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Source d`ions Turbo V

1. 11 Installer la SOnd 23 32 42444 suis eh LARE mama AIR a Tebal RAGE a AL RA 11 Installer la source d ions sur le spectrom tre de masse 12 Connecter le tube chantillon 12 Chapitre 3 Optimisation de la source d ions 15 Introduction de l chantillon 15 Optimiser la sonde TurbolonSpray 16 D bit et temp rature 17 Configurer le syst me 17 Ex cuter la m thode 18 D finir les conditions de d marrage 18 Optimiser la position de la sonde TurbolonSpray 18 Optimiser les param tres de la source du gaz 19 Optimiser la temp rature du chauffage turbine Turbo Heater 20 Conseils d optimisation 20 Optimiser la sonde APCI 20 Configurer le syst me 0 0 0 02222 21 Ex cuter la m thode 21 D finir les conditions de d marrage 22 Optimiser les param tres Gas 1 Gaz 1 Gas 2 Gaz 2 et Curtain Gas Flow Flux Curtain Gas 22 R
2. 42 Tester la source d ions sur les syst mes AB SCIEX TripleTOF 4600 et 5600 5600 2 2 0 20200 44 Pr parer la solution de test 45 Tester la sonde TurbolonSpray 1 444 4 45 Testerla sonde APGI 1672406422 dune te m AGR R PRA D AG AA tint 47 Appendice A Principes de fonctionnement 51 Mode TurbolonSpray upean ra EEN A a E N E TERT 51 Mode APGI 422522 00 a AE ENE E R O RNA nee do N late 53 R giond ionisationAPCl 24464600 6406060660666606 56 Appendice B Consommables et pi ces de rechange 59 Appendice C Param tres de la source et tensions 63 Param tres de la sonde TurbolonSpray p Param tres de la sonde APCI 64 Description des param tres 64 Position de la sonde 67 Composition du solvant 67 IM ACS 5277252 a 4828 du bed ee T O B SR at da rte ane bee NS dd a ane 69 Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 4 of 72 Pr sentation de la source d ions La source d ions Turbo V permet d utiliser la sonde Turbolonspray ou APCI ionisation chimique pression atmosph rique dans le m me logement de source d ions Utiliser l
3. Conseil Il est plus facile d optimiser le signal et le rapport signal bruit avec l analyse FIA ou des injections sur colonne G Tableau 3 1 Optimisation des param tres de la sonde TurbolonSpray Param tres D bit LC Plage de fonctionnement 5 ul min 200 ul min 1000 pl min 5 ul min 3000 pl min 50 pl min D bit LC 5 pl min 200 pl min 1000 pl min 5 pl min 50 pl min 3000 pl min Gaz 1 gaz 20 psi 40 psi 40 psi 60 psi 40 psi 60 psi 0 psi 90 psi n buliseur Gaz 2 gaz O psi 50 psi 50 psi O psi 90 psi chauffant Source Curtain 20 psi 20 psi 20 psi 20 50 psi Gas M Temp rature 0 C 200 C 200 C 650 C 400 C Jusqu 750 C 750 C Probe vertical 7 10 2 5 0 2 0 13 micrometer setting R glage du microm tre vertical de la sonde Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 16 sur 72 Optimisation de la source d ions Tableau 3 1 Optimisation des param tres de la sonde TurbolonSpray Suite Param tres D bit LC Plage de fonctionnement 5 ul min 200 pl min 1000 ul min 5 ul min 3000 pl min 50 pl min Probe 4 6 4 6 4 6 0 10 horizontal micrometer setting R glage du microm tre horizontal de la sonde Le r glage du microm tre horizontal optimal par rapport au centre de l ouverture de la plaque rideau correspond une distance de 1 mm de l un ou l autre c t d
4. Retirer la source d ions du spectrom tre de masse Voir Retirer la source d ions 2 Desserrer le boulon de 1 8 de pouce du tube chantillon et retirer le tube chantillon de la sonde 3 Desserrer l anneau de retenue en bronze qui fixe la sonde au logement de la source d ions 4 Tirer d licatement la sonde vers le haut de la tour viter tout contact avec la pointe de la sonde pendant son retrait 5 Mettre la sonde sur une surface propre e Remarque viter tout contact avec la pointe de la sonde pendant qu elle a est rang e Nettoyer le tube lectrode La configuration standard des sondes utilise un tube lectrode de 100 um 0 004 de diam tre int rieur Nettoyer le tube lectrode r guli rement ou en cas de d gradation des performances Cette proc dure s applique la fois aux sondes TurbolonSpray et APCI Proc der de la m me mani re pour retirer le tube lectrode en vue de son nettoyage Si le tube lectrode ne peut pas tre nettoy suivre alors cette proc dure pour le remplacer par un tube neuf Le tube lectrode est un consommable fourni avec la source d ions spectrom tre de masse avant de commencer la moindre proc dure de A AVERTISSEMENT Risque d lectrocution retirer la source d ions du maintenance distance des flammes et des tincelles et ne l utiliser que dans des hottes de ventilation pour fum es chimiques ou dans des armoires de s curit ll produit des vape
5. viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions Figure 1 3 Pi ces de la sonde APCI l ment Description 1 Capuchon d ajustement de l lectrode collier noir qui r gle l extension de la pointe de l lectrode 2 Anneau de retenue en bronze qui fixe la sonde sa tour dans le logement de la source d ions 3 Pointe de l lectrode travers laquelle les chantillons sont pulv ris s dans la zone d introduction de l chantillon de la source d ions Connexions du gaz et lectriques Les raccordements de gaz et les connexions lectriques haute tension entrent par la plaque frontale de l interface et sont raccord s en interne travers le logement de la source d ions Lorsque la source d ions est install e sur le spectrom tre de masse tous les raccordements lectriques et de gaz doivent tre en place Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 9 sur 72 Pr sentation de la source d ions Loquet de la source d ions Un loquet d sactive l alimentation haute tension du spectrom tre de masse et le syst me d vacuation de la source si Le logement de la source d ions n est pas install ou est mal install Une sonde n est pas install e Le spectrom tre de masse d tecte une anomalie au niveau du gaz Syst me d vacuation de la source AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels veiller utilis
6. un usage sp cifique et d cline toute responsabilit ou responsabilit conjointe notamment pour tout dommage indirect ou accessoire toute utilisation qu un acheteur peut faire de l quipement d crit ici ou toute cons quence r sultant de cet usage R serv exclusivement des fins de recherche Ne pas utiliser dans le cadre de proc dures de diagnostic Les marques commerciales cit es dans le pr sent document appartiennent AB Sciex Pte Ltd ou leurs propri taires respectifs AB SCIEX est utilis sous licence AB SCIEX 71 Four Valley Dr Concord Ontario Canada L4K 4V8 AB Sciex LP est certifi ISO 9001 2012 AB SCIEX Imprim au Canada REGISTERED COMPANY Table des Mati res Chapitre 1 Pr sentation de la source d ions 5 propos de la source d iONS cccccce cec ecc 5 SONAS 2 4 222 aE E a E E Ea E AE Ea EE E E a E E EE NEE EE E de 7 Sonde TurbolonSpray 0 0 222222244 7 Sonde APC NEC E ia A dam 8 Connexions du gaz et lectriques 9 Loquet de la source d ions 10 Syst me d vacuation de la source 10 Chapitre 2 Installation de la source d ions 11 Installer la source d ions 11 Pr parer l installation
7. viter la diffusion de A vapeurs nocives dans l environnement du laboratoire Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 23 sur 72 Optimisation de la source d ions e Ajuster la valeur TEM par incr ments de 50 C 100 C de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 24 sur 72 Maintenance de la source d ions Cette section d crit les proc dures de maintenance g n rale de la source d ions Pour d terminer la fr quence de nettoyage de la source d ions ou effectuer des t ches de maintenance pr ventive prendre en compte ce qui suit Compos s test s Propret des m thodes de pr paration Temps d inactivit d une sonde contenant un chantillon e Temps d ex cution global du syst me Ces facteurs peuvent affecter les performances de la source d ions auquel cas une maintenance est alors requise V rifier que la source d ions mont e est herm tiquement raccord e au spectrom tre de masse et qu il n y a aucune trace de fuite de gaz Effectuer une inspection de maintenance g n rale pour s assurer que le syst me fonctionne en toute s curit Nettoyer les composants de la source d ions r guli rement pour pr server l tat de bon fonctionnement AVERTISSEMENT Risque d incendie et de toxicit chimique tenir le m thanol distance des flammes et des tincelles et ne l utiliser que dans des hottes de
8. 60 psi 0 psi 90 psi n buliseur Gaz 2 gaz O psi 50 psi 50 psi O psi 90 psi chauffant Source Curtain 20 psi 20 psi 20 psi 20 50 psi Gas Temp rature 0 C 200 C 200 C 650 C 400 C Jusqu 750 C 750 C Probe vertical 7 10 2 5 0 2 0 13 micrometer setting R glage du microm tre vertical de la sonde Probe 4 8 4 6 4 6 0 10 horizontal micrometer setting R glage du microm tre horizontal de la sonde Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 04019 63 sur 72 Param tres de la source et tensions Tableau C 1 Optimisation des param tres de la sonde TurbolonSpray Param tre Valeurs typiques Plage de fonctionnement Les valeurs de temp rature optimales d pendent du compos et de la composition de la phase mobile un contenu hautement aqueux exige une temp rature sup rieure La valeur z ro 0 signifie qu aucune temp rature n est appliqu e Param tres de la sonde APCI Tableau C 2 Param tre d optimisation de la sonde APCI Param tre Valeur nominale Plage de fonctionnement D bit LC 1000 pl min 200 pl min 2000 pl min Gaz 2 30 psi 0 psi 90 psi Source Curtain Gas 20 psi 20 psi 50 psi Temp rature 400 C 100 C 750 C lectro n buliseur Positif 3 Positif O 5 N gatif 3 N gatifs 5 O R glage du microm tre 4 0 13 vertical La valeur de temp
9. Flux Curtain 20 Gas Temperature TEM C 700 Temp rature lonSpray Voltage Floating ISVF V 5000 Tension flottante lonSpray Param tres du compos Declustering Potential DP Potentiel 100 de d fragmentation Collision Energy CE nergie de 45 collision Param tres de r solution Q1 Resolution R solution Q1 Unit Unit 7 Cliquer sur Start D marrer ou Acquire Acqu rir pour commencer la collecte des donn es Attention Dommage potentiel sur l instrument utiliser la valeur la plus lev e possible pour le d bit Curtain Gas afin d viter de contaminer le spectrom tre de masse 8 Effectuer plusieurs injections de 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en optimisant le gaz n buliseur GS1 le gaz du chauffage turbine GS2 et le flux Curtain Gas CUR de mani re obtenir l intensit et la stabilit du signal maximales AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions 9 Optimiser l extension de la pointe de l lectrode Voir Optimisation de la source d ions page 15 10 Optimiser les positions horizontales et verticales de la sonde 11 Apr s l optimisation de la source injecter 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en s
10. gler la position de l aiguille de d charge par effet corona 22 Optimiser la position de la sonde APCI 23 Optimiser l lectro n buliseur 23 Optimiser la temp rature de la sonde APCI 23 Chapitre 4 Maintenance de la source d ions 25 Nettoyage des sondes 26 Retirer la source d ions 27 Retirer la Sonde se eieaa LUS einen men aies aude ts 28 Nettoyer le tube lectrode 2 28 Assembler les composants de la sonde 30 R gler l extension de la pointe de l lectrode 31 Remplacer l aiguille de d charge par effet corona 31 Guide de l op rateur Source d ions Turbo V D5040193 A 3 of 72 Table des Mati res Remplacer le tube chantillon 33 Chapitre 5 D pannage 4424488 meute ue ae eee es tee 35 Chapitre 6 Tests de la source d ions 39 Pr parationid s tests cierra het on den es Un anne ne d un Pie Me rt a Ua 4387 39 Tester la source d ions sur des syst mes quadripolaires triples et QTRAP 40 Tester la sonde TurbolonSpray 40 Tester la sonde APCI
11. syst mes quadripolaires triples test de la source d ions sur 40 syst mes TOF test de la source d ions sur 44 syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 test de la source d ions sur 44 T temp rature d pannage 36 effet sur la vaporisation 19 efficacit de l ionisation 66 optimisation de la sonde APCI 23 optimisation des flux de gaz 19 param tres de la sonde APCI 21 48 64 param tres de la sonde TurbolonSpray 46 test mat riel 39 sonde APCI sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 42 sonde APCI sur syst mes Triple TOF 4600 et 5600 5600 47 sonde TurbolonSpray sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 40 sonde TurbolonSpray sur syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 45 tube chantillon 6 diam tre 40 Source d ions Turbo V 71 of 72 Indice remplacement 33 tube remplacement 33 Tubes d lectrode d pannage 35 V vapeur d pannage 35 ventilation 10 volumes inertes viter 15 Source d ions Turbo V 72 of 72 Guide de l op rateur
12. Gas 2 GS2 10 Gaz 2 de la source d ions Curtain Gas flow CUR Flux 20 Curtain Gas Temperature TEM C 425 Temp rature Nebulizer Current NC 3 lectro n buliseur Param tres du compos Declustering Potential DP 100 Potentiel de d fragmentation Collision Energy CE 45 Energie de collision Param tres de r solution Q1 Resolution R solution Unit Unit Q1 7 Cliquer sur Start D marrer ou Acquire Acqu rir pour commencer la collecte des donn es Attention Dommage potentiel sur l instrument utiliser la valeur la plus lev e possible pour le d bit Curtain Gas afin d viter de contaminer le spectrom tre de masse 8 Effectuer plusieurs injections de 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en optimisant le gaz n buliseur GS1 le gaz du chauffage turbine GS2 le flux Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 48 sur 72 10 11 12 13 14 15 16 17 Tests de la source d ions Curtain Gas CUR et l lectro n buliseur NC de mani re obtenir l intensit et la stabilit du signal maximales AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions Optimiser l extension de la pointe de l lectrode Voir Opt
