REF 30 419 VIDAS®TOTAL IgE (IGE)
Contents
1. Pr ts l emploi 1 x 2 ml liquide Calibrateur IGE 1 x 2 ml liquide Diluant IGE 1x5ml Pr t l emploi Le c ne usage unique sert la fois de phase solide et de syst me de pipetage Les autres r actifs de la r action immunologique sont pr ts l emploi et pr r partis dans la cartouche Toutes les tapes du test sont r alis es automatiquement par l instrument Elles sont constitu es d une succession de cycles d aspiration refoulement du milieu r actionnel Dans une premi re tape l chantillon est pr lev puis transf r dans le puits contenant l anticorps anti IgE marqu la phosphatase alcaline conjugu Le m lange chantillon conjugu est aspir et refoul plusieurs fois dans le c ne afin d augmenter la vitesse de r action Cette op ration permet aux IgE de se lier d une part aux immunoglobulines fix es sur le c ne et d autre part au conjugu formant ainsi un sandwich Des tapes de lavage liminent les compos s non fix s Lors de l tape finale de r v lation le substrat 4 M thyl ombelliferyl phosphate est aspir puis refoul dans le c ne l enzyme du conjugu catalyse la r action d hydrolyse de ce substrat en un produit 4 M thyl ombelliferone dont la fluorescence mise est mesur e 450 nm La valeur du signal de fluorescence est proportionnelle la concentration en IgE pr sente dans l chantillon la fin du test les r sultats sont calcul2. contact avec les yeux laver imm diatement et abondamment avec de l eau et consulter un Pour plus d informations consulter la fiche de donn es s curit disponible sur demande MATERIELS ET CONSOMMABLES NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS Pipette embout jetable permettant la distribution de 100 ul Gants non talqu s usage unique Pour d autres mat riels et consommables sp cifiques se r f rer au Manuel Utilisateur de l instrument Instrument de la famille VIDAS PRECAUTIONS D UTILISATION e Pour diagnostic in vitro uniquement e Pour usage professionnel uniquement e Ce coffret contient des composants d origine humaine Aucune des m thodes d analyse actuellement connues ne peut garantir de fa on absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathog ne transmissible Il est recommand de les manipuler avec les pr cautions d usage relatives aux produits potentiellement infectieux se reporter au Manuel de S curit Biologique en Laboratoire OMS Gen ve derni re dition Ce coffret contient des composants d origine animale La ma trise de l origine et ou de l tat sanitaire des animaux ne pouvant garantir de fa on absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathog ne transmissible il est recommand de les manipuler avec les pr cautions d usage relatives au produits potentiellement infectieux ne pas ing rer ne pas inhaler e Ne pas utiliser les c nes dont le sache
3. en 30 minutes environ la fin de l analyse retirer les c nes et les cartouches de l instrument RESULTATS ET INTERPRETATION D s le test termin les r sultats sont analys s automatiquement par le syst me informatique L instrument effectue deux mesures de fluorescence dans la cuvette de lecture pour chacun des tests La premi re lecture prend en compte le bruit de fond d la cuvette substrat avant mise en contact du substrat avec le c ne La seconde lecture est effectu e apr s incubation du substrat avec l enzyme pr sente dans le c ne Le calcul de la RFV est le r sultat de la diff rence des deux mesures appara t sur la feuille de r sultats Les r sultats sont calcul s automatiquement par l instrument par rapport une courbe de calibration m moris e mod le math matique mod le logistique 4 param tres et sont exprim s en KIU d apr s l talon international 2nd IRP 75 502 Les chantillons pr sentant des concentrations en IgE sup rieures 1 000 KIU I doivent tre redos s apr s dilution au 1 10 voire au 1 100 dans le diluant IGE R1 Si le facteur de dilution n a pas t saisi lors de la cr ation de la liste de travail voir Manuel d Utilisation multiplier le r sultat par le facteur de dilution pour avoir la concentration de l chantillon L interpr tation des r sultats du test doit tre faite en tenant compte du contexte clinique et ventuellement des r sultats d autre
