre spectrophotom tre sont ind pendantes de l instrument utilis Pour maintenir cette ind pendance il faut effectuer une mesure de r f rence Par la suite toutes les mesures sont effectu es par rapport la derni re mesure de r f rence Dans le logici
51. eut tre d sactiv e par l utilisateur logiciel ChemStation si vous voulez faire plusieurs analyses r p titives tr s rapides soit elle est automatiquement d sactiv e logiciel du bo tier de commande Compartiment chantillons Le spectrophotom tre poss de un compartiment chantillons ouvert qui facilite l acc s la cuve La conception de l optique de l instrument permet de se passer de capot Le spectrophotom tre est fourni avec un porte cuve monocuve pr install dans le compartiment chantillons Ce porte cuve peut tre remplac par le r gulateur de temp rature effet Peltier le porte cuve thermostatable le porte cuve r glable le porte cuve long trajet optique ou le passeur de cuves Tous ces porte cuve optionnels s installent dans le compartiment chantillons l aide du m me syst me de montage simple et rapide Une roue porte filtre optique peut galement tre utilis e avec le spectrophotom tre et la plupart des accessoires Spectrographe Le corps du spectrographe est en c ramique pour r duire le plus possible les effets thermiques Les principaux composants du spectrographe sont la lentille la fente le r seau et la barrette de photodiodes avec l lectronique associ e L intervalle d chantillonnage moyen de la barrette de photodiodes est de 0 9 nm dans la plage comprise entre 190 nm et 1100 nm La largeur nominale de la fente spectrale est de 1 nm Lentille du spectro
52. giciel pour obtenir la vue et les r ponses que vous voulez partir de vos donn es Ces t ches ont t d finies partir d une tude des t ches de spectroscopie UV visible les plus couramment effectu es dans les laboratoires d analyses Ces t ches taient pr c demment r alis es avec des photom tres filtre ou des spectrophotom tres balayage L avantage de votre spectrophotom tre est que par d faut la totalit du spectre UV visible de vos chantillons est disponible Les t ches ne font en fait qu offrir des vues diff rentes des donn es que vous avez recueillies Un changement de t che l int rieur du mode Standard est beaucoup plus rapide qu un changement total de mode Autre avantage de ces t ches les m thodes sont d finies l int rieur d une seule bo te de dialogue Longueur d onde fixe Task Fixed Wavelengths M La t che Longueur d onde fixe Fixed Wavelength sert tudier les donn es d chantillons mesur s six longueurs d onde diff rentes Ces donn es sont l absorbance la transmission et les d riv es premi re quatri me Gr ce aux techniques suppl mentaires d acquisition de spectres telles que la r f rence interne ou la correction proportionnelle des soustractions du bruit de fond peuvent tre effectu es Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Logiciel ChemStation Agilent usage g n
53. graphe La lentille du spectrographe est la premi re des pi ces collectivement d sign es par le terme spectrographe Elle est mont e sur le corps du spectrographe Elle refocalise le faisceau collimat une fois qu il a travers l chantillon Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 e Fente La fente est un orifice troit pratiqu dans une plaque situ e au niveau du foyer de la lentille du spectrographe Elle est exactement de la taille de l une des photodiodes de la barrette de photodiodes En limitant la taille du faisceau lumineux entrant la fente permet que chaque bande de longueurs d onde soit projet e uniquement sur la photodiode voulue e R seau Un r seau holographique concave permet de combiner la dispersion de la lumi re et l imagerie spectrale Le r seau disperse la lumi re sur la barrette de photodiodes selon un angle proportionnel la longueur d onde e Barrette de photodiodes La barrette de photodiodes est le c ur du spectrographe Il s agit d une s rie de 1024 photodiodes individuelles avec leurs circuits de commande grav s par attaque chimique sur une puce de semi conducteur Pour une plage de longueurs d onde comprise entre 190 et 1100 nm l intervalle d chantillonnage nominal est de 0 9 nm Description du spectrophotom tre Le spectrophotom tre est tr s simple d emploi Il est quip d un indicateur de m
54. ible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Enregistrement et recherche de donn es Recherche de spectres 1 S lectionnez Load Samples Charger Echantillons dans le menu File Fichier 845x UV Visible System 1 Offline TK Edt Method Measure Instument Math V Save E Standards 2 S lectionnez le fichier de donn es dans la zone de s lection File name de la bo te de dialogue Load Spectra to SAMPLES Charger les spectres dans ECHANTILLONS CE CAFFEINE SD c hpchem 1 data ADVEXAM2 SD ADYEXAM3 SD ADYEXAM 4 5D ADYEXAM5 SD ADYEXAM7 SD ADYEXAM8 SD BENZENE SD CAFFEINE SD List Files of Type Drives Spectral SD STD c H RDDISK 7 File Information c hpchem 1 data caffeine sd ISPECTRA Sample Name Caffeine 10mg L Number of Samples 1 Date 10 18 99 Time 16 15 19 Vous pouvez visualiser les informations sur les diff rents fichiers en d pla ant le curseur dans la zone de s lection des fichiers Le contenu est mis jour en fonction de la s lection en cours Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 71 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 r stromant at ranrnharnh An cnregistrement et recnercne qe donnees 3 Cliquez sur OK pour lancer l op ration Les spectres disponibles pour votre fichier de donn es sont ajout s aux fichiers qui se trouven
