THROMBOPLASTIN
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1. Centrifuger 10 minutes 2500g Les chantillons sont stables 4 heures apr s collecte temp rature ambiante 15 25 C La collecte sur tube Citrate Hepes permet d augmenter la stabilit de l chantillon jusqu 8 heures INTERFERENCES Ce test est prot g contre l influence de l h parine par un inhibiteur de l h parine La contamination de l chantillon par de la thromboplastine ou par h molyse peut entrainer un raccourcissement des temps de coagulation Appliquer les ratios indiqu s sang anticoagulant voir ci dessus Ajuster le volume d anticoagulant dans le cas d h matocrite tr s anormal Pour une revue plus approfondie des facteurs influen ant ce dosage se r f rer la publication de Young D S EQUIPEMENT ET REACTIFS COMPLEMENTAIRES Appareillage g n ral de laboratoire Analyseur de coagulation ou chronom tre et bain marie 37 C 0 5 Plasma de r f rence Plasmas de contr le PRECAUTIONS DE SECURITE Les r actifs ABLIANCE sont destin s un usage professionnel pour diagnostic in vitro Les bonnes pratiques de laboratoire doivent tre appliqu es lors de la manipulation des r actifs plasmas de r f rence ou de contr les et chantillons de patients manipuler comme potentiellement infectieux Pour plus d information les fiches de donn es de s curit sont disponibles sur demande Elimination des d chets respecter la l gislation en vigueur ABLIANCE SA2. de cerveau de lapin REAG R2 Tampon de reconstitution Tampon Hepes Calcium BUF PREPARATION DES REACTIFS R actif de travail Ouvrir un flacon de R1 et un flacon de R2 Ajouter rapidement au contenu du flacon R1 le volume de R2 indiqu sur l tiquette du flacon R1 Boucher le flacon et m langer doucement le flacon de R1 jusqu dissolution compl te en vitant la formation de mousse Porter 37 C le volume n cessaire de R1 pendant 15 minutes avant de commencer le test Stocker imm diatement les volumes restants de R1 et R2 bien rebouch s 2 8 C STABILITE ET STOCKAGE Les flacons non ouverts stock s 2 8 C sont stables jusqu la date de p remption indiqu e sur l tiquette R1 apr s reconstitution le r actif est stable 5 jours 2 8 C ou 7 heures 37 C R2 une fois ouvert si stock 2 8 C et exempt de contamination le contenu du flacon R2 est stable jusqu la date de p remption indiqu e sur l tiquette Jeter tout r actif trouble Rejeter tout r actif Si la date d expiration est d pass e Si les valeurs des contr les sont en dehors des tol rances COLLECTE ET MANIPULATION DES ECHANTILLONS Plasma collect avec pr caution par ponction veineuse sous anticoagulant ratio 1 10 solution de Citrate trisodique 0 109M M langer imm diatement le sang et l anticoagulant Evitez tout pr l vement la seringue qui pourrait entrainer la formation de micro caillots
3. CE Usage Diagnostic In Vitro REF PTO2 R1 5x2 mL R2 1 x12 mL PTO5 R1 10 x 5 mL R2 1 x 60 mL Fabriqu en France Version 18 12 2014 PRINCIPE DE LA METHODE M thode de Quick et al La thromboplastine tissulaire et le calcium sont ajout s au plasma citrat activant ainsi les facteurs du syst me de coagulation extrins que contenus dans le plasma Le temps de coagulation temps de formation du caillot de fibrine est mesur 37 C SIGNIFICATION CLINIQUE 5 7 Le taux de prothrombine est utilis comme test de d pistage pour la d tection des troubles de la voie extrins que de la coagulation Les r sultats en secondes sont convertis en afin d valuer l activit prothrombinique d un patient par rapport un plasma de r f rence consid r comme gal 100 Une activit prothrombinique d ficiente peut se rencontrer dans les cas suivants Maladie h patique Maladie h morragique du nouveau n _ D ficits cong nitaux en facteurs II V VII ou X __ Hypovitaminoses K administration th rapeutique d antivitamine K AVK Anticoagulants circulants Fibrinolyse Coagulation intravasculaire diss min e CIVD Les r sultats en secondes sont convertis en INR ratio international normalis dans le cas particulier de la surveillance des traitements par anticoagulants oraux antagonistes de la vitamine K REACTIFS R1 Thromboplastine Thromboplastine lyophilis e
