Biermer Atrophic Gastritis DOT
Contents
1. TETE CN OO 0 0 0 QG 0 0 Les bandelettes doivent tre ins r es manuellement dans le peigne pr vu cet effet avant de d marrer le test automatis cf Pr paration du test pt 8 1 4 Durant cette op ration veiller ne pas toucher directement avec les doigts les membranes de nitrocellulose Veiller porter des gants de laboratoire et manipuler les bandelettes par leur support en plastique porte bandelettes Description des CARTOUCHES DE REACTIFS cf image page 1 Les cartouches de r actifs sont compos es de 7 puits diff rents remplis de r actifs pr ts l emploi Les cartouches sont scell es et les r actifs herm tiquement s par s au moyen d un film d aluminium qui doit tre enlev avant de d marrer le test Une fois ouverte veiller manipuler les cartouches avec pr caution de mani re viter la perte de r actifs ou une contamination entre les puits La face arri re des cartouches est tiquet e au moyen d un code alphanum rique et d un code barres qui permet l identification par le BlueDiver Instrument du type de cartouche ainsi que du num ro de lot de celle ci Les cartouches doivent tre charg es manuellement dans le porte cartouches pr vu cet effet avant de d marrer le test automatis cf pt 8 1 10 La face avant pr sente sa base une forme triangulaire et la face arri re pr sente sa base et au sommet une forme carr e Ces formes sont utilis es pour s curiser2. l insertion des cartouches et comme leur orientation dans le porte cartouches Association BANDELETTES CARTOUCHES Les bandelettes et les cartouches d une m me trousse partagent le m me num ro de lot et doivent tre utilis es ensemble Veiller ne pas dissocier les composants d une trousse ou d associer d une mani re erron e ceux ci car le BlueDiver Instrument le d tectera comme une configuration invalide et arr tera le test Pour autant que toutes les paires bandelettes cartouches soient valides le BlueDiver Instrument peut tester diff rents types de trousses en m me temps Par contre seulement les trousses ayant le m me num ro de protocole et donc le m me temps d incubation et de s quences peuvent tre automatis es simultan ment cf le num ro de protocole indiqu page 1 sous la r f rence de la trousse 8 1 Pr paration du test Amener tous les r actifs temp rature ambiante 18 C to 25 C avant utilisation Une liste de travail soit dit e par le logiciel Dr DOT soit une liste externe pourrait faciliter le chargement correct des bandelettes cartouches et s rums de patients V rifier que le porte cartouches est bien fix dans son emplacement dans le BlueDiver Instrument V rifier que le BlueDiver Instrument est branch La liste des tapes ci dessous r sume le chargement et la pr paration du BlueDiver Instrument des bandelettes des cartouches et des s rums de patients avant le d but d
3. le Manuel Utilisateur du BlueDiver Instrument 9 Confirmer le bon alignement des bandelettes en appuyant sur le BlueDiver Instrument descend les bandelettes compl tement dans les trous de r f rence et commence la lecture des codes barres des bandelettes une fois la lecture des codes barres termin e l cran affiche Ins rer les cartouches Note si un ou plusieurs codes barres des bandelettes n est pas lu LED clignotantes aux positions non lues consulter le Manuel Utilisateur du BlueDiver Instrument 10 Ouvrir les cartouches de r actifs et les ins rer sous leur bandelette respective dans l encoche pr vue cet effet du porte cartouches 11 Confirmer l insertion des cartouches en appuyant sur Y le BlueDiver Instrument proc de la lecture des codes barres des cartouches et v rifie la bonne association avec les bandelettes une fois la lecture des codes barres termin e le nombre de bandelettes associations bandelettes cartouches valid es est affich Note dans le cas o un ou plusieurs codes barres de cartouche sont illisibles ou dans le cas d une mauvaise association bandelette cartouche LED clignotantes aux positions correspondantes consulter le Manuel Utilisateur du BlueDiver Instrument 12 Confirmer le nombre de bandelettes en appuyant sur le num ro de protocole identifi sur les codes barres est affich l cran ID protocole xx 13 Confirmer le num ro