55. ie UV visible Agilent 8453 99 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Quand faut il effectuer une mesure blanc 100 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Index A absorbance 26 forte 57 acc s aux lampes 17 ac tate d thyle 47 ac tone 47 ac tonitrile 47 acide ac tique 47 acide sulfurique 47 acquisition date 30 heure 30 acquisition du spectre 28 ad quation du solvant 46 adresse IP 37 38 56 agitateur 50 agitation 48 alcool dibutylique 47 alcool isopropylique 47 am lioration de la sensibilit 97 analyse 62 92 analyse quantitative des chantillons 87 pr te pour l analyse 91 application sp cifique 23 autotest 94 d marrer 95 tat de fonctionnement 96 historiques 96 r sultats 96 avertissement aucun r sultat pr sent 74 barre d outils 20 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 barrette de diodes 13 33 benz ne 47 blanc 40 50 Blank bouton poussoir 15 bo te de dialogue options et informations sur la m thode 63 param tres des longueurs d ondes fixes 60 bo te de dialogue de configuration 20 bo te de dialogue des param tres 76 boutons poussoirs 15 blank 15 sample 15 standard 15 stop 15 bruit 48 C caf ine 59 calcul 33 calculs r sultats 80 CAN connecteur 17 carte MIO connecteur d extension 17 changements rapides d absorbance
56. illon sur le panneau avant du spectrophotom tre ou cliquez sur Sample dans le tableau de bord de l instrument pour lancer la proc dure de mesure 9 La vue montre le spectre de votre chantillon de caf ine Deux pics ont t trouv s marqu s et annot s avec leur longueur d onde Sous le graphe du spectre le tableau des chantillons r sultats montre la longueur d onde des pics trouv s et les valeurs d absorbance mesur es 78 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Comment trouver le maximum d absorbance de la caf ine NO verlaid Sample Spectra SEnpE Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 79 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Saisie de la longueur du trajet optique de la cuve 80 Les cuves utilis es pour les mesures sont sp cifi es avec les param tres du syst me d chantillonnage Dans les calculs quantitatifs ces param tres sont utilis s pour le calcul des r sultats Du fait de la libert de choix offerte pour la longueur du trajet optique vous devez indiquer la valeur correcte de ce param tre Ces informations sont g n ralement obtenues aupr s du fournisseur des cuves La proc dure pour indiquer la longueur du trajet optique en mode manuel de manipulation des cuves est la suivante 1 Cliquez sur Setup Configurer dans le
57. ions sur l chantillon dans la bo te de dialogue Sample Information Infos chantillon et cliquez sur OK La vue des chantillons appara t et les r sultats quantitatifs s affichent dans le tableau des chantillons r sultats Sample Result table Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Analyse quantitative avec des talons 1 Sample 1 00000 4 99900 0 26521 Pour enregistrer les donn es en vue d un usage ult rieur ou des fins de documentation REMARQUE l 9 voir la section Enregistrement et recherche de donn es page 67 pour plus d informations Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 93 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Comment tre s r que mon Agilent 8453 fonctionne correctement La qualit des donn es de mesure d pend des performances du spectrophotom tre Pour proc der une v rification compl te des performances il faut utiliser des talons externes Ces proc dures sont d crites dans le manuel Qualification op rationnelle V rification des performances des syst mes de spectroscopie UV visible Agilent 8458 Un contr le rapide sans talon peut tre effectu gr ce l autotest du mode Verification and Diagnostics V rification et diagnostics Ce test peut tre effectu apr s le d marrage du sp
58. ise sous tension d un indicateur d tat et de plusieurs boutons poussoirs Toutes les connexions lectriques s effectuent l arri re de l appareil Vue avant La Figure 2 montre la vue avant du spectrophotom tre Notez que le compartiment chantillons est ouvert Contrairement aux spectrophotom tres classiques le Agilent 8453 ne craint pas la lumi re parasite ambiante Cette zone ouverte facilite l acc s pour la manipulation des cuves et la connexion de tubes une cuve circulation ou un porte cuve thermostatable Le spectrophotom tre est livr avec un porte cuve standard monocuve Les porte cuve standard et les porte cuve suppl mentaires sont d pos s et remplac s en quelques secondes avec peu ou pas d outillage Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 13 1 Pr sentation du syst me t moin vert 14 Interrupteur de marche arr t avec Indicateur Boutons poussoirs Figure 2 Vue avant du spectrophotom tre L interrupteur de marche arr t se trouve dans la partie inf rieure gauche du spectrophotom tre Quand il est enfonc le spectrophotom tre est mis sous tension Lorsque le spectrophotom tre est sous tension l interrupteur reste enfonc et un t moin vert est allum Quand il est en position ressortie t moin vert teint le spectrophotom tre est hors tension Un indicateur d tat se trouve galement sur le panneau avant du spect
59. l application principale par exemple Agilent 845x UV visible System 1 s 845x UY Visible System 1 Offline TK Fie Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help Chaque session permet l analyse des donn es uniquement ou la commande de l instrument Les sessions de commande de l instrument sont ex cut es en temps r el Online et ne peuvent tre lanc es que comme instances uniques partir de votre PC Mais il est possible de lancer plusieurs sessions d analyse des donn es en diff r Offline Les sessions en diff r permettent d effectuer de nouveaux calculs partir de donn es enregistr es et sont utiles pour le d veloppement des m thodes d analyse Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 23 1 24 Pr sentation du syst me Niveaux de fonctionnement Les niveaux de fonctionnement niveau administrateur et niveau op rateur s appliquent tous les modes et permettent de g rer ou simplement d ex cuter une application Au niveau administrateur une m thode est g n ralement labor e et sauvegard e sur le disque Ce niveau est prot g par un mot de passe afin de garantir l int grit des m thodes pr d finies et des s quences d op rations Au niveau op rateur seul un ensemble limit de fonctions est accessible En particulier les fonctions susceptibles d affecter l int grit d une proc dure d analyse ne sont pas accessibles En rev
