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ANALYSE ET JUSTICE

1. 1 sont assujettis au contr le de l Etat les instruments qui mesurent la concentration d alcool par analyse de l air alv olaire expir d nomm s ci apr s thylom tres les thylom tres peuvent mesurer outre la concentration d alcool thylique la concentration d autres alccols notamment d alcool m thylique ou isopropylique Art 4 le contr le pr vu l article 1 comprend 1 L approbation du mod le des instruments et du manuel d utilisation par le minist re charg de l industrie 2 La v rification primitive des instruments neufs ou r par s 3 Des v rifications p riodiques L Etat contr le donc les technologies de d pistage de l alcool mie aussi bien sur le plan de leur construction que de leur v rification et de leur utilisation Il M thodes de dosage d alcool Il 1 Ethylom tre Divers types d thylom tres sont adapt s des usages bien d finis La soci t Seres fabrique plusieurs mat riels parmi lesquels l thylom tre 679T homologu et scell par le Minist re de l Industrie apporte la preuve de la conduite en tat d ivresse au m me titre que l analyse sanguine L alcoodose 2 un thylotest lectronique homologu par le Minist re de la Sant est destin au d pistage de la conduite en tat d ivresse par les forces de l ordre Il remplace peu peu le ballon L alcoobar est un thylotest usage collectif mis la dis
2. L EPS est une m thode beaucoup plus rapide et efficace et permet d obtenir un dosage de meilleure pr cision sur la benzoylecgonine et la morphine L extrait d une puret interm diaire entre une simple extraction liquide liquide et la triple extraction propos e est cependant tr s satisfaisant pour des pr l vements de sang total tels que ceux r alis s dans le cadre de contr les routiers 28 II 3 Les cannabino des Le produit doser est le delta 9 t trahydrocannabinol THC principe psychoactif extrait des plants femelles de Cannabis Hormis l alcool et le tabac le Cannabis est la drogue la plus largement consomm e au monde Trois formes sont disponibles sur le march avec des concentrations en THC tr s variables l herbe 0 2 10 la r sine 5 20 et l huile 40 80 Le THC n est pas un alcalo de puisque la mol cule ne contient pas d atome d azote Dans le cadre des r flexions sur la d p nalisation les effets pharmacologiques du THC sont largement discut s mais 1l semble qu une seule cigarette soit capable de modifier la vigilance d un sujet pendant 24 heures Plusieurs tudes tant en France qu l tranger ont montr la pr valence du THC chez les conducteurs impliqu s dans des accidents de la route Ici encore c est une m thode de chromatographie gazeuse coupl e la spectrom trie de masse qui sera utilis e pour l identification et la quantification du delta9 THC et de son m tabolite princ
3. mes et le danger L autorit sanitaire saisie du cas fait proc der une enqu te sociale portant sur la vie familiale professionnelle et sociale de l int ress et un expert d sign r alise un examen m dical 1 2 L gislation anti alcoolique routi re taux 0 5 g l 0 8 g l d cret du 29 ao t 1995 passible d une contravention avec amende 900 Francs et retrait de 3 points du permis de conduire au del de 0 8 g l loi du 12 juillet 1978 Toute personne qui aura conduit un v hicule alors qu elle se trouvait m me en l absence de tous signes d ivresse manifeste sous l emprise d un tat alcoolique caract ris par la pr sence dans le sang d un taux d alcool 0 8 g 100 ou par la pr sence dans l air expir d un taux d alcool pur gal ou sup rieur 0 4 milligramme par litre sera punie d un emprisonnement d un mois un an et d une amende de 5000 10 000 francs ou de l une de ces deux peines seulement Ces v rifications sont obligatoires dans tous les cas de crime d lit ou accidents suivis de mort Lors d infraction au code de la route lors de contr les syst matiques ordonn s par le Procureur le lieu et la date sont pr cis s par le parquet 1 3 Proc dures de d pistage On distingue tout d abord I Alcootest marque Draeger changement de couleur l Ethylotest lectrode sp cifique l alcool M thode de d pistage et non d analyse Si l une ou l autre des deux techniques est
4. s par une seconde m thode Dans la pratique seule la GC MS pr sente suffisamment de sp cificit et de sensibilit pour tre retenue De plus les cheveux permettent une valuation de la s v rit de l impr gnation faible moyen ou grand consommateur A nsi par analyse segmentaire d coupage d une m che en segments de 2 cm il est possible d tablir le profil de la consommation de substances stup fiantes m dicamenteuses ou toxiques et de suivre son volution constante en diminution en augmentation En mai 1993 Washington sous l gide du National Institute of Standards and Technologies un groupe restreint d experts a propos que l on fixe le seuil de positivit pour une consommation d h ro ne ou de coca ne de 6 monoac tylImorphine ou de coca ne 1 ng mg l 4 Analyse des produits stup fiants Les produits stup fiants peuvent se pr senter sous plusieurs formes les plus couramment analys es sont les poudres par ex h ro ne coca ne les liquides par ex liquide contenu dans une seringue bouteille suspecte les comprim s g lules pastilles de nature inconnue par ex comprim s d ecstasy les plantes d termination de la teneur en THC Les objectifs des analyses de poudre sont rechercher les produits stup fiants identifier toutes les substances pharmacologiquement actives d terminer la concentration des produits stup fiants identifier les adjuvants ou les adult
5. 2 M thodes de d pistage rapide Les techniques analytiques utilis es lors de cette premi re approche sont pratiquement impos es par les contraintes propres aux contr les anti dopage e Volume de l chantillon d urine limit e Recherche syst matique sur tous les chantillons de l ensemble des substances prohib es e D tection des produits proscrits chaque niveau de concentration e N cessit d obtention rapide des r sultats Toutes les m thodes cit es pr c demment sont mises en uvre afin de pouvoir analyser sans proc dures de purification pr alables des matrices biologiques complexes Les diff rentes proc dures analytiques de tri et de d pistage concernent soit des classes rapides de substances dont les composants pr sentent des structures chimiques voisines soit des groupes de produits dont la d tection et la caract risation n cessitent la formation de d riv s d un certain type e Les produits stimulants Cette classe de substances h t rog nes contient une centaine de principes actifs d riv s de l amph tamine coca ne et d riv s m taboliques m socarb Ils sont tous analysables en GC sur colonnes capillaires de 25 m en programmation de temp rature et avec une d tection s lective sur des d tecteurs thermo oniques Ces substances sont caract ris es par leurs temps de r tention relatifs l talon interne employ diph nylamine Ce type d analyse permet la d tection d autres subs
6. cadre d une fen tre et un outil par exemple LA Le contact physique entre deux objets lt E Analyse de polym res de stup fiants ne Nous verrons de mani re d taill e l analyse des stup fiants dans la partie IV ARAARA ASS SERRE AARARANES SES E 8600 _ gt EU gt gt gt gt JAE gt gt gt gt gt gt CO R Hg 3 Comparason cei mentar R d une r sre PUR piolyvdayledutyrol provenunt du verre namin de ln vitrine d una bjostede carmigriul e u ut d un goial da plastleue d couvert sui k digue dician d une tron onneuse Buipacto b B DOSAGE DE L ALCOOL I Alcoolisme Aspects m dico l gaux La lutte contre l alcoolisme est trait e dans le livre III du Code de la Sant Publique lutte contre les fl aux sociaux Il convient de rappeler le r le majeur ou le r le associ l alcool dans la survenue des accidents routiers et des actes criminels et d lictuels D un point de vue l gislatif nous traiterons la loi de 1954 concernant les alcooliques dangereux la loi de l alcoolisme routier 1 1 Obligation de traitement pour les alcooliques dangereux pour autrui L Etat coordonne la pr vention et le traitement de l alcoolisme les d penses occasionn es sont la charge de l Etat Le signalement se fait par les autorit s administratives judiciaires ou sanitaires l occasion de poursuites judiciaires ou sur certificat d un m decin du service public d crivant les sympt
7. de drogues distinctes L avantage de cette m thode est la possibilit de d celer la pr sence d un vaste ventail de drogues la fois Son principal inconv nient est qu elle n cessite des instruments co teux et un analyste de laboratoire tr s exp riment La troisi me m thode combine la chromatographie en phase gazeuse et la spectrom trie de masse Cette technique consiste bombarder d lectrons un chantillon afin d obtenir une empreinte d une drogue pr cise Cette combinaison est consid r e comme la cr me des m thodes de d pistage en raison de son efficacit et de sa pr cision elle est la plus utilis e Les laboratoires proc dent de la mani re suivante 25 Diff rents tests de pr cipitation ou de coloration test du Marquis pour l h ro ne test de Thiocyanate de cobalt pour la coca ne test de Duquesnois pour le cannabis permettent de d terminer de mani re rapide mais non pr cise quel type de drogue le produit saisi appartient En utilisant les dosages par chromatographie sur couche mince ainsi qu un spectrom tre infrarouge le type de drogue est d termin la plupart des produits recherch s tant identifi s et dos s On identifie ensuite les sucres et les polyols par chromatographie en phase gazeuse mais apr s ac tylation de la poudre La spectrographie de masse permet de mettre en vidence certains produits encore incertains et d obtenir le profil des impuret s
8. du taux d alcool mie dans la partie consacr e aux analyses d chantillons biologiques L extraction aux solvants fond e sur la solubilit diff rentielle des constituants permet aussi de s parer par exemple certaines mati res grasses ou permet d identifier les liants contenus dans les peintures Mais la technique la plus utilis e pour s parer les constituants reste la chromatographie C est en effet la m thode la plus moderne et de plus elle est la fois utilisable en solution avec la chromatographie liquide et en milieu gazeux avec la chromatographie en phase gazeuse La chromatographie sera d crite plus en d tails ult rieurement Pour la d crire rapidement c est une m thode fond e sur la mobilit diff rentielle des constituants d un m lange se d pla ant dans un support sous l effet d un flux liquide ou gazeux La chromatographie sur couche mince qui se d roule en phase liquide utilise un milieu de migration tel que du papier ou du gel tandis que la chromatographie en colonnes utilise des tubes colonnes remplis d un milieu s parateur de type granuleux dans lequel se d place les substances On peut ainsi caract riser les colorants contenu dans les cosm tiques si la quantit de produit comme du rouge l vre ou de la poudre de riz est suffisante La chromatographie en phase gazeuse est r gie par le m me principe que son homologue liquide mais la phase mobile dans la colonne est ici un gaz sous pression On utilise