4. possibilit de r sultats faussement positifs ou faussement n gatifs Dans cette optique un test d immunofluorescence indirecte devrait dans la mesure du possible tre r alis en parall le la d termination des auto anticorps faite avec les trousses ALPHADIA Dot pour BDI L immunofluorescence tant reconnue comme m thode de r f rence en auto immunit 3 ALPHADIA sa nv et ses distributeurs autoris s ne peuvent pas tre tenus responsables des dommages occasionn s indirectement ou cons cutivement un changement ou une modification dans le proc d indiqu L utilisation de cette trousse est r serv e uniquement un personnel technique qualifi 4 L utilisation de cette trousse est soumise au respect des Bonnes Pratiques de Laboratoires BPL et doit galement tenir compte de tous les r glements g n raux et sp cifiques li s l utilisation d une telle trousse 5 La responsabilit d ALPHADIA sa nv se limite dans tous les cas au remplacement de la trousse GARANTIE ALPHADIA sa nv d cline toute responsabilit vis vis des dommages directs indirects ou cons quents r sultant de l usage inad quat des r actifs inclus dans cette trousse Fabriqu par md ALPHADIA sa nv Avenue V sale 26 1300 Wavre BELGIQUE Tel 0032 0 10 24 26 49 Fax 0032 0 10 24 55 99 Email contact alphadia be www alphadia be Version B 03 2014
5. se lie aux complexes antig nes anticorps la surface de la membrane Apr s une tape de lavage permettant d liminer l exc s de conjugu les bandelettes sont incub es dans une solution de chromog ne substrat celle ci provoque l apparition d un produit insoluble color violet qui pr cipite sur le site de la r action enzymatique L intensit de la coloration est directement proportionnelle la quantit d anticorps pr sents dans l chantillon 3 CONTENU DE LA TROUSSE Abr viations en ordre alphab tique AP Phosphatase alcaline BCIP Bromo Chloro Indolyl Phosphate BSA albumine de s rum bovin KCI Chlorure de potassium MgCl Chlorure de magn sium MIT MethylIsoThiazolone NaCl Chlorure de sodium NaN Sodium azide NBT NitroBlue Tetrazolium TBS Tampon Tris Salin Bandelettes 3 x 8 unit s dans un porte bandelettes s cables BANDELETTE CARTOUCHE individuellement scell es dans une pochette en aluminium 4 dots sur chaque bandelette 1 contr le positif C 2 antig nes 1 contr le n gatif C Cartouche 24 unit s ayant chacune 7 puits Diluent pour Position I 1 x 1 4 ml jaune chantillon contenu H20 TBS NaCI Tween conservateur MIT colorant mulsion anti mousse Tampon de Position II III IV et VI 4 x 1 4 ml incolore lavage contenu H20 TBS NaCI Tween conservateur MIT mulsion anti mousse Conjugu Position V 1 x 1 4 mli rouge contenu H
6. 20 TBS NaCI KCI MgCL gt Aimmunoglobulines de ch vre anti IgG humaines AP conservateur MIT colorant mulsion anti mousse Substrat Position VII 1 x 1 4 ml solution jaune p le contenu H O NaN 0 05 MgCL gt TBS stabilisateur NBT NBT BCIP mulsion anti mousse Autre Papier absorbant pour s cher les cupules au bout mat riel des porte bandelettes cf 8 1 16 scell avec les bandelettes dans la pochette Manuel d Utilisation Certificat d Analyse liste des antig nes 4 MATERIEL OBLIGATOIRE NECESSAIRE MAIS NON FOURNI BlueDiver Instrument Micropipettes gants 5 CONSERVATION La trousse doit tre conserv e une temp rature entre 2 C 8 C pendant toute sa p riode de validit voir date d expiration sur la trousse Ne pas congeler Apr s ouverture de la trousse les cartouches de r actifs non utilis es doivent tre conserv es entre 2 C 8 C et l abri de la lumi re de pr f rence dans la bo te originale de la trousse Les bandelettes non utilis es doivent tre conserv es dans les pochettes en aluminium scell es et conserv es entre 2 C 8 C de pr f rence dans la bo te originale de la trousse Lorsqu ils sont conserv s correctement tous les composants de la trousse sont stables jusqu la date d expiration indiqu e 6 PRECAUTIONS Tous les r actifs sont destin s au diagnostic in vitro et une utilisation professionnelle La trousse ne peut tr