60. le menu File Fichier 845x UV Visible System 1 Online TK File Print Method Automaton iesus REMARQUE Pour pouvoir imprimer le rapport de m thode il faut que votre imprimante soit configur e correctement et en ligne Si votre imprimante n est pas en ligne vous avez la possibilit d afficher l aper u avant impression 66 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Enregistrement et recherche de donn es Cette section explique comment enregistrer et rechercher les donn es mesur es Ces donn es peuvent tre utilis es des fins d archivage pour laborer une m thode ult rieurement ou des fins d change avec d autres ChemStation Agilent Votre ChemStation Agilent a la possibilit de stocker et d extraire vos donn es sous un format de donn es binaires avec total de contr le extension sd std Tous les spectres en cours chantillons ou talons peuvent tre enregistr s et stock s sur le disque L enregistrement et le chargement des donn es sont possibles avec les lecteurs de disque locaux et ceux du r seau Par ailleurs il est possible de s lectionner un seul spectre sauvegarder Enregistrement des chantillons 1 S lectionnez Save Samples As Enregistrer chantillons sous dans le menu File Fichier ou cliquez sur l ic ne correspondante dans la barre d outils 84
61. lent 8453 19 1 Pr sentation du syst me Menu Fie Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help L interface classique menus dans le haut de la fen tre du logiciel ChemStation permet de commander toutes les op rations Quand vous choisissez une option dans la barre de menus une liste de commandes et de sous menus s affiche Pour effectuer une op ration il suffit de choisir une commande cliquer avec la souris ou appuyer sur la touche ENTR E Barre d outils La barre d outils situ e en dessous de la barre de menus est compos e de boutons dot s d ic nes qui permettent d acc der directement des op rations l mentaires telles que l impression de rapports de r sultats le chargement de m thodes ou l enregistrement de m thodes et de donn es Tableaux de bord Les panneaux situ s sur la gauche sont le tableau de bord d analyse et le tableau de bord de l instrument La taille et l emplacement de ces panneaux sont fixes mais d pendent de la r solution de votre moniteur La r solution minimale requise est de 600 x 800 pixels Tableau de bord d analyse Le tableau de bord d analyse donne une repr sentation graphique du contexte dans lequel vous tes en train de travailler Il permet en outre d acc der la bo te de dialogue de configuration de la t che en cours au moyen du bouton Setup Configurer 20 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr
62. lit Voir la Figure 5 pour conna tre les cuves recommand es et la Figure 6 pour conna tre celles qui ne doivent pas tre employ es avec l instrument Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 K nas S S LAA 2 Cuves en quartz Cuves en quartz avec ouvertures noircies Figure 5 Cuves recommand es Utilis es avec un passeur de cuves les cuves en quartz avec ouvertures noircies de ATTENTION p q moins de 2 mm peuvent donner des mesures de faible reproductibilit m RD LN Cuves en quartz avec ouvertures transparentes cuves fluorescence cuves en plastique Figure 6 Cuves qui ne doivent pas tre employ es avec l instrument Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 43 Bonnes pratiques de mesure Cuves circulation Nous recommandons d utiliser une pompe chantillon avec une cuve circulation pour obtenir des mesures de grande pr cision La cuve circulation vite d avoir d placer la cuve entre la mesure blanc et la mesure de l chantillon De plus la cuve peut tre rinc e fond l aide de la solution mesurer Pour des r sultats d une grande fiabilit la forme de la cuve circulation doit permettre de r duire le plus possible le pi geage des bulles et la formation de courants de convection Manipulation et e
63. ll Autosampler XY Autosampler Gilson 2217222 2 Cliquez sur Setup Configurer dans le tableau de bord de l instrument Tapez la longueur du trajet optique de la cuve circulation en centim tres et cliquez sur OK Setup Sipper Path Length 0 cm 82 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 3 Cliquez nouveau sur Setup puis sur Parameter Param tre pour afficher la bo te de dialogue Sipper Parameter Param tres de la pompe chantillon Les param tres appropri s peuvent tre d termin s gr ce la t che Flow Test Test de d bit du mode Verification and Diagnostics V rification et diagnostics Sipper Parameter Pump 20 s Pump Direction CW M Wait Time E s Sample Return 0 z Wash Time 0 s Air Segment Jo s 4 Cliquez sur OK dans la bo te de dialogue Sipper Parameter puis dans la bo te de dialogue Sipper pour valider les param tres Toute mesure lanc e en cliquant sur l un des boutons de mesure du tableau de bord de l instrument ou en appuyant sur les boutons du spectrophotom tre utilise la pompe chantillon pour introduire l chantillon La pompe chantillon est galement utilis e en cas de s quence automatis e Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 83 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 U
64. ltats e choix des solvants e pr paration d un chantillon e utilisation des filtres e agitation de l chantillon et r gulation de la temp rature e insertion des cuves dans le porte cuve cts Agilent Technologies 39 3 Bonnes pratiques de mesure Consid rations g n rales 40 Beaucoup de facteurs peuvent avoir un impact sur les r sultats des mesures Quelques uns des plus importants seront abord s Conception du spectrophotom tre Le compartiment chantillons du spectrophotom tre Agilent 8453 est ouvert Contrairement aux instruments classiques le Agilent 8453 ne craint pas la lumi re parasite ambiante Le fait que la zone chantillons soit ouverte en simplifie l acc s et facilite le branchement d un tuyau une cuve circulation ou un porte cuve thermostatable Mesures Mesure blanc r f rence et mesure d un chantillon Votre spectrophotom tre tant un instrument monofaisceau vous devez effectuer la mesure blanc avant de mesurer des chantillons Pour une plus grande pr cision des mesures la mesure de l chantillon doit tre effectu e le plus rapidement possible apr s la mesure blanc En r gle g n rale la mesure blanc doit tre renouvel e aussi souvent que possible M me dans un environnement thermiquement stable il est conseill d effectuer une mesure blanc toutes les demi heures pour tre s r d obtenir des r sultats pr cis Du point