9. et se les injectent d j Le dopage et le contr le anti dopage sont des disciplines en pleine expansion Le contr le demande une connaissance scientifique de pointe du point de vue technologique Une collaboration multidisciplinaire s av re n cessaire pour mener bien ce projet 37 Bibliographie Sciences l gales et Police Scientifique J L Cl ment Masson 1997 Analytical Chemistry vol 62 N 23 December 1990 Critical Reviews in Analytical Chemistry 1991 Optoelectronics World November 1998 Analyse industrielle tome II Michel Cerr Tec et Doc OLE d cembre1998 Optoelectronics World Novembre 1998 Analytical chemistry News amp features Septembre 1 1996 Analyse industrielle tome II Michel Cerr Tec et Doc Analusis magazine 1993 v 21 n 5 Manuel Pratique de la Chromatographie en Phase Gazeuse J TRANCHANT Analyse industrielle I chap 2 4 M CERR JP Lafarge JM Delobelle I Pinard JP Saligot X Witz D Ba lloux C Tr guier Le dopage et sa r glementation Analusis Magazine Edition Science Elsevier 1994 V22 M8 M25 MF Grenier Loustalot Le dopage des sportifs L actualit chimique novembre d cembre 1998 N 11 12 p 3 8 Sites internet http www chemistry mnsu edu research ion_mobility http www ionpro com http www eecs wsu edu cwu http www zianet com erg http life nthu edu tw Islpc LS6521 Spectroscopy raman htm http www person
10. faudrait pouvoir se r f rer des normes quantitatives pour tre capable de caract riser un apport exog ne de telles substances III 3 Quels supports d analyse choisir Contrairement une id e re ue les analyses d urine comme les analyses de sang classiques permettent de d tecter des concentrations anormalement lev es d hormones de croissance ou d Epo Mais Selon le Dr Garnier responsable des contr les antidopage au minist re de la Jeunesse et des Sports D tecter de l hormone de croissance ou de l Epo dans l urine d un individu ne revient pas dire qu il a pris de l hormone de croissance ou de l Epo Il faut d finir un seuil de normalit pour pouvoir dire qu au dessus de ce seuil l individu est dop 36 Or jusqu pr sent les experts ont t incapables de fixer ce seuil car les taux d hormones varient d un individu l autre Impossible de savoir si les exc s d hormones trouv s sont naturels ou pas Les tricheurs peuvent donc dormir tranquilles Par ailleurs il estime que la prise de sang n est pas une solution miracle au probl me du dopage car les substances recherch es restent de fa on encore plus transitoire dans le sang que dans l urine Pour l Epo par exemple c est 24 heures dans le sang 48 heures dans l urine On pourrait aussi utiliser la salive ou les cheveux en faisant toutefois la part entre le th orique envisageable et ce qui peut tre raisonnablement mis en uvre avec de r
11. la chromatographie pour analyser les encres les drogues les explosifs les substances toxiques ou les produits incendiaires En particulier la chromatographie en phase gazeuse est tr s utilis e pour s parer les liants contenus dans les peintures c est dire les compos s organiques qui donnent aux peintures leur propri t s physiques 1 2 3 Les techniques d analyse chimique qualitative Il s agit ici de d terminer pr cis ment la composition chimique de l chantillon l aide de diff rentes et nombreuses techniques dont les plus modernes et les plus utilis es sont la spectrom trie de fluorescence X et la spectrom trie de masse ou leur couplage Les m thodes spectrales permettent de faire une analyse qualitative des substances chimiques et d en d terminer la teneur en fonction de leur masse pour la spectrom trie de masse ou en fonction de l absorption de l chantillon aux variations de longueurs d ondes des radiations mises par la source Il existe plusieurs techniques de cette spectrom trie mol culaire bas e sur les propri t s spectrales des mol cules on les caract rise par la nature de l mission de la source en fonction de sa longueur d onde visible ultraviolet infrarouge La spectrom trie de masse donne un diagramme pr sentant une succession de pics correspondant aux groupes d ions de m me rapport masse charge apr s ionisation des mol cules analyser La spectrom trie mol culaire de
12. le m thanol et alcool sup rieurs divers hydrocarbures et solvants des d riv es nitr s soufr s phosphor s La pr sence de tels toxiques est r v l e au moyen de la chromatographie en phase gazeuse conjugu e la spectrom trie infrarouge ou la spectrom trie de masse Les toxiques min raux qui sont les produits chimiques d origine non organique correspondant des sels ou des complexes d l ments min raux Certains l ments sont mis en vidence par des m thodes colorim triques ou en utilisant la spectroscopie d absorption atomique bas e sur l absorption d nergie lumineuse mise par une radiation monochromatique de longueur d onde caract ristique de l l ment doser Pour des l ments faible concentration la microscopie lectronique balayage peut s av rer n cessaire Les toxiques organiques extractibles tels que les m dicaments les stup fiants et certains insecticides Afin de d pister les principales substances pr sentes dans les liquides biologiques sang s rum on utilise la m thode Emit ST Diverses techniques de chromatographie peuvent ensuite tre mises en oeuvre chromatographie sur couche mince chromatographie en phase gazeuse ou en phase liquide pour arriver des r sultats plus pouss s mais les conditions op ratoires doivent tre adapt es chaque toxique La toxicologie m dico l gale doit modifier ses techniques suivant les cas tudier Le d vel
13. positive une confirmation s impose Pour cela deux possibilit s existent L thylom tre Le suspect d alcoolisme soufflera dans un appareil sophistiqu Spectrom trie infra rouge sp cifique et pr cis contr l par le service des mesures Mais un examen r alis par des non m decins sans examen clinique pr alable avec aucune possibilit de contre expertise possible La prise de sang r alisation d un examen clinique et du pr l vement sanguin par un m decin sur r quisition Le mat riel est fourni par les autorit s de police ou de gendarmerie L autorit requ rante peut assister aux pr l vements 15 cc sont pr lev s et r partis en 2 flacons La proc dure comporte 3 fiches fiche A examen fait par les policiers ou les gendarmes fiche B examen clinique fait par le m decin r alisant le pr l vement fiche C r sultat de l alcool mie r alis e par l expert Ces flacons sont confi s un biologiste expert ou au laboratoire de l h pital faisant partie du service public Il existe seulement 2 m thodes officielles M thode de CORDEBARD M thode Chromatographie Gazeuse La m thode enzymatique n est pas valable car il y a possibilit de faux positif La r glementation des instruments de mesure de la concentration d alcool dans le sang ou dans l air expir est publi dans le Journal Officiel de la R publique Fran aise Voici quelques extraits de l dition du 7 janvier 1986 Art
14. rants par ex caf ine et parac tamol pour l h ro ne lidoca ne pour la coca ne identifier les produits de coupage ou diluants utilis s sucres mannitol amidon obtenir des donn es statistiques sur l volution de la composition des poudres comparer l chantillon analys aux autres poudres dont les donn es analytiques sont enregistr es dans notre base de donn es Il Identification et dosage des principales drogues Il 1 Les amph taminiques Il s agit de l amph tamine AM de la m thamph tamine MA de la m thyl nedioxyamph tamine MDA de la m thyl nedioxym thamph tamine MDMA et de la m thyl nedioxy thylamph tamine MDEA 27 Le dosage se fait dans le sang total par chromatographie en phase gazeuse coupl e la spectrom trie de masse GC MS On peut utiliser par exemple un chomatographe HP 5890 s rie II coupl un spectrom tre de masse HP MSD 5972 L ensemble est pilot par un micro ordinateur qui sert l acquisition l enregistrement et au traitement des donn es chromatographiques et spectrom triques Le principe g n ral est le suivant apr s extraction les amph tamines sont d riv es puis l extrait est purifi par lavages successifs Ensuite elles passent par une tape de s paration puis d ionisation Remarque l extraction liquide liquide passe par une tape d vaporation op ration d licate pour des mol cules aussi volatiles que ces amph tamines Les
15. s plusieurs jours apr s avoir t remplis Cette technique est donc fr quemment utilis e en cas de doute par les experts III 3 Chromatographie en phase gaz et spectrom trie de masse III 3 1 Principe de la chromatographie en phase gaz La technique est bas e sur la solubilit et donc la mobilit de certaines esp ces chimiques dans des phases dites stationnaires a Consid rons alors un chantillon de mati re appel matrice pr lev sur le lieu d un incendie dont on soup onne i At l origine criminelle Dans ce genre de situation les hace as de di substances les plus recherch es par les analystes criminels g qu sont les acc l rateurs d incendies dont la composition 4 chimique reste uniforme apr s vaporation et que l on peut classifier assez ais ment par le nombre de carbone pr sents dans la s quence chimique ainsi que par les composants dominants Leon Cet chantillon va alors tre mis dans une colonne de d cantation au milieu d une phase connue pour tre stationnaire par rapport aux esp ces que l on esp re trouver Figura 2 Chromatograms of acc lerants buried in tha matrix Les composants de la phase dite mobile matrice vont alors EE x A x faj Wairix charred carpel carput padding migrer travers la phase stationnaire pour atteindre le haut and curain malerlal bi weak gimuiasac de la colonne de d cantation La finalit de la manipulation ER MAIEAN AiE