7. ALPHADIA sav DIAGNOSTIC PRODUCTS E IFU Mode d emploi AD BAGDBD p 1 of 4 Biermer Atrophic Gastritis DOT Pour Instrument BlueDiver Code AD BAGDBD BlueDiver Protocol 02 1 INDICATIONS D UTILISATION La trousse ALPHADIA Biermer Atrophic Gastritis DOT pour Instrument BlueDiver contient 24 tests Immunodot permettant la d tection des auto anticorps IgG dirig s contre les antig nes Intrinsic Factor et PCA dans le s rum humain Cette trousse est automatis e au moyen du BlueDiver Instrument Plus d informations sur le type la source des antig nes sont disponibles par l interm diaire de votre distributeur 2 PRINCIPE DU TEST Cette trousse est pr vue pour une utilisation sur l automate BlueDiver Instrument Le test est bas sur une m thode immuno enzymatique Les bandelettes sont compos es d une membrane fix e sur un support plastique sp cifique Durant l automatisation du test le BlueDiver Instrument incube les bandelettes successivement dans les puits des cartouches contenant les r actifs pr ts l emploi En r sum les bandelettes sont d abord incub es avec le s rum dilu du patient Les anticorps s ils sont pr sents dans l chantillon se lient l antig ne aux antig nes sp cifique s sur la membrane La fraction non li e est limin e par lavage dans l tape suivante Ensuite les bandelettes sont incub es avec les immunoglobulines anti IgG humaines conjugu es de la phosphatase alcaline Le conjugu
8. S 10 1 Reproductibilit Des chantillons de r f rence ont t test s pour chaque anticorps dans des s ries successives statistiquement repr sentatives tant dans un m me essai ou lors de diff rents essais afin de calculer respectivement la variation intra et inter essais Dans tous les cas les variations d intensit de coloration des dots se trouvaient dans les limites attendues et l cart type tait inf rieur 10 Les donn es d taill es sont disponibles sur demande 10 2 Sensibilit et sp cificit Des chantillons de r f rence caract ris s chantillons confirm s positifs ou n gatifs pour certains anticorps sp cifiques et ce par des laboratoires de r f rence et ou des m thodes de r f rence ont t test s en suivant les instructions du test La sensibilit et la sp cificit ont t calcul es partir des r sultats g n r s par le logiciel Dr DOT W EE IF PCA Ea vrai positif faux positif vrai positif faux positif 56 1 35 0 faux n gatif vrai n gatif faux n gatif vral n gatif 0 81 1 37 Sensibilit Sensibilit Sp cificit Sp cificit 11 LIMITES DU TEST 1 Le diagnostic ne doit pas tre tabli uniquement sur base d une seule m thode de test 2 Les r sultats doivent tre toujours interpr t s en tenant compte de l examen clinique de l historique du patient et des r sultats obtenus au moyen d autres m thodes Aucune technique utilis e seule ne peut carter la
9. ace en position centrale pour faciliter la manipulation du peigne L automate met un beep et l cran affiche Test fini S cher les bandelettes en appuyant doucement le papier absorbant la base des porte bandelettes au niveau de la petite cavit servant charger l chantillon et laisser les bandelettes s cher pendant 30 minutes avant d interpr ter les r sultats En cas d utilisation du BlueScan et du Dr DOT laisser les bandelettes r v l es attach es sur le peigne ENREGISTREMENT DES DONNEES DU TEST Le protocole du test peut tre t l charg en appuyant sur le symbole de la cl USB et en suivant les indications l cran Ins rer cl USB Ecriture cl USB Enlever cl USB Cette tape n est pas obligatoire mais fortement recommand e pour tablir la tra abilit et r pondre certaines