65. m du fichier par exemple Caf ine m Cliquez sur OK pour enregistrer la m thode Save Method As 21 x File name Eolders EEE Caiteinem c hpchem 1 methods Cx Cancel 3 HPCHEM Network dh E gt methods Save file as type Drives Methoat M c HARDDISK Si vous mettez au point un grand nombre de m thodes vous pouvez s lectionner Options amp Infos dans le menu Method M thode pour ajouter du texte titre d information et simplifier l acc s aux m thodes Ceci fait appara tre la bo te de dialogue Method Options amp Information Options et informations sur la m thode Dans la zone Method Information Informations sur la m thode vous pouvez entrer un bref texte descriptif qui devient partie int grante de la m thode consid r e Method Options amp Information Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 63 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Recherche et impression d une m thode Recherche et impression d une m thode Cette section d crit comment acc der aux m thodes et imprimer un rapport de m thode 1 S lectionnez Load Method Charger une m thode dans le menu File Fichier ou cliquez sur l ic ne correspondante dans la barre d outils 845x UV Visible System 1 Online TK File za La Load Method Si la m thode en cours a t modifi e une bo te d
66. mStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale Cette section donne un aper u des l ments qui composent l interface utilisateur du logiciel ChemStation Agilent et du concept d analyse des donn es sur lequel ils reposent Elle explique comment sont trait es les donn es et quels sont les avantages pratiques de ce traitement 18 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale El ments de l interface utilisateur Le logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour spectroscopie UV visible facilite l utilisation du spectrophotom tre UV visible barrette de diodes notamment pour les op rations quotidiennes Il a t con u avec un souci de convivialit simplicit d utilisation et d apprentissage Une interface graphique permet de suivre l cran le fonctionnement et l utilisation du spectrophotom tre Elle est compos e de plusieurs l ments qui sont d crits ci apr s Commutateur de mode Nom de la m thode 7 UV Visible ChemStation Online Perm NEA Barre d outils spectrumzPeaks Psem Tableau de bord d analyse Tableau de bord de l instrument Tableau de r sultats Spectres Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agi
67. ns le tableau de bord d analyse pour ouvrir la bo te de dialogue des param tres 4 R glez la longueur d onde d analyse sur 273 nm Use wavelength tapez Caf ine comme nom de compos analys Analyte name d finissez le type de courbe d talonnage sur Linear Lin aire s lectionnez l option Concentration et choisissez mg L comme unit Unit Cochez les cases Prompt for standard information Demander les infos talon et Prompt for sample information Demander les infos chantillon S lectionnez Absorbance comme type de donn es Data type et Display spectrum From 190 nm To 340 nm Afficher le spectre entre 190 nm et 340 nm 88 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Analyse quantitative avec des talons Quantification Parameters 5 Cliquez sur OK pour valider vos param tres tes pr t effectuer des mesures REMARQUE Vous tes pr t u Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 89 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Etalonnage 1 Prenez la cuve en quartz avec un trajet optique de 1 cm et remplissez la d eau distill e Relevez le levier sur la gauche du porte cuve Placez la cuve dans le porte cuve en veillant mettre les fen tres transparentes face lavant et l arri re du spectrophotom tre Raba ssez le
68. ntille de la source collimate la lumi re mise par les deux lampes et le faisceau collimat traverse l chantillon ventuellement plac dans le compartiment chantillons e Obturateur L obturateur est commande lectrom canique Il s ouvre pour laisser passer la lumi re travers l chantillon mesurer Entre deux mesures il se ferme pour limiter le temps d exposition de l chantillon la lumi re Si la cadence de mesure est tr s lev e il peut soit rester ouvert si vous l y obligez logiciel ChemStation soit rester automatiquement ouvert logiciel du bo tier de commande portatif Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 11 1 12 Pr sentation du syst me e Filtre de correction de la lumi re parasite Dans une s quence de mesure standard les spectres d intensit de r f rence ou des chantillons sont mesur s d abord sans le filtre de correction de la lumi re parasite puis avec le filtre devant le faisceau lumineux Sans le filtre on mesure le spectre d intensit dans la totalit du domaine compris entre 190 et 1100 nm Le filtre bloque la lumi re parasite 50 420 nm Quand le filtre est en place toute lumi re mesur e au dessous de 400 nm est consid r e comme de la lumi re parasite Son intensit est soustraite du premier spectre pour donner un spectre corrig Selon le logiciel utilis soit la correction de la lumi re parasite p
69. ntretien des cuves Passivation des cuves neuves Si vous remplissez de solution d chantillon une cuve neuve non passiv e vous constaterez que des bulles d air se collent sur les fen tres de la cuve Pour viter la formation de ces bulles rincez la cuve l aide de la solution de nettoyage et de passivation r f rence 5062 8529 La proc dure de nettoyage est indiqu e sur l tiquette du flacon de la solution Nettoyage des cuves Les mati res grasses d pos es par les doigts sont des absorbeurs majeurs dans la gamme des UV et si on les laisse sur les surfaces optiques elles peuvent tre l origine de r sultats erron s Eliminez avec un chiffon doux toutes les traces de doigts et de contaminants avant d utiliser la cuve chantillon N employez que du papier optique de grande qualit r f rence 9300 0761 et ne s chez jamais l int rieur d une cuve avec du papier optique Utilisez plut t de l air comprim sec qui vite le d p t de particules de papier dans la cuve ou rincez la avec le blanc ou la solution d chantillon Toute particule en suspension dans la cuve fera d vier le faisceau lumineux et donnera des mesures spectrales de tr s mauvaise qualit Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 Toute particule en suspension fera d vier et dispersera le faisceau lumineux gt Figure 7 Particules en suspension dans une cu