16. substances non dopantes L identification de ces produits inconnus souvent d origine m dicamenteuse permet outre l largissement de la banque de donn es de d couvrir de nouvelles substances en cours d essai chez les athl tes Par comparaison des donn es obtenues avec des chantillons t moins blancs on arrive identifier les produits inconnus L examen des substances tudi es se fait par couplage GC MS e Echantillons contenants des substances proscrites o Les chantillons sont de nouveau analys s suivant la proc dure de confirmation suivante e Pr paration simultan e d un t moin blanc urinaire de l chantillon suspect et de r f rences biologiques ou synth tiques e Proc dure de screening dans cet ordre e Deuxi me s rie d analyses sur un syst me GC MS diff rent pour compl ter et confirmer la premi re s rie et contr ler la pr cision e Comparaison des diagrammes e Calcul des temps de r tention relatifs l talon interne e D termination des abondances relatives des ions caract ristiques e Echantillons pr sentant des profils st ro diens anormaux L tude des profils st ro diens est syst matique car certaines substances dopantes peuvent modifier des param tres biologiques et par cons quent les profils urinaires hormonaux Des examens compl mentaires sont r alis s pour doser par des m thodes immunologiques divers param tres biologiques et quantifier en GC MS des hormones Ces dosa
17. CISION 551 6010826 0 02 S S S L AA 22 C DEPISTAGE DES DROGUES sites cosss ess dossocso doses ess dossocse doses ess dose e dia dense ts stone des etes es ess dose eds ades sets detecte 23 T PR SENTATION RP iha t A2 dA Rl r l E 24433 23 FIX SIUATLON JUFIILQUE ES RS Rs RER E ER ER RS TR Ne An ER I ten nes ete ie 23 L2 Notion dedosa tensona R R R A rt nest a A A te tt Mt anne 25 PI Chode chantions sise Be Te ES TA NA NO ES ee 26 1 4 Analyse des produits stup fiants ses 27 II IDENTIFICATION ET DOSAGE DES PRINCIPALES DROGUES sccccecccisecccssoccsesocsssoossocessoensooenessonassnenes 27 IE T Ees amph taminiques ss mutant detente nn elite tte tt nds diese 27 II 2 La coca ne et ses m tabolites et les opiac s majeurs sis 28 IL 3 EAEOI LENT APIE SEE EA E E ETT 29 D INSTRUMENTATION ET CONTROLE DU DOPAGE ecccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccceses 30 L INTRODUGTION 45848 ta ent a a A O E E A S a E T E A E A tnt 2 AE 30 ELLI Ledopage M NE PE E 30 V 12728 B 72 1211551411 EE AEE EE E E A EE A E E A EE 30 E3 Les laboratoires antidopage sss zs t sboster ge Abbat a e a a a e a 30 1 4 Les contraintes de la lutte anti dopage seen 31 II LES SUBSTANCES PROSCRITES cceeeccesocresocccsoscvoosoressovesosessssesessenessevesensesssensssenessevessecnsssensenessesevensseess 31 III TECHNIQUES ANALYTIQUES MISES EN UVRE ET TECHNIQUES DE DOSAGE ses 32 TE T AMT OQUCTTON dorreen o A ENE
18. Mars 1999 DOSSIER I M C ANALYSE ET JUSTICE Marc Assuied Natalie Debouzy Caroline Defever Doroth e K hne Olivier Rinaldi Nicolas Saignat Philippe Tran Tuteur M Di Benedetto Les premiers laboratoires de Police scientifiques sont apparus pendant la premi re guerre mondiale D velopp s par la police pour lutter contre l espionnage ils taient destin s mettre en uvre des nouvelles techniques pour tudier les indices d un crime Le second conflit mondial et l apparition de techniques scientifiques plus pointues a marqu l essor des m thodes d analyse des indices et l utilisation de nouveaux appareils comme le microscope comparateur pour les tudes balistiques ou le monochromateur infrarouge pour l tude des falsifications De nos jours les laboratoires de police scientifique utilisent les appareils et les techniques les plus sophistiqu s pour pratiquer ce que l on a regrouper aujourd hui sous le terme Sciences l gales La mission de ces Sciences l gales est l tude scientifique des indices destin s apporter une preuve mat rielle dans les affaires judiciaires Les laboratoires de Police scientifique utilisent des m thodes d analyse tr s pouss es appelant des technologies toujours plus modernes et avanc es Nous tudierons d abord l analyse des chantillons non biologiques la biologie g n tique et les techniques g n rales mises en oeuvres par les laboratoires de Police
19. ON nas EOE Nol eA dea Nb caD date VOE e Nene Rec O RA 32 H 2 M thodes de d pistage rapides tenant nn fn Mein mir nest 33 II 3 Les analyses de deuxi me niveau sise 34 IV RECHERCHE ET D VELOPPEMENT cs eccccececccccccccccccccciccccccccscccccesececoceecoeecessceeooceseseoeeesesseeooeeoenenneens 35 III 1 Axes de la recherche anti dopage sense seen 36 M2 Les hormones p plidiquesnsiss riens Rime te Rene nn einen sen 36 III 3 Quels supports d analyse choisir eee 36 IH 4 Denouveaux produites isses es ans rer On Dettes ste tn LP ete ts 37 Bibliographie ss nine en me ange nr nn lime ii lente ae re 38 I AIALA HA PR RS D DE EN V PR VA AN o V D E EN O TER MS lt 38 A MEDECINE LEGALE ET POLICE SCIENTIFIQUE I L ANALYSE DES ECHANTILLONS NON BIOLOGIQUES 1 1 La nature des chantillons non biologiques Dans la plus pure tradition du Sherlock Holmes invent par Conan Doyle les coupables laissent toujours des traces identifiables et analysables par les laboratoires de Police scientifique dont le c l bre d tective fut un pr curseur imaginaire Ces traces constituent autant d indices permettant de constituer des preuves ou du moins d aiguiller les enqu teurs dans leur recherche du coupable Il peut s agir de balles perdues ou retrouv es sur le corps d une victime de traces de poudre ou de produits chimiques d encres de fausse monnaie m tallique de d bris de verre de m taux de peintures de co
20. al umich edu 80 jshaver virtual explain html http www optoelectronics world com http www shu ac uk schools sci chem tutorials chrom chrom1 htm http courses che umn edu 97fscn5312 1f chrom2 htm http www nercdg org brettellabstract htm http www wco com surfsci gcms html http www ozemail com au tcforen http www mhv net dfriedman arson welcome html http hamers chem wisc edu FTIR html http www wco com surfsci ftir html http www nicolet com Applications html http www emse fr ECOLE FRENCH SPIN instrum sam96 index htm http www chez com nethorizon dopage Accsa htm http www prevention ch dopageetesvousaucourant htm 38
21. analyse impromptue sur site devenait de plus en n cessaire un pr l vement suivi d une analyse en laboratoire n tant pas toujours la meilleur m thode de mesure Les constructeurs ont donc t amen s fabriquer des appareils portatifs et autonomes Certes miniaturis s ces appareils pr sentent tout de m me les m mes modules que les chromatographes de laboratoire Leur autonomie est fonction de la r serve de gaz vecteur et de la capacit des batteries La chromatographie est donc fr quemment utilis e pour la mesure du taux d alcool mie dans le sang Ce n est pourtant pas sa seule utilit Les chromatographes sont aussi utilis s pour mesurer la pollution De nombreux appareils servent diff rentes chelles mesurer l alcool pr sent dans le sang Mais les seuils autoris s sont impos s par l Etat Comment l Etat contr le t 1l ces appareils de mesure Quelle importance est accord e la pr cision III Qualit et pr cision En ce qui concerne les thylom tres leur pr cision et l erreur maximale tol r e sont fix es par des d crets minist riels Ainsi dans le Journal Officiel du 7 Janvier 19886 l article 3 du d cret n 85 1519 mentionne L erreur maximale tol r e sur la mesure de la concentration d alcool thylique en plus ou en moins sur les instruments de service est de 0 032 mg L pour toute concentration inf rieure 0 40 mg L 8 centi mes en valeur relative pour t
22. ations en sciences forensiques D minage L IMS est une m thode adapt e au d minage En effet cette technique permet de s parer les composants mol culaires ionis s issus des mat riaux servant la fabrication des explosifs On arrive ainsi identifier assez facilement les particules de T N T Toutefois si cette m thode appara t rapide et facile mettre en uvre instruments compacts la sensibilit est assez faible D tection des armes et explosifs Des laboratoires de recherches en sciences forensiques ont mis au point des d tecteurs utilisables dans les lieux publics risques coles a roports etc Les personnes passent au travers d une porte quelque peu particuli re En effet un souffle d air l g rement propuls sur les gens est alors collect puis analys suivant la technique IMC La m thode permet alors de reconna tre la signature chimique d une grande vari t de substances utilis es dans le domaine de l armurerie et des explosifs Cette nouvelle forme de d tection permet de repousser les limites des d tecteurs traditionnels bas s sur la d tection du m tal pr sent dans les armes III 2 Spectroscopie Raman III 2 1 Principe La spectroscopie Raman est la mesure de la fr quence et de l intensit de la lumi re diffus e de mani re in lastique par le mat riau que l on tudie et que l on expose une lumi re incidente de fr quence connue En effet la di
23. dans la phase liquide par un talonnage pr alable 20 La m thode d espace de t te est donc une m thode de d termination indirecte de la concentration de produits en phase liquide ou gazeuse Le coefficient de partage d pend de la matrice qui n est pas toujours connue ni reproductible d un chantillon l autre Le choix de la m thode d talonnage d pend de la nature de l chantillon Dans le cas d un m lange h t rog ne contenant des solides et des liquides comme l alcool dans le sang on opte pour un talonnage direct Dans ce cas la matrice de l chantillon est connue constante et disponible l tat pur c est dire sans les produits volatils recherch s Des m langes talons contenant diff rentes concentrations des produits doser sont pr par s avec la m me matrice que celle des chantillons Les m langes talons et les chantillons sont analys s selon la m me proc dure et les concentrations sont calcul es par simple comparaison des aires des pics du chromatogramme II 4 2 Les appareils de mesure Les m thodes d espace de t te pr sentent un grand int r t et de nombreux constructeurs tels Perkin Elmer proposent des appareils permettant de les automatiser Aujourd hui les constructeurs de mat riels chromatographiques en phase gaz ont pour la plupart disparu du march mondial ou ont fusionn avec d autres soci t s plus ou moins sp cialis es dans ce domaine Il en
24. des h ro nes et des coca nes Un couplage des deux techniques pr c dentes permet d estimer les pourcentages respectifs des constituants de l chantillon analys Des tests destin s d finir la couleur sont aussi utilis s l 3 Choix des chantillons Selon le type de consommation et les moyens techniques dont on dispose plusieurs chantillons biologiques peuvent tre utilis s pour le dosage dans le cas de personnes vivantes Echantillon biologique Dur e de d tection des drogues lt 1 jour environ Evaluation de lalLe sang veineux doit toxicit des effets sur tre pr lev rapidement le comportement les la p riph rie performances ex homog n is et refroidi capacit conduire un puis transf r v hicule imm diatement au laboratoire et des m dicaments conserver au froid chronique du plasma et m dicament recherche Les cheveux comme chantillons d analyse permettent d obtenir une information long terme plusieurs semaines plusieurs mois sur la consommation ou l exposition d un individu des x nobiotiques les analyses urinaires ont une dur e de d tection de 2 4 jours environ Ces deux techniques sont compl mentaires l urine est le pr l vement de choix pour tablir une consommation r cente et les cheveux une consommation r p t e ou chronique 26 Dans le cas de contr les routiers tous les chantillons pr sum s positifs doivent tre confirm