4. s automatiquement par l instrument par rapport une courbe de calibration m moris e puis imprim s C nes sensibilis s par des immunoglobulines monoclonales de souris anti IgE S rum de cheval IgE humaine m tacr sol 1 4 g l L intervalle de confiance en KIU I kilo unit internationale par litre est indiqu sur la carte MLE avec la mention Control C1 Dose Value Range S rum de cheval IgE humaine m tacr sol 1 4 g l Le titre en KIU I est indiqu sur la carte MLE avec la mention Calibrator S1 Dose Value L intervalle de confiance en Relative Fluorescence Value est indiqu sur la carte MLE avec la mention Calibrator S1 RFV Range S rum de cheval m tacr sol 1 4 g l 1 Carte MLE Master Lot Entry Sp cifications des donn es usine n cessaires la calibration du test se r f rer au Manuel Utilisateur pour la lecture 1 Notice Le c ne Le c ne est sensibilis au moment de la fabrication par des immunoglobulines monoclonales de souris anti IgE Chaque c ne est identifi par le code IGE Utiliser uniquement le nombre de c nes n cessaire et laisser les c nes inutilis s dans leur sachet Refermer compl tement le sachet apr s ouverture bioM rieux SA La cartouche La cartouche est compos e de 10 puits recouverts d une feuille d aluminium scell e et tiquet e L tiquette comporte un code barres reprenant principalement le code du test le num ro de lot e
5. REF 30 419 VIDAS TOTAL IgE GE 06932 H fr 2010 05 D VIDAS TOTAL IgE est un test quantitatif automatis sur les instruments de la famille VIDAS permettant la d termination immunoenzymatique des IgE totales humaines dans le s rum ou le plasma humain h parinate de lithium ou EDTA par technique ELFA Enzyme Linked Fluorescent Assay INTRODUCTION ET OBJET DU TEST 1 9 Depuis leur d couverte par les quipes d Ishizaka K et T et de Johannsen et Bennich en 1967 les IgE ont t associ es l hypersensibilit imm diate de type I Les individus atopiques peuvent en effet produire des quantit s mod r ment lev es d IgE apr s exposition des allerg nes sp cifiques Une l vation anormale des IgE s riques totales peut galement tre observ e dans des affections non allergiques telles que parasitoses notamment les helminthiases n phropathies d ficits immunitaires et affections n oplasiques incluant entre autres le syndrome de Wiskott Aldrich la maladie de Hodgkin le my lome IgE dermatoses pemphigus psoriasis pityriasis rubra pilaire VIDAS TOTAL IgE est un test d aide au diagnostic des affections allergiques PRINCIPE Le principe du dosage associe la m thode immunoenzymatique sandwich une d tection finale en fluorescence ELFA COMPOSITION DES REACTIFS DU COFFRET 60 TESTS 60 cartouches IGE 60 c nes IGE 2 x 30 Contr le IGE Pr tes l emploi
6. ia and Wiskott Aldrich Syndrome J Immunol 1972 109 2 304 310 PAUPE J Chapitre 33 Tests biologiques in vitro in ALLERGOLOGIE CHARPIN I 27 dition Flammarion M decine Sciences 1989 326 338 ISBN 2 12279 257 8 LAURENT J NOIROT C ANSQUER C et al Comment d finir le taux normal des IgE s riques chez l adulte Ann Med lnterne 1985 vol 136 n 5 p 419 422 06932 H fr 2010 05 TABLE DES SYMBOLES Symbole Signification R f rence du catalogue Dispositif m dical de diagnostic in vitro EE Limites de temp rature g pem Contenu suffisant pour n tests BIOMERIEUX le logo bleu VIDAS et SPR sont des marques utilis es d pos es et ou enregistr es appartenant bioM rieux SA ou lune de ses filiales Les autres marques et noms de produits mentionn s dans ce document sont des marques commerciales de leurs d tenteurs respectifs Mal bioM rieux SA M IRIEUX cs LYON 673 620 399 69280 Marcy l Etoile France T l 33 0 4 78 87 20 00 Fax 33 0 4 78 87 20 90 wwWw biomerieux com Imprim en France