70. onnue par le logiciel d application Agilent Le port GPIB n est pas utilis quand le bo tier de commande portatif du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453E est connect au spectrophotom tre Les commutateurs de configuration du port doivent cependant tre correctement positionn s pour les communications GPIB e Le connecteur d extension pour carte MIO est destin recevoir une carte d interface de r seau local e Le connecteur d extension pour carte suppl mentaire est r serv un usage ult rieur e La prise d alimentation secteur n a pas de s lecteur de tension en raison des capacit s tendues de l alimentation Pour plus d informations voir le chapitre 1 du Manuel de maintenance Caract ristiques techniques Il n y a pas de fusible accessible de l ext rieur l alimentation tant munie de fusibles lectroniques automatiques Le levier de s curit de la prise emp che la d pose du capot du spectrophotom tre quand l appareil est branch sur le secteur C t du spectrophotom tre Sur le c t droit du spectrophotom tre se trouve une porte qui permet d acc der aux lampes Cette porte en plastique cache une autre porte en m tal Deux interrupteurs de s curit ind pendants teignent automatiquement les lampes d s que la porte m tallique est ouverte Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 17 1 Pr sentation du syst me Logiciel Che
71. ours Une vue comporte une ou plusieurs fen tres distinctes Ces fen tres donnent des informations principalement sous forme de graphiques ou de tableaux Vous pouvez ainsi afficher un graphe des spectres de l chantillon mesur et un tableau avec les r sultats des calculs Les vues sont g n ralement g n r es automatiquement par la fonction ex cut e mais vous pouvez galement utiliser les commandes du menu View Vue pour s lectionner la vue qui vous int resse Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Structure du logiciel Pour des raisons de simplicit d utilisation le logiciel est divis en applications sp cifiques appel es modes Il existe en outre des niveaux de fonctionnement et une aide pour les sessions d valuation des donn es sans recours au spectrophotom tre Sessions du logiciel ChemStation Agilent Votre ChemStation Agilent appartient la famille des logiciels de commande d instruments ChemStation Agilent Une seule installation du logiciel ChemStation Agilent permet de piloter partir d un m me PC jusqu quatre instruments UV vis diff rents Chaque instrument a sa propre session Instrument 1 Instrument 2 Installation online online Qualification mn o Instrument 1 Instrument 2 UVVis offline offline Configuration Editor Quand vous d marrez une session son nom s affiche dans la barre de titre de la fen tre de
72. r du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 29 Pr sentation du syst me Traitement des spectres Longueur d onde 30 utilis e Le conteneur de donn es brutes conserve les donn es initialement acquises de la mani re sp cifi e par vos param tres d acquisition et accompagn es par exemple de la date et de l heure d acquisition ainsi que du nom de l op rateur qui a recueilli les donn es Data type Absorbance M Absorbance 1st Derivative 2nd Derivative 3rd Derivative La m thode d finit la mani re dont les donn es sont analys es La premi re tape est le traitement des spectres Les spectres de donn es brutes trait es sont transf r s automatiquement dans un second conteneur de spectres trait s Cette proc dure vous permet de consulter les r sultats de cette tape de traitement en affichant le contenu du conteneur de spectres trait s Par exemple si vous avez sp cifi comme type de donn es la d riv e premi re les spectres de la d riv e premi re de toutes vos donn es brutes seront stock s apr s l analyse dans le conteneur des spectres trait s Le type d op ration sur les spectres est d fini par les param tres de la m thode Wavelengths Use wavelength 260 nm Background three point drop line l 200 250 Fiai L tape suivante de l analyse des donn es consiste effectuer des op rations de correction de la longueur d onde et
73. rage 35 R sum des instructions d installation du syst me UV visible usage g n ral Agilent 8453 36 G n ralit s 36 Spectrophotom tre 36 PC 37 D marrage d une session de mesures 38 Bonnes pratiques de mesure 39 Consid rations g n rales 40 Conception du spectrophotom tre 40 Mesures 40 Mat riau des cuves 41 Sp cifications optiques des cuves 41 Cuves ouverture 42 Cuves circulation 44 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Sommaire Manipulation et entretien des cuves 44 Solvants 46 Pr paration des chantillons 48 Echantillons photosensibles 49 Agitation des chantillons et r gulation de la temp rature 49 Liste de contr le pour des r sultats optimaux 50 Insertion d une cuve 53 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 55 D marrage de votre premi re session de mesures 56 D marrage du logiciel UV visible 58 Mesure de l absorbance de la caf ine 273 nm 59 Enregistrement de vos param tres en tant que m thode 62 Recherche et impression d une m thode 64 Enregistrement et recherche de donn es 67 Enregistrement des chantillons 67 Enregistrement du spectre s lectionn 69 Recherche de spectres 71 Suppression des spectres en cours 72 Aper u des rapports avant impression 73 Comment trouver le maximum d absorbance de la caf ine 76 Saisie de la longueur du trajet optique de la cuve 80 Commande de la pompe chantillon 82