25. e Notons tout de m me que cette pr sentation est des plus simplistes et provient d une brochure commerciale Elle constitue une bonne introduction Les trois appareils utilisent les m mes types de composants optiques de tailles diff rentes Nous tudierons la qualit de la mesure et la pr cision donn e par ces appareils dans une troisi me partie Il 2 Voie enzymatique Cette m thode contrairement aux deux autres n est pas officiellement reconnue Quand la mesure de l thanol sanguin n est pas effectu e dans un cadre m dico l gal la m thode enzymatique est d usage courant dans les laboratoires hospitaliers notamment ceux qui n tant pas sp cialis s en pharmacologie toxicologie ne sont pas quip s en chromatographie gazeuse cf II 3 Une mesure automatis e directe sur plasma est alors pr f r e une m thode manuelle apr s d prot nisation dans le but de r pondre rapidement la demande tant le jour que la nuit Il 3 La m thode de Cordebard Cette m thode chimique est un dosage de l alcool par son pouvoir r ducteur Les r actions de Nicloux et Cordebard utilisent du bichromate chaud ou froid en milieu acide Le bichromate est oxyd par de l acide nitrique Pour le dosage on met du bichromate en exc s en milieu acide une partie est consomm e par l alcool le reste est dos Ce dosage n est pas tr s pr cis pour des doses d alcool de 0 5 g il y a 10 d erreu
26. e la cession l acquisition l incitation l usage de stup fiants par tout moyen est passible de dix ans d emprisonnement et ou de 50 000 000 Francs d amende NCP art 222 37 Le blanchiment de l argent de la drogue est passible de dix ans d emprisonnement et ou 1 000 000 Francs d amende art 222 38 L offre ou la cession de stup fiants une personne en vue de sa consommation personnelle est passible de cinq ans d emprisonnement et ou de 500 000 francs d amende art 222 39 premier alin a La peine d emprisonnement est aggrav e dix ans lorsque les stup fiants sont offerts ou c d s des mineurs ou dans des centres d enseignement ou d ducation ou dans des locaux de l administration art 222 39 deuxi me alin a 24 l 2 Notion de dosage C est essentiellement cause des accidents de la route provoqu s par des conducteurs dans un tat euphorique que le dosage de drogues dans le sang est venu compl ter les traditionnels thylotests Bien s r on ne peut pas mesurer l tat actuel des facult s des consommateurs mais les prises de sang et les tests d urine permettent de d pister une utilisation ant rieure de substances comme la coca ne ou la marijuana Dans le cas de quelques drogues la sensation d euphorie ressentie par l usager ne correspond pas la concentration de drogue dans son sang Par exemple l tat d euphorie que procure la coca ne est atteint apr s le plafonnement de la concentra
27. e Les diur tiques et les produits masquants Plus limit s en nombre ces produits spironolactone ac tozolamide sont recherch s en couplage GC MS trois ions caract ristiques par produits apr s hydrolyse acide extraction divers pH et m thylation Sch ma de traitement des chantillons pour le screening des diur tiques et des produits masquants Prise d essai D ajustement pH 1 5 hydrolyse acide extraction au di thyl ther D vaporation sec D reprise l ac tone D m thylation gt vaporation sec T reprise l ac tone e Produits recherch par les m thodes immunologiques Certaines substances ou groupes de substances sont recherch es par une m thode immunologique pour gagner en sensibilit ou parce que leur d tection est difficile inclure dans les m thodes pr c dentes Les opiac s le cannabis la coca ne et les s datifs sont syst matiquement recherch s par ces proc d s Hormis une centrifugation il n y a aucune pr paration pr alable de l chantillon II 3 Les analyses de deuxi me niveau A l issue des analyses de screening environ 10 des chantillons feront l objet d examens de deuxi me niveau e Echantillons contenant des substances inconnues 34 Seul un petit nombre d chantillons contiennent des substances non r pertori es En effet l accumulation des donn es au cours du temps permet de localiser dans chacune des proc dures pr c dentes une certaine quantit de
28. e la Sant Publique tout usage de drogue est interdit et par cons quent r pr hensible Par ailleurs il n est pas question de toxicomanie mais seulement d usage de stup fiants sans distinction entre les drogues douces et dures ni entre l usage r gulier et occasionnel Toute personne qui enfreint la loi commet un d lit et s expose des sanctions allant jusqu un an de prison et ou une amende de 500 25 000 Francs 23 La loi du 31 d cembre 1970 offre cependant la possibilit de pr venir les poursuites judiciaires gr ce l injonction th rapeutique Si l usager peut pr senter un certificat m dical dans lequel il appara t qu il s est soumis une cure de d sintoxication par exemple depuis l infraction le procureur ne peut pas proc der aux poursuites judiciaires sauf ventuellement en cas de r cidive Enfin il existe encore la possibilit pour le procureur de classer l affaire sur la base du principe d opportunit des poursuites La circulaire du 12 mai 1987 introduit un nouveau crit re il n est plus fait de distinction entre les sortes de drogues mais entre les usagers usager occasionnel et usager d habitude Lorsqu il est constat que l usager occasionnel est bien int gr socialement logement travail famille etc il est alors recommand au parquet de se contenter d un avertissement La situation est diff rente lorsqu il s agit d un usager d habitude quelqu un qui pr sente des signes d intox
29. elles chances de succ s Actuellement il est possible de trouver sans difficult s les traces de consommation chroniques de stup fiants opiac es coca ne amph tamines III 4 De nouveaux produits Si les dopeurs ont d j trouv une alternative l Epo celle ci doit r pondre trois exigences tre aussi efficace que l Epo ne pas augmenter le nombre de globules rouges tre ind tectable par les contr les habituels Deux types de substances r pondent ces crit res La premi re famille est celle des h moglobines semi synth tiques base d h moglobine humaine ou animale L h moglobine est la prot ine qui transporte l oxyg ne dans les h maties globules rouges Les h moglobines de synth se pourraient augmenter le taux d h moglobine mais pas l h matocrite Elles ne seraient donc pas d cel es par les nouveaux tests de l UCI La seconde famille est celle des perfluorocarbures PFC Ces substances synth tiques associant fluor et carbone sont d excellents transporteurs des gaz du sang Les perfluorocarbures n augmentent ni l h moglobine ni l h matocrite Pour les d celer dans le sang il faut donc les rechercher de mani re sp cifique Des h matologues confirment que de tels produits permettent chez des athl tes en bonne sant d augmenter l oxyg nation des tissus pour un risque tr s faible Selon l un d eux Ces produits ne sont pas encore disponibles sur le march mais des sportifs s en procurent
30. en ou long terme et de nature modifier la performance sportive De fa on tr s sch matique on peut actuellement classer les principes actifs en six grandes cat gories e Les stimulants ou excitants e Les anabolisants st ro diens ou non e Les narcotiques et analg siques e Les b ta bloquants e Les diur tiques et produits masquants e Les hormones peptidiques Tous les dopants naturels ou de synth se les 5 premiers ont comme caract ristiques physico chimiques communes des poids mol culaires assez bas inf rieurs 500 qui permettent leur d tection par des m thodes analytiques usuelles type couplage chromatographie en phase gazeuse et spectrom trie de masse GC MS Les hormones peptidiques se distinguent des pr c dentes par des poids mol culaires nettement plus lev s ce qui rend plus difficile leur caract risation De plus elles sont pr sentes dans l organisme de tr s bas niveaux de concentration tr s variables d un individu 31 l autre et sont consid rablement modifi es par des param tres comme l effort le stress ou la fatigue L alcool la marijuana les anesth siques locaux les corticost ro des et certains b ta bloquants sont soumis des restrictions particuli res Plusieurs m thodes de dopage sont aussi prohib es Il s agit des transfusions de sang de globules rouges et de d riv s du sang ainsi que les manipulations chimiques physico chimiques et pharmacologi
31. ffusion d une radiation monochromatique par des mol cules entra ne l apparition de radiations de faibles intensit s dont les fr quences sont diff rentes de celle de la radiation incidente Ces changements de fr quence li s aux nergies vibratoires et rotationnelles des mol cules sont propres chaque mol cule et donc l intensit du rayonnement diffus est caract ristique du mat riau Aussi l analyse du spectre Raman d un chantillon diagramme repr sentant l intensit diffus e en fonction de la fr quence permet d identifier tr s pr cis ment les mol cules pr sentes III 2 2 Applications en sciences forensiques Identification des faux diamants Depuis quelques ann es il existe des bases de donn es donnant le spectre Raman de chaque pierre pr cieuse recens e de telle sorte que par l analyse du spectre de la pierre on parvienne d terminer sa composition son origine et les traitements qu elle a subis L avantage de cette technique est qu elle est non destructive Reconnaissance d criture L utilisation de la spectroscopie Raman permet d identifier les critures et donc de confondre les faussaires En effet cette technique va permettre d analyser la composition chimique de l encre et ainsi fournir des d informations pr cieuses sur la date d criture Deux critures diff rant par la date seront imm diatement d tect es aussi sera t il possible d identifier des ch ques sign
