Instructions for fitting Electrode Cables
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1. et Battery 1 Disposez les barri res dans les fentes de l appareil situ es 10 mm du fil de platine Assurez vous qu elles sont enfonc es aussi profond ment que possible Cela assurera une bonne tanch it et l impossibilit de toute fuite de gel Une petite quantit de Vaseline ou de graisse d tanch it en bas et sur les c t s des barri res augmentera encore la protection contre les fuites 2 Placez le s peigne s dans les fentes Chaque plaque comporte plusieurs fentes de peigne de sorte qu il est possible d utiliser plusieurs peignes Utiliser plusieurs peignes augmente le nombre d chantillons disponibles par gel mais augmente la dur e de la s paration et il faut prendre soin de v rifier que les chantillons du premier puits ne vont pas migrer dans les bandes du deuxi me puits 3 Versez avec pr cautions l agarose de fa on ne pas g n rer de bulles Toute bulle qui surviendrait peut tre liss e expuls e vers les bords du gel et dispers e par la pointe d une pipette 4 Laissez l agarose reposer en veillant ce que rien ne vienne le perturber 5 Enlevez avec pr cautions les barri res de d versement du gel et le peigne Utilisation du gel 1 M langez l chantillon charger avec le tampon d chantillon reportez vous aux solutions pour tampons d chantillon courants D habitude 3 ul de tampon d chantillon conviennent mais on peut en utiliser moins avec des volumes d chantillon de2. jusqu ce que tous les cristaux aient t dissous On le voit mieux sur un arri re plan clair Les cristaux apparaissent translucides Ils interf reront avec la migration de l chantillon s ils ne sont pas compl tement dissous Il faut refroidir le gel entre 50 C et 60 C avant de le verser LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 D versement du gel La gamme d appareils CSL Multi Sub autorise trois diff rentes m thodes de coulage de gel Barri res Flexicaster Bande traditionnelle Utilisation de plaques avec Casting Dams hors FMMSI10 Battery ou MultiSUB4 1 Placez les barri res au dessus de chaque extr mit de la plaque et disposez l ensemble sur une surface horizontale Les barri res doivent tre dispos es de fa on viter tout intervalle entre les c t s de la plaque et la fente dans les barri res Cela garantira l impossibilit de toute fuite du gel 2 Placez le s peigne s dans les fentes Chaque plaque comporte plusieurs fentes de peigne de sorte qu il est possible d utiliser plusieurs peignes Utiliser plusieurs peignes augmente le nombre d chantillons disponibles par gel mais augmente la dur e de la s paration et il faut prendre soin de v rifier que les chantillons du premier puits ne vont pas migrer dans les bandes du deuxi me puits 3 Versez avec pr cautions l agarose de fa on ne pas g n rer de bulles Toute bulle qui surviendrai
3. MODE D EMPLOI CUVES ELECTROPHORESE LN4000 MSMINI LN4100 MSMIDI LN4200 MSCHOICE LN4300 MSMAXI LN4400 MSSCREEN LN4500 FMMS10 MSCHOICEST MSBGEL MSMIDI96 MSMIDI96ST MULTISUB4 LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 PR CAUTIONS DE S CURIT BIEN UTILIS S CES APPAREILS NE POSENT AUCUN RISQUE POUR LA SANT TOUTEFOIS CES APPAREILS PEUVENT PRODUIRE DES NIVEAUX DANGEREUX D ELECTRICIT ET NE DOIVENT TRE UTILIS S QUE PAR UN PERSONNEL QUALIFI SELON LES GUIDELINES SP CIFI S DANS CE MANUEL D INSTRUCTIONS QUICONQUE D SIRE UTILISER CET QUIPEMENT DOIT LIRE ATTENTIVEMENT L INT GRALIT DE CE MANUEL IL NE FAUT JAMAIS UTILISER L APPAREIL SI LE COUVERCLE DE S CURIT N EST PAS BIEN POSITIONN L APPAREIL NE DOIT PAS TRE UTILIS S IL PR SENTE DES SIGNES DE DOMMAGES AU R SERVOIR EXTERNE OU AU COUVERCLE CES APPAREILS SONT CONFORMES AUX DIRECTIVES STATUTAIRES DE S CURIT CE 73 23 EEC DIRECTIVE BASSE TENSION IEC 1010 1 1990 plus AMENDEMENT 1 1992 EN 61010 1 1993 BS EN 61010 1 1993 LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 Guide et restrictions d utilisation e Altitude maximale 2 000 m e Gamme de temp ratures entre 4 C et 65 C e Humidit relative maximale 80 pour les temp ratures jusqu 31 C avec diminution lin aire jusqu 50 d humidit relative 40 C e Pas pour utilisation l e
4. anol alcool isopropylique bases D contamination des ribonucl ases On peut l effectuer en suivant le protocole suivant Nettoyez les appareils avec un d tergent doux comme d crit plus haut Lavez au peroxyde d hydrog ne H202 3 pendant 10 minutes Rincez avec de l eau distill e trait e 0 1 DEPC di thyl pyrocarbonate Attention Le DEPC est suspect d tre canc rig ne Prenez toujours les pr cautions n cessaires quand vous l utilisez LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 Vous pouvez aussi utiliser RNaseZAPTM Ambion Consultez les instructions d utilisation sur les cuves de gel acrylique Mise en place des cuves de gel horizontales Instructions de mise en place des c bles d lectrode hors MSBGEL 1 Notez la position du couvercle de l appareil Elle indique la bonne polarit et la bonne orientation des c bles noir est n gatif rouge est positif 2 Enlevez le couvercle de l appareil Notez que si le couvercle n est pas enlev mettre les c bles en place peut entra ner le desserrage de la prise dor e et l endommagement de l lectrode 3 Vissez les c bles dans les orifices filet s autant que possible pour qu il ne reste aucun intervalle entre le couvercle et le bord avant du raccordement de c ble 4 Remettez le couvercle en place Instructions de mise en place des guides de chargement hors FMMS10 Vous pouvez les mettre en plac