74. rajet optique indication 80 umi re ambiante 13 umi re parasite 13 40 correction 10 12 M manipulation des cuves 46 mauvaise lin arit 42 maximum 25 maximum d absorbance 76 menu 20 mesure blanc 56 bruit 57 chantillon 57 92 talon 90 informations chantillon 92 informations sur l talon 91 r f rence 56 mesure boutons poussoirs 15 mesures 40 mesures de grande pr cision 44 m tal porte 17 m thanol 47 Index m thode 25 29 32 33 62 aper u avant impression 66 chargement 64 chargement d une m thode 64 derni re utilis e 58 en cours 65 enregistrer la m thode sous 62 talonn e 34 87 impression 64 66 informations 65 modifi e 64 nom 63 options et information 63 param tre 29 param tres 62 rapport 64 recherche 64 stockage 62 minimum 25 mode 23 avanc 24 calculs de couleurs 24 changement 25 cin tique 24 d naturation thermique 24 dernier utilis 58 ex cuter une m thode avanc e 24 rapports combin s 24 standard 24 59 76 87 tests de dissolution 24 tests de dissolution multibains 24 v rification et diagnostics 24 94 m xyl ne 47 nettoyage des cuves 44 niveau administrateur 24 58 niveau op rateur 24 niveaux de fonctionnement 23 24 nom de l op rateur 30 nouveaux calculs 23 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 103 Index 0 obturateur 10 11 occup 38 op
75. re blanc avec de l eau montrant une bonne ligne de base Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 51 3 52 Bonnes pratiques de mesure 0 01 0 00 0 01 0 02 0 03 0 04 200 400 600 800 1000 Figure 10 Exemple d une mesure blanc avec de l eau contenant des bulles donnant une mauvaise ligne de base Si le spectre de blanc pr sente des d fauts comme ceux de la Figure 10 voir la section Solvants page 46 pour optimiser la proc dure de mesure Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Insertion d une cuve Bonnes pratiques de mesure 3 Le spectrophotom tre est livr avec le porte cuve standard monocuve que vous devez d abord installer dans le compartiment chantillons Ce porte cuve peut recevoir des cuves standard ou des cuves circulation Pour ins rer une cuve dans le porte cuve 1 Tournez le levier de verrouillage vers le haut 2 Ins rez la cuve en veillant l orienter correctement Les parois d polies non transparentes de la cuve ne doivent pas se trouver sur le trajet du faisceau lumineux Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 53 3 Bonnes pratiques de mesure 3 Immobilisez la cuve en tournant le levier de verrouillage vers le bas Les cuves circulation de faible contenance en particulier celles qui ont une ouverture de moins de 2 mm peuv
76. recommandons d utiliser de l eau de qualit UV ou CLHP afin de r duire l absorbance due aux impuret s contenues dans l eau Si vous utilisez le syst me pompe chantillonneur l eau doit tre d gaz e pour viter la formation de bulles dans la cuve circulation notamment si l eau vient d un r cipient sous pression Pr paration des chantillons La cuve doit tre rinc e trois cinq fois avec le solvant que vous comptez utiliser avant d tre remplie avec le solvant pur qui servira pour la mesure Pour liminer les restes de solvant retournez la cuve sur du papier absorbant Cette op ration r duira la contamination due aux exp riences pr c dentes Les chantillons qui contiennent des dispersions collo dales de la poussi re ou d autres particules doivent tre filtr s centrifug s ou d cant s Sinon le spectre global d att nuation de transmission d la dispersion et ou la r flexion de la lumi re masquera les informations spectrales des compos s analys s Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Bonnes pratiques de mesure 3 Echantillons photosensibles Certaines substances sont tr s photosensibles Elles se d gradent ou subissent des r actions photochimiques quand elles sont expos es la lumi re La diminution de l absorbance de l chantillon dans le temps permet de s en rendre compte facilement Emploi de filtres Les ultraviolets
77. rophotom tre il affiche diff rentes couleurs selon l tat du spectrophotom tre e Vert le spectrophotom tre est pr t pour les mesures e Vert clignotant des mesures sont en cours e Jaune le spectrophotom tre n est pas pr t il est par exemple en train d allumer une des lampes ou les deux lampes sont teintes e Rouge anomalie autrement dit chec de l un des autotests ex cut s la mise sous tension du spectrophotom tre ou erreur en cours d utilisation Dans ce cas le logiciel d application UV visible affiche un message d erreur d taill Les causes possibles sont indiqu es dans l aide en ligne et dans le chapitre 3 du Manuel de maintenance Diagnostics et recherche d anomalies Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 e Rouge clignotant anomalie au niveau du processeur du spectrophotom tre Dans la mesure o dans ce cas il n y a pas communication avec l ordinateur il n y a pas de message d erreur Vous trouverez plus d informations sur la recherche d anomalies dans l aide en ligne et le chapitre 3 du Manuel de maintenance Diagnostics et recherche d anomalies Les quatre boutons poussoirs qui se trouvent sur le panneau avant permettent de d clencher les mesures suivantes et de transmettre les donn es correspondantes l ordinateur e BLANK le spectrophotom tre effectue une mesure blanc Il s agit
78. s Vous ne pouvez lancer sur votre PC qu une seule session en temps r el mais vous pouvez lancer parall lement plusieurs sessions en diff r ce qui vous permet d optimiser les param tres de votre m thode par comparaison directe des ensembles de donn es identiques 1 Allumez votre PC votre moniteur et votre imprimante 2 D marrez le syst me d exploitation de votre PC 3 Pour lancer une session ChemStation Agilent s lectionnez Instrument 1 online pour ex cuter une session de mesures en temps r el ou Instrument 1 offline pour optimiser une m thode ou valuer des donn es en diff r 4 Entrez votre nom pour ouvrir une session sur votre ChemStation Agilent Si vous avez prot g votre niveau administrateur par un mot de passe entrez ce mot de passe Le syst me reprendra le dernier mode et la derni re m thode utilis s Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Mesure de l absorbance de la caf ine 273 nm Cette section d crit la proc dure suivre pour mesurer l chantillon de caf ine livr avec votre spectrophotom tre Cette mesure sert galement pour la qualification de l installation de votre spectrophotom tre Agilent 8453 1 V rifiez que vous tes en mode Standard Le mode actif est indiqu dans la barre d outils de votre session ChemStation Agilent LOL x 845x UY Yisible System 1 Offlin