13. de la sonde TurbolonSpray r f 027461 Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 60 sur 72 Consommables et pi ces de rechange Figure B 3 Ensemble de la sonde APCI r f 027460 Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 61 sur 72 Consommables et pi ces de rechange AB SCIEX Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 62 sur 72 Param tres de la source et tensions C Selon la source d ions install e sur le spectrom tre de masse diff rents param tres d pendant de la source pourront tre optimis s Param tres de la sonde TurbolonSpray Letableau C 1 indique les conditions de fonctionnement recommand es pour la sonde TurbolonSpray trois d bits diff rents Pour chaque d bit le flux Curtain Gas doit tre aussi lev que possible La composition du solvant utilis pour l optimisation tait un m lange 50 50 d eau et d ac tonitrile Ces conditions repr sentent un point de d part pour l optimisation de la sonde TurbolonSpray Par un processus it ratif optimiser les param tres en utilisant l analyse des injections de flux de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible pour le compos d int r t Tableau C 1 Optimisation des param tres de la sonde TurbolonSpray Param tre Valeurs typiques Plage de fonctionnement D bit LC 5 ul min 200 pl min 1000 pl min 5 ul min 50 pl min 3000 pl min Gaz 1 gaz 20 psi 40 psi 40 psi 60 psi 40 psi
14. interm diaires qui conduisent la formation de l chantillon d ions Les ions de la polarit choisie d rivent sous l influence du champ lectrique dans le sens de la plaque rideau et travers le rideau de gaz dans l analyseur de masse L ensemble du processus de formation des ions na t essentiellement de la collision par la pression atmosph rique relativement lev e de la sonde APCI Sauf dans la proximit imm diate de la pointe de l aiguille de d charge o la force du champ lectrique est plus grande l nergie impartie un ion par le champ lectrique est faible en comparaison avec l nergie thermique de cet ion Par les collisions une distribution gale de certains ions p ex des ions en grappe d eau proton e est pr serv e Tout exc dent d nergie qu un ion peut acqu rir pendant le processus de r action ion mol cule est thermalis Par la stabilisation des collisions bon nombre des ions produits sont r par s m me si de nombreuses collisions se sont succ d La formation des ions produits et des ions r actifs est r gie par les conditions d quilibre une pression de fonctionnement atmosph rique de 760 torr Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 57 sur 72 Principes de fonctionnement La sonde APCI fonctionne comme un r acteur sans paroi car les ions qui passent de la source vers la chambre de d pression puis finalement dans le d tecteur ne sont jamais soumis des collisions ave
15. la pointe de l lectrode conform ment aux caract ristiques Voir R gler l extension de la pointe de l lectrode page 31 R gler l extension de la pointe de l lectrode R gler l extension de la pointe de l lectrode pour des performances optimales Le r glage optimal d pend des compos s La distance sur laquelle s tend la pointe de l lectrode affecte la forme du c ne de pulv risation forme qui son tour a une incidence sur la sensibilit du spectrom tre de masse AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions AVERTISSEMENT Risque de perforations manipuler le tube lectrode avec pr cautions Sa pointe est extr mement coupante e R gler le capuchon d ajustement de l lectrode noire sur le dessus de la sonde de mani re tendre ou r tracter la pointe de l lectrode La pointe de l lectrode devrait s tendre sur une distance de 0 5 1 0 mm par rapport l extr mit de la sonde comme illustr dans figure 4 2 No Figure 4 2 R glage de l extension de la pointe de l lectrode 0 5 1 mm l ment Description 1 Sonde 2 lectrode Remplacer l aiguille de d charge par effet corona Remplacer la pointe de l aiguille de d charge par effet cor
16. la relativement forte pression des gaz dans la source En cons quence le processus d ionisation donne des ions mol culaires produits principalement pour l analyse de masse dans le spectrom tre de masse R gion d ionisation APCI Les lignes inclin es dans figure A 4 indiquent un r acteur sans paroi Un courant d ions de d charge corona d marrage automatique dans la plage du microamp re est cr cons cutivement au champ lectrique entre l aiguille de d charge et la plaque rideau Les ions primaires p ex N2 et O2 sont form s par la perte d lectrons provenant du plasma proximit imm diate de la pointe de l aiguille de d charge L nergie de ces lectrons est mod r e par un certain nombre de collisions avec les mol cules de gaz avant d atteindre une nergie o leur courbe d efficacit d ionisation leur permet d ioniser efficacement des mol cules neutres La figure A 4 indique l emplacement g n ral du r acteur ion mol cule de la sonde APCI Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 56 sur 72 Principes de fonctionnement IN Ua j NT Figure A 4 R gion d ionisation APCI l ment Description 1 Pointe de l aiguille de d charge D bit de l chantillon R acteur sans paroi Ouverture de la plaque rideau Source Curtain Gas M Orifice NI A ON Plaque orifice 8 Tube en c ramique Les ions primaires leur tour g n rent des ions
17. permet d activer et de d sactiver l interface Chauffer l interface permet d optimiser le signal d ionisation et emp che la contamination des l ments optiques ioniques moins que le compos analys par l utilisateur soit extr mement fragile nous recommandons que l interface soit chauff e Avec la source d ions Turbo V la plaque de l interface est chauff e 100 C Position de la sonde La position de la sonde peut affecter la sensibilit de l analyse Pour plus informations sur la mani re d optimiser la position de la sonde voir Optimiser la sonde TurbolonSpray page 16 et Optimiser la sonde APCI page 20 Pour plus d informations sur l optimisation du spectrom tre de masse voir le guide de prise en main du logiciel Analyst Getting Started Guide ou le manuel d utilisation du syst me System User Guide Composition du solvant La concentration standard de formiate d ammonium ou d ac tate d ammonium est de 2 mmol l 10 mmol l pour les ions positifs et de 2 mmol l 50 mmol l pour les ions n gatifs La concentration d acides organiques est de 0 1 0 5 par volume pour la sonde TurbolonSpray et 0 1 2 0 en volume pour la sonde APCI Solvants courants e Ac tonitrile M thanol Propanol Eau Modificateurs courants e Acide ac tique Acide formique Formiate d ammonium Ac tate d ammonium Les modificateurs suivants ne sont pas fr quemment utilis s ca
18. rapport signal bruit et pas seulement sur le signal Optimiser la sonde APCI Attention Dommage potentiel sur l quipement si le syst me LC connect au spectrom tre de masse n est pas contr l par le logiciel d analyse ne pas laisser le Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 20 sur 72 Optimisation de la source d ions spectrom tre sans surveillance pendant son fonctionnement Le syst me LC peut d border la source d ions quand le spectrom tre de masse bascule en mode de veille Plusieurs param tres influent sur les performances de la sonde APCI Optimiser les performances tout en injectant un compos connu et en surveillant le signal de l ion reconnu Ajuster les param tres de mani re optimiser le rapport signal bruit Conseil Il est plus facile d optimiser le signal et le rapport signal bruit avec l analyse FIA ou des injections sur colonne F Tableau 3 4 Param tre d optimisation de la sonde APCI Param tre Valeur nominale Plage de fonctionnement DEbtLC 1000 p min gt 200 pl min 2000 pl min Gaz 2 30 psi O psi 90 psi Source Curtain Gas 20 psi 20 psi 50 psi Temp rature 400 C 100 C 750 C lectro n buliseur Positif 3 Positif O 5 N gatif 3 N gatifs 5 O R glage du microm tre 4 0 13 vertical La valeur de temp rature d pend du compos Configurer le syst me 1 Configurer la pompe HPLC de
19. rature optimale du chauffage turbine est d pendante des compos s du d bit et de la composition de la phase mobile Plus le d bit et la phase aqueuse sont lev s plus la temp rature est optimis e Lors de l optimisation de la temp rature de la source s assurer que la source d ions s quilibre au nouveau r glage de la temp rature e Ajuster la valeur TEM par incr ments de 50 C 100 C de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible Conseils d optimisation Utiliser la plus haute temp rature possible lors de l optimisation des compos s Une temp rature de 700 C est courante pour de nombreux compos s Des temp ratures lev es contribuent maintenir une source d ions propre et r duire le bruit de fond e Utiliser le d bit le plus grand du Curtain Gas CUR sans diminuer le signal Cela permet de e viter l incursion du flux Curtain Gas qui peut d clencher un signal bruyant e viter la contamination de l ouverture Augmenter globalement le rapport signal bruit Diriger le liquide de pulv risation de la sonde TurbolonSpray de mani re l loigner de l ouverture pour e viter la contamination de l ouverture e viter la perforation du flux Curtain Gas qui peut cr er un signal instable e viter un court circuit lectrique d la pr sence de liquide e Utiliser la plus faible tension lonSpray possible sans perte du signal Se concentrer sur le
20. sont s par s du flux liquide Cependant cette s paration est incompl te et chaque gouttelette contient de nombreux ions double polarit Les ions polarit simple sont pr dominants dans chaque gouttelette et la diff rence entre le nombre d ions charg s positivement ou n gativement donne la charge nette Seuls les ions en exc s de la polarit pr dominante sont disponibles pour leur vaporation et seule une fraction de ces ions s vapore effectivement La polarit et la concentration d ions en exc s d pendent de l amplitude et de la polarit du potentiel haute tension appliqu au niveau de l embout du pulv risateur Par exemple lorsqu un chantillon contient une solution d arginine dans de l eau et de l ac tonitrile et qu une potentialit positive est envoy e dans le pulv risateur l exc s d ions positifs sera de l arginine H et MH La sonde TurbolonSpray peut g n rer des ions charges multiples partir des compos s comportant des sites de charges multiples comme les peptides et les oligonucl otides Cela est utile lors de l observation d esp ces de haut poids mol culaire dans lesquels les charges multiples produisent des ions dont la Valeur du rapport masse charge m z est comprise dans la plage de masse du spectrom tre de masse Cela permet de d terminer le poids mol culaire de routine des compos s en kilodaltons kDa Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 51 sur 72 Princ
21. sorte qu elle distribue la phase mobile au d bit requis 2 Raccorder la jonction de mise la terre de la source d ions une pompe par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 3 En cas d utilisation d un auto chantillonneur configurer ce dernier pour l ex cution d injections multiples Ex cuter la m thode 1 Dans le logiciel Analyst en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tuning R glage manuel 2 Ouvrir une m thode optimis e pr c demment ou cr er une m thode sur la base des compos s 3 Si la source d ions a eu le temps de refroidir proc der alors comme suit i R gler le param tre Temperature TEM Temp rature TEM sur 450 ii Laisser la source d ions chauffer pendant 30 minutes au maximum La phase de r chauffement de 30 minutes vite la condensation des vapeurs de solvant dans une sonde froide D marrer l acquisition Lancer la circulation et l injection de l chantillon Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 21 sur 72 Optimisation de la source d ions D finir les conditions de d marrage 1 Dans l onglet Source Gas Source Gaz du Tune Method Editor diteur de r glage de m thode taper 0 dans le champ lon Source Gas 1 GS1 Gaz 1 de la source d ions GS1 Remarque La valeur du param tre GS1 qui est utilis par la sonde a TurbolonSpray peut affecter les perfo
22. spectrom tre de masse utilis si n cessaire Si les performances de la source d ions se sont d grad es consid rablement se reporter D pannage page 35 Apr s avoir termin les tests arr ter la pompe LC et r gler la temp rature sur 0 Tester la source d ions sur les syst mes AB SCIEX TripleTOF 4600 et 5600 5600 Remarque La source d ions recommand e pour les syst mes Triple TOF 4600 et 5600 5600 d AB SCIEX est la DuoSpray Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 44 sur 72 Tests de la source d ions Pr parer la solution de test 1 Combiner 100 ul de la solution de 0 167 pmol ul de r serpine et 900 ul du diluent standard M langer l aide d un agitateur Vortex pendant 30 secondes Il en r sulte la solution de 0 0167 pmol ul de r serpine Tester la sonde TurbolonSpray Pour plus d informations sur l installation ou l optimisation de la source d ions se reporter Installer la source d ions page 11et Optimisation de la source d ions page 15 chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance Attention Dommage potentiel sur l quipement ne pas introduire le moindre flux de solvant avant d avoir v rifi que la source d ions a atteint la temp rature correcte 1 S a