32. fluorescence est bien plus efficace et bien plus utilis e par les laboratoires de Police scientifique Une source de radiation de longueur d onde donn e est envoy e sur l chantillon Un monochromateur s pare les radiations mises et un r cepteur analyse l mission de l chantillon sous l effet de l excitation apr s amplification et enregistrement du signal mis La spectrom trie dans le visible et l ultraviolet est utilis e pour mesurer la concentration d un corps dissous dans un chantillon d identifier les liants contenus dans les peintures ou de distinguer des cosm tiques aux teintes tr s proches comme deux traces de rouge l vres de couleur apparemment identiques La spectrom trie d absorption infrarouge et la spectrom trie d mission Raman utilisant un rayonnement laser permet aussi d identifier les composants contenus dans les peintures et vernis les cosm tiques et les drogues Enfin la spectrom trie de fluorescence X qui utilise les rayons X permet d analyser les constituants min raux des chantillons les peintures les verres ou les terres C est une des m thodes les plus modernes et les plus utilis es par les laboratoires de Police scientifique Parmi les outils ultramodernes mis disposition des chercheurs les nouveaux appareils de microanalyse par fluorescence X simplifient les op rations et procurent un grand confort d utilisation Il sont surtout beaucoup plus sensibles que toute
33. forensiques 2 een 13 III 2 SP CTROSCOPIE RAMAN As sb 2556 5 00 120 Pannes nn me sn tnt Pantone aol sm D Tes Re 13 naa S Principes en IR net ne en RE 13 111 2 2 Applications en sciences forensiques 2 eee 14 TII 3 CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZ ET SPECTROM TRIE DE MASSE cccssseeccccccssesosoccccasasosooccaaasaus 15 III 3 1 Principe de la chromatographie en phase gaz ss 15 III 3 2 Principe de la spectrom trie de masse ss 15 II 4 MICROSPECTROM TRIE INFRAROUGE TRANSFORM E DE FOURIER seeeecccccsssesecccccsssssococenananas 16 B DOSAGE DE L ALCOOL ssentessetent etes te ttes one 17 I ALCOOLISME ASPECTS M DICO L GAUX cccccssecccccccsssssscccccssssssscoceassssssooenassssseoecaaassssoooeeaassssooonenenass 17 1 1 Obligation de traitement pour les alcooliques dangereux pour autrui ss 17 1 2 L gislation anti alcoolique routi re ss 17 13 Proc duresde d pistage seresa tenerae noaa ae EA NSA nn relire ren tree ste Une 18 II M THODES DE DOSAGE D ALCOOL suisses sseeenenesessccceenennnesescccennnnnnsesceceenennnneeccccenennnneecccceeennnnesseeeee 19 IT 1 thylometr ssihnsssr tien it entr nr ini ri ni nn nn ie the eee ie tn R e 19 HZ Voie enzymatigul iinn nan ann tem rime nine fes nt es a teint es 20 11 53 L m thode de Cor d badr d s sot 022 0Sod 2200204 nn enr vet Cd 2600000241 de 20 IL 4 Chromatographie en phase gazeuse siennes 20 IN QUALIT ET PR
34. ge froid sont en train d tre am lior es et tendent palier ces inconv nients II 2 Toxicologie m dico l gale Lorsque la police d couvre un cadavre des pr l vements sont effectu s sur le sujet afin de d finir les causes du d c s mais les techniques doivent tre modifi e en fonction de l tat de putr faction des chantillons La mission du toxicologue d passe la simple analyse car l interpr tation des r sultats doit tre clair e par une connaissance des r actions susceptibles de modifier l tat d impr gnation toxique des victimes apr s la mort On distingue classiquement quatre types de toxique les toxiques gazeux tels que le dioxyde de carbone CO et l acide cyanhydrique CNH Le CO se fixe sur l h moglobine la place de l oxyg ne pour former la carboxyh moglobine Lorsque le rapport des concentrations de carboxyh moglobine et d h moglobine d passe 0 55 le CO peut tre mortel Diff rents m thodes permettent de d terminer la concentration en toxique gazeux On citera l examen spectroscopique bas sur la comparaison entre les bandes d absorption d un sang pur et d un sang contamin le dosage du CO par spectrom trie ou par la m thode de Conway bas e sur le pouvoir r ducteur du toxique L ion cyanure peut quant lui bloquer la cha ne respiratoire au niveau cellulaire On le met en vidence par colorim trie ou par pr cipitation Les toxiques volatils tels que
35. ges concernent actuellement 12 constituants parmi lesquels la testost rone et l pitestost rone Ils sont effectu s selon les proc dures de screening des anabolisants d crites pr c demment et en r f rence avec une table de calibrage comprenant trois niveaux de concentration par substance dos e Les dossiers analytiques relatifs aux chantillons consid r s comme anormaux sont transmis la Commission nationale de lutte contre le dopage Des examens m dicaux compl mentaires sont effectu s sur les athl tes concern s afin de d terminer si les anomalies biologiques concern es sont d origines pathologiques ou non IV Recherche et d veloppement La loi fran aise de 1989 oblige mener des recherches sur les effets des produits dopants et r aliser un suivi biologique des sportifs de haut niveau La recherche prend donc maintenant une dimension m dicale et biologique en plus de son aspect toxicologique 35 Le d veloppement consid rable des activit s de recherche est d l utilisation de plus en plus fr quente d hormones pr sentes dans l organisme Ces substances sont parfois difficiles d tecter dans les conditions o sont r alis s les contr les anti dopage Les techniques employ es devraient tre m me de d terminer ce qui provient des s cr tions endog nes et ce qui peut provenir d un apport ext rieur III 1 Axes de la recherche anti dopage Les principaux axes de la recherche anti dopage tradi
36. ication reconna t se livrer r guli rement l usage de drogue ou quelqu un qui a d j t arr t pour des faits analogues La circulaire recommande au procureur de pr f rer l injonction th rapeutique sauf dans les cas qu il juge in vitables Si l usager ne donne pas son accord l injonction th rapeutique il y a alors lieu d envisager des poursuites p nales Le Nouveau Code P nal entr en vigueur le 1 mars 1994 comprend les dispositions suivantes Le fait de diriger ou d organiser un groupement ayant pour objet la production la fabrication l importation l exportation le transport la d tention l offre la cession l acquisition ou l emploi illicite de stup fiants est passible de la r clusion criminelle perp tuit et ou de 50 000 000 Francs d amende art 222 34 La production ou la fabrication illicite de stup fiants est passible de vingt ans de r clusion criminelle et ou de 50 000 000 Francs d amende 222 35 premier alin a Ces faits sont passibles de trente ans de r clusion criminelle lorsqu ils sont commis en bande organis e art 222 35 deuxi me alin a L importation ou l exportation illicite de stup fiants est passible de dix ans d emprisonnement et ou de 50 000 000 Francs d amende art 22 36 premier alin a Ces faits sont passibles de trente ans de r clusion criminelle lorsqu ils sont commis en bande organis e art 222 36 deuxi me alin a Le transport la d tention l offr
37. icrospectrom trie infrarouge transform e de Fourier Cette technique mesure l absorption d un chantillon soumis une radiation incidente infrarouge L absorption correspond aux diff rent modes de vibration rotation des atomes autour des liaisons qui les unissent l int rieur d une mol cule organique Le spectre obtenu intensit absorb e en fonction de la longueur d onde d pendant ainsi des groupes fonctionnels pr sents constitue donc une empreinte digitale propre au compos consid r Le spectre obtenu est trait par le principe de la transform e de Fourier de fa on obtenir des spectres de haute r solution Les principaux avantages de cette m thode sont sa simplicit sa sensibilit et sa s lectivit Les principales applications en sciences forensiques sont L analyse de fibres textiles synth tiques Les fibres textiles repr sentent l une des traces les plus facilement transf rables et sont donc pr sentes en tant qu indices dans la plupart des affaires criminelles agressions sexuelles accidents de la route cambriolages Le spectre obtenu par l analyse de la fibre est ensuite compar une base de donn e Analyse de peintures peints entra ne un change r ciproque de peinture Leur analyse comparative permet d tablir des liens probants Les cas les plus JS pese souvent rencontr s sont les accidents de la s ig route ou les cambriolages contact entre le M E
38. ipal l acide 1 1 nor delta 9 THC COOH dans le sang total Les limites de quantification sont respectivement de 1 0 et0 5 ng ml pour le THC et le THC COOH 29 D INSTRUMENTATION ET CONTROLE DU DOPAGE Fl au du sport moderne le dopage repr sente une menace pour la sant publique et porte atteinte l thique sportive La plupart des institutions sportives nationales et internationales dite des r glements fixant le cadre et les modalit s de la lutte contre le dopage l int rieur m me du mouvement sportif L Introduction 1 1 Le dopage en France D s 1965 la France d finit clairement sa position vis vis du dopage en adoptant le ler juin une loi tendant la r pression de l usage des stimulants l occasion des comp titions sportives Le 28 juin 1989 une nouvelle loi relative la pr vention et la r pression de l usage des produits dopants lors des comp titions et manifestations sportives est vot e Ce texte d finit un ensemble de moyens juridiques adapt s aux diff rentes formes d actions de pr vention d ducation et de r pression Aucune sanction p nale n est pr vue l encontre d athl tes convaincus de dopage En revanche tous ceux qui favorisent le dopage prescripteurs pourvoyeurs ou incitateurs sont passibles de peines correctionnelles 1 2 D finitions Dans le premier article la loi donne une d finition du dopage Il est interdit toute personne d utiliser au cours des comp ti
39. limites de d tection sont de 0 5 8 ng mL selon les compos s la limite de quantification est de 10 ng mL l exception de la MA 20 ng mL et de la MDA 50 ng mL Il n y a pas d interf rences de la part des principales autres amines sympathomim tiques ph drine pseudo ph drine Il 2 La coca ne et ses m tabolites et les opiac s majeurs Il s agit de la coca ne et de ses m tabolites m thylecgonine et benzoylecgonine ainsi que des opiac s majeurs cod ine morphine et 6 ac tylmorphine Le dosage se fait dans le sang total la s paration chromatographique et la d tection sont r alis es sur le couplage Chromatographie en Phase Gazeuse Spectom trie de Masse GC MS Deux techniques extractives diff rentes peuvent tre envisag es La premi re est obtenue sur la base d une extraction liquide liquide tandis que la seconde utilise l Extraction en Phase Solide EPS Le chromatographe en phase gazeuse peut tre un HP 5890 s ries II L exfraction liquide liquide comporte une manipulation longue et fastidieuse Elle pr sente des rendements d extraction plus faible qu en phase solide car on ne peut pas recueillir l int gralit de la phase retraiter lors de chaque tape La m thylecgonine est en revanche mieux extraite qu en phase solide En outre elle offre une qualit chromatographique in gal e on doit donc la choisir lorsque l on a affaire un sang putr fi ou tout autre matrice tr s complexe