exigences r glementaires 9 INTERPRETATION DES RESULTATS Une interpr tation visuelle des r sultats est possible cependant l utilisation du logiciel Dr DOT et du BlueScan est g n ralement recommand e pour plus de pr cision et pour une interpr tation semi quantitative Pour plus d informations sur le logiciel Dr DOT contacter le distributeur 9 1 Interpr tation 1 Enlever le peigne de l automate BlueDiver Instrument et enlever les porte bandelettes du peigne 2 D poser les porte bandelettes avec la face r active des bandelettes vers le haut sur la feuille d interpr tation fournie avec la trousse Cette
10. de protocole en appuyant sur Y Fermer le capot svp est affich l cran 14 Fermer le capot du BlueDiver Instrument et confirmer la fermeture en appuyant surW le BlueDiver Instrument r alise un premier lavage pr traitement en incubant les bandelettes dans le 2 puits des cartouches Etape de lavage 1 minute A la fin de cette tape l cran affiche Ouvrir le capot svp 15 Ouvrir le capot du BlueDiver Instrument et confirmer l ouverture en appuyant sur le bras horizontal se d place alors automatiquement vers l avant de la machine et pr sente les bandelettes l utilisateur l cran affiche S cher les bandelettes 16 S cher les bandelettes en appuyant doucement le papier absorbant la base des porte bandelettes au niveau de la petite cupule servant charger l chantillon 17 Confirmer le s chage des bandelettes en appuyant sur l cran affiche D poser les chantillons 18 D poser les chantillons en ins rant 10 ul de s rum plasma de patient dans la petite cupule la base des porte bandelettes Note Alternativement les 10ul de s rum peuvent tre d pos s directement dans le diluent 1 puits de la cartouche Cette intervention peut tre r alis e n importe quel moment apr s ouverture de la cartouche voir point 8 1 10 19 Confirmer l ajout des chantillons en appuyant surW Fermer le capot svp est affich l cran 20 Fermer le capot du BlueDive
11. e utilis e que par des techniciens form s La trousse contient des composants potentiellement dangereux donc tout contact avec la peau les yeux ou les muqueuses doit tre vit Les chantillons des patients doivent tre manipul s comme s ils taient capables de transmettre des maladies infectieuses D chets les chantillons des patients et les bandelettes incub es doivent tre manipul es comme des d chets infectieux les autres r actifs ne n cessitent pas une collecte s par e moins que des directives officielles le sp cifient autrement ALPHADIA sa nv et ses distributeurs autoris s ne peuvent tre tenus responsables en cas de dommages directs ou indirects suite un changement ou une modification de la proc dure d crite Dans tous les cas les BPL doivent s appliquer l utilisation de cette trousse avec toutes les r gles g n rales ou individuelles en vigueur WASH 1 4 mL WASH 1 4 mL DIL 1 4 mL ALPHADIA S A N V DIAGNOSTIC PRODUCTS E IFU Mode d emploi AD BAGDBD p 2 of 4 7 PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS MANIPULATION ET CONSERVATION Le test doit tre utilis de pr f rence sur des chantillons r cemment pr lev s Les s rums pr sentant des particules devraient tre centrifug s faible vitesse Les chantillons de sang doivent tre recueillis dans des tubes secs ou dans des tubes contenant de l EDTA ou de l h parine Apr s s paration les chantillons s riques doivent tr