5. e pour am liorer la visibilit des puits si vous le d sirez Vous pouvez les adapter la plateforme de vinyle blanche ou l appareil lui m me 1 Amenez la plaque dans l appareil et notez la position des fentes des peignes Les chantillons courent du noir au rouge mais les plaques peuvent s utiliser l avant ou l arri re aussi assurez vous que les fentes de peigne les plus proches de l lectrode noire sont bien marqu es 2 Enlevez la plaque 3 D tachez l arri re du guide de chargement et appliquez le avec soin sur la plateforme gel L appareil est maintenant pr t l emploi LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 Pr paration de gel 1 Le tableau 1 ci dessous montre le volume de solution d agarose n cessaire pour fabriquer le gel d agarose d sir pour chaque taille de plaque de l appareil Pour un gel d agarose standard de 0 7 ajoutez 0 7 g d agarose 100 ml de solution 1x TAE ou TBE La m me solution 1x doit s utiliser dans la solution tampon de la cuve Tableau 1 Multi Sub Mini Multi Sub Midi Multi Sub Choice Multi Sub Maxi Volume de gel pour un gel de 5 mm d paisseur Plaque Volume de gel pour un gel de 5 mm d paisseur Plaque Volume de gel pour un gel de 5 mm d paisseur Plaque Volume de gel pour un gel de 5 mm d paisseur Plaque 7x7 cm 25
6. ions des solutions de colorant et ajustez le volume utilis en cons quence Il faut couvrir tout le gel NOTE On suspecte le bromure d thidium d tre canc rig ne et les pr cautions de s curit n cessaires doivent tre prises 2 D colorez le gel pendant 10 30 minutes dans l eau distill e en vous assurant que le gel est compl tement immerg 3 Rincez le gel deux fois pendant quelques secondes l eau distill e 4 Transf rez le gel sous un Transilluminateur UV 5 Les chantillons appara tront souvent sous forme de bandes claires et lumineuses quand on les photographie ou vues avec un syst me de documentation de gel Toutefois si les bandes de gel sont trop floues il faut adapter la proc dure de coloration pour r duire la d coloration S il y a trop de LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 bruit de fond il faut adapter la proc dure de coloration pour augmenter la d coloration LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09
7. le Par la m thode de la bande traditionnelle 1 Il faut utiliser une bande d autoclave ou une bande support plastique Il faut couper une longueur 5 cm plus longue que la largeur de chaque extr mit de la plaque Une longueur doit tre plac e sur une extr mit de la plaque et coller sur 1 cm l int rieur de la plaque Il faut ensuite la plier et assurer l tanch it des bords R p tez pour l autre extr mit et placez l ensemble sur une surface horizontale pour verser le gel 2 Placez le s peigne s dans les fentes Chaque plaque comporte plusieurs fentes de peigne de sorte qu il est possible d utiliser plusieurs peignes Utiliser plusieurs peignes augmente le nombre d chantillons disponibles par gel mais augmente la dur e de la s paration et il faut prendre soin de v rifier que les chantillons du premier puits ne vont pas migrer dans les bandes du deuxi me puits 3 Versez avec pr cautions l agarose de fa on ne pas g n rer de bulles Toute bulle qui surviendrait peut tre liss e expuls e vers les bords du gel et dispers e par la pointe d une pipette 4 Laissez l agarose reposer en veillant ce que rien ne vienne le perturber LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 5 Enlevez avec pr cautions les barri res de d versement du gel et le peigne et transf rez la plaque contenant le gel dans la cuve principale Versement dans les unit s Mini Rapide