7. ibilit inter essai Cinq chantillons ont t dos s en simple sur un m me VIDAS sur une p riode de 7 semaines _Echantilon 1 2 73 4 57 Concentration 56 2 280 8 445 0 639 6 895 6 moyenne KIU 1 cv 37 32 80 51 507 Trois chantillons ont t dilu s dans le diluant IGE et dos s en simple dans 3 s ries La concentration moyenne mesur e rapport e la concentration attendue est exprim e en pourcentage de r cup ration moyen Echantillons Facteur dilution Comparaison avec une autre m thode de dosage Une corr lation a t tablie entre le coffret VIDAS TOTAL IgE et un autre coffret commercialis VIDAS TOTAL IgE 1 209 X 15 9 r 0 995 n 196 REACTIONS CROISEES ET INTERFERENCES Il n y a pas de r action crois e avec les autres immunoglobulines pour les IgG jusqu 19 g l pour les IgM jusqu 30 g l pour les IgA jusqu 40 g l bioM rieux SA Concentration de moyenne attendue KIU 1 Concentration moyenne mesur e KIU 1 Pourcentage de r cup ration moyen ELIMINATION DES DECHETS Eliminer les r actifs utilis s ou non utilis s ainsi que les mat riels usage unique contamin s en suivant les proc dures relatives aux produits infectieux ou potentiellement infectieux Il incombe chaque laboratoire de g rer les d chets et les effluents qu il produit selon leur nature et leur dangerosit et d en assurer ou faire assurer le
8. rs 150 KIU I De ce fait il a t recommand chaque laboratoire d tablir ses propres valeurs de r f rence sur une population rigoureusement s lectionn e Chez les enfants Les valeurs usuelles d termin es lors d une valuation sur un site ext rieur sont en accord avec la bibliographie et sont pr sent es dans le tableau suivant Concentrations en IgE 0 lt 20 KIU I 20 gt lt 50 KIU I 50 lt 100 KIU I 100 gt 100 KIU I Age Nombre Nombre Y Nombre Nombre 10 mois 65 19 20 4 6 5 3 3 2 n 93 2 ans 27 31 4 20 23 3 16 18 6 23 26 7 n 86 K i B LE H K i i i i i 4 ans 10 20 4 10 20 4 n 49 5 10 ans 3 n 27 gt 10 ans 3 n 11 PERFORMANCES Effet crochet Les tudes de VIDAS TOTAL IgE ont donn les r sultats Aucun effet crochet n a t observ jusqu des suivants concentrations en IgE de 100 000 KIU I Limite de d tection analytique D finie comme tant la plus petite concentration en IgE significativement diff rente de la concentration z ro avec une probabilit de 95 0 5 KIU I bioM rieux SA Fran ais 4 VIDAS TOTAL IgE Pr cision Reproductibilit intra essai Cinq chantillons ont t dos s 30 fois dans une m me s rie _Echantillon 1772 3 4 57 Concentration 56 3 267 2 429 8 6099 918 2 moyenne KIU 1 45 58 38 47 37 Exactitude Test de dilution 06932 H fr 2010 05 Reproduct
9. rtains tests CONDITIONS DE STOCKAGE e Conserver le coffret VIDAS TOTAL IgE 2 8 C Ne pas congeler les r actifs e Laisser 2 8 C les r actifs non utilis s e l ouverture du coffret v rifier l int grit et la bonne fermeture du des sachet s de c nes Dans le cas contraire ne pas utiliser les c nes Fran ais 2 VIDAS TOTAL IgE e Apr s chaque utilisation refermer compl tement le sachet avec son d shydratant pour maintenir la stabilit des c nes et replacer la totalit du coffret 2 8 C e Tous les composants sont stables jusqu la date de p remption indiqu e sur l tiquette tui lorsqu ils sont conserv s dans les conditions pr conis es ECHANTILLONS Nature et pr l vement des chantillons S rum ou plasma pr lev sur h parinate de lithium ou EDTA Il est pr conis chaque laboratoire de valider le type de tube de pr l vement utilis L utilisation de s rums inactiv s par la chaleur n a pas t valid e Il n a pas t observ pour ce dosage d influence significative de l h molyse apr s surcharge d chantillons en h moglobine de 0 300 mol l de monom re de la lip mie apr s surcharge d chantillons en lipides de 0 2 g l d quivalent triglyc rides de la bilirubin mie apr s surcharge d chantillons en bilirubine de 0 275 pmol l Il est n anmoins conseill de ne pas utiliser d chantillons visiblement h moly