23. ventilation pour fum es chimiques ou dans des armoires de s curit Il produit des vapeurs dangereuses en cas d inhalation et susceptibles de provoquer un incendie protection personnelle un masque respiratoire dot d un filtre des gants et des lunettes de protection afin d viter toute exposition de la peau et des yeux l ac tone au m thanol et l isopropanol et ne pas ing rer ces produits chimiques AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels en cas de d versement de produits chimiques se reporter aux fiches de donn es sur la s curit des produits pour obtenir les instructions sp cifiques N arr ter l coulement ou la fuite que si cela est possible en toute s curit Utiliser un quipement de protection personnelle appropri et des tissus absorbants pour contenir le d versement et mettre au rebut conform ment aux r glementations locales A AVERTISSEMENT Risque de toxicit chimique porter un quipement de Attention Dommages potentiels sur l instrumentation utiliser uniquement les m thodes de nettoyage recommand es pour viter d endommager l quipement Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 25 sur 72 Maintenance de la source d ions Mat riel requis Cl plate 1 4 e Cl Allen 9 64 cl en forme de L fournie e Cl Allen 5 mm e Cl Allen 2 5 mm Tournevis cruciforme Tournevis plat M thano
24. 0167 pmol ul de r serpine sont acceptables Voir les Caract ristiques de la source d ions correspondant au spectrom tre de masse utilis si n cessaire 16 Si les performances de la source d ions se sont d grad es consid rablement se reporter D pannage page 35 17 Apr s avoir termin les tests arr ter la pompe LC et r gler la temp rature sur 0 Tester la sonde APCI Pour plus d informations sur l installation ou l optimisation de la source d ions se reporter Installer la source d ions page 11et Optimisation de la source d ions page 15 chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 42 sur 72 Tests de la source d ions Attention Dommage potentiel sur l quipement ne pas introduire le moindre flux de solvant avant de v rifier que la source d ions a atteint la temp rature correcte 1 S assurer que le spectrom tre de masse a t optimis l aide de la source d ions par d faut 2 Retirer toute autre source d ions install e sur le spectrom tre de masse et installer la source d ions Turbo V 3 Configurer la pompe HPLC pour distribuer 1 ml min de la phase mobile 4 Raccorder la jonction de m
25. D5040193 A dans la sonde TurbolonSpray 18 21 connexions lectriques 9 contamination viter 20 67 nettoyage des sondes 26 tampons et 8 D d bits 15 et position de la sonde APCI 23 sonde APCI 8 sonde TurbolonSpray 7 d charge par effet corona d pannage 37 pr sentation 54 56 d contamination Voir nettoyage E chantillons complexes 8 pr filtrage 15 solvants 7 sonde APCI et 7 8 temp rature 19 chantillons m thodes d introduction 15 crou du tube chantillon 6 entr e des chantillons conditions de fonc tionnement 15 tat de panne d pannage 35 tincelles d pannage 37 vaporation durant l ionisation 51 F FIA introduction de l chantillon 15 optimisation des param tres 63 sonde APCI 8 fusibles F3 d pannage 35 fusibles d pannage 35 G Gaz 1 optimisation 19 Voir aussi param tres GS1 Source d ions Turbo V 69 of 72 Indice Gaz 2 d pannage 36 optimisation 19 gaz chauffant Voir Gaz 2 gaz n buliseur Voir Gaz 1 j installation sondes 11 source d ions 11 ionisation illustration 57 processus 56 r gion 57 ionisation chimique pression atmosph rique Voir Sonde APCI J jonction de mise la terre 6 12 K kit de consommables 59 L liste des pi ces 59 loquets de source 6 M mise la terre 12 modificateurs types 67 N nettoyage sondes 26 tube lectrode 28 O optimisation courant de l
26. DS 40 solvants types 67 sonde APCI caract ristiques 7 d bits 8 illustration 9 installation 11 ionisation illustr 53 optimisation 21 param tres 67 pr sentation 53 r gion de l ionisation 56 r glage 23 solvants 23 test sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 43 utilisations pour 8 voir aussi sonde TurbolonSpray sonde TurbolonSpray caract ristiques 7 compos s labiles 7 d bits et efficacit de l ionisation 7 change 28 installation 11 ionisation illustr 51 optimisation 16 param tres 16 63 67 pr sentation 7 pulv risateur 20 r glage 18 test 41 45 test sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 40 test sur syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 45 voir aussi sonde APCI sondes illustration 29 installation 11 nettoyage 26 retrait 28 Source Curtain Gas pr sentation 65 source d ions connexions lectriques 9 Guide de l op rateur Indice installation 11 pr sentation 5 11 raccordements de gaz 9 r chauffement 18 21 retrait 27 sonde APCI test sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 42 sonde APCI test sur syst mes Triple TOF 4600 et 5600 5600 test APCI test sur syst mes Triple TOF 4600 et 5600 5600 47 sonde TurbolonSpray test sur syst mes quadripolaires triples et QTRAP 40 sonde TurbolonSpray test sur syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 45 source d ions lonSpray 7 syst me d vacuation de la source pr sentation 10 syst mes QTRAP test de la source d ions sur 40
27. Effectuer les tests d installation sur le spectrom tre de masse avec la source par d faut V rifier que les solutions de test ont t pr par es correctement Si le probl me persiste contacter un technicien Source d ions Turbo V 35 sur 72 D pannage Tableau 5 1 D pannage Suite Sympt me Bruit de fond lev Source d ions Turbo V 36 sur 72 Cause possible La temp rature TEM est trop lev e Le d bit du gaz chauffant GS2 est trop lev La source d ions est contamin e Solution Optimiser la temp rature Optimiser le d bit du gaz chauffant Nettoyer ou remplacer les composants de la source d ions Voir Maintenance de la source d ions page 25 tat de la source et de la face avant 1 D placer la sonde APCI ou TIS la position la plus loign e de l ouverture verticalement et horizontalement 2 S assurer que le chauffage de l interface est en marche 3 Infuser ou injecter un m lange 50 50 de m thanol et d eau avec un d bit de pompe de 1 ml min 4 Dans le logiciel Analyst r gler TEM sur 650 GS1 sur 60 et GS2 sur 60 5 R gler le flux Curtain Gas sur 45 ou 50 6 Faire fonctionner pendant au moins 2 heures ou de pr f rence toute la nuit pour un r sultat optimal Guide de l op rateur Tableau 5 1 D pannage Suite D pannage Sympt me Les performances de la source d ions se sont d grad es Cause
28. Principes de fonctionnement page 51 Figure 1 2 Pi ces de la sonde TurbolonSpray l ment Description 1 Capuchon d ajustement de l lectrode collier noir qui r gle l extension de la pointe de l lectrode 2 Anneau de retenue en bronze qui fixe la sonde sa tour dans le logement de la source d ions 3 Pointe de l lectrode travers laquelle les chantillons sont pulv ris s dans la zone d introduction de l chantillon de la source d ions sonde APCI La sonde APCI convient pour L ionisation de compos s qui ne forment pas ais ment des ions dans une solution Il s agit g n ralement de compos s non polaires La cr ation d un spectre simple APCI pour des exp riences MS MS e Les analyses haut d bit d chantillons complexes et impurs Ces analyses sont moins sensibles aux effets de suppression d ions Introduction rapide de l chantillon par une injection en flux avec ou sans colonne LC La sonde APCI peut accepter l ensemble des effluents sans partage des d bits compris entre 50 ul min et 3000 ul min avec une colonne gros diam tre Elle peut vaporiser les compos s volatils et labiles avec une d composition thermique minimale La d solvatation et la vaporisation rapides des gouttelettes et de l analyte minimisent la d composition thermique et pr servent l identit mol culaire pour l ioni
29. Source d ions Turbo V Guide de l op rateur Num ro du document D5040193 A Date de publication Juillet 2012 Ce document est fourni aux clients qui ont achet un quipement AB Sciex afin de les informer sur le fonctionnement de leur quipement AB Sciex Ce document est prot g par les droits d auteur et toute reproduction de tout ou partie de son contenu est strictement interdite sauf autorisation crite d AB Sciex Le logiciel ventuellement d crit dans le pr sent document est fourni en vertu d un accord de licence Il est interdit de copier modifier ou distribuer le logiciel sur tout support sauf dans les cas express ment autoris s dans le contrat de licence En outre l accord de licence peut interdire de d composer un logiciel int gr d inverser sa conception ou de le d compiler quelque fin que ce soit Des parties de ce document peuvent faire r f rence d autres fabricants et ou leurs produits qui peuvent comprendre des pi ces dont les noms sont des marques d pos es et ou fonctionnent comme des marques commerciales appartenant leurs propri taires respectifs Cet usage est destin uniquement d signer les produits des fabricants tels que fournis par AB Sciex int gr s dans ses quipements et n induit pas implicitement le droit et ou l autorisation de tiers d utiliser ces noms de produits comme des marques commerciales AB Sciex ne garantit en aucun cas l ad quation de ce mat riel
30. a contamination des valeurs des l ments optiques ioniques tout en dirigeant les ions de l chantillon vers la chambre de d pression par la production de champs lectriques entre l interface de d pression et l aiguille de pulv risation La contamination des composants optiques d entr e ioniques r duit donc la transmission QO la stabilit et la sensibilit et augmente les bruits de fond Maintenir le flux Curtain Gas un niveau aussi lev que possible sans perte de sensibilit TEM Temp rature Guide de l op rateur Contr le la chaleur appliqu e l chantillon pour le vaporiser La temp rature optimale est la temp rature la plus basse laquelle l chantillon est compl tement vaporis Optimiser par incr ments de 50 C Source d ions Turbo V 65 sur 72 Param tres de la source et tensions Tableau C 3 Param tres d pendant de la source Suite ID Nom Temp rature suite Description Sonde TurbolonSpray contr le la temp rature du gaz chauffant dans la sonde TurbolonSpray Le gaz chauffant vapore le solvant pour produire des ions d chantillon en phase gazeuse La meilleure sensibilit est obtenue lorsque la combinaison de la temp rature TEM et du d bit du gaz chauffant GS2 conduit le solvant LC au point auquel il est presque enti rement vaporis mesure que la teneur en mati re organique du solvant augmente la temp rature optimale de la sonde do
31. a source d ions pour l ionisation par lectropulv risation avec la sonde TurbolonSpray ou pour l ionisation chimique avec la sonde APCI Les applications pour la source d ions comprennent le d veloppement d une m thode qualitative et une analyse qualitative et quantitative Pour obtenir les informations r glementaires et sur la s curit du spectrom tre de masse consulter le Safety Guide Guide de la s curit D1000012640 En cas d utilisation d un instrument de la s rie 4500 ou 6500 se reporter au System User Guide Manuel d utilisation D5030863 ou D5030602 AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels utiliser la source d ions seulement si vous avez les qualifications et la formation appropri es et si vous connaissez les r gles A de confinement et d vacuation des mat riaux toxiques ou nuisibles utilis s avec la source d ions Toute substance toxique ou nocive introduite dans cet quipement sera pr sente dans la source d ions et sa sortie d vacuation propos de la source d ions La figure 1 1 page 6 indique les pi ces de la source d ions Guide de l op rateur Source d ions Turbo V D5040193 A 5 sur 72 Pr sentation de la source d ions ui v Eli AN IA Y Figure 1 1 Composants de la source d ions l ment Description 1 Tube chantillon 2 Tour de la sonde 3 Microm tre u
32. a valeur la plus lev e possible pour le d bit Curtain Gas afin d viter de contaminer le spectrom tre de masse Effectuer plusieurs injections de 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en optimisant le gaz n buliseur GS1 le gaz du chauffage turbine GS2 le flux Curtain Gas CUR et l lectro n buliseur NC de mani re obtenir l intensit et la stabilit du signal maximales AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions Optimiser l extension de la pointe de l lectrode Voir Optimisation de la source d ions page 15 Optimiser les positions horizontales et verticales de la sonde Apr s l optimisation de la source d ions injecter 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en surveillant m z 609 195 Conseil Le fabricant recommande de remplir avec exc s la boucle de 5 pl avec 30 ul 40 Ul de la solution R p ter l op ration tape 11deux autres fois et noter l intensit moyenne des trois injections Imprimer une copie des r sultats Passer en revue la copie imprim e des r sultats du test de la sonde APCI Confirmer que les trois injections de la solution de 0 0167 pmol ul de r serpine sont acceptables Voir les Caract ristiques de la source d ions correspondant au
33. acuation fourni par le client Pour plus d informations sur les crit res requis du syst me d vacuation de la source se reporter au Site Planning Guide Guide de planification du site du spectrom tre de masse AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels ventiler le syst me d vacuation de la source vers une hotte ou une bouche d a ration externe afin d viter la diffusion de A vapeurs nocives dans l environnement du laboratoire Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 10 sur 72 Installation de la source d ions La source d ions est connect e l interface de d pression et est maintenue en place par deux loquets L int rieur de la source d ions est visible travers les fen tres en verre tremp situ es sur le c t et l extr mit de la source d ions spectrom tre de masse la fin de cette proc dure Une haute tension est A AVERTISSEMENT Risque d lectrocution installer la source d ions sur le pr sente lorsque la source d ions est install e sur l quipement Installer la source d ions Mat riel requis Ensemble du logement de la source d ions Sondes Kit du mat riel de la source d ions Conseil Ne pas jeter l emballage vide Le garder pour ranger la source d ions quand elle n est pas utilis e Pr parer l installation AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assure