12. e utilis s imm diatement ou aliquot s et conserv s 2 8 C pendant quelques jours ou congel s 20 C pour de plus longues p riodes Eviter les cycles r p t s de cong lation d cong lation des chantillons 8 PROCEDURE DU TEST INDICATIONS PRELIMINAIRES MANIPULATION ET CONSEILS Principe de la proc dure du test Apr s l insertion manuelle des bandelettes et des cartouches de r actifs le BlueDiver Instrument r alise automatiquement les incubations et les tapes de lavage Par son mouvement continu l automate BlueDiver Instrument assure une circulation efficace des r actifs pr ts l emploi sur la bandelette Toute la proc dure du test doit tre effectu e temp rature ambiante Description des BANDELETTES La face r active avant des bandelettes contient les La face non r active arri re des bandelettes contient antig nes qui apparaissent sous forme de dots l g rement la fois un code alphanum rique et un code barres color s en bleu Cette coloration garantit que tous les antig nes permettant l identification par le BlueDiver Instrument du ont t correctement adsorb s sur la membrane Elle dispara t type de bandelette et du num ro de lot du test pendant la premi re tape de la proc dure La face avant affiche galement un num ro de bandelette et un code barres deux dimensions permettant la tra abilit des bandelettes une fois sorties du BlueDiver Instrument la fin du test
13. elettes Tout mauvais alignement doit tre corrig en sortant les bandelettes du peigne et en les ins rant nouveau Des r sidus plastiques peuvent se former lors de la s paration des bandelettes et provoquer des d calages sur le peigne pour viter des probl mes lors de la r alisation des tests sur le BDI ou lors de la lecture avec le logiciel Dr DOT ceux ci doivent tre limin s avec une simple paire de ciseaux ALPHADIA S A N V DIAGNOSTIC PRODUCTS E IFU Mode d emploi AD BAGDBD p 3 of 4 5 Replacer le peigne dans son emplacement sur le bras vertical du BlueDiver Instrument en poussant l g rement vers le bas p S lectionner le nombre de bandelettes charg es sur le peigne en utilisant les fl ches haut et bas sur l cran tactile 7 Confirmer le nombre de bandelettes charg es en appuyant sur le bras horizontal se d place alors automatiquement vers l arri re de la machine et se positionne au dessus des trous de r f rence du porte cartouches V rifier alignement est affich l cran 8 Utiliser la fonction Pas Pas pour v rifier l alignement correct des bandelettes maintenir une l g re pression sur la fl che bas jusqu ce que les porte bandelettes entrent dans les trous de r f rence Si l alignement est correct les bandelettes ne touchent pas le bord des trous de r f rence Note en cas de mauvais alignement contact des bandelettes avec le porte cartouches consulter
14. feuille d interpr tation permet de d terminer la position des diff rents contr les et des antig nes sur la bandelette 3 Le dot sup rieur Contr le positif doit toujours tre positif color pour tous les chantillons La coloration de ce contr le positif garantit que le test a t r alis correctement et que les composants de la trousse ne sont pas d grad s ALPHADIA sav DIAGNOSTIC PRODUCTS E IFU Mode d emploi AD BAGDBD p 4 of 4 4 Comparer les dots antig nes avec le contr le n gatif toujours situ en derni re position L intensit de la couleur des dots antig nes est directement proportionnelle la concentration de l anticorps sp cifique dans l chantillon du patient Dans des conditions optimales et si l chantillon est d pourvu de substances interf rentes le contr le n gatif est presque incolore Au contraire un contr le n gatif plus color indique un taux important de liaisons non sp cifiques dans l chantillon RESULTAT POSITIF Un chantillon est positif pour un anticorps sp cifique si l intensit de la couleur du dot antig ne correspondant est sup rieure l intensit de la couleur du dot Contr le N gatif RESULTAT NEGATIF Un chantillon est n gatif pour un anticorps sp cifique si l intensit de la couleur du dot antig ne correspondant est inf rieure ou gale l intensit de la couleur du dot Contr le N gatif Note Une interpr tation visuelle peut tre diffic