79. soustractions du bruit de fond peuvent en outre tre effectu es L talonnage peut tre optimis dans la plage de concentrations qui vous int resse en changeant la longueur d onde utilis e Un nouvel talonnage et une nouvelle analyse sont automatiquement effectu s partir des donn es de l talon en cours Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale g g ge g p Traitement des donn es en mode Standard Traitement g n ral des donn es Bien qu il ne soit pas n cessaire de conna tre en d tails le cheminement des donn es et la fa on dont elles sont trait es pour utiliser le logiciel ChemStation il vous sera utile de comprendre comment celui ci traite vos donn es et de quelle mani re ce traitement est contr l par les param tres de votre m thode Le traitement des donn es est facile d crire en prenant un mod le de conteneur de donn es et en visualisant les op rations sur un organigramme Traitement des spectres Acc s aux donn es Evaluation des donn es Toutes les donn es de base sont r unies dans un conteneur de donn es brutes Ce conteneur est vide quand vous d marrez une session ChemStation et se remplit au fur et mesure que vous effectuez des mesures ou r cup rez des donn es dans un fichier Manuel de l op rateu
80. t d j dans le conteneur des chantillons de la ChemStation Agilent Suppression des spectres en cours 1 S lectionnez Clear Samples Effacer Echantillons dans le menu Edit Edition ou cliquez sur l ic ne de la barre d outils 845x UV Visible System 1 Offline TK Clear Eile Method Measure Instument Math View Mc il X CI Eui Cie Copy Eiri HE il Easte ika Haste Append SAIE E Ta Select All Fi Copy to Clipboard es Standards ce E Math Results AARQUE Clear Standards et Clear Math Results Effacer Etalons et Effacer R sultats math etes peuvent tre utilis s pour supprimer respectivement les talons en cours et les spectres calcul s math matiquement de la m moire de la ChemStation Agilent 72 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Apercu des rapports avant impression La fonction Print Preview Aper u avant impression vous permet de voir le rapport dans une fen tre distincte de la ChemStation Agilent en fonction des param tres de l imprimante configur e Tous les types de rapports existants peuvent tre consult s page page dans la fen tre d aper u de m me que le nombre de pages g n r es et leur mise en page Le rapport affich peut en outre tre imprim Aper u avant impression d un rapport de r sultats L aper u avant impression fonctionne de
81. taill es accompagn es d exemples d op rations et de t ches l mentaires Ce manuel ne remplace ni la documentation d taill e fournie pour l installation Installation du syst me de spectroscopie UV visible et l utilisation du logiciel Comprendre le syst me de spectroscopie UV visible ni le Manuel de maintenance 8453 1 Pr sentation du syst me Ce chapitre pr sente l instrument et le principe de fonctionnement du logiciel ChemStation 2 Installation et d marrage Ce chapitre r sume les proc dures d installation du syst me et de lancement d une session de mesures 3 Bonnes pratiques de mesure Ce chapitre indique les bonnes pratiques de mesure 4 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Ce chapitre donne tape par tape des exemples de mesures l mentaires et de t ches connexes Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 3 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Sommaire Pr sentation du syst me 9 Spectrophotom tre Agilent 8453 pr sentation g n rale 10 Pr sentation du syst me optique 10 Description du spectrophotom tre 13 Logiciel ChemStation Agilent usage g n ral pour la spectroscopie UV visible pr sentation g n rale 18 El ments de l interface utilisateur 19 Structure du logiciel 23 T ches du mode Standard 25 Traitement des donn es en mode Standard 29 Installation et d mar
82. teur GPIO General Purpose Input Output permet de commander une pompe de pr l vement et un passeur d chantillons ou d autres accessoires selon le logiciel utilis Le connecteur de commande distance s utilise avec d autres spectrophotom tres Agilent Technologies si vous voulez utiliser des fonctions telles que l arr t centralis etc Le connecteur RS 232C peut tre utilis pour piloter le spectrophotom tre partir d un ordinateur avec le logiciel appropri en pr vision Ce connecteur doit tre d fini l aide des commutateurs de configuration qui se trouvent c t du connecteur GPIB Le logiciel a besoin des pilotes appropri s pour pouvoir utiliser ce mode de communication pr vu pour une utilisation future Le port RS 232C permet de brancher l imprimante du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453E l aide d un c ble s rie parall le Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Pr sentation du syst me 1 e Le bus CAN de droite permet de brancher le bo tier de commande portatif du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453E au spectrophotom tre e Le connecteur GPIB permet de connecter le spectrophotom tre un ordinateur Le module des commutateurs de configuration 8 bits qui se trouve c t du connecteur GPIB d termine l adresse GPIB de votre spectrophotom tre Les commutateurs sont pr r gl s sur une adresse par d faut rec