34. aiguille 23 Gaz 1 19 Gaz 2 19 sonde APCI 21 sonde TurbolonSpray 16 temp rature de la sonde APCI 23 P Param tre DP 41 46 Param tre GS1 Source d ions Turbo V 70 of 72 valeurs typiques pour sonde TurbolonSpray 16 63 param tre GS1 param tres de test de la sonde APCI 48 param tres de test de la sonde TurbolonSpray 41 46 param tre GS2 description 64 param tres de test de la sonde APCI 48 param tres de test de la sonde TurbolonSpray 41 46 Param tre NC 21 64 Param tre TEM 21 64 Perfusion en T 15 phase mobile composition de la solution de nettoyage 27 pointe de l lectrode extension r glage 31 illustration 8 9 r glage de l extension de la pointe 31 position de l axe vertical 6 pulv risateur direction correcte de 20 pulv risation d pannage 35 R raccordements de gaz 9 r chauffement de la source d ions 18 21 r frig ration des solutions de test 40 r glage aiguille de d charge par effet corona 22 extension de la pointe de l lectrode 31 position de la sonde TurbolonSpray 18 sonde APCI 23 r glage du microm tre horizontal 6 remplacement aiguille de d charge par effet corona 31 tube chantillon 33 retrait sondes 28 source d ions 27 S sensibilit d pannage 35 solution de test 40 solutions r frig ration 40 solvants Guide de l op rateur optimisation du Gaz 1 et du Gaz 2 19 sonde APCI 23 sonde TurbolonSpray 7 syst me d vacuation de la source 10 Solvants MS
35. c la paroi lls sont uniquement l objet de collisions avec d autres mol cules Les ions sont galement form s en dehors de la source API d sign e mais ils ne sont pas d tect s et sont finalement neutralis s en interagissant avec la surface de la paroi La temp rature de la sonde est un facteur important pour le fonctionnement de la sonde APCI Pour pr server l identit mol culaire la temp rature doit tre suffisamment lev e pour assurer une vaporation rapide une assez haute temp rature de fonctionnement les gouttelettes s vaporent rapidement pour que les mol cules organiques soient d sorb es des pr cipit s avec un minimum de d gradation thermique Toutefois si le r glage de la temp rature est trop bas l vaporation est plus lente et une pyrolyse ou d composition peut se produire avant la fin de la vaporisation Le fonctionnement de la sonde APCI des temp ratures sup rieures la temp rature optimale peut provoquer la d composition thermique de l chantillon Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 58 sur 72 Consommables et pi ces de rechange B Les tableaux suivants r pertorient les pi ces commander pour la source d ions Turbo V Les pi ces sont disponibles dans le kit de consommables du spectrom tre de masse Le kit de consommables des syst mes des s ries 4500 et 5500 porte la r f rence 1026540 Le kit de consommables des syst mes TripleTOF 4600 et 5600 d AB SCIEX po
36. connecteurs de l interface de d pression 3 Appuyer d licatement la source d ions contre l interface de d pression puis tourner compl tement les loquets de la source d ions vers le bas de mani re verrouiller la source d ions en position position verrouill e 6h30 Voir figure 2 1 page 13 Connecter le tube chantillon Si la source d ions Turbo V est utilis e sur un syst me TripleTOF 4600 ou 5600 5600 d AB SCIEX avec le CDS fourni en option suivre les instructions d crites dans le Guide de l op rateur du CDS pour installer le CDS et connecter les tubulures et les c bles jonction de mise la terre La jonction de mise la terre assure la s curit entre AVERTISSEMENT Risque d lectrocution ne pas n gliger la connexion de la le spectrom tre de masse et le dispositif d introduction de l chantillon Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 12 sur 72 Installation de la source d ions AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que l crou du tube chantillon est correctement serr avant d utiliser cet quipement Si l crou du tube chantillon n est pas bien resserr l chantillon peut fuir entra nant alors un risque d exposition des produits chimiques dangereux 1 Connecter le tube PEEK rouge du dispositif d alimentation de l chantillon la jonction de mise la terre sur la source d ions 2 Ins rer u
37. cquire Acqu rir pour commencer la collecte des donn es Attention Dommage potentiel sur l quipement utiliser la valeur la plus lev e possible pour le d bit Curtain Gas afin d viter de contaminer le spectrom tre de masse 8 Effectuer plusieurs injections de 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en optimisant le gaz n buliseur GS1 le gaz du chauffage turbine GS2 et le flux Curtain Gas CUR de mani re obtenir l intensit et la stabilit du signal maximales AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions 9 Optimiser l extension de la pointe de l lectrode Voir Optimisation de la source d ions page 15 10 Optimiser les positions horizontales et verticales de la sonde 11 Apr s l optimisation de la source d ions injecter 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en surveillant m z 609 195 Conseil Le fabricant recommande de remplir avec exc s la boucle de 5 pl avec 30 Ll 40 Ul de la solution 12 R p ter l op ration tape 11deux autres fois et noter l intensit moyenne des trois injections 13 Imprimer une copie des r sultats 14 Passer en revue la copie imprim e des r sultats du test de la sonde TurbolonSpray 15 Confirmer que les trois injections de la solution de 0
38. d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels en cas de d versement de produits chimiques se reporter aux fiches de donn es sur la s curit des produits pour obtenir les instructions sp cifiques N arr ter l coulement ou la fuite que si cela est possible en toute s curit Utiliser un quipement de protection personnelle appropri et des tissus absorbants pour contenir le d versement et mettre au rebut conform ment aux r glementations locales Passer la phase mobile qui sera compos e 50 50 d eau et d ac tonitrile ou 50 50 d eau et de m thanol Dans le logiciel Analyst proc der comme suit i R gler la temp rature TEM entre 500 et 600 ii R gler le gaz 1 de la source d ions GS1 et le gaz 2 de la source d ions GS2 sur 40 au moins iii R gler le flux Curtain Gas CUR sur la valeur la plus lev e possible iv Attendre que le point de consigne TEM soit atteint injecter la phase mobile dans la valve d inversion les tubulures et chaque sonde raison de 1 ml min pendant 10 15 minutes Veiller rincer soigneusement les deux sondes et les tubes d chantillon Retirer la source d ions La source d ions peut tre retir e rapidement et facilement sans outils Toujours retirer la source d ions du spectrom tre de masse avant de la soumettre la moindre op ration de maintenance ou de changer les sondes AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les s
39. e est retir e ou si l analyte le d bit ou la composition du solvant change r p ter la proc dure d optimisation apr s l installation Optimiser l lectro n buliseur La source d ions est contr l e par le courant et non par la tension S lectionner le courant appropri pour la m thode d acquisition quelle que soit la position choisie de la source d ions Utiliser le bouton de r glage PEEK pour positionner l aiguille de d charge par effet corona de sorte que la pointe de l aiguille soit exactement orient e au centre de la sonde Commencer avec la valeur 1 dans le champ Nebulizer Current NC lectro n buliseur puis augmenter cette valeur de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible L lectro n buliseur NC appliqu l aiguille de d charge par effet corona optimise g n ralement entre 1 pA et 5 uA en mode positif Si aucune variation du signal n est observ e lors de l augmentation du courant laisser ce dernier la valeur la plus faible garantissant le meilleur signal ou rapport signal bruit possible Optimiser la temp rature de la sonde APCI La quantit et le type de solvant influent sur la temp rature optimale de la sonde APCI un d bit lev la temp rature optimale augmente AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels ventiler le syst me d vacuation de la source vers une hotte ou une bouche d a ration externe afin d
40. e l ouverture Conseil p plus le r glage du microm tre est lev plus la sonde est proche de l ouverture Les valeurs de temp rature optimales d pendent du compos et de la composition de la phase mobile un contenu hautement aqueux exige une temp rature sup rieure La valeur z ro 0 signifie qu aucune temp rature n est appliqu e D bit et temp rature La quantit et le type de l chantillon ont une incidence sur la temp rature TIS optimale un d bit lev la temp rature optimale augmente La composition du solvant est un facteur plus significatif mesure que la teneur en mati re organique du solvant augmente la temp rature optimale de la sonde doit diminuer La sonde TIS est utilis e normalement avec des d bits d chantillon compris entre 40 et 1000 ul min La chaleur est utilis e pour augmenter la vitesse d vaporation ce qui am liore l efficacit de l ionisation et augmente la sensibilit Les d bits de solvant hautement organique extr mement faibles n exigent g n ralement pas de temp rature Voir tableau 3 2 Tableau 3 2 Temp ratures initiales recommand es D bit pl min Temp rature C 1 20 0 100 20 100 150 350 100 300 300 400 300 1000 400 500 Configurer le syst me 1 Configurer la pompe HPLC de sorte qu elle distribue la phase mobile au d bit requis 2 Raccorder la jonction de mise la terre de la source d ions une pompe
41. e la temp rature est trop lev il peut se produire une d gradation thermique de l chantillon NC lectro n buliseur ou courant d aiguille Source d ions Turbo V 66 sur 72 Les param tre NC contr lent le courant appliqu sur l aiguille de d charge par effet corona dans la sonde APCI La d charge ionise les mol cules de solvant qui leur tour ionisent les mol cules de l chantillon Pour la sonde APCI le courant appliqu sur l aiguille de d charge par effet corona NC g n ralement est optimum dans une fourchette large de 1 mA 5 mA Pour l optimisation commencer avec la valeur 1 puis augmenter cette Valeur de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible Si lorsque le courant est augment aucune variation du signal n est observ e laisser alors le courant au niveau le plus bas fournissant la meilleure sensibilit p ex 2 mA Guide de l op rateur Param tres de la source et tensions Tableau C 3 Param tres d pendant de la source Suite ID Nom Description IS Tension lonSpray Le param tre IS contr le la tension appliqu e au pulv risateur qui ou ionise l chantillon dans la source d ions Il d pend de la polarit et affecte la stabilit du jet et la sensibilit Tension flottante lonSpray ihe Chauffage de Ce param tre est toujours activ pour les syst mes 4600 5500 et l interface 5600 5600 Le param tre ihe
42. er le syst me d vacuation de la source afin d liminer en toute s curit les vapeurs d gag es par l chantillon dans l environnement du laboratoire Pour conna tre les crit res requis pour le syst me d vacuation de la source se reporter au Site Planning Guide Guide de planification du site du spectrom tre de masse utilis Toutes les sources d ions produisent des vapeurs d chantillon et de solvant Ces vapeurs repr sentent un danger potentiel pour l environnement du laboratoire Le syst me d vacuation de la source est con u pour liminer en toute s curit et g rer correctement les vapeurs d chantillon et de solvant Lorsque la source d ions est install e le spectrom tre de masse ne fonctionne que si le syst me d vacuation de la source fonctionne Un capteur de d pression mont dans le circuit d vacuation de la source mesure la d pression dans la source Si la d pression dans la source est sup rieure au point de consigne alors que les sondes sont install es le syst me passe en mode d vacuation par d faut non pr t Un syst me d vacuation en activit limine les r sidus de la source d ions gaz solvant vapeur d chantillon par une sortie de vidange sans provoquer de bruit chimique La sortie de vidange est raccord e une bouteille de vidange par le biais d une chambre de vidange et d une pompe d vacuation de la source et de l un syst me de ventilation d v
43. es d bits lev s typiques avec un al syst me LC et conjointement avec l augmentation de la temp rature P 3 Taper 4500 dans le champ lonSpray Voltage Floating ISVF Tension flottante lonSpray ou lonSpray Voltage IS Tension lonSpray 4 Dans le champ Curtain Gas CUR saisir la valeur appropri e pour le spectrom tre de masse Voir tableau 3 3 Tableau 3 3 Valeurs des param tres pour Curtain Gas Spectrom tre de masse Valeurs de d part S ries 3200 4000 et 4500 20 S ries 5000 et 5500 25 S rie 6500 30 S ries 4600 et 5600 5600 20 25 selon le d bit Optimiser la position de la sonde TurbolonSpray faibles d bits la sonde peut tre ajust e sur la position la plus basse de son axe Y d bits lev s positionner la sonde plus haut que l ouverture L ouverture de la plaque rideau doit rester tout moment exempte de solvant ou de gouttelettes de solvant 1 Regarder travers la fen tre du logement de la source d ions pour afficher la position de la sonde Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 18 sur 72 Optimisation de la source d ions 2 Utiliser les r glages du microm tre sur les axes horizontal et vertical pr c dents ou les r gler sur 5 comme position de d part initiale 3 Surveiller le signal dans le logiciel Utiliser le microm tre de l axe horizontal pour r gler la position de la sonde par petits incr ments afin d obtenir le meilleur signal