10. s en double voir Manuel d Utilisation La valeur du calibrateur doit tre comprise dans les limites de RFV Relative Fluorescence Value fix es Si ce n est pas le cas refaire une calibration bioM rieux SA 06932 H fr 2010 05 R alisation du test 1 Sortir uniquement les r actifs n cessaires les laisser 30 minutes temp rature ambiante avant utilisation 2 Utiliser une cartouche IGE et un c ne IGE pour chaque chantillon contr le ou calibrateur tester V rifier que le sachet de c nes a t referm compl tement apr s chaque utilisation 3 Le test est identifi par le code IGE sur l instrument Le calibrateur identifi obligatoirement par S1 doit tre utilis en double Si le contr le est test il est identifi par C1 4 Si clarifier les n cessaire chantillons par centrifugation 5 Homog n iser l aide d un agitateur de type vortex le calibrateur le contr le et les chantillons pour s rum ou plasma s par du culot pour une meilleure reproductibilit des r sultats 7 Placer dans l instrument les c nes IGE et les cartouches IGE V rifier la concordance des codes couleurs et lettres entre le c ne et la cartouche 8 D marrer l analyse voir Manuel d Utilisation Toutes les tapes sont alors g r es automatiquement par l instrument 9 Reboucher les flacons et les remettre 2 8 C apr s pipetage 10 Les r sultats sont obtenus
11. s s lip miques ou ict riques et d effectuer si possible un nouveau pr l vement Stabilit des chantillons Les chantillons peuvent tre stock s 2 8 C dans des tubes bouch s 5 jours au maximum au del congeler les s rums ou plasma 25 6 C Une tude r alis e sur des chantillons congel s pendant deux mois n a montr aucune influence sur la qualit des r sultats Eviter les cong lations et d cong lations successives MODE OPERATOIRE Pour des instructions compl tes se r f rer au Manuel d Utilisation de instrument Saisie des donn es MLE A l ouverture d un nouveau lot les sp cifications ou donn es usine doivent tre entr es dans l instrument l aide des donn es MLE Si cette op ration n tait pas effectu e avant de commencer les tests l instrument ne pourrait pas diter de r sultats Ces sp cifications ne sont entr es qu une seule fois pour chaque lot Il est possible de saisir les donn es MLE manuellement ou de fa on automatique en fonction de l instrument se r f rer au Manuel d Utilisation Calibration La calibration l aide du calibrateur fourni dans le coffret doit tre effectu e louverture de chaque nouveau lot apr s entr e des sp cifications du lot puis tous les 14 jours Cette op ration permet d ajuster la calibration chaque instrument et l volution ventuelle du r actif dans le temps Le calibrateur identifi par S1 sera analy
12. s tests Fran ais 3 VIDAS TOTAL IgE CONTROLE DE QUALITE Un contr le est inclus dans chaque coffret VIDAS TOTAL IgE Ce contr le doit tre utilis l ouverture de chaque nouveau coffret afin de v rifier l absence d alt ration des r actifs Chaque calibration doit tre galement v rifi e l aide de ce contr le Pour que l instrument puisse v rifier la valeur du contr le il faut l identifier par C1 06932 H fr 2010 05 Remarque Il est de la responsabilit de l utilisateur de s assurer que le contr le de qualit est mis en uvre conform ment la l gislation locale en vigueur LIMITE DU TEST Une interf rence peut tre rencontr e avec certains s rums contenant des anticorps dirig s contre des Si la valeur du contr le s carte des valeurs attendues les x nc composants du r actif c est pourquoi les r sultats de ce r sultats ne peuvent tre valid s test doivent tre interpr t s en tenant compte du contexte clinique et ventuellement des r sultats d autres tests VALEURS ATTENDUES Chez les adultes 10 11 Les tudes bibliographiques montrent qu il est assez difficile de fixer des valeurs normales pour le taux s rique des IgE La fa on de choisir l chantillon est tr s importante De plus le passage des IgE dans la circulation n est qu ph m re leur dur e de vie y tant courte A titre indicatif 80 de la population non atopique ont des taux inf rieu