83. tilisation du passeur de cuves Le passeur de cuves est un changeur de cuves qui permet de mettre automatiquement jusqu huit cuves en position de mesure Vous pouvez utiliser des cuves diff rentes pour chaque position de mesure La longueur du trajet optique peut tre sp cifi e individuellement pour chaque position de cuve Pour plus de d tails sur le passeur de cuves voir le manuel nstallation et fonctionnement du passeur de cuves 1 S lectionnez Multicell 8 cell Passeur de cuves 8 cuves dans la zone de s lection du tableau de bord de l instrument Sampling Multicell 8 cell Manual Sipper Multicell 7 cell Multicell 8 celll Autosampler XY Autosampler Gilson 2217222 2 Cliquez sur Setup Configurer dans le tableau de bord de l instrument Tapez les longueurs de trajet optique des cuves en centim tres et cliquez sur OK 84 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Setup Multicell Transport Cell Path Length TTN 3 Pour mettre une cuve en position pour la mesure suivante cliquez sur la cuve dans le tableau de bord de l instrument ou choisissez Multicell Transport Position Position du passeur de cuves dans le menu du spectrophotom tre pour ouvrir la bo te de dialogue Multicell transport Control Commande du passeur de cuves L cliquez sur l un des boutons de position pour d pla
84. tion de l instrument 13 d termination de la puret 97 d veloppement des m thodes d analyse 23 didacticiel principes l mentaires 97 principes fondamentaux de la spectroscopie UV visible 97 spectroscopie d riv e 97 diff r 23 dim thylformamide 47 dim thylsulfoxyde 47 dispersions collo dales 48 102 dispositif d chantillonnage 21 donn es 29 absorbance 87 acc s 30 31 archivage 67 chargement 67 effacer 72 effacer les talons 72 effacer les r sultats math matiques 72 enregistrement 67 enregistrement des donn es s lectionn es 69 enregistrer les chantillons sous 67 valuation 31 extension de fichier 68 format 67 informations sur les fichiers 71 nom de fichier 68 recherche 67 71 remplacement 68 stockage 67 stockage local 67 suppression 72 transfert via le r seau 67 zone de s lection des fichiers 71 donn es brutes 29 donn es brutes des spectres 34 donn es d chantillons 32 donn es hors limites 33 E eau 47 eau de qualit CLHP 48 eau de qualit UV 48 chantillon 40 51 compartiment 12 chantillon liquides 40 l ment actif 21 ensemble de param tres 25 quation 25 31 quation d finie par l utilisateur 28 talon 28 32 externe 94 talonnage 28 32 87 90 coefficients 32 courbe 28 talons 87 en cours 32 nombre 33 nombre minimum requis 33 tat 38 ther sulfurique 47 exemples 98 F
85. ve 0 01 0 00 0 01 0 02 0 03 0 04 200 400 600 800 1000 Figure 8 Spectre pris avec des particules en suspension dans le faisceau lumineux Le papier optique pour lunettes ou autres usages contient souvent des d tergents ou des lubrifiants qui peuvent fausser les mesures Dans la mesure du possible vitez de nettoyer les parois de la cuve entre la mesure blanc et la mesure de l chantillon Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 45 3 Bonnes pratiques de mesure Manipulation des cuves Placez toujours les cuves dans le m me sens pour limiter les probl mes dus un manque d uniformit Pour de meilleurs r sultats avec les microcuves laissez la cuve en place pendant toute la s quence de mesure Retirez et remplacez les solutions l aide d une pipette ou utilisez des cuves circulation ATTENTION Si vous utilisez une pipette Pasteur en verre prenez soin de ne pas toucher ou rayer les fen tres optiques de la cuve avec la pipette Solvants Le choix du solvant doit reposer principalement sur ses caract ristiques d absorbance dans le domaine de longueurs d onde voulu sur ses propri t s de solvant des compos s analyser et sur les conditions exp rimentales Le Tableau 1 donne la liste des solvants courants et la limite inf rieure de leur gamme de longueurs d onde utile 46 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible
86. vez ouvert une session sur le r seau local Mettez le spectrophotom tre sous tension et attendez que le voyant soit vert La proc dure d autotest du spectrophotom tre prend une minute environ Pour plus de d tails sur le d marrage voir le chapitre Installation et d marrage du manuel Installation du syst me de spectroscopie UV visible Pour d marrer la session de mesures cliquez sur le bouton D marrer de votre syst me d exploitation et s lectionnez Programmes HP UV Visible ChemStations spectrophotometer 1 on line Y Votre syst me est pr t d s que l indicateur bleu d tat occup dans la ligne de message s teint La premi re mesure que vous devez effectuer est une mesure de r f rence Apr s cet alignement vous pourrez commencer mesurer les donn es d absorbance et les spectres Il faut environ 15 minutes pour que les lampes se stabilisent Pour de meilleurs r sultats attendez que ce laps de temps se soit coul avant de commencer les mesures Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Agilent 8453 Syst me de spectroscopie UV visible Manuel de l op rateur 3 Bonnes pratiques de mesure Consid rations g n rales 40 Insertion d une cuve 53 Ce chapitre d crit les op rations suivantes e mesures e choix du mat riau des sp cifications optiques et du type de cuve e manipulation et entretien des cuves e liste de contr le pour obtenir de bons r su
87. yst me de spectroscopie UV visible 2 Allumez votre PC votre moniteur et votre imprimante D marrez le syst me d exploitation de votre PC V rifiez que votre serveur d initialisation est actif dans la barre des t ches de votre syst me ou que votre administrateur r seau a bien int gr votre spectrophotom tre Agilent 8453 dans le r seau local Start da a CAG Bootp Server 4 Mettez votre spectrophotom tre Agilent 8453 sous tension Un serveur d initialisation affecte une adresse IP votre spectrophotom tre Dans le cas d une installation standard c est le serveur d initialisation CAG qui ex cute cette t che 5 Lancez la session de mesures en s lectionnant Instrument 1 online dans le menu Le tableau de bord de l instrument indique l tat du spectrophotom tre et le bouton Blank est activ 6 La premi re chose faire est de mesurer une r f rence En g n ral on met en place la cuve remplie de solvant celui qui sera utilis avec l chantillon et on effectue une mesure blanc Pour lancer la mesure cliquez sur le bouton Blank du tableau de bord de l instrument ou appuyez sur le bouton Blank du spectrophotom tre 56 Manuel de l op rateur du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 Utilisation du syst me de spectroscopie UV visible Agilent 8453 4 Une mesure blanc est une mesure de r f rence associ e la mesure du spectre de la ligne de base Le spectre de la

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