44. es d une montre afin de desserrer et de retirer d licatement la pointe 4 Tirer doucement sur l aiguille de d charge par effet corona vers le bas travers la chemin e d vacuation pour l enlever 5 Ins rer la nouvelle aiguille dans la chemin e d vacuation dans le manchon en c ramique aussi loin que possible 6 Tout en tenant une pointe neuve entre le pouce et l index d une main et l aiguille de d charge par effet corona avec l autre main tourner la pointe de l aiguille de d charge par effet corona dans le sens des aiguilles d une montre afin de mettre en place la pointe 7 Ins rer la sonde puis installer la source d ions sur le spectrom tre de masse Voir Installation de la source d ions page 11 Remplacer le tube chantillon Suivre la proc dure d crite ci dessous pour remplacer le tube chantillon en cas d obstruction 1 Arr ter le flux de l chantillon et v rifier que tout gaz r siduel a t limin travers le syst me d vacuation de la source Voir Retirer la source d ions page 27 D connecter le tube chantillon de la sonde et de la connexion 3 Remplacer le tube chantillon avec un tube de la m me longueur que celui utilis pr c demment 4 Relancer le flux de l chantillon Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 33 sur 72 Maintenance de la source d ions AB SCIEX Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 34 sur 72 D pannage Tableau 5 1 D pan
45. eur doit tre suffisamment form sur le fonctionnement du spectrom tre de masse et les proc dures de s curit lt Remarque Toutes les solutions de test doivent tre conserv es au r frig rateur Si elles sont gard es hors du r frig rateur pendant plus de 48 heures les mettre au rebut P et utiliser de nouvelles solutions Tester la source d ions sur des syst mes quadripolaires triples et QTRAP Tester la sonde TurbolonSpray Pour plus d informations sur l installation ou l optimisation de la source d ions se reporter Installer la source d ions page 11et Optimisation de la source d ions page 15 chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 40 sur 72 Tests de la source d ions Attention Dommage potentiel sur l quipement ne pas introduire le moindre flux de solvant avant d avoir v rifi que la source d ions a atteint la temp rature correcte 1 S assurer que le spectrom tre de masse a t optimis l aide de la source d ions par d faut 2 Retirer toute autre source d ions install e sur le spectrom tre de masse et installer la source d ions Turbo V 3 Configurer la pompe HPLC pour d
46. ge corona Les chantillons introduits travers la sonde APCI sont pulv ris s avec un gaz de n bulisation dans le tube chauff en c ramique A l int rieur du tube les gouttelettes de l chantillon et du Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 54 sur 72 Principes de fonctionnement solvant dispers es finement sont soumises une vaporisation rapide avec une d composition thermique minimale La vaporisation douce pr serve l identit mol culaire de l chantillon Les mol cules de l chantillon et du solvant en phase gazeuse passent dans le logement de la source d ions o l ionisation par APCI est induite par une aiguille de d charge par effet corona connect e l extr mit du tube en c ramique Les mol cules de l chantillon sont ionis es par les collisions avec les ions r actifs cr s par l ionisation des mol cules de solvant en phase mobile Comme illustr dans figure A 3 les mol cules de solvant vaporis ionisent pour produire les ions r actifs X H en mode positif et X H en mode n gatif Ce sont ces ions r actifs qui produisent des ions d chantillonnage stable quand ils entrent en collision avec les mol cules de l chantillon Figure A 3 lonisation chimique pression atmosph rique APCI l ment Description 1 chantillon 2 Les ions primaires sont cr s dans les environs de l aiguille de d charge par effet corona 3 L ionisation produit surt
47. gnal possibles Le gaz chauffant Gaz 2 aide l vaporation des solvants ce qui contribue renforcer l ionisation de l chantillon Toutefois une temp rature trop lev e peut entra ner la vaporisation pr matur e du solvant au niveau de la pointe de la sonde TurbolonSpray en particulier si cette derni re se trouve trop bas ce qui occasionne une instabilit du signal et un bruit de fond chimique important De m me un flux de gaz trop chaud pourrait produire un signal bruyant ou instable 1 R gler les valeurs GS1 et GS2 par incr ments de 5 pour obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible 2 Augmenter la valeur CUR jusqu ce que le signal commence diminuer lev e possible sans pour autant sacrifier la sensibilit Ne pas r gler la J Remarque Pour viter toute contamination utiliser la valeur CUR la plus P valeur CUR en dessous de 20 Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 19 sur 72 Optimisation de la source d ions 3 R gler les valeurs IS ou ISVF par incr ments de 500 V pour optimiser le rapport signal bruit corona peut se produire Celle ci sera visible sous forme d une lumi re P bleue la pointe de la sonde TurbolonSpray Il en r sultera une d gradation de la sensibilit et de la stabilit du signal ionique 7 Remarque Si la valeur ISVF est trop lev e une d charge par effet Optimiser la temp rature du chauffage turbine Turbo Heater La temp
48. i vous connaissez les r gles de confinement et d vacuation des mat riaux toxiques ou nuisibles utilis s avec la source d ions Toute substance toxique ou nocive introduite dans cet quipement sera pr sente dans la source d ions et sa sortie d vacuation Introduction de l chantillon M thode Le flux d chantillon liquide est pomp vers la source d ions par une pompe LC ou par une pompe seringue S il est introduit par une pompe LC l chantillon peut tre directement inject dans la phase mobile en utilisant l analyse FIA Flow Injection Analysis analyse de l injection du flux par perfusion en T ou travers une colonne de s paration LC MS avec un injecteur boucle ou un auto chantillonneur S il est introduit par une pompe seringue l chantillon est inject directement dans la source d ions L optimisation de la perfusion peut tre utilis e pour l optimisation de la trajectoire des ions et la s lection fragmentaire MS MS D bit Les d bits d chantillon sont d termin s par le syst me de chromatographie ou par le volume de l chantillon disponible Conditions d entr e des chantillons L entr e des chantillons transf re l chantillon liquide vers l entr e de la source d ions sans perte et avec un volume inerte minimal Utiliser les proc dures et les pratiques analytiques appropri es pour r duire au minimum les volumes inertes Pr filtrer les chantillons de sorte que les tubes capil
49. imisation de la source d ions page 15 Optimiser les positions horizontales et verticales de la sonde Apr s l optimisation de la source d ions injecter 5 ul de la solution de test de 0 0167 pmol ul tout en surveillant la fen tre XIC de m z 195 Conseil Le fabricant recommande de remplir avec exc s la boucle de 5 pul avec 30 Lul 40 Ul de la solution I R p ter l op ration tape 11deux autres fois et noter l intensit moyenne des trois injections Imprimer une copie des r sultats Passer en revue la copie imprim e des r sultats du test de la sonde APCI Confirmer que les trois injections de la solution de 0 0167 pmol ul de r serpine sont acceptables Voir les Caract ristiques de la source d ions correspondant au spectrom tre de masse utilis si n cessaire Si les performances de la source d ions se sont d grad es consid rablement se reporter D pannage page 35 Apr s avoir termin les tests arr ter la pompe LC et r gler la temp rature sur 0 Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 49 sur 72 Tests de la source d ions AB SCIEX Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 50 sur 72 Principes de fonctionnement Mode TurbolonSpray La sonde TurbolonSpray utilise deux chauffages turbine pour souffler de l azote UHP puret ultra lev e chaud et sec La sonde TurbolonSpray occupe une position centrale entre les chauffages turbine qui sont plac s
50. ipes de fonctionnement 2 T Figure A 1 vaporation des ions l ment Description 1 Le pr cipit de gouttes contient des ions des deux polarit s dont une dominante 2 mesure que le solvant s vapore le champ lectrique augmente et les ions se d placent la surface 3 certaines valeurs de champ critiques des ions sont mis par les gouttelettes 4 Les r sidus non volatils restent comme des particules s ches Comme illustr dans figure A 1 page 52 chaque gouttelette charg e contient un solvant et des ions positifs et n gatifs mais avec une polarit dominante Comme un vecteur conducteur les charges en exc s restent la surface du pr cipit mesure que le solvant s vapore le champ lectrique la surface du pr cipit de gouttes augmente en raison de la r duction du rayon du pr cipit Si le pr cipit contient un exc s d ions et que suffisamment de solvant s en vapore un champ critique est atteint pour chaque ion mis de la surface En fin de compte le solvant s vaporera du pr cipit en laissant une particule s che compos e de mati re non volatile de la solution de l chantillon Les nergies de solvatation pour la plupart des mol cules organiques tant inconnues les sensibilit s de tout ion organique l vaporation ionique sont difficiles pr dire L importance de l nergie de solvatation est vidente parce que les agents tensioactifs concen
51. ise la terre de la source d ions une pompe par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 5 Dansle logiciel Analyst en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tune R glage manuel 6 Utiliser une m thode et des param tres optimis s pr c demment ou r gler les param tres comme illustr dans tableau 6 2 Tableau 6 2 Param tres de la m thode Param tre Valeur Param tres MS Scan Mode Mode d analyse MRM Q1 609 2 Q3 195 1 Scan Time Temps d analyse 0 100 Secondes Duration minutes Dur e 10 Param tres de la source et du gaz Curtain Gas flow CUR Flux 20 ou comme optimis Curtain Gas Nebulizer Current NC lectro 3 ou comme optimis n buliseur Temperature TEM 425 C Temp rature TEM lon Source Gas1 GS1 Gaz 1 30 ou comme optimis de la source d ions Param tres du compos Declustering Potential DP 100 ou comme optimis Potentiel de d fragmentation Collision Energy CE nergie 45 ou comme optimis de collision Collision Exit Potential CXP Comme optimis Sortie de collision potentielle 7 Cliquer sur Start D marrer ou Acquire Acqu rir pour commencer la collecte des donn es Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 43 sur 72 Tests de la source d ions 10 11 12 13 14 15 16 17 Attention Dommage potentiel sur l quipement utiliser l
52. istribuer 0 2 ml min en phase mobile 4 Raccorder la jonction de mise la terre de la source d ions une pompe par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 5 Dans le logiciel Analyst en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tune R glage manuel 6 Utiliser une m thode et des param tres optimis s pr c demment ou r gler les param tres comme illustr dans tableau 6 1 Tableau 6 1 Param tres de la m thode Param tre Valeur Param tres MS Scan Mode Mode d analyse MRM Q1 609 2 Q3 195 1 Scan Time Temps d analyse 0 200 Secondes Duration minutes Dur e 10 Param tres de la source et du gaz Curtain Gas flow CUR 20 ou comme optimis Flux Curtain Gas Temperature TEM 700 C ou comme Temp rature TEM optimis lon Source Gas 1 Gaz 1 de 50 ou comme optimis la source d ions GS1 lon Source Gas 2 GS2 50 ou comme optimis Gaz 2 de la source d ions Pulv risation ionique IS V 14500 ou comme optimis Param tres du compos Declustering Potential DP 100 ou comme optimis Potentiel de d fragmentation Collision Energy CE 45 ou comme optimis Energie de collision Collision Exit Potential CXP Comme optimis Sortie de collision potentielle Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 41 sur 72 Tests de la source d ions 7 Cliquer sur Start D marrer ou A
53. it diminuer Avec les solvants compos s 100 de m thanol ou d ac tonitrile les performances de la sonde peuvent tre optimis es une temp rature minimale de 300 C Les solvants aqueux compos s d eau 100 des d bits d environ 1000 ul min n cessitent une temp rature de sonde maximale de 750 C Si le r glage de la temp rature est temp rature est trop bas alors l vaporation est incompl te et de grosse et visible gouttes seront expuls es dans le logement de la source d ions Si la temp rature est trop lev e le solvant peut tre vaporis pr matur ment au niveau de la pointe de la sonde TurbolonSpray en particulier si le r glage de celle ci est trop bas 5 mm 13 mm Sonde APCI contr le la temp rature de la sonde APCI mesure que la teneur en mati re organique du solvant augmente la temp rature optimale de la sonde doit diminuer Avec les solvants compos s 100 de m thanol ou d ac tonitrile les performances de la sonde peuvent tre optimis es des temp ratures minimales de 400 C des d bits de 1000 l min Les solvants aqueux compos s d eau 100 r gl s sur des d bits d environ 2000 pl min n cessitent une temp rature de sonde minimale de 700 C Si le r glage de la temp rature est temp rature est trop bas alors l vaporation est incompl te et de grosse et visible gouttes seront expuls es dans le logement de la source d ions Si le r glage d