40. nt t utilis es pour le dosage de l alcool mais seuls deux laboratoires travaillent encore avec la m thode chimique En deux ans l utilisation de la CPG a fait un bond de 38 et le nombre d utilisateurs de la m thode enzymatique baisse lentement Sur les derni res ann es les carts 22 types et les coefficients de variation ont diminu pour la CPG mais pas pour les m thodes enzymatiques N anmoins les laboratoires devront fournir un effort suppl mentaire pour parvenir une pr cision suffisante dans le cadre de la m decine l gale r sultats obtenus par CPG devraient tre dans la fourchette moyenne 5 L limination peut en premi re approximation tre repr sent e par une droite de pente 0 08 g l h 0 25 g l h valeur moyenne 0 15 g l h Cette approximation permet une valuation prudente a posteriori d une impr gnation alcoolique au moment des faits De m me elle permet une pr vision de la dur e n cessaire pour revenir une alcool mie nulle ou raisonnable A titre indicatif nous rappelons ici les taux d alcool pr sents dans quelques boissons Bi re 4 5 250mL 9 8g Some 130 hote Dans le commerce dans un verre contenant 80 150g de liquide on peut estimer approximativement qu il contiendra 10g d alcool Chez soi il faut majorer la quantit d alcool contenu dans le verre C DEPISTAGE DES DROGUES l Pr sentation 1 1 Situation juridique En vertu de l article L 628 du Code d
41. oires r gionaux implant s Lille Lyon Marseille et Toulouse La gendarmerie a quant elle mis en place l institut de recherche criminelle de la gendarmerie IRCG Les m thodes qui vont tre expos es trouvent de nombreuses applications dans des domaines tels que la lutte contre le trafic des stup fiants l identification d individus la simulation ou la reconstitution de d lits Il 1 Les empreintes g n tiques L utilisation du typage d ADN ou encore empreinte g n tique remonte 1985 mais les techniques se sont consid rablement d velopp es en l espace de dix ans Les premi res techniques biologiques avoir t utilis es en criminalistique taient des techniques de ph notypage groupe sanguin rh sus Ces techniques immunologiques ne permettaient seulement que l exclusion relative d individus mais elles ne permettaient pas une identification La technique de Southern que nous allons d tailler est une des ces techniques qui permettent de visualiser de mesurer et de comparer les r gions variables locus qui se trouvent dans l ADN Ces r gions sont compos es d unit s de bases appel es nucl otides unit s qui sont r p t es en nombre diff rent suivant les individus Ces r gions permettent d identifier chaque individu et sont lues au moyen de sondes On distingue les sondes multilocus et les sondes unilocus une sonde tant un ADN de r f rence se fixant sur les r gions variables Les
42. onnes diff rentes D autres recherches sont en cours ou vont tre entreprises Elles touchent notamment aux verres dont l tude se limitait jusque l la d termination de l indice de r fraction et la densit les laboratoires vont tre en mesure d analyser exactement les l ments en trace contenus dans le verre D autres travaux touchant les r sidus d incendies intentionnels semblent tr s prometteurs La plupart des produits qui acc l rent la propagation du feu tels les solvants ou l essence contiennent des m taux provenant des r cipients que les rayons X excitent de sorte que la Police scientifique pourra bient t d tecter ces traces et ainsi avancer encore dans sa recherche de la v rit Il BIOLOGIE G N TIQUE Les sciences forensiques recouvrent l ensemble des principes scientifiques et des m thodes techniques appliqu es l investigation criminelle pour prouver l existence d un crime et aider la justice d terminer l identit de l auteur et son mode op ratoire Par d finition pluridisciplinaires les sciences forensiques encore appel es criminalistiques utilisent des m thodologies non destructives afin de pouvoir proc der une ventuelle contre expertise Nous allons plus particuli rement nous int resser dans ce chapitre aux m thodes analytiques ou spectroscopiques utilis es par les diff rentes laboratoires de la police scientifique La France dispose actuellement de quatre laborat
43. oppement des techniques analytiques lui a permis et va lui permettre d largir encore le champ de ses applications III SCIENCES FORENSIQUES DESCRIPTION DES TECHNIQUES III 1 lon Mobility Spectrometry III 1 1 Principe Il s agit d une m thode de caract risation et d identification des substances chimiques par la mesure de leur mobilit l tat gazeux Le principe assez simple consiste introduire un chantillon de vapeur la pression atmosph rique dans un tube directeur soumis un champ lectrique A l instar des particules plac es dans un champ lectrique les mol cules ionis es sont acc l r es et l on peut alors mesurer leur mobilit obtenue par le ratio de la vitesse atteinte sur l amplitude du champ lectrique La vitesse de lion tant d pendante du libre parcours moyen de celui ci PIMS appara t donc comme une m thode d analyse l chelle mol culaire Vion E Les particules ainsi acc l r es sont ensuite recueillies sur une plaque d tectrice qui enregistre alors un courant d ions puis g n re un signal lectrique On obtient alors le spectre des mobilit s par la repr sentation de l intensit du courant d ions en fonction du temps En d finitive si des ions de natures diff rentes sont pr sents dans l chantillon consid r ceux ci peuvent alors tre s par s de par leur diff rentes mobilit s r pertori es dans des bases de donn es IL 1 2 Applic
44. ou s il s agit d une contrefa on on fait appel un examen artistique incombant aux experts d art et une tude technique et scientifique des mat riaux employ s La spectroscopie Raman bas e sur l observation des tats vibratoires et rotationels des mol cules permet de d tecter et d identifier des pigments pr sents en faible concentration dans une peinture Les spectres obtenus apr s spectroscopie Raman sont caract ristiques des pigments analys s Apr s consultation d une banque de donn es on peut r v ler des incompatibilit s entre la date suppos e de la r alisation de l uvre et la p riode d utilisation des pigments d tect s L int r t de ce type de spectroscopie est qu il laisse intacte l uvre analys e et permet donc une contre expertise 1 2 Les techniques d analyse Les techniques utilis es par les laboratoires sont tr s nombreuses puisqu il s agit d identifier des chantillons divers et de tous types On peut pourtant distinguer les techniques d observation qui consistent comparer deux chantillons pour v rifier la provenance de l chantillon suspect les techniques de s paration destin es mettre en vidence des substances caract ristiques m lang es d autres plus communes et les techniques d analyse chimique qualitative qui donnent la composition exacte de l chantillon consid r Bien entendu toutes ces techniques sont compl mentaires de sorte que les laboratoi
45. oute concentration sup rieure ou gale 0 40 mg L et inf rieure 1 mg L 15 centi mes en valeur relative pour toute concentration sup rieure ou gale 1 mg L et inf rieure 2 mg L 30 centi mes en valeur relative pour toute concentration sup rieure ou gale 2 mg L A titre indicatif la soci t Seres mentionn e pr c demment propose des appareils pour lesquels la pr cision est de 0 01 mg L Malgr la multiplication des thylom tres et la g n ralisation de leur utilisation les dosages d alcool dans le sang ont encore de beaux jours devant eux Concernant l valuation de l impr gnation alcoolique des conducteurs la m thode chimique de Cordebard distillation et la CPG restent les techniques officielles Ayant constat la grande diversit des m thodes employ es et la fr quence d utilisation de m thodes enzymatiques non officielles la Soci t Fran aise de Toxicologie Analytique SFTA s est pr occup e de promouvoir la bonne qualit des analyses toxicologiques et depuis 1996 elle propose ses adh rents un contr le externe pour l alcool mie Ce contr le est g r par la commission Assurance de Qualit en collaboration avec un sp cialiste finlandais Labquality pour la pr paration des chantillons avec trois taux diff rents d alcool thylique et dont un contient aussi d autres alcools et le traitement statistique des r sultats Les trois m thodes CPG chimique et enzymatique o
46. position du public dans certains lieux discoth ques bars Ces appareils requi rent pourtant une unique technologie ils sont tous bas s sur la spectrom trie infrarouge Principe g n ral de la mesure Les analyseurs sont bas s sur l absorption d une radiation infrarouge sp cifique par la mol cule d alcool thylique La longueur d onde choisie autour de 9 4 microns est caract ristique de la liaison OH les mesures ne sont donc pas sensibles aux gaz interf rents potentiels La quantit de lumi re absorb e est donn e par la loi de Beer Lambert Log l Io K C L Avec Io intensit de lumi re re ue par le d tecteur en l absence d alcool dans le trajet optique I intensit de lumi re re ue par le d tecteur en pr sence d alcool sur le trajet optique L trajet optique K coefficient d extinction mol culaire constante physique de l alcool thylique C concentration d alcool thylique dans la cuve gaz La valeur Io est maintenue constante et ajust e automatiquement avant chaque mesure La valeur de I ne d pend que de C concentration en alcool le trajet optique tant toujours le m me L avantage majeur de cette technique r side dans le fait qu en effectuant une mesure en valeur absolue on supprime la n cessit d utiliser un talon Notons galement l limination de la d rive due l lectronique l encrassement de l optique ou au vieillissement de la sourc
47. ques qui peuvent alt rer l int grit et la validit des chantillons d urine Compl ment sur les diff rentes cat gories de substances Classes des produits actifs Exemples de substances Effets Excitants stimulants Aph tamines coca ne Effet euphorisant am lioration des performances retardent l apparition de la fatigue Anabolisants mat riels ou Nandrolone testot rone accroissemnt de la masse et de la force synth tiques musculaire Narcotiques et Dextromoramide lls calment la douleur et ont un effet analg siques propoxyph ne morphine euphorisant B ta bloquants Pindolol Ac butol Am lioration de la concentration Propanolol ralentissement de la fr quence des pulsations cardiaques Diur tiques et produits Acide thacrinique Augmentent le d bit urinaire diminution masquants Furs mide Canc rone du poids dilution de l urine rendant difficile la d tection d autres substances Hormones peptidiques Hormone de croissance EPO augmente l oxyg nation humaine HGH hormone musculaire et la quantit de globules de croissance GH rouges dans le sang rythropo tine EPO Les st ro des anabolisants sont les plus utilis s 62 des cas positifs suivis par les stimulants 24 et les diur tiques 4 L incidence des hormones peptidiques est faible III Techniques analytiques mises en uvre et techniques de dosage Il 1 Introduction 32 Impos es ou choisies les techniques analy
48. r Il 4 Chromatographie en phase gazeuse Utilis e depuis 1986 la chromatographie en phase gazeuse CPG est une m thode d analyse par s paration qui s applique aux compos s gazeux ou susceptibles d tre vaporis s par chauffage sans d composition Elle permet l analyse de m langes complexes L appareil utilis est le chromatographe Il s pare les constituants de l chantillon et mesure la quantit des produits ainsi s par s Enfin une qualit essentielle de la CPG moderne r side dans la possibilit d op rer sur de tr s petites quantit s d chantillon de l ordre du milligramme et g n ralement inf rieures II 4 1 Principe g n ral La technique la plus fr quemment utilis e dans l analyse d alcool dans le sang est la Chromatographie en Phase Gazeuse Espace de T te Statique Headspace Cette m thode permet d analyser les constituants volatils d un chantillon contenant galement des produits qu il n est pas souhaitable d introduire sur la colonne eau sang Cela concerne ici la matrice sang L chantillon est plac dans une bouteille en verre thermostat e afin que s tablisse un quilibre entre la concentration des compos s volatils dans la phase gazeuse et la phase liquide Une partie de la phase gazeuse est pr lev e et inject e dans le chromatographe On d termine ainsi la composition de la phase gazeuse d o l on d duit la concentration des compos s volatils
49. r ils peuvent conduire de fausses conclusions L obtention du code g n tique a permis de r soudre de nombreuses affaires d agressions sexuelles d identification de cadavres de recherche de paternit Il permet aussi de comparer des taches de sang de suivre l volution d une greffe de moelle Le typage d ADN a apport aussi beaucoup de preuves scientifiques dans de nombreux proc s par l analyse de traces biologiques sang salive peau cheveux laiss es sur des supports variables m gots de cigarette si ge de voiture Il n est toutefois pas la panac e car les r sultats obtenus avec une telle technique d pendent grandement de la quantit de mat riel g n tique de l tat de d gradation de l ADN des conditions de d gradation ainsi que de la qualit du laboratoire De plus lorsqu il y a identification entre le sang du suspect et une trace biologique 1l faut d terminer de mani re statistique le risque d erreur que le suspect ne soit pas l agresseur r el Par exemple en utilisant une sonde A la probabilit pour qu un autre individu pr sente le m me codage g n tique est de 1 sur 5000 En utilisant plusieurs sondes 3 ou 4 la probabilit descend alors de 1 sur quelques millions 1 sur quelques milliards Bien qu efficace ces techniques sont lourdes mettre en uvre et n cessitent beaucoup de temps une garde vue dure 48h De nouvelles techniques bas es notamment sur le marqua
50. ration sans aucun diagnostic chimique permettant d orienter les recherches vers l une ou l autre cat gorie de substances n cessite un proc d extr mement pr cis tant au point de vue de la pr paration de l chantillon que de la m thodologie mise en uvre et de l interpr tation des r sultats Une activit permanente de recherche et d veloppement est donc n cessaire pour mettre au point et am liorer les m thodes de d tection 1 4 Les contraintes de la lutte anti dopage Les r glementations nationales et internationales en vigueur d finissent les imp ratifs de fonctionnement des laboratoires sp cialis s dans la d tection des substances dopantes Ils disposent des techniques analytiques impos es par les organismes internationaux fonctionnent toute l ann e 24 heures sur 24 Ces laboratoires doivent tre en mesure de d tecter la totalit des substances proscrites et de les identifier formellement directement ou par l interm diaire de leurs m tabolites caract ristiques Enfin ils doivent tre capables de traiter chaque jour un nombre important d chantillons de fournir rapidement les r sultats et de garantir l absolue confidentialit des r sultats analytiques obtenus II Les substances proscrites La liste des substances et proc d s proscrits publi e conjointement par les ministres de la sant et des sports num re environ 500 principes actifs pr sentant un risque d montr ou potentiel court moy
51. res de Police scientifiques utilisent des couplages de ces m thodes pour acc der la v rit 1 2 1 Les techniques d observation Les techniques d observation sont les techniques les plus connues et r pandues au niveau du grand public Il s agit classiquement des expertises balistiques des analyses de marques d outils toolmarks en anglais des comparaisons d empreintes digitales que le public a pu d couvrir dans des s ries polici res comme Colombo Ces observations se font principalement gr ce la microscopie optique la microscopie lectronique transmission M E T et la microscopie lectronique balayage M E B Les figures 3 et 4 donnent un aper u de ce que peuvent tre ces premi res investigations Figure 3 Image rehauss e par Figure 4 Comparaison de deux balles ordinateur d une empreinte digitale presque effac e Balle retir e du me Balle test tir e de corps de la x HZ l arme retrouv e victime sur la sc ne du crime 1 2 2 Les techniques de s paration Les substances analyser par le laboratoire sont rarement pures de sorte qu il est n cessaire de s parer chacun des l ments les composant pour les tudier plus facilement Parmi les m thodes de s paration on peut citer la distillation bas e sur les carts entre les temp ratures d bullition des diff rents constitution d un m lange liquide Nous reparlerons de ce principe pour la d termination
52. reste n anmoins un certain nombre pour l ensemble des mat riels chromatographiques de laboratoire de process ou portatifs Parmi les plus connus on peut citer Helwett Packard US Perkin Elmer US Varian US ou Shimatzu J en ce qui concerne les mat riels de laboratoire Dany I Siemens D pour les appareils de laboratoire et industriels en ligne et ABB S Foxboro US Hatmann amp Braun D pour les appareils industriels Chromatographes en phase gazeuse de laboratoire Comme nous l avons d j vu dans la partie d crivant les techniques cet appareil est en g n ral r serv l tude et l laboration des m thodes analytiques dans les laboratoires de recherches plut t qu au stricte contr le routinier La pr sence du microprocesseur introduit une convivialit et facilite l utilisation ainsi que les r glages Il est par ailleurs adaptable aux exigences de la nature des chantillons analyser Un grand choix de colonnes d injecteurs et de d tecteurs est propos l op rateur permettant ainsi un changement ais de configuration Le microprocesseur constitue le syst me de r glage et de contr le du chromatographe Les m thodes analytiques peuvent tre m moris es par l appareil et rappel es tout moment Des accessoires compl tent l quipement des chromatographes comme les d gazeurs Head Space 21 Chromatographes de terrain Nous avons constat partie I qu une
53. rt Lg 4 cez And c est de s parer les diff rentes substances et d obtenir temps s ardar af AA evaporated Gasalha de r tention des esp ces pr sentes dans la matrice temps pour atteindre la sortie de la colonne ainsi que la quantit de ces substances ayant atteint le sommet On peut ensuite comparer les chromatogrammes obtenus quantit en fonction du temps des chromatogrammes t moins On arrive ainsi d terminer la pr sence ventuelle de substances acc l rantes Souvent cette m thode est compl t e par l utilisation de la technique dite de spectrom trie de masse III 3 2 Principe de la spectrom trie de masse Apr s ionisation sous vide lev cette technique renseigne sur la pr sence et l abondance relative ordonn e par masses croissantes de chacun des l ments atomes radicaux mol cules constitutifs du corps analys Les informations obtenues constituent le spectre de masse qui s apparente une v ritable empreinte digitale de la structure mol culaire consid r e Une comparaison des banques de spectres permet alors d identifier la structure consid r e La combinaison des deux m thodes est donc un outils puissant d identification des substances puisque la chromatographie en phase gaz permet la s paration des substances et qu ensuite l utilisation d un spectrom tre de masse permet d identifier la substance avec pr cision en fonction de sa masse III 4 M
54. s les techniques en usage La fluorescence analyse les rayons X mis par l chantillon Parmi les utilisations possibles figure l identification des peintures ces derni res contiennent des pigments qui donnent la couleur et des l ments de charge sp cifiques Il est possible d identifier notamment l arsenic le baryum le plomb l aluminium le silicium le soufre le titane le chrome le fer le cuivre le zinc le strontium ou le zirconium mieux on peut d terminer leurs proportions dans une peinture donn e Il suffit d un chantillon de 10 microm tres pour obtenir en quelques minutes un spectre interpr table et comparable un mod le connu Par exemple le spectrom tre se r v le tr s utile lorsqu il s agit de d terminer avec une assez grande probabilit qu un fragment de peinture d pos sur un pare chocs appartient bien une autre voiture accident e Il en va de m me pour les fibres textiles L ce sont les substances que le fabricant ajoute aux fibres synth tiques pour leur donner des propri t s particuli res brillance r sistance etc qui sont analys es La m thode permet de diff rencier deux fibres que d autres techniques n auraient pas pu discriminer Des recherches vont tre entreprises pour savoir si ces spectrom tres sont en mesure de d tecter la pollution min rale des fibres en d autres termes si l on peut diff rencier deux jeans identiques port s dans des conditions diverses ou par des pers
55. scientifique Ensuite nous d taillerons les trois domaines d analyse fondamentaux et les plus courants que constituent les analyses respectives de l alcool mie des drogues et du dopage SOMMAIRE A MEDECINE LEGALE ET POLICE SCIENTIFIQUE coccccccccccccccccccccccccccccccccccccceeee 5 I L ANALYSE DES ECHANTILLONS NON BIOLOGIQUES eeecececccccococooocccccccososoooooovosoveuvsouooeese 5 1 1 LA NATURE DES CHANTILLONS NON BIOLOGIQUES ccccccccccccsosssosecccccccocococecocecocecononnnnnnnnneneeens 5 1 2 LES TECHNIQUES D ANALYSE 4042212570240466 6 12 1 Les t chniques d observations sine ne nn ner ner Se a Pe RAR S an 6 1 2 2 Les techniques de s paration ss 7 1 2 3 Les techniques d analyse chimique qualitative 7 TI BIOLOGIE G N TIQUE ant ut tannins ten esveteuts 9 II 1 LES EMPREINTES G N TIQUES ses ssss se seenennn ce ccenennnnse eee seneeeennnnnecenennneseccceeeennnennneseccennnnececeeeees 9 II 2 TOXICOLOGIE M DICO L GALE escsccccccccssecccsssssssocccassssssssssooooassooenassssssooeesessssossssooeaasnooeaaesass 11 III SCIENCES FORENSIQUES DESCRIPTION DES TECHNIQUES cccccccccccccccococccoooooccccccccococoseue 12 HI 1 ION MOBILITY SPECTROMETRY ccsccccsecccsesesccscccssocesosocsssoosssooesesssoenoensssonsssonassoensssensnssoenonessnenes 12 MENPAN ARR EN TITRE PERTE TRE e OR PEER EE EI OR EEE RER PEER ER EE TRES EI RES 12 1 1 2 Applications en sciences
56. sm tiques A chacun de ces type d chantillons correspond une ou plusieurs m thodes de caract risation physico chimique permettant de donner la composition de l chantillon ou de le comparer avec un chantillon existant afin d appr hender un suspect Par exemple lors d un accident avec d lit de fuite un clat de peinture retrouv sur le capot de la voiture accident e peut tre compar la peinture de la voiture du suspect Les photos de la figure 1 et 2 donnent des exemples d chantillons analys s par les laboratoires scientifiques Figure 1 Eclat de verre ins r dans la Figure 2 Eclat de peinture semelle d un suspect L identification des r sidus de tir est aussi un travail courant des laboratoires Lorsque la police tente de d terminer si une personne a utilis une arme feu elle essaie d identifier des produits de la combustion de la poudre d amor age qui peuvent demeurer sur les mains la face les cheveux ou les v tements du tireur Les laboratoires utilisent aujourd hui la microscopie lectronique balayage coupl e un microanalyseur X pour localiser et identifier les r sidus de tir L identification de trois l ments plomb baryum antimoine est d terminante pour identifier la poudre de la charge explosive Enfin on peut aussi faire appel aux laboratoires de Police scientifique en cas d expertise des oeuvres picturales afin de d terminer si une uvre d art est authentique
57. sondes multilocus reconnaissent une r gion variable situ e sur plusieurs chromosomes alors qu une sonde unilocus ne reconna t qu un locus unique Le principal inconv nient des sondes multilocus r side dans l interpr tation des profils obtenus De plus elles r agissent parfois avec d autres organismes bact ries animaux Quant aux sondes unilocus il r side dans son faible pouvoir discriminant rendant n cessaire l utilisation de plusieurs sondes unilocus afin de minimiser le risque d erreur La technique de Southern mise en uvre lors de l utilisation de sonde est sch matis e par le sch ma suivant I PE RE Pr l vement analyser ADN sous forme de macromol cule ADN coup en fragments Grand petit Dp embrane Ordonnancement transfert sur membrane mise en contact de la par lectrophor se membrane avec une sonde radioctive fixation puis limination de la sonde Film radio mis en contact avec la membrane puis d veloppement de ce film Toutefois lorsque la quantit de mat riel est trop faible 10 20 ng au moins sont n cessaires ou que l tat de d gradation de ADN est avanc on peut avoir recours la technique de l amplification g nique ou PCR qui repose sur une copie de mat riel g n tique Cette technique qui reproduit un fragment d ADN en plusieurs copies se r v le tre particuli rement utile mais les r sultats obtenus doivent tre consid r s avec du recul ca
58. tances proscrites narcotiques analg siques anesth siques locaux 33 e Les narcotiques analg siques et b ta bloquants Les chantillons sont pr alablement trait s Apr s hydrolyse enzymatique et formation de d riv s trifluoroac tiques il est possible de d tecter les substances cod ine morphine h ro ne Elles sont identifi es par analyse GC MS sur colonnes capillaires de 25 m avec programmation de temp rature et acquisition du mode fragmentograpique sur trois 1ons par produits recherch s Le nombre important de substances d tecter par ce type d analyses n cessite deux programmes d acquisition e Les anabolisants et les b ta agonistes Cette classe de substances est la plus complexe elle regroupe les hormones naturelles les st ro des anabolisants de synth se et des b ta agonistes nandrolone testost rone Au niveau des analyses rapides en plus de l identification des x nobiotiques dont la d tection n est possible que par l interm diaire des m tabolites caract ristiques une estimation quantitative des hormones naturelles est effectu e pour d terminer le profil st ro dien de l chantillon et le comparer aux profils normaux Les analyses sont effectu es en couplage CG MS en mode fragmentographique sur un ion pour la quantification des hormones dos es et trois ions caract ristiques pour la recherche des b ta agonistes et des m tabolites principaux des substances x nobiotiques
59. tion de drogue dans le sang Contrairement l alcool certaines drogues demeurent dans la circulation sanguine longtemps apr s le moment de leur utilisation La marijuana d ailleurs peut tre d tect e plusieurs semaines apr s l usage initial Par cons quent la pr sence de drogue dans le flux sanguin ne signifie pas que la personne test e se trouve sous l influence d une drogue Un test positif n indique pas le moment de l utilisation n1 la quantit ou la forme de drogue consomm e Trois m thodes sont couramment utilis es pour le d pistage des drogues dans l urine ou le sang L inmuno essai d signe l une des principales m thodes de d pistage fr quemment employ e avec les chantillons d urine Il permet de d tecter la pr sence d une cat gorie de drogues par exemple les opiac s mais ne parvient pas identifier une drogue pr cise dans cette cat gorie comme l h ro ne Ce test comporte parfois des erreurs d interpr tation Par exemple l ibuprof ne un m dicament anti inflammatoire et analg sique en vente libre peut donner un test faussement positif et indiquer la pr sence de cannabis dans l organisme L immuno essai est la m thode de d pistage la moins pr cise il est donc primordial de faire suivre le test initial d analyses plus perfectionn es en laboratoire La chromatographie elle peut tre effectu e au moyen de papier de gaz ou de fluides et permet d identifier les aspects caract ristiques
60. tionnellement appliqu s demeurent e L am lioration constante des techniques de d tection accro tre les sensibilit s automatiser les proc dures simplifier les protocoles au cours de ces derni res ann es les volutions les plus marquantes outre le domaine de l informatique concernent le d veloppement des m thodes immunologiques et la robotique de laboratoire e La connaissance du m tabolisme de nouvelles substances x nobiotiques susceptibles d avoir des effets dopants les laboratoires s efforcent de prendre de l avance en mettant l tude certains nouveaux produits dont les effets principaux ou secondaires permettent de pr voir terme leur utilisation comme dopant e L tude cin tique de l limination de ces produits dans les conditions particuli res d effort physique intense III 2 Les hormones peptidiques L utilisation de ces hormones est devenue une pr occupation majeure des responsables de la lutte anti dopage dans le monde Parmi ces substances on trouve principalement l EPO et l hormone de croissance Ces substances ont la r putation de ne pouvoir tre d cel es et sont donc rarement d cel es dans les laboratoires Les hormones peptidiques de synth se qui peuvent tre utilis es actuellement sont soit identiques soit tr s voisines des hormones naturelle du point de vue chimique Leur distinction physico chimique s av re impossible Elles sont dos es par des m thodes immunologiques mais 1l
61. tions ou manifestations sportives organis es ou agr es par des f d rations sportives ou en vue d y participer les substances et proc d s modifiant artificiellement les capacit s ou masquant l emploi de substances ou de proc d s ayant cette propri t Ceux ci sont d termin s par arr t conjoint des ministres charg s des sports et de la sant Le Comit international olympique CIO entend par dopage tout usage volontaire ou involontaire de substances appartenant aux classes interdites ainsi que tout recours aux m thodes d fendues selon la liste en vigueur 1 3 Les laboratoires anti dopage En France seul le laboratoire national de d pistage du dopage cr en 1965 est accr dit pour r aliser l analyse des pr l vements dans le cadre de la lutte anti dopage chez les sportifs Ce laboratoire a pour mission de mettre au point des techniques analytiques adapt es la d tection des substances dopantes quelle que soit leur concentration pr sentes dans les 30 diff rents milieux biologiques Par ailleurs ce laboratoire doit aussi effectuer des recherches biom dicales afin de compl ter certaines connaissances de base sur les transformations que subissent certains produits st ro des anabolisant dans l organisme Rechercher dans un chantillon urinaire ponctuel de faible volume la pr sence ventuelle de l un des 300 principes actifs proscrit ou de leur m tabolites et ce quelle que soit leur concent
62. tiques employ es sont pratiquement les m mes dans tous les laboratoires actuellement accr dit s au niveau international Un premier stade analytique de d pistage rapide screening met en uvre des m thodes immunologiques ou radio immunologiques des m thodes s paratives de type chromatographie en phase gazeuse GC et en phase liquide HPLC et des techniques de couplage de type chromatographie spectrom trie de masse GC MS HPLC MS ou chromatographie d tection mission atomique GC AED Il est primordial ce stade que soit recherch e la sensibilit de d tection maximale pour viter que des chantillons soient d clar s faussement n gatifs Ce premier niveau analytique doit permettre de trier les chantillons afin de s lectionner rapidement ceux qui contiennent des substances proscrites ou plus g n ralement ceux qui pr sentent des profils anormaux Le deuxi me stade analytique consisterait identifier formellement les constituants proscrits ou non d tect s lors du premier stade rechercher les diff rents m tabolites ventuellement pr sents d terminer les concentrations et tenter de d finir aussi pr cis ment que possible le produit initialement utilis en recherchant dans ce dernier la pr sence d autres principes actifs ou excipients caract ristiques ce stade diff rentes techniques de couplage chromatographiques liquides ou gazeuses avec la spectrom trie de masse sont utilis es II

ANALYSE ET JUSTICE

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