13. t est perc e Ne pas utiliser de cartouches visiblement alt r es feuille aluminium ou plastique endommag e Ne pas utiliser les r actifs apr s la date de p remption indiqu e sur l tiquette tui e Ne pas m langer les r actifs ou consommables de lots diff rents bioM rieux SA e Ne pas utiliser de gants talqu s entra ner de faux r sultats pour immunoenzymatiques e Les r actifs du coffret contiennent un conservateur azoture de sodium susceptible de r agir avec les tuyauteries en plomb ou en cuivre et de former des azotures m talliques explosifs Il est recommand de rincer l eau tout rejet e Le tampon de lavage puits 8 de la cartouche contient un agent nocif di thanolamine 11 5 Prendre connaissance des phrases de risque R et des conseils de prudence S indiqu s ci dessus e Le substrat puits 10 de la cartouche contient un agent irritant di thanolamine 6 6 Prendre connaissance de la phrase de risque R et des conseils de prudence S cit s ci dessus e Les projections doivent tre trait es avec un liquide d tergent ou une solution d eau de Javel contenant au moins 0 5 d hypochlorite de sodium Se r f rer au Manuel d Utilisation pour liminer les projections sur ou l int rieur de l instrument Ne pas autoclaver de produit javellis e L instrument doit tre r guli rement nettoy et d contamin se reporter au Manuel d Utilisation le talc pouvant ce
14. t la date de p remption du coffret Le premier puits comporte une partie pr d coup e pour faciliter l introduction de l chantillon Le dernier puits est une cuvette permettant la lecture en fluorim trie Les diff rents r actifs n cessaires l analyse sont contenus dans les puits interm diaires Fran ais 1 VIDAS TOTAL IgE Description de la cartouche Conjugu 06932 H fr 2010 05 1 Puits chantillon immunoglobulines monoclonales de souris anti IgE marqu es la phosphatase alcaline azoture de sodium 0 9 g l 600 pl Tampon de lavage phosphate de sodium 0 01 mol l pH 7 4 azoture de sodium 1 g l 600 ul 300 pl R actif NOCIF Cuvette de lecture avec substrat 4 M thyl ombelliferyl phosphate 0 6 mmol l di thanolamine DEA 0 62 mol l soit 6 6 pH 9 2 azoture de sodium 1 g l Tampon de lavage di thanolamine 1 1 mol l soit 11 5 pH 9 8 azoture de sodium 1 g l 600 pl R 48 22 Nocif risques d effets graves pour la sant en cas d exposition prolong e par ingestion R 41 risque de l sions oculaires graves S26 en cas de contact avec les yeux laver imm diatement et abondamment avec de l eau et consulter un sp cialiste S 46 en cas d ingestion consulter imm diatement un m decin et lui montrer l emballage ou l tiquette R actif IRRITANT R 36 irritant pour les yeux S 26 sp cialiste en cas de
15. traitement et l limination selon les r glementations applicables Fran ais 5 VIDAS TOTAL IgE REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 10 11 CAPRON A DESSAINT J P CAPRON M et al From parasites to allergy a second receptor for IgE Immunology today 1986 7 1 15 18 DESSAINT J P BOUT D WATTRE P CAPRON A Quantitative determination of specific IgE antibodies to Echinococcus granulosus and IgE levels in sera from patients with hydatid disease Immunology 1975 29 813 823 GEHA R S Human IdE J Allergy Clin Immunol 1984 74 2 109 120 HALPERN G M Evaluation of in Vitro IgE Testing to Diagnose Atopic Diseases Clinical Reviews in Allergy 1989 7 23 48 JOHANSSON S G 0 BENNICH H WIDE L A new class of immunoglobulin in human serum Immunology 1968 14 265 272 LAGRUE G LAURENT J HIRBEC G et al Serum IgE in primary glomerular diseases Nephron 1984 36 5 9 LAGRUE G WIRQUIN E MORETTI J P HIRBEC G LAGRUE R GALLE P Etude des IgE s riques dans les n phropathies glom rulaires J Urol N phro 1974 80 795 801 VOGEL M STADLER B M Immunor gulation chez les atopiques Med et Hyg 1990 48 2311 2313 WALDMANN T A POLMAR S H BALESTRA S T et al Immunoglobulin E in immunologic deficiency diseases Il Serum IgE concentration of patients with Acquired Hypogammaglobulinemia Thymoma and Hypogammaglobulinemia Myotonic Dystrophy Intestinal Lymphangiectas
Download Pdf Manuals
Related Search