15. ile pour les dots antig nes dont l intensit de coloration est tr s faible et tr s proche de l intensit du Contr le N gatif Dans de tels cas l utilisation du syst me Dr DOT BlueScan peut tre avantageuse voir 9 2 et permettre une interpr tation plus pr cise 2 Utilisation du logiciel Dr DOT et du BlueScan Enlever le peigne du BlueDiver Instrument et laisser les porte bandelettes contenant les bandelettes attach s au peigne Ins rer le peigne dans l emplacement pr vu cet effet dans le capot du scanner BlueScan Veiller introduire le peigne de telle mani re que la face r active des bandelettes soit sur la vitre du scanner 3 D marrer la num risation des bandelettes au moyen du logiciel Dr DOT Pour plus d informations concernant le logiciel Dr DOT et le BlueScan se r f rer au Manuel Utilisateur du logiciel Dr DOT Unit s arbitraires Interpr tation Des faibles concentrations d auto anticorps peuvent tre observ es chez des patients Dr DOT AU sains Pour cette raison un r sultat positif faible entre 5 et 10 UA bien que valide doit tre consid r comme quivoque Dans un tel cas il est recommand de r aliser un nouveau test du patient de pr f rence en utilisant un nouvel chantillon Si le r sultat reste quivoque quivoque apr s ce nouveau test d autres tests de diagnostic et ou clinique doivent tre utilis s pour aider d terminer le statut auto immun du patient 10 PERFORMANCE
16. r Instrument et confirmer la fermeture en appuyant sur W le BlueDiver Instrument d marre automatiquement le test en suivant les tapes d crites ci dessous Protocole 02 8 2 R alisation du test Description Les bandelettes sont incub es dans le 1 puits de la cartouche Diluent pour chantillon Une fois en contact avec le diluent l chantillon pr alablement d pos cf 9 1 18 est lib r de la petite cavit et dilu gr ce l agitation Le peigne se d place vers l avant et les bandelettes sont incub es dans le 2 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l avant et les bandelettes sont incub es dans le 3 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l avant et les bandelettes sont incub es dans le 6 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l arri re et les bandelettes sont incub es dans le D puits Conjugu Le peigne se d place vers l arri re et les bandelettes sont incub es dans le 4 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l arri re et les bandelettes sont incub es dans le 3 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l arri re et les bandelettes sont incub es dans le 2 puits Tampon de lavage Le peigne se d place vers l avant et les bandelettes sont incub es dans le 7 puits Substrat Le peigne se d place vers l arri re et les bandelettes sont incub es dans le 6 puits Tampon de lavage Une fois le test termin le peigne se d pl
17. u test Consulter le Manuel Utilisateur du BlueDiver Instrument pour des informations plus d taill es en cas de probl me 1 Allumer le BlueDiver Instrument et attendre quelques secondes jusqu ce que la date et l heure s affichent sur l cran tactile 2 Confirmer la date et l heure en appuyant sur Y l cran tactile en cas de premi re utilisation ou lors d un reset consulter le Manuel Utilisateur du BlueDiver Instrument Initialiser est affich l cran 3 Confirmer l initialisation en appuyant sur Y le bras horizontal de l automate se place automatiquement en position centrale Charger bandelettes 24 est affich 4 Veiller ne pas confirmer le nombre de bandelettes directement Enlever le peigne de son emplacement sur le bras horizontal en le soulevant doucement Ins rer les bandelettes tester tenir le peigne face num rot e vers le haut position ouverte et ins rer les bandelettes galement face num rot e r active vers le haut en introduisant la partie sup rieure des porte bandelettes langue dans l espace pr vu cet effet du peigne V rifier la bonne insertion en appliquant une l g re pression sur le porte bandelettes Notes Charger toujours partir de la position 1 du peigne c t gauche et ne pas laisser d espace vide entre les bandelettes Lorsque toutes les bandelettes sont charg es v rifier visuellement l alignement vertical horizontal et lat ral des band
Download Pdf Manuals
Related Search