8. ml 10x7 cm 85 ml 15x7 cm 52 5 ml 20x10 cm 100 ml 7x10 cm 35 ml 10x10 cm 50 ml 15x10 cm 75 ml 20x15 cm 150 ml 15x15 cm 112 5 ml 20x20 cm 200 ml 20x25 cm 250 ml Multi Sub Screen Mini Rapide Battery Plaque Volume de gel pour Volume de gel Volume de gel pour un un gel de 5 mm pour un gel de gel de 5 mm d paisseur 5 mm d paisseur d paisseur 26 x 16 cm 208 ml 40 ml 25 ml 26 x 24 cm 512 ml 26 x 32 cm 416 ml Multi Sub Midi 96 Multi Sub Midi 96 Stretch Multi Sub 4 Volume de gel pour un Volume de gel pour un gel Plaque Volume de gel pour un gel de gel de 5 mm d paisseur de 5 mm d paisseur 4x5 mm d paisseur 60 ml 120 ml 8x6cm 96 ml 8x 12 cm 192 ml 8 x 18 cm 288 ml LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 2 Versez la poudre d agarose dans une fiole conique 3 Versez la quantit appropri e de solution 1x TAE ou TBE selon le tableau ci dessus Pour pr venir l vaporation pendant les tapes de dissolution ci dessus il faut couvrir la fiole conique par du parafilm 4 Dissolvez la poudre d agarose en chauffant l agarose soit sur une plaque chauffante avec un barreau magn tique soit dans un four micro ondes Si vous utilisez un four micro ondes il faut le r gler environ 400 watt ou au r glage m dian et il faut agiter la fiole toutes les minutes Il faut chauffer la solution
9. moins de 10 ul 2 Remplissez l appareil de tampon jusqu ce que le gel soit juste plong dans le tampon Cela donnera la meilleure r solution en temps Pour am liorer la qualit LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 de r solution de l chantillon remplissez l appareil jusqu 5 mm au dessus du gel 3 Chargez les chantillons dans les puits avec des pipettes Vous pouvez utiliser des pipettes multicanales MC pour charger des chantillons avec des peignes compatibles MC Reportez vous au listing des accessoires pour les identifier 4 Placez avec soin le couvercle sur la cuve et connectez l appareil une alimentation lectrique hors CSL HBSET glissez la section de base dans la section du couvercle l appareil se lancera automatiquement 5 Typiquement on utilise les gels entre 90 et 150 volts Toutefois les tensions maximales sont indiqu es sur l tiquette de s rie de chaque appareil Il faut noter que des tensions plus fortes donnent g n ralement des r solutions plus rapides mais de moins bonne qualit de l chantillon Coloration et visualisation du gel Les plaques Multi Sub et l appareil Mini Fast permettent d effectuer une coloration sans enlever le gel de la plaque pour Fast Mini si on le pr f re 1 Transf rez le gel dans un r cipient contenant le volume appropri de 0 5 ug ml de bromure d thidium pour 15 30 minutes Reportez vous aux concentrat
10. t peut tre liss e expuls e vers les bords du gel et dispers e par la pointe d une pipette 4 Laissez l agarose reposer en veillant ce que rien ne vienne le perturber 5 Enlevez avec pr cautions les barri res de d versement du gel et le peigne et transf rez la plaque contenant le gel dans la cuve principale Utilisation du Flexicaster 1 Assurez l horizontalit de la base du Flexicaster en r glant les pieds de fa on que la bulle soit exactement au centre LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 2 Ins rez la plaque de longueur d sir e dans le Flexicaster de fa on qu une extr mit de la plaque soit pouss e et assure l tanch it tout contre le coussinet de silicone de l extr mit permanente du Flexicaster 3 Positionnez l extr mit mobile du Flexicaster de fa on que le coussinet de silicone soit pouss contre l autre extr mit de la plaque 4 Tournez la came pour que le coussinet en silicone assure l tanch it sur le c t de la plaque Versez avec pr cautions l agarose de fa on ne pas g n rer de bulles Toute bulle qui surviendrait peut tre liss e expuls e vers les bords du gel et dispers e par la pointe d une pipette 5 Laissez l agarose reposer en veillant ce que rien ne vienne le perturber 6 Enlevez avec pr cautions les barri res de d versement du gel et le peigne et transf rez la plaque contenant le gel dans la cuve principa
11. xt rieur Cet appareil est class DEGR DE POLLUTION 2 selon la norme IEC 664 Le DEGR DE POLLUTION 2 sp cifie que Normalement il ne survient qu une pollution non conductrice A l occasion toutefois il faut s attendre une conductivit temporaire caus e par de la condensation LABO MODERNE 37 rue DOMBASLE 75015 PARIS T l 01 42 50 50 50 Fax 01 45 32 01 09 Entretien et Maintenance Nettoyage des unit s horizontales Les appareils se nettoient au mieux l eau ti de avec un d tergent doux L eau au dessus de 600 C peut endommager l appareil et ses composants La cuve doit tre rinc e fond l eau ti de ou l eau distill e pour pr venir la formation de sels mais 1 faut prendre soin de ne pas endommager l lectrode incluse et un nettoyage vigoureux n est ni n cessaire ni conseill On pr f rera un s chage l air avant utilisation Les appareils ne doivent tre nettoy s qu avec les produits suivants De l eau ti de avec une faible concentration de savon ou d un autre d tergent doux Les d tergents compatibles incluent le liquide de vaisselle l hexane et les hydrocarbures aliphatiques Les appareils ne doivent pas tre expos s aux d tergents plus de 30 minutes Les appareils ne doivent jamais entrer en contact avec les agents nettoyants suivants ils provoqueraient des dommages irr versibles et cumulatifs ac tone ph nol chloroforme t trachlorom thane m thanol th
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