4. S 21 quai du Clos des Roses 60200 Compi gne France REFiR f rence Catalogue Ci Consulter la notice Num ro de lot T 33 0 3 44 20 61 30 F 33 0 3 44 20 62 55 ee Abliance THROMBOPLASTIN R actif pour la d termination du taux de prothrombine TP dans le plasma humain CONTROLE DE QUALITE Au moins chaque s rie lors du changement de flacon de r actif ou apr s une maintenance de l analyseur il est recommand d utiliser 2 taux de plasma de contr le NP01 Plasmas de contr les normaux et pathologiques Ou tout autre plasma de contr le dos se r f rant la m me m thode Si les r sultats des contr les sont en dehors de la plage d finie proc der comme suit cons cutivement et jusqu correction r p tition du test avec des plasmas frais calibration avec un nouveau flacon de r actif utilisation d un nouveau flacon de plasma de r f rence s il y a lieu Si aucune solution n est trouv e contactez votre fournisseur local ou le support technique ABLIANCE VALEURS NORMALES 2 5 Les r sultats peuvent tre exprim s en TP sec TP ou TP INR TP sec les r sultats sont g n ralement entre 11 et 16 sec Les valeurs sont allong es chez le nouveau n et rejoignent les valeurs normales vers l ge de 6 mois TP Les r sultats compris entre 70 et 100 sont consid r s comme normaux TP INR Il est conseill chaque laboratoire d tablir ses propres valeurs de r f r
5. ence normales CALIBRATION D termination du MNPT temps de prothrombine normal moyen Utiliser un plasma de r f rence CAO pour estimer le MNPT Ou pr parer un pool de plasmas normaux citrat s fraichement collect s Mesurer en triplicate les temps de coagulation du plasma de r f rence et calculer la moyenne MNPT INR La valeur du MNPT et ISI Index international de sensibilit indiqu s dans le tableau sp cifique du lot g n ralement entre 1 1 et 1 3 peuvent tre utilis s pour calculer INR ou renseigner dans l analyseur PT D terminer le MNPT et utiliser la table de calcul comme indiqu au CALCUL Ou Utiliser un set de calibration et mesurer en triplicate les temps de coagulation de chaque niveau Tracer la courbe de calibration sur papier millim tr ou entrer la moyenne des temps de coagulation pour chaque niveau et les PT correspondant dans l analyseur PERFORMANCES R sultats des tudes de performance sur Thrombolyzer Compact X R p tabilit intra s rie Moyenne PT sec 13 1 CVS 0 7 n 32 Moyenne PT sec 29 4 CV 1 6 n 32 Moyenne PT sec 43 4 CV 2 n 32 Reproductibilit inter s rie Moyenne PT sec 13 4 CV 1 3 n 17 Moyenne PT sec 29 6 CV 2 5 n 17 PROCEDURE M thode Semi automate et automate Consulter le manuel d utilisation de l instrument M thode manuelle Pr incuber le r actif 37 C M langer doucement le r actif R1 avant de pip
6. eter Plasma 100pL Incuber 2 minutes 37 C Thromboplastine pr incub e 37 C 200pL M langer et incuber 3 min 37 C D clencher un chronom tre imm diatement et noter le temps n cessaire la formation du caillot en secondes CALCUL 5 PT sec indiquer les r sultats des patients en secondes et le temps de r f rence trouv pour le MNPT PT Consulter la table de calcul jointe s lectionner la colonne correspondant au MNPT trouv Identifier la ligne qui correspond au r sultat sec du patient et se r f rer la valeur indiqu e dans la colonne PT PT INR calculer l INR comme suit INR Temps du patient MNPT REFERENCES 1 Caen J Larrieu M Samama M L h mostase M thodes d exploration et diagnostic pratique Paris L Expension Scientfique p 344 347 1975 2 Clinical Guide to Laboratory Test 3 Ed N W TIETZ 1995 p 526 529 3 YOUNG D S Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests 4 Ed 1995 p 3 513 3 517 4 Quick A J J Am Assoc 1938 110 p 1658 1662 5 Duckert F Marbet G A M d et Hyg 1977 35 p 911 6 Goguel A F Feuillets de Biologie 1985 36 146 p 25 28 7 Houbouyan Reveillard et al Spectra biologie 2003 vol 22 n 132 p 33 37 8 Neofotistos D Oropeza M Ts ao C H Stability of plasma for add on PT and PTT tests Am J Clin Pathol 109 6 758 763 1998 ial Fabricant Li
7. mites de temp rature s utilis avant Diagnostic In Vitro Diluer avec info abliance com www abliance com
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