Fiche technique Taq`Ozyme HS
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1. viter les cong lations d cong lations r p t es La Taq Ozyme HS n est pas adapt e pour des amplicons de plus 5 kb 6 kb en plasmide Si besoin voir la section Produits associ s COMPOSANTS 1 x 50 ul Taqg Ozyme HS 2 x 1 ml tampon de r action 5X TAMPON DE R ACTION Le tampon de r action 5X contient des dNTPs 5 mM du MgCl 15 mM ainsi que des additifs de stabilisation et des amplificateurs de PCR Sa com position est confidentielle MANUEL D UTILISATION wWww ozyme fr proto taqhs mam m PRODUITS ASSOCI S Taq Ozyme Taq Ozyme Purple Mix 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr Takara Ex Taq ou Takara LA Taq PCR gt 5 Kb Advantage GC2 Polymerase Mix jusqu 90 de GC ExactLadder DNA PreMix 100 bp Plus ExactLadder DNA PreMix 2 log ExactLadder DNA PCR PreMix dNTP PreMix 4 x 10 mM dNTP PreMix 4 x 25 mM POUR COMMANDER Www ozyme fr OZYME Parc d Activit s du Pas du lac 10 Avenue Amp re 78180 Montigny Le Bretonneux France Email commande ozyme fr T l 33 0 1 34 60 15 16 Fax 33 0 1 34 60 92 12 Pri OZYME 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr NUMERO DE FICHE TECHNIQUE OZYA002 250 0714 PRODUIT A USAGE DE RECHERCHE UNIQUEMENT 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr2. Des femmes et des hommes au service de vos recherches Taq Ozyme HS 250 unit s R F RENCE OZYAO02 250 CONCENTRATION 5 unit s ul VOLUME 50 l STOCKAGE 20 C DUR E DE VIE un an r ception dans les conditions recommand es DESCRIPTIF La Taq Ozyme HS est une Taq ADN Polym rase recombinante thermostable d marrage chaud Hot Start L enzyme est inactiv e gr ce un anticorps anti Taq permettant la pr paration du m lange r actionnel temp rature ambiante ex PCR haut d bit Cette caract ristique vite l amplification des dim res d amorces et des hy bridations non sp cifiques basse temp rature 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr Www ozyme fr Cette enzyme est fournie avec un tampon de r ac tion 5X contenant des dNTPs du MgCI des ampli ficateurs de PCR et des stabilisateurs aux concen trations optimales Les optimisations particuli res si elles peuvent tre n cessaires sont ainsi facilit es D FINITION DE L UNIT Une unit est d finie comme la quantit d enzyme qui incorpore 10 nmoles de dNTPs dans un frag ment d ADN en 30 min 74 C PROTOCOLE STANDARD Ce protocole est adapt pour une r action de 50 ul partir de matrices purifi es Les amorces ont pr f rentiellement une temp rature de fusion Tm proche de 60 C C est un point de d part pour les optimisa tions Voir les sections Optimisations et Protocol
3. es sp cifiques PCR sur colonie PCR multiplexe dans le Manuel d Utilisation en ligne Apr s d cong lation compl te de chaque r actif bien homog n iser l aide d un vortex puis centrifuger bri vement tous les r actifs avant leur utilisation 1 Les r actifs sont m lang s dans un micro tube st rile dans l ordre suivant P n LS acti Conc R actif son Eau st rile x redistill e q s p 50 yl o Amorce sens Amorce anti sens ex 20 uM 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr ERA ZYME 2 Le m lange r actionnel est vortex doucement puis centrifug bri vement pour rassembler l chan tillon au fond du tube Volume 3 Programmation du thermocycleur Tampon de r action 5X Temp rature Etape D naturation 25 35 Temps Cycles Ha Extension 72 C 5 min 1 finale Stockage 4 C variable 1 option ou Tm 5 C sur le Tm le plus bas des deux amorces si le Tm des amorces est diff rent de 60 C 1 25 unit s 50 yl Taq Ozyme HS 5 u Hl Plasmide 10 ng ADNg 200 ng ADNc non dilu lt Sul Matrice d ADN q s p quantit suffisante pour 8 aliquot d un m lange r actionnel de transcription inverse RUN SON EAN E A a RS ARS AIre voir Optimisations dans le Manuel d Utilisation Des femmes et des hommes au service de vos recherches PR CAUTIONS
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