54. l de qualit LC MS Eau d ionis e de qualit HPLC Lunettes de protection Gants non poudr s nitrile recommand Blouse de laboratoire Nettoyage des sondes Rincer r guli rement la source d ions quel que soit le type de compos s chantillonn s Pour ce faire configurer dans le logiciel Analyst une m thode destin e tout particuli rement la r alisation d une op ration de rin age chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance AVERTISSEMENT Risque d incendie et de toxicit chimique tenir le m thanol distance des flammes et des tincelles et ne l utiliser que dans des hottes de ventilation pour fum es chimiques ou dans des armoires de s curit ll produit des vapeurs dangereuses en cas d inhalation et susceptibles de provoquer un incendie AVERTISSEMENT Risque de toxicit chimique porter un quipement de protection personnelle un masque respiratoire dot d un filtre des gants et des lunettes de protection afin d viter toute exposition de la peau et des yeux l ac tone au m thanol et l isopropanol et ne pas ing rer ces produits chimiques gt b gt Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 26 sur 72 Maintenance de la source d ions AVERTISSEMENT lRisques
55. laires de l chantillon en entr e ne soient pas bloqu s par des particules des pr cipit s d chantillons et des sels S assurer que toutes les connexions sont suffisamment ajust es pour emp cher les fuites Ne pas trop serrer Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 19 15 sur 72 Optimisation de la source d ions Optimiser la sonde TurbolonSpray AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que le laboratoire est quip d un syst me de ventilation appropri Une ventilation ad quate dans le laboratoire est indispensable pour un fonctionnement s r du spectrom tre de masse Attention Dommage potentiel sur l quipement si le syst me LC connect au spectrom tre de masse n est pas contr l par le logiciel d analyse ne pas laisser le spectrom tre sans surveillance pendant son fonctionnement Le syst me LC peut d border la source d ions quand le spectrom tre de masse bascule en mode de veille Plusieurs param tres affectent les performances de la sonde TurbolonSpray Optimiser les performances tout en injectant un compos connu et surveiller le signal de l ion reconnu Ajuster les param tres de mani re optimiser le rapport signal bruit et la stabilit du signal Remarque Pour maintenir l instrument propre et garantir son fonctionnement optimal ajuster la position de la sonde lors de la modification du d bit Voir tableau 3 1
56. lectrode avec la moindre partie du logement de la source d ions pour viter d endommager la sonde 1 Ins rer la sonde dans la tour Aligner l orifice de la sonde sur la broche d alignement qui se trouve sur le dessus de la source d ions Voir figure 2 1 page 13 2 Appuyer d licatement sur la sonde de fa on ce que les contacts s engagent avec ceux de la tour 3 Tourner l anneau de retenue en bronze sur la sonde appuyer dessus pour engager son filetage dans celui de la tour puis bien resserrer l anneau avec les doigts Attention Dommage potentiel sur l quipement s assurer que la pointe de l aiguille de d charge par effet corona est loin de l ouverture lors de l utilisation de la sonde TurbolonSpray 4 V rifier que la pointe de l aiguille de d charge par effet corona de la sonde APCI est orient e vers l ouverture Installer la source d ions sur le spectrom tre de masse AVERTISSEMENT Risque d lectrocution lors de l installation de la source d ions installer la sonde avant d installer la source d ions sur le spectrom tre de masse Si la source d ions n est pas correctement install e l alimentation haute tension n est alors pas disponible 1 S assurer que les loquets de la source qui se trouvent de chaque c t de la source d ions sont 12h 2 Aligner la source d ions sur l interface de d pression en veillant ce que les loquets de la source d ions soient align s sur les
57. maintenant la sonde pointe vers le bas de sorte que le ressort reste l int rieur de la sonde retirer le tube lectrode Voir figure 4 1 METRE S Figure 4 1 Sonde vue agrandie l ment Description 1 Capuchon d ajustement de l lectrode 2 Jonction PEEK 3 Ressort 4 Anneau de retenue en bronze 5 Pointe de l lectrode Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 29 sur 72 Maintenance de la source d ions Figure 4 1 Sonde vue agrandie l ment Description 6 Tube pulv risateur 7 Tube lectrode 8 crou de retenue de 1 4 Tirer la jonction PEEK et le tube lectrode fix la sonde Voir figure 4 1 Utiliser la cl plate de 1 4 pour retirer l crou de retenue fixant le tube lectrode la jonction PEEK Retirer le tube lectrode de l crou de retenue Nettoyer le tube lectrode avec une solution 50 50 de m thanol et d eau en faisant circuler la solution dans le tube lectrode ou en trempant ce dernier dans un bain ultrasons Assembler les composants de la sonde Quand le tube lectrode est propre ou remplac par un tube neuf assembler les composants de la sonde pr cautions Sa pointe est extr mement coupante Q AVERTISSEMENT Risque de perforations manipuler le tube lectrode avec 1 Ins rer le tube lectrode dans l crou de
58. n morceau de tube PEEK rouge de 30 cm dans l crou du tube chantillon 3 Installer l crou du tube chantillon sur le raccord situ au dessus de la sonde puis bien resserrer l crou du tube chantillon avec les doigts Figure 2 1 Source d ions Turbo V l ment Description 1 Tube chantillon Tour de la sonde Jonction de mise la terre Loquet de la source Broche de guidage Anneau de retenue en bronze NI Gil A ND crou du tube chantillon Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 13 sur 72 Installation de la source d ions 4 Connecter l autre extr mit de la tubulure PEEK rouge la jonction de mise la terre Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 14 sur 72 Optimisation de la source d ions Optimiser la source d ions chaque fois que l analyte son d bit ou la composition de la phase mobile change Plusieurs param tres influent sur les performances de la sonde Optimiser les performances tout en injectant un compos connu et surveiller le signal de l ion reconnu R gler le microm tre les param tres du gaz et de la tension pour optimiser le rapport signal bruit et la stabilit du signal Voir Param tres de la source et tensions page 63 AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels utiliser la source d ions seulement si vous avez les qualifications et la formation appropri es et s
59. n plastique sur le dessus de l aiguille 2 Regarder travers la fen tre en verre pour s assurer que l aiguille est align e sur la pointe en face de l ouverture Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 22 sur 72 Optimisation de la source d ions Optimiser la position de la sonde APCI S assurer que l ouverture de la plaque rideau reste exempte tout moment de solvant ou de gouttelettes de solvant La position de la buse du pulv risateur affecte la sensibilit et la stabilit du signal R gler la sensibilit de la sonde par petits incr ments seulement Lorsque le d bit est faible placer la sonde plus pr s de l ouverture d bits lev s loigner la sonde de l ouverture 1 Utiliser les r glages du microm tre sur les axes horizontal et vertical pr c dents ou les r gler sur 5 comme position de d part initiale Surveiller le signal dans le logiciel Utiliser le microm tre de l axe horizontal pour r gler la sonde par petits incr ments afin d obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible 4 Utiliser le microm tre de l axe vertical pour r gler la sonde par petits incr ments afin d obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible gt Remarque Pour viter la d gradation des performances du spectrom tre al de masse ne pas pulv riser directement dans louverture P Apr s l optimisation de la sonde il convient d effectuer quelques r glages mineurs Si la sond
60. n surface faible affichent g n ralement les plus grands gains de sensibilit au fur et mesure que la temp rature de la source augmente La technique du TurbolonSpray est suffisamment douce pour tre utilis e avec des compos s labiles comme les peptides les prot ines et les produits pharmaceutiques thermolabiles Lorsque le chauffage est teint la sonde TurbolonSpray fonctionne comme une source d ions lonSpray classique Elle fonctionne galement avec des d bits compris entre 5 pl min et 3000 l min et elle vaporise les compositions de solvants 100 aqueuses 100 organiques La sonde TurbolonSpray consiste en un tube d acier inoxydable de 0 012 de diam tre ext rieur DE et est install e un emplacement central avec deux chauffages turbine plac s un angle de 45 degr s de chaque c t Les chantillons introduits travers la sonde TurbolonSpray Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 7 sur 72 Pr sentation de la source d ions sont ionis s dans le tube par l application d une haute tension tension lonSpray puis ils sont n bulis s par un souffle d azote UHP puret ultra lev e sec et chaud ou d air z ro en provenance des chauffages turbine ce qui a pour effet de cr er un brouillard de petites gouttelettes hautement charg es La combinaison de l effluent lonSpray et du gaz sec chauff du turbo n buliseur est projet e un angle de 90 degr s par rapport au parcours des ions Voir
61. nage Sympt me Le logiciel Analyst signale une panne du spectrom tre de masse Cause possible La sonde n est pas install e La sonde n est pas connect e correctement Solution Installer la sonde Voir Installer la sonde page 11 D poser et remplacer la sonde Bien resserrer la bague de connexion en bronze de la sonde Voir Retirer la sonde page 28 et Installer la sonde page 11 Le logiciel Analyst indique que la sonde APCI est en cours d utilisation alors que c est la sonde TurbolonSpray qui est install e Le fusible F3 a saut Contacter un technicien La pulv risation n est pas uniforme L lectrode est bloqu e Nettoyer ou remplacer l lectrode Voir Nettoyer le tube lectrode page 28 La sensibilit est mauvaise Les composants de l interface l avant sont sales Des vapeurs de solvants ou d autres compos s inconnus sont pr sents proximit de l analyseur Nettoyer les composants de l interface et repositionner la source d ions Optimiser le flux Curtain Gas Voir Optimiser les param tres Gas 1 Gaz 1 Gas 2 Gaz 2 et Curtain Gas Flow Flux Curtain Gas page 22 Pendant le test la source d ions ne satisfait pas aux caract ristiques requises Guide de l op rateur D5040193 A Le spectrom tre de masse a chou aux tests d installation La solution de test n a pas t pr par e correctement
62. ona si elle est us e Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 31 sur 72 Maintenance de la source d ions chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance spectrom tre de masse avant de commencer la moindre proc dure de AVERTISSEMENT Risque d lectrocution retirer la source d ions du maintenance AVERTISSEMENT Risque de perforation manipuler l aiguille avec soin L extr mit de l aiguille est extr mement ac r e 1 Retirer la source d ions et la sonde du spectrom tre de masse et se reporter Retirer la source d ions page 27 et Retirer la sonde page 28 2 Faire pivoter la source d ions de sorte que le c t ouvert soit accessible Figure 4 3 Retirer l aiguille de d charge par effet corona l ment Description 1 Manchon en c ramique 2 Aiguille de d charge par effet corona 3 Chemin e d vacuation 3 Tout en tenant la pointe de l aiguille de d charge par effet corona entre le pouce et l index d une main et l aiguille de d charge par effet corona avec l autre main Guide de l op rateur D5040193 A Source d ions Turbo V 32 sur 72 Maintenance de la source d ions tourner la pointe de l aiguille de d charge par effet corona dans le sens contraire des aiguill
63. ou rapport signal bruit possible La sonde peut tre optimis e l g rement de l un ou l autre c t de l ouverture Conseil Il est plus facile d optimiser le signal et le rapport signal bruit avec l analyse FIA ou des injections sur colonne 7 5 Utiliser le microm tre de l axe vertical pour r gler la position de la sonde par petits incr ments afin d obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible d bit est faible la sonde doit tre plus pr s de l ouverture d bits lev s 7 Remarque La position verticale de la sonde d pend du d bit Lorsque le P la sonde doit tre plac e plus loin AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que l lectrode ressort au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source L lectrode ne doit pas tre encastr e dans la sonde 6 R gler le capuchon d ajustement de l lectrode noire sur la sonde pour d placer la pointe de l lectrode par rapport au tube pulv risateur L extension optimale de l lectrode depuis le tube pulv risateur est g n ralement comprise entre 0 5 mm et 1 0 mm Apr s l optimisation de la sonde il convient d effectuer quelques r glages mineurs Optimiser les param tres de la source du gaz Optimiser le gaz n buliseur Gaz 1 de fa on obtenir la meilleure sensibilit et la meilleure stabilit du si
64. out des ions de solvant 4 Les ions r actifs r agissent aux mol cules de l chantillon formant des grappes 5 Interface 6 Plaque rideau X mol cules de solvant M mol cules de l chantillon Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 55 sur 72 Principes de fonctionnement Les mol cules de l chantillon sont ionis es par un processus de transfert de protons en mode positif ou par transfert d lectrons ou de protons en mode n gatif L nergie du processus d ionisation APCI na t essentiellement de la collision par la pression atmosph rique relativement lev e de la source API Pour les applications en phase inverse les ions r actifs se composent de mol cules de solvants proton es en mode positif et des ions d oxyg ne solvat s en mode n gatif Avec une thermodynamique favorable l ajout des modificateurs change la composition des ions r actifs Par exemple l ajout de tampons ou de modificateurs d ac tate peut faire de l ion d ac tate CH3COO le r actif primaire en mode n gatif Les modificateurs d ammonium peuvent faire de l ammoniac proton NH le r actif primaire en mode positif Par les collisions une distribution en quilibre de certains ions p ex des ions en grappe d eau proton e est pr serv e La probabilit d une fragmentation pr matur e de l chantillon d ions dans la source est faible en raison de l influence mod ratrice des grappes de solvant sur les ions r actifs et
65. par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 3 En cas d utilisation d un auto chantillonneur configurer ce dernier pour l ex cution d injections multiples Source d ions Turbo V 17 sur 72 Guide de l op rateur Optimisation de la source d ions Ex cuter la m thode 1 Dans le logiciel Analyst en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tuning R glage manuel 2 Ouvrir une m thode optimis e pr c demment ou cr er une m thode sur la base des compos s 3 Si la source d ions a eu le temps de refroidir proc der alors comme suit i R gler le param tre Temperature TEM Temp rature TEM sur 450 ii Laisser la source d ions chauffer pendant 30 minutes au maximum La phase de r chauffement de 30 minutes vite la condensation des vapeurs de solvant dans une sonde froide D marrer l acquisition Lancer la circulation et l injection de l chantillon D finir les conditions de d marrage 1 Dans l onglet Source Gas Source Gaz du Tune Method Editor diteur de r glage de m thode saisir une valeur de d part pour le gaz 1 de la source d ions GS1 Pour les pompes LC utiliser une valeur comprise entre 40 et 60 pour GS1 2 Saisir une valeur de d part pour le gaz 2 de la source d ions GS2 Pour les pompes LC utiliser une valeur comprise entre 30 et 50 pour GS2 lt Remarque Le gaz 2 est utilis avec l
66. possible La sonde n est pas optimis e L chantillon n a pas t pr par correctement ou s est d grad Rechercher des fuites dans le syst me au niveau des raccords de l entr e de l chantillon Solution Optimiser la sonde TurbolonSpray ou Optimiser la sonde APCI V rifier que l chantillon a t pr par correctement V rifier que les raccords sont bien serr s et remplacer ceux qui pr sentent des fuites Ne pas trop serrer les raccords Installer et optimiser une autre source d ions Si le probl me persiste contacter un technicien Production d arcs lectriques ou d tincelles Guide de l op rateur La position de l aiguille de d charge par effet corona est incorrecte Tourner l aiguille de d charge par effet corona vers la plaque rideau et loin du flux du gaz chauffant Voir R gler la position de l aiguille de d charge par effet corona page 22 Source d ions Turbo V 37 sur 72 D pannage AB SCIEX Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 38 sur 72 Tests de la source d ions Ex cuter ces tests dans les situations suivantes Apr s l installation initiale de la source d ions e Apr s une maintenance majeure sur la source d ions ou sur le spectrom tre de masse e Pour r valuer les performances de la source d ions avant le commencement d un projet ou dans le cadre d une proc dure op ratoire standard Pour conna tre le
67. r vaporation ionique La sonde APCI vaporise l chantillon avant de provoquer l ionisation par ionisation chimique pression atmosph rique Ce processus est induit par une aiguille de d charge par effet corona quand les ions traversent le logement de la source d ions vers la r gion de l interface Il est possible de basculer facilement entre les modes d ionisation en changeant la sonde install e dans la source Le logiciel Analyst d termine la sonde install e et permet les contr les utilisateur correspondants Toutes les donn es acquises l aide de la source d ions sont identifi es par une abr viation repr sentant la sonde utilis e pour acqu rir les donn es TIS pour la sonde TurbolonSpray HN pour la sonde APCI e Remarque Les syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 d AB SCIEX utilisent le logiciel Analyst TF Dans le pr sent guide le logiciel Analyst TF est d sign par l appellation logiciel Analyst Sonde TurbolonSpray La sonde TurbolonSpray est id alement adapt e pour les analyses LC MS MS La sensibilit atteinte avec cette technique d pend la fois du d bit et de l analyte Lorsque le d bit est lev l efficacit de l ionisation augmente parall lement l augmentation de la temp rature de la source d ions du fait de l am lioration de la d solvatation ce qui a pour effet d am liorer la sensibilit Les compos s dont la polarit est extr mement lev e et l activit e
68. r ils compliquent le spectre avec leurs m langes d ions et leurs combinaisons en grappes Ils peuvent galement att nuer la puissance du signal ionique des compos s cibles e Tri thylamine TEA Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 67 sur 72 Param tres de la source et tensions Phosphate de sodium Acide trifluoroac tique TFA e Sulfate dod cyl de sodium Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 68 sur 72 A aiguille de d charge par effet corona optimisation du courant de la sonde APCI 23 r glage 22 remplacement de la pointe 31 aiguille d charge corona Voir aiguille de d charge par effet corona analyse des tests sonde APCI 44 49 sonde TurbolonSpray 42 47 analyse par injection en flux Voir FIA anneau de retenue en bronze 6 8 9 arc lectrique d pannage 37 azote processus d ionisation 56 sonde TurbolonSpray 8 UHP 51 azote de puret ultra lev e Voir azote azote UHP Voir azote B broche de guidage 6 bruit de fond d pannage 19 36 64 r duction 19 bruit Voir bruit de fond C capuchon d ajustement de l lectrode 6 8 9 caract ristiques sonde 7 Chauffage turbine illustration 6 chauffage turbine pr sentation 8 51 voir aussi Gaz 2 compos s labiles et sonde APCI 8 mauvaise sensibilit 35 nettoyage de la source d ions 26 volatils et sonde APCI 8 compos s labiles et sonde TurbolonSpray 7 condensation viter Guide de l op rateur
69. r que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d viter que des vapeurs nocives ne s chappent de la source d ions R gler le capuchon d ajustement de l lectrode noire sur la sonde pour d placer la pointe de l lectrode l int rieur du tube lectrode Pour garantir une stabilit des performances optimales la pointe de l lectrode doit s tendre sur 0 5 mm 1 0 mm apr s l extr mit de la sonde Installer la sonde La sonde n est pas pr install e dans la source d ions Installer la sonde dans la source d ions avant d installer la source d ions Toujours enlever la source d ions du spectrom tre de masse avant d changer les sondes Voir Retirer la source d ions page 27 Quand la source d ions est install e le spectrom tre de masse la reconna t et affiche son identifiant dans le logiciel Analyst Si la sonde n est pas correctement install e dans la source d ions l alimentation haute tension du spectrom tre de masse et du syst me d vacuation de la source est alors d sactiv e Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 193 11 sur 72 Installation de la source d ions source d ions est compl tement d connect du spectrom tre de masse avant de AVERTISSEMENT Risque d lectrocution s assurer que le logement de la continuer Attention Dommage potentiel sur l quipement viter tout contact de la pointe saillante de l
70. rature d pend du compos Description des param tres Tableau C 3 Param tres d pendant de la source ID Nom Description GS1 Gaz 1 de la source Contr le le gaz n buliseur pour la sonde TurbolonSpray et le d ions gaz auxiliaire pour la sonde APCI Le gaz n buliseur contribue g n rer de petites gouttelettes du d bit de l chantillon et affecte la stabilit et la sensibilit de la pulv risation GS2 Gaz2 de la source Contr le le gaz chauffant pour la sonde TurbolonSpray Le gaz d ions chauffant vapore les gouttelettes pulv ris es La meilleure sensibilit est obtenue lorsque la combinaison de la temp rature TEM et du d bit du gaz pouss GS2 conduit le solvant LC au point auquel il est presque enti rement vaporis Pour optimiser GS2 augmenter le d bit de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit En cas d augmentation significative du bruit de fond Un d bit de gaz trop lev peut produire du bruit ou un signal instable Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 64 sur 72 Param tres de la source et tensions Tableau C 3 Param tres d pendant de la source Suite ID Nom CUR Curtain Gas Y flow Flux Curtain Gas Description Contr le le d bit du gaz vers l interface Curtain Gas L interface de Curtain Gas est situ e entre la plaque rideau et louverture Elle emp che la p n tration de l air ambiant et des gouttes de solvants et l
71. retenue puis dans la jonction PEEK S assurer que le tube d lectrode est ins r aussi loin que possible dans la connexion PEEK S il y a un vide entre le tube lectrode et son logement dans le raccord de la jonction un volume d chantillon inerte risque de se produire 2 Resserrer l crou de retenue Ne pas croiser le filetage ni trop resserrer l crou de retenue sous peine d entra ner une fuite du tube 3 Aligner le tube lectrode sur l ouverture troite du tube pulv risateur puis ins rer le raccord de la jonction PEEK et le tube lectrode connect dans la sonde Veiller ne pas tordre le tube lectrode 4 S assurer que le ressort est toujours l int rieur de la sonde puis serrer le capuchon d ajustement de l lectrode 5 Ins rer la sonde dans la tour en vitant tout contact de la pointe de la sonde avec une quelconque partie du logement de la source d ions 6 Pousser vers le bas l anneau de retenue en bronze pour engager son filetage sur celui du logement de la source d ions puis serrer l anneau 7 Fileter la ligne d entr e de l chantillon avec la bague de serrage dans le raccord de la jonction PEEK situ au dessus de la sonde 8 Serrer l crou du tube chantillon avec les doigts Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 30 sur 72 Maintenance de la source d ions 9 Installer la source d ions sur le spectrom tre de masse Voir Installer la source d ions page 11 10 R gler
72. rmances de la sonde APCI R gler la valeur du param tre GS1 comme requis pour obtenir des performances optimales 2 Taper 20 dans le champ lon Source Gas 2 GS2 Gaz 2 de la source d ions 7 Remarque Le gaz 2 est utilis comme gaz n buliseur pour la sonde APCI 3 Taper 20 dans le champ Curtain Gas CUR 4 Taper 4500 dans le champ lonSpray Voltage Floating ISVF Tension flottante lonSpray ou lonSpray Voltage IS Tension lonSpray Optimiser les param tres Gas 1 Gaz 1 Gas 2 Gaz 2 et Curtain Gas Flow Flux Curtain Gas 1 R gler les valeurs GS1 et GS2 par incr ments de 5 de mani re obtenir le meilleur signal ou rapport signal bruit possible 2 Augmenter la valeur CUR jusqu ce que le signal commence diminuer gt Remarque Pour viter toute contamination utiliser la valeur CUR la plus al lev e possible sans pour autant sacrifier la sensibilit Ne pas r gler la F valeur CUR en dessous de 20 R gler la position de l aiguille de d charge par effet corona Lors de l utilisation de la sonde APCI s assurer que l aiguille de d charge par effet corona est orient e vers l ouverture Mat riel requis Tournevis plat AVERTISSEMENT Risque d lectrocution suivre cette proc dure pour viter tout contact avec les hautes tensions appliqu es sur l aiguille de d charge par effet corona et la plaque rideau 1 Utiliser un tournevis plat pour tourner la vis e
73. roduire un flux de solvant avant de v rifier que la source d ions a atteint la temp rature correcte 1 S assurer que le spectrom tre de masse a t optimis l aide de la source d ions par d faut 2 Retirer toute autre source d ions install e sur le spectrom tre de masse et installer la source d ions Turbo V 3 Configurer la pompe HPLC pour distribuer 1 ml min de la phase mobile 4 Raccorder la jonction de mise la terre de la source d ions une pompe par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 5 Dans le logiciel Analyst TF en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tune R glage manuel 6 Utiliser une m thode et des param tres optimis s pr c demment ou r gler les param tres comme illustr dans tableau 6 4 Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 47 sur 72 Tests de la source d ions Tableau 6 4 Param tres de la m thode Param tre Valeur Param tres MS Scan Mode Mode d analyse Product lon lon produit High Sensitivity Haute Activ sensibilit syst mes 5600 5600 uniquement Product Of Produit de 609 2807 TOF Masses Masses TOF 150 Da 650 Da Accumulation time 0 100 secondes Temps d accumulation Duration minutes Dur e 10 Param tres de la source et du gaz lon Source Gas1 GS1 30 Gaz 1 de la source d ions lon Source
74. rte la r f rence 1038888 Les consommables et les pi ces de rechange sont illustr es dans les figure B 1 page 60 figure B 3 page 61 Tableau B 1 Consommables R f rence Description Quantit D tails 016316 TUBE DE 1 16 X ORIFICE cm Tubulure PEEK rouge orifice de 0 005 0 005 016325 RACCORD PEEK 10 32 X 1 16 1 Raccord PEEK marron 016485 TUBE PEEK DE 1 16 DI cm Tubulure PEEK chair orifice de 0 0025 0 0025 019675 RACCORD INSERT ENT 1 Insert en T orifice de 0 25 mm ORIFICE 0 25 025388 LECTRODE N 1 lectrode APCI 025392 LECTRODE T 1 lectrode TurbolonSpray Tableau B 2 Pi ces de rechange R f rence Description Quantit D tails 027947 FRU KIT AIGUILLE NEB 1 Aiguille de d charge par effet corona Guide de l op rateur 027950 FRU KIT LECTRODE N B 1 Kit d lectrode APCI 1003263 FUSIBLE 4 A 250 V 5X20 1 Fusible F3 temporis T4A 250 V TEMPORISE 5 mm x 20 mm Non utilis avec les syst mes Triple TOF 4600 et 5600 5600 d AB SCIEX 027460 OPT ENS N B 1 Ensemble de la sonde APCI 027461 OPT ENS TURBO 1 Ensemble de la sonde TurbolonSpray Source d ions Turbo V 59 sur 72 Consommables et pi ces de rechange Figure B 1 Consommables pour la source d ions l ment Description 1 Tubulure PEEK r f 016316 ou 016485 Figure B 2 Ensemble
75. s sp cifications de test des sondes et les param tres du spectrom tre de masse se reporter aux Caract ristiques de la source d ions AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels utiliser la source d ions seulement si vous avez les qualifications et la formation appropri es et si vous connaissez les r gles A de confinement et d vacuation des mat riaux toxiques ou nuisibles utilis s avec la source d ions Toute substance toxique ou nocive introduite dans cet quipement sera pr sente dans la source d ions et sa sortie d vacuation AVERTISSEMENT Risque de toxicit chimique porter un quipement de protection personnelle un masque respiratoire dot d un filtre des gants et des lunettes de protection afin d viter toute exposition de la peau et des yeux l ac tone au m thanol et l isopropanol et ne pas ing rer ces produits chimiques AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels en cas de d versement de produits chimiques se reporter aux fiches de donn es sur la s curit des produits pour obtenir les instructions sp cifiques N arr ter l coulement ou la fuite que si cela est possible en toute s curit Utiliser un quipement de protection personnelle appropri et des tissus absorbants pour contenir le d versement et mettre au rebut conform ment aux r glementations locales Pr paration des te
76. sation par l aiguille de d charge par effet corona Les tampons sont facilement tol r s par la source d ions sans contamination importante et la Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 8 sur 72 Pr sentation de la source d ions vaporisation instantan e de l effluent pulv ris permet d utiliser jusqu 100 d eau sans difficult La sonde APCI consiste en un tube d acier inoxydable de 100 um 0 004 de diam tre int rieur DI entour d un flux de gaz n buliseur Gaz 1 Le flux de l chantillon liquide est pomp travers le pulv risateur o il est n bulis dans un tube en c ramique contenant un chauffage La paroi interne du tube en c ramique peut tre maintenue une temp rature de 100 C 750 C et est contr l e par le capteur int gr dans le chauffage Un jet haute vitesse de gaz n buliseur circule autour de la pointe de l lectrode pour disperser l chantillon en un brouillard de fines particules Il se d place travers le chauffage de vaporisation en c ramique dans la r gion de r action de la source d ions au del de l aiguille de d charge par effet corona o les mol cules de l chantillon sont ionis es quand elles traversent le logement de la source d ions Voir Principes de fonctionnement page 51 AVERTISSEMENT Risques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels s assurer que la pointe de l lectrode s tend au del de la pointe de la sonde afin d
77. ssurer que le spectrom tre de masse a t optimis l aide de la source d ions par d faut 2 Retirer toute autre source d ions install e sur le spectrom tre de masse et installer la source d ions Turbo V 3 Configurer la pompe HPLC pour distribuer 0 2 ml min en phase mobile 4 Raccorder la jonction de mise la terre de la source d ions une pompe par le biais d un injecteur quip d une boucle de 5 pl ou auto chantillonneur 5 Dans le logiciel Analyst TF en mode Tune and Calibrate R glage et calibrage double cliquer sur Manual Tune R glage manuel 6 Utiliser une m thode et des param tres optimis s pr c demment ou r gler les param tres comme illustr dans tableau 6 3 Tableau 6 3 Param tres de la m thode Param tre Valeur Param tres MS Scan Mode Mode d analyse Product lon lon produit High Sensitivity Haute sensibilit Activ syst mes 5600 5600 uniquement Product Of Produit de 609 2807 TOF Masses Da Masses TOF 150 650 Accumulation time secondes Temps 0 200 d accumulation Duration minutes Dur e 10 Param tres de la source et du gaz Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 45 sur 72 Tests de la source d ions Tableau 6 3 Param tres de la m thode Suite Param tre Valeur lon Source Gas 1 Gaz 1 de la source 50 d ions GS1 lon Source Gas 2 GS2 Gaz 2 de la 50 source d ions Curtain Gas flow CUR
78. sts Pr parer le mat riel suivant pour effectuer les tests de performance Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 919 39 sur 72 Tests de la source d ions Mat riel requis M thanol de qualit LC MS Eau d ionis e de qualit HPLC Solvant en phase mobile solution d ac tonitrile et d eau 70 30 Solution de test 0 0167 pmol ul quivalent 10 pg yl de r serpine en phase mobile Pour les syst mes quadripolaires triples et QTRAP utiliser la solution de 0 0167 pmol ul de r serpine pr dilu e fournie dans le kit de chimie standard AB SCIEX r f 4406127 Pour les syst mes TripleTOF 4600 et 5600 5600 pr parer la solution de test partir de la solution de 0 167 pmol ul de r serpine et du diluent standard fourni dans le kit de chimie du syst me AB SCIEX TripleTOF r f 4456736 Pompe HPLC pour phase mobile _Injecteur manuel 8125 Rheodyne ou quivalent avec une boucle de 5 ul ou un auto chantillonneur r gl sur des injections de 5 Ll Tubulure PEEK 1 16 avec un diam tre ext rieur de 0 005 pouces Source d ions avec sonde install e Seringue de 250 ul 1000 Ll Lunettes de protection Gants non poudr s nitrile recommand e Blouse de laboratoire Se reporter toutes les fiches de donn es de s curit applicables pour conna tre les pr cautions prendre avant de manipuler des produits chimiques ou des solvants Avant d effectuer le test l utilisat
79. tilis pour positionner la sonde sur l axe horizontal en vue de r gler la sensibilit de la source d ions Jonction de mise la terre 5 L un des deux loquets de la source qui la s curisent dans le spectrom tre de masse 6 Broche de guidage 7 Port de la fen tre 8 Chauffage turbine 9 Anneau de retenue en bronze 10 Microm tre utilis pour positionner la sonde sur l axe vertical en vue de r gler la sensibilit de la source d ions 11 Capuchon d ajustement de l lectrode 12 crou du tube chantillon Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 6 sur 72 Pr sentation de la source d ions Sondes Les sondes TurbolonSpray et APCI fournissent un ventail de possibilit s pour tester les chantillons Choisir la sonde et la m thode les plus appropri es pour le compos dans le flux de l chantillon Tableau 1 1 Caract ristiques de la source d ions Param tre Sonde TurbolonSpray Sonde APCI Plage de temp ratures Temp rature de la sonde depuis la Temp rature de la sonde de la source d ions temp rature ambiante 750 C en de 50 C 750 C en fonction du d bit du liquide fonction du d bit du liquide Chromatographie en Interfaces pour tout syst me de chromatographie en phase liquide phase liquide Gaz n buliseur Gaz 1 Voir le Site Planning Guide Guide de planification du site du Gaz chauffant Gaz 2 spectrom tre de masse La sonde TurbolonSpray produit des ions pa
80. tr s la surface du liquide peuvent tre d tect s tr s finement Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 52 sur 72 Principes de fonctionnement Mode APCI Les incompatibilit s qu impliquait par le pass l association de la chromatographie en phase liquide avec la spectrom trie de masse taient dues aux difficult s observ es lors de la conversion des mol cules relativement non volatiles de la solution liquide en gaz mol culaire sans provoquer de d composition excessive Le processus de la sonde APCI de n bulisation douce de l chantillon dans un pr cipit de gouttelettes finement dispers es dans un tube chauff en c ramique permet une vaporisation rapide de l chantillon de sorte que les mol cules de ce dernier ne se d composent pas Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 53 sur 72 Principes de fonctionnement H30 H0 Figure A 2 diagramme du flux de la r action APCI La figure A 2 montre la r action du flux de l ionisation chimique pression atmosph rique APCI pour des ions positifs r actifs hydrates de proton H3O H20O Les principaux ions primaires N O2 H O et NO sont form s par l impact d lectrons cr s par une d charge corona sur les composants neutres majeurs de l air Bien que NO ne soit pas habituellement un des principaux constituants de l air sa concentration dans la source est augment e par les r actions de neutralit initi es par la d char
81. un angle de 45 de l un et l autre c t de la sonde La combinaison des effluents de l lonSpray et le gaz sec chauff sortant des chauffages turbine sont projet s un angle de 90 par rapport l ouverture de la plaque rideau Seuls les compos s qui ionisent dans le solvant liquide peuvent tre g n r s en ions en phase gazeuse dans la source L efficacit et la vitesse de production des ions d pendent de l nergie de solvatation des ions sp cifiques Les ions dont l nergie de solvatation est basse sont plus sujets l vaporation que ceux dont l nergie de solvatation est sup rieure L interaction entre l IonSpray et les chauffages turbine contribue concentrer le flux TurbolonSpray et augmente la vitesse d vaporation des gouttelettes entra nant alors l intensification du signal d ionisation Le gaz chauff augmente l efficacit de l vaporation des ions ce qui entra ne une augmentation de la sensibilit et un meilleur contr le du d bit des chantillons liquides Une grande vitesse de d bit de gaz n buliseur s pare les gouttelettes du flux de l chantillon liquide dans l admission de l lonSpray En utilisant la haute tension variable appliqu e au pulv risateur la source d ions applique une charge nette chaque gouttelette cette charge facilite la dispersion des gouttelettes Les ions polarit simple sont attir s de pr f rence dans les gouttelettes par la haute tension mesure qu ils
82. urfaces de la source d ions chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance Arr ter toutes les analyses lectroniques en cours Arr ter le flux de l chantillon Taper 0 dans le champ Temperature TEM Temp rature si les chauffages sont en cours d utilisation Laisser la source d ions refroidir pendant au moins 20 minutes D brancher le tube chantillon de la jonction de mise la terre Tourner vers le haut les deux loquets de la source d ions afin de d gager cette derni re loigner d licatement la source d ions de l interface de d pression Placer la source d ions dans un endroit propre et s r Guide de l op rateur Source d ions Turbo V 27 sur 72 Maintenance de la source d ions Retirer la sonde La sonde peut tre retir e rapidement et facilement sans outils Toujours retirer la source d ions du spectrom tre de masse avant de changer les sondes ou d effectuer la moindre maintenance sur la sonde chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance spectrom tre de masse avant de commencer la moindre proc dure de A AVERTISSEMENT Risque d lectrocution d connecter la source d ions du maintenance
83. urs dangereuses en cas d inhalation et susceptibles de provoquer un incendie A AVERTISSEMENT Risque d incendie et de toxicit chimique tenir le m thanol Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 28 sur 72 Maintenance de la source d ions protection personnelle un masque respiratoire dot d un filtre des gants et des lunettes de protection afin d viter toute exposition de la peau et des yeux l ac tone au m thanol et l isopropanol et ne pas ing rer ces produits chimiques A AVERTISSEMENT Risque de toxicit chimique porter un quipement de AVERTISSEMENT Risque de perforations manipuler le tube lectrode avec pr cautions Sa pointe est extr mement coupante reporter aux fiches de donn es sur la s curit des produits pour obtenir les instructions sp cifiques N arr ter l coulement ou la fuite que si cela est possible en toute s curit Utiliser un quipement de protection personnelle appropri et des tissus absorbants pour contenir le d versement et mettre au rebut conform ment aux r glementations locales AVERTISSEMENT lRisques d irradiation biologiques ou de toxicit chimique potentiels en cas de d versement de produits chimiques se 1 Retirer la source d ions du spectrom tre de masse Voir Retirer la source d ions page 27 Retirer la sonde de la source d ions Voir Retirer la sonde page 28 3 Retirer le capuchon d ajustement de l lectrode Tout en
84. urveillant la fen tre 50 mDa autour de la masse d quilibrage de lion fragment m z 195 Source d ions Turbo V Guide de l op rateur 46 sur 72 12 13 14 15 16 17 Tests de la source d ions Conseil Le fabricant recommande de remplir avec exc s la boucle de 5 ul avec 30 Ll 40 Ul de la solution I R p ter l op ration tape 11deux autres fois et noter l intensit moyenne des trois injections Imprimer une copie des r sultats Passer en revue la copie imprim e des r sultats Confirmer que les trois injections de la solution de 0 0167 pmol ul de r serpine sont acceptables Voir les Caract ristiques de la source d ions correspondant au spectrom tre de masse utilis si n cessaire Si les performances de la source d ions se sont d grad es consid rablement se reporter D pannage page 35 Apr s avoir termin les tests arr ter la pompe LC et r gler la temp rature sur 0 Tester la sonde APCI Pour plus d informations sur l installation ou l optimisation de la source d ions se reporter Installer la source d ions page 11et Optimisation de la source d ions page 15 chauffent pendant le fonctionnement Laisser la source d ions refroidir pendant A AVERTISSEMENT Risque de surface chaude les surfaces de la source d ions au moins 20 minutes avant de commencer la moindre proc dure de maintenance Attention Dommage potentiel sur l quipement